Una investigació sobre l'efecte contra el càncer de fetge dels glucòsids feniletanoides de Cistanche

Contacte: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Correu electrònic:audrey.hu@wecistanche.com

Resum

Objectiu: Estudiar l'anti-hepatocarcinomaefecte deglucòsids feniletanoides de cistanche (CPhG),i explorar el seu possible mecanisme d'acció. Mètodes: es va establir un model de tumor H22 de càncer de fetge de ratolí mitjançant injecció subcutània a l'axil·la dreta de l'extremitat anterior. L'experiment va establir un grup de control en blanc, un grup model de tumor H22 de càncer de fetge i un grup de tractament positiu Ganfule (1351,5 mg/kg) amb CPhG elevats. El grup de dosi (500 mg/kg), el grup de dosi mitjana (250 mg/kg) i el grup de dosi baixa (125 mg/kg), un total de 6 grups, cadascun amb 10 animals. Excepte el grup control en blanc i el grup model, als altres grups se'ls va donar Ganfule o CPhG per sonda durant 10 dies consecutius. Durant el seguiment de l'estat general dels ratolins, es va observar el creixement dels cossos tumorals de ratolins portadors de tumors H22 a cada grup. Al final de l'experiment, es van agafar els globus oculars per recollir sang i es van detectar la interleucina sèrica 2 (IL-2) i el factor de necrosi tumoral mitjançant un assaig immunosorbent lligat a enzims (ELISA). a (contingut de TNF-∞ i alfa-fetoproteïna (AFP); separar la melsa i el fetge, pesar-los, calcular el coeficient de l'òrgan; treure completament el cos del tumor, calcular la taxa d'inhibició del tumor de cada grup de ratolins; observar el teixit patològic de Resultats: els tumors axil·lars del grup model portador de tumors van aparèixer precoçment i van créixer més ràpidament, seguits del grup de CPhGs de dosis baixa i mitjana, i els tumors del grup de dosis altes i el tractament positiu. El grup va créixer lentament. En comparació amb el grup model, els CPhG van mostrar un creixement mitjà i ràpid. La massa tumoral en el grup de dosis altes es va reduir significativament (P<0.05), and="" the="" tumor="" suppressor="" rate="" in="" each="" dose="" group="" increased="" with="" the="" increase="" of="" cphgs="" dose=""><0.05); the="" positive="" treatment="" group="" and="" the="" spleen="" coefficient="" of="" each="" dose="" group="" of="" cphgs="" increased="" significantly="" and="" liver="" coefficients="" were="" significantly="" reduced=""><0.05); the="" levels="" of="" il-2="" in="" cphgs="" medium,="" high-dose="" groups,="" and="" positive="" treatment="" groups="" were="" significantly="" increased=""><0.05), while="" the="" content="" of="" afp="" was="" significantly="" reduced="" (,="">< 0.05);="" tnf-0="" [content="" in="" each="" dose="" group="" and="" a="" positive="" treatment="" group="" of="" cphgs="" was="" significantly="" reduced=""><0.05). pathological="" results="" showed="" that="" the="" growth="" of="" mouse="" liver="" cancer="" cells="" in="" each="" dose="" group="" of="" cphgs="" was="" inhibited,="" the="" number="" was="" smaller,="" the="" heterogeneity="" was="" reduced,="" and="" a="" large="" number="" of="" necrotic="" cells="" were="" accompanied.="" conclusion:="" cphgs="" can="" reduce="" liver="" damage="" in="" h22="" tumor-bearing="" mice="" and="" inhibit="" tumor="" growth,="" which="" may="" be="" related="" to="" cphgs="" reducing="" the="" serum="" afp="" content="" in="" tumor-bearing="" mice="" and="" improving="" the="" immunity="" of="" tumor-bearing="">

[Paraules clau]Cistanche; glucòsids feniletanoides totals; cèl·lules H22; càncer de fetge

