Identificació de disset components a Cistanches Herba cultivada al desert de Tarim per HPLC-MS

NAN Ze-dong1 ,ＲEN Hua-zhong1 ,ZHAO Ming-bo2 ,JIANG Yong2 ,TU Peng-fei2*

( 1. Col·legi Tècnic i Vocacional de Leshan, Leshan 614000, Xina; 2. Laboratori Estatal Clau de Medicaments Naturals i Biomimètics, Escola de Ciències Farmacèutiques, Centre de Ciències de la Salut de la Universitat de Pequín, Pequín 100191, Xina)

［Abstracte］Objectiu: identificar els components cromatogràfics de l'extracte de metanol al 60 per centCistanches deserticola Herbacultivat al desert de Tarim per HPLC-MS.Mètode: L'anàlisi HPLC-MS es va realitzar en una columna Agilent ZOＲBAX Eclipse Plus C18 (4, 6 mm × 250 mm, 5 μm) ． La fase mòbil era l'acetonitril-0. Solució aquosa d'àcid fòrmic a l'1 per cent per elució en gradient a un cabal d'1 mL·min － 1, i la longitud d'ona de detecció va ser de 254 nm. La temperatura de la columna es va establir a 25 graus i el volum d'injecció era de 10 μL. Ｒ resultat: es van identificar amb precisió setze pics cromatogràfics / disset components comparant el temps de retenció, els pesos moleculars i els ions de fragments dels compostos que vam aïllar i identificar. Aquests components cromatogràfics es van determinar com a coniferina, demetil siringina, siringina, equinacòsid, cistàsid A, verbascòsid (tubulósida A), cistànosida B, isoverbascòsid, 2'-acetilcistanosid A, cistanòsid C, isocistàsid C, 2'-acetilverbascòsid B, etupimeriòsid B, A, cistanòsid K i cistanòsid J.

Conclusió: El mètode HPLC-MS és adequat per a la identificació dels components cromatogràfics de l'extracte de metanol al 60 per cent a Cistanches Herba. Aquest estudi proporcionarà l'evidència científica per analitzar exhaustivament els components químics d'aquesta herba medicinal.

［Paraules clau］ Cistanches deserticolaHerba; Cistanche; HPLC-MS; extracte de metanol

Cistanche deserticola YCMa

Cistanche deserticola, també conegut com "ginseng del desert",és una famosa medicina xinesa tònica, que es distribueix a Mongòlia Interior, Ningxia, Gansu i Xinjiang de la Xina [1].Té l'efecte de tonificar el yang del ronyó, beneficiar l'essència de la sang, humitejar els intestins i defecar. S'utilitza habitualment a les clíniques per tractar la impotència masculina, la infertilitat femenina, el dolor fred a la cintura i el genoll, el restrenyiment per estasi de la sang., etc. [2-3].Cistanche deserticola mainclosa a la primera part de la Farmacopea Xinesa (edició 2015) hi ha la tija carnosa seca de Cistanche deserticola i Cistanche tubulosa (4). El nostre equip d'investigació porta molts anys realitzant una investigació sistemàtica i profunda sobre les plantes de Cistanche.Els components químics de les plantes de Cistanche són principalment glicòsids feniletanoides, a més dels iridoides i els seus glucòsids, lignans i els seus glucòsids, glucòsids d'alcohol benzílic, etc.[5]. Els estudis farmacològics moderns mostren que els glicòsids de feniletanol, els components principals del gènere, tenen efectes neuroprotectors, antioxidants, hepàtics, antibacterians, antivirals, antitumorals, antiinflamatoris i altres efectes [6-11].

