Boldine, un alcaloide de Peumus Boldus Molina, indueix una vasodilatació depenent de l'endoteli al ronyó de rata perfusa: implicació d'òxid nítric i Ca2 plus de petita conductància - canal K més activat

Resum

La boldina, 2,9-dihidroxi-1,10-dimetoxiaporfina, és el principal alcaloide que es troba a les fulles i l'escorça de Peumus boldus Molina. En els últims anys, la boldina ha demostrat diverses propietats farmacològiques que beneficien la funció endotelial, el control de la pressió arterial i redueixen el dany en les malalties renals. Tanmateix, els efectes i els mecanismes vasodilatadors renals segueixen sent desconeguts. Aquí, es van utilitzar ronyons de rata perfusos per estudiar la capacitat de la boldina per induir la vasodilatació de les artèries renals. Per això, es van contractar preparacions de ronyó esquerre amb i sense endoteli funcional amb fenilefrina i van rebre injeccions de boldina de 10 a 300 nmol. (Les preparacions es van perfondre durant 15 min amb fenilefrina més L-NAME, indometacina, KCl, tetraetilamoni, glibenclamida, apamina, caribdotoxina o iberiotoxina. En dosis de 30, 100 i 300 nmol, la boldina va induir una endodependència de la dosi i de la dosi). efecte relaxant sobre el llit vascular renal. No es van observar efectes vasodilatadors en preparats sense endoteli funcional. Si bé la inhibició de l'enzim ciclooxigenasa mitjançant l'addició d'indometacina no va provocar cap canvi en l'acció vasodilatadora de la boldina, l'inhibidor no selectiu de l'òxid nítric sintasa L -NAME va impedir totalment l'acció vasodilatadora de la boldina a totes les dosis provades (e La perfusió amb KCl o tetraetilamoni (bloquejador no selectiu de canals K plus) també va abolir l'efecte vasodilatador de la boldina, indicant la participació dels canals K plus en l'acció renal de la boldina. (e perfusió amb glibenclamida (bloquejador selectiu de canals K més sensible a l'ATP), iberiotoxina (bloqueig selectiu de Ca2 d'alta conductivitat més K activat més bloquejador de canals) i caribdotoxina (bloqueig selectiu de Ca2 d'alta i conductivitat intermèdia més K activat més bloquejador de canals). ) no va modificar l'acció vasodilatadora de la boldina. D'altra banda, la perfusió amb apamina (Ca2 selectiu de petita conductància més K activat més bloquejador de canals) va impedir completament l'acció vasodilatadora de la boldina a totes les dosis provades. En conjunt, el present estudi va mostrar les propietats vasodilatadores renals de la boldina, un efecte que depèn de la generació d'òxid nítric i de l'obertura d'un canal de K plus activat amb Ca2 més de conductivitat petita.

Feu clic aquí per obtenir els avantatges de Cistanche

Introducció

Peumus boldus Molina, conegut popularment com "boldo" o "negreta", és una espècie d'arbre pertanyent a la família de les Monimiaceae i originària del centre i sud de Xile, on es troba abundantment. A més de l'ús popular per al tractament de diverses malalties, àmpliament conegudes per trastorns gàstrics i hepàtics, les preparacions a base de boldo es descriuen en diversos textos farmacognòstics oficials, com ara les farmacopees oficials al Brasil, Xile, Alemanya, Portugal, Romania, Espanya i Suïssa [1, 2].

Els principis actius de Boldo s'han descrit en olis essencials (ascaridol, cineol, èsters, aldehids, cetones i hidrocarburs), alcaloides (boldina, iso boldina i altres), glicòsids i altres (flavonoides, àcid cítric, goma, sucres, tanins). , minerals, lípids, etc.). (e Les escorces són més riques en alcaloides [3]. La majoria dels estudis farmacològics del boldo descriuen les activitats observades per a l'alcaloide boldina, definit com el component principal del te boldo [4]. La concentració d'alcaloides a les fulles de boldo s'estima en 0,4 per cent, i la concentració de boldine pot arribar a més del 12 per cent [5].

