Membranes de nanocel·lulosa bacteriana bioactive enriquides amb Eucalyptus Globulus Labill. Extracte aquós de fulles per a aplicacions de cura de la pell anti-envelliment Part 2

Siusplau contactaoscar.xiao@wecistanche.comper a més informació

3. Resultats i discussió

Es van preparar membranes BNC bioactives, incorporant diferents dosis d'un extracte aquós obtingut de la hidrodestil·lació de fulles d'E.globulus, preveient la seva aplicació com a màscares anti-envelliment per a la cura de la pell. Quatre membranes BNC que contenen 7,5 mg cm-de glicerol (actuant com a plastificant i humectant)[39,48] i diferents continguts de HDE, és a dir, 1.0 ug cm-2(BNC-G-HDE1) ,1,5 ug cm-2（BNC-G-HDE1,5）, 2.0 ug cm-2（BNC-G-HDE2) i 3.0 ug cm-7(BNC-G-HDE3), es van preparar (taula 1). També es va preparar una membrana BNC pura (BNC) i una membrana BNC només amb glicerol (BNC-G) per a la comparació (taula 1). Les membranes BNC-G-HDE es van fabricar pel mètode d'impregnació simple, basat en la difusió de les solucions aquoses HDE i glicerol a la xarxa BNC hidròfila i altament porosa (Figura 1), segons estudis anteriors que descriuen aquest procés per a la incorporació. d'una barreja d'extractes vegetals [13] i cafeïna [23].

Amb l'addició de l'HDE i el glicerol, el gruix de les membranes BNC seques va augmentar de 50 ± 1 um per al BNC pur a 87 ± 4 um per al BNC-G, i a valors en el rang de 79 ± 4 um a 98. ±8 μm per a membranes carregades amb HDE i glicerol, la qual cosa indica la incorporació reeixida dels components de l'extracte i el glicerol a l'estructura 3D de BNC. L'aspecte macroscòpic de les membranes obtingudes (figura 1) és indicatiu d'una distribució homogènia de l'HDE i el glicerol dins de la nanoestructura de BNC.quant cistanche prendreTambé és evident que la inclusió de glicerol fa que les membranes siguin més translúcides, com s'ha descrit anteriorment [20]. A més, la incorporació de l'HDE no va provocar alteracions visibles del color de les membranes BNC blanquinoses, la qual cosa està en línia amb l'aspecte incolor de la solució aquosa HDE (figura 1).

Feu clic aquí per saber-ne més

Totes les membranes BNC obtingudes es van caracteritzar pel que fa a la morfologia, el rendiment mecànic, l'estabilitat tèrmica i la capacitat d'absorció d'humitat. A més, també es va avaluar l'activitat antioxidant i la citotoxicitat in vitro de les membranes. Per a la membrana BNC-G-HDE2 (2.0 ug cm{--), l'estabilitat de l'activitat antioxidant després de 3 mesos d'emmagatzematge a 22-25 graus C i 52 per cent d'HR o a 40 També es va avaluar el grau C i el 75 per cent, així com l'activitat antisenescència in vitro.

3.1.Morfologia

La morfologia de les membranes BNC, BNC-G i BNC-G-HDE es va avaluar mitjançant anàlisi SEM, tal com es mostra a la figura 2. A la micrografia superficial del BNC pur, es nota clarament la seva característica xarxa nanofibril·lar 3D; tanmateix, aquesta microestructura és menys perceptible a les membranes BNC-G i BNC-G-HDE, especialment amb l'augment de la quantitat d'extracte, que, juntament amb el glicerol, cobreix les nanofibrils de cel·lulosa. Aquest efecte ja es va observar a les membranes BNC que només incorporaven glicerol [49] o glicerol i ingredients farmacèutics actius (per exemple, cafeïna, diclofenac i lidocaïna) [22]. També es pot veure que aquestes membranes mostren una estructura menys compacta que la BNC prístina a causa de l'atrapament de glicerol (així com dels components de l'extracte) a la xarxa BNC. La incorporació de molècules de glicerol entre nanofibril·les BNC redueix els enllaços d'hidrogen intermoleculars entre nanofibrils de cel·lulosa[49] i, en conseqüència, disminueix el col·lapse de l'estructura BNC durant l'assecat, donant lloc a membranes amb una major flexibilitat [23]. A les imatges de secció transversal, també s'observa clarament l'ompliment dels espais lamel·lars de BNC amb glicerol i l'extracte. També es van informar resultats similars per a materials basats en BNC carregats amb una solució etanòlica d'extracte de pròpolis [50] Scrophularia striata extracte de Boiss [51] o àcid hialurònic [52]. Així, aquests resultats confirmen l'èxit de la incorporació de glicerol i HDE a les membranes BNC, sense formació evident d'aglomerats d'extracte.què és un cistancheAquesta observació és una indicació de la bona compatibilitat dels components de l'extracte (compostos fenòlics) amb les fibrilles de cel·lulosa i el glicerol.