Cistanche deserticola té molts efectes, feu clic aquí per saber-ne més

Cistanche (tubulosa)es produeix principalment a Xinjiang i la Lliga Alexa de Mongòlia Interior. Es coneix com el "ginseng del desert" i té un valor medicinal extremadament alt. És un material medicinal tradicional xinès preciós. Publicat per primera vegada a "Shen Nong's Materia Medica", apareix com el grau superior. És de naturalesa dolça, salada i càlida. Té els efectes de nodrir el yang del ronyó, nutrir l'essència i la sang i hidratar els intestins. Sovint s'utilitza per tractar la impotència en els homes, la infertilitat en les dones i la cintura i els genolls. Dolor de fred, sequedat de sang, restrenyiment i altres símptomes ridiculitzar. Els estudiosos nacionals han dut a terme moltes investigacions sobre els components químics deCistanche, inclòsglicòsids feniletanoidesdes decistanche(CPhGs), iridoides, lignans, polisacàrids, alcaloides, etc. Els components més importants són CPhGso, la investigació farmacològica moderna ha demostrat que els CPhG tenen antibacterians, antiinflamatoris, antivirals, antitumorals, antioxidants, regulació immune, millora de la memòria , yang i altres activitats farmacològiques. Al mateix temps, un gran nombre de membres de l'equip d'investigació realitzat sobre CPhG en la fase inicial van demostrar que els CPhG tenen efecte anti-fibrosi hepàtica". 71. En aquest experiment, els CPhG aïllats deCistancheEs van utilitzar materials medicinals per estudiar el seu efecte anti-hepatocarcinoma en ratolins portadors de tumors H22. Oferir una base per al desenvolupament de fàrmacs.

1. Materials i mètodes

1.1 La substància d'assaig i els animals d'experimentació

Cistancheglicòsids feniletanoides(CPhGs) van ser extrets, separats i identificats per l'investigador Zhao Jun de l'Institut de Matèria Medica de Xinjiang, la puresa era del 70 per cent 91 i es va utilitzar un 0,5 per cent de carboximetil cel·lulosa a l'experiment. El sodi (0,5 per cent de CMC-Na) es dissol, es prepara en diferents concentracions, s'emmagatzema a 4 graus i s'utilitza en una setmana.

Ratolins Kunming de classe SPF, 60 mascles, amb un pes de 18-22 g, comprats al Centre de Recerca Animal Experimental de la Universitat Mèdica de Xinjiang, el número de certificat és SCXK (nou) 2016—0002 i el número de llicència és SYXK (sou: ) 2016—0003.

1.2. El ratolí de la línia cel·lular

La línia cel·lular d'hepatocarcinoma H22 la proporciona Wuhan Prose Life Technology Co., Ltd., el número d'article és CL-01341.

1.3. Aparell i reactius principals

Centrífuga de baixa velocitat (70L-5A, Shanghai Anting); CO, incubadora (Heal Force, HF240); dipòsit d'aigua a temperatura constant de calefacció elèctrica (DK-8D, Shanghai ◎Heng Technology Co., Ltd.); Lector de microplaques (Bio-rad); pinça vernier (Shanghai Future Experimental Equipment Co., Ltd.); balanç electrònic (Changzhou Wantai Balance Instrument Co., Ltd.).

Gainful és un producte de CommScope Pharmaceutical Co., Ltd. (Z20060389); Anticòs RPMI-1640 mitjà i 1% doble (Isher IJBI); Sèrum boví fetal (Gibco, EUA); 0,4 per cent de blau tripà i 4 per cent de paraformaldehid (Jing Suo Lebao); factor IX de necrosi tumoral del ratolí (TNF-cc), interleucina 2 (IL-2), kit ELISA d'alfa-fetoproteïna (AFP) (Wuhan Huamei).

