Eficàcia del tractament combinat d'extractes de Laminaria Japonica i Cistanche Tubulosa en el creixement del cabell

Contacte: emily.li@wecistanche.com

Kyungha Shin1# et al

Atès que la pèrdua de cabell del cuir cabellut ha augmentat recentment fins i tot en els joves, afectant seriosament la qualitat de vida de les persones, lacreixement del cabell-efectes estimulants de l'extracte de Laminaria japonica (LJE) iCistanche tubulosaes van investigar extractes (CTE). Després de confirmar la fase anàgena dels fol·licles sota l'afaitat, els ratolins mascles C57BL / 6 es van aplicar dermicament amb un 3 per cent de Minoxidil o administrats per via oral amb les combinacions de LJE i CTE （Cistanche tubulosaextracte)durant 21 dies. El minoxidil va promoure el creixement del cabell i l'augment de les activitats de la glutamil transpeptidasa (-GTP) i la fosfatasa alcalina (ALP). A més, els nivells de factor de creixement epidèrmic (EGF) i factor de creixement endotelial vascular (VEGF) de Minoxidil. Coadministració de LJE i CTE（Cistanche tubulosaextracte)a 54 mg/kg LJE més 162 mg/kg, CTE (Cistanche tubulosaextracte)va exercir efectes sinèrgics de promoció sobre el creixement del cabell, comparables al 3% de Minoxidil. LJE va millorar preferentment l'activitat ALP, mentre que CTE（Cistanche tubulosaextracte)va augmentar les activitats tant -GTP com ALP, així com les expressions EGF i VEGF. El model d'inflamació de la bossa d'aire in vivo, l'exsudació vascular induïda per carragenina i l'augment de les concentracions d'òxid nítric i prostaglandina E2 als exsudats es van suprimir sinèrgicament mitjançant la coadministració de LJE i CTE.（Cistanche tubulosaextracte). A més, la infiltració de cèl·lules inflamatòries es va inhibir substancialment pel tractament combinat. Els resultats suggereixen que el tractament oral combinat amb LJE i CTE（Cistanche tubulosaextracte)dosis i proporcions inadequades eviten la caiguda del cabell i milloren l'alopècia, que podria estar en part mediada per les seves activitats antiinflamatòries.

Paraules clau Creixement del cabell, inflamació, Laminaria japonica,Cistanche tubulosa, tractament combinat

Cistanche tubulosaextracte té moltes funcions

Recentment, la caiguda del cabell del cuir cabellut ha augmentat fins i tot en els joves, afectant seriosament la qualitat de vida d'un individu. Tot i que la calvície no és un dels problemes de salut, pot causar un estrès social profund psicològicament incòmode. Per tant, és de gran interès desenvolupar nous materials preventius i/o terapèutics per a la caiguda i el creixement del cabell. Malgrat el mercat de mil milions de dòlars, hi ha alguns productes disponibles actualment [1].
Els fol·licles pilosos es remodelen durant els períodes cíclics de creixement (anagen), regressió (catagen), repòs (telogen) i despreniment (exogen) [2]. Durant el catàgen, moltes de les cèl·lules fol·liculars pateixen la mort cel·lular programada (apoptosi) [3], reduint la mida del fol·licle a mesura que els fol·licles entren en telogen. L'activació de cèl·lules mare epitelials rarament ciclades situades a la regió de protuberància dels fol·licles provoca la regeneració fol·licular a l'inici de la següent fase anagen [4]. La descendència de cèl·lules mare forma una nova matriu fol·licular durant l'anàgen primerenc, i el tall del cabell i la beina de l'arrel interna es deriven d'aquestes cèl·lules de la matriu relativament indiferenciada [5]. És ben sabut que la mida del fol·licle pilós i la durada de la fase anàgena governen la mida (diàmetre) i la longitud de l'eix del cabell, respectivament. Aquest creixement cíclic del cabell està regulat per diversos factors de creixement.

Minoxidil, finasteride i Propecia estan disponibles comercialment per frenar la caiguda del cabell i facilitar el creixement del cabell. El minoxidil és un vasodilatador que va exercir un efecte secundari per facilitarcreixement del cabell[6] que pot ser degut a les seves activitats de subministrament de nutrients i d'obertura de canals de potassi [7,8]. El minoxidil és eficaç per a l'alopècia androgènica, entre altres tractaments per a la calvície, encara que la seva eficàcia desapareix als mesos després de la interrupció del tractament. En comparació, la finasterida i Propecia, terapèutiques de la hiperplàsia benigna de pròstata i el càncer de pròstata, s'han registrat en molts països per a l'alopècia androgenètica (calvície de patró masculí). Finasteride i Propecia són antiandrògens sintètics que inhibeixen la 5- reductasa de tipus II, un enzim que converteix la testosterona en dihidrotestosterona (DHT) a les cèl·lules de la papil·la a la part inferior dels fol·licles pilosos [9].

