Expressió gènica relacionada amb la immunitat als ronyons i la melsa dels ansaris infectats amb l'astrovirus nefrític de l'oca

Contactetina.xiang@wecistanche.comper a més informació.

RESUML'astrovirus nefrític de l'oca (GNAstV) es va aïllar per primera vegada el 2018, causant grans pèrdues econòmiques a la indústria de l'oca. No obstant això, se sap poc sobre l'amfitrióresposta immunea la infecció per GNAstV. En aquest estudi, es van dividir aleatòriament quaranta anssins de {{0}}dia d'edat en 2 grups: grups d'infecció i control negatiu. Cada gosling del grup d'infecció es va desafiar amb 0, 5 ml de GNAstV-JSHA per via intramuscular, mentre que el gosling del grup de control negatiu es va inocular amb la mateixa quantitat de PBS. Canvis histopatològics i localització del virus a lamelsaironyóes van examinar i es va determinar l'expressió de gens relacionats amb la immunitat mitjançant qPCR als 7 i 14 dies després de la infecció. Els nostres resultats van mostrar que la degeneració i necrosi induïda per la infecció per GNAstV dels limfòcits esplènics i les cèl·lules epitelials renals, i aquestes cèl·lules eren positives per al virus. A més, la infecció per GNAstV va induir l'activació de receptors de reconeixement de patrons (RIG-I, MDA-5 i TLR3) i molècules adaptadores clau.

(MyD88, MAVS i IRF7) a la melsa i el ronyó, i va regular l'expressió gènica d'interferó a la melsa i proteïnes antivirals (MX1, OASL i IFITM3) a la melsa i el ronyó. A més, es van trobar alts nivells d'expressió d'interleucina (IL)-1 i IL{-8 a la melsa i iNOS a la melsa i el ronyó. Aquests resultats van indicar que la infecció per GNAstV va activar la resposta immune innata de l'hoste. A més, la infecció per GNAstV va augmentar els nivells d'expressió de CD8t, MHCI i MHCII, cosa que indica que es va activar una resposta immune adaptativa. A més, el TGF- es va expressar molt a la melsa i al ronyó, cosa que pot ser una estratègia d'evasió immune de GNAstV per provocar infecció. Curiosament, els nivells d'ARNm d'IL-1 i IL-6 es van reduir al ronyó, cosa que pot ajudar a reduir les lesions renals. Aquest és el primer estudi que informa de canvis en l'expressió gènica relacionada amb el sistema immunitari en resposta a la infecció per GNAstV, i els nostres resultats proporcionen informació sobre la patogènesi viral.

Paraules clau: astrovirus nefrític de l'oca, resposta immune, melsa, ronyó, gosling

Feu clic per conèixer els avantatges de la tija del cistanche i tenir experiència amb el cistanche

INTRODUCCIÓ

Des del 2017, diversos ramats d'oques han experimentat un brot greu de gota en ansarons d'un dia de 4- a 16-a l'est de la Xina, la qual cosa ha provocat pèrdues econòmiques importants a la indústria de les oques. Els goslings infectats presentaven un pes corporal reduït i ronyons inflats i pàl·lids, amb urats blancs als urèters i disposició d'urats a la superfície dels òrgans viscerals i la cavitat articular. L'any 2018, es va aïllar un nou astrovirus de l'oca dels goslings infectats i els experiments de reproducció amb animals van demostrar que era el principal agent causant de la malaltia de la gota. Aquest virus era genèticament diferent dels coneguts astrovirus i astrovirus mam. Va formar un clade diferent d'acord amb la seqüència d'aminoàcids de la proteïna ORF2 de longitud completa (proteïna càpsida), que és la regió més variable del genoma. Per tant, s'ha de prestar més atenció als danys causats pel virus als ansaris. En el present estudi, el nou astrovirus de l'oca s'anomena astrovirus nefrític de l'oca (GNAstV).