Ginseng del desert

A la Xina,Cistanche deserticolaes distribueix a l'oest de Mongòlia Interior, al nord de Xinjiang i a la conca de Qaidam a Qinghai, però no a la conca de Tarim, al sud de Xinjiang.. A finals de la dècada de 1990, per protegir el jaciment de Tazhong i controlar el desert, la seu del camp petrolier va introduir un gran nombre de dendrons de munició Haloxylon al voltant del jaciment de Tazhong i a banda i banda de la carretera del desert i van inocular el dendron de munició Haloxylon amb cistanche, més de 10 anys. A causa del clima càlid del sud de Xinjiang i de les bones condicions de reg per degoteig a la base del petroli, el rendiment de cistanche deserticola és molt elevat i el rendiment de cistanche deserticola fresca per mu arriba als 500 kg [8]. Molts components químics de Cistanche deserticola han produït un gran nombre d'isòmers a causa de les diferents posicions de connexió dels substituents. Això comporta grans dificultats per a la identificació del pic cromatogràfic d'aquest material medicinal. És difícil identificar amb precisió els components del pic cromatogràfic si només es basa en LC-MS sense compostos monòmers com a control. Per tant, hi ha pocs informes bibliogràfics sobre aquest treball en l'etapa inicial. L'autor va aïllar molts compostos monòmers [9-11] de Cistanche deserticola conreat al desert de Tazhong en l'etapa inicial. Mitjançant aquests compostos monòmers obtinguts en la fase inicial, es van identificar amb precisió els pics cromatogràfics parcials de HPLC de l'extracte de metanol al 60 per cent de Cistanche deserticola. Això no només evitarà la identificació repetida d'alguns compostos coneguts en els constituents químics de Cistanche deserticola, sinó que també proporcionarà alguna referència per a més investigacions sobre el control de qualitat del material medicinal. En aquest document, es van identificar 17 components d'extracte de metanol al 60 per cent de Cistanche deserticola mitjançant HPLC-MS.

Llesca de Cistanche deserticola

Feu clic aquí per veure els productes Cistanche

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

1.Material

Instrument de ressonància magnètica nuclear Inova-500 (Varian, EUA); Espectròmetre de masses 6320IonTrap LC-MS, columna EclipseXDB-C18 (4,6 mm × 250 mm, 5 μ m) (Agilent, EUA); Balança electrònica QUINTIX313-1CN tipus 1/10000 (Divisió Sedaris); Netejador d'ultrasons KQ-500DV (Jiangsu Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.); KMUP - Ⅰ Trace Analytical Ultra Pure Water Generation System (Chengdu Haochun Instrument Equipment Co., Ltd.).

Les 39 substàncies de control utilitzades en aquest experiment van ser aïllades de Cistanche deserticola cultivada al desert a Tazhong per l'autor en la fase inicial, i les seves estructures es van determinar mitjançant RMN i altres tècniques d'espectroscòpia. Les estructures de 39 mostres de control es van identificar com a Cistanche deserticoside J, Cistanche deserticoside K, Cistanche deserticoside L, Cistanche deserticoside M, Cistanche deserticoside N, epimeridinosideA, Isocistancheside C, angiocianina B, Cistanche heterophyllin, Isocornicin, Cistanche deserticoside D, Cistanche deserticoside C, Cistanche deserticoside Cistanche cymosin, 2 '- acetil Cistanche deserticoside A, 2' - acetil Cistanche deserticoside A, Cistanche deserticola B, Cistanche deserticola A, Equinoside A, Cistanche deserticola glicòsid E, Salidroside, 6 '- acetil salidroside, salidroside de B, siringina d'etil , juniperina, (2E, 6E) - 3, 7-dimetil-8-hidroxicatadi{-1-O{- - D-glucòsid, ( més ) - siringina, ( més ) - siringina-4 '- O- - D-glucopiranòsid, ( més ) - isoeucommina A, eucomminA, ( més ) - èter monometil de colofonia- - D-glucòsid, larvicida-4 ' - O- - D-glucòsid, larvicida{-4-O{- - D-glucòsid{- - D glucopiranòsid, hesperidina A, àrea a part A, 6-desoxicatapol. La puresa de totes les substàncies de referència anteriors és superior al 98.0 per cent . L'acetonitril és cromatogràficament pur (DikmaPure, EUA), l'aigua és aigua ultrapura i altres reactius utilitzats en el procés de prova són reactius analítics purs, produïts per Beijing Chemical Plant.