1.4 Mètode de prova

1.4.1 Establiment del model de ratolí portador de tumors H22 de càncer de fetge

Reanimar les cèl·lules H22 a 37 graus, descartar el sobrenedant per centrifugació, afegir un medi complet RPMI-1640 fresc per resuspendre les cèl·lules per a una recuperació ràpida, cultivar més del 95 per cent de les cèl·lules viables in vitro i inocular els ratolins quan arribi la densitat cel·lular. 1×106/mL Cavitat abdominal, 0,2 mL cadascuna. Passatge aproximadament 8,10 d. El líquid tumoral H22 peritoneal del ratolí cultivat a la dreta de 8 dE es va extreure asèpticament, es va diluir amb solució salina normal per ajustar el nombre de cèl·lules tumorals a 1X 107/mL, es va barrejar bé i es va reservar. Excepte que el grup control en blanc es va injectar amb la mateixa quantitat de solució salina normal al mateix lloc, els ratolins dels altres grups van ser desinfectats i inoculats amb suspensió de cèl·lules tumorals H22 a l'aixella dreta de les extremitats anteriors, cadascuna. 2 ml [9.101, 24 hores després del modelatge, observeu el creixement del tumor cada dia.

1.4.2 Agrupació i administració

Els ratolins portadors de tumors H22 modelats anteriorment es van dividir aleatòriament en 5 grups, és a dir, el grup model i el grup de tractament positiu (Ganfule 1351,5 mg/kg), amb CPhG elevats (500 mg/kg), QB ( 250 mg/kg) mg/kg), grup de dosis baixa (125 mg/kg), cada grup té 10 animals. La sonda es va iniciar a 24 hA després del modelatge. Excepte el grup control en blanc i el model, al grup se'ls va donar el mateix volum de solució de CMC-Na al 0,5 per cent, als altres grups se'ls va donar una dosi determinada de fàrmacs positius o CPhG per sonda durant 10 hores consecutives. d"2.1 31. Entrevisteu l'observació diària de l'estat de l'activitat mental, la mida de la inflor axil·lar dreta i el temps d'aparició, el color del pelatge i la gana dels ratolins portadors de tumors. 24 hores després de l'última administració, peseu el pes, traieu el globus oculars i recollir sang, i separar el sèrum de recanvi; El mètode de luxació cervical mata ratolins, separa la melsa i el fetge, pesa el fetge i el coeficient de la melsa; elimina completament el tumor, neteja amb paper de filtre i pesa la massa, calcula la inhibició del tumor taxa de cada grup de ratolins; el teixit tumoral és patològic Examen histològic.

1.4.3 Prova d'indicadors

①Determinació dels coeficients de melsa i fetge: després de sacrificar els ratolins de cada grup, es van tallar i pesar la melsa i el fetge i es van calcular els coeficients dels òrgans. Coeficient d'òrgan=massa d'òrgans/4, massa corporal del ratolí × 100 per cent . ②Determinació de la massa tumoral i la taxa d'inhibició del tumor: 24 hores després de l'última administració, els ratolins es van sacrificar pel mètode de luxació cervical i es van pesar. El tumor es va eliminar completament, es va netejar amb paper de filtre i després es va pesar en una balança electrònica. La massa es va calcular a partir de la massa del tumor. Taxa d'inhibició del tumor de ratolins a cada grup d'administració, taxa d'inhibició del tumor =(massa tumoral del grup model-massa tumoral del grup experimental) massa tumoral del grup membranós X 100 per cent. ③Després d'eliminar els globus oculars i prendre sang, separeu el sèrum i emmagatzemeu-lo a 80 graus per a la inspecció. Detecteu contingut IL-2, TNF{-0 i AFP al sèrum segons les instruccions del kit ELISA. ④Examen histopatològic del tumor. Després de fixar els tumors de cada grup amb un 4% de paraformaldehid durant 24 hores, les seccions es van incrustar en parafina i es van tacar amb HE convencional. Els canvis patològics del tumor es van observar al microscopi de llum i es va jutjar preliminarment l'àrea de necrosi de cèl·lules tumorals. Tractament amb fàrmacs CphGs Efecte.

1.5 Mètodes estadístics

Es va utilitzar el programari SPSS 17.0 per a l'anàlisi estadística i els resultats de les dades de cada grup es van expressar com a x±S, i les dades entre diversos grups es van comparar mitjançant l'anàlisi unidireccional de la variància i el nivell de prova. a=0.05.