De fet, s'ha atribuït una àmplia gamma d'efectes biològics a la boldine. S'ha demostrat que Boldine posseeix activitat antioxidant i efectes antiinflamatoris, per això sovint s'estudia per a malalties associades a l'estrès oxidatiu. Per exemple, s'ha descrit l'efecte protector de la boldina sobre el dany mitocondrial oxidatiu en rates diabètics induïdes per estreptozotocina [6], i la reducció de l'estrès oxidatiu indueix les seves propietats gastroprotectores [7]. Pel que fa a l'acció farmacològica sobre els sistemes cardiovascular i renal per controlar la hipertensió i patologies com la diabetis, els estudis han demostrat l'acció de la boldina en la millora de la funció endotelial en ratolins diabètics mitjançant la inhibició de l'estrès oxidatiu vascular i la disfunció endotelial [8]. A més, els estudis han demostrat que el tractament amb boldine exerceix efectes protectors endotelials en rates espontàniament hipertenses mitjançant la inhibició de la producció de superòxid mediada per NADPH [9]. Boldine va millorar el dany renal en la hipertensió renovascular induïda pel model Goldblatt de dos ronyons d'un clip [10] i va mostrar una acció renoprotectora en la diabetis induïda per estreptozotocina en rates [11].

Malgrat l'ús generalitzat de l'alcaloide boldina, el seu mecanisme d'acció sobre la funció renal encara no està clar. Tenint en compte la necessitat de nous enfocaments per al tractament de la hipertensió o contribuir a les accions renoprotectores contra la hipertensió, aquest estudi pretenia investigar l'acció vasodilatadora de la boldine mitjançant l'ús d'un model de ronyó de rata aïllat i perfusat per verificar la hipòtesi que la boldina provoca la relaxació directa de les artèries renals. . (e També es van explorar els mecanismes responsables de les accions vasodilatadores renals.

Els efectes de Cistanche

Materials i mètodes

1. Drogues.

Boldine (més o igual al 98 per cent de puresa) es va comprar a Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, EUA). L'heparina es va obtenir de Crist'alia, (São Paulo, SP, Brasil). La xilazina i el clorhidrat de ketamina es van obtenir de Vetec (Vetec, Duque de Caxias, RJ, Brasil). Clorur d'acetilcolina, apamina, caribdotoxina, dextrosa, glibenclamida, iberiotoxina, indometacina, clorur de tetraetilamoni (TEA), èster metílic de Nω-nitro-L-arginina (L-NAME), fenilefrina, desoxicolat de sodi, NaCl, NaHCO3K2Cl, MCO3Cl, , KH2PO4 i àcid etilendiaminotetraacètic (EDTA) es van comprar a Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, EUA).

2. Animals.

Es van obtenir rates Wistar mascles, de 3 mesos d'edat, de la instal·lació d'animals de la Universitat de Vale do Itaja´ı (UNIVALI). (Els animals es van mantenir a temperatura ambient controlada (22 ± 2 graus), 12-hora de cicle de llum/foc, amb accés gratuït a aigua i menjar. Totes les metodologies i procediments utilitzats aquí van ser presentats i aprovats pel Comitè d'Ètica de Ús d'animals d'UNIVALI, amb el número d'autorització 022/19p, i seguint totes les recomanacions del National Control Council of Animal Experimentation.