Laminaria japonica, Undaria pinnatifida i Cladosiphon okamuranus, àmpliament distribuïts a molts països, s'han utilitzat com a terapèutics en la medicina oriental durant un llarg període. En estudis anteriors, el fucoidan, un complex de polisacàrids de sulfat, s'havia extret i identificat de les algues i es va confirmar que posseïa activitats antioxidants, anticoagulatives, anticancerígenes i antiinflamatòries [10,11]. Posteriorment, s'han demostrat els efectes beneficiosos del fucoidan sobre malalties inflamatòries, isquèmia, disfunció immune i tumors [12,13]. Per altra banda,Cistanche tubulosaextracte (CTE) també s'ha utilitzat àmpliament per a la medicació tradicional a la Xina. CTE（Cistanche tubulosaextracte)millora el flux sanguini reduint els nivells de colesterol en sang [14]. Recentment, es va informar que la CTE va disminuir la producció de factor de necrosi tumoral (TNF-) i interleucina-4 (IL{-4), que són factors principals per a la producció d'òxid nítric (NO) a la via inflamatòria. [15]. També vam demostrar que el fucoidan de l'extracte de Laminaria japonica (LJE) i CTE（Cistanche tubulosaextracte)inflamació atenuada sinèrgicament in vitro i in vivo [16]. En particular, s'ha demostrat que hi havia una estreta associació de la inflamació de la pell (especialment de les glàndules lacrimals) amb l'alopècia [17]. Així, estan sorgint aspectes antiinflamatoris del tractament de l'alopècia [18].
A partir de les activitats de millora del flux sanguini i la inflamació, investiguem l'eficàcia combinada de LJE i CTE（Cistanche tubulosa extracte)activatcreixement del cabelli mecanismes subjacents, en comparació amb el 3% de Minoxidil (Hyundai Pharmaceutical, Seül, Corea), un conegutcreixement del cabellpotenciador.

Cistanche tubulosaL'extracte és bo perCreixement del cabell

Materials i mètodes

Materials

LJE i CTE (Cistanche tubulosaextracte)es van obtenir de Misuba RTech Co., Ltd. (Asan, Corea). La pols seca de Laminaria japonica es va extreure en aigua purificada a 60oC durant 24 hores, es va filtrar a través d'una membrana de 0,45 μm, es va desinfectar i es va assecar amb aerosol.Cistanche tubulosaes va extreure en etanol al 80 per cent, es va desinfectar, es va concentrar i es va assecar. LJE i CTE (Cistanche tubulosaextracte)es van mantenir a 4oC, es van barrejar (1:3) i es van dissoldre en aigua purificada abans del seu ús, i es van administrar per via oral en un volum de 5 mL/kg.
Animals
Ratolins mascles C57BL/6 per acreixement del cabellL'estudi i els ratolins ICR mascles per a l'estudi de la inflamació es van comprar a Daehan Biolink (Eumseong, Corea) i es van allotjar en una habitació amb condicions ambientals constants (23±2ºC; 45-65 per cent d'humitat relativa; 12-hora de llum). -cicle fosc; brillantor de 150-300 lux). L'alimentació de pellets i l'aigua purificada estaven disponibles ad libitum. Tots els experiments amb animals van ser aprovats pel Comitè Institucional de Cura i Ús d'Animals (IACUC) de la Universitat Nacional de Chungbuk (CBNU), Corea, i es van dur a terme segons els procediments operatius estàndard (SOP) del Centre d'Investigació d'Animals de Laboratori, CBNU.

Tractament per al creixement del cabell

Després de confirmar la fase anagen observant el color de la pell rosat homogeni a la pell posterior de ratolins C57BL/6 (6 setmanes d'edat, n=8/grup) després de retallar-se a la fase telògena, es va afaitar el cabell [1,19. ,20]. A partir de l'endemà es van seleccionar ratolins sense rascades visibles i per via oral
tractats amb LJE (18 o 54 mg/kg), CTE (54 o 162 mg/kg) o la seva barreja (18 més 54 o 54 més 162 mg/kg) una vegada al dia durant 21 dies. Les dosis baixes de LJE (18 mg/kg) i CTE (54 mg/kg) provenien de dosis humanes estimades de 100 mg/cos (70 kg) i 300 mg/cos després de la translació de la superfície del pes corporal (Km{{14} } per a humà/Km=3 per a ratolí), respectivament. Dosis elevades de LJE i CTE（Cistanche tubulosaextracte)es van establir en 3 plecs, sols o en combinació, per avaluar els efectes sinèrgics màxims [16]. El minoxidil (3 per cent, 0,2 ml) es va aplicar tòpicament una vegada al dia a la pell afaitada en el mateix programa amb el tractament LJE/CTE.

Observació bruta del creixement del cabell

Els dies a intervals de 3-dia després de l'afaitat i durant el tractament, els ratolins van ser anestesiats lleugerament amb èter dietílic i es van fer fotografies a la part posterior. Es va analitzar la proporció de creixement del cabell (àrea de recreixement/àrea afaitat) a les fotografies mitjançant un sistema d'anàlisi d'imatges informatitzat (Imageinside, Daejeon, Corea).

