Activitat antioxidant, perfil fenòlic i potencial nefroprotector dels extractes etanòlics i aquosos d'Anastatica Hierochuntica contra la nefrotoxicitat induïda per CCl4-en rates

Contacte:ali.ma@wecistanche.com

Tariq I. Almundarij et al

Resum:Kaff-e-Maryam (Anastatica hierochuntica L.) s'utilitza àmpliament per tractar una sèrie de problemes de salut, sobretot per alleujar el part i alleujar els trastorns relacionats amb el sistema reproductiu. Aquest estudi tenia com a objectiu avaluar l'efecte de A. hierophantic etanolic (KEE), i l'extracció aquosa (KAE) CCl4-induït estrès oxidatiu i nefrotoxicitat en rates utilitzant els marcadors bioquímics perrenalfuncionsi estat antioxidant així com exàmens histopatològics del teixit renal.A. hierophantic contenia 67,49 mg GAE g−1 de compostos fenòlics totals (TPC), 3,51 µg g−1 de carotenoides totals (TC) i 49,78 i 17,45 mg QE g−1 de flavonoides totals (TF) i flavonols totals (TFL), respectivament. Va donar lloc a 128,71 µmol de TE g−1 de DPPH-RSA i 141,92 µmol de TE g−1 d'ABTS-RSA. A. jeròfantic presentat superioractivitat antioxidantinhibint els radicals d'àcid linoleic i quelant els metalls d'oxidació. L'anàlisi HPLC va donar com a resultat 9 i 21 àcids fenòlics i 6 i 2 flavonoides enKEEi KAE amb predomini dels àcids sinàpic i siringic, respectivament. Injecció intramuscular de vit. E més Se i l'administració oral de KEE, KAE i KEE més KAE a 250 mg kg-1 de pes corporal van restaurar significativament els nivells de creatinina sèrica, urea, K, proteïnes totals i albúmina. A més, van reduir el malondialdehid (MOD), van restaurar el glutatió reduït (GSH) i van augmentar els nivells de superòxid dismutasa (SOD). KEE, KAE i KEE més KAE van protegir elronyonsde la nefrotoxicitat de CCl4-, ja que atenuaven principalment l'estrès oxidatiu induït. El totalnefronaLa secció va ser d'uns 83,27 per cent, 97,62 per cent i 78,85 per cent per a KEE, KAE i KEE més KAE, respectivament. Tots dos vit. Els extractes d'E més Se i A. hierophantic van atenuar l'alteració histopatològica en rates tractades amb CCl4-. En conclusió, A. hierophantic, especialment KAE, té la capacitat potencial de restaurar l'estabilitat oxidativa i millorarronyófunció després de CCl4lesió renal agudamillor que KEE. Per tant, A. hierophantic té el potencial de ser un agent terapèutic útil en el tractament de la nefrotoxicitat induïda per fàrmacs.

Paraules clau:Kaff-e-Maryam; polifenols; bioactivitat; metabòlits secundaris;marcadors renals; enzims antioxidants;renaldisfunció

Cistanche NZ per prevenir malalties renals, feu clic aquí per obtenir la mostra

1. Introducció

Malaltia de ronyóés la novena causa de mort amb més d'1 de cada 7, és a dir, s'estima que el 15 per cent dels adults nord-americans o 37 milions de persones tenenmalaltia renal crònica(ERC) [1]. Sorprenentment, la causa més freqüent d'ERC registrada el 2015 és la diabetis mellitus seguida de la pressió arterial alta i la glomerulonefritis [2]. Altres causes d'ERC inclouen la idiopàtica (sovint associada a ronyons petits a l'ecografia renal) [3]. Anteriorment, CCl4 s'utilitzava per al desgreixatge de metalls, neteja en sec, taques de teixits, líquids extintors i fumigació de gra [4]. Provoca trastorns greus al fetge, pulmons i testicles, així com a la sang, generant radicals lliures actius [5]. Segons les troballes d'Ogeturk et al. [6], l'exposició a aquest dissolvent produeix danys renals aguts i crònics. Es creu que la peroxidació lipídica induïda per radicals lliures és una de les causes principals del dany a la membrana cel·lular, que condueix a una varietat de condicions patològiques [7]. La generació de radicals reactius s'ha implicat en la nefrotoxicitat induïda per CCl4-, que està implicada en la peroxidació lipídica i l'acumulació de proteïnes disfuncionals, provocant lesions als ronyons [8]. Els usos tradicionals sorprenents de les plantes medicinals han crescut en els últims anys i nombroses investigacions han confirmat el seu paper terapèutic contra diverses malalties [9–12].

2. Materials i Mètodes

2.1. Preparació de la mostra

La mostra de la planta Kaff-e-Maryam (A. hierophantic L.) es va comprar a un mercat natiu de la ciutat de Buraydah, regió de Qassim, Aràbia Saudita. El material vegetal va ser autenticat pel Departament de Producció i Protecció Vegetal, Col·legi d'Agricultura i Medicina Veterinària, Universitat de Qassim, Aràbia Saudita. La mostra es va rentar amb aigua neta de l'aixeta per eliminar la sorra i la brutícia de les fulles i després el material vegetal assecat a l'aire (a 28 ± 1 ◦ C durant 48 h.) es va pols mecànicament i es va mantenir en bosses de polietilè opacs a 4 ± 1 ◦ C. fins al seu ús.

