Resultats
Regla de fragmentació massiva de glicòsids feniletanoides i iridoides
Els glucòsids feniletanoides són els principals constituents químics de la CD. Es van prendre les solucions estàndard d'isoacteòsid, cistàsid F, tableside A, equinacòsid, acteòside i 2'-actylactéeoside, seguides de proporcionar un nivell diferent d'energies de col·lisió (taula 1) i després es van obtenir els mapes MS2 corresponents (Fig. 1). .
Per a més informació:
david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501
L'anàlisi espectromètrica de masses va revelar que els glicòsids feniletanoides tenen patrons de fragmentació de l'espectre de masses similars, les vies d'escissió en el mode d'ions negatius inclouen principalment (1) Escissió de l'enllaç èster: pèrdua del grup cafeoil neutre (C9H3O6, 162,03) i del grup acetil neutre (C2H2O). 42.00); (2) Escissió glicosídica: pèrdua de residus de ramnosa neutres (C6H10O4, 146,05) i de residus de glucosa neutres (C6H10O5, 162,05). A partir de l'espectrometria de masses d'alta resolució, es podrien distingir el cafeoil (162.03) i el residu de glucosa (162.05).
Es van prendre solucions estàndard d'ajugol, catalpol, àcid tenpòsid, genipòsid i 8-epideoxilogànic d'iridoides, seguides de proporcionar diferents energies de col·lisió i es van obtenir els mapes MS2 corresponents (Fig. 2).
Els glicòsids iridoides tenen patrons de fragmentació de l'espectre de masses similars, les vies de divisió en el mode d'ions negatius inclouen principalment (1) Escissió glicosídica: pèrdua de residu de glucosa neutre (C6H10O5, 162,05); (2) Pèrdua de CO2 neutre (43,99) i H2O (18,01).
Identificació dels compostos en extractes de CD, CD-NP i CD-HP
Anàlisi UPLC-QTOF-MSE
Es va dur a terme l'optimització de les condicions cromatogràfiques. A continuació, es van avaluar els compostos de Cistanche Herba tant en modes d'ions negatius com positius amb CE alts i baixos. Els resultats obtinguts van revelar que la compatibilitat del mode negatiu era més gran en relació amb el mode positiu d'aquests compostos. La figura 3 mostrava un cromatograma de pics bàsics de MS (BPI) traçat amb pics numerats. La intensitat de cada ió detectat en l'anàlisi UPLC-Q-TOF-MSE es va normalitzar pel que fa a tot el recompte d'ions per a la generació d'una matriu de dades que constava del valor m/z, l'àrea de pic normalitzada i el temps de retenció.
L'avaluació de components de CD i els seus productes processats a la plataforma UNIFI
Es van identificar un total de 97 compostos amb el mode -SEM (n=6) de CD i el seu producte processat (taula 2), inclosos glicòsids feniletanoides (PhGs), iridoides, lignans i oligosacàrids. Els components 95, 91 i 94 es van detectar en CD, CD-NP i CD-HP, en conseqüència. Entre ells, 64 eren feniletanoides, 13 iridoides i es van determinar 20 tipus de compostos més. Hi havia una similitud en la composició química del CD i el seu producte processat, però, es va trobar que la quantitat dels components era diferent entre el CD i el seu producte processat.
Variacions en els components químics dels productes processats
El programari Simca-P 13.0 es va emprar per analitzar la matriu de dades multivariant. Abans de la PCA, totes les variables estaven centrades en la mitjana i a escala de Pareto, seguida de la identificació de variables discriminants potencials. En un gràfic de puntuació PCA, cada punt mostrava una mostra individual. Les mostres que mostraven similitud en els seus components químics es van dispersar entre si, mentre que les que mostraven variacions en els seus components es van dividir. Tal com es veu a la PCA (Fig. 4), el grup de CD-HP es va separar dels grups de CD i CD-NP.
