Detecció de variants de MUC1 en pacients diagnosticats clínicament amb malaltia renal tubulointersticial autosòmica dominant

Introducció

La malaltia renal tubulointersticial autosòmica dominant (ADTKD)-MUC1 és causada principalment per mutacions de frameshift a causa d'una inserció d'una sola base a la regió de repetició en tàndem de nombre variable (VNTR) a MUC1. A causa de la complexitat de la variant hotspot, la identificació mitjançant seqüenciadors de lectura curta (SRS) és un repte. Tot i que estudis recents han revelat la utilitat dels seqüenciadors de lectura llarga (LRS), la prevalença de variants MUC1 en pacients amb sospita clínica d'ADTKD segueix sent desconeguda. El nostre objectiu és aclarir aquesta prevalença i les característiques genètiques i les manifestacions clíniques d'ADTKD-MUC1 en una població japonesa mitjançant un SRS i un LRS.

Mètodes

Des de gener de 2015 fins a desembre de 2019, es va realitzar una anàlisi genètica mitjançant un SRS en 48 pacients amb sospita clínica d'ADTKD. Es van realitzar anàlisis addicionals mitjançant un LRS en pacients amb resultats negatius de SRS.

Resultats

Els resultats de la seqüenciació de lectura curta van revelar variants de MUC1 en 1 pacient que albergava una inserció de citosina a la segona unitat de repetició de la regió VNTR; tanmateix, les regions VNTR més profundes no es van poder llegir pel SRS. Per tant, vam realitzar una anàlisi de seqüenciació de lectura llarga de 39 casos i vam detectar variants de MUC1 VNTR en 8 pacients (en total, 9 pacients de famílies no relacionades). Amb la inclusió de pacients afectats per la família (n ¼ 31), l'edat mitjana en el desenvolupament de la malaltia renal terminal (ESKD) va ser de 45 anys (IC del 95 per cent: 40-40 anys).

Conclusió

Al Japó, la taxa de detecció de variants de MUC1 en pacients amb sospita clínica d'ADTKD va ser del 18,8 per cent. Més del 20 per cent dels pacients amb resultats negatius de SRS tenien variants MUC1 detectades per un LRS.

Paraules clau

ADTKD; ADTKD-MUC1; seqüenciació de lectura llarga; MCKD; NGS; Seqüenciació SMRT.

Feu clic aquí per obtenirBeneficis de Cistanche

L'ADTKD és un grup de malalties renals hereditàries caracteritzades per fibrosi tubulointersticial progressiva i atròfia tubular que condueix a ESKD. ADTKD es pot dividir en subtipus en funció dels defectes genètics causants subjacents, incloses les anomalies en UMOD, MUC1, REN, HNF1B i SEC61A1. Atesa la no especificitat de les característiques unificadores comunes de l'ADTKD, incloses les anomalies del sediment urinari suau i la proteinúria lleu a negativa, es suposa que l'ADTKD està molt infradiagnosticada.

MUC1 és una glicoproteïna transmembrana altament expressada a la membrana apical de l'extremitat ascendent gruixuda del bucle de Henle, túbuls contornejats distals i conductes col·lectors. La causa genètica més comuna d'ADTKD-MUC1 és una variant de canvi de marc causada per la inserció d'una sola base en el polimorfisme VNTR de MUC1 (OMIM 158340; 1q22) a l'exó 2.5 Aquesta mutació acaba la síntesi de la proteïna MUC1 després de la regió VNTR i crea una nova proteïna escurçada (MUC1fs) que no té un domini C-terminal (figura 1a). Aleshores, MUC1fs s'acumula al citoplasma a causa del transport anormal de proteïnes intracel·lulars. La regió VNTR presenta una variació interindividual substancial perquè està formada per 60-unitats de nucleòtids que es repeteixen de 20 a 125 vegades, amb cada al·lel que té repeticions úniques (figura 1b). Per tant, detectar variants gèniques mitjançant SRS ha estat un repte a causa de la complexitat del hotspot variant.