3.2. Rendiment mecànic

El rendiment mecànic de totes les membranes BNC es va avaluar mitjançant proves de tracció i es va comparar amb el d'una màscara facial comercial basada en BNC. Tenint en compte que una màscara facial de làmina s'aplica normalment en estat humit, el rendiment mecànic de les membranes preparades es va avaluar tant en estat sec com humit (80 per cent de contingut d'humitat). L'avaluació de la resistència i elasticitat d'una màscara facial de làmina és fonamental perquè ha de ser prou resistent per ser manipulada i, alhora, prou elàstica per permetre un ajustament perfecte i una adherència estreta a la pell, permetent així una millor penetració de la pell. compostos actius a la pell [13]. Els resultats de les proves de tracció de les membranes seques (Figura 3A) mostren que la incorporació de glicerol va afectar significativament les propietats mecàniques de les membranes BNC millorant, en gran mesura, la seva elasticitat. Això és evident per l'augment significatiu del valor de l'allargament a la ruptura del 3,6 ± 0, 6 per cent per a BNC al 15, 5 ± 1, 4 per cent per a BNC-G, acompanyat d'una disminució significativa del mòdul de Young (d'1. 0.1±1,2 GPa per BNC a 0,5±0,1 GPa per BNC-G) i en la resistència a la tracció (de 237±34 MPa per BNC a 40±9 MPa per BNC-G). Aquests resultats coincideixen amb estudis anteriors sobre materials basats en BNC que incorporen glicerol com a plastificant [39,49,53]. Com s'ha explicat anteriorment, la incorporació de glicerol a la xarxa BNC provoca la reducció de les forces intermoleculars entre les nanofibrils de cel·lulosa, augmentant així l'espai entre fibres i la seva mobilitat, donant lloc a membranes més elàstiques [49]. Pel que fa al comportament mecànic de les membranes humides (Figura 3B), l'efecte de l'addició de glicerol sobre l'allargament de les membranes no és tan evident.cistanche แอ ม เว ย์De fet, BNC mostra un valor d'allargament idèntic al de BNC-G (BNC: 15,2 ± 1, 3 per cent, BNC-G: 20, 8 ± 3, 5 per cent ), que pot estar associat amb la presència de molècules d'aigua. a la xarxa BNC que també debilitarà els enllaços interfibril·lars [24], fent que el BNC humit sigui més estirable. Tanmateix, com a les membranes seques, una reducció significativa del mòdul de Young (BNC:0,3±0.0 GPa vs.BNC-G:0,02 ±0,01 GPa) i la resistència a la tracció (BNC:26±1 MPa vs. BNC-G:2±1 MPa) s'observa després de la càrrega de glicerol.

La incorporació de l'HDE a les membranes BNC no altera, de manera significativa, la majoria de les propietats mecàniques de les membranes seques en comparació amb la contrapart BNC-G. L'excepció és l'augment de la resistència a la tracció i el mòdul de Young per a BNC-G-HDE2 i l'augment de l'allargament a la ruptura de BNC-G-HDE3. Totes les membranes BNC-G-HDE mostren allargaments elevats (11-18 per cent) juntament amb valors petits del mòdul de Young ({{10}}.7-1,9 GPa) i valors de resistència a la tracció entre 51 i 116 MPa. De la mateixa manera, en estat humit, també es va confirmar que l'addició de HDE no influeix significativament en la majoria de les propietats mecàniques de BNC-G (figura 3B). Les membranes humides BNC-G-HDE també mostren allargaments elevats (19-27 per cent), valors baixos del mòdul de Young (0,03-0,06 GPa) i valors de resistència a la tracció entre 4 i 5 MPa.