3. Aïllament i perfusió del ronyó de rata.

Per evitar l'aparició de coàguls al llit vascular renal durant el procediment d'aïllament i perfusió renal, els animals van ser tractats prèviament amb heparina (30 UI, per via intraperitoneal), de 5 a 10 min abans. l'administració de l'agent anestèsic. (Les rates es van anestesiar després amb 80 mg/kg de ketamina més 10 mg/kg de xilazina per via intraperitoneal. Després d'obtenir una anestèsia profunda, es va realitzar una laparotomia, permetent l'accés a totes les vísceres de l'animal. (l'intestí es va desplaçar cap al costat dret, permetent la visualització del ronyó esquerre i la dissecció de l'aorta abdominal.Durant aquests procediments, les vísceres, especialment el ronyó esquerre, es mantenien humides amb una gasa quirúrgica empapada en solució salina fisiològica.Amb l'ajuda d'un fil quirúrgic es lligava l'urètre esquerre. , evitant el flux urinari i, en conseqüència, la producció d'orina pel ronyó.Es va col·locar un altre cable quirúrgic a l'artèria aorta abdominal, entre les artèries renals dreta i esquerra, per dirigir el flux sanguini només cap al costat esquerre.Flux sanguini a l'aorta l'artèria es va interrompre per sota de l'artèria renal dreta (en, es va fer una petita incisió a l'artèria aorta que permetia la inserció d'un catèter dirigit a l'artèria renal esquerra i fixat a l'artèria aorta amb fils quirúrgics. (Es va lligar el fil quirúrgic col·locat sobre l'aorta abdominal, interrompent el flux renal, i es va activar una bomba de perfusió peristàltica, iniciant el procés de perfusió. En el procés de perfusió contínua, es va extreure el ronyó de la cavitat abdominal i es va col·locar en una placa per eliminar el greix i la glàndula suprarenal adjacents, per evitar la influència de la glàndula suprarenal sobre el llit vascular renal durant el període d'experimentació (en, el ronyó es va col·locar en una cambra que contenia 100 ml de solució salina fisiològica (PSS; 119 mM NaCl, 4,7). mM KCl, 2,4 mM CaCl2, 1,2 mM MgSO4, 25,0 mM NaHCO3, 1,2 mM KH2PO4, 11,1 mM dextrosa i 0,03 mM EDTA) i acoblat al sistema de perfusió, mantingut a una temperatura de 37 graus O2 i airejat constantment al 95 per cent. 5 per cent de CO2, amb un flux constant de 4 ml/min. Es va respectar un període de 30 min abans d'iniciar l'avaluació experimental. (e l'enregistrament de la pressió de perfusió es va realitzar mitjançant un transductor de pressió acoblat al sistema de perfusió, connectat a un polígraf informatitzat). amb programari d'integració específic (sistema PowerLab i programari Chart 7.1, ADInstruments, Castle Hill, Austràlia). A la figura 1 es mostra un diagrama de la configuració experimental del ronyó perfós aïllat.

4. Avaluació dels efectes i mecanismes de Boldine sobre les artèries renals.

Després d'un temps d'estabilització de 30 min, es va verificar la integritat del teixit amb una injecció en bolus de 120 mmol de KCl. (La integritat de l'endoteli es va comprovar 20 minuts més tard amb l'addició de fenilefrina (300 nmol) seguida d'acetilcolina (300 nmol). Es va esperar un període de 20 minuts més, i després les preparacions es van perfondre contínuament amb PSS que contenia fenilefrina (3 µM) , que és suficient per induir un augment sostingut de la pressió de perfusió renal Després de l'estabilització de l'augment de la pressió de perfusió, els preparats van rebre injeccions en bolus que contenien 10, 30, 100 i 300 nmol de boldina, i es va avaluar la reducció de la pressió de perfusió. (Les injeccions en bolus de les substàncies provades es van fer en un volum final de 10 o 30 ul mitjançant un accés proper a la preparació, amb un interval de temps mínim de 3 min entre dosis. Algunes preparacions renals es van perfondre amb PSS que contenien desoxicolat de sodi (1,8). mg/ml) durant 30 s per eliminar químicament l'endoteli de les artèries renals. Després de la infusió de desoxicolat de sodi, es va perfondre PSS regular durant 40 min per a l'estabilització (la manca de vasodilatació va confirmar l'eliminació de l'endoteli després d'una injecció en bolus d'acetilcolina). Es va generar una corba dosi-resposta (30, 100 i 300 nmol) de boldina per a preparacions sense endoteli. Les respostes es van registrar 10 s després de l'administració. Es van registrar els canvis en la pressió de perfusió (en mmHg) i es van comparar entre grups.