Examen microscòpic dels fol·licles pilosos

Els dies 14 i 21, els ratolins van ser sacrificats mitjançant anestèsia profunda amb èter dietílic i se'ls va retirar la pell dorsal [1]. La pell dorsal es va tallar en dues parts. Les seccions de teixit incrustats en parafina fixades amb formalina (5 μm de diàmetre) d'una part es van tacar amb hematoxilina-eosina per examinar el nombre de fol·licles pilosos i les troballes histològiques. L'altra part del teixit es va congelar en nitrogen líquid per a assaig enzimàtic i immunoassaig.

Assaig de l'activitat enzimàtica

El teixit de la pell es va homogeneïtzar en 4 volums de tampó fosfat (pH 7,4). L'homogenat es va centrifugar a 3,000 rpm durant 20 min, i el sobrenedant es va utilitzar per a l'anàlisi de les activitats de -glutamil transpeptidasa (-GTP) i fosfatasa alcalina (ALP) utilitzant p-nitrofenil fosfat (PNPP) -DEAV com a substrat [1,21].

Cistanche tubulosa

Quantificació dels factors de creixement

El factor de creixement epidèrmic (EGF) i el factor de creixement endotelial vascular (VEGF) es van quantificar mitjançant kits d'assaig immunoabsorbent vinculat a enzims (ELISA) (R&D Systems, Minneapolis, EUA) segons les instruccions del fabricant [1, 22].

Tractament de la inflamació

Els ratolins ICR (7 setmanes d'edat, n=8/grup) van ser tractats per via oral amb LJE (18 o 54 mg/kg), CTE（Cistanche tubulosaextracte)(54 o 162 mg/kg), o la seva barreja (18 més 54 o 54 més 162 mg/kg) un cop al dia durant 7 dies [16]. El 1er dia de LJE i CTE（Cistanche tubulosaextracte)tractament, els ratolins es van injectar per via subcutània amb 10 ml d'aire estèril a la part posterior per formar una bossa [16,23,24]. Després de 2 i 5 dies, es va tornar a injectar la bossa amb 5 ml d'aire. Una hora després de la final LJE i CTE（Cistanche tubulosaextracte)tractament, es va injectar 1 ml de carragenina (1 per cent en solució salina; Sigma-Aldrich, St. Louis, EUA) o el seu vehicle (solució salina) a la bossa.

Anàlisi dels exsudats

La bossa d'aire es va rentar amb 1 ml de solució salina freda 6 hores després de la injecció de carragenina i es va registrar el volum net de líquid de rentat [16]. Es va determinar el nombre total de cèl·lules inflamatòries, inclosos neutròfils, monòcits i limfòcits mitjançant un comptador de colter.

Les concentracions de NO i prostaglandina E2 (PGE2) es van determinar mitjançant el reactiu de Griess (Sigma-Aldrich) i l'immunoassaig enzimàtic (EIA) mitjançant un kit Correlate-EIA (Assay Designs, Ann Arbor, EUA), respectivament [16].

Anàlisi estadística

Les dades es presenten com a mitjana ± error estàndard. La significació estadística es va determinar mitjançant l'anàlisi unidireccional de la variància, seguida de la prova de comparació múltiple de Tukey posthoc. Valors P<0.05 were="" considered="" to="" be="" statistically="">

Resultats

L'aplicació de Minoxidil (3 per cent), un material de referència, va facilitar notablementcreixement del cabellde ratolins C57BL/6, que presenten una cobertura gairebé total (92,4 per cent) de l'àrea afaitat (figures 1, 2B) en comparació amb el 29,2 per cent en creixement normal (figures 1, 2A) el dia 21. Tot i que menys eficaç que l'aplicació de Minoxidil , el tractament oral de LJE també va facilitar lacreixement del cabell, donant lloc a una cobertura del 33,5 i el 69,1 per cent a 18 i 54 mg/kg, respectivament (figures 1, 2C, 2D). CTE（Cistanche tubulosaextracte)també va ser eficaç per millorarcreixement del cabell, arribant al 73,6 i al 80,4 per cent de cobertura a 54 i 162 mg/kg, respectivament (figures 1, 2E, 2F). En particular, la teràpia combinada amb dosis elevades de LJE (54 mg/kg) i CTE（Cistanche tubulosaextracte)(162 mg/kg) va millorar notablement elcreixement del cabella partir del dia 12, comparable a l'efecte de Minoxidil (figures 1, 2H), encara que baixes dosis de LJE (18 mg/kg) i CTE（Cistanche tubulosaextracte)(54 mg/kg) exerceixen un efecte sinèrgic només a la fase inicial (figures 1, 2G).

Figura 1. Curs temporal del creixement del pèl de ratolins tractats amb Minoxidil o extracte de Laminaria japonica (LJE) i/oCistanche tubulosaextracte (CTE). ,

○normal; ●, aplicació de Minoxidil (3 per cent); △, 18 mg/kg LJE; ▼, 54 mg/kg LJE; □, 54 mg/kg CTE; ■, 162 mg/kg CTE; ◇, 18 mg/kg LJE més 54 mg/kg CTE; ◆, 54 mg/kg LJE més 162 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaextracte).