To distinguish CD from CD-HP and CD-NP, OPLS-DA, permutation test, S-plot, and VIP value were developed. (Figs. 5, 6, 7) The obtained results revealed that many components were key characteristic components of each product. The screening condition was the VIP>1 i P<0.05. From the date of the S-plot, the characteristic components evaluated, which were commonly existing in the three groups were.
A la figura 8, hem trobat la intensitat de l'acteòsid (54), el cistàsid C (74), el campneòsid II (43), l'osmantuside (75) i el 2'-actylacteòside (80) que tenen el grup 4'-O-cafeoil en la part 8-O- -d-glucopiranosil (vegeu la figura 9) va disminuir després de ser processada pel vi d'arròs, mentre que la intensitat de l'isoacetòsid (60), l'isocistanòsid (71), l'isocampneòsid I (69) , els isomartinòsids (86) que tenen el grup 6'-O-cafeoil (vegeu la figura 9) van augmentar, especialment per al grup CD-NP. El tubulósid B (72) resistent que té un grup 6'-O-cafeoil, el mateix que l'isoacteòsid, la intensitat va disminuir a causa del seu grup 2'-actil. La intensitat de l'equinacòsid (38) i el cistàsid B amb grups 6'-O- -d-glucopiranosil va augmentar, però la intensitat del tubulòsid A (55) també va disminuir a causa del seu grup 2'-actil.
El nostre equip d'investigació també va estudiar l'estabilitat tèrmica de l'acteòsid i l'isoacteòsid i va trobar que l'acteòsid era inestable en aigua, metanol i solució de vi d'arròs groc, i es podia convertir en isoacteòsid parcialment en condicions de calefacció. Però la termoestabilitat de l'isoacteòsid era millor, especialment en la solució de vi d'arròs groc. La figura 10 mostra els possibles canvis de PhG en CD durant el processament:
Identificació dels metabòlits en rates
A partir de dades d'espectrometria de masses d'alta resolució, es va analitzar i comparar el pes molecular exacte i la composició elemental de metabòlits i compostos de protomolècules. Com que els mateixos tipus de compostos en TCM van mostrar similituds en modificacions metabòliques, les correlacions dels components fitoquímics in vitro es poden estendre als seus metabòlits in vivo. Mentrestant, a partir de les vies de biotransformació convencionals, es va inferir un canvi raonable en el pes molecular. Finalment, els metabòlits es van identificar mitjançant l'anàlisi de l'espectre de masses MSE dels metabòlits i la via de fragmentació dels protocompostos a l'espectre de masses [21, 22]. En comparació amb la mostra en blanc, els seus components es van identificar in vivo a partir de la informació proporcionada pel cromatograma-espectre de masses, la possibilitat d'una reacció metabòlica, les característiques de l'estructura del compost i la regla de fragmentació del seu espectre de masses. Vegeu la taula 3.
Identificació de metabòlits relacionats amb glicòsids feniletanoides
Per al processament es va utilitzar la plataforma UNIFI. La figura 11 mostrava el cromatògraf TIC d'orina, femta i plasma per CD i els seus productes processats. En comparació amb les mostres en blanc, es van identificar un total de 54 metabòlits en rates, inclosos 10 components prototip i 44 metabòlits, dels quals 24, 49 i 6 estaven en femta, orina i plasma, en conseqüència.
A partir de la massa precisa, la cascada de fragmentació i les pèrdues neutres predictibles per biotransformació, es van avaluar provisionalment un total de 35 metabòlits associats a glicòsids feniletanoides. Els metabòlits relacionats dels glicòsids feniletanoides tenen patrons de fragmentació de l'espectre de masses similars, com el típic fragment de cafeoil m/z 461,1605, després hidrolitzats per enllaços glicosídics i èsters in vivo i metabolitzats en hidroxitirosol (HT) (m/). z 153,0504, C8H10O3, 4,73 min) i cafès àcids (CA) (m/z 179,0389, C9H7O4, 0,77 min), vegeu la figura 12A.