Com que el GNAstV és un virus emergent, la majoria dels estudis s'han centrat en el seu aïllament, anàlisi genètica i establiment de mètodes de diagnòstic (Yuan et al., 2018; Wan et al., 2019; Yin et al., 2020). Tanmateix, se sap poc sobre la resposta immune de l'hoste a la infecció per GNAstV. L'astrovirus nefrític de l'oca causa principalment danys al ronyó, el fetge i la melsa en els ansaris, i s'ha detectat una càrrega viral més alta al ronyó i la melsa en comparació amb la d'altres òrgans (Jin et al, 2018; Xu et al, 2019). Les lesions esplèniques i la càrrega viral elevada indiquen que el virus pot causar danys a la resposta immune. El sistema immunitari innat té un paper important durant la infecció pel virus, ja que serveix com a primera línia de defensa contra la invasió viral (Chow J et al., 2015). Els receptors de reconeixement de patrons (PRR) reconeixen els àcids nucleics virals i provoquen una resposta innata, inclosa la producció de citocines, com ara I-1, TNF-x i IFN, i proteïnes antivirals com OASL, IFITM3 i MX1. El receptor 3 de tipus Toll lligat a la membrana (TLR3) i els receptors tipus RIG-I citosòlics que contenen principalment RIG-1 i MDA-5 són els PRR més importants que reconeixen l'ARN viral. La resposta immune innata indueix la senyalització per provocar la resposta immune adaptativa, que controla la infecció viral en una fase posterior d'infecció. La resposta immunitària adaptativa inclou la resposta I mediada per anticossos/cèl·lules B i la resposta mediada per cèl·lules, que requereixen la implicació de molècules CD3 plus, CD4 plus, CD8 plus i MHC classe I i II. Actualment, els mecanismes pels quals GNAstV afecta les respostes immunitàries innates i adaptatives de l'hoste no estan clars. La Xina és la llar de la població d'oques més alta del món; per tant, investigar la resposta immune de l'oca a la infecció per GNAstV és important per dilucidar el mecanisme de patogenicitat i immunitat de GNAstV i controlar-ne la propagació. En aquest estudi, 2-gossins d'un dia d'edat es van infectar amb GNAstV. A continuació, es van examinar els canvis histopatològics i la ubicació del virus, així com l'expressió gènica relacionada amb el sistema immunitari a la melsa i el ronyó.

MATERIALS I MÈTODES

Declaració Ètica

Tots els experiments amb animals es van dur a terme d'acord amb les directrius per a animals experimentals del Ministeri de Ciència i Tecnologia (Beijing, Xina) i van ser aprovats pel Comitè Institucional de Cura i Ús d'Animals de la Universitat Agrícola de Nanjing.

Virus

L'aïllat GNAstV-JSHA (núm. d'adhesió GenBank MK125058) es va aïllar de ansarons malalts amb gota (província de Jiangsu, Xina) i es va mantenir al nostre laboratori. El títol del GAstV-JSHA va ser d'1 × 104. 25 50 per cent de dosi infecciosa de cultiu de teixits (TCID50)/ml tal com es va determinar mitjançant la titulació en cèl·lules epitelials de ronyó d'oca d'acord amb el mètode de Reed & Muench.

Experiment amb animals

Les mostres de melsa i ronyó es van recollir del nostre experiment anterior amb animals que es va descriure a l'estudi de Xu (Xuet al., 2019). Breument, es van separar aleatòriament2-anssins de quaranta dies sense infecció per GNAstV en 2 grups: grups d'infecció i control negatiu. Cada gosling del grup d'infecció es va desafiar amb 0, 5 ml de GNAstV-JSHA mitjançant inoculació intramuscular, mentre que el gosling del grup de control negatiu es va inocular amb la mateixa quantitat de PBS.

Tots els goslings es van controlar diàriament per detectar els signes clínics. Als 7 dies després de la infecció (dpi), es van sacrificar 10 goslings de cada grup i es van examinar els canvis bruts, i després es van recollir el ronyó i la melsa. Una part d'aquests problemes es va solucionar amb un 10 per cent de formaldehid per a l'examen histopatològic, la resta es va emmagatzemar a -80 grau per a més experiments. A 14 dpi, es van sacrificar els goslings supervivents i es van recollir i emmagatzemar teixits com s'ha esmentat anteriorment.

Exploració histopatològica

Les mostres fixes es van deshidratar amb una sèrie d'alcohols, es van clarificar en xilè i es van incrustar en parafina. A continuació, les mostres es van tallar en sèrie en seccions de 4 μm i es van tacar amb hematoxilina i eosina mitjançant mètodes rutinaris. Les seccions tacades es van examinar amb un microscopi de llum.