Figura 2. Resultats bruts representatius del creixement del pèl de ratolins tractats amb Minoxidil o extracte de Laminaria japonica (LJE) i/oCistanche tubulosaextracte (CTE) el dia 21.

A, normal; B, aplicació de Minoxidil (3 per cent); C, 18 mg/kg LJE; D, 54 mg/kg LJE; E, 54 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaextracte); F, 162 mg/kg CTE; G, 18 mg/kg LJE més 54 mg/kg CTE; H, 54 mg/kg LJE més 162 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaextracte).

En comparació amb els fol·licles pilosos normals (figura 3A), l'aplicació de Minoxidil va millorar la integritat dels fol·licles pilosos, mostrant fol·licles més grans i tiges de cabell més gruixudes (figura 3B). Aquests efectes també es van trobar a les pells de ratolins tractats amb LJE i/o CTE（Cistanche tubulosaextracte)(Figures 3C-3H). Especialment, l'eficàcia per a l'enfortiment del fol·licle pilós del tractament combinat de LJE i CTE (Cistanche tubulosaextracte)era comparable a la del Minoxidil.

Figura 3. Trobades microscòpiques representatives del creixement del pèl de ratolins tractats amb Minoxidil o extracte de Laminaria japonica (LJE) i/oCistanche tubulosaextracte (CTE) el dia 21.

A, normal; B, aplicació de Minoxidil (3 per cent); C, 18 mg/kg LJE; D, 54 mg/kg LJE; E, 54 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaextracte); F, 162 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaextracte); G, 18 mg/kg LJE més 54 mg/kg CTE; H, 54 mg/kg LJE més 162 mg/kg CTE

L'aplicació de minoxidil va augmentar l'activitat de -GTP que indueix els fol·licles pilosos a la fase anagen en un 90-120 per cent els dies 14 i 21, en comparació amb el nivell de pell normal (figura 4). LJE (54 mg/kg) també va millorar l'activitat enzimàtica, tot i que hi va haver variacions elevades. CTE va exercir efectes similars, millorant significativament l'activitat -GTP el dia 14. Curiosament, el tractament combinat de LJE i CTE（Cistanche tubulosaextracte)va augmentar encara més l'activitat enzimàtica més gran que quan es van utilitzar els extractes sols.
L'activitat ALP, un marcador del creixement ossi i l'angiogènesi, va augmentar significativament a la pell els dies 14 i 21 després de l'aplicació tòpica de Minoxidil (figura 5). LJE i CTE（Cistanche tubulosaextracte)també va augmentar l'activitat de l'ALP després de l'administració oral de manera dependent de la dosi. En particular, l'activitat enzimàtica es va millorar de manera sinèrgica mitjançant el tractament combinat amb LJE i CTE.

Figura 4. Efectes de Minoxidil (MXD, 3 per cent), o extracte de Laminaria japonica (LJE) i/oCistanche tubulosaextracte (CTE) (en mg/kg) sobre l'activitat de la -glutamil transpeptidasa (-GTP) els dies 14 (A) i 21 (B) de tractament.

* Significativament diferent del control normal (Nor) (P<>

Figura 5. Efectes de Minoxidil (MXD, 3 per cent) o extracte de Laminaria japonica (LJE) i/oCistanche tubulosaextracte (CTE) (en mg/kg) sobre l'activitat de la fosfatasa alcalina (ALP) els dies 14 (A) i 21 (B) de tractament.

* Significativament diferent del control normal (Nor) (P<>

En l'anàlisi de l'EGF, un conegutcreixement del cabellfactor, l'aplicació de Minoxidil va millorar el nivell d'EGF 3,5 vegades de control normal els dos dies 14 i 21 (figura 6). LJE (18 mg/kg) va augmentar l'EGF només el dia 21, mentre que la CTE (162 mg/kg) va augmentar molt la seva producció els dies 14 i 21. És d'interès assenyalar que el tractament combinat de LJE i CTE（Cistanche tubulosaextracte)fins i tot a dosis baixes va mostrar efectes sinèrgics marcats.

El tractament amb minoxidil també va augmentar el nivell de VEGF un 50-80 per cent per sobre del valor de control (figura 7). Tot i que LJE va ser ineficaç, CTE (Cistanche tubulosaextracte)va exercir efectes potenciadors notables. A més, teràpia combinada de LJE i CTE（Cistanche tubulosaextracte)va mostrar una activitat sinèrgica a la fase inicial el dia 14.

Figura 6. Efectes de Minoxidil (MXD, 3 per cent), o extracte de Laminaria japonica (LJE) i/oCistanche tubulosaextracte (CTE) (en mg/kg) sobre el contingut del factor de creixement epidèrmic (EGF) els dies 14 (A) i 21 (B) del tractament.

* Significativament diferent del control normal (Nor) (P<>

Figura 7. Efectes de Minoxidil (MXD, 3 per cent), o extracte de Laminaria japonica (LJE) i/oCistanche tubulosaextracte (CTE) (en mg/kg) sobre el contingut del factor de creixement endotelial vascular (VEGF) els dies 14 (A) i 21 (B) de tractament.