En un altre conjunt experimental, utilitzant preparats amb un endoteli intacte, els preparats es van perfondre amb PSS que contenia 3 μM de fenilefrina més els següents agents: 100 μML-NAME (inhibidor no selectiu de l'òxid nítric sintasa), 1 μM d'indometacina (inhibidor de la ciclooxigenasa no selectiu), mM KCl (despolarització mediada per K plus), 10 mM TEA (bloquejador de canals de potassi inespecífic), 10 μM de glibenclamida (bloquejador selectiu de canals K més sensible a l'ATP), apamina 10 nM (bloqueig selectiu de canals de K més de conductivitat petita activat) ), iberiotoxina (Ca2 selectiu d'alta conductància més K activat més bloquejador de canals), caribdotoxina 1 nM (Ca2 selectiu d'alta i conductivitat intermèdia més K activat més bloquejador de canals). Després de 15 min de perfusió, es va injectar boldine (30, 100 i 300 nmol). La seva capacitat per reduir la pressió de perfusió es va comparar amb els resultats obtinguts amb els preparats de control perfosats només amb el vehicle.

5. Anàlisi estadística.

els resultats s'expressen com a mitjana ± error estàndard de la mitjana de sis preparacions de cada grup. (e Les anàlisis estadístiques es van realitzar mitjançant una anàlisi de variància unidireccional (ANOVA) seguida de la prova post hoc de Bonferroni. Els valors de p < 0,05 es van considerar estadísticament significatius. (Les anàlisis estadístiques es van realitzar mitjançant el GraphPad Prism versió del programari 6.00 per a Windows (GraphPad, La Jolla, CA, EUA).

Cistanche en pols

Resultats i discussió

L'efecte vasodilatador sobre les artèries renals mitjançant ronyons de rata aïllats i perfusos ha estat una estratègia molt utilitzada per avaluar les accions hemodinàmiques de compostos aïllats, amb una aproximació més propera al mecanisme d'acció, donada la capacitat d'avaluar diferents dianes moleculars [12]. En el present estudi, l'administració de boldina (30, 100 i 300 nmol) al llit vascular del ronyó va induir un resultat dilatador depenent de la dosi (Figura 2(c)), responent així a la hipòtesi inicial del treball que es va discutir. la possibilitat que la boldina tingui una acció vasodilatadora al llit arterial renal. (és el primer estudi que demostra els efectes relaxants de la boldina sobre el llit vascular renal. Tanmateix, l'efecte relaxant de la boldina sobre altres teixits vasculars es va descriure per primera vegada l'any 1996, quan Chen et al. van demostrar l'acció vasodilatadora d'aquest alcaloide en rata aïllada). aorta toràcica [13].

Figura 2: vasorelaxació induïda depenent de la dosi de Boldine en ronyons aïllats i perfusos. (a) Estructura molecular de la boldina. (b) Registre de traça de la pressió de perfusió renal que mostra els efectes de l'acetilcolina (ACh) i la boldina. (c) Efectes de la boldina sobre la pressió de perfusió en ronyons aïllats intactes amb endoteli. (d) Efectes de la boldina sobre les preparacions d'endoteli intacte (End plus) i denudes d'endoteli (End-). (Les dades s'expressen com la mitjana ± SEM de sis experiments. ∗p <0.05, en comparació amb la pressió de perfusió després de l'administració de PSS (identificada com el nombre 0); # p <0, 05, en comparació amb la dosi anterior de boldina (a) o preparacions denudes d'endoteli (b).

A partir d'aquest resultat positiu, es van fer investigacions sobre la implicació de l'endoteli i els mecanismes subjacents relacionats amb les accions relaxants. Tal com es mostra a la figura 2 (d), els efectes de la boldina en els preparats administrats prèviament amb desoxicolat de sodi (és a dir, per eliminar l'endoteli) estaven completament absents (figura 2 (d)), cosa que indica que l'endoteli funcional és essencial per al seu vasodilatador. acció. En conseqüència, es van prevenir els efectes de totes les dosis de boldina en preparats que es van tractar amb l'inhibidor no selectiu d'òxid nítric sintasa L-NAME (Figura 3 (a)), mentre que en els preparats perfusos amb l'inhibidor no selectiu de l'enzim ciclooxigenasa indometacina, els efectes vasorelaxants. de boldina es va mantenir sense canvis (figura 3 (b)), cosa que indica que les propietats relaxants de la boldina depenent de l'endoteli depenien de la generació d'òxid nítric (NO) i independents de la producció de prostanoides.