En conjunt, les propietats mecàniques comentades anteriorment confirmen que les membranes BNC-G-HDE són prou flexibles per ser manipulades i modelables a la pell, com és desitjable per a l'aplicació prevista. De fet, els resultats demostren que aquestes membranes són realment prometedores, sobretot tenint en compte la comparació amb la màscara BNC comercial. Les membranes seques BNC-G-HDE tenen idèntiques o fins i tot significativament (pàg<0.05)superior mechanical="" properties="" (e.g.,="" elongation="" at="" break="" of="" dry="" bnc-g-hde3)="" to="" those="" of="" the="" commercial="" bnc="" counterpart="" when="" evaluated="" in="" a="" wet="" state,="" the="" commercial="" bnc="" shows="" higher="" values="" of="" elongation="" at="" break="" and="" tensile="" strength="" than="" those="" observed="" in="" the="" bnc-g-hde="" membranes,="" whereas="" values="" of="" young's="" modulus="" are="" identical.="" differences="" in="" the="" content="" of="" plasticizers="" and="" humectants="" (e.g.,="" glycerol,="" hyaluronic="" acid,="" peg-450)="" can="" explain="" the="" increased="" elasticity="" of="" wet="" commercial="" bnc="" compared="" to="" the="" bnc-g-hde="" membranes="" developed="" in="" the="" present="">

3.3. Estabilitat tèrmica

Per conèixer l'estabilitat tèrmica de les membranes seques BNC-G-HDE, es va realitzar una anàlisi termogravimètrica sota una atmosfera inert (N,). La membrana BNC-G es va analitzar com a control. Els perfils de degradació i els seus derivats corresponents es mostren a la figura 4. Totes les membranes mostren una pèrdua de pes inicial per sota dels 100 graus, atribuïda a l'evaporació de l'aigua adsorbida de la matriu polimèrica, que confirma la hidrofilicitat del BNC i la naturalesa higroscòpica del glicerol. A part d'aquest pas de deshidratació, totes les membranes mostren un perfil de pèrdua de pes en dos passos. El perfil tèrmic de la membrana BNC-G mostra un pas de pèrdua de pes amb temperatures de descomposició inicial i màxima d'uns 125 graus i 233 graus, respectivament, principalment associades a la degradació del glicerol, d'acord amb els resultats anteriors obtinguts en altres llocs amb BNC plastificat. [49]. La segona etapa de pèrdua de pes es produeix a temperatures de descomposició inicial i màxima d'uns 295 graus i 355 graus, respectivament, i s'atribueix a la descomposició de les unitats de glicosil de cel·lulosa [30].

Pel que fa a les membranes que incorporen l'HDE, el pas de pèrdua de pes assignat a la descomposició del glicerol presenta una temperatura màxima de descomposició a ca. 232 graus per a BNC-G-HDE1,224 graus per a BNC-G-HDE1,5,226 graus per a BNC-G-HDE2 i 213 graus per a BNC-G-HDE3. Similar al BNC-G, el segon pas de pèrdua de pes s'observa a temperatures màximes de descomposició d'uns 355 graus C per a BNC-G-HDE1, 353 graus C per a BNC-G-HDE1.5, 343 graus per a BNC-G-HDE2, i 350 graus per a BNC-G-HDE3, a causa de la descomposició de les cadenes polimèriques BNC.dosificació de cistanche tubulosa redditA partir dels termogrames, no va ser possible identificar la pèrdua de pes atribuïda a la descomposició dels compostos fenòlics HDE, que segons la literatura pot ocórrer en el rang de 100-300 grau [54,55]. Tanmateix, donada la baixa relació (<0.1%, w/w)of="" the="" hde="" in="" the="" bnc="" membranes,="" the="" weight="" loss="" associated="" with="" the="" extract="" components="" is="" probably="" not="">

Aquests resultats indiquen que totes les membranes són estables fins a ca. 125 graus, que és comparable amb els resultats reportats anteriorment per a membranes BNC plastificades amb glicerol [49] i és adequat per a l'ús previst com a màscara facial, tenint en compte el seu ús a temperatura corporal.

