Efecte dels polisacàrids del desert de Cistanche sobre les funcions d'aprenentatge i memòria i la ultraestructura de les neurones cerebrals
Mar 10, 2022
Contacte: emily.li@wecistanche.com
Efecte dels polisacàrids de Cistanche Desertica sobre les funcions d'aprenentatge i memòria i la ultraestructura de les neurones cerebrals en ratolins d'envelliment experimental
SUN Yun et al
RESUM ObjectiuPer observar els efectes deCistanchedeserticapolisacàrids(CDP) alFuncions d'aprenentatge i memòriai ultraestructura cerebral en ratolins d'envelliment experimental. Mètodes: CDP(Cistanchedeserticapolisacàrids)es va administrar intragàstricament 50 o 100 mg/kg per dia durant 64 dies successius a ratolins model d'envelliment experimental induït per D-galactosa, i després elFuncions d'aprenentatge i memòriade ratolins es van estimar mitjançant la prova de reducció i la prova de laberint en Y; Els orgànuls del teixit cerebral i la ultraestructura cerebral es van observar mitjançant un microscopi electrònic de transmissió i es va determinar la força física mitjançant una prova de natació. Resultats: òbviament, el CDP podria millorarFuncions d'aprenentatge i memòria(FV0. 01) i allargar el temps de natació (P<0. 05),="" decrease="" the="" number="" of="" lipofuscins="" and="" slow="" down="" the="" degeneration="" of="" mitochondria="" in=""><0.05), and="" improve="" the="" degeneration="" of="" cerebral="" ultra-structure="" in="" aging="" mice.="" qmdusion:="" cdp="">(Cistanchedeserticapolisacàrids)podria millorar la funció fisiològica deteriorada i alleujar el canvi morfològic cerebral en ratolins envellits experimentalment.
PARAULES CLAUenvelliment,Funcions d'aprenentatge i memòria, Cistanche desertica polisacàrids, ultraestructura, D-galactosa
Cistanchedesertica, una herba medicinal aplaudida com "ginseng del desert", té l'efecte especial de reforçar l'os i la medul·la i allargar la vida útil, i el seu efecte anti-envelliment ha estat confirmat per estudis farmacològics moderns"). El procés d'envelliment natural comença amb l'aprenentatge. i la degradació de la memòria, seguida dels canvis degeneratius en les estructures biològiques i morfològiques En aquest article s'ha utilitzat un model de ratolí d'envelliment induït per D-galactosa per observar l'efecte deCistanchedeserticapolisacàrids(CDP) activatFuncions d'aprenentatge i memòriai la força física, així com la ultraestructura dels teixits cerebrals. Els resultats es van informar de la següent manera.
Cistanche té moltes funcions. Feu clic aquí per saber-ne més
MÈTODES
Animal
Els ratolins ICR, de 2 mesos d'edat, del vidre transparent, meitat mascle i meitat femella, amb un pes de 20 a 22 g, es van comprar al Centre d'Animals Experimentals de la Universitat de Yangzhou (certificació núm. 98002). Es van guardar deu ratolins a cada cambra i tots els animals tenien accés lliure a menjar i aigua.
Reactius
La D-galactosa, comprada a la fàbrica farmacèutica número 2 de Xangai, es va combinar amb solució salina normal a 5 g/L i es va reservar a la nevera a 4 graus. CDP(Cistanchedeserticapolisacàrids)va ser proporcionada per l'Institut de Plantes Silvestres de Nanjing, utilitzant aigua destil·lada per combinar-la a 2,5 g/L i 5, 0 g/L. El kit reductor i l'aparell de laberint en Y van ser els productes de Shanghai Haodun Medical Apparatus Company.
Duplicació de models d'envelliment i disseny experimental1,3,
Els ratolins ICR es van dividir aleatòriament en 4 grups: el grup control (els ratolins normals), el grup model d'envelliment; la dosi alta de CDP(Cistanchedeserticapolisacàrids)grup i el CDP a dosis baixes(Cistanchedeserticapolisacàrids)grup, 55 ratolins a cada grup. Per al grup control, 10 ml - kg-1. Es va injectar d_1 solució salina normal per via subcutània a cada ratolí. Pel que fa als altres grups, 50 mg. Es va injectar de forma hipodèrmica kg-1 - d{_1 D-galactosa a cada animal durant 42 dies per duplicar el model d'envelliment. Des de l'inici de la duplicació, es van administrar intragàstricament 20 ml - kg-1 - d-1 de solució salina normal a cada animal del grup del model d'envelliment i 50 mg • kg-1 • d{{16 }}i 100 mg - kg-1 - d-1 CDP(Cistanchedeserticapolisacàrids)es van administrar intragàstricament a cada ratolí en dosis baixes de CDP(Cistanchedeserticapolisacàrids)grup (grup de tractament I) i CDP a dosis altes(Cistanchedeserticapolisacàrids)grup (grup de tractament U) respectivament durant 64 dies.