Figura 3: Paper de l'òxid nítric i els prostanoides en els efectes vasodilatadors de la boldina. Efectes de la boldina sobre preparats renals intactes amb endoteli que es van perfondre amb (a) L-NAME o (b) indometacina. Les dades s'expressen com la mitjana ± SEM de sis experiments. #p < 0.05, en comparació amb els preparats perfusos només per a vehicles.

Cistanche tubulosa

El principal factor relaxant derivat de l'endoteli és el NO, que es considera un dels principals mediadors dels processos cel·lulars. Als vasos sanguinis, el NO es produeix a les cèl·lules endotelials a partir de la L-arginina, amb una acció vasodilatadora. Es difon a les cèl·lules musculars llises interactuant amb l'enzim guanilat ciclasa soluble fent-lo actiu, provocant la formació de monofosfat de guanosina cíclic, que resulta en la relaxació de la cèl·lula muscular llisa vascular [14, 15]. Tenint en compte que l'eliminació de l'endoteli o la supressió de la producció de NO mitjançant l'administració de L-NAME van prevenir completament els efectes vasculars de la boldina, els nostres resultats suggereixen que l'endoteli va realitzar una funció crucial en la disminució de la pressió de perfusió induïda per la boldina. De fet, les accions de la boldina sobre l'endoteli vascular ja s'han descrit a la literatura. El tractament amb Boldine va millorar la relaxació màxima de l'acetilcolina en l'aorta de rates hipertenses espontàniament [9], va millorar la relaxació dependent de l'endoteli a les aortes de rates diabètics tractades amb estreptozotocina [16] i va millorar la relaxació dependent de l'endoteli a les aortes de ratolins diabètics [17] ].

Figura 4: Efecte dels canals de potassi sobre l'efecte vasodilatador de la boldina. Efectes de la boldina sobre preparats renals intactes amb endoteli que es van perfondre amb (a) KCl o (b) TEA. (Les dades s'expressen com la mitjana ± SEM de sis experiments. #p <0.05, en comparació amb les preparacions perfuses només amb vehicles.

Per verificar les accions relacionades amb els canals K plus, les preparacions es van perfondre amb una solució nutritiva a la qual es va afegir KCl 40 mM, que indueix la despolarització mediada per K plus, i TEA, un bloquejador no selectiu del canal K plus (Figures 4 (a) i 4(b), respectivament). Es va observar que ambdós tractaments van bloquejar els efectes vasorelaxants induïts per la boldina, cosa que suggereix un paper predominant dels canals K plus en els efectes vasodilatadors d'aquest compost. Els canals K plus són estructures de proteïnes presents en diferents tipus de cèl·lules i funcionen com a porus a les membranes que permeten el pas del K plus. (Es divideixen en 4 classes principals: canals K més dependents de la tensió, canals K més sensibles a l'ATP, canals K plus rectificadors cap a dins i canals K més activats amb Ca2 més [18-20]. (e Tractament amb glibenclamida, un bloquejador del canal K més sensible a l'ATP, va mantenir l'acció vasorelaxant de la boldina sense canvis en totes les dosis utilitzades (Figura 5 (a)). De la mateixa manera, la perfusió amb caribdotoxina, un canal selectiu de conductivitat alta i intermèdia de Ca2 més activat amb K plus. bloquejador (Figura 6(a)), i la iberiotoxina, un bloquejador de canals de Ca2 més K activat i d'alta conductància selectiu (Figura 6(b)), no va modificar l'acció vasodilatadora de la boldina. D'altra banda, la perfusió amb L'apamina, un bloquejador selectiu de canals K més activat amb Ca2 més de conductivitat petita, va impedir completament l'acció vasodilatadora de la boldina a totes les dosis provades (figura 5 (b)), cosa que indica que aquest subtipus de canal K plus sembla ser crucial per a les accions relaxants. En resum, tenint en compte que els objectius aigües avall de la via de l'òxid nítric als vasos inclouen l'obertura de canals K més [21, 22], aquest conjunt de resultats suggereix que la vasodilatació depenent de l'endoteli mediada per la boldina a les artèries renals depèn de l'obertura de canals de Ca2 més K plus de conductància petita induïts per l'òxid nítric a les cèl·lules musculars llises.