2. resultats

2.1 L'observació general dels ratolins

Before administration, there was no statistically significant difference in the bodyweight of the mice between the groups (P>0.05). En el grup model, 2 ratolins van morir a causa de l'administració gàstrica durant l'experiment. Després de l'administració, en comparació amb el grup control en blanc, el pes corporal dels ratolins del grup model va augmentar amb el creixement del tumor, però la diferència no va ser estadísticament significativa.

(P>0.05); Compared with the model group, the bodyweight of mice in the positive treatment group and the CPhGs dose group decreased to a certain extent, but the difference was not statistically significant (P>0.05). El quart dia de l'experiment, les aixelles dels ratolins van començar a inflar-se, l'estat d'activitat mental de l'animal va empitjorar, els animals van respondre lents als estímuls externs, la seva gana va disminuir i el color del seu pelatge es va atenuar. La massa tumoral va aparèixer primer al grup del model i la taxa de creixement va ser la més ràpida. Les reaccions anteriors van ser les més òbvies, seguides pel grup de dosis baixes i mitjanes de CPhG. El grup de dosis altes i el grup de tractament positiu van tenir un creixement tumoral més lent, una millor qualitat de vida i sense efectes adversos evidents.

2.2 L'efecte de Cistanche CPhG sobre els coeficients de melsa i fetge de ratolins portadors de tumors H22

En comparació amb el grup control en blanc, el coeficient de melsa del grup model es va reduir significativament i el coeficient hepàtic es va augmentar significativament (P<0.01); compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" spleen="" coefficient="" of="" the="" positive="" treatment="" group="" and="" the="" cphgs="" dose="" groups="" were="" significantly="" increased,="" and="" the="" liver="" coefficient="" was="" significantly="" decreased="" (p=""><0.01), indicating="" that="" cphgs="" can="" improve="" the="" immune="" function="" of="" tumor-bearing="" mice="" to="" a="" certain="" extent="" and="" inhibit="" liver="">

3. Discussió

primàriacàncer de fetgeés un tumor maligne comú en la pràctica clínica. Ocupa el quart lloc en incidència de tumors al món i el segon lloc en mortalitat. La seva prevenció i tractament encara és un tema de recerca candent al meu país. Els avantatges de la medicina tradicional xinesa en el control del desenvolupament dels pacients, la millora dels símptomes i signes i la millora de la qualitat de vida estan sorgint gradualment. Per tal de trobar baix tòxic i alta eficiènciacontra el càncer de fetgemedicaments de la medicina tradicional xinesa, aquest tema utilitza H22càncer de fetgecèl·lules per preparar cèl·lules tumorals H22. Model de tumor de ratolí, compareu les diferents dosis del grup de tractament amb CPhGs amb el grup de control del model i el grup de tractament positiu Ganfule per explorar l'efecte antitumoral dels CPhGs en ratolins portadors de tumors H22 i el seu mecanisme.

Els resultats van mostrar que el grup model va ser el primer a tenir inflor del tumor axil·lar i el seu creixement va ser el més ràpid. L'estat mental dels ratolins va disminuir, la gana va disminuir i el color del pelatge va començar a enfosquir-se. El grup de dosis baixes i mitjanes de CPhG seguit del grup de dosis altes i Ganfule positiu. El grup de tractament va ser més lent i el pes corporal dels ratolins a cada grup de dosis de CPhG i no hi va haver una disminució significativa en el grup de tractament positiu Ganfule, cosa que suggereix que els fàrmacs CPhGs poden millorar relativament la qualitat de vida dels ratolins portadors de tumors H22 i reduir la toxicitat dels tumors per al cos. La qualitat del tumor de cada grup de dosi de CPhGs i grup de tractament positiu Ganfule va ser significativament inferior a la del grup de control model, i la taxa d'inhibició del tumor del grup de dosis altes era equivalent a la del grup de tractament positiu Ganfule, cosa que suggereix que els CPhG. pot afectar els ratolins portadors de tumors H22 Els tumors in vivo tenen un cert efecte inhibidor. A més, els resultats d'aquest estudi mostren que els coeficients de melsa del grup de tractament positiu Ganfule i els grups de dosi CPhGs són més alts que el grup model, mentre que els coeficients hepàtics són més baixos que el grup control del model, cosa que suggereix que el fàrmac és eficaç, Aquest projecte utilitza H22càncer de fetgecèl·lules per preparar models de tumors de ratolí portador de tumors H22, compara les diferents dosis del grup de tractament amb CPhGs amb el grup de control del model i el grup de tractament positiu Ganfule i explora els efectes antitumorals dels CPhG en ratolins portadors de tumors H22. El seu mecanisme.