2.2. Preparació d'extractes etanòlics i aquosos

Es van extreure aproximadament 200 g d'A. hierophantic sec amb 300 ml d'etanol al 70 per cent en un extractor Soxhlet per preparar l'extracció etanòlica (KEE). L'extracte es va concentrar en un evaporador rotatiu a 40 ◦ C per evaporar el dissolvent restant i després fins a la sequedat sota un corrent de N2. L'extracció aquosa (KAE) es va dur a terme tal com descriu Asuzu [23] amb petites modificacions. Es van afegir dos-cents grams de material vegetal sec a 500 ml d'aigua destil·lada estèril calenta. A continuació, es va agitar bé la mescla i es va deixar reposar durant 1 h. A continuació, es va connectar un condensador de reflux al matràs i després es va escalfar fins a bullir suaument durant 10 min, es va refredar, es va agitar bé i es va filtrar a través de paper de filtre Whatman No. 1. El filtrat es va evaporar mitjançant un evaporador rotatiu i després fins a sequedat sota un corrent de N2. Els extractes alcohòlics i aquosos (250 mg mL-1) es van formular recentment en aigua destil·lada per ser utilitzats per a l'administració oral.

2.3. Contingut fenòlic total (TPC)

El contingut de TPC d'A. hierophantic es va determinar segons el mètode adaptat per Bettaieb et al. [24]. Els resultats es van comparar amb una corba estàndard d'àcid gàl·lic (GA) representada en el rang de 50-500 mg mL-1 (R2=0,99), i el TPC es va calcular com a mg d'equivalent d'àcid gàlic (GAE). ) per gram d'A. jeròfantic (mg de GAE g−1 ).

2.4. Carotenoides totals (TC), flavonoides totals (TF) i flavonols totals (TFL)

Tal com va informar Al-Qabba et al. [10], es van extreure repetidament 5 g d'A. hierophantic amb una barreja d'acetona i èter de petroli (1:1, v/v). El contingut total de carotenoides (TC) es va determinar espectrofotomètricament a 451 nm. El TC es va expressar com a mg g-1 DW. El contingut de TF d'A. hierophantic es va analitzar segons el protocol descrit per Mohdaly et al. [25]. El contingut de TF es va calcular com a mg equivalent de quercetina (QE) per 100 g-1 DW. En el mateix context, es va dur a terme el contingut TFL [26]. Es va registrar l'absorbància a 440 nm i es va calcular la TFL com a mg equivalent de quercetina (QE) per 100 g-1 DW.

2.5. Determinació de la capacitat antioxidant

Assaig d'eliminació de radicals DPPH: el RSA es va provar espectrofotomètricament depenent del blanqueig de la solució de color porpra DPPH segons una tècnica alterada per Lu et al. [27]. La capacitat antiradical es va presentar com a µmol d'equivalents de Trolox (TE) per gram d'A. hierophantic (µmoL TE g−1). Activitat d'eliminació de radicals ABTS: el RSA d'A. hierophantic contra els radicals ABTS es va provar mitjançant el mètode adaptat de Lu et al. [27]. Els resultats es van expressar com a µmoL TE g-1. Assaig de blanqueig amb -carotè-àcid linoleic: es va avaluar el percentatge d'antioxidants d'A. hierophantic en termes de blanqueig amb -carotè en comparació amb el hidroxianisol butilat (BHA) aplicant un protocol espectrofotomètric adaptat designat per Koleva et al. [28]; els resultats es van donar com a percentatge relacionat amb BHA. Acció quelant d'A. hierophantic sobre ions ferrosos: l'activitat quelant d'A. hierophantic es va mesurar segons el protocol de Zhao et al. [29]. El percentatge d'inhibició de ferrozina-Fe2 més la creació de complexos com a acció quelant dels metalls es va mesurar i es va presentar com a mg mL-1 quan es va utilitzar l'àcid etilendiaminotetraacètic (EDTA) com a control positiu.

2.6. Fraccionament de compostos polifenòlics d'extractes aquosos i etanòlics d'A. hierophantic

La determinació de polifenols a partir d'extractes etanòlics i aquosos es va realitzar mitjançant un sistema HPLC HP1100 (Agilent Technologies, Palo Alto, CA, EUA) equipat amb un mostreig automàtic, una bomba quaternària i un detector de matriu de díodes (Hewlett Packard 1050) mitjançant una columna (Altima). C18 150 × 4,6 mm, 5 µm) amb una columna de protecció Altima C18 de 5 mm (Alltech, Nettetal, Alemanya) segons Goupy et al. [30]. El sistema de dissolvents utilitzat va ser un gradient de A (àcid acètic 2,5 per cent), B (àcid acètic 8 per cent) i C (acetonitril). La taxa d'intercanvi de dissolvents va ser d'1 ml min-1 i la separació es va realitzar a 35 ◦ C. El volum injectat va ser de 10 µl. Els compostos fenòlics es van analitzar mitjançant un calibratge estàndard extern i es van expressar com a mg g-1 DW d'equivalents (més)-catequina per a flavan-3-ols i cumarina equivalent per a compostos aromàtics polars. Es va determinar una variabilitat del 8 per cent en cinc extraccions de fenòlics de la mateixa mostra. Tots els valors eren la mitjana de les injeccions duplicades. Els polifenols i els seus derivats es van identificar i quantificar a 280 i 320 nm, mentre que els flavonoides es van identificar a 360 nm.