Figura 5: Efecte dels bloquejadors del subtipus del canal de potassi sobre l'efecte vasodilatador de la boldina. Efectes de la boldina sobre preparats renals intactes amb endoteli que es van perfondre amb (a) glibenclamida o (b) apamina. (Les dades s'expressen com la mitjana ± SEM de sis experiments. #p <0.05, en comparació amb les preparacions perfuses només amb vehicles.

Figura 6: Efecte dels bloquejadors del subtipus del canal de potassi sobre l'efecte vasodilatador de la boldina. Efectes de la boldina sobre preparats renals intactes amb endoteli que es van perfondre amb (a) caribdotoxina o (b) iberiotoxina. (Les dades s'expressen com la mitjana ± SEM de sis experiments.

Cal destacar que, en els darrers anys, s'han estudiat nombrosos compostos aïllats de plantes medicinals per les seves accions renals, revelant importants accions vasodilatadores, diürètiques, antiurolítices i protectores contra el dany hipertensiu. Nothofagin, un mono-C-glicòsid de 4,2′,4′,6′-tetrahidroxi-dihidrochalcona que es troba a les fulles de Leandra dasytricha, va demostrar la capacitat d'induir diüresi [23], renoprotecció [24], vasodilatació [12] i efecte hipotensiu [25]. Diferents compostos de les classes de xantona aïllats de les branques de Garcinia achachairu van revelar accions diürètiques agudes [26, 27], efectes diürètics i renoprotectors prolongats [28] i propietats antiurolítices [29]. A més, els flavonoides glicosilats obtinguts de les fulles de Bauhinia forficata van revelar efectes vasodilatadors [30], diürètics i protectors renals [31].

pastilles de Cistanche

No obstant això, tot i que els resultats aquí descrits apunten sens dubte a la participació dels canals de Ca2 més K més activats en els efectes renals induïts per la boldina, calen estudis addicionals per investigar altres dianes moleculars i subtipus de canals utilitzant diferents enfocaments combinats d'inhibidors. A més, una altra limitació important de l'estudi és que no hem pogut explorar el receptor implicat en l'efecte vasodilatador de la boldina, que encara s'ha d'estudiar en el futur. Tenint en compte les accions ja descrites a la literatura per a aquest alcaloide, aquest estudi afegeix sobre l'efecte vasodilatador renal, contribuint a una millor comprensió del potencial de la boldina per ser utilitzada com a farmacoteràpia o suplement dietètic.

Referències

[1] M. d. F. Agra, PF d. Freitas, i JM Barbosa-Filho, "Sinopsi de les plantes conegudes com a medicinals i tòxiques al nord-est del Brasil", Revista Brasileira de Farmacognosia, vol. 17, núm. 1, pàgs. 114–140, 2007.

[2] MGL Brandão, GP Cosenza, RA Moreira i RLM Monte-Mor, "Plantes medicinals i altres productes botànics de la farmacopea oficial brasilera", Rev Bras Farmacogn, vol. 16, pàgines 408–420, 2006.

[3] C. Viegas, VS Bolzani, J. Eliezer i EJ Barreiro, "(e natural products and the modern medicinal chemistry", Quimica Nova, vol. 29, núm. 2, 2006.

[4] ALTG Ruiz, D. Tafarello, VHS Souza i JE Carvalho, "Farmacologia i toxicologia de Peumus boldus i Baccharis genistelloides", Rev. bras. Farmacognòsia. vol. 18, núm. 2, 2008.

[5] P. O'Brien, C. Carrasco-Pozo i H. Speisky, "Boldine and its antioxidant or health-promoting properties", Interaccions químiques i biològiques, vol. 159, pàgs. 1–17, 2006.

[6] YY Jang, JH Song, YK Shin, ES Han i CS Lee, "Efecte protector de la boldina sobre el dany mitocondrial oxidatiu en rates diabètics induïdes per estreptozotocina", Recerca farmacològica, vol. 42, núm. 4, pàgs. 361–371, 2000.