Estudis anteriors han utilitzat mètodes alternatius, inclosa l'espectrometria de masses i l'extensió de la sonda, com es diu, per detectar variants causatives; però, aquests mètodes són tècnicament exigents. Estudis recents han trobat la utilitat dels LRS, que utilitzen un mètode de seqüenciació en temps real de molècula única (SMRT) per identificar variants de MUC1 VNTR. No obstant això, les variants MUC1 VNTR encara no s'han caracteritzat a la població japonesa. A més, es desconeix la prevalença de variants MUC1 en pacients amb sospita clínica d'ADTKD. Per tant, l'objectiu d'aquest estudi era aclarir aquesta prevalença, incloses les característiques genètiques i les manifestacions clíniques, d'ADTKD-MUC1 a la població japonesa. Aquí, vam diagnosticar 9 pacients amb ADTKD-MUC1 que tenien variants de VNTR detectades mitjançant un SRS (n ¼ 1) o un LRS (n ¼ 8) entre 48 casos d'ADTKD clínicament sospitosos.

Mètodes

1. Participants

Entre gener de 2015 i desembre de 2019, vam realitzar anàlisis genètiques en 48 pacients amb sospita clínica d'ADTKD. Els participants tenien disfunció renal per causes desconegudes, amb anomalies urinàries lleus a negatives. Els pacients van ser diagnosticats clínicament amb ADTKD si tenien antecedents familiars positius de malaltia renal crònica i/o hiperuricèmia o si les troballes patològiques a la biòpsia renal van revelar malaltia renal quística medul·lar (el terme anterior per a ADTKD-MUC1 i ADTKD-UMOD), tubulointersticial. nefritis o dany intersticial crònic. Es van excloure pacients amb malformacions renals i/o símptomes extrarenals. Les mostres d'ADN es van analitzar primer mitjançant un SRS. A continuació, es van realitzar més investigacions en pacients amb resultats negatius de SRS (n ¼ 39) mitjançant un LRS. Totes les mostres i la informació clínica es van obtenir d'hospitals de referència japonesos. Les anàlisis genètiques es van realitzar després d'obtenir el consentiment informat per escrit dels pacients i/o dels seus tutors si el pacient era menor d'edat. Aquest estudi va ser aprovat pel Comitè de Revisió Institucional de la Facultat de Medicina de la Universitat de Kobe (número d'aprovació 301).

2. Seqüenciació de lectura curta

Genomic DNA was extracted from peripheral blood leukocytes using the QuickGene Mini 80 system (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., Tokyo, Japan). For targeted sequencing using an SRS, samples were prepared using HaloPlex (Agilent Technologies, Santa Clara, CA) according to the manufacturer's instructions. Paired-end sequencing was performed on the MiSeq platform (Illumina, San Diego, CA). HaloPlex was used for targeted sequencing of 128 genes (version 2, Supplementary Table S1), 172 genes (version 4, Supplementary Table S2), 159 genes (version 5, Supplementary Table S3), 164 genes (version 6, Supplementary Table S4), 181 genes (version 7, Supplementary Table S5), and 183 genes (version 8, Supplementary Table S6) associated with congenital anomalies of the kidney and urinary tract, cystic kidneys, ADTKD, and nephronophthisis. The HaloPlex version used for each patient is found in Supplementary Table S7. Reads were aligned to the reference human genome (GRCh37/Hg19) using SureCall 4.0, which is a desktop application combining algorithms for end-to-end next-generation sequencing data analysis from alignment to categorization of mutations (Agilent Technologies). We excluded called variants with minor allele frequencies >1 per cent en bases de dades de variacions humanes disponibles públicament, com ara les següents: Human Genetic Variation Database (http://www.genome.med.kyoto-u.ac.jp/SnpDB/), gnomAD (https://gnomad.broadinstitute .org/) i bases de dades del Projecte 1000 Genomes (1000G) (https://www.internationalgenome.org/data). Les variants candidates es van seleccionar mitjançant el programari de predicció computacional, SIFT (https://sift.bii.astar.edu.sg/), PolyPhen-2 (http://genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) , Mutation Taster (http://www.mutationtaster.org/) i CADD (https://cadd.gs.washington.edu/snv), i després es classifiquen com a patògens, probablement patògens o de significació incerta, segons el directrius de l'American College of Medical Genetics and Genomics.9