El material medicinal utilitzat en aquest experiment, Cistanche deserticola, es va recollir a la zona desèrtica de Tazhong, Xinjiang, el novembre de 2010. Va ser identificat pel professor Tu Pengfei de l'Escola de Farmàcia de la Universitat de Pequín com la tija carnosa seca de la planta Leobaceae. Cistanche deserticola. L'exemplar es va emmagatzemar al Centre de Recerca Moderna de Medicina Tradicional Xinesa de la Universitat de Pequín (número d'exemplar: CD201011).

Llesca de Cistanche deserticola

2.Mètodes i resultats

2.1 Preparació de la solució de referència

Agafeu aproximadament 1 mg de cadascuna de les 39 mostres de control obtingudes de Cistanche deserticola en l'etapa inicial, peseu-les amb precisió, poseu-les en un matràs aforat de 5 ml respectivament, dissolgueu-les amb metanol i amplieu-les a l'escala, i després obteniu el control únic. solució.

2.2 Preparació de la solució d'assaig

En referència a la Farmacopea Xinesa, edició 2015, agafeu aproximadament 1 g del producte en pols (a través del quart colador), peseu-lo amb precisió, poseu-lo en una ampolla marró de 100 ml, afegiu-hi precisament 50 ml de metanol al 60 per cent, tamponeu-lo. agiteu-lo bé, peseu la massa, remulleu-la durant 30 minuts, tractament ultrasònic durant 40 minuts, refredeu-la, torneu a pesar la massa, afegiu-hi el 50 per cent de metanol per formar la massa reduïda, agiteu-la bé, poseu-la, preneu el sobrenedant, i utilitzeu una filtració de membrana microporosa de 0,45 μ M, agafeu el filtrat continu per obtenir la solució de prova.

2.3 Condicions cromatogràfiques

Columna cromatogràfica AgilentEclipse XDB-C18 (4,6 mm × 250mm, 5 μ m), longitud d'ona de detecció 254 nm, temperatura de la columna 25 graus; Utilitzant acetonitril (A) - 0, 1 per cent de solució aquosa d'àcid fòrmic (B) com a fase mòbil, elució en gradient (0 - 20min, 5 per cent - 15 per cent A; 20 - 50 min, 15 per cent - 30 per cent A; 50 - 60min, 30 per cent - 50 per cent A; 60 - 70min, 50 per cent - 95 per cent A); Caudal: 1,0 ml · min-1, volum d'injecció: 10 μ L.

2.4 Condicions de l'espectre de masses

Temperatura capil·lar 350 graus; Tensió capil·lar 3500V; Caudal de gas de la camisa (nitrogen) 12,0 L · min-1; Pressió del gas auxiliar (nitrogen) 206,8 kPa; El rang complet d'escaneig de l'espectrometria de masses és m/z 50~1000; Heli de gas de col·lisió, l'energia de col·lisió es selecciona automàticament durant la prova; Recolliu 1 agulla per a cada mode d'ions positius i negatius.

2.5 Prova d'una substància de referència

Les 39 solucions de referència preparades sota 2.1 es van provar en 2.3 condicions cromatogràfiques i 2.4 condicions espectromètriques de masses, i es van registrar el seu temps de retenció i el seu pes molecular relatiu (taula 1).