2.7. Disseny experimental

Tots els experiments van ser aprovats pel Comitè Institucional d'Ètica Animal (IAEC) de QU (núm. {{0}}), KSA, que està regulat pel Propòsit del Control i la Supervisió d'Experiments amb Animals (CPCSEA) Comitè del Comitè Nacional de Bioètica (NCBE), Reglaments d'aplicació de la Llei d'ètica de la investigació sobre éssers vius. En l'estudi actual es van utilitzar un total de 36 rates albines mascles i es van dividir en 6 grups de 6 animals cadascun i es van tractar de la següent manera: el grup I (Control) va rebre una injecció intraperitoneal (ip) d'oli d'oliva (1.0 mL kg−1 dues vegades per setmana) i 0,5 mL d'aigua destil·lada per via oral/dia durant 21 dies successius. El grup II va rebre una injecció ip d'una barreja fresca de volums iguals de CCl4 i oli d'oliva (a una dosi d'1,0 mL kg-1 dues vegades per setmana) i 0,5 mL d'aigua destil·lada per via oral/ diàriament segons Al-Qabba et al. [10] amb petites modificacions. El grup III (grup de referència) va rebre una injecció intramuscular (im) de 50 mg kg-1 vit. E plus Se (Selepherol, Vetoquinol Co., Magny-Vernois, França) dues vegades per setmana, segons Asuka et al. [31] i El-Desoky et al. [32], i 0,5 ml d'aigua destil·lada per via oral/dia. El grup IV va servir com a prova i va rebre 250 mg kg-1 de KEE per via oral/dia juntament amb CCl4 ip dues vegades per setmana. El grup V va rebre 250 mg kg-1 de KAE per via oral/dia juntament amb CCl4 ip dues vegades per setmana. El grup VI va rebre 250 mg kg-1 de KEE més KAE (1:1) per via oral/dia juntament amb CCl4 ip dues vegades per setmana. Vint-i-quatre hores després de l'últim tractament (dia 21), les rates van ser anestesiades amb la mescla (alcohol:cloroform:èter, 1:2:3). Es van recollir mostres de sang de la punció cardíaca per a tots els animals i es va separar el sèrum per centrifugació a 4000 rpm durant 10 min i es va mantenir a -20 ◦ C per a l'examen bioquímic.

2.7.1. Anàlisi bioquímica renal

Les concentracions de creatinina sèrica, urea, proteïna total i albúmina es van determinar mitjançant mètodes espectrofotomètrics automatitzats (autoanalitzador BM/Hitachi-911; Boehringer Mannheim, Alemanya) segons les instruccions del fabricant. Els nivells de potassi es van determinar mitjançant fotometria de flama a 766 nm.

2.7.2. Estimació de l'activitat antioxidant renal

Després de la recollida de mostres de sang, es van sacrificar animals de tots els grups; dretronyonses van aïllar ràpidament i es van esbandir amb solució salina gelada. A continuació, es va retallar el teixit, es va esbandir amb solució salina freda, es va assecar i es va col·locar al gel immediatament. Utilitzant un homogeneïtzador de teixit elèctric, es van pesar porcions del teixit (1,0 g) i es van homogeneïtzar amb 9 volums de tampó fosfat 0,05 M fred a pH a 7,4. Els residus cel·lulars es van eliminar mitjançant centrifugació a 12,000 rpm (4 ◦C) durant 20 min per recollir sobrenedants per determinar la concentració de malondialdehid (MDA) [33], l'activitat de la superòxid dismutasa (SOD) [34] i es va reduir. contingut de glutatió (GSH) [35]. Concentració de proteïnes enronyóL'homogeneïtat es va determinar mitjançant el mètode Bradford [36].

2.7.3. Percentatge de nefroprotecció

The nephroprotection (F) percentages of vit. E plus Se, KEE, KAE, and KEE plus KAE were calculated for each biochemical parameter separately according to Wakchaure et al. [37] using the following equation:

on T=valor mitjà del grup de tractament, C=valor mitjà del grup de control positiu i N= valor mitjà del grup de control negatiu. A més, es va comparar el percentatge de nefroprotecció total (percentatge de TFP) amb vit. E plus Seas és el següent:

2.7.4. Estudis histopatològics

Es van recollir mostres d'autòpsia des de l'esquerraronyóde grups separats de rates i fixats en solució salina de formalina al 10% durant 24 h. El rentat amb aigua de l'aixeta va ser seguit de la deshidratació amb dilucions en sèrie d'alcohol (metil, etil i etil absolut). Les mostres es van netejar en xilè i es van incrustar en parafina durant 24 h a 56 ◦ C en un forn d'aire calent. Es van preparar blocs de teixit de cera d'abelles de parafina per seccionar a 4-micres de gruix mitjançant un micròtom de trineu. Les rodanxes de teixit es van recollir en portaobjectes de vidre, es van desparafinar i es van tacar amb hematoxilina i eosina per a una inspecció regular sota un microscopi elèctric lleuger [38].