3.4.Capacitat d'absorció d'humitat

La retenció d'humitat és una propietat molt desitjable de les màscares facials de làmines amb l'objectiu d'evitar la deshidratació de l'estructura polimèrica i assegurar l'adherència de la màscara a la pell durant tot el temps del tractament [24]. Al mateix temps, la inflació de l'estructura nanoporosa del BNC, a causa de la unió a l'aigua, també facilitarà el lliurament dels compostos actius incorporats. Així, es va determinar la capacitat d'absorció d'humitat de les membranes seques preparades per avaluar la seva capacitat per absorbir la humitat ambiental. Per tant, les membranes es van col·locar en un dessecador amb humitat controlada (RH aprox. 52 per cent) a temperatura ambient i es va controlar l'absorció d'humitat al llarg del temps, des de 30 min fins a 48 h (figura 5). El RH d'aproximadament el 52 per cent utilitzat en l'assaig és proper al valor del 45 ± 5 per cent, indicat com a pautes generals per realitzar estudis d'hidratació amb cosmètics hidratants [56].

All the prepared BNC membranes can absorb environmental humidity, showing an incremental uptake over time and reaching a maximum at 48 h, which is in agreement with a previous work with BNC loaded with silk-sericin [24]. As expected, the incorporation of glycerol, a highly hygroscopic compound, resulted in BNC membranes with a higher aptitude to uptake environmental humidity, even for short periods of time, such as 1 h, with BNC-G membranes absorbing 5.3±0.3% of moisture after this time, and pristine BNC absorbing only 1.3±0.2%. Similar behavior was observed for the BNC-Gmembranes loaded with the HDE, presenting a moisture uptake of 4.4± 0.6% for BNC-G-HD,4.4± 0.3% for BNC-G-HDE1.5,4.2±0.3% for BNC-G-HDE2, and 3.9±0.6% for BNC-G-HDE3 after 1 h. The amount of the HDE seems to have no influence on the moisture uptake capacity of the membranes since the differences are not significant(p>0.05). Considering that the time of treatment of a beauty mask is generally between 20 min and 1 h, the capacity of the BNC-G-HDE membranes to rapidly absorb environmental humidity is fundamental to guarantee the adherence of the BNC sheet to the skin during the entire treatment and favor the release of the active compounds. It is also noteworthy that for the short period of 1 h, the moisture uptake capacity of BNC-G-HDE membranes is identical (p>{{0}},05) a l'obtingut per a la màscara BNC comercial (3,2 ± 1,0 per cent).

3.5. En l'activitat química antioxidant

El TPC de l'E.globulus HDE es va determinar mitjançant el mètode Folin-Ciocalteu, que va comptar amb 329 ± 9 mg de GAEg-I d'extracte liofilitzat. Aquest resultat confirma la presència d'un alt contingut de compostos fenòlics en aquest extracte, essent comparable amb els valors de TPC reportats anteriorment per a extractes fenòlics de fulles d'E.globulus (311 ± 20 mg GAEg-Iof extracte sec) [57].

Els compostos fenòlics són ben coneguts per les seves propietats antioxidants resultants de l'eliminació de radicals lliures, que és un dels mecanismes per prevenir l'estrès oxidatiu cel·lular [29]. Per tant, es van avaluar les activitats antioxidants de l'HDE i de les membranes BNC preparades (BNC, BNC-G, BNC-G-HDE1, BNC-G-HDE1.5, BNC-G-HDE2 i BNC-G-HDE3). pel mètode d'eliminació de radicals lliures DPPH (figura 6). L'activitat antioxidant es va controlar fins a 2,5 h, en funció de la durada generalment curta d'aplicació d'una màscara facial i dels procediments descrits en altres llocs [44,58].