2.6 Determinació de la solució d'assaig

Agafeu el material medicinal Cistanche deserticola recollit de la zona desèrtica de Tazhong, Xinjiang, i prepareu la solució de prova segons el mètode descrit a 2.2. A continuació, realitzeu la determinació segons les condicions cromatogràfiques descrites a 2.3 i les condicions d'espectrometria de masses descrites a 2.4 i determineu el seu cromatograma HPLC i l'espectrometria de masses en el mode d'ions positius i negatius (figures 1-3).

figa. 1 cromatograma HPLC d'extracte de metanol al 60 per cent de Cistanches Herba

figa. 2 Cromatograma TIC MS positiu d'extracte de metanol al 60 per cent de Cistanches Herba

figa. 3 Cromatograma TIC MS negatiu d'extracte de metanol al 60 per cent de Cistanches Herba

2.7 Identificació del cromatograma HPLC de materials medicinals

En les mateixes condicions (2,3 condicions cromatogràfiques i 2,4 condicions d'espectrometria de masses), els components es van identificar comparant el temps de retenció i el pes molecular relatiu de la mostra de prova i la mostra de control. El procés d'identificació específic del pic del cromatograma de la mostra de prova (figura 1) és el següent.

2.7.1 Identificació del pic cromatogràfic 1

El temps de retenció del pic cromatogràfic 1 és de 16,67 minuts. En el mode d'ions positius, el pic d'ions excimer m/z365 es dóna com a [M més Na] més, mentre que en el mode d'ions negatius, es dóna el pic d'ió excimer m/z387 [M més COOH] -. Es determina que el pes molecular relatiu del pic 1 és 342. També es dóna l'ió fragment m/z179, que s'origina per la pèrdua d'1 molècula de glucosa 163 Da a causa de la ruptura de l'enllaç glicòsid. Segons el temps de retenció i el pes molecular relatiu de la substància de referència, el pic cromatogràfic 1 es va identificar com a coniferina.

2.7.2 Identificació del pic cromatogràfic 2

El temps de retenció del pic cromatogràfic 2 és de 17,36 min. Sota el mode d'ions negatius, es donen els pics d'ions excimer m/z357 [M – H] -, 393 [M més Cl] - i es determina que el pes molecular relatiu del pic 2 és 358. Al mateix temps, el El fragment d'ió m/z195 es deriva de la pèrdua d'1 molècula de glucosa 163 Da a causa de la ruptura de l'enllaç glicòsid. El pic cromatogràfic 2 es va identificar com a demetilsiringina segons el temps de retenció i el pes molecular relatiu de la substància de referència.

2.7.3 Identificació del pic cromatogràfic 3

El temps de retenció del pic cromatogràfic 3 és de 19,04 minuts, el pic d'ions excimer m/z395 [M més Na] plus es dóna en el mode d'ions positius i el pic d'ions excimer m/z417 [M més HCOO] - es dóna a la mode d'ions negatius, i el pes molecular relatiu del pic 3 es determina que és 372. Al mateix temps, l'ió fragment m/z209 es deriva de la pèrdua d'1 molècula de glucosa 163 Da a causa de la ruptura de l'enllaç glicòsid. El pic cromatogràfic 3 es va identificar com a siringina segons el temps de retenció i el pes molecular relatiu de la substància de referència.

2.7.4 Identificació del pic cromatogràfic 4

El temps de retenció del pic cromatogràfic 4 és de 27,66 min. El pic d'ions excímers m/z804 [M més NH4] més es dóna en el mode d'ions positius i el pic d'ions excímers m/z785 [M – H] - en el mode d'ions negatius. El pes molecular relatiu del pic 4 es determina que és 786. Al mateix temps, l'ió fragment m/z623 es deriva de la pèrdua per trencar l'enllaç èster d'1 molècula de cafeïna 163 Da. Combinat amb el temps de retenció i el pes molecular relatiu de la substància de referència, el pic cromatogràfic 4 es va identificar com a equinàcia.

2.7.5 Identificació del pic cromatogràfic 5

El temps de retenció del pic cromatogràfic 5 és de 31,48 min, el pic d'ió excimer m/z818 [M més NH4] plus es dóna en el mode d'ions positius i el pic d'ió excimer m/z799 [M – H] - es dóna en el mode mode d'ions negatius i el pes molecular relatiu del pic 5 es determina que és 800. Al mateix temps, l'ió fragment m/z637 es deriva de la pèrdua per trencar l'enllaç èster d'1 molècula de cafeïna 163Da. Combinant el temps de retenció i el pes molecular relatiu de la substància de referència, es va confirmar que el pic cromatogràfic 5 era el cistanche glicòsid A.

