Les respostes dicotòmiques a la hipòxia fetal crònica condueixen a un fenotip d'envelliment predeterminat Ⅱ
Nov 29, 2023
Hipòxic
Ronyons fetals
Mostra un perfil d'expressió de proteïnes desregulada Per dilucidar les vies moleculars que subjauen a la IUGR impulsada per la hipòxia, els ronyons acabats de aïllar de fetus E18.5 hipòxics o normoxics es van sotmetre a un perfil de proteoma de baix a dalt mitjançant un sistema nano-LC (Dionex UltiMate 3{{9). }}00 RSLC) acoblat a un espectròmetre de masses orbital d'alta resolució (Thermo QExactive). L'anàlisi dels components principals va mostrar diferències sorprenents entre els ronyons hipòxics i normoxics (Fig. 2A). En total, es van identificar 6307 proteïnes (FDR < 0, 01, taula suplementària S2) de les quals 436 estaven significativament desregulades (FDR < 0, 05); 284 amb abundància augmentada i 152 amb abundància disminuïda. L'agrupació d'anotacions funcionals mitjançant l'ontologia gènica (18-20) va revelar l'enriquiment de proteïnes específiques d'unió a l'ADN, mitocondrial, lisosomal, ARN i ADN, així com proteïnes implicades en processos metabòlics específics o respostes immunitàries innates (Fig. 2, B-D) . Hem categoritzat aquestes proteïnes pel que fa a (1) formació de nefrones, (2) adaptació metabòlica i (3) envelliment accelerat, tal com es presenta i es comenta als paràgrafs següents.
La replicació de l'ADN reprimit i la síntesi de proteïnes contribueixen a la formació restringida de noves nefrones en la hipòxia crònica
Els esdeveniments adversos durant el desenvolupament, com ara la hipòxia fetal crònica, s'han demostrat freqüentment associats a un nombre reduït de nefrones (27, 29-32). No obstant això, poques vegades es podria demostrar un mecanisme subjacent que expliqui de manera convincent aquesta troballa. L'agrupament de les 64 proteïnes desregulades que pertanyen als termes GO "DNA-binding" i "RNA-binding" (un mapa de calor es mostra a la Fig. S2 suplementària) mitjançant la base de dades STRING (22) va revelar múltiples subxarxes incloent reparació de l'ADN, replicació de l'ADN, splicing d'ARNm i proteïnes ribosòmiques (Fig. 3A). A la figura 3B (FDR <0.05) es mostra una llista més completa de processos o vies enriquides. D'aquests "ribosoma" i "replicació de l'ADN" es trobaven entre els termes principals de les proteïnes reprimides, mentre que l'empalmament de l'ARNm i la "degradació de l'ARN" es trobaven entre els termes principals de les proteïnes induïdes. Els processos de reparació de l'ADN van mostrar un patró d'expressió bipartit. Aquí, es van reprimir les proteïnes implicades en l'excisió de nucleòtids o en la reparació de desajustaments, però es van induir aquelles que mediaven la "reparació de l'excisió de la base". A més, el nivell d'abundància de l'inhibidor del cicle cel·lular p27Kip1 va augmentar dues vegades (Fig. 3C) i el del marcador de proliferació Ki67 es va reduir 3.4- vegades (Fig. 3D), cosa que en conjunt indica una desacceleració de la cèl·lula. procés de divisió. En particular, el nivell d'expressió d'ARNm de Mki67, el gen que codifica per Ki67, es va reprimir significativament en cèl·lules tubulars proximals primàries del ratolí cultivades en condicions hipòxiques (Fig. 3E). Aquesta repressió va ser mediada per la hipermetilació de la regió promotora de Mki67 en ronyons fetals hipòxics (Fig. 3F). Així, en els ronyons hipòxics fetals, la síntesi d'ADN, la traducció de l'ARNm i la majoria dels processos de reparació de l'ADN sembla que es redueixen, reduint la capacitat de les cèl·lules de créixer i proliferar. En conjunt aquí, per primera vegada, les dades de perfils de proteoma proporcionen proves moleculars que poden explicar la disminució de la formació de nefrones.