M11 va indicar [M–H]− a m/z 153,0504 amb la fórmula, és a dir, C8H10O3, i identificat com a HT. M16 va presentar [M-H] - a m / z 329,0851, que era 176 Da elevat que el de HT, revelant que podria ser un metabòlit glucuronidat de HT. El [M–H]− de M26 estava a m/z 343,1037, 14 Da més alt que el de HT-glucurònid. Per tant, M26 es va identificar com a glucurònid metilat amb HT. M17 es va identificar com a HT-sulfat basant-se en el seu [M-H]- a m/z 233,0112, 80 Da sobre l'HT, que es va poder metilar més, i després va produir M22, que va mostrar el m/z 247,0278, cosa que indica que era Metabòlit sulfatat metilat amb HT. M7 (m/z 167,0335) i M5 (m/z 167,0762) es van considerar productes d'oxidació i HT metilat, respectivament (Fig. 12B).
M1 va indicar [M–H]− a m/z 179,0389, la fórmula molecular dilucidada era C9H7O4 i es va identificar com àcid cafeic (CA). M25 va revelar [M-H] - a m / z 355,0704, que era 176 Da elevat que el de CA, cosa que demostra que podria ser un metabòlit glucuronidat de CA. M27 tenia m/z 258,994, que era 80 Da superior al de CA, de manera que el vam dilucidar com a sulfat de CA i podria produir M35 (m/z 273,0064). Com que M4 dóna el [M–H]- a m/z 193,0524, 14 Da més que CA, es va identificar com a metabòlit metilat de CA. M39 era un metabòlit de deshidroxilació de CA, amb m/z 163,04, i es podria sulfatar en M32 (m/z 242,9951).
M33 (m/z 181.0491, C9H10O4, 9,06 min) va ser el producte de reducció de CA, és a dir, l'àcid 3,4-dihidroxibenzè propiònic, que es podia metilar en M19 (m/z 195,0623, C10H12O4, 0,93 min). M33 es podria deshidratar en M43, és a dir, 3-HPP (m/z 165,0558, C9H10O3, 11,29 min) i M31 (m/z 341,0942, C15H17O9, 8,90 min) i M29 (m/z 01265, C9H10O3, 11,29 min) 8,52 min) van ser els productes glucuronidats i sulfatats (Fig. 12C).
Per als metabòlits associats als glicòsids feniletanoides, les cascades metabòliques clau van ser les reaccions metabòliques de fase II, és a dir, la glucuronidació, la metilació i la sulfatació. Les cascades metabòliques proposades de feniletanoides es mostren a la figura 13.
Identificació de metabòlits relacionats amb iridoides
Mitjançant l'anàlisi de la composició elemental dels metabòlits, la fragmentació de MSE i la literatura associada, es van provar un total de 19 metabòlits associats a iridoides.
avaluat. Els glicòsids iridoides es van hidrolitzar mitjançant enllaços glicosídics per formar les seves corresponents aglicones. Te m/z 185,117 va ser per a M8, 162 Da menys que ajugol, que es va produir per la pèrdua de residus de glucosa. M40 (m/z 199,0641, Rt 10,91 min) va ser el producte desglicosilat del catalpol. M45 m/z 169,0487, Rt 12,15 min) era inferior a 30 Da el del metabòlit desglicosilat de catalpol i es va identificar com l'eliminació d'una molècula del metabòlit CH2O. M34 (m / z 151,0352, Rt 9,08 min), va ser una pèrdua addicional del metabòlit H2O.
M44 (m/z 211,0665, Rt 11,31 min) era un metabòlit desglicosilat del genipòsid, i M37 (m/z 197,0833, Rt 15,03 min) era la desglicosilació de l'àcid 8-epideoxilogànic. Les reaccions metabòliques dels iridoides es podrien revelar com el metabolisme de la fase I de la desglicosilació (Fig. 12D).