Taula 1 Pes molecular i temps de retenció( tＲ ) de 39 compostos estàndard

2.7.6 Identificació del pic cromatogràfic 6

El temps de retenció del pic cromatogràfic 6 és de 34,17 minuts. Dos pics d'ions excímers m/z846642 [M més NH4] més es donen en el mode d'ions positius, i dos pics d'ions excimers m/z827623 [M – H] - també es donen en el mode d'ions negatius. S'especula que el pic 6 pot contenir dos compostos amb un pes molecular relatiu de 828624. Al mateix temps, el fragment d'ió m/z665461 es deriva de la pèrdua de trencament de l'enllaç èster d'1 molècula de cafeïna 163 Da i el fragment d'ió m /z622 es deriva de la ruptura de l'enllaç acetil-èster. Aquests dos compostos es van aïllar i es van combinar amb el temps de retenció i el pes molecular relatiu de la substància de referència, el pic cromatogràfic 6 era una barreja de cimicifugarina i antocianina A.

2.7.7 Identificació del pic cromatogràfic 7

El temps de retenció del pic cromatogràfic 7 és de 35,34 min. El pic d'ions excimer m/z832 [M més NH4] més , 837 [M més Na] més es dóna en el mode d'ions positius i el pic d'ions excímers m/z813 [M – H] - es dóna en el mode d'ions negatius , i el pes molecular relatiu del pic 7 és 814. Al mateix temps, l'ió fragment m/z637 es deriva de la pèrdua per trencar l'enllaç èster d'1 molècula d'àcid ferúlic 177Da. Combinat amb el temps de retenció i el pes molecular relatiu de la substància de referència, el pic cromatogràfic 7 es va identificar com a glucòsid B de cistanche.

2.7.8 Identificació del pic cromatogràfic 8

El temps de retenció del pic cromatogràfic 8 és de 36,17 min, el pic d'ió excimer m/z647 [M més Na] plus es dóna en el mode d'ions positius i el pic d'ió excimer m/z623 [M – H] - es dóna en el mode mode d'ions negatius, i es determina que el pes molecular relatiu del pic 8 és 624. Al mateix temps, es dóna l'ió fragment m/z461, que s'origina per la ruptura de l'enllaç èster i la pèrdua d'1 molècula del grup de cafeïna 163 Da. Combinat amb el temps de retenció i el pes molecular relatiu de la substància de referència, el pic cromatogràfic 8 es va identificar com a heterocoenòsid.

2.7.9 Identificació del pic cromatogràfic 9

El temps de retenció del pic cromatogràfic 9 és de 38,20 minuts. Els pics d'ions excímers m/z860 [M més NH4] més , 865 [M més Na] més es donen en el mode d'ions positius i els pics d'ions excimers m/z841 [M – H ] -, 877 [M més Cl] - es donen en el mode d'ions negatius. El pes molecular relatiu del pic 9 es determina que és 842. Al mateix temps, l'ió fragment m/z679636 es deriva de la pèrdua per trencar l'enllaç èster d'1 molècula de cafeïna 163 Da i 1 molècula d'acetil 43 Da. El temps de retenció i el pes molecular relatiu de la substància de referència són consistents i el pic d'identificació 9 és de 2'- acetil cistanche glicòsid A.

2.7.10 Identificació de cromatogràfica pàgbec 10

El temps de retenció del pic cromatogràfic 10 és de 39,04 minuts. El pic d'ió excimer m/z656 [M més NH4] més , 661 [M més Na] més es dóna en el mode d'ions positius, i el pic d'ió excimer m/z637 [M – H] -, 673 [M més Cl] - es dóna en el mode d'ions negatius. El pes molecular relatiu del pic 10 es determina que és 638. Al mateix temps, l'ió fragment m/z475 es deriva de la pèrdua per trencament de l'enllaç èster d'1 molècula de cafeïna 163 Da. El temps de retenció i el pes molecular relatiu de la substància de referència són consistents i el pic d'identificació 10 és Cistanche C.