El sistema immunitari innat i l'estrès oxidatiu s'activen en condicions hipòxiques cròniques
Un dels termes més enriquits que apareixen en l'anàlisi d'anotacions funcionals de les 436 proteïnes i el més important per a les proteïnes induïdes va ser la "desgranulació de neutròfils" (Fig. 2, B i C), que indica una activació contínua del sistema immunitari innat enronyons fetals hipòxics. De les 34 proteïnes associades, 29 van ser induïdes i cinc reprimides (rosa a la figura 4A). Entre les proteïnes induïdes hi havia molts enzims glicolítics i relacionats amb lisosomes, diversos membres de la família de proteïnes S100A, el factor inhibidor de la migració de macròfags de citocines inflamatòries (MIF), així com les proteïnes de grànuls primàries i secundàries proteïnes de grànuls neutròfils (NGP), mieloperoxidasa (MPO) , catelicidina (CAMP), proteïna de reconeixement de peptidoglicans 1 (PGLYRP1) i lactoferrina (LTF). Per verificar la invasió prevista de neutròfils als ronyons fetals hipòxics i descobrir la seva ubicació dins del teixit, es van tacar seccions renals per MPO. Les cèl·lules MPO positives van formar grups a la zona nefrogènica de l'escorça renal, a la proximitat dels vasos sanguinis, adjacents al túbul proximal, i ocasionalment es podien trobar a les regions medul·lars de mostres hipòxiques (Fig. 4D i Fig. S3, A suplementària). –C). En canvi, els ronyons fetals normoxics no van mostrar infiltració ni acumulació de neutròfils (Fig. 4C). Es va demostrar que la caveolina-1 (CAV1) millora la migració transcel·lular de les cèl·lules immunitàries (33). En conseqüència, CAV1 es va induir en ronyons fetals hipòxics (figura suplementària S3D), mostrant una tinció millorada dels vasos sanguinis renals, inclosos els que travessen la regió cortical del ronyó fetal (Fig. 4, E i F). La desgranulació dels neutròfils produeix una explosió local d'espècies reactives d'oxigen que condueix a un augment de l'estrès oxidatiu i danys als teixits, inclosa l'oxidació de l'ADN. Un marcador important de l'oxidació de l'ADN és la 8-hidroxi{-2'-desoxiguanosina (8-OHdG), que es va potenciar als túbuls proximals i a la zona nefrogènica dels ronyons fetals hipòxics (Fig. 4, G i H), a les proximitats de l'agrupament de neutròfils. Aquest augment de l'ADN danyat per 8-OHdG es va produir malgrat una inducció simultània de MGMT i OGG1 (Fig. 4, I i J), dos enzims responsables de l'eliminació de 8-OHdG. Aquests resultats demostren una activació contínua del sistema immunitari innat al ronyó en desenvolupament, que provoca encara més danys als teixits a més de l'estrès hipòxic. Juntament amb la reparació ineficaç d'aquestes lesions tissulars, es podria iniciar un cercle viciós que perjudiqui encara més la nefrogènesi.
FIG. 2. El perfil proteòmic revela múltiples canvis associats a la hipòxia. A, l'anàlisi dels components principals de les dades proteòmiques va mostrar una clara separació entre els ronyons fetals normoxics i hipòxics. B-D, agrupació d'anotacions funcionals de totes les proteïnes significativament desregulades (B), proteïnes induïdes (C) i proteïnes reduïdes (D) La fracció significativament canviada d'una via (eix x) es representa en funció de la seva importància d'enriquiment (y- eix). La mida de cada punt codifica el nombre total de membres d'aquesta via. Les proteïnes induïdes van mostrar un enriquiment de processos metabòlics (glicòlisi), proteïnes mitocondrials o lisosomals i proteïnes implicades en la resposta del sistema immunitari (desgranulació de neutròfils), mentre que les proteïnes reduïdes s'enriqueixen per a vies d'unió a l'ADN i l'ARN (un constituent estructural del ribosoma).