La membrana BNC pura no presenta una activitat d'eliminació antiradical considerable, cosa que coincideix amb les dades informades en estudis anteriors [51,59]. Es van obtenir resultats similars per a les membranes BNC-G ja que el glicerol no és un compost antioxidant. Pel que fa a les solucions aquoses HDE, mostren una activitat antioxidant depenent de la dosi, que es pot atribuir al seu contingut en fenòlics, similar als resultats reportats anteriorment per a un extracte aquós de fulles d'E.globulus [57]. L'activitat màxima d'eliminació de DPPH es va assolir al final de 2, 5 h amb la solució HDE3 (7, 5 ug mL-) (75, 1 ± 5, 8 per cent). Aquest resultat indica que l'HDE té una activitat antioxidant més alta en comparació amb un extracte etanòlic de biomassa comercial seca d'E.globulus, que només mostra una activitat eliminadora de DPPH del 65 per cent (a 0,5 h d'incubació) per a una concentració d'extracte. de 250 ug mL-I【37】 Pel que fa a les membranes BNC-G-HDE, els resultats van revelar que totes les membranes mostren activitat antioxidant amb una resposta dependent de la dosi que augmenta amb el temps.Beneficis de salsa cistancheLes activitats màximes d'eliminació de DPPH es van assolir al final de les 2,5 h, amb un 14,2 ± 1,6 per cent, un 28,1 ± 6,3 per cent, un 48,9 ± 6,1 per cent i un 53,3 ± 5,7 per cent per a BNC-G-HDE1, BNC-G-HDE1,5, Membranes BNC-G-HDE2 i BNC-G-HDE3, respectivament. Per tant, els resultats mostren clarament que la incorporació de l'HDE a la xarxa BNC imparteix amb èxit el BNC pur amb activitat antioxidant, similar al que es va aconseguir en treballs anteriors amb extractes de S.striata Boiss [51] o Epilobium Angustifolia L.[60]. ].

These results also demonstrate that the HDE is gradually released from the membranes, and after 2.5 h, the DPPH scavenging activities obtained for all membranes, except for BNC-G-HD3, are identical (p>0.05) als aconseguits per a la solució HDE corresponent. La diferència (pàg<0.05)between bnc-g-hde3="" and="" hde3="" samples="" may="" be="" related="" to="" the="" kinetics="" of="" the="" hde="" release="" from="" the="" membrane.="" these="" are="" promising="" results="" regarding="" the="" use="" of="" these="" membranes="" for="" the="" delivery="" of="" the="" active="" compounds="" of="" the="" hde.="" in="" particular,="" the="" bnc-g-hde2="" membrane="" seems="" preferable="" for="" further="" studies,="" because="" it="" shows="" similar="" results,="" in="" terms="" of="" antioxidant="" activity,="" to="" the="" membrane="" with="" the="" highest="" dose="" of="" hde,="" even="" though="" a="" lower="" dose="" of="" hde="" is="" used,="" which="" is="" especially="" relevant="" when="" future="" scale-up="" is="">

3.6.Avaluació de l'estabilitat de la membrana BNC-G-HDE2 sota emmagatzematge

Se sap que els factors ambientals (per exemple, la temperatura, la llum i l'oxigen) tenen un impacte en l'estabilitat estructural dels compostos fenòlics i en la seva activitat antioxidant 61. La temperatura d'emmagatzematge i la llum es troben entre els factors més reportats associats a la reducció activitat antioxidant d'extractes que contenen compostos fenòlics [62,63]. Per tant, basant-se en les directrius internacionals sobre proves d'estabilitat de productes cosmètics [46], es va realitzar una prova d'estabilitat exploratòria per avaluar els canvis en l'activitat antioxidant de la membrana BNC-G-HDE2 en condicions normals d'emmagatzematge, concretament a 22-25 grau i 52 per cent d'HR (condició I) i en condicions accelerades (és a dir, condicions d'emmagatzematge exagerades), és a dir, a 40 graus i 75 per cent d'HR (condició II) durant 3 mesos.

L'observació de l'aspecte macroscòpic de les membranes (Figura 7) mostra que no hi ha alteracions significatives en la seva homogeneïtat durant els 3 mesos d'emmagatzematge en ambdues condicions d'emmagatzematge.