Sis hores després de l'últim medicament, es van prendre 30 ratolins de cada grup respectivament per provar-loFuncions d'aprenentatge i memòriaper prova de reducció i prova de laberint en Y, 15 per cada prova. La prova de natació per avaluar la tolerància física dels ratolins es va realitzar 2 hores després de l'última medicació amb 15 ratolins de cada grup. A més, 10 ratolins del grup control, el grup model i el grup de tractament H, respectivament, van ser assassinats al final de l'experiment per a l'examen histomorfològic.
Prova de baixada ⑷
Els ratolins es van posar a la cambra de resposta per adaptar-se a l'entorn durant 3 minuts, després es va iniciar l'entrenament connectant l'electricitat a la cambra. El ratolí estava segur quan estava a la plataforma, però quan va saltar al fons de la cambra (un error), l'estimulació elèctrica de 36 V obligaria el ratolí a saltar de nou a la plataforma. L'entrenament es va dur a terme durant 5 minuts, es va registrar el nombre acumulat de vegades d'error en 5 minuts. La prova formal es va dur a terme 24 hores després per provar la capacitat del ratolí a buscar una zona segura per escapar de l'estimulació elèctrica. El ratolí es va posar a la plataforma i es va registrar el temps latent abans del primer error (temps d'estada a la plataforma) i el nombre acumulat de vegades d'error en 5 minuts.
Prova del laberint en Y
El laberint en Y és una caixa de laberint amb tres cambres disposades radialment amb la part inferior feta de barres de coure i obertes una a l'altra. A la part superior es col·loca una làmpada i una font elèctrica està connectada a la part inferior de cada cambra. El llum s'encendrà quan es trenca el circuit elèctric i, aleshores, la cambra és una zona segura per a l'animal. En canvi, quan el circuit elèctric s'activa, la cambra enfosquida es converteix en una zona d'estimulació elèctrica, que provocarà danys elèctrics a l'animal. El ratolí es va col·locar primer al laberint Y durant 2 minuts per adaptar-se a l'entorn, després es va connectar el circuit (36-40 V) a la cambra on es va quedar el ratolí per forçar el ratolí a escapar a la zona segura. L'entrenament es va repetir 15 vegades per consolidar la memòria de l'àrea segura depenent de la llum al ratolí. A continuació, es va registrar el nombre de temps correctes i incorrectes de 10 proves per estimar la taxa correcta.
Prova de natació (1)
El ratolí es va col·locar en un recipient, que tenia 28 cm d'alçada, i es va omplir d'aigua, a 15 graus de temperatura, i nedava a l'aigua fins que s'esgotava i s'ofegava. El temps des de posar-lo a l'aigua fins a la seva submersió es va comptar com a temps de natació, que es va utilitzar per avaluar la tolerància física del ratolí.
Preparació de la mostra d'avaluació histomorfològica ⑶
Deu ratolins extrets del grup control, el grup model d'envelliment i el grup de tractament II, respectivament, van ser decapitats i es va treure l'escorça del cervell esquerre de cada ratolí, doblement fixada per un 4% d'àcid glutaral i un 1% d'àcid osmic, deshidratat gradientment per acetona. incrustat per Epon 812, tenyit per tinció de Pb-U. Els orgànuls principals es van observar al microscopi electrònic de transmissió (TEM, Hitachi H-300, Japó).
Anàlisi estadística
Les dades es van expressar com x més s. Les comparacions estadístiques dels resultats es van realitzar amb la prova t aparellada.
RESULTATS
Efectes del CDP(Cistanchedeserticapolisacàrids)sobre les funcions d'aprenentatge i memòria
La prova de baixada va demostrarFuncions d'aprenentatge i memòriadels ratolins envellits va disminuir de manera més significativa en comparació amb els del grup control, manifestant-se com un temps de latència reduït i un augment dels temps d'error acumulats. El temps de latència es va prolongar i els temps d'error acumulats van disminuir al grup de tractament I i U; es va trobar una diferència significativa en comparació amb el grup del model d'envelliment. Els resultats van mostrar que CDP(Cistanchedeserticapolisacàrids)òbviament podria millorarFuncions d'aprenentatge i memòria. Vegeu la taula 1.
Els resultats de la prova Y-maze van ser similars als de la prova de reducció, que va demostrar que la taxa de memòria de seguretat correcta es va reduir en ratolins envellits. Va existir una diferència significativa quan es van comparar els grups de tractament I i H amb el grup model, cosa que suggereix la taxa de memòria de seguretat correcta augmentada després de CDP(Cistanchedeserticapolisacàrids)tractament.
Efecte del CDP(Cistanchedeserticapolisacàrids)sobre la tolerància física
El temps de natació en ratolins envellits es va escurçar significativament en comparació amb el del grup control. Es va demostrar que només una dosi alta de CDP(Cistanchedeserticapolisacàrids)podria allargar significativament el temps de natació, per tant, tenir la funció anti-fatiga. Vegeu la taula 2.