(PGLYRP1) i lactoferrina (LTF). Per verificar la invasió prevista de neutròfils als ronyons fetals hipòxics i descobrir la seva ubicació dins del teixit, es van tacar seccions renals per MPO. Les cèl·lules MPO positives van formar grups a la zona nefrogènica de l'escorça renal, a la proximitat dels vasos sanguinis, adjacents al túbul proximal, i ocasionalment es podien trobar a les regions medul·lars de mostres hipòxiques (Fig. 4D i Fig. S3, A suplementària). –C). En canvi, els ronyons fetals normoxics no van mostrar infiltració ni acumulació de neutròfils (Fig. 4C). Es va demostrar que la caveolina-1 (CAV1) millora la migració transcel·lular de les cèl·lules immunitàries (33). En conseqüència, CAV1 es va induir en ronyons fetals hipòxics (figura suplementària S3D), mostrant una tinció millorada dels vasos sanguinis renals, inclosos els que travessen la regió cortical del ronyó fetal (Fig. 4, E i F). La desgranulació dels neutròfils produeix una explosió local d'espècies reactives d'oxigen que condueix a un augment de l'estrès oxidatiu i danys als teixits, inclosa l'oxidació de l'ADN. Un marcador important de l'oxidació de l'ADN és la 8-hidroxi-2'-desoxiguanosina (8-OHdG), que es va potenciar als túbuls proximals i a la zona nefrogènica dels ronyons fetals hipòxics (Fig. 4, G i H), a les proximitats de l'agrupament de neutròfils. Aquest augment de l'ADN danyat per 8-OHdG es va produir malgrat una inducció simultània de MGMT i OGG1 (Fig. 4, I i J), dos enzims responsables de l'eliminació de 8-OHdG. Aquests resultats demostren una activació contínua del sistema immunitari innat al ronyó en desenvolupament, que provoca encara més danys als teixits a més de l'estrès hipòxic. Juntament amb la reparació ineficaç d'aquestes lesions tissulars, es podria iniciar un cercle viciós que perjudiqui encara més la nefrogènesi.
Les adaptacions metabòliques a la hipòxia donen lloc a una pronunciada glucòlisi al ronyó fetal
La hipòxia crònica és una malaltia greu a la qual les cèl·lules s'han d'adaptar mitjançant canvis metabòlics per sobreviure. El més important d'això és el manteniment de la producció cel·lular d'ATP que, en absència d'oxigenació suficient, requereix un canvi de la fosforilació oxidativa a la glucòlisi. De tots els termes resultants de l'anotació funcional, el "procés glicolític" va ser el més significatiu (Fig. 2B). Els deu enzims (vermell ①–⑩ a la figura 5A) necessaris per a la conversió de glucosa en piruvat es van induir enronyons hipòxics fetalsen comparació amb els controls normoxics (a la figura 5C es mostra un mapa de calor). A més, també es van millorar les expressions del transportador de glucosa 1 (SLC2A1, taronja a la figura 4A) i la lactat deshidrogenasa A (LDHA, vermell fosc a la figura 5A), cosa que hauria de facilitar l'augment de la captació de glucosa a la cèl·lula i la reducció augmentada de piruvat a lactat, respectivament. La utilització alternativa del piruvat en el cicle de l'àcid cítric semblava estar impedida (1) per l'expressió millorada de la piruvat deshidrogenasa quinasa 1 (PDK1, vermell fosc a la figura 5A), que inactiva el complex de piruvat deshidrogenasa als mitocondris i, per tant, l'oxidació del piruvat. a acetil-CoA; i (2) per nivells reduïts de piruvat carboxilasa (PC), que catalitza la conversió de piruvat a oxalacetat. D'altra banda, la fructosa-1,6-bisfosfatasa 1 (FBP1, blau