* Significativament diferent del control normal (Nor) (P<>

La injecció de carragenina a la bossa d'aire del ratolí ICR va augmentar el volum d'exsudat dins de la bossa 6 vegades el nivell de control (taula 1). Aquest augment de l'exsudació es va atenuar significativament pel tractament amb LJE (18 i 54 mg/kg) o CTE（Cistanche tubulosaextracte)(54 i 162 mg/kg). En particular, el tractament combinat amb LJE i CTE va reduir encara més el volum d'exsudat, en comparació amb els efectes individuals. El nombre de cèl·lules inflamatòries va augmentar dràsticament amb la injecció de carragenina: nivells de control de 34,6, 4,2 i 24,9 vegades per a neutròfils, monòcits i limfòcits, respectivament (taula 1). Tanmateix, LJE i CTE（Cistanche tubulosaextracte)va reduir significativament les cèl·lules inflamatòries de manera depenent de la dosi, en què la LJE era una mica superior a la CTE（Cistanche tubulosaextracte). S'esperava que es van aconseguir efectes sinèrgics en la infiltració de cèl·lules inflamatòries mitjançant la coadministració de LJE i CTE.（Cistanche tubulosaextracte).
Paral·lelament a la infiltració de cèl·lules inflamatòries a la bossa, el contingut de NO i PGE2 a la bossa també va augmentar dràsticament després de la injecció de carragenina (taula 1). En comparació amb l'efecte lleu de LJE, CTE（Cistanche tubulosaextracte)va reduir notablement la concentració de NO. Tractament combinat de LJE i CTE（Cistanche tubulosaextracte)va reduir encara més el nivell de NO de manera dependent de la dosi. De manera similar, l'augment del nivell de PGE2 es va suprimir sinèrgicament per la teràpia combinada de LJE i CTE (taula 1).

Discussió

El cap humà té una mitjana de 100,000 fol·licles pilosos. Durant tota la vida, cada fol·licle creix i es desprèn unes 20 vegades, mostrant una pèrdua de cabell diària de 100 brins [25]. La pèrdua de cabell, inclosa l'alopècia i la calvície, és una condició angoixant per als homes i les dones, especialment a la societat moderna. Per tant, és de gran importància desenvolupar noves teràpies que evitin la caiguda del cabell i millorin el creixement del cabell. En aquest sentit, la medicina alternativa ha despertat l'interès dels investigadors.

Els aspectes morfològics, histoquímics i bioquímics relacionats amb l'envelliment de la calvície de patró masculí han estat revelats per una sèrie d'estudis sobre macacs de cua de soca. En la calvície de patró masculí, la fase telògena es va allargar, mentre que la fase anagen es va escurçar. Així, es considera que per millorar la caiguda del cabell és molt important el manteniment de l'allargament del fol·licle pilós que es produeix des de l'anagen primerenc fins a l'anagen mitjà [26]. En el present estudi, hem demostratcreixement del cabell-Activitat facilitadora d'un tractament combinat LJE i CTE（Cistanche tubulosaextracte). El més important és que la prescripció combinada de LJE (54 mg/kg) i CTE (162 mg/kg) va mostrar una excel·lent activitat de recreixement del cabell, malgrat l'administració oral dels extractes. En particular, l'efecte de la teràpia combinada va ser comparable al de l'aplicació dèrmica d'una alta concentració (3 per cent) d'un compost purificat Minoxidil, tot i que les concentracions d'ingredients actius de LJE i CTE（Cistanche tubulosaextracte)a la pell després de l'administració oral no es va confirmar.
A la pell del ratolí ciclable, l'activitat -GTP es pronuncia durant l'anagen, però disminueix molt durant el telogen [27]. A la pell, l'enzim existeix exclusivament a les beines de l'arrel exterior i interna dels fol·licles pilosos per sota del nivell de les glàndules sebàcies en què no hi ha -GTP [27]. En comparació, l'ALP s'expressa de manera destacada a les unitats pilosebàcies, i l'activitat augmenta a l'àrea de creixement del cabell. L'ALP com a factor angiogènic millora el subministrament nutricional a les papil·les dèrmiques i, per tant, indueix el gruix durant l'anagen [28]. Tanmateix, es va confirmar que l'activitat de l'ALP va disminuir a la pell alopècica [21]. En l'estudi mecanicista, el compost de referència Minoxidil va millorar notablement l'activitat de -GTP i ALP, la qual cosa implica que Minoxidil facilitacreixement del cabellno només induint els fol·licles pilosos
a la fase anagen, però també millorant el flux sanguini mitjançant l'angiogènesi. Com que LJE va augmentar l'activitat de l'ALP, es proposa que la LJE tingui un efecte beneficióscreixement del cabella través del seu potencial angiogènic, tal com es va inferir d'un estudi anterior que el fucoidan, un ingredient actiu de LJE, té una activitat que millora el flux sanguini [29]. En comparació, CTE（Cistanche tubulosaextracte)va millorar tant les activitats -GTP com ALP, cosa que suggereix els seus efectes sobre la inducció de la fase anagen i la millora del flux sanguini. Segons les accions sinèrgiques sobre els enzims -GTP i ALP, es creu que es pot aconseguir un creixement més gran del cabell mitjançant la coadministració de LJE i CTE.（Cistanche tubulosaextracte).
És ben sabut que diverses citocines i factors de creixement, inclosos EGF i VEGF, estan implicats en la regulació de la morfogènesi i el creixement del cabell [30,31]. És d'interès assenyalar que els factors derivats de les cèl·lules de la papil·la dèrmica tenen activitats quimiotàctiques sobre les cèl·lules circumdants, que condueixen, al seu torn, a la promoció decreixement del cabell[32]. L'EGF s'expressa en associació amb el desenvolupament de fol·licles pilosos [33,34]. Tot i que l'expressió tant d'EGF com del seu receptor (EGFR) a la beina de l'arrel externa està regulada a la baixa amb la finalització del creixement fol·licular, la seva expressió es recupera quan les cèl·lules fol·liculars entren a la fase anàgena. El VEGF té un paper important implicat en l'angiogènesi durant la reacció inflamatòria i el desenvolupament del tumor [35]. Especialment, la xarxa vascular està estretament associada amb el cicle de creixement del cabell [36-38]. Per tant, es va confirmar que l'expressió gènica de VEGF varia segons el cicle del cabell humà [39].