Comparació de perfils metabòlics en plasma, orina i femta entre CD i els seus productes processats
Es van comparar 2 prototips en plasma, 7 en orina i 3 en femta. Hi havia 7 prototips absorbits en CD, 7 prototips absorbits en CD-NP i 8 prototips en CD-HP. M21 només es va detectar en el grup de femtes de CD-NP, i M38 i M51 només es van detectar en els grups d'orina de CD-HP. En comparació amb els metabòlits, els metabòlits idèntics en plasma, orina i femta eren 4, 42 i 21, respectivament. Hi va haver 34 metabòlits absorbits en el grup CD, 39 en CD-NP i 40 en el grup CD-HP. M5, M7, M40 i M52 només es van detectar en grups CD-NP, mentre que M24, M41 i M48 només es van detectar en grups CD-HP.
Es van observar variacions en l'absorció i el metabolisme de compostos actius en diversos productes processats de CD. A la figura 14, vam trobar que la intensitat de la conjugació HT-sulfat (M17) era la més alta a l'orina, seguida de 3-conjugació de sulfat HPP (M29), conjugació de sulfat HT metilat (M22), sulfat de CA deshidroxilat. conjugació (M32) i 3,4-conjugació amb sulfat d'àcid propiònic dihidroxibenzè (M19). El contingut de productes metabòlics en el grup processat va ser més gran que en el grup CD, especialment per a M22, M29, M27, M16, M19, M1 i M2. Els seus compostos precursors, com l'hidroxitirosol, tenen propietats antitumorals, antiinflamatòries, antibacterianes, víriques i antifúngiques [23]. L'àcid cafeic posseeix activitats antiinflamatòries, anticancerígenes i antivirals [24]. Va ser coherent amb l'ús clínic de CD i els seus productes processats.
Discussió
El CD és un TCM, i els seus principals components bioactius, inclosos els PhG, iridoides i polisacàrids, han estat documentats per diversos estudis de recerca. En la pràctica clínica de TCM, els productes processats de CD s'han utilitzat àmpliament en relació amb els crus. La composició química es canviarà durant el processament, cosa que pot provocar canvis en els efectes medicinals (Fig. 14).
Els PhG són un tipus de compost fenòlic caracteritzat per una estructura -glucopiranòsid que porta una part hidroxifeniletil com l'aglicona. Aquests compostos sovint comprenen àcid de cafeïna i ramnosa units al residu de glucosa mitjançant enllaços èster o glicosídics respectivament. En el present estudi, es van realitzar les anàlisis qualitatives de CD, CD-NP i CD-HP, i es van identificar un total de 97 compostos, entre els quals hi ha glucòsids feniletanoides (PhGs), iridoides, etc. Els resultats obtinguts van mostrar variacions en la composició química abans i després del processament. La intensitat dels PhG que tenen el grup 4'-O-cafeoil a la part 8-O{- -d-glucopiranosil, com l'acteòsid, el cistàsid C, el campneòsid II, l'osmantuside va disminuir després de ser processats, mentre que els PhG amb el El grup 6'-O-cafeoil a la part 8-O{- -d-glucopiranosil, com ara l'isoacetòsid, l'isocistanòsid, l'isocampneòsid I, l'isomartinòsid va augmentar, especialment en el grup CD-NP. També va augmentar la intensitat de l'equinacòsid i el cistàsid B l'estructura dels quals posseeix una part 6'-O- -d-glucopiranosil. Els PhG que tenien un grup 2'-actil sovint van disminuir a causa de les reaccions d'hidròsi durant el procés, com el tubulòsid B i l'{23}}acetillacteòsid.