a la figura 5A) es va reduir, augmentant encara més el flux potencial de glucosa cap al piruvat. Tots aquests canvis enzimàtics afavoreixen la producció de lactat i, de fet, la concentració de lactat va augmentar en els ronyons fetals hipòxics (Fig. 5B). L'augment de la producció de lactat pot conduir a una acidificació desfavorable. No obstant això, vam trobar entre les proteïnes enriquides els transportadors de monocarboxilats SLC16A3 i SLC5A8 (taronja a la figura 5A), que se sap que excreten lactat a l'espai extracel·lular per evitar els efectes tòxics de l'acidificació citoplasmàtica. Així, el nostre model demostra la notable capacitat dels ronyons fetals per adaptar-se a la hipòxia crònica augmentant l'activitat glicolítica,
FIG. 3. La formació de noves nefrones en la hipòxia s'associa amb la replicació de l'ADN reprimit i la síntesi de proteïnes. Una xarxa d'interacció de proteïnes de proteïnes d'unió a l'ADN i l'ARN que han canviat significativament derivades de la base de dades STRING mostra diversos grups de proteïnes: proteïnes ribosòmiques (blau), proteïnes implicades en la replicació de l'ADN (verd), reparació de l'ADN (morat) i splicing de l'ARNm. vermell). El marcador de proliferació Ki67 (Mki67) està marcat en negre, destacant la seva estreta relació amb la reparació de l'ADN i la replicació de l'ADN. B, una selecció de vies de proteïnes d'unió a l'ADN i l'ARN significativament canviades de les bases de dades KEGG i Reactome que van mostrar les alteracions més destacades enronyons hipòxics, representat en ordre decreixent de significació. Els processos d'empalmament i degradació de l'ARN es van enriquir (vermell), mentre que es van reprimir les vies de traducció de l'ARN, replicació de l'ADN i reparació (blau). Només els processos amb un FDR<0.05 are shown. C and D, the cell cycle inhibitor p27Kip1 was enhanced (unpaired two-tailed t test, Welch's correction, p = 0.0095), whereas the expression of the proliferation marker Ki67 was reduced (unpaired two-tailed t test, Welch's correction, p = 0.0078) in hypoxic fetal kidneys. E, hypoxia reduced the mRNA expression level of Mki67 in mouse primary proximal tubular cells (unpaired two-tailed t test, p < 0.0001). F, this reduction was mediated by hypermethylation of the Mki67 promoter in hypoxic fetal kidneys. Open circle unmethylated, black circle methylated (Fisher's exact test, p = 0.0016; Mann–Whitney U-test, p = 0.0431)
FIG. 4. Les proteïnes implicades en la resposta inflamatòria i l'estrès oxidatiu s'enriqueixen en nefrones de nova formació sota hipòxia. A, representació de les 34 proteïnes canviades significativament per a l'anotació anomenada desgranulació de neutròfils (cercles rosats) entre totes les proteïnes significatives (cercles grisos més grans) i no significatives (cercles grisos més petits) del nostre conjunt de dades. 29 tenien un nivell d'abundància més alt, mentre que cinc eren reduïts. B, un mapa de calor que mostra totes les proteïnes roses a (A) i la seva inducció o repressió a la hipòxia, representades en ordre decreixent d'abundància de proteïnes. C–H, imatges immunohistoquímiques representatives de E18.5 normoxic oronyons hipòxicsmostrant la infiltració de neutròfils i l'estrès oxidatiu. C i D, la immunohistoquímica per al marcador de neutròfils mieloperoxidasa (MPO) va revelar l'agrupació d'aquestes cèl·lules a la proximitat de