Els resultats van mostrar que el grup model va ser el primer a tenir inflor del tumor axil·lar i el seu creixement va ser el més ràpid. L'estat mental dels ratolins va disminuir, la gana va disminuir i el color del pelatge va començar a enfosquir-se. El grup de dosis baixes i mitjanes de CPhG seguit del grup de dosis altes i Ganfule positiu. El grup de tractament va ser més lent i el pes corporal dels ratolins en cada grup de dosis de CPhG i el grup de tractament positiu Ganfule no va disminuir significativament, cosa que suggereix que els fàrmacs CPhGs poden millorar relativament la qualitat de vida dels ratolins portadors de tumors H22 i reduir la toxicitat de tumors al cos. La qualitat del tumor de cada grup de dosi de CPhGs i grup de tractament positiu Ganfule va ser significativament inferior a la del grup de control model, i la taxa d'inhibició del tumor del grup de dosis altes era equivalent a la del grup de tractament positiu Ganfule, cosa que suggereix que els CPhG. té un cert efecte sobre els tumors en ratolins portadors de tumors H22 Inhibició. A més, els resultats d'aquest estudi van mostrar que els coeficients de melsa del grup de tractament positiu Ganfule i els grups de dosi de CPhGs eren més alts que el grup model, mentre que els coeficients hepàtics eren més baixos que el grup de control del model, cosa que suggereix que els CPhGs poden inhibir els tumors a el mateix temps. Fins a cert punt, millora la funció immune dels ratolins portadors de tumors i també té un efecte protector sobre el fetge, però l'efecte sobre la melsa i el fetge no és significativament diferent del de Ganfule.

IL-2 és un tipus de factor de creixement cel·lular del sistema immunitari. Participa en la immunitat cel·lular i té un paper regulador central en la complexa xarxa immune del cos. Pot millorar la funció immune del cos afavorint la proliferació i diferenciació de cèl·lules T i pot produir cèl·lules immunitàries actives antitumorals. Els estudis han trobat que la IL-2 pot promoure la supervivència, l'expansió i l'activació de les cèl·lules assassines activades per limfocines. Aquest tipus de cèl·lula és una espècie de cèl·lula assassina amb cèl·lules antitumorals altes produïdes per limfòcits en contacte amb IL-2, i aquesta cèl·lula assassina Les cèl·lules només reconeixen antígens tumorals i no tenen cap efecte sobre les cèl·lules hostes normals" 5.161. Els resultats d'aquest experiment mostren que els grups de dosis altes i mitjanes de CPhG poden augmentar significativament el contingut d'IL-2 dels ratolins, cosa que indica que els CPhG poden millorar la immunitat dels ratolins portadors de tumors H22. Capacitat d'ajudar el cos a matar les cèl·lules tumorals.