[7] T. Boeing, LNB Mariano, AC Dos Santos, et al., "Efecte gastroprotector de l'alcaloide boldine: implicació de grups sulfhidrils no proteics, prostanoides i reducció de l'estrès oxidatiu", Interaccions química-biològiques, vol. 327, ID d'article 109166, 2020.

[8] YS Lau, WC Ling, D. Murugan i MR Mustafa, "Boldine millora l'estrès oxidatiu vascular i la disfunció endotelial", Journal of Cardiovascular Pharmacology, vol. 65, núm. 6, pàgines 522–531, 2015.

[9] Y.-S. Lau, A. Machha, FI Achike, D. Murugan i MR Mustafa, "(e aporfina alcaloide boldine millora la funció endotelial en rates espontàniament hipertenses", Experimental Biology and Medicine, vol. 237, núm. 1, pàg. 93–98. , 2012.

[10] GI G´omez i V. Velarde, "Boldine millora el dany renal en el model Goldblatt 2K1C evitant l'augment de TGF-", International Journal of Molecular Sciences, vol. 19, núm. 7, pàg. 1864, 2018.

[11] R. Hern´andez-Salinas, AZ Vielma, MN Arismendi, MP Boric, JC S´aez i V. Velarde, "Boldine prevents renal alterations in diabetic rates", Journal of Diabetes Research, vol. 2013, ID d'article 593672, 2013.

[12] AAM Marques, CHF da Silva, P. de Souza, et al., "L'òxid nítric i els canals K plus d'alta conductància activats amb Ca2 més medien la vasodilatació dependent de l'endoteli induïda per nothofagina al ronyó de rata perfusa", Chemico- Interaccions biològiques, vol. 327, ID d'article 109182, 2020.

[13] KS Chen, FN Ko, CM Teng i YC Wu, "Accions antiplaquetàries i vasorelaxants d'alguns aporfinoides", Planta Medica, vol. 62, núm. 2, pàgs. 133–136, 1996.

[14] GA Shiekh, T. Ayub, SN Khan, R. Dar i KI Andrabi, "Nivell de nitrat reduït en individus amb hipertensió i diabetis", Journal of Cardiovascular Disease Research, vol. 2, no. 3, pàgines 172–176, 2011.

[15] ES Underbakke, AT Iavarone, MJ Chalmers, et al., "Nítric oxide-induced conformational changes in soluble guanylate cyclase", Structure, vol. 22, núm. 4, pàgines 602–611, 2014.

[16] YS Lau, XY Tian, ​​Y. Huang, D. Murugan, FI Achike i MR Mustafa, "Boldine protegeix la funció endotelial en l'estrès oxidatiu induït per la hiperglucèmia mitjançant un mecanisme antioxidant", Biochemical Pharmacology, vol. 85, núm. 3, pàgines 367–375, 2013a.

[17] YS Lau, XY Tian, ​​MR Mustafa, et al., "Boldine millora la funció endotelial en la mort/desaparició diabètica mitjançant la inhibició de la cascada d'estrès oxidatiu BMP4-mediada per angiotensina II", British Journal of Pharmacology, vol. . 170, núm. 6, pàgines 1190– 1198, 2013b.

[18] M. Baranowska, H. Kozłowska, A. Korbut i B. Malinowska, "Canals de potassi als vasos sanguinis: el seu paper en la salut i la malaltia", Postepy Higieny I Medycyny Doswladczalnej, vol. 61, pàgines 596–605, 2007.

[19] WF Jackson, "Canals de potassi en la microcirculació perifèrica", Microcirculation, vol. 12, núm. 1, pàgs. 113–127, 2005.

[20] BF Palmer i DJ Clegg, "Fisiologia i fisiopatologia de l'homeòstasi del potassi", Advances in Physiology Education, vol. 40, no. 4, pàgines 480–490, 2016.

[21] SL Archer, JM Huang, V. Hampl, DP Nelson, PJ Shultz i EK Weir, "L'òxid nítric i el cGMP causen vasorelaxació mitjançant l'activació d'un canal K sensible a la charibdotoxina per la proteïna quinasa dependent de cGMP", Proceedings of the Acadèmia Nacional de Ciències, vol. 91, núm. 16, pàgines 7583–7587, 1994.