La investigació dels metabòlits absorbits in vivo es va dur a terme després de l'administració oral de CD i els seus productes processats. Els processos metabòlics de la fase II van ser les cascades clau i la majoria dels metabòlits eren sulfat, glucurònid i conjugats metilats. Els glucòsids de feniletanol tenen una baixa absorció i utilització oral. Són difícils d'absorbir a la sang i actuen com a progenitors per jugar els seus papers després de l'activació metabòlica in vivo. Els feniletanoides produïts en feniletanolaglicona, com la hidroxitirosina (HT) i l'àcid de cafeïna (CA) i el seu derivat 3-àcid hidroxifenilpropiònic (3-HPP), aquests metabòlits es poden absorbir més fàcilment al plasma i tenen un millor efecte medicinal. efecte.
La majoria dels metabòlits es van trobar en les seves concentracions més baixes o no es van detectar al plasma de rata, però, es va observar una concentració més alta a l'orina, cosa que indica que els metabòlits s'eliminarien fàcilment a través de l'orina. Tal com es mostra a la Taula 3, es van determinar els mateixos compostos en diversos grups, mentre que es van trobar variacions considerables en les concentracions dels metabòlits que podrien estar associades amb l'eficàcia desigual de la CD i els seus productes processats. La conjugació HT-sulfat (M17) té la intensitat més alta a l'orina, seguida de la 3-conjugació de sulfat HPP (M29), la conjugació de sulfat de HT metilat (M22), la conjugació de sulfat de CA deshidroxilat (M32) i 3,{{ 8}}conjugació de sulfat d'àcid propiònic dihidroxi benzè (M19). El contingut de productes metabòlics en el grup processat va ser més gran que en el grup CD, especialment per a M22, M29, M27, M16, M19, M1 i M2.
En general, els components que tenen una alta exposició als òrgans diana podrien ser efectius. S'ha avaluat i determinat in vitro una quantitat suficient de feniletanoides i els seus derivats. L'acteòsid és el compost característic, el contingut del qual va disminuir després de ser processat pel vi d'arròs, i el contingut d'isoacteòsid, isocistanòsid C i isocampneòsid I va augmentar en conseqüència. Els productes de degradació dels PhG, com els derivats de CA i HT, es podrien avaluar a les biomostres, i el processament del vi d'arròs pot millorar l'absorció de metabòlits in vivo.
Conclusió
En aquest estudi, es van detectar 97 compostos en els extractes de CD i el seu producte processat. La degradació d'uns quants glicòsids es va produir a una temperatura elevada i, com a resultat, es van sintetitzar alguns nous isòmers i complexos. En un estudi in vivo, es van determinar o avaluar provisionalment components prototips (10) i metabòlits (44) en plasma de rata, femta i orina. Els processos metabòlics de la fase II van ser les cascades clau, la majoria dels metabòlits estaven associats amb equinacòsid o acteòsid, com HT, CA i els seus derivats 3-àcid hidroxifenilpropiònic 3-HPP. Aquests metabòlits poden absorbir-se més fàcilment al plasma i tenir un millor efecte medicinal. Els resultats obtinguts van mostrar que la composició química del CD era diferent i afectava la disposició del compost in vitro i in vivo.
Abreviatures
PhGs: glucòsids feniletanoides; CD: Cistanche deserticola; CMM: Chinese Materia Medica; MTC: Medicina Tradicional Xinesa; CD-NP: Cistanche deserticola Elaborat per cocció al vapor amb vi d'arròs a pressió normal; CD-HP: Cistanche deserticola Elaborat per cocció al vapor amb vi d'arròs a alta pressió; UPLC-Q-TOF-MSE: cromatografia líquida d'ultra alt rendiment juntament amb TOF-MSE; PCA: anàlisi de components principals; VIP: Importància variable per a la projecció; CA: àcid cafèic; HA: Hidroxitirosol.
Agraïments
No aplicable.
Aportacions dels autors
LZ, LBN i SJ van participar en la redacció i escriptura del manuscrit. RJ, LPP van ajudar amb els experiments amb animals i van redactar i finalitzar totes les figures i taules. ZC, HY i JTZ van ajudar amb el disseny i el rendiment d'aquest estudi i van revisar el manuscrit. Tots els autors van llegir i van aprovar el manuscrit final.