Detecció d'ubicació de virus mitjançant hibridació in situ

El mètode d'hibridació in situ (FISH) es va realitzar segons les instruccions del kit comercial ISH (Boster, Xina), amb algunes modificacions. Abans de realitzar ISH, es va provar i optimitzar la sensibilitat i l'especificitat de la mostra mitjançant una sèrie de pretractaments. Breument, les seccions de teixit desparafinat es van tractar prèviament amb HCl (0.2 M, 15 min) i proteïnasa K （40 ug/mL, 20 min, 37 graus ）. La proteasa K es va inhibir mitjançant la fixació en un 4% de paraformaldehid durant 5 min. A continuació, es van realitzar els passos d'hibridació i post-hibridació. Es van afegir sondes al tampó d'hibridació a una concentració de 0.5-2 ug/mL; el tampó que contenia les sondes es va desnaturalitzar a 98 graus durant 10 min i es va refredar immediatament amb gel. Es van pipetear aproximadament 20 μL de la barreja d'hibridació sobre seccions de teixit, es van cobrir amb cobertors tractats amb dietilpirocarbonat i es van incubar durant 16 a 20 h a 42 graus. Les sondes que s'havien hibridat amb l'ARN viral es van detectar utilitzant un anticòs anti-DIG conjugat a 3,3-N-diaminobenzidina tetraclorhidrat. Les diapositives es van tacar amb verd de metil i es van segellar amb goma neutra. Per millorar la sensibilitat, es va utilitzar la proteinasa K per millorar la permeabilitat dels teixits per facilitar l'entrada de sondes al teixit.

Anàlisi de gens immunitaris mitjançant PCR quantitativa en temps real

L'ARN total es va extreure amb Trizol (Invitrogen, CA) i la transcripció inversa de l'ARN es va realitzar mitjançant el kit HiScript Q RT SuperMix (Vazyme, Xina). Es va utilitzar un termociclador (AB7300; Life Technologies) per a la PCR quantitativa. Es va utilitzar el programari Primer 5.0 per a la designació dels gens relacionats amb la immunitat, tal com es mostra a la Taula 1. L'expressió d'àcid ribonucleic es va normalitzar mitjançant la quantificació de GAPDH com a gen de neteja. Els nivells de transcripció relatius es van analitzar per mètode mitjançant l'2-AACT

Anàlisi estadística

Les diferències entre el grup control i el grup experimental es van analitzar mitjançant la prova t de Student. Els resultats s'expressen com a mitjana ± desviació estàndard. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistical="" significance="" compared="" with="" the="" control="" group,="" and="">< 0.01="" was="" considered="" to="" indicate="" a="" high="" degree="" of="" significance="" compared="" with="" the="" control="">

RESULTATS

Canvis clínics

No es van observar morts ni signes clínics evidents en el control no inoculat. Tanmateix, 5 dels 20 goslings infectats van morir durant l'experiment i es va observar una reducció del pes corporal en els goslings infectats amb GNAstV. A l'autòpsia, els òrgans del grup de control negatiu semblaven normals, però la disposició d'urats a la superfície dels òrgans (fetge, cor i ronyó), els sacs biliars i la cavitat articular es va detectar en els ansarons morts. A més, es van observar ronyons inflats i pàl·lids amb urat blanc als urèters en tots els goslings infectats. Els canvis patològics es van mostrar en el nostre estudi anterior (Xu et al..2019). Aquests resultats van indicar que vam establir amb èxit un model animal d'infecció per GNAstV en goslings.

Canvis histopatològics en el ronyó i la melsa

A l'examen histopatològic, els ronyons i la melsa dels ansaris de control negatiu semblaven histològicament normals (figures 1A i 1B). No obstant això, la degeneració i la necrosi de les cèl·lules epitelials renals iinflamatòriaes va observar infiltració cel·lular als ronyons dels anssins infectats (figura 1C). A més, necrosi de la melsalimfòcitsi també es va trobar infiltració de cèl·lules inflamatòries a la melsa (figura 1D).

Localització del virus al ronyó i la melsa

Es va examinar la ubicació de l'astrovirus nefrític de l'oca als ronyons i la melsa mitjançant ISH. Com es mostra a la figura 2, es van detectar diverses partícules marrons al citoplasma de les cèl·lules epitelials tubulars renals, però no es van observar partícules marrons als glomèruls del ronyó. Es van detectar poques partícules marrons als limfòcits esplènics i a les cèl·lules dels macròfags de la melsa. Aquests resultats indiquen que GNAstV pot infectar cèl·lules epitelials tubulars renals i limfòcits esplènics.