2.8. Anàlisi estadística

Els resultats es mostren com a mitjana ± error estàndard (SE). La importància de les diferències entre mitjanes en diversos grups es va examinar mitjançant una anàlisi de variància unidireccional (ANOVA) seguida de la prova de Duncan, i es va donar un valor p entre les mitjanes al nivell p <0.05 [39="">

3. Resultats

3.1. Fitoquímics i capacitat antioxidant de A. hierophantic

Es va realitzar l'anàlisi quantitativa dels fitoquímics A. hierophantic i les activitats antioxidants relacionades mitjançant l'eliminació de radicals DPPH i ABTS, activitats de blanqueig -carotè-àcid linoleic i la capacitat quelant (CA). Com es pot veure clarament a la taula 1, el contingut de TPC era de 67, 49 mg GAE g-1. El contingut de TC era de 3,51 µg g-1. Els continguts de TF i TL eren de 49,78 i 17,45 mg QE g-1, respectivament. A més, es van utilitzar DPPH-RSA i ABTS-RSA per mesurar la progressió de les activitats antioxidants. Els resultats van indicar 128,71 µmol de TE g−1 i 141,92 µmol de TE g−1 per a DPPH-RSA i ABTS-RSA, respectivament. A més, elactivitat antioxidant(AOA) d'A. hierophantic es presenta a la taula 1. El percentatge d'inhibició dels radicals d'àcid linoleic es va calcular en un 45,74 per cent en comparació amb el BHA mitjançant l'assaig de blanqueig amb carotè (-CB). A més, l'avaluació de l'activitat quelant dels metalls va revelar 42, 89 mg g-1, que sembla ser capaç d'interferir amb la formació del complex Fe2 més -ferrozina, cosa que indica la seva capacitat per quelar els metalls d'oxidació.

3.2. Quantificació de A. compostos fenòlics hierophantic

Es va dur a terme l'anàlisi quantitativa de compostos fenòlics per a KEE i KAE mitjançant anàlisi HPLC, i les dades es mostren a la taula 2. Es van identificar nou àcids fenòlics separats i sis flavonoides en quantitats detectables a partir de la KEE d'A. hierophantic. Els àcids fenòlics més abundants van ser els àcids hidroxicinàmics com l'àcid sinàpic (28,704 mg 1{00 g−1 ) seguit de l'àcid cafeic (6,621 mg 1{0{ {61}} g−1 ), àcid rosmarínic (2,884 mg 100 g−1 ), àcid ferúlic (1,854 mg 100 g−1 ) i àcid cinàmic (0,094 mg 100 g−1 ); i àcids hidroxi-benzoics com l'àcid p-hidroxibenzoic (3,440 mg 100 g−1 ), l'àcid protocatecuic (1,811 mg 100 g−1 ), l'àcid vanil·lic (3,326 mg 100 g−1 ) i l'àcid siringic (1,083 mg 100 g −1 ) −1). Flavonoides com la miricetina (16,269 mg 100 g−1 ), D-catequina (2,410 mg 100 g−1 ), kaempferol (0,434 mg 100 g−1 ), rutina (0,539 mg 100 g−1 ), apigenina {{56} Es van detectar quantitats inestimables de }glucòsid (0,192 mg 100 g-1 ) i quercetina (0,184 mg 100 g-1 ). També es van determinar els compostos fenòlics en KAE d'A. hierophantic, i les dades es presenten a la taula 2. L'àcid siringic es va registrar com l'àcid fenòlic més alt entre els 21 fenòlics identificats. El catecol i el pirogallol eren 2,526 i 1,589 mg 100 g-1, respectivament. Dades

va indicar que alguns àcids fenòlics com els àcids cafeic, catequina, clorogènic, epicatequina, e-vanil·lic, p-hidroxibenzoic i protocatecuic es van detectar en quantitats moderades de 0.725, 0.256, { {6}},136, 0,193, {{10}},443, 0,223 i 0,454 mg 100 g−1, respectivament. En el mateix context, quantitats baixes de 3,4,5-temps etoxi cinàmic, 4-aminobenzoic, benzoic, cinàmic, cumarínic, elàgic, ferúlic, gàlic, isoferúlic, -cumàric, p-cumàric , i l'àcid salicílic es van quantificar després de ser identificats. L'epicatequina i la D-catequina com a flavonoides també es van quantificar en KAE d'A. hierophantic.

3.3. Nivells sèrics de creatinina, urea, K, proteïnes totals i albúmina

La injecció de CCl4 va augmentar substancialment els nivells de creatinina sèrica, urea i k en rates GII en comparació amb les rates control (GI). Per contra, els nivells totals de proteïna i albúmina es van reduir significativament en rates tractades amb CCl4-(taula 3). Vit. Els extractes d'E plus Se i A. hierophantic (G III, IV, V i VI) van reduir substancialment les alteracions de la creatinina i la urea causades per la injecció de CCl4, mentre que van augmentar l'albúmina i les proteïnes totals per estar propers als valors normals en GI (taula 3). ). El nivell de k sèric va augmentar notablement en rates tractades amb CCl4-(GII) en comparació amb GI (taula 3). La injecció de vit. E més Se i l'administració d'extractes alcohòlics i aquosos d'A. hierophantic (G IV, V i VI) també van millorar positivament el nivell de k en comparació amb GI (taula 3).