Finançament
Aquest treball va comptar amb el suport de la Fundació Nacional de Ciències Naturals de la Xina (subvenció núm.: 81874345) i la Fundació de ciències naturals de la província de Liaoning (subvenció núm.: 2020-MS-223).
Disponibilitat de dades i materials
Els conjunts de dades utilitzats i/o analitzats durant l'estudi actual estan disponibles a l'autor corresponent a petició raonable.
Declaracions
Aprovació ètica i consentiment per participar
L'aprovació ètica per utilitzar animals d'experimentació per a aquest estudi s'ha obtingut del Comitè d'Ètica Mèdica de la Universitat de Medicina Tradicional Xinesa de Liaoning (Número d'aprovació: 2018YS(DW)-044-01). Tots els procediments experimentals d'aquest estudi estaven sota els estàndards ètics del Comitè d'Ètica Mèdica de la Universitat de Medicina Tradicional Xinesa de Liaoning.
Consentiment per a la publicació
No aplicable.
Interessos competitius
Els autors declaren que no tenen conflictes d'interès per revelar.
Detalls de l'autor
1Departament de Farmàcia, Universitat de Medicina Tradicional Xinesa de Liaoning, Dalian, Liaoning, Xina. 2Drug Research Institute of Monos Group, Ulaanbaatar 14250, Mongòlia.
Referències
1. Comissió de la Farmacopea Xinesa. Farmacopea de la República Popular de la Xina, vol. I. Beijing: Xina Medical Science Press; 2020. pàg. 140.
2. Li Z, Lin H, Gu L, Gao J, Tzeng CM. Herba Cistanche (Rou Cong-Rong): un dels millors regals farmacèutics de la medicina tradicional xinesa. Front Pharmacol. 2016;7:41.
3. Liu BN, Shi J, Zhang C, Li Z, Hua Y, Liu PP, Jia TZ. Efectes de diferents mètodes de processament d'assecat per a Fresh Cistanche deserticola sobre el contingut dels seus components. J Chin Med Mater. 2020;10:2414–8.
4. Liu BN, Shi J, Jia TZ, Lv TT, Li Z. Optimització del procés de cocció al vapor a alta pressió per a Cistanches Herba. Chin Trad Patent Med. 2019;11:2576–80.
5. Fan YN, Huang YQ, Jia TZ, Wang J, La-Sika, Shi J. Efectes de Cistanches herba abans i després del processament sobre la funció anti-envelliment i la funció immune de les rates envellides induïdes per la D-galactosa. Chin Arch Trad Chin Med, 2017; 11:2882–2885.
6. Gao YJ, Jiang Y, Dai F, Han ZL, Liu HY, Bao Z, Zhang TM, Tu PF. Estudi sobre constituents laxants a Cistanche deserticola YCMa. Modern Chin Med. 2015;17(4):307–10.
7. Liu BN, Shi J, Li Z, Zhang C, Liu P, Yao W, Jia T. Estudi sobre la funció neuroendocrina-immune de Cistanche deserticola i els seus productes al vapor de vi d'arròs en un model de rata induïda per glucocorticoides. Evid Based Complement Alternat Med. 2020;22:5321976.
8. Guo Y, Wang L, Li Q, Zhao C, He P, Ma X. Millora de la funció estimulant del ronyó en un model de ratolí per Cistanches herba assecat ràpidament a una temperatura mitjana-alta. J Med Food. 2019;22(12):1246–53.
9. Wang T, Zhang X, Xie W. Cistanche deserticola YC Ma, "Desert ginseng": una revisió. Am J Chin Med. 2012;40(6):1123–41.
10. Fu Z, Fan X, Wang X, Gao X. Cistanches Herba: una visió general de la seva propietat química, farmacològica i farmacocinètica. J Etnofarmacol. 2018;219:233–47.