[22] VM Bolotina, S. Najibi, JJ Palacio, PJ Pagano i RA Cohen, "L'òxid nítric activa directament els canals de potassi dependents del calci al múscul llis vascular", Nature, vol. 368, núm. 6474, pàgines 850–853, 1994.

[23] CLB de Almeida, T. Boeing, LB Somensi, et al., "Diuretic, natriuretic and potassium-sparing effect of nothofagin isolated from Leandra dasytricha (A. Gray) Cogn. leaves in normotensive and hypertensive rates", Chemico- Interaccions biològiques, vol. 268, pàgines 103–110, 2017.

[24] CLB de Almeida, V. Cechinel-Filho, T. Boeing et al., "Efecte diürètic i saluretic prolongat de la nothofagina aïllada de Leandra dasytricha (A. Gray) Cogn. fulles en rates normotenses i hipertenses: paper del sistema antioxidant i protecció renal", Interaccions química-biològiques, vol. 279, pàgines 227–233, 2018.

[25] CH da Silva, RA Palozi, P. de Souza, et al., "La via de senyalització d'òxid nítric/cGMP i els canals de potassi contribueixen als efectes hipotensius de la nothofagina", Minerva Cardioangiologica, vol. 68, núm. 6, pàgines 602–608, 2020.

[26] LN Bolda Mariano, T. Boeing, R. d. CMV d. AF da Silva et al., "1,3,5,6-Tetrahidroxixantona, una xantona natural, indueix la diüresi i saluta en rates normotenses i hipertenses", Interaccions química-biològiques, vol. 311, ID d'article 108778, 2019.

[27] LN Bolda Mariano, T. Boeing, V. Cechinel-Filho, R. Niero, L. Mota da Silva i P. de Souza, "(e efectes diürètics aguts amb dosis baixes de xantones prenilades naturals en rates, " European Journal of Pharmacology, vol. 884, Article ID 173432, 2020.

[28] LN Bolda Mariano, T. Boeing, V. Cechinel Filho, et al., "Efectes diürètics i renoprotectors prolongats d'una xantona obtinguda a partir de Garcinia achachairu rusby en rates normotenses i hipertenses", Complement Alternative Medicine basat en Evid, vol. 2021, ID d'article 5510053, 9 pàgines, 2021.

[29] LNB Mariano, T. Boeing, V. Cechinel Filho, R. Niero, L. Mota da Silva i P. de Souza, "1,3,5,6-tetrahydroxyxanthone promos diuresi, renal protection and propietats antiurolítices en rates normotenses i hipertenses", Journal of Pharmacy and Pharmacology, vol. 73, núm. 5, pàgines 700–708, 2021.

[30] CC Cechinel-Zanchett, R. d. CMV d. AF da Silva, A. Tenfen, et al., "L'enllaç Bauhinia forficata, una planta medicinal brasilera que s'utilitza tradicionalment per tractar trastorns cardiovasculars, exerceix una vasorelaxació independent i dependent de l'endoteli a l'aorta toràcica de rates normotenses i hipertenses", Journal of Ethnopharmacology, vol. . 243, pàg. 112118, 2019.

[31] CC Cechinel-Zanchett, LN Bolda Mariano, T. Boeing et al., "Efecte protector diürètic i renal de kaempferol 3- O-Alpha-l-rhamnoside (afzelin) en rates normotenses i hipertenses", Journal de Productes Naturals, vol. 83, núm. 6, pàgines 1980–1989, 2020.

Priscila de Souza , 1 Rita de C´assia Vilhena da Silva,1 Luisa Mota da Silva,1 Viviane Miranda Bispo Steimbach,1 Karyne Garcia Tafarelo Moreno,2 i Arquimedes Gasparotto Junior 2

1 Programa de Postgrau en Ciències Farmacèutiques, Nucli d'Investigacions Químiques i Farmacèutiques (NIQFAR), Universitat de Vale do Itaja´ı, Itaja´ı, SC, Brasil

2 Laboratori d'Electrofisiologia i Farmacologia Cardiovascular, Facultat de Ciències de la Salut, Universidade Federal da Grande Dourados, Dourados, Mato Grosso do Sul, Brasil