3. Preparació de la biblioteca i seqüenciació de lectura llarga (seqüenciació SMRT)

Els amplicons es van agrupar en proporcions equimolars i es van preparar per a les biblioteques de seqüències SMRTbell mitjançant un kit de preparació de plantilles SMRTbell Express 2.0 (Pacific Biosciences, Menlo Park, CA) segons les instruccions del fabricant. Posteriorment, es va construir una plantilla de seqüència connectant la versió 2 del primer de seqüència i l'ADN polimerasa als adaptadors als dos extrems de la biblioteca de seqüències, i la plantilla es va carregar a una cèl·lula SMRT. La seqüenciació SMRT es va realitzar mitjançant el sistema PacBio Sequel II amb el kit de seqüenciació Sequel II 2.0. Les dades seqüenciades es van analitzar amb SMRT Link versió 9.0.0, i es van obtenir seqüències de consens molt precises. A continuació, es va realitzar l'agrupament de seqüències mitjançant l'eina d'anàlisi "pbaa", que és adequada per analitzar seqüències repetitives. Takara Bio (Kusatsu, Shiga, Japó) va realitzar la preparació de la biblioteca, la seqüenciació i les anàlisis bioinformàtiques de la seqüenciació SMRT. La seqüència de nucleòtids, el nombre de lectures i la freqüència d'al·lel es van compilar en un fitxer Excel per a cada pacient (dades no revelades). Per a cada seqüència identificada, vam reconstruir manualment la seqüència cada 60 bases per línia, tal com descriuen Kirby et al.5 (figura 1b). A causa dels possibles errors de PCR en la complexa seqüència VNTR, es van detectar múltiples seqüències en cada pacient. Les seqüències correctes es van identificar comparant els resultats de LRS amb electroferogrames dels amplicons obtinguts mitjançant un bioanalitzador (taula suplementària S8). En la majoria dels casos, es va determinar que les 2 seqüències principals amb el major nombre de lectures eren correctes. En alguns casos, però, es va determinar que les seqüències amb el tercer o menor nombre de lectures més habituals eren correctes si les seves mides coincideixen amb els pics d'electroforesi detectats pel bioanalitzador (SC449, SC511, SC534, SC560, SC566, SC593, SC616, i SC639) a causa de la ineficiència de l'amplificació per PCR d'al·lels llargs quan la mida de la regió VNTR dels 2 al·lels era significativament diferent.

Cistanche en pols i extracte de Cistanche

Discussió

Segons el que sabem, aquest és el primer informe d'una anàlisi genètica de variants MUC1 VNTR detectades mitjançant una combinació de SRS i LRS en una cohort japonesa. Hem identificat mutacions MUC1 VNTR en 9 pacients de famílies no relacionades. A més, la taxa de detecció de variants MUC1 entre pacients amb sospita clínica d'ADTKD va ser del 18,8 per cent.

A causa de la complexitat de la variant hotspot, detectar variants de MUC1 VNTR mitjançant anàlisi genètica rutinària mitjançant un SRS és un repte, i normalment es requereixen altres mètodes, com el mètode d'instantània o l'espectrometria de masses. Malauradament, aquests mètodes són tècnicament exigents i només es realitzen en uns quants laboratoris d'arreu del món.5,6 Wenzel et al.7 van realitzar la seqüenciació SMRT i van confirmar tots els diagnòstics en participants europeus de 9 famílies amb variants MUC1 VNTR detectades prèviament mitjançant el mètode de la instantània. Wang et al.8 també van revelar la utilitat de la seqüenciació SMRT per detectar mutacions MUC1 VNTR en una gran família xinesa. No obstant això, a causa del disseny del seu estudi, aquests 2 estudis no van determinar la taxa de detecció de variants MUC1 VNTR en pacients amb sospita clínica d'ADTKD. En aquest estudi, vam aclarir que la taxa de diagnòstic de variants MUC1 en pacients amb sospita clínica d'ADTKD era del 18,8 per cent, cosa que pot facilitar probabilitats més precises, especialment durant l'assessorament genètic.