les nefrones de nova formació (asterisc) i adjacents als vasos sanguinis renals (punta de fletxa) dels ronyons fetals hipòxics (D). En els controls normoxics (C), les cèl·lules MPO positives poques vegades estaven presents. (Barres d'escala 100 μm). E i F, immunohistoquímica que representa una expressió millorada de caveolina -1 (CAV1) als vasos sanguinis renals dels ronyons fetals hipòxics (F) en comparació amb els controls (E) (Barres d'escala 200 μm). G i H, 8-hidroxi-2′-desoxiguanosina (8-OHdG), un marcador de dany oxidatiu a l'ADN, es va millorar de manera destacada en les nefrones de nova formació (asterisc) a l'escorça renal i en cèl·lules dels túbuls proximals (fletxa) dels ronyons hipòxics (H), mentre que només poques cèl·lules es van tacar al teixit normòxic (G) (Barres d'escala 200 μm). I i J, aquest augment del dany a l'ADN es va produir malgrat un augment simultani de l'O-6-metilguanina-ADN metiltransferasa (MGMT; prova t de dues cues no aparellades, p=0,0002) (I) i {{ 15}}oxo guanina glicosilasa (OGG1; prova t de dues cues no aparellades, p=0.0063) (J), dos enzims implicats en la reparació de l'ADN oxidat.
que garanteix la producció i la supervivència suficients d'ATP en aquesta condició adversa.
La hipòxia fetal promou la importació compensatòria de proteïnes mitocondrials i el muntatge de la cadena respiratòria
A més de la glucòlisi millorada, hem trobat múltiples alteracions en els nivells d'abundància de proteïnes mitocondrials (un mapa de calor es mostra a la figura suplementària S4). La generació de xarxes de proteïnes mitjançant STRING va revelar diversos grups que comprenien proteïnes implicades en la translocació de proteïnes a mitocon.dria, fosforilació oxidativa i proteïnes ribosòmiques mitocondrials (Fig. 5, D i E). Cal destacar que es van induir múltiples proteïnes vinculades a la membrana mitocondrial interna, el lloc on té lloc la fosforilació oxidativa (OXPHOS). OXPHOS engloba cinc complexos multiproteics disposats al llarg de la membrana mitocondrial interna. Entre les proteïnes induïdes hi havia components dels complexos OXPHOS (NDUSF6), III (UQCR10), IV (COX6B1, COXC i COX7A2) i V (ATP5J, MTATP8), però també UQCC3 i SCO2, que són necessaris per al correcte muntatge i funció. de complex i IV, respectivament (Fig. 5D i suplementària Fig. S4). SDHC i SDHD, subunitats del complex ll, també estaven preregulades (1.6- i 2.5-vegades, respectivament), però no van assolir significació estadística. A més, no només els components de la cadena respiratòria es van enriquir en fetalronyons hipòxics, però també una multitud de proteïnes que medien la seva importació als mitocondris. Això incloïa membres de la translocasa de la membrana externa (TOM - TOMM22) i del complex de translocasa de membrana interna TIM22 (TIMM22, TIMM9 i TIMM10 i el complex TIMM8-TIMM{13- associat (Fig. 5D i figura suplementària). S4) Entre les 21 proteïnes mitocondrials amb abundància reduïda hi havia quatre proteïnes ribosòmiques mitocondrials, així com proteïnes implicades en el catabolisme d'aminoàcids, la biosíntesi de vitamines o la beta-oxidació d'àcids grassos (Fig. 5, D i E, i la figura suplementària). S4). Aquestes troballes apunten a evitar una possible disfunció mitocondrial i esforços aparents per regenerar proteïnes danyades (34), malgrat la glucòlisi millorada i la síntesi de proteïnes reduïda en general.
