Paràmetres d'extracció i mètodes d'assecat de Cistanche Deserticola

Cistanche és la Cistanche deserticola YC Ma orCistanche tubulosa (Schenk) Wighttija carnosa seca amb fulles escamoses de la planta OrobanchiaceaeCistanche deserticola YC Ma[1]. El principal ingredient actiu de Cistanche deserticola són els glucòsids de feniletanol [2-4]. Els estudis farmacològics han demostrat que té les funcions deafrodisíac, millorant la immunitat, ipotenciant la memòria[4-9].

En els últims anys, la metodologia de la superfície de resposta s'ha utilitzat àmpliament en l'extracció de la medicina tradicional xinesa [{{0}}]. El mètode de la superfície de resposta té els avantatges inherents d'una alta precisió de detecció, menys nombre d'experiments necessaris, predicció precisa dels models de funció i capacitat de reflectir la relació entre factors i valors predits [15-17]. Per tant, aquest experiment utilitza la puntuació completa del contingut dels cinc glicòsids de feniletanol com a valor de resposta i utilitza el programari Design-Expert 8.0.6.1 per dissenyar l'experiment, optimitzar el procés d'extracció de Cistanche deserticola i proporcionar informació per a la identificació i establiment d'estàndards de qualitat deCistanche deserticola.

Actualment, l'índexcomponents echinaceaside i verbascosidesón temes de recerca candents en la tecnologia d'extracció i processament deCistanche deserticola. L'edició de 2015 de la Farmacopea Xinesa estipula que el mètode de processament de Cistanche deserticola és "eliminar les impureses, rentar, humitejar, tallar a rodanxes gruixudes i assecar". [1], no hi ha regulacions clares sobre el mètode d'assecat. Per tant, aquest experiment va utilitzar vuit mètodes d'assecat diferents, incloent assecat al sol, assecat a l'ombra, assecat al forn (40, 60, 80, 100, 120 graus) i liofilització, per processar Cistanche deserticola [18], que va proporcionar una base teòrica per a la procés d'assecat de Cistanche deserticola.

Sobre l'orientació.

EXTRACTE DE CISTANCHE AMB 30% ECHINCAOSID

1 Materials i instruments

Cistanche deserticola fresca es va collir l'octubre de 2018. El lloc d'origen és el municipi de Mitan, comtat de Minqin, Baiyin, província de Gansu. El professor associat Guo Yehong de la Universitat Agrícola de Gansu el va identificar com Cistanche deserticola YC Ma, una tija carnosa amb fulles escates. Substàncies de referència echinaceaside (número de lot 82854-37-3, fracció de massa superior o igual al 98%), cistancheaside A (número de lot 93236-42-1, fracció de massa superior o igual al 95%), verbascòsid (número de lot {{ {5}}, fracció de massa superior o igual al 98%), isomurabasin (número de lot 61303-13-7, fracció de massa superior o igual al 98%), 2′-acetil verbascòsid (número de lot 94492-24-7 , la fracció de massa superior o igual al 95%) es va comprar a Chengdu Pu. Feide Biotechnology Co., Ltd.; l'àcid fòrmic i el metanol són de grau de cromatografia, Merck Company of Germany; L'aigua és aigua purificada i altres reactius són de grau analític.

Cromatògraf líquid Waters Acquity, detector PDA, estació de treball de cromatografia Empower i sistema de gestió de dissolvents quaternaris; Netejador d'ultrasons KQ-100E, Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.

empresa; Balança analítica AL104, Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd.; LyoQuest-85 liofilitzador, Telstar, Espanya.

2 Mètodes i resultats

2.1 Preparació de la solució de referència

Peseu amb precisió les quantitats adequades deechinaceaside, cistanqueoside A, verbascoside, isorbascòside, i estàndards de referència de 2'-acetil verbascòsid, i afegiu-hi un 70% de metanol per fer que les concentracions en massa siguin 1.04, 0.61, 0.63, 0,39 i 0,48 mg/mL de solució de referència mixta.