Les dades sobre la prevalença d'ADTKD-MUC1 són limitades, tot i que estudis anteriors han revelat una prevalença de 0,7 a 4 per milió als Estats Units i Irlanda.3,13 Un estudi a Anglaterra va revelar una prevalença estimada d'ADTKD. -UMOD de 9 per milió, cosa que suggereix que ADTKD-UMOD és la malaltia renal no poliquística més freqüent.14 En el nostre estudi, 9 pacients tenien variants MUC1, mentre que 6 tenien variants UMOD, cosa que suggereix que ADTKD-MUC1 podria ser un dels subtipus de malaltia més comuns de ADTKD.

Malgrat la complexitat estructural de la regió MUC1 VNTR, SRS va poder detectar variants en 3 pacients, tots els quals tenien la mateixa mutació: una citosina inserida en 7 citosines consecutives al final de la 60-unitat de nucleòtids a la segona repetició de el VNTR. Es va suposar que les variants a la part poc profunda del MUC1 VNTR (fins a la tercera repetició del VNTR) serien detectables encara que l'ADN estigués fragmentat (100-200 parells de bases per lectura) com a part de la preparació de la mostra per a l'anàlisi SRS. Yamamoto et al.15 van identificar una altra mutació de frameshift localitzada abans de la regió MUC1 VNTR mitjançant una SRS (seqüència d'exoma sencera). Aquesta mutació també genera una proteïna truncada anormalment de la mateixa manera que ho faria la mutació posicionada dins del VNTR.15 Aquests resultats suggereixen que l'anàlisi SRS pot ser útil per detectar variants posicionades abans o dins de la regió poc profunda del VNTR.

En el nostre estudi, 7 dels 9 pacients amb variants de MUC1 VNTR tenien la mateixa seqüència d'unitats de nucleòtids 60- que contenia la citosina inserida (taula 2). En estudis anteriors en què es va realitzar una anàlisi genètica de seqüenciació de lectura llarga per a MUC1 VNTR, la mateixa variant es va detectar en 9 famílies d'una cohort europea7 i una gran família xinesa8. A més, aquesta mutació s'ha detectat mitjançant el mètode de la instantània i es va trobar definit com "27dupC".12 Olinger et al.16 van informar que la prevalença de la variant 27dupC era del 93,5 per cent en 2 registres d'ADTKD a Europa i als Estats Units. Segons aquestes troballes, les nostres dades van indicar que la variant 27dupC era la mutació MUC1 més comuna en una cohort japonesa.