11. Lei H, Wang X, Zhang Y, Cheng T, Mi R, Xu X, Zu X, Zhang W. Herba Cistanche (Rou Cong Rong): una revisió de la seva fitoquímica i farmacologia. Chem Pharm Bull. 2020;68(8):694–712.
12. Geng X, Tian X, Tu P, Pu X. Efectes neuroprotectors de l'equinacòsid en el model MPTP del ratolí de la malaltia de Parkinson. Eur J Pharmacol. 2007;564:66–74.
13. Deng M, Zhao JY, Ju XD, Tu PF, Jiang Y, Li ZB. Efecte protector del tubulósido B sobre l'apoptosi induïda per TNF alfa a les cèl·lules neuronals. Acta Pharmacol Sin. 2004;25(10):1276–84.
14. Nan ZD, Zhao MB, Zeng KW, Tian SH, Wang WN, Jiang Y, Tu PF. Iridoides antiinflamatoris de les tiges de Cistanche deserticola cultivades al desert de Tarim. Chin J Nat Med. 2016;14(1):61–5.
15. Nan ZD, Zeng KW, Shi SP, Zhao MB, Jiang Y, Tu PF. Glicòsids feniletanoides amb activitats antiinflamatòries de les tiges de Cistanche deserticola cultivades al desert del Tarim. Fitoteràpia. 2013;89:167–74.
16. Morikawa T, Pan Y, Ninomiya K, Imura K, Yuan D, Yoshikawa M, Hayakawa T, Muraoka O. Iridoides i glucòsids monoterpènics acíclics, kankanòsids L, M, N, O i P de Cistanche tubulosa. Chem Pharm Bull. 2010;58(10):1403–7.
17. Li SL, Song JZ, Qiao CF, et al. Una nova estratègia per explorar ràpidament marcadors químics potencials per a la discriminació entre Radix Rehmanniae cru i processat mitjançant UHPLC-TOF-MS amb anàlisi estadística multivariant. J Pharm Biomed Anal. 2010;51(4):812–23.
18. Peng F, Chen J, Wang X, Xu CQ, Liu TN, Xu R. Canvis en els nivells de glucòsids feniletanoides, activitat antioxidant i altres trets de qualitat en rodanxes de Cistanche deserticola mitjançant processament al vapor. Chem Pharm Bull. 2016;64:1024–30.
19. Ma ZG, Tan YX. Canvis de contingut de sis glicòsids feniletanoides en intervals de temps de cocció al vapor amb vi a Desertliving Cistanche. Chin Trad Patent Med. 2011;33(11):1951–4.
20. Peng F, Xu R, Wang X, Xu C, Liu T, Chen J. Efecte del procés de cocció al vapor sobre la qualitat de la cistanche deserticola postcollita per a ús medicinal durant l'assecat al sol. Biol Pharm Bull. 2016;39(12):2066–70.
21. Cui Q, Pan Y, Zhang W, Zhang Y, Ren S, Wang D, Wang Z, Liu X, Xiao W. Metabòlits de l'acteòsid dietètic: perfils, aïllament, identificació i capacitats hepatoprotectores. J Agric Food Chem. 2018;66(11):2660–8.
22. Cui Q, Pan Y, Bai X, Zhang W, Chen L, Liu X. Caracterització sistemàtica dels metabòlits d'echinacòsid i acteòside de Cistanche tubulosa en plasma de rata, bilis, orina i femta basada en UPLC-ESI-Q-TOF -SENYORA. Cromatograma Biomed. 2016;30(9):1406–15.
23. Bertelli M, Kiani AK, Paolacci S, Manara E, Kurti D, Dhuli K, Bushati V, Miertus J, Pangallo D, Baglivo M, Beccari T, Michelini S. Hidroxitirosol: un compost natural amb activitats farmacològiques prometedores. J Biotecnologia. 2020;309:29–33.
24. Touaibia M, Jean-François J, Doiron J. Cafeic Acid, a versatile pharmacophore: an overview. Mini Rev Med Chem. 2011;11(8):695–713.
Per a més informació: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501