3.4. Biomarcadors antioxidants renals

Com es mostra a la taula 4, l'administració de CCl4 va reduir significativament els nivells de SOD i GSH i va augmentar el nivell de MDA a GII.ronyóhomogeneïtzar el teixit. Tanmateix, en comparació amb GI, les rates es van tractar amb tant vit. Els extractes d'E plus Se i A. hierophantic (GIII, VI, V i VI) van mostrar una millora substancial en l'activitat dels enzims antioxidants SOD i GSH, així com una reducció dels nivells de MDA (taula 4). L'extracte alcohòlic hierophantic (GIV) va superar A. l'extracte aquós hierophantic (GV) i va combinar extractes alcohòlics i aquosos d'A. hierophantic en atenuar els nivells d'antioxidants, i la lluita contra el procés d'autooxidació va donar lloc a nivells baixos de MDA en comparació amb GI.

3.5. Percentatge de nefroprotecció

El percentatge de nefroprotecció (relatiu als grups de control negatiu (GI) i positiu (GII) deronyófuncions com la creatinina, urea, k, TP i albúmina, així com activitats antioxidants en l'homogeneïtat de ronyó (MDA, SOD, GSH) s'il·lustra a la taula 5. El percentatge de nefroprotecció va registrar el valor més alt com a creatinina, urea, k en GIII, TP i albúmina a GV, MDA i GSH a GIII i SOD a GV (taula 5). El percentatge total de nefroprotecció en relació amb vit. El tractament amb E més Se va registrar nivells màxims en el grup tractat amb KAE (GV, 97,62 per cent), després KEE (GIV, 83,27 per cent) i després KEE més KAE (GVI, 78,85 per cent), tal com es revela a la taula 5.

3.6. Efectes dels extractes d'A. hierophantic sobre la histoarquitectura renal

Els resultats de les investigacions bioquímiques van ser recolzats per un examen histopatològic. La taula 6 i la figura 1 mostren el grau de canvis histològics en l'estructura subjacent de la rataronyonsen diversos grups experimentals tractats amb extractes d'A. hierophantic. En la investigació actual, elronyódel grup control (GI) es va trobar que tenia una estructura histològica normal (Figura 1(I.1)). La histoarquitectura de les rates tractades amb CCl4- (GII) va mostrar una infiltració focal de cèl·lules inflamatòries (++) entre els túbuls de l'escorça, la congestió (+++) dels vasos sanguinis entre els túbuls (Figura 1(II.2) ), múltiples formacions eosinofíliques (plus més) a la llum d'alguns túbuls i hemorràgia focal (plus més) entre els túbuls degenerats a la porció corticomedular (Figura 1(II.3), taula 6). En GIII, injectant vit. E plus Se, l'administració de l'extracte alcohòlic d'A. hierophantic (GIV), extracte aquós d'A. hierophantic (GV) i una combinació d'extractes d'A. hierophantic (GVI) va atenuar els efectes citotòxics de CCl4 i va registrar lleus ( més ) a congestió moderada (plus més) als vasos sanguinis entre els túbuls de l'escorça (Figura 1(III.4–VI.8), Taula 6) amb la càpsula de Bowman ben desenvolupada amb glomèrul i túbuls contorneats engrandits. A més, l'extracte aquós d'A. hierophantic (GV) va registrar una infiltració focal de cèl·lules inflamatòries (més més) a la part corticomedular (figura 1 (V.7), taula 6).

4. Discussió

Els fitoquímics són majoritàriament eficaços eliminadors de radicals lliures i es consideren agents antioxidants superiors a base de plantes. Es creu que les substàncies polifenòliques tenen propietats anticancerígenes i antimutàgenes en humans [40]. Un valuós contingut de TPC en A. hierophantic va ser lleugerament superior al obtingut per Mohamed et al. [21] com 51,97 mg GAE g × 1 a A. herba hierophantic i per AlGamdi et al. [41], que va trobar 4 mmol L × 1 GAE a les llavors d'A. hierophantic. Recentment, Zin et al. [42] va indicar la presència de tanins a A. hierophantic com a compost bioactiu i va recomanar la seva bioactivitat, que s'havia d'investigar a fons. El contingut de -carotè, com a part dels carotenoides totals, va ser de 2, 27 µg g × 1, tal com van esmentar Mohamed et al. [21], i fins i tot els resultats actuals van presentar els carotenoides totals com 3,51 µg g × 1. Mohamed et al. han indicat troballes similars en els continguts de flavonoides i flavonols. [21]. Components biològicament actius, com els compostos fenòlics, presentsactivitat antioxidantcom a ruptures de reaccions en cadena d'oxidació de lípids donant hidrogen als radicals lliures actius. Aquest potencial d'eliminació dels fenòlics per inhibir els radicals va ser dilucidat pels seus grups hidroxil fenòlics [8,10,22]. Aquest àcid fenòlic s'ha descrit com un component antioxidant eficaç, incloent peròxid d'hidrogen, radical hidroxil i anió superòxid [43]. L'activitat quelant dels metalls hierophantic sembla ser eficaç per interferir amb la construcció del complex "Fe2 més –ferrozina", cosa que suggereix la seva capacitat per capturar ions "ferrosos" abans que "ferrozina". Una relació positiva entre un augment del seu contingut en compostos fenòlics està directament indicada amb la seva capacitat antioxidant [42]. Andjelkovi´c et al. [44] va establir l'activitat de nombrosos àcids fenòlics per formar complexos amb metalls. El valuós TPC i les activitats antioxidants rellevants que utilitzen diferents enfocaments de mesurament donen una idea clara i confirmen la bioactivitat d'A. hierophantic com a herba medicinal per a aplicacions d'aliments o begudes.