Es milloren la biogènesi i l'autofàgia lisosomalsRonyons fetals hipòxicsEl lisosoma va ser el segon orgànul que sembla estar enriquit en condicions hipòxiques. Tanmateix, en comparació amb els mitocondris, on es reduïen el 36% de les proteïnes, gairebé totes les proteïnes relacionades amb els lisosomes estaven regulades (Fig. 6, A i B). Entre elles hi havia nou hidrolases àcides lisosomals, que representaven gairebé el 20% de les hidrolases àcides lisosomals anotades a la via KEGG per als lisosomes: quatre pro teases (CTSA, CTSF, CTSZ, TPP1), tres glicosidases (GAA, NAGA, NEU1), la lisosomal la fosfatasa àcida 2 (ACP2) i la lipasa àcida lisosomal A (LIPA). A més, vam trobar evidències d'una major biogènesi de lisosomes i orgànuls relacionats. Tres dels vuit components BLOC1 (biogènesi del complex 1 d'orgànuls relacionats amb lisosomes) es van induir significativament (Fig. 6, C-E), així com el transportador d'intercanvi H/Cl 5 (CLCN5), que és un actor crucial en el acidificació dels endosomes (Fig. 6F). Cal destacar que Snapin (subunitat 7 BLOC1) també té un paper en l'acidificació lisosomal i en la maduració i funció de l'autofagosoma. Altres proteïnes induïdes que se sap que tenen un paper en l'autofàgia van ser Atg7 i Bnip3 (Fig. 6, G i H). Un altre requisit per al flux autofàgic és l'agrupament perinuclear de lisosomes, mediat pel complex Ragulator lisosomal (35, 36) i dues famílies de proteïnes motores oposades. Sorprenentment, quatre dels cinc membres de les subunitats de bastida del Regulador (LAMTOR1, 2, 3 i 5) van ser induïts significativament (Fig. 6, A i B); LAMTOR4 també va ser induït 1.81-vegament, però no va assolir significació estadística. A més, les kinesines, que medien el moviment cap a l'exterior dels orgànuls, van mostrar una tendència a ser reprimides, mentre que els membres de la família de la dineïna que faciliten el moviment cap a dins van ser induïts, encara que no estadísticament significatius (figura suplementària S5). Col·lectivament, aquestes troballes proporcionen una forta evidència que la funció de neteja dels lisosomes es milloraronyons hipòxics fetals, totalment compatible amb la necessitat prevista de renovar els mitocondris danyats.
Prematur
L'envelliment exemplifica els aspectes de l'adaptació hipòxica davant de Janus En contra dels mecanismes compensatoris de reparació i rejoveniment, hem trobat 15 de les proteïnes desregulades que pertanyen al terme GO "envelliment" (Fig. 7A), que representen la tercera categoria d'adaptacions hipòxiques: envelliment accelerat. . Tot i que la majoria d'aquestes proteïnes tenen un paper en un dels processos descrits anteriorment, la desgranulació de neutròfils i el lisosomes (MIF, MPO, PSEN1), els mitocondris (NDUFS6, FADS1, MTCO1, CYP27B1), la glucòlisi (ALDOC) i la reparació de l'ADN (OGG1) ; S'ha descrit que alguns afecten directament la vida útil dels ratolins. En particular, l'abundància de proteïnes tant de klotho com de sirtuïna 6 es va reduir en E18.5 hipòxicronyons fetals(Fig. 7, B i C). La sirtuina 6 és un enzim expressat de manera ubiqua amb proteïna desacetilasa i activitat mono-ADP ribosil transferasa implicada en la regulació de diverses funcions cel·lulars, com ara la inflamació, la glucòlisi i la reparació de l'ADN. El seu knockout condueix a una progèria severa en ratolins amb una vida útil reduïda d'1 a 3 mesos (37, 38). El ronyó és el lloc principal de la síntesi de klotho (és a dir, el túbul contornejat distal: la DCT aporta la majoria de la proteïna amb síntesi addicional als túbuls contornejats proximals), on actua localment com a beta-glucuronidasa unida a la membrana. La reducció de