Results from the antioxidant activity of the BNC-G (control) and BNC-G-HDE2 mem-branes over the 3 months of storage in each condition are depicted in Figure 8. As in the assay of the antioxidant activity of BNC-G-HDE membranes(Section 3.5), the values obtained for the antioxidant activity of BNC-G are not significant. Regarding the BNC-G-HDE2 membrane, when it is stored at 22-25°C and 52% RH (Figure8A), the antioxidant activity is kept unchanged over the entire assay(p>0.05), showing values of 37.0±6.9%in the beginning of the assay and 39.6± 2.4% after 3 months. Similar results were obtained after storage at accelerated conditions(Figure 8B) of 40°C and 75%RH, in which the variation in the antioxidant activity after 1 month (31.7±7.5%)and after 3 months (31.0±5.2%)is not significantly different(p>0.05) a partir de l'inici de l'assaig. Per tant, aquests resultats indiquen que l'activitat antioxidant de BNC-G-HDE2 és estable durant almenys 3 mesos en aquestes condicions d'emmagatzematge, el que significa que no es produeix cap degradació aparent dels compostos fenòlics de l'HDE a les membranes. A més, amb aquests resultats prometedors en condicions accelerades, és previsible que l'estabilitat de les membranes sigui superior a 3 mesos en condicions d'emmagatzematge normals.

3.7. Assajos biològics in vitro

3.7.1. Assaig de citotoxicitat

L'avaluació de la seguretat de les membranes basades en BNC és fonamental per a la seva aplicació com a màscares facials ja que això implica el seu contacte directe amb la pell. Per tant, la citotoxicitat de les membranes BNC-G (per al control) i les quatre membranes BNC-G-HDE es va avaluar mitjançant l'assaig MTT, amb extractes de les membranes, cap a cèl·lules de queratinòcits humans (HaCaT) i fibroblasts de ratolí (NIH/3T3). . Aquestes línies cel·lulars es van seleccionar per ser representatives dels dos tipus de cèl·lules estructurals importants de la pell. Els queratinòcits són les cèl·lules principals de l'epidermis (la capa de la pell més alta), mentre que els fibroblasts formen part de la dermis (segona capa de la pell) [64].

Els resultats obtinguts per a la membrana BNC-G (Figura 9) estan en línia amb la coneguda no citotoxicitat del BNC pur cap a les cèl·lules HaCaT [52,65] i NIH/3T3 [65,66] i del BNC plastificat amb glicerol. sobre cèl·lules HaCaT [39]. Pel que fa als resultats de la citotoxicitat de les membranes BNC carregades amb HDE, es nota que, independentment de la dosi d'HDE, les membranes no tenen cap efecte significatiu sobre la viabilitat de les cèl·lules HaCaT o NIH/3T3. Tots els valors de viabilitat cel·lular obtinguts per a les membranes BNC-G-HDE són superiors al 70% i, per tant, es consideren no citotòxics per a aquestes línies cel·lulars, segons l'estàndard internacional ISO10993-5 per a l'avaluació biològica de dispositius mèdics (Part 5). : Proves de citotoxicitat in vitro). Així, aquests resultats són una confirmació que la incorporació d'aquestes dosis d'E.globulus HDE a BNC és totalment segura per a aplicacions dèrmiques. De fet, aquestes dades coincideixen amb els resultats reportats en altres llocs que mostren la no citotoxicitat d'un extracte etanòlic de la biomassa d'E.globulus (1, 10 i 100 ug ml-1) provat en fibroblasts dèrmics humans normals [37].

3.7.2. Activitat Anti-Senescència

El procés d'envelliment de la pell s'ha associat no només amb alteracions en la composició i la integritat estructural de la matriu extracel·lular dèrmica (ECM) [67] sinó també amb l'augment de cèl·lules senescents a la capa dèrmica [68]. Ara es reconeix que l'acumulació de fibroblasts dèrmics senescents té un paper actiu en el procés d'envelliment de la pell, contribuint a la disminució de la funcionalitat del teixit [69,70].

En aquest sentit, es va avaluar l'activitat antisenescència de la membrana BNC-G-HDE2 cap a fibroblasts de ratolí (línia cel·lular NIH/3T3). La membrana BNC-G-HDE2 va ser seleccionada per a aquesta avaluació perquè, juntament amb BNC-G-HDE3, mostra una de les activitats antioxidants més altes, i com que s'utilitza una menor quantitat d'HDE en el BNC-G-HDE2, és preferible pel que fa a una futura aplicació econòmica.