Expressió de PRR i molècules adaptadores a la melsa i el ronyó de goslings infectats per GNAstV L'expressió de PRR (RIG-1, MDA-5 i TLR3) i molècules adaptadores clau (MAVS, MyD88 iIRF7) a la melsa i als ronyons es va determinar mitjançant qPCR tal com es mostra a la figura 3. El nivell d'ARNm del 3 PRR a la melsa va augmentar significativament en el grup infectat a 7 i 14 dpi en comparació amb el grup control negatiu (P<0.05). the="" rig-1="" and="" tlr3="" mrna="" levels="" in="" the="" kidneys="" were="" also="" increased="" in="" the="" infected="" group="" at="" 7="" and="" 14="" dpi="" compared="" with="" that="" in="" the="" negative="" control="">< 0.01).="" the="" mda-5="" mrna="" level="" was="" higher="" in="" the="" infected="" group="" at="" 14="" dpi,="" but="" no="" difference="" in="" mda-5="" mrna="" expression="" was="" observed="" between="" the="" infected="" and="" negative="" control="" groups="" at="" 7="" dpi(p="">0.05). En conseqüència, l'expressió de les molècules adaptadores en el grup infectat a 7 i 14 dpi va ser significativament superior a la del grup control (P<0.05). these="" results="" indicate="" that="" gnastv="" infection="" activates="" the="" host's="" innate="" immune="">

Expressió de citocines a la melsa i el ronyó dels ansaris infectats per GNAstV

Les expressions de la citocina, IL-1, I-6, IL-8, Ⅱ-10, TGF-B i iNOS es van determinar mitjançant qPCR tal com es mostra a la figura 4. A la melsa, els nivells d'ARNm d'IL-1B i TGF-B al grup d'infecció a 7 i 14Els dpi eren òbviament més alts que els del grup de control negatiu (P<0.01). furthermore,="" the="" i-8="" and="" inos="" mrna="" levels="" in="" the="" infection="" group="" at="" 14="" dpi="" were="" higher="">< 0.05).="" but="" no="" differences="" in="" the="" levels="" were="" observed="" between="" the="" infection="" and="" negative="" control="" groups="" at="" 7="" dpi(p=""> 0.05). Moreover, no difference in I-6 mRNA expression at 7 and 14 dpi was observed between the infection and control groups(P>0.05). Als ronyons, els nivells d'ARNm d'I-1 a 7 i 14 dpi i I-6 a 7 dpi eren més baixos en el grup d'infecció que els del grup de control negatiu (P< 0.05),="" whereas="" the="" tgf-b="" and="" inos="" mrna="" levels="" at="" 7="" and="" 14="" dpi="" and="" the="" i-8="" mrna="" level="" at="" 14="" dpi="" were="" higher="" in="" the="" infection="" group="" than="" those="" in="" the="" negative="" control="" group=""><0.05). no="" difference="" in="" i-10="" expression="" was="" detected="" between="" the="" infection="" and="" control="" groups(p="">0.05).

Expressió de proteïnes antivirals a la melsa i els ronyons dels ansaris infectats per GNAstV

El nivell d'ARNm d'IFN-d. a la melsa i l'expressió de proteïnes antivirals (OASL, IFITM3.i MIX1) al ronyó i la melsa es van determinar tal com es mostra a la figura 5. A la melsa, els nivells d'ARNm deIFN-2. OASL, IFITM3 i MX1 a 7 i 14 dpi eren significativament més alts en el grup infectat que els del grup control negatiu (P< 0.05).="" in="" the="" kidney,="" the="" mrna="" levels="" of="" oasl,="" ifitm3,="" and="" mx1="" at="" 14="" dpi="" were="" obviously="" higher="" in="" the="" infected="" group="" than="" in="" the="" negative="" control="" group=""><0.05); however,="" no="" significant="" differences="" in="" levels="" were="" observed="" between="" the="" infection="" and="" negative="" control="" group="" at="" 7="" dpi(p="">0.05).