El TNF- és un dels factors biològicament actius amb l'efecte antitumoral directe més fort trobat fins ara"7-81. El TNF indueix l'apoptosi de les cèl·lules tumorals, millora la funció immune de l'hoste i actua sobre les cèl·lules endotelials vasculars tumorals unint-se als receptors. La disfunció vascular condueix a l'hemorràgia tumoral i la necrosi per exercir el seu efecte antitumoral"91, però el TNF- presenta una dualitat en els tumors, que pot causar necrosi tumoral i promoure el creixement del tumor." TNF- en organismes normals La baixa concentració de té els efectes de inhibint la proliferació de cèl·lules tumorals, promou la formació de vasos sanguinis de cèl·lules tumorals i trombosi per provocar hemorràgies i necrosi, i millora la funció immune antitumoral del cos.Al mateix temps, el TNF és un factor promotor de tumors endogen i és produït per les mateixes cèl·lules tumorals. El TNF- pot estimular el creixement de cèl·lules tumorals i inhibir l'efecte tòxic de les cèl·lules efectores immunitàries sobre les cèl·lules tumorals; per tant, l'efecte biològic del TNF- està estretament relacionat amb el seu nivell en el cos. ment, es va trobar que en comparació amb el grup normal, el grup model TNF- va augmentar significativament, la qual cosa és coherent amb l'augment del tumor TNF-. El nivell de TNF dels ratolins a cada grup de dosi de CPhG va disminuir significativament, cosa que indica que els CPhG poden inhibir l'augment anormal de TNF- en el sèrum de ratolins portadors de tumors H22, inhibir l'aparició de tumors.

En circumstàncies normals, l'AFP prové principalment de cèl·lules hepàtiques embrionàries. L'AFP desapareix de la sang unes dues setmanes després del naixement. Per tant, el contingut d'AFP en el sèrum d'adults normals és inferior a 20 gg/mL. vint-i-u. En adults, l'AFP pot augmentar en el sèrum d'aproximadament un 80 per cent decàncer de fetgepacients 31. Quan les cèl·lules hepàtiques humanes es tornen canceroses, restableixen la funció de producció de la proteïna AFP i, a mesura que la malaltia empitjora, el seu contingut sèric també augmentarà bruscament. Com a indicador clínic específic per al diagnòstic primaricàncer de fetge, la concentració d'AFP al sèrum sol estar positivament correlacionada amb la mida decàncer de fetge1. Els resultats d'aquest experiment mostren que els grups de dosis altes i mitjanes de CPhG poden reduir significativament el contingut d'AFP en ratolins, cosa que indica que els CPhG poden inhibir l'expressió d'AFP en el sèrum de ratolins portadors de tumors H22 i inhibir el creixement del tumor.

La tinció HE mostra que, en comparació amb el grup model, els CPhG poden promoure significativament l'apoptosi de les cèl·lules tumorals, inhibir el creixement de les cèl·lules tumorals, reduir l'heterogeneïtat de les cèl·lules tumorals i s'acompanyen d'un gran nombre de necrosi cel·lular. Entre ells, els CPhG en diferents grups de dosi augmenta amb la dosi Amb l'augment, l'àrea necròtica de les cèl·lules tumorals també augmenta, i el grup de CPhGs a dosis altes i el grup de tractament positiu Ganfule tenen una quantitat considerable de necrosi de cèl·lules tumorals, cosa que suggereix que els CPhG. té un bon efecte antitumoral sobre H22càncer de fetgeratolins portadors de tumors.

En resum, els CPhG tenen un bécontra el càncer de fetgeefecte, que pot estar relacionat amb els CPhG que redueixen el contingut d'AFP sèric dels ratolins portadors de tumors i milloren la capacitat immune dels ratolins portadors de tumors. Aquest estudi proporciona dades bàsiques per al desenvolupament de nouscontra el càncer de fetgefàrmacs que utilitzen CPhGCistanche.

Referències

[1] Peng Fang, Xu Rong, Wang Xia, et al. Progrés de la investigació en el processament i processament de materials medicinals del gènere Mesquite [JI Modern Chinese Medicine, 2015, 17(4): 406-412.

[2] Zhong Yaoxin. Interpretació de "Shen Nong's Materia Medica" 32[J], és beneficiós obrir el volum (demanant assessorament mèdic),

2015, 35(8): 40-41.

[3] Liu Xiong, Li Chengming, Gao Jiande, et al. Progrés de la investigació de la pasta de cendres de carn[J]. China Journal of Traditional Chinese Medicine and Technology, 2013, 20(5): 575-576.