La senescència cel·lular es va induir amb l'agent genotòxic etopòsid, i es va mesurar l'activitat de -gal, un biomarcador àmpliament utilitzat per a cèl·lules senescents [71]. Segons les dades presentades a la figura 10, ni les membranes BNC-G ni BNC-G-HDE2 activen -gal associat a la senescència de cèl·lules NIH/3T3. Per contra, amb el tractament amb etopòsids, el nombre de cèl·lules NIH/3T3 associades a la senescència (tinció blava) NIH/3T3 augmenta significativament en comparació amb el control (44,1±2,7% versus 8,9±1.0%) . Això també és visible a la morfologia adquirida de les cèl·lules NIH/3T3, que mostra el característic fenotip senescent amb cèl·lules augmentades i aplanades (figura 10A). Notablement, després de 24 h de tractament amb l'extracte BNC-G-HDE2, hi ha una reducció significativa del nombre de cèl·lules senescents NIH/3T3 (32, 2 ± 4, 0 per cent) (Figura 10B). Aquest efecte positiu segurament es deu als components de l'HDE, és a dir, els compostos fenòlics que s'alliberen de la membrana. De fet, ja s'ha demostrat que els compostos fenòlics tenen efectes beneficiosos en la prevenció de la senescència cel·lular mitjançant la supressió de la -gal associada a la senescència, principalment pel seu paper conegut com a inhibidors del dany oxidatiu [72,73]. Altres exemples en línia amb els resultats obtinguts aquí són les troballes sobre els efectes de l'extracte de fulla de Sonchus oleraceus L. (que conté àcid caftàric, àcid clorogènic i àcid chicòric) sobre la senescència cel·lular induïda per H2O2-en WI{{45 }} cèl·lules de fibroblast diploides de pulmó humà [74], o de fenols d'oliva (hidroxitirosol i oleuropeïna) sobre fibroblasts dèrmics i pulmonars humans pre-senescents [72]No obstant això, pel que sabem, aquesta és la primera vegada que s'ha produït aquesta activitat. informat per a membranes BNC enriquides amb extractes de plantes. Per tant, aquests són resultats prometedors que suggereixen el potencial considerable de les membranes BNC-G-HDE desenvolupades per a aplicacions de cura de la pell anti-envelliment.

4. Conclusions

Amb l'objectiu de desenvolupar un material totalment de base biològica amb propietats mecàniques bioactives i adequades per a possibles aplicacions de cura de la pell anti-envelliment, membranes BNC carregades amb glicerol i diferents dosis (1-3 ug cm-2) d'un extracte aquós d'E.globulus derivat de la hidrodestil·lació (HDE) de fulles que contenen compostos fenòlics (329 ± 9 mg GAE gI d'extracte liofilitzat) mitjançant el mètode d'impregnació. Totes les membranes BNC-G-HDE presentaven un comportament mecànic resistent però encara elàstic, similar (tant en estat sec com humit) al d'una màscara facial BNC comercial. La capacitat de les membranes BNC-G-HDE per absorbir la humitat ambiental era superior a la del BNC pur i també comparable a la de la màscara BNC comercial. Es va trobar que les membranes BNC-G-HDE eren tèrmicament estables fins a uns 125 graus. A més, la incorporació de l'HDE confereix una activitat antioxidant depenent de la dosi (assaig d'eliminació de radicals DPPH) al BNC. L'estabilitat de l'activitat antioxidant de la membrana amb 2 ug cm-2d'HDE es va demostrar després d'un emmagatzematge durant 3 mesos a la normalitat esperada (22-25 grau /52 per cent d'HR) i accelerada (40C/75 per cent d'HR). ) condicions d'emmagatzematge. Es va demostrar que totes les membranes BNC-G-HDE no eren citotòxiques cap a les línies cel·lulars HaCaT i NIH/3T3. A més, es va demostrar que el tractament amb membrana BNC-G-HDE2 provoca una reducció del percentatge de cèl·lules senescents (aproximadament un 32 per cent) en comparació amb l'observat en cèl·lules tractades només amb etopòsid (aproximadament un 44 per cent). Les troballes aquí descrites destaquen clarament el potencial de les membranes BNC preparades carregades amb HDE com a màscares facials de fulla robustes per a la cura de la pell anti-envelliment.

Aquest article està extret de Materials 2022, 15, 1982. https://doi.org/10.3390/ma15051982 https://www.mdpi.com/journal/materials