Expressió de molècules CD4t, CD8 plus i MHC Classe i I a la melsa de goslings infectats per GNAstV

L'expressió de gens associats a la presentació d'antigen (molècules CD4', CD8', MHC classe I i II) a la melsa es va determinar mitjançant qPCR tal com es mostra a la figura 6. Els nivells d'expressió de MHC I a 7 i 14Els dpi eren significativament més alts al grup infectat que als del grup control negatiu (P <{0}},05). els="" nivells="" d'expressió="" de="" mhc="" ii="" a="" 14="" dpi="" eren="" òbviament="" més="" alts="" en="" el="" grup="" infectat="" que="" els="" del="" grup="" control="" negatiu=""><0.05); however,="" no="" difference="" in="" levels="" was="" observed="" between="" the="" 2="" groups="" at="" 7="" dpi(p="">0.05). Els nivells de CD8 més ARNm a 7 i 14 dpi eren significativament més alts en el grup infectat que els del grup control negatiu (P< 0.05).="" but="" no="" changes="" in="" cd4+mrna="" levels="" at="" 7="" and="" 14="" dpi="" were="" found="" between="" the="" 2="" groups="" (p="">0.05).

DISCUSSIÓ

L'astrovirus nefrític de l'oca és un virus recentment aïllat que pot causar gota visceral i la mort dels ansarons, provocant grans danys als pollets d'oca. Fins ara, no hi ha vacunes ni agents terapèutics per al seu tractament. Per tant, és necessari investigar la resposta immune de l'hoste al virus per entendre la seva patogènesi i desenvolupar vacunes i teràpies. En aquest estudi, vam establir amb èxit un model animal en goslings mitjançant inoculació intramuscular amb GNAst V-JSHA. La localització del virus en limfòcits esplènics i macròfags i la necrosi dels limfòcits esplènics indiquen que GNAstV pot infectar la melsa i induir danys al sistema immunitari de l'hoste. Tanmateix, fins ara, no hi ha hagut informes sobre la resposta immunològica dels goslings infectats amb GNAstV. A més, es va observar un títol viral elevat a les cèl·lules epitelials renals. i això pot contribuir al dany renal i al trastorn d'excreció d'àcid úric.

El sistema immunitari innat és la primera línia de defensa contra un patogen invasor. En el nostre estudi, la infecció per GNAstV va provocar un augment de TLR3. Expressió d'ARNm RIG-1 i MIDA-5 a la melsa i el ronyó, cosa que indica que el sistema immunitari innat es va activar, cosa que pot contribuir a la inhibició de la invasió viral, la regulació positiva de les molècules adaptadores clau (MyD88 i IRF7). ) va confirmar encara més aquests resultats. L'IFN es produeix després de l'activació del PRR, que té un paper crític en la supressió viral mitjançant la inducció de diversos gens estimulats per IFN els productes dels quals tenen activitat antiviral directa. En el nostre estudi, l'expressió d'IFN-z a la melsa i l'expressió de proteïnes antivirals (OASL, MX1 i IFITM3) a la melsa i el ronyó es van incrementar després de la infecció per GNAstrV. L'augment de la producció de proteïnes antivirals pot ser útil per a la inhibició de la invasió viral. D'acord amb això, els nostres resultats van mostrar que TLR3.RIG-1. MDA-5 i IRF7 es van activar durant la infecció per GNAstV. Un estudi anterior també va demostrar que el tipus de sistema limita la replicació dels astrovirus humans in vitro i in vivo i proporciona protecció contra la permeabilitat de la barrera induïda per astrovirus (Marvin et al..2015). Tanmateix, les troballes de TLR3 i OASL eren diferents de les de les altres proteïnes PRR i antivirals a la melsa, ja que l'expressió tant de TLR3 com de OASL va disminuir a 14 dpi en comparació amb 7 dpi. Això pot estar relacionat amb la regulació de la retroalimentació negativa o la reducció de la càrrega de virus. En conseqüència, lL-1B a 14 dpi pot ser el resultat de mecanismes reguladors del cos contra l'excés de producció de citocines proinflamatòries. Curiosament, el nivell d'ARNm d'I-1 al ronyó es va reduir en el grup infectat. Un nivell més baix d'aquesta citocina proinflamatòria pot ajudar a alleujar el dany renal. Estudis anteriors van informar que les infeccions per astrovirus humà i astrovirus tipus 2 (TASt V-2) no estaven associades amb la inflamació i van causar poques lesions a les vellositats intestinals (Koci et al..2003; Sebire et al.2004), cosa que suggereix que aquesta pot ser una característica de la infecció per astrovirus a les cèl·lules epitelials. I-6 també és una citocina inflamatòria que indueix efectes antivirals mitjançant una resposta immunitària eficient, però també està implicada en processos que provoquen danys vasculars,inflamacióde la paret vascular i trombosi. En el nostre estudi, no es va trobar cap canvi significatiu en IL-6 a la melsa després de la infecció per GNAstV; això podria estar relacionat amb grans diferències entre ansaris individuals. Tanmateix, l'expressió I-6 es va reduir al ronyó, de manera similar a l'observació de -1B; això també pot ajudar a alleujar el dany renal. I-8 és un mediador responsable del reclutament de neutròfils que participen en l'infiltrat inflamatori local. En aquest estudi, I-8 estava regulat a la melsa i el ronyó i, per tant, pot haver contribuït a la inflamació. IL-10 és una citocina antiinflamatòria que pot inhibir la producció de citocines proinflamatòries. En aquest estudi, GNAstV va provocar una disminució òbvia dels nivells d'IL-10 a la melsa; això podria ser una indicació d'una inflamació severa a la melsa i una de les causes del dany a la melsa. També s'ha demostrat que la infecció per altres virus, com el virus de l'encefalitis japonesa i el virus del Zika, provoca una disminució de l'expressió I-10 (Swarup et al. 2007; Abreu 2019), però el mecanisme exacte GNAstr Vinfection subjacent necessita més estudis. TGF- és una citocina immunosupressora. Així, l'augment dels nivells de TGF-B a la melsa i el ronyó indica que la infecció per GNAstV pot induir la supressió immune. A més, es va informar que la infecció per T AStV-2 va augmentar el nivell sèric de TGF- als galls dindis (Koci et al.2003). S'ha demostrat que l'augment de la producció de TGF suprimeix la resposta immune i millora la replicació viral (Letterio i Roberts, 1998). Per tant, l'augment de la producció de TGF podria contribuir a la replicació de GNAstV inhibint la resposta immune de l'hoste. iNOS és un component important de la resposta immune innata i té un paper clau en el control de les infeccions víriques. En el nostre estudi, els resultats van indicar que la infecció per GNAstV