A partir dels resultats del present estudi, s'explica que elcreixement del cabell- L'efecte promotor de Minoxidil pot ser degut al seu potencial EGF i VEGF que regulan a l'alça que faciliten el creixement del fol·licle així com l'angiogènesi. Tot i que LJE no va afectar l'expressió de VEGF, va augmentar el contingut d'EGF a la pell després de l'administració oral. En comparació, CTE（Cistanche tubulosaextracte)va ser eficaç en l'expressió tant d'EGF com de VEGF. En particular, LJE i CTE（Cistanche tubulosaextracte)va exercir efectes additius sobre l'expressió dels factors de creixement.

A més de l'allargament dels cabells, la integritat dels fol·licles pilosos es va millorar notablement després del tractament amb Minoxidil, LJE i/o CTE.（Cistanche tubulosaextracte)en l'examen microscòpic. En la fase inicial de la caiguda del cabell i la calvície en pacients humans i models animals, la integritat dels fol·licles es va reduir i el gruix del tall del cabell es va reduir, mentre que la integritat fol·licular i el gruix de la tija es van recuperar en els cabells regenerats. Curiosament, aquests efectes positius sobre la integritat i el creixement dels components del cabell es van aconseguir amb l'administració oral de LJE més CTE.（Cistanche tubulosaextracte), en què l'efecte era comparable al de l'aplicació tòpica d'una alta concentració de Minoxidil. Per tant, s'espera que la combinació per a la ingesta oral de LJE més CTE（Cistanche tubulosaextracte)podria ser una recepta relativament convenient en comparació amb l'ús dèrmic de Minoxidil.
En el model d'alopècia del ratolí, la infiltració de limfòcits sensibles als esteroides al voltant dels fol·licles pilosos és freqüent, mostrant un patró similar a la immunoteràpia de l'alopècia humana amb inflamació de la glàndula lacrimal [17,40]. En el present estudi, la inflamació de la pell induïda per carragenina va ser notablement atenuada per LJE i CTE（Cistanche tubulosaextracte)tractament; és a dir, l'exsudació vascular i la infiltració de cèl·lules inflamatòries es van suprimir sinèrgicament. En l'anàlisi quantitativa, els principals mediadors inflamatoris NO i PGE 2 es van controlar substancialment després de la coadministració oral de LJE i CTE (Cistanche tubulosaextracte). Curiosament, com que el LJE mostrava una activitat antiinflamatòria superior a la del fucoidan semipurificat [16], se suposa que pot haver-hi un(s) ingredient(s) actiu(s) addicional(s), a més del fucoidan, al LJE.

En conjunt, els resultats indiquen que el tractament oral combinat amb LJE i CTE（Cistanche tubulosaextracte)millora la caiguda del cabell mitjançant la regulació positiva dels factors de creixement i les activitats enzimàtiques relacionades i, en part, mitjançant el potencial antiinflamatori. Per tant, es suggereix una combinació que inclogui LJE i CTE（Cistanche tubulosaextracte)dosis i proporcions clíniques inadequades podrien ser una recepta candidata per als pacients amb pèrdua de cabell.

Cistanche tubulosaextreure productes

Agraïments

Aquesta investigació va comptar amb el suport financer del Desenvolupament de la indústria líder per a la regió econòmica de l'Oficina de la indústria líder de Chungcheong, l'Institut de Corea per a l'Avançament de la Tecnologia (KIAT) i el Ministeri d'Economia del Coneixement (MKE), i en part pel Programa de desenvolupament de tecnologia d'aliments d'alt valor afegit. , Ministeri d'Agricultura, Alimentació i Afers Rurals (MAFRA; subvenció número 113034-3).

Conflicte d'interessos

Els autors declaren que no hi ha cap conflicte d'interès financer per publicar aquests resultats.