2.7.11 Identificació del pic cromatogràfic 11

El temps de retenció del pic cromatogràfic 11 és de 40,82 min. El pic d'ió excimer m/z661 [M més Na] més, 677 [M més K] més es dóna en el mode d'ions positius, i el pic d'ió excimer m/z637 [M – H] -, 673 [M més Cl] - es dóna en el mode d'ions negatius. Es pot determinar que el pes molecular relatiu del pic 11 és 638. Al mateix temps, l'ió fragment m/z475 es deriva de la pèrdua per trencar l'enllaç èster d'1 molècula de cafeïna 163 Da. Combinant el temps de retenció i el pes molecular relatiu de la substància de referència, el pic cromatogràfic 11 es va identificar com a isocistanche glicòsid C.

2.7.12 Identificació del pic cromatogràfic 12

El temps de retenció del pic cromatogràfic 12 és de 41,48 min. El pic d'ions excimer m/z684 [M més NH4] més, 689 [M més Na] més es dóna en el mode d'ions positius i el pic d'ions excímers m/z665 [M – H] - es dóna en el mode d'ions negatius . Es pot determinar que el pes molecular relatiu del pic 12 és 666. Al mateix temps, es demostra que l'ió fragment m/z503460 prové de la pèrdua de trencament de l'enllaç èster d'1 molècula de cafeïna 163 Da i 1 molècula d'acetil 43. Da. Segons el temps de retenció i el pes molecular relatiu de la substància de referència, el pic cromatogràfic 12 es va identificar com a acetil celiaòsid de 2'.

Experiment de Cistanche deserticola

2.7.13 Identificació del pic cromatogràfic 13

El temps de retenció del pic cromatogràfic 13 és de 44,29 min, el pic d'ió excimer m/z689 [M més Na] plus es dóna en el mode d'ions positius i el pic d'ió excimer m/z665 [M – H] - es dóna en el mode d'ions negatius i el pes molecular relatiu del pic 13 és 666. Al mateix temps, es demostra que el fragment d'ió m/z503460 prové de la pèrdua de trencament de l'enllaç èster d'1 molècula de cafeïna 163 Da i 1 molècula d'acetil 43. Da. Combinat amb el temps de retenció i el pes molecular relatiu de la substància de referència, el pic cromatogràfic 13 es va identificar com a antocianina B.

2.7.14 Identificació del pic cromatogràfic 14

El temps de retenció del pic cromatogràfic 14 és de 46,67 min. El pic d'ions excimer m/z675 [M més Na] més es dóna en el mode d'ions positius, i el pic d'ions excimer m/z651 [M – H] - es dóna en el mode d'ions negatius. El pes molecular relatiu del pic 14 és 652. Al mateix temps, l'ió fragment m/z475 es deriva de la pèrdua per trencar l'enllaç èster d'1 molècula del grup d'àcid ferúlic 177Da. Combinat amb el temps de retenció i el pes molecular relatiu de la substància de referència, el pic cromatogràfic 14 es va identificar com a epimeridinòsidA.

2.7.15 Identificació del pic cromatogràfic 15

El temps de retenció del pic cromatogràfic 15 és de 49,90 min. El pic d'ions excimer m/z698 [M més NH4] més , 703 [M més Na] més es dóna en el mode d'ions positius, i el pic d'ions excimer m/z679 [M – H] -, 715 [M més Cl] - es dóna en el mode d'ions negatius. El pes molecular relatiu del pic 15 és 680. Al mateix temps, l'ió fragment m/z517474 es deriva de la pèrdua per trencar l'enllaç èster d'1 molècula de cafeïna 163 Da i 1 molècula d'acetil 43 Da. El pic cromatogràfic 15 es va identificar com a cistanche glicòsid K en funció del temps de retenció i el pes molecular relatiu de la substància de referència.