2.2 Condicions cromatogràfiques de Cistanche deserticola

Waters Symmetry C18 (250 mm×4,6 mm, 5 μm); temperatura de la columna 30 graus, cabal de volum 1,0 ml/min; la fase mòbil és metanol-0.1% solució aquosa d'àcid fòrmic, gradient d'elució: 0~12 min, 29%~34% metanol; 12-40 min, 34%-40% metanol; 30-35 min, 40%-35% metanol; 35-40 min, 30% de metanol;

1-echinacòsid 2-cistanche A 3-verbascòsid 4-isoacteòsid 5-2′-acetilacteòsid

Fig. 1 HPLC de referència mixta (A) i mostra de C. deserticola (B)

2.3 Preparació de la solució d'assaig

Pesar amb precisió 1 g de pols de Cistanche deserticola seca en un matràs Erlenmeyer (passat per un tamís de malla 65-), afegir 50 ml de metanol al 50%, pesar la massa, ultrasònic a 40 kHz a 150 W, refredar a temperatura ambient. , i forma la massa per aconseguir-la.

2.4 Investigació de la relació lineal

Agafeu {{0}}.1, {{20}}.5, 1, 2, 4 i 8 ml de la solució de referència mixta anterior en 10 ml matràs aforat i afegiu-hi un 70% de metanol a la marca. Dibuixa amb precisió 10 μL i mesura segons les condicions cromatogràfiques de "2,2". La concentració de massa és l'abscissa (X) i l'àrea del pic és l'ordenada (Y). Feu una regressió lineal i les equacions de regressió són: Equinàcia Y=128 049 X -830 189, r=0.999 5, rang lineal 10,4~832,0 ug/mL; Cistancheside AY=87 980 -447 963, r＝0.999 8, rang lineal 6.3-504,0 ug/mL; Isomurabasin Y＝92 831 Glicòsid Y{=79 207 X{-304 428, r=0.{999 4, rang lineal 4,8~384,0 ug/mL.

2.5 Revisió metodològica

2.5.1 Inspecció de precisió

Agafeu 2 0 μL de la solució de referència mixta a l'article "2.1" i injecteu-los 6 vegades contínuament per mesurar les àrees màximes d'echinaceaside, cistancheaside A, verbascòsid, isorebascòsid i 2'-acetilverbascòsid. Els RSD són del 0,23% respectivament. , {{10}},71%, 0,59%, 0,41%, 0,29%, que indica que l'instrument té una bona precisió.

2.5.2 Prova de repetibilitat

Agafeu 6 porcions de la mateixa mostra de Cistanche deserticola, prepareu la solució de prova segons el punt "2.3", injecteu la mostra en les condicions cromatogràfiques del punt "2.2" i mesureu l'àrea del pic. Resultats Les fraccions massiques mitjanes d'equinàcèsida, cistanqueòsid A, verbascòsid, isorebascòsid i 2′-acetil verbascòsid eren de l'1,83%, 0,21%, 2,34%, 0,13% i {{15} }},68% respectivament, i els RSD eren 1,32 respectivament. %, 0,83%, 1,24%, 2,19%,

0,78%, que indica que el mètode té una bona repetibilitat.

2.5.3 Prova d'estabilitat

Determineu l'estabilitat de la mateixa solució de prova (preparada segons "2.3") a 0, 2, 4, 8, 12, 24 i 48 hores per obtenir l'equinàcèsida, el cistanqueòsid A, el verbascòsid i l'isolebascòsid. , àrea del pic de 2′-acetil verbascòsid, RSD eren 0,58%, 0,21%, 1,58%, 1,46%, 2,19% respectivament, cosa que indica que la solució de prova era estable en 48 h.

2.5.4 Prova de recuperació de mostres

Agafeu 1 g de 6 mostres de Cistanche deserticola amb contingut conegut i afegiu-hi amb precisió una certa quantitat de solució de referència mixta (Echinaceaside 1.06 mg/mL, Cistancheoside A 0.86 mg. /mL, verbascòsid 2,17 mg/mL, isolebascòsid 0,79 mg /mL, 2′-acetil verbascòsid 0,91 mg/mL), afegiu metanol al 70% per arribar a 50 ml i injectar mostres segons les condicions cromatogràfiques de "2.2". Les recuperacions mitjanes mesurades són del 101,52%, 99,21% i 102,62% respectivament. , 98,62%, 97,36%, RSD són 1,64%, 1,95%, 0,87%, 1,59%, 1,13% respectivament, i la taxa de recuperació de la mostra és bona.

Cistanche és una herba tònica coneguda que pot nodrir i protegir els ronyons. En la teoria de la medicina tradicional xinesa, Cistanche és la millor herba per als ronyons. Cistanche és ric en echinacòsid, acteòsid i flavonoides. Aquests ingredients efectius de Cistanche poden reduir l'apoptosi de les cèl·lules renals i augmentar la proliferació de cèl·lules renals. Per tant, Cistanche és un suplement natural de ronyó.