De: 'Efectivitat del tractament combinat dels extractes de Laminaria japonica i Cistanche tubulosa en el creixement del cabell' perKyungha Shin1# et al

--- Lab Anim Res 2015: 31(1), 24-32http://dx.doi.org/10.5625/lar.2015.31.1.24

REFERÈNCIES

1. Kim JS, Kang BS, Park HJ, Kim DY, Hwang SY, Nam SY, Yun YW, Lee BJ. Efecte de promoció de les barreges d'extractes d'herbes sobre el creixement del cabell en ratolins C3H/HeJ. J Biomed Res 2009; 10(3): 99-108.
2. Paus R, Cotsarelis G. La biologia dels fol·licles pilosos. N Engl J Med 1999; 341(7); 491-497.
3. Cotsarelis G. El fol·licle pilós: morir per l'atenció. Am J Pathol 1997; 151(6): 1505-1509.
4. Cotsarelis G, Sun TT, Lavker RM. Les cèl·lules que retenen l'etiqueta resideixen a l'àrea de protuberància de la unitat pilosebàcia: implicacions per a les cèl·lules mare fol·liculars, el cicle del cabell i la carcinogènesi de la pell. Cèl·lula 1990; 61(7): 1329-1337.
5. Oshima H, Rochat A, Kedzia C, Kobayashi K, Barrandon Y. Morfogènesi i renovació dels fol·licles pilosos a partir de cèl·lules mare multipotents adultes. Cèl·lula 2001; 104(2): 233-245.
6. Burton JL, Marshall A. Hipertricosi deguda al minoxidil. Br J Dermatol 1979; 101(5): 593-595.
7. Meisheri KD, Cipkus LA, Taylor CJ. Mecanisme d'acció de la vasodilatació induïda pel sulfat de minoxidil: un paper per a l'augment de la permeabilitat K més. J Pharmacol Exp Ther 1988; 245(3): 751-760.
8. Buhl AE, Waldon DJ, Baker CA, Johnson GA. El sulfat de minoxidil és el metabòlit actiu que estimula els fol·licles pilosos. J Invest Dermatol 1990; 95(5): 553-557.
9. Kaufman KD, Dawber RP. Finasterida, un inhibidor de l'alfa-reductasa de tipus 2 5, en el tractament d'homes amb alopècia androgenètica. Expert Opin Investig Drugs 1999; 8(4): 403-415.
10. Feldman SC, Reynaldi S, Stortz CA, Cerezo AS, Damont EB. Propietats antivirals de les fraccions fucoidanes de Leathesia difformis. Fitomedicina 1999; 6(5): 335-340.
11. Wang J, Zhang Q, Zhang Z, Song H, Li P. Potencial antioxidant i capacitat anticoagulant de les fraccions de fucoidan de baix pes molecular extretes de Laminaria japonica. Int J Biol Macromol 2010; 46(1): 6-12.
12. Bojakowski K, Abramczyk P, Bojakowska M, Zwoliñska A, Przybylski J, Gaciong Z. Fucoidan millora el flux sanguini renal en l'etapa inicial de la lesió per isquèmia/reperfusió renal a la rata. J Physiol Pharmacol 2001; 52(1): 137-143.
13. Li N, Zhang Q, Song J. Avaluació toxicològica del fucoidan extret de Laminaria japonica en rates Wistar. Food Chem Toxicol 2005; 43(3): 421-426.
14. Shimoda H, Tanaka J, Takahara Y, Takemoto K, Shan SJ, Su MH. Els efectes hipocolesterolèmics de l'extracte de Cistanche tubulosa, una medicina crua tradicional xinesa, en ratolins. Am J Chin Med 2009; 37(6): 1125-1138.
15. Yamada P, Iijima R, Han J, Shigemori H, Yokota S, Isoda H. Efecte inhibidor de l'acteòsid aïllat de Cistanche tubulosa sobre l'alliberament de mediadors químics i la producció de citocines inflamatòries per cèl·lules RBL-2H3 i KU812. Planta Med 2010; 76(14): 1512-1518.
16. Kyung J, Kim D, Park D, Yang YH, Choi EK, Lee SP, Kim TS, Lee YB, Kim YB. Efectes antiinflamatoris sinèrgics de Laminaria japonica fucoidan i extracte de Cistanche tubulosa. Lab Anim Res 2012; 28(2): 91-97.
17. Chee E, Fong KS, Al Jajeh I, Nassiri N, Rootman J. L'associació de la inflamació de la glàndula lacrimal amb l'alopècia areata. Òrbita 2015; 34(1): 45-50.
18. Brzezinska-Wcislo L, Bergler-Czop B, Wcislo-Dziadecka D, LisSwiety A. Nous aspectes del tractament de l'alopècia areata. Postepy Dermatol Alergol 2014; 31(4): 262-265.
19. Hattori M, Ogawa H. Anàlisi bioquímica decreixement del cabelldes dels aspectes de l'envelliment i les activitats enzimàtiques. J Dermatol 1983; 10(1): 45-54.
20. Lee SH, Lee HJ, Baek IJ, Yon JM, Nam SY, Lee BJ, Yun YW, Kim YB, Hwang SY, Hong JT. Efecte de la loció per al cuir cabellut DREAMMO® sobrecreixement del cabellpromoció en un model d'alopècia de ratolins C57BL/ 6. Lab Anim Res 2006; 22(1): 91-96.
21. Handjiski BK, Eichmüller S, Hofmann U, Czarnetzki BM, Paus R. Activitat i localització de la fosfatasa alcalina durant el cicle del cabell murí. Br J Dermatol 1994; 131(3): 303-310.
22. Cross MJ, Dixelius J, Matsumoto T, Claesson-Welsh L. Transducció del senyal del receptor VEGF. Trends Biochem Sci 2003; 28(9): 488-494.
23. Shin S, Jeon JH, Park D, Jang JY, Joo SS, Hwang BY, Choe SY, Kim YB. Efectes antiinflamatoris d'un extracte d'etanol d'Angelica gigas en un model d'inflamació de la bossa d'aire de carragenina. Exp Anim 2009; 58(4): 431-436.
24. Kim D, Park D, Kyung J, Yang YH, Choi EK, Lee YB, Kim HK, Hwang BY, Kim YB. Efectes antiinflamatoris de l'extracte supercrític de Houttuynia cordata en el model d'inflamació de la bossa d'aire de carragenina. Lab Anim Res 2012; 28(2): 137-140.
25. Rebora A. Patogènesi de l'alopècia androgenètica. J Am Acad Dermatol 2004; 50(5): 777-779.
26. Shirai A, Ikeda J, Kawashima S, Tamaoki T, Kamiya T. KF19418, un nou compost per acreixement del cabellpromoció de models de ratolí in vitro i in vivo. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 213-218.
27. Kawabe TT, Kubicek MF, Johnson GA, Buhl AE. Ús de l'activitat gamma-glutamil transpeptidasa com a marcador del cicle del cabell i inducció d'anàgens en fol·licles pilosos del ratolí. J Invest Dermatol 1994; 103(1): 122-126.
28. Hamada K, Suzuki K. Avaluació dels índexs bioquímics com a marcador del cicle del cabell en ratolins C3H. Exp Anim 1996; 45(3): 251-256.
29. Park SJ, Lee KW, Lim DS, Lee S. El polisacàrid sulfatat fucoidan estimula la diferenciació osteogènica de les cèl·lules mare derivades de l'adipòs humà. Stem Cells Dev 2012; 21(12): 2204-2211.