Suplements de cistanche

S'ha informat que el nombre de repeticions de VNTR és de 20 a 253; tanmateix, en el nostre estudi, el nombre de repeticions VNTR oscil·lava entre 30 i 82, amb el 80 per cent dels al·lels que tenien de 30 a 36 repeticions. Un estudi anterior a Europa va informar que el percentatge d'al·lels amb 30 a 36 repeticions era del 39 per cent, fet que pot estar recolzat per l'homogeneïtat ètnica de la població japonesa. El present estudi va revelar que l'edat mitjana per desenvolupar ESKD era de 45 anys (IC del 95 per cent: 40-50 anys) en pacients amb ADTKD-MUC1, inclosos pacients afectats familiars en una cohort japonesa (9 famílies, n ¼ 31). Un estudi anterior va avaluar 147 individus, inclosos pacients amb mutacions de MUC1 i els seus familiars afectats, i va revelar que l'edat mitjana en el desenvolupament d'ESKD era de 44,9 a 15,4 anys.17 En canvi, investigacions recents utilitzant diferents cohorts van indicar que el temps mitjà de supervivència renal en 104 pacients amb ADTKD-MUC1 tenia 36 anys (rang interquartil: 30-46 anys), cosa que es pot explicar per l'exclusió dels familiars afectats que no van ser sotmesos a anàlisi genètica.16 A més, s'han informat variacions interfamiliars i intrafamiliars en pacients. amb variants de MUC1,8,17,18 encara que es desconeix l'existència de gens modificadors o altres factors. En el mateix període d'estudi, també vam detectar mutacions en HNF1B, un gen causant d'ADTKD, en 19 pacients. No obstant això, els pacients amb sospita clínica de mutacions HNF1B van ser exclosos del nostre estudi en el moment del registre, ja que la majoria d'aquests pacients eren clínicament distingibles d'aquells amb ADTKD-MUC1 a causa d'anomalies morfològiques en el sistema urinari renal i/o una història familiar autosòmica dominant de diabetis d'inici precoç i/o hipomagnesèmia, i ja hem informat anteriorment sobre aquesta població de pacients. quina fibrosi tubulointersticial renal és la principal manifestació perquè només uns pocs casos presenten només malaltia tubulointersticial.1,20 Es creu que l'anèmia infantil, la hipotensió lleu i la hiperpotasèmia lleu són característiques específiques de l'ADTKD-REN. No obstant això, un estudi de cohort internacional recent sobre les característiques clíniques de 111 pacients amb ADTKD-REN va informar que aproximadament el 70% dels pacients es van presentar a institucions mèdiques per malaltia renal crònica o gota.21 Segons aquest informe, l'anèmia infantil estava present en el 75,8% dels pacients. pacients, però la seva gravetat era relativament lleu; Els nivells mitjans d'hemoglobina van ser de 9,6, 10,1 i 10,5 g/dl per a edats<10 years, 10 to <15 years, and 15 to <20 years, respectively.21 Although hypotension was not reported in the article, the severity of hyperkalemia was mild and the mean serum potassium level in patients who were not taking fludrocortisone was 4.8 mEq/l.21 Childhood anemia, hypotension, or hyperkalemia may often be overlooked, and they are not always specific to ADRKD-REN; thus, we did not exclude participants with these findings. ADTKD-SEC61A1 is much rare than other ADTKD subtypes, with 6 families reported as of date.22 Patients harboring SEC61A1 mutation present with specific features, such as intrauterine growth retardation, cleft palate, congenital anemia, neutropenia, and immunodeficiency.3,22 Although the clinical manifestations of ADTKD-REN have not been completely clarified owing to the small number of reported cases, patients presenting with these specific features can be clearly distinguished from those with ADTKD-MUC1.