Efecte del CDP(Cistanchedeserticapolisacàrids)sobre orgànuls a les neurones cerebrals
Amb un microscopi electrònic, es van observar 10 neurones de cada mostra i es va mesurar el nombre d'orgànuls⑷. Els resultats van mostrar que els nivells de lipofuscina i lisosoma van augmentar a les neurones, el nombre de mitocondris i complex de Golgi va disminuir en el grup del model d'envelliment. Els dos criteris es van restaurar fins a cert punt després de dosis grans de CDP(Cistanchedeserticapolisacàrids)tractament. Vegeu la taula 3.
Efecte del CDP(Cistanchedeserticapolisacàrids)sobre l'ultraestructura del teixit cerebral
Es va demostrar que la cresta mitocondrial es va trencar i es va distribuir poc amb degeneració vacuolar. El nombre de cos de NissP es va reduir i la desgranulació va aparèixer en alguns reticles endoplasmàtics de superfície rugosa, el grànul de glicogen es va reduir, el saccule aplanat de Golgicomplex lleugerament dilatat, amb el nombre de sinapsis reduït i el nombre de vesícules sinàptices en el component presinàptic reduït. Vegeu la figura 1.
Fig 1 Els mitocondris es van inflar i la seva sinapsi va desaparèixer a les neurones. Grups de models d'envelliment 10,000
Els canvis degeneratius es van alleujar lleugerament després del CDP(Cistanchedeserticapolisacàrids)tractament amb nucleopors evidentment augmentats, cossos i processos NissPs i lipofuscina reduïda. Vegeu les figures 2 i 3.
Figura 2 Els cossos de neurones de Nissl van reaparèixer i encara es pot veure una mica de lipofuscina. Grup de tractament II, X 10,000
Fig 3 El porus nuclear va augmentar i es pot veure el nuclèol a les neurones, el citoplasma és ric. Grup de tractament K, X 10,000
DISCUSSIÓ
The mechanism of E>-La galactosa en induir l'envelliment es basa en la teoria dels radicals lliures de l'envelliment. Com a resultat, la D-galactosa podria augmentar el contingut de radicals lliures en els organismes i perjudicar les funcions dels orgànuls a través del dany de l'oxidació. Els mitocondris com a "fàbrica d'energia" de les cèl·lules, poden produir molts radicals lliures en el procés respiratori, i aquests radicals lliures podrien atacar-los fàcilment. Els mitocondris d'un organisme envellit són fàcilment danyats pels radicals lliures, el dany no es va poder reparar a causa de la manca de capacitat de reparació.), i s'agreujarien cada cop més fins a la mort definitiva. La lipofuscina és una marca important de l'envelliment, la seva producció està estretament relacionada amb el dany dels radicals lliures, per aquest motiu, sovint s'utilitza com a criteri per avaluar el nivell d'envelliment.
Els resultats d'aquest estudi van mostrar que CDP(Cistanchedeserticapolisacàrids)en dosis altes podria millorar la tolerància física en ratolins envellits i millorar-neFuncions d'aprenentatge i memòria, i alleujar el nivell de dany de la ultraestructura cerebral. Tots aquests resultats coincideixen amb la nostra investigació anterior (1, 2) i van indicar que CDP(Cistanchedeserticapolisacàrids)pot allargar la vida útil, el seu efecte anti-envelliment pot estar relacionat amb la seva capacitat antioxidant i els efectes d'eliminació de radicals lliures⑵ per estabilitzar el sistema de membrana i mantenir un entorn intracel·lular estable.
De: "Efecte dels polisacàrids de Cistanche Desertica sobre les funcions d'aprenentatge i memòria i ultraestructura de les neurones cerebrals en ratolins d'envelliment experimental" de SUN Yun et al.
---CJIM2001;7(4) =288--292
REFERÈNCIES
1. SUN Y, LIN AP, ZHANG HQ. Recerca de XinjiangCistanchedeserticasobre el dany anti-oxidació induït pels radicals lliures. China J Chinese Material Medica 1994; 19 (7): 433.
2. SUN Y, WANG DJ, SHEN SQ, et al. Observació de XinjiangCistanche deserticasobre hepatòcits i escorça cerebral de ratolins envellits mitjançant microscopi electrònic de transmissió. Traditional Chinese Drug Research 1997;8(1) * 30.
3. GONG GQ, XU FB. Estudi del model d'envelliment en ratolins. J China Pharmaceutical University 1991;22(2):101.
4. LI YK. Metodologia experimental d'herbes xineses en farmacologia. Xangai: Science and Technology Publishing House 1991: 172.
5. ZENG ZH, ZHANG ZY. Dany per oxidació de l'ADN mitocondrial i envelliment per radicals lliures. Progr Biochem and Biophys 1995;22(5): 430.