Components antioxidants efectius, com ara peròxid d'hidrogen, radical hidroxil i anió superòxid [43,45,47]. Els compostos identificats i quantificats per HPLC a KAE d'A. hierophantic eren superiors al nombre de compostos identificats a KEE, però els compostos identificats a KEE d'A. hierophantic es van presentar en quantitats més altes [22]. Els resultats reflecteixen que l'A. hierophantic consumidor podria presentar molts components tant en formes polars com no polars. Aquests resultats són presentats de manera similar per AlGamdi et al. [41] ja que van identificar i quantificar 20 compostos polifenòlics en llavors d'A. hirerohuntica. L'extracte contenia àcids clorogènics i àcids hidroxibenzoics, però els components principals eren flavones C-glicòsids, C-diglicòsids, O-glicòsids i O-glicòsids-C-glicòsids que es presenten principalment com a conjugats de luteolina. A més, 14 dels 20 compostos de l'extracte d'A. hierophantic van mostraractivitat antioxidantutilitzant un sistema de detecció d'antioxidants HPLC en línia [41]. Curiosament, les dades actuals confirmen que A. hierophantic és ric en compostos fitoquímics i és una bona font d'antioxidants naturals amb beneficis potencials per a la salut, com gairebé no s'ha destacat abans a les llavors [41]. Per tant, el te preparat a partir de la pols de la planta sencera és la forma tradicional de consum; les dades van il·lustrar nous compostos bioactius identificats en KEE i KAE d'A. hirerohuntica, que difereixen dels trobats a AlGamdi et al. [41]

En nombrosos estudis, la nefrotoxicitat induïda per CCl4-s'utilitza com a sistema model per provar l'efecte nefroprotector d'extractes o fàrmacs de plantes [48,49]. L'estudi actual va analitzar l'efecte dels extractes d'A. hierophantic sobre CCl4-induïtronyódany, així com la seva nefroprotecció i potencial antioxidant en rates. En l'estudi actual, el grup de tractament amb CCl4 (GII) va augmentar significativament els nivells de creatinina, urea i k i va disminuir les concentracions totals de proteïna i albúmina en comparació amb GI. Això podria ser perquè la intoxicació amb CCl4 és una font important de producció de radicals lliures en nombrosos òrgans, inclosos el fetge, els ronyons, els pulmons, el cervell i la sang [50]. També s'ha observat que després de la injecció de CCl4 a rates, la concentració de CCl4 es distribueix de manera més uniforme als ronyons que al fetge [51], ja que elronyóté una alta afinitat per CCl4 i conté citocrom P450, predominantment a l'escorça. Els radicals lliures més comuns de CCl4 són el radical triclorometil (CCl3• ) i el radical triclorometil peroxil (CCl3O2• ) [52]. Aquests radicals s'uneixen a una proteïna intracel·lular, lípids de la membrana cel·lular i ADN, provocant la desnaturalització de proteïnes, la peroxidació lipídica i el dany oxidatiu de l'ADN que condueix a la mort cel·lular [53]. En canvi, tractar rates CCl4- amb vit. Els extractes E plus Se (GIII) i A. hierophantic (GVI: VI) van atenuar eficaçment aquests augments dels nivells de creatinina i urea, així com l'augment de l'albúmina sèrica i les proteïnes totals per estar molt a prop dels seus nivells en GI. Això pot ser degut a les propietats antioxidants i al ric contingut fenòlic dels extractes d'A. hierophantic i a la capacitat antioxidant i a l'activitat quelant de vit. E més Se, que elimina els radicals lliures inhibint així el dany renal. Els fitoquímics són els eliminadors de radicals lliures més eficaços i es consideren agents antioxidants superiors de les plantes [54]. Els compostos fenòlics més abundants van ser els àcids hidroxicinàmics, com l'àcid sinàpic, entre els nou compostos fenòlics identificats en KEE, mentre que l'àcid siringic va ser l'àcid fenòlic més elevat entre els 21 àcids fenòlics identificats en KAE. Es van identificar sis flavonoides a KEE i dos a KAE mitjançant l'anàlisi HPLC [55]. A més, com a antioxidant, vit. Es creu que E protegeix els teixits dels danys causats pels metabòlits reactius de l'oxigen. El seleni també és reconegut com un oligoelement essencial per a la salut humana, protegint les cèl·lules dels efectes nocius dels radicals lliures [22].