2.7.16 Identificació del pic cromatogràfic 16

El temps de retenció del pic cromatogràfic 16 és de 55,36 minuts. En el mode d'ions positius, es dóna el pic d'ió excimer m/z717 [M més Na] més, mentre que en el mode d'ió negatiu, el pic d'ió excimer m/z693 [M – H] -, 729 [M més Cl] - es donen, donant com a resultat un pes molecular relatiu de 694 per al pic 16. Al mateix temps, es demostra que l'ió fragment m/z517474 prové de la pèrdua de trencament de l'enllaç èster d'1 molècula d'àcid ferúlic del grup 177 Da i 1 molècula de grup acetil 43 Da. Combinat amb el temps de retenció i el pes molecular relatiu de la substància de referència, el pic cromatogràfic 16 es va identificar com a glucòsid de cistanche J. Els pics cromatogràfics de l'extracte de metanol al 60 per cent de Cistanche deserticola es van identificar mitjançant HPLC-MS combinat amb el pes molecular relatiu, retenció. temps i ió fragment de la substància de referència separada. Els resultats van mostrar que es van identificar amb precisió 17 components dels 16 pics cromatogràfics (taula 2).

Taula 2 Pics cromatogràfics identificats de Cistanches Herba i compostos estàndard de referència

3 .Discussió

3.1 Selecció del mètode de preparació de l'article de prova

L'objectiu principal d'aquest estudi és identificar els pics HPLC de Cistanche deserticola. Per tant, la selecció del dissolvent d'extracció i el mètode d'extracció es basa en la capacitat d'obtenir més pics d'HPLC. L'equip d'investigació ha dut a terme investigacions a llarg termini sobre Cistanche deserticola i ha fet molta feina en anàlisi de qualitat. En aquest treball, també s'ha seleccionat el dissolvent d'extracció i el mètode d'extracció de Cistanche deserticola a partir del treball d'anàlisi previ del grup de recerca i de la Farmacopea Xinesa (edició 2015). Finalment, es va seleccionar com a mètode d'extracció l'extracció ultrasònica amb dissolvent de metanol al 60 per cent durant 40 min.

3.2 Selecció de condicions HPLC-MS

La selecció de la columna cromatogràfica en aquest article es basa en l'anàlisi de la qualitat de Cistanche deserticola en la fase inicial del grup de recerca i la investigació d'AgilentZORBAXEclipsePlusC18 (4,6 mm × 250 mm, 5 μ m), DionexC18 (4,6 mm × 250 mm,5). μ m), ThermoC18 (4,6 mm × 250 mm, 5 μ m) Columna cromatogràfica, finalment seleccioneu columna cromatogràfica AgilentZORBAXEclipsePlusC18 (4,6 mm × 250 mm, 5 μ m) Té un bon efecte de separació sobre Cistanche deserticola; Les 39 substàncies de referència inclouen feniletanoide, lignans i fenilpropanoide, de manera que la longitud d'ona de detecció és de 254 nm; Al mateix temps, els efectes de la fase mòbil com ara metanol-aigua, acetonitril-aigua, metanol-0,1 per cent d'aigua àcid fosfòric, acetonitril-0,1 per cent d'aigua àcid fòrmic sobre la separació cromatogràfica i la massa es va investigar la detecció d'espectrometria i finalment es va seleccionar acetonitril -0, 1 per cent d'aigua d'àcid fòrmic com a fase mòbil.

3.3 Resum

El mètode establert en aquest estudi va identificar amb precisió 17 components de 16 pics cromatogràfics de 60 per cent de metanolextractedeCistanche deserticola. 