òbviament va augmentar l'expressió INOS. L'alta producció d'iNOS pot permetre a l'hoste resistir la infecció viral. Els nostres resultats estaven d'acord amb els d'estudis anteriors, que van demostrar que la infecció per TAStV-2 indueix la producció d'iNOS, la qual cosa limita la replicació d'astrovirus (Qureshi et al., 200l; Koci et al., 2004; Meyerhoff et al., 2012). ).

El sistema immunitari adaptatiu juga un paper clau en el control de les infeccions víriques. En el nostre estudi, GNAstVinfection va augmentar el nivell d'ARNm de MHC Ia, MHC Iix i CD8 plus, i això indica que es van activar les respostes immunes humorals i cel·lulars. Anteriorment, es va informar que la infecció per astrovirus humà evoca la producció d'anticossos, que poden neutralitzar el virus (Kurtzand Lee, 1978). No obstant això, no es van trobar canvis significatius en l'expressió de CD4 més ARNm a l'estudi. Tenint en compte que les cèl·lules T CD4" són essencials per a la maduració de les cèl·lules B i l'especificitat d'anticossos, és possible que GNAst V no pogués induir una resposta immune humoral forta. Això pot explicar per què no es va observar un augment evident de l'expressió MHC Ⅱ a 7 dpi. A més. , els nivells d'ARNm de CD8 i MHCIa a 14 dpi van disminuir en comparació amb 7 dpi. Això pot estar relacionat amb la reducció de la càrrega de virus, com s'ha esmentat anteriorment. En aquest estudi, l'anticossos GNAst V no es va detectar perquè no hi ha cap kit comercial disponible. , el paper dels anticossos en GNAstVinfection s'ha d'investigar més a fons.

En conclusió, les nostres dades van revelar els patrons de resposta immune a la melsa i el ronyó dels ansàssos infectats amb GNAst V. A la infecció per GNAst V, es van activar gens relacionats amb la immunitat innata i adaptativa. No obstant això, la producció de citocines i proteïnes antivirals no va protegir els goslings contra la malaltia. Aquest és el primer estudi que informa dels canvis en les expressions gèniques relacionades amb el sistema immunitari en resposta a GNAst Vinfection, que pot ajudar a dilucidar encara més els mecanismes moleculars de les interaccions amb GNAstV hoste.