En l'estudi actual, l'administració de CCl4 va disminuir notablement GSH i SOD i va augmentar els nivells de MDAronyóhomogeneïts en relació amb GI. Vit. Els extractes d'E plus Se i A. hierophantic van millorar els diversos efectes de CCl4 restaurant l'activitat alterada d'agents antioxidants com SOD i GSH i poden desactivar el procés de producció de l'MDA, com es va informar recentment [15,21,40,41] . El GSH és un antioxidant no enzimàtic que es troba a totes les cèl·lules de mamífers. Amb la seva forma oxidada, GSSG, GSH actua com a cofactor de nombrosos enzims desintoxicants (GPx, GST i altres) contra l'estrès oxidatiu i manté l'equilibri redox cel·lular [47]. Aquesta troballa segueix les de Khan i Siddique [56] i Makni et al. [57], que va informar que CCl4 va disminuir el nivell de GSH als ronyons de rata. Tractament amb vit. Els extractes d'E plus Se i A. hierophantic van mostrar protecció contra la reducció del nivell de GSH provocat per CCl4. En el mateix context, SOD catalitza la dismutació de dues molècules d'anió superòxid (*O2) en peròxid d'hidrogen (H2O2) i oxigen molecular (O2), fent que l'anió superòxid potencialment nociu sigui menys perillós [58,59]. La intoxicació amb CCl4 altera el nivell d'expressió gènica esgotant la SOD renal [60]. Una disminució de l'activitat SOD és un índex sensible de dany cel·lular. Els nostres extractes d'A. hierophantic provats van millorar la toxicitat renal en alleujar el nivell de SOD. Participa en diversos processos enzimàtics per reduir la concentració de reaccions de desintoxicació [61]. MDA és el primer producte de la peroxidació lipídica i és un dels marcadors importants de l'estrès oxidatiu. Els extractes d'A. hierophantic van disminuir l'augment dels nivells de MDA i van restaurar el poder antioxidant total als ronyons de rates tractats amb CCl4-. Aquests efectes protectors poden ser deguts a la potent activitat antioxidant dels extractes d'A. hierophantic [15,21,40,41]. Aquests resultats també suggereixen que els extractes d'A. hierophantic poden atenuar l'estrès oxidatiu disminuint els nivells de peròxid de lípids en els ronyons de rates exposats a CCl4- i prevenint el dany renal. Aquests resultats coincidien amb els resultats de les activitats antioxidants del Zn sobre la nefrotoxicitat aguda induïda per CCl 4- [62, 63].

Els extractes d'A. hirerohuntica van presentar una valuosa capacitat de nefroprotecció pel que faronyóproves de funció (creatinina, urea, K, TP i albúmina) i activitats antioxidants de l'homogeneïtat renal (GSH, SOD, MDA) a GIV, V i IV, respectivament. El percentatge total de nefroprotecció en relació amb vit. El tractament amb E més Se va registrar nivells màxims en el grup tractat amb KAE (GV, 97,62 per cent), després KEE (GIV, 83,27 per cent) i després KEE més KAE (GVI, 78,85 per cent), respectivament, en ordre descendent. Això pot ser degut a diferències en la quantitat i qualitat dels continguts fenòlics i antioxidants dels extractes d'A. hirerohuntica, que tenen una relació amb la capacitat antioxidant [15,19,22,40,42].

Les troballes histopatològiques aronyonssón coherents amb les estimacions bioquímiques dels grups experimentals investigats. L'administració de CCl4 (GII) va provocar una lesió glomerular i tubular amb vasocongestió als ronyons. Dogukan et al. [64] va descobrir un patró histològic similar al teixit renal de rata en resposta a un tractament prolongat amb CCl4. També es considera que els canvis histològics són causats per la sobrecàrrega funcional de les nefrones, que condueix a una disfunció renal [65], i/o es deuen a la destrucció del teixit provocada com a conseqüència de la generació de radicals lliures mitjançant el metabolisme de CCl4 [56,66] . L'efecte de la vit. E més Se i A. extracte hierophantic per reparar i restaurar els efectes de destrucció renal de CCl4 van ser notables. Això pot ser perquè vit. E més Se (com a potent antioxidant) actua sobre les ROS induïdes per CCl4 [67]. Els extractes d'A. hierophantic suprimeixen la nefrotoxicitat aguda induïda per CCl4-a causa del paper antioxidant i les propietats d'eliminació de radicals lliures dels compostos fenòlics presents als extractes d'A. hirerohuntica [22]. Els nostres resultats són coherents amb els d'altres investigadors que han demostrat que diversos derivats vegetals tenen efectes farmacològics eliminant els abusos de CCl4 i recuperant la normalitat [6].

5. Conclusions

Els resultats d'aquest estudi van demostrar clarament que la planta A. hierophantic és rica en compostos fenòlics polars i no polars amb una capacitat antioxidant superior, que està directament relacionada amb el contingut fitoquímic. A. hierophantic (sobretot extracte aquós) protegeix les rates contra l'estrès oxidatiu induït per CCl4-i agutronyólesions, com ho demostra una caiguda significativa dels nivells de MDA i l'augment de l'activitat de GSH i SOD, així com el cessament de les alteracions bioquímiques i histològiques als ronyons. L'eficàcia protectora podria derivar de les propietats antioxidants i d'eliminació de radicals lliures dels compostos fenòlics presents als extractes d'A. hierophantic. Aquestes característiques ajuden a explicar l'eficàcia medicinal de la planta com a medicament a base d'herbes. Es necessiten més investigacions per descriure completament els principis actius d'A. hierophantic, i aquest estudi pretén estimular una investigació relacionada més exhaustiva per oferir dades i recomanacions suficients per definir els seus mecanismes i dosis segures.

Contribucions de l'autor:Conceptualització, TIA, YMA i HB; metodologia, investigació, HB i HAA-R.; curació de dades, TIA i YMA; redacció: preparació, revisió i edició de l'esborrany original; HB i HAA-R. Tots els autors han llegit i acceptat la versió publicada del manuscrit.

Finançament:Els investigadors volen agrair al Deganat d'Investigació Científica de la Universitat de Qassim el finançament de la publicació d'aquest projecte.

Declaració de disponibilitat de dades:Les dades presentades en aquest estudi estan disponibles a petició de l'autor corresponent.