[4] Geng Huijie, Yu Guangen. Desenvolupament i utilització de plantes del gènere Sargassum [J]. Ciència i tecnologia de Tianjin, 2012, 21 (4): 66-68.

[5] You Shuping, Zhao Jun, Ma Long, et al. L'efecte i el mecanisme de l'extracte d'etanol de la pasta de cendra de carn sobre la fibrosi hepàtica immune a les rates [J]. Revista xinesa de farmacologia i toxicologia,

2016, 30(5): 504-510.

[6] Mu Ke Remu • Di Mai Ti, You Shu Ping, Zhao Jun, et al. Estudi experimental sobre l'efecte deGlicòsids feniletanoidesoxima de la cendra de carn a la fibrosi hepàtica induïda per BSA en rates [J]. Journal of Xinjiang Medical University, 2015, 38(5): 567-570.

[7] You Shuping, Zhao Jun, Mu Keremu•Di Mai Ti, et al. Efectes del feniletanoide de Roucong Rong sobre l'expressió del factor de creixement transformant|31 en rates amb fibrosi hepàtica induïda per BSA [Transformació del càncer JL. Distorsion•Mutation, 2015, 27(6): 409-414.

[8] You Shuping, Zhao Jun, Ma Long, et al. L'efecte de l'alcohol fenetílic del puré de cendres de carn total sobre l'expressió de la via de senyalització TGF-01/Smad a les cèl·lules estelades hepàtiques de rata [J]. Carcinogènesi. Distorsion and Mutation, 2016, 28(5): 372-376.

[9] Zhang Jianwu, Pu Qigong, Chen Doujia, et al. Estudi sobre l'efecte del complex aspirina-nicotinamida-zinc en ratolins que porten H22càncer de fetge［J］. Sichuan Journal of Physiological Sciences, 2012, 34(4): 148-149.

[10] Shen Julio. L'efecte antitumoral de Kuiling Huajijian sobre les cèl·lules d'hepatocarcinoma H22 del ratolí i la seva influència en l'expressió de C-my i nm23-Hl [D]. Dalian: Dalian Medical University, 2013: 8-9.

[11] Hao Mingzhi, Chen Wujin, Lin Hailan, et al. Observació de l'eficàcia clínica de la quimioteràpia d'embolització de l'artèria hepàtica combinada amb la càpsula Ganfule en el tractament avançatcàncer de fetge［J］. Zhongnan Pharmaceutical, 2013, 11⑵: 147-150.

[12] Guo Shengqi, Huang Tingzhang, Li Yuanhui, et al. Estudi sobre l'efecte antitumoral dels extractes d'aigua de les tiges de gessamí en ratolins portadors de tumors H22]. Chinese Journal of Clinical Pharmacology, 2015, 31(10): 855-857.

[13] Zhang Wenjuan, Jiang Weizhe, Lan Xianli, et al. Estudi sobre el mecanisme antitumoral de l'extracte d'insecte Wu Gu sobre H22càncer de fetgeratolins portadors de tumors cel·lulars]. Guangxi Medicine, 2017, 39(2): 215-219.

[14] Ye Shenglong. Nous avenços en el camp decàncer de fetgeel 2013［J］. Chinese Journal of Hepatology, 2014, 22(1): 2-4.

[15] Liu Xiaorui, Wang Jian. Avenços en l'aplicació clínica de cèl·lules assassines induïdes per citocines contra tumors［J］. Guangdong Medicine, 2016, 37(18): 2840-2843.

[16] Cançó Haojie. Quimioteràpia a dosis baixes combinada amb vacuna de cèl·lules dendrítiques modificades genèticament per tractar el fetge

Investigació experimental sobre càncer［D］. Guangzhou: Southern Medical University, 2012.

[17] Zuo Shaoyuan, Qian Jintao, Fang Shuhuan, et al. Activitat antitumoral del polisacàrid de pol·len d'abella de cártam［J］. Frontera de la medicina, 2014, 4(1): 42-43.