Cistanche tubulosa

Estudis recents sobre els mecanismes moleculars i cel·lulars d'ADTKD-MUC1 han revelat que aquesta condició és una proteinopatia tòxica causada per l'acumulació intracel·lular de proteïna MUC1 mal plegada.11,23 Dvela-Levitt et al.24 van informar de l'ús d'una petita molècula, BRD4780. , per redirigir la via secretora als lisosomes, revelant que els MUC1fs es van eliminar en ratolins col·locats i organoides del pacient i destacant el potencial terapèutic de BRD4780. En conseqüència, un diagnòstic precís de les variants de MUC1 pot ser crucial per al desenvolupament d'agents terapèutics efectius. El nostre estudi tenia diverses limitacions. En primer lloc, tots els participants del nostre estudi eren japonesos i la nostra mida de la mostra era petita a causa de la curta durada de l'estudi. Atesa la naturalesa retrospectiva d'aquest estudi, tampoc hem pogut obtenir informació clínica longitudinal, com ara el pronòstic renal. En segon lloc, es van observar insercions d'una sola base fins i tot en al·lels sense mutacions. A causa de l'elevada taxa d'error, va ser difícil aconseguir un muntatge d'alta qualitat per detectar variants o indels d'un sol nucleòtid mitjançant un LRS. Va ser necessari combinar tecnologies de seqüenciació per detectar tots els diferents tipus de variacions genètiques, la qual cosa augmenta el cost i la complexitat dels projectes. Així, PacBio va idear un nou sistema de seqüenciació, anomenat seqüenciació de consens circular. La seqüenciació de consens circular produeix lectures d'alta fidelitat amb un 99,8 per cent de precisió i una longitud mitjana de 13,5 quilobases, la qual cosa redueix dràsticament la taxa d'error de seqüenciació.25 Aquest mètode de seqüenciació també es va aplicar al nostre estudi. Per tant, tenint en compte les millores en la precisió de la seqüenciació, les insercions d'una sola base possiblement van ser causades per un error de PCR. Tot i que la KOD Hot Start DNA polimerasa es va optimitzar per a l'amplificació de les dianes més difícils26, altres DNA polimerases, la fidelitat de les quals és superior a la de KOD (per exemple, Phusion), poden contribuir a reduir la taxa d'error de PCR27. els estudis han trobat un protocol lliure d'amplificació per a l'enriquiment dirigit mitjançant el sistema de repeticions palindròmiques curtes/Cas9 agrupades regularment entre espais.28,29 Aquest nou mètode probablement proporcionaria millors resultats. En tercer lloc, no hem validat un mètode alternatiu que pugui facilitar un diagnòstic, com ara la immunotinció de mostres de ronyó o cèl·lules derivades de l'orina. Kirby et al., 5 que van informar per primer cop de la mutació causant d'ADTKD-MUC1, van realitzar una anàlisi immunohistoquímica de mostres de ronyó de pacients amb mutacions MUC1. Van informar que, tot i que la immunotinció en controls normals va donar lloc a una tinció inespecífica, els pacients amb mutacions de MUC1 presentaven un patró de tinció intracel·lular específic al bucle de Henle, túbuls distals i conductes col·lectors.5 S'han informat anàlisis d'immunotinció similars de la proteïna MUC1 mutant. 11,13,18,30 Yamamoto et al.15 van detectar proteïna MUC1 mutant en exosomes d'orina. Tot i que les manifestacions clíniques d'ADTKD-MUC1 no són específiques, aquestes anàlisis no genètiques poden donar suport al diagnòstic clínic. Per tant, cal verificar la utilitat d'aquestes anàlisis no genètiques juntament amb els resultats del nostre estudi. En conclusió, el nostre estudi revela que l'anàlisi genètica combinada amb SRS i LRS és útil per detectar variants de MUC1 VNTR en una cohort japonesa i que la prevalença d'ADTKD-MUC1 pot ser alta en aquesta població. L'anàlisi genètica combinada amb SRS i LRS és probable que millori la taxa de diagnòstic d'ADTKD-MUC1 i pot contribuir al desenvolupament d'enfocaments de tractament òptims.

REFERÈNCIES

1. Eckardt KU, Alper SL, Antignac C, et al. Malaltia renal tubulointersticial autosòmica dominant: diagnòstic, classificació i gestió: un informe de consens KDIGO. Ronyó Int. 2015;88:676–683. https://doi.org/10. 1038/ki.2015.28

2. Bolar NA, Golzio C, Zivná M, et al. Les mutacions heterozigotes amb pèrdua de funció SEC61A1 causen malaltia renal túbul-intersticial i glomeruloquística autosòmica dominant amb anèmia. Am J Hum Genet. 2016;99:174–187. https://doi.org/ 10.1016/j.ajhg.2016.05.028

3. Devuyst O, Olinger E, Weber S, et al. Malaltia renal tubulointersticial autosòmica dominant. Nat Rev Dis Primers. 2019;5: 60. https://doi.org/10.1038/s41572-019-0109-9

4. Patton S, Gendler SJ, Spicer AP. La mucina epitelial, MUC1, de la llet, la glàndula mamària i altres teixits. Biochim Biophys Acta. 1995;1241:407–423. https://doi.org/10.1016/0304-4157 (95)00014-3

5. Kirby A, Gnirke A, Jaffe DB, et al. Les mutacions que causen la malaltia renal quística medul·lar tipus 1 es troben en un gran VNTR en MUC1 perdut per una seqüenciació massivament paral·lela. Nat Genet. 2013;45: 299–303. https://doi.org/10.1038/ng.2543

6. Ekici AB, Hackenbeck T, Morinière V, et al. La fibrosi renal és la característica comuna de les malalties renals tubulointersticials autosòmiques dominants causades per mutacions en mucina 1 o uromodulina. Ronyó Int. 2014;86:589–599. https://doi.org/10.1038/ki. 2014.72

7. Wenzel A, Altmueller J, Ekici AB, et al. La seqüenciació en temps real d'una molècula única a ADTKD-MUC1 permet el muntatge complet del VNTR i el posicionament exacte de les mutacions causants. Ciència Rep. 2018;8:4170. https://doi.org/10.1038/s41598-018-22428-0