30. Danilenko DM, Ring BD, Pierce GF. Factors de creixement i citocines en el desenvolupament i el cicle del fol·licle pilós: coneixements recents de models animals i potencials per a la teràpia clínica. Mol Med Avui 1996; 2(11): 460-467.
31. Ozeki M, Tabata Y. In vivo va promoure el creixement dels fol·licles pilosos dels ratolins mitjançant l'alliberament controlat de factors de creixement. Biomaterials 2003; 24(13): 2387-2394.
32. Fujie T, Katoh S, Oura H, Urano Y, Arase S. L'efecte quimiotàctic d'un factor derivat de cèl·lules de la papil·la dèrmica sobre les cèl·lules de la beina de l'arrel externa. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 206-212.
33. Stenn KS, Paus R. Controls of hair follicle cycling. Physiol Rev 2001; 81(1): 449-494.
34. Chapman RE, Hardy MH Efectes del factor de creixement epidèrmic del ratolí injectat per via intradèrmica i aplicat tòpicament sobre el creixement de la llana, la pell i els fol·licles de llana d'ovella merina. Aust J Biol Sci 1988; 41(2): 261-268.
35. Dvorak HF, Brown LF, Detmar M, Dvorak AM. Factor de permeabilitat vascular/factor de creixement endotelial vascular, hiperpermeabilitat microvascular i angiogènesi. Am J Pathol 1995; 146(5): 1029-1039.
36. Ellis RA, Moretti G. Patrons vasculars associats amb fol·licles pilosos catàgens al cuir cabellut humà. Ann NY Acad Sci 1959; 83: 448-457.
37. Stenn KS, Fernandez LA, Tirrell SJ. Les propietats angiogèniques del fol·licle pilós de la vibrissa de rata estan associades amb el bulb. J Invest Dermatol 1988; 90(3): 409-411.
38. Yano K, Brown LF, Detmar M. Control ofcreixement del cabelli la mida del fol·licle per angiogènesi mediada per VEGF. J Clin Invest 2001; 107(4): 409-417.
39. Lachgar S, Charveron M, Ceruti I. Distribució de les etapes del fol·licle pilós indiferents de l'ARNm de VEGF per hibridació in situ de fluorescència combinada amb microscòpia làser confocal. A: Hair Research for the Next Millennium (Van Neste DJJ, ed), Elsevier, Amsterdam, 1996; pp 407-12.
40. Freyschmidt-Paul P, Sundberg JP, Happle R, McElwee KJ, Metz S, Boggess D, Hoffmann R. Tractament exitós de la pèrdua de cabell semblant a l'alopècia areata amb el sensibilitzador de contacte èster dibutílic d'àcid quadraric (SADBE) en ratolins C3H/HeJ . J Invest Dermatol 1999; 113(1): 61-68.