[18] Ni Yang. L'efecte del polisacàrid de Lithospermum sobre els òrgans immunitaris i les citocines TNF-a i IFN-y en ratolins portadors de tumor S180［J］. Heilongjiang Medicine, 2014, 27(3): 512-514.

[19] Gu Cuiping, Zhang Yiping. Nous avenços en el mecanisme antitumoral del TNF-a [J]. Tumor xinès, 2007, 16⑵: 102-105.

[20] Zhu Bo, Zhang Wei, Chen Yanhua, et al. Aplicació del factor de creixement específic del tumor i del factor de necrosi tumoral en el diagnòstic i pronòstic decàncer de fetge［J］. Modern Oncology Medicine, 2008, 16(5): 765-766.

[21] Lin Yu. Estudi preliminar sobre l'efecte anti-hepatocarcinoma i el mecanisme dels fàrmacs odorífers d'aranya [D]. Chengdu: Southwest Jiaotong University, 2015.

[22] Wang Shimo, Hu Yonghao, Li Qiang, et al. Anàlisi de correlació entre el nivell d'AFP i el pronòstic dels pacients amb cirurgia de carcinoma hepatocel·lular primari［J］. Chinese Journal of Hepatobiliary Surgery, 2017, 23(2): 134-136.

[23] Song Wei. La importància clínica de la detecció combinada d'AFP sèrica, AFU, GP73 i IL-8 en el diagnòstic primaricàncer de fetge[J] Chinese Journal of Clinicians (Electronic Edition), 2016, 10(9): 1266-1270.

[24] Guan Yu, Yu Xinfa, Zhou Chengyu, et al. El valor clínic de l'alfa-fetoproteïna en el diagnòstic i el pronòstic de la primàriacàncer de fetge［J］. Hainan Medicine, 2016, 27(6): 891 894.

RANKL i el seu efecte sobre les malalties òssies [J]. Prog Mod Biomed, 2010, 10(20): 3963-3966.

[14]FRANCESCHI RT, XIAO G. Regulació del factor de transcripció específic de l'osteoblast, Runx2: resposta a múltiples vies de transducció de senyals[J]. J Cell Biochem, 2003, 88(3): 446-454.

[15]FRANCESCHI RT, XIAO G. Regulació del factor de transcripció específic de l'osteoblast, Runx2: resposta a múltiples vies de transducció de senyals[J]. J Cell Biochem, 2003, 88(3): 446-454.

[16]GUICHEUX J, LEMONNIER J, GHAYOR C, et al. Activació de la proteïna cinasa activada per mitogen p38 i de la c-Jun-NH2-quinasa terminal per BMP{-2 i la seva implicació en l'estimulació de la diferenciació de cèl·lules osteoblàstiques ^]. J Bone Mineral Res, 2003, 18(11): 2060.

[17]GE C, CAWTHORN WP, LI Y, et al. Control recíproc de la diferenciació osteogènica i adipogènica mitjançant la fosforilació de la cinasa ERK/MAP dels factors de transcripció Runx2 i PPARgamma [J]. J Cell Physiol, 2016, 231(3): 587 -596.

[18]GE C, XIAO G, JIANG D, et al. Identificació i caracterització funcional dels llocs de fosforilació ERK/MAPK al factor de transcripció Runx2 [J]-J Biol Chem, 2009, 284(47): 32533-32543.

[19]GREENBLATT MB, Shim JH, GLIMCHER L H. Vies de proteïna quinasa activada per mitogens en osteoblasts[J]. Annual Rev Cell Dev Biol, 2013, 29(1): 63.

[20] Li Feng, Liu Wenfeng, Liu Rushi, et al. El malondialdehid inhibeix la diferenciació osteogènica de les cèl·lules mare mesenquimals activant les vies p38 i JNK [J]. Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology, 2012, 28(9): 804-810.

[21] ZHANG G M. Ubiquitin ligase Smurfl controla l'activitat dels osteoblasts i l'homeòstasi òssia dirigint-se a MEKK2 per a la seva degradació ^]. Cell, 2005, 121(1): 101-113.