AbreviaturesABTS:àcid 2,2'-azino-bis(3-etilbenzè tiazolina-6-sulfònic); AOA:activitat antioxidant; BHA: hidroxianisol butilat; BHA: hidroxianisol butilat; DPPH: 1,1-difenil-2-picril hidrazina; DW: pes sec; GA: àcid gàl·lic; GAE: equivalent àcid gàlic; GSH: glutatió reduït; HPLC-DAD: detecció de matriu de díodes per cromatografia líquida d'alt rendiment; KAE: A. extracte aquós jerofantic; KEE: A. extracte etanòlic hierofantic; MDA: malonaldehid; QE: equivalent de quercetina; RAA: activitat antioxidant relativa; ROS: espècies reactives d'oxigen; RSA: activitat d'eliminació de radicals; Se: seleni; SE: error estàndard; SOD: superòxid dismutasa; TC: carotenoides totals; TC: carotenoides totals; TF: flavonoides totals; TE: equivalents de Trolox; TFL: flavonols totals; TPC: compostos fenòlics totals.

References

1. Estadístiques, KD Chronic Kidney Disease als Estats Units. 2021. Disponible en línia: (consultat el 20 de juliol de 2021).

2. Ku, E.; Glidden, DV; Johansen, KL; Sarnak, M.; Tighiouart, H.; Grimes, B.; Hsu, CY Associació entre el control estricte de la pressió arterial durant la malaltia renal crònica i la menor mortalitat després de l'aparició de la malaltia renal terminal. Ronyó Int. 2015, 87, 1055–1060.

3. Tumlin, JA; Madaio, MP; Hennigar, R. Nefropatia IgA idiopàtica: patogènesi, histopatologia i opcions terapèutiques. Clin. Melmelada. Soc. Nefrol. 2007, 2, 1054–1061.

4. Olah, G.; Reddy, VP; Prakash, GS; Reaccions, enciclopèdia de tecnologia química FC Kirk-Othmer. Lents de contacte 1978, 720–742.

5. Ozturk, F.; Ucar, M.; Ozturk, IC; Vardi, N.; Batcioglu, K. Nefrotoxicitat induïda per tetraclorur de carboni i efecte protector de la betaïna en rates Sprague-Dawley. Urologia 2003, 62, 353–356.

6. Ogeturk, M.; Kus, I.; Colakoglu, N.; Zararsiz, I.; Ilhan, N.; Sarsilmaz, M. L'èster fenetílic de l'àcid cafeic protegeix els ronyons contra la toxicitat del tetraclorur de carboni a les rates. J. Etnofarmacol. 2005, 97, 273–280.

7. Slater, TF Mecanismes de radicals lliures en lesions tissulars. En funció i malaltia cel·lular; Cañedo, LE, Todd, LE, Packer, L., Jaz, J., Eds.; Springer: Boston, MA, EUA, 1988; pàgines 209–218.

8. Khan, MR; Rizvi, W.; Khan, GN; Khan, RA; Shaheen, S. Nefrotoxicitat induïda per tetraclorur de carboni en rates: paper protector de Digerati muricata. J. Etnofarmacol. 2009, 122, 91–99.

9. Afsar, T.; Khan, MR; Razak, S.; Ullah, S.; Mirza, B. Activitat antipirètica, antiinflammatòria i analgèsica de l'Acacia hydaspica R. Parker i la seva anàlisi fitoquímica. Complement BMC. Altern. Med. 2015, 15, 1–12.

10. Al-Qabba, MM; El-Mowafy, MA; Althwab, SA; Alfheeaid, HA; Aljutaily, T.; Barakat, H. Perfil fenòlic, activitat antioxidant i millora de l'eficàcia dels brots de quinoa de Chenopodium contra l'estrès oxidatiu induït per CCl4 en rates. Nutrients 2020, 12, 2904.

11. Al Zhrani, MM; Althwab, SA; Aljutaily, T.; Alfheeaid, HA; Ashish, IS; Barakat, H. Efecte protector de les begudes a base de moringa contra la hiperlipèmia i la hiperglucèmia en rates induïdes per diabetis tipus 2. Alimentació Res. 2021, 5, 279–289.

12. Khalifa, I.; Nawaz, A.; Sobhy, R.; Althwab, SA; Barakat, H. Les antocianes poliacilades en xarxa constructivament amb residus de diades catalitzadores de 3CLpro de 2019-nCoV que les antocianes monomèriques: un estudi d'activitat de relació estructural amb 10 antocians mitjançant enfocaments in-silico. J. Mol. Gràfic. Model. 2020, 100, 107690.

13. Yusof, J.; Mahdy, ZA; Noor, RM Ús de la medicina complementària i alternativa durant l'embaràs i el seu impacte en el resultat obstètric. Complement. Allà. Clin. Practiqueu. 2016, 25, 155–163.

14. Salah, SH; Abdou, HS; Abd El-Azeem, A.; Abdel-Rahim, E. Els efectes antioxidants d'algunes plantes medicinals com a agents hipoglucèmics sobre l'aberració cromosòmica i el metabolisme anormal dels àcids nucleics produïts per l'estrès de la diabetis en rates albines adultes masculines.J. Diabetis Mellit. 2011, 1, 6–14.

15. Daur, I. Propietats químiques de l'herba medicinal Kaff Maryam (Anastatica hierochuntica L.) i la seva relació amb l'ús de la medicina popular. Afr. J. Microbiol. Res. 2012, 6, 5048–5051.