8. Wang GQ, Rui HL, Dong HR, et al. La seqüenciació SMRT es va revelar com un mètode eficaç per al diagnòstic d'ADTKD-MUC1 mitjançant l'anàlisi de seguiment d'una família xinesa. Ciència Rep. 2020;10:8616. https://doi.org/10.1038/s41598-020-65491-2

9. Richards S, Aziz N, Bale S, et al. Estàndards i directrius per a la interpretació de variants de seqüència: una recomanació de consens conjunt de l'American College of Medical Genetics and Genomics i l'Associació per a la Patologia Molecular. Genet Med. 2015;17:405–424. https://doi.org/10.1038/ gim.2015.30

10. Kanda Y. Investigació del programari d'ús gratuït "EZR" per a estadístiques mèdiques. Trasplantament de medul·la òssia. 2013;48:452–458. https://doi.org/10.1038/bmt.2012.244

11. Robinson JT, Thorvaldsdóttir H, Winckler W, et al. Visor de genòmica integradora. Nat Biotechnol. 2011;29:24–26. https://doi. org/10.1038/nbt.1754

12. Zivná M, Kidd K, P ristoupilová A, et al. Diagnòstic immunohistoquímic no invasiu i noves mutacions MUC1 que causen malaltia renal tubulointersticial autosòmica dominant [la correcció publicada apareix a J Am Soc Nephrol. 2020;31: 892]. J Am Soc Nephrol. 2018;29:2418–2431. https://doi.org/ 10.1681/ASN.2018020180

13. Cormican S, Connaughton DM, Kennedy C, et al. Malaltia renal tubulointersticial autosòmica dominant (ADTKD) a Irlanda. Ren Fail. 2019;41:832–841. https://doi.org/10.1080/ 0886022X.2019.1655452

14. Gast C, Marinaki A, Arenas-Hernandez M, et al. Malaltia renal tubulointersticial autosòmica dominant: la UMOD és la malaltia renal genètica no poliquística més freqüent. BMC Nephrol. 2018;19:301. https://doi.org/10.1186/s12882-018- 1107-y

15. Yamamoto S, Kaimori JY, Yoshimura T, et al. L'anàlisi d'una família ADTKD amb una nova mutació de canvi de marc en MUC1 revela trets característiques de la proteïna MUC1 mutant. Trasplantament de Nephrol Dial. 2017;32:2010–2017. https://doi.org/10. 1093/ndt/gfx083

16. Olinger E, Hofmann P, Kidd K, et al. Espectres clínics i genètics de la malaltia renal tubulointersticial autosòmica dominant a causa de mutacions en UMOD i MUC1. Ronyó Int. 2020;98:717–731. https://doi.org/10.1016/j.kint.2020.04.038

17. Bleyer AJ, Kmoch S, Antignac C, et al. Presentació clínica variable d'una mutació MUC1 causant malaltia renal quística medul·lar tipus 1. Clin J Am Soc Nephrol. 2014;9:527– 535. https://doi.org/10.2215/CJN.06380613

18. Ayasreh N, Bullich G, Miquel R, et al. Malaltia renal tubulointersticial autosòmica dominant: presentació clínica de pacients amb ADTKD-UMOD i ADTKD-MUC1. Am J Kidney Dis. 2018;72:411–418. https://doi.org/10.1053/j.ajkd.2018.03. 019

Eri Okada1,2 , Naoya Morisada1,3 , Tomoko Horinouchi1 , Hideki Fujii4 , Takayuki Tsuji5 , Masayoshi Miura6 , Hideyuki Katori7 , Masashi Kitagawa8 , Kunio Morozumi9 , Takanobu Toriyama10, Natsuki A. do1, Yuya Aoto1, Shinya Ishiko1 , Rini Rossanti1 , Nana Sakakibara1 , China Nagano1 , Tomohiko Yamamura1 , Shingo Ishimori1 , Joichi Usui2 , Kunihiro Yamagata2 , Kazumoto Iijima13,14, Toshiyuki Imasawa15 i Kandai Nozu1