l'abundància de klotho sembla ser un procés específic, ja que altres proteïnes de la DCT inclosa CALB1 no es van alterar. Klotho també es secreta a la circulació, ja sigui per clivage de la part extracel·lular de la forma unida a la membrana o per traducció d'una variant d'empalmament alternativa. El nivell de klotho circulant (sKL) disminueix amb l'edat (39, 40), fet que ens va impulsar a valorar la seva concentració i la de sirtuïna 6 a la sang troncal de fetus E18.5 hipòxics o normoxics. De fet, les concentracions de sKL i sirtuïna 6 es van reduir significativament en fetus E18.5 hipòxics (Fig. 7, D i E). A més i més important, els nivells sèrics de klotho i sirtuina 6 també es van reduir significativament en ratolins vells (Fig. 7, F i G), cosa que indica una reducció permanent d'aquestes dues proteïnes al llarg de la vida. Per a Klotho, això sembla que es deu a una reducció significativa dels nivells d'expressió d'ARNm als ronyons de la descendència hipòxica de 15-mes d'edat (Fig. 7H). No obstant això, els nivells d'expressió d'ARNm renal de sirtuïna 6 no van canviar entre els ratolins normoxics i hipòxics (Fig. 7I). A més, s'ha demostrat que els canvis en la metilació de l'ADN són un dels mecanismes més importants no només per a la renovació i diferenciació de les cèl·lules progenitores de la nefrona (41), sinó també per a l'expressió de klotho (42, 43). Tanmateix, a diferència de la hipermetilació de Mki67 (Fig. 3F), el promotor klotho es va hipometilar durant la hipòxia crònica (figura suplementària S6). No es va poder determinar el patró de metilació de Sirt6. Segons el que sabem, el nostre model IUGR és el primer a delinear un mecanisme que condueix a un fenotip d'envelliment prematur, a través de la sinergia de danys inflamatoris, reparació ineficaç, metabolisme alterat i abundància reduïda de proteïnes antienvelliment que ja tenen lloc al néixer.
La reducció de proteïnes antienvelliment en resposta a la hipòxia crònica es conserva entre ratolins i homes En un darrer conjunt d'experiments, ens vam preguntar si la interacció entre la hipòxia crònica i els nivells sèrics reduïts de proteïnes antienvelliment és un fenomen conservat evolutivament. Amb aquesta finalitat, es van recollir mostres de sèrum d'un estudi controlat (10) de nou voluntaris sans (vuit homes i una dona) dues setmanes abans (nivell del mar, SL), en tres moments durant un 28-dia ininterromput. estada a 3454 m (altitud elevada, HA3, HA9, HA28) i 1, 7 i 14 dies després del seu retorn a SL (RSL1, RSL7, RSL14) es van analitzar per sKL i SIRT6 (Fig. 8). Les mostres obtingudes a SL van servir de control per a cada participant. Els nivells sèrics de sKL i SIRT6 van disminuir a altituds elevades i tots dos van assolir rellevància estadística a H28. En tornar al nivell del mar, sKL va augmentar a nivells més alts que abans de l'estada a gran altitud a RSL7 i va tornar a la normalitat a RSL14 (Fig. 8A). D'altra banda, SIRT6 va continuar disminuint en tornar al nivell del mar i només va començar a inclinar-se de nou a RSL14 (Fig. 8B), cosa que suggereix una regulació diferencial d'aquestes dues proteïnes anti-envelliment. En resum, aquestes troballes suggereixen que els nivells sèrics reduïts de klotho i sirtuïna 6 generalment poden requerir l'exposició a condicions hipòxiques cròniques i, per tant, poden representar un procés evolutiu molt conservat.
Servei de suport de Wecistanche: el major exportador de cistanche a la Xina:
Correu electrònic:wallence.suen@wecistanche.com
WhatsApp/Tel:+86 15292862950}
Compreu per obtenir més detalls de les especificacions:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