Extracte de Cistanche en pols

Els resultats de la investigació no només tenen un cert valor de referència per a l'anàlisi posterior de la qualitat del material medicinal, sinó que també poden evitar alguns treballs repetitius sobre la identificació de l'estructura dels compostos coneguts del material medicinal. Tanmateix, en general, hi ha relativament pocs pics cromatogràfics identificats, i molts pics cromatogràfics no s'han identificat perquè no s'han assignat a la substància de referència. Els components més identificats són glicòsids feniletanoides, mentre que els lignans són rars. Això pot ser perquè el mètode d'extracció a què es refereix l'edició de 2015 de la Farmacopea xinesa està dirigit principalment als glucòsids feniletanoides, o perquè el contingut d'echinacòsids i compostos semblants a coliformes en l'extracte d'aquest material medicinal és massa elevat, la qual cosa dificulta la realització. per detectar altres compostos amb contingut reduït. S'han d'aclarir els motius concrets.

[Referències]

[1] Comitè Editorial de Flora of China. Flora de la Xina [M]. Beijing: Science Press, 1990: 86

[2] Yang Junshan. Ginseng del desert -- Cistanche deserticola [J]. Chinese Journal of Pharmacy, 2011, 46(12): 881．

[3] Tu Pengfei, Jiang Yong, Guo Yuhai, et al. Recerca sobre Cistanche deserticola i el seu desenvolupament industrial[J]. Chinese Journal of Pharmacy, 2011, 46 (12): 882-887

[4]Comissió Nacional de Farmacopea. Farmacopea de la República Popular de la Xina. Part I [M]Beijing: Xina Pharmaceutical Science and Technology Press, 2015: 135

[5] JIANG Y,TU PF. Anàlisi de components químics en espècies de Cistanche ［J］． J Chromatogr A,2009,1216 ( 11): 1970-1979．

[6] PAN J,YUAN CS,LIN CJ,et al. Activitats farmacològiques i mecanismes dels glucòsids fenilpropanoides naturals［J］． Pharmazie,2003,58(11): 767-775．

[7] FU GM, PANG HH, Wong Y. Glicòsids feniletanoides d'origen natural: pistes potencials per a noves terapèutiques［J］． Curr Med Chem, 2008, 15 ( 25 ): 2592-2613．

[8] Rhode Mei, Long Mei, Du Wenjing, et al. El mecanisme de l'efecte anti-osteoporosi de l'extracte de Cistanche deserticola en ratolins M KOOPG ［ J ］. Experiment xinès Journal of Prescriptions, 2016, 22 (10): 138-142

[9] Ma Hui, Yin Ruoxi, Guo Min, et al. Efecte del polisacàrid de Cistanche deserticola sobre l'envelliment induït per la D-galactosa Efecte de l'expressió CREB en ratolins de model antic ［ J ］. Chinese Experimental Prescriptions Journal, 2014, 20 (20): 137-141

[10] Tao Yicun, Li Jianying, Xu Yonghua, et al. Efectes del feniletanòsid de Cistanche deserticola en rates Prevenció i tractament de l'edema pulmonar a gran altitud ［ J ］. Chinese Journal of Experimental Prescriptions,2014,20(15): 134-138．

[11] Zhou Haitao, Cao Jianmin, Lin Qiang. Cistanche deserticola sobre la capacitat de natació esgotada de les rates i la capacitat antioxidant mitocondrial del miocardi ［ J ］. Fórmula experimental xinesa Journal of Science, 2012, 18 (6): 229-233

[12] NAN ZD,ZHAO MB,ZENG KW, et al. Iridoides antiinflamatoris de les tiges de Cistanche deserticola cultivades al desert de Tarim ［J］． Chin J Nat Med,2016,14(1): 61-65．

[13] NAN ZD,ZENG KW,SHI SP, et al. Glicòsids feniletanoides amb activitats antiinflamatòries de les tiges de Cistanche deserticola cultivades al desert de Tarim ［J］． Fitoterapia,2013,89: 167-174．

[14] Nan Zedong, Zhao Mingbo, Jiang Yong, et al. Química del cistanche del desert cultivat a Tazhong Estudi de composició ［ J ］. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2013, 38 (16):2665-2670．

[15] Nan Zedong, Zhao Mingbo, Jiang Yong, et alLignans [J]. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2015, 40 (3):463-468．