Respostes d'anticossos funcionals i neutralitzants longitudinals a les variants del coronavirus 2 del síndrome respiratori agut greu després de la vacunació del 2019 de la malaltia del coronavirus d'ARN missatger

En aquesta cohort prospectiva longitudinal d'adults sans als Estats Units, vam trobar que les sèries primàries d'ARN missatger i les vacunes de reforç de la malaltia del coronavirus 2019 van provocar títols elevats d'anticossos de citotoxicitat de citotoxicitat mediada per cèl·lules depenent d'anticossos i neutralitzadors de reacció creuada àmpliament, que van disminuir gradualment més de 6. mesos, especialment contra les variants del coronavirus 2 de la síndrome respiratòria aguda severa. Aquestes dades donen suport a la indicació d'una vacunació de reforç posterior.

Paraules clau.

ADCC; citotoxicitat mediada per cèl·lules dependent d'anticossos; durabilitat; immunitat híbrida; Omicron.

planta de cistanche per augmentar el sistema immunitari

Al març de 2023, la pandèmia del coronavirus 2019 (COVID-19) causada pel coronavirus 2 (SARS-CoV-2) de la síndrome respiratòria aguda severa ha causat més de 600 milions de casos i 6,8 milions de morts a tot el món [1]. ]. La pandèmia s'ha caracteritzat per l'aparició seqüencial de variants del SARS-CoV-2 amb una major transmissibilitat i la capacitat d'escapar parcialment d'anticossos neutralitzants induïts per la vacuna i la infecció natural [2]. Una d'aquestes variants va ser la soca Omicron (B.1.1.529), que va ser declarada variant de preocupació (VOC) per l'Organització Mundial de la Salut el novembre de 2021 [3].

Beneficis de cistanche per a homes que enforteixen el sistema immunitari

Feu clic aquí per veure els productes Cistanche Enhance Immunity

【Demanar més】 Correu electrònic:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Des que Omicron es va identificar per primera vegada, han sorgit múltiples sublinatges, inclosos BA.1, BA.2, BA.2.12.1 i BA.4/5 (figura suplementària 1), que es van convertir en la soca predominantment circulant als Estats Units el juny de 2022. [4]. Tot i que Omicron s'ha caracteritzat per una malaltia menys greu [5–7], pot evadir parcialment els anticossos neutralitzants a causa de mutacions en el domini d'unió al receptor de proteïnes de punta (RBD) [8]. Se sap menys sobre la capacitat de les variants d'Omicron per evadir els anticossos que medien les funcions efectores de Fc. Tot i que el paper dels anticossos neutralitzadors en la protecció contra COVID-19 ha estat ben establert [9-11], la importància dels anticossos efectors Fc s'ha reconegut més recentment [12, 13]. Els anticossos poden mediar les funcions efectores de Fc, inclosa la citotoxicitat mediada per cèl·lules depenent d'anticossos (ADCC), la fagocitosi mediada per cèl·lules depenent d'anticossos, la fagocitosi de neutròfils dependent d'anticossos i la deposició de complement dependent d'anticossos mitjançant la unió de Fab als antígens objectiu i el compromís de Fc amb qualsevol de les dues. Receptors Fc (FcRs; presents a totes les cèl·lules immunitàries innates) o components del sistema del complement. Com que els anticossos efectors Fc es poden unir a llocs antigènics diferents dels anticossos neutralitzants, poden conservar la funcionalitat i conferir protecció independentment de la neutralització. Per tant, en aquest estudi, hem mesurat l'ADCC funcional longitudinal i les respostes d'anticossos neutralitzants als COV SARS-CoV-2 que circulen actualment després de les vacunacions primàries i de reforç d'ARN missatger (ARNm) de COVID{-19 en individus amb i sense immunitat híbrida. .

cistanche tubulosa: millora el sistema immunitari

MÈTODES

Declaració de consentiment del pacient

Aquest estudi va ser aprovat per la Junta de Revisió Institucional de la Universitat d'Emory i tots els participants van proporcionar un consentiment informat per escrit.

Cohort d'estudi 

Els adults ambulatoris sans amb o sense antecedents de COVID-{0}} simptomàtics diagnosticats mitjançant proves d'atenció estàndard es van inscriure prospectivament en un protocol de recollida de mostres del 27 d'abril de 2020 al 12 d'abril de 2021. ARNm d'atenció estàndard COVID{{ Es van administrar 9}} sèries de vacunes primàries i vacunes de reforç monovalents als participants segons el proveïdor/ubicació escollida (taula 1). Els participants van ser seguits en els moments de prevacunació, després de la dosi 2, de la dosi de reforç i de la dosi posterior a la 3 a 1 mes, 3 mesos i 6 mesos després de la dosi de reforç. Les mostres de sèrum es van recollir en cada moment en tubs separadors de sèrum, es van dividir en alíquotes i es van congelar a -80 graus fins a l'anàlisi. Neutralització de pseudovirusAssajos

Pseudovirus amb SARS-CoV-2 de tipus salvatge (Wuhan-Hu{-1), Delta (B.1.617.2) i Omicron (subvariants BA.1, BA.2, BA.2.12.1) , i BA.4/5) es van desenvolupar proteïnes d'espiga i es van realitzar assajos tal com es va descriure anteriorment (Mètodes suplementaris) [14, 15]. Les plaques es van desenvolupar mitjançant el substrat de luciferasa Britelite Plus (PerkinElmer) i es van llegir unitats de luminescència relativa (RLU) en un luminòmetre TopCount NXT. El títol d'anticossos neutralitzants a cada proteïna de punta variant es va expressar com la concentració efectiva a la qual es va neutralitzar el 50% del virus.

Assajos ADCC El desenvolupament de proteïnes fluorescents verdes induïbles per tetraciclina i línies cel·lulars de doble reporter de luciferasa que expressen proteïnes d'espiga variant de SARS-CoV -2 es va realitzar tal com es va descriure anteriorment [14, 15]. La citotoxicitat es va determinar a partir d'una lectura de luminescència que indicava cèl·lules vives residuals. L'ADCC es va calcular segons la fórmula següent: ADCC (%)=[RLU × (sense anticos) – RLU (amb anticos)] / RLU (sense anticos) × 100 i s'expressa com a títol final.

cistanche tubulosa: millora el sistema immunitari

RESULTATS

Cohort de l'estudi Es van inscriure prospectivament setze participants amb i 10 participants sense antecedents de COVID-19 que posteriorment van rebre la vacunació d'ARNm COVID-19 (taula 1 i taula suplementària 1). Els diagnòstics de COVID-19 es van produir de març a desembre de 2020, que van precedir en gran part l'aparició dels COV als Estats Units. Dels que tenien antecedents de COVID-19, 1 (7%) van rebre ARNm-1273 i 15 (93%) van rebre BNT162b2 per a les dosis 1 i 2, mentre que 3 (19%) van rebre ARNm{{ 19}} i 13 (81%) van rebre BNT162b2 per a la dosi 3. Dels que no tenien antecedents de COVID-19, 3 (30%) van rebre ARNm-1273 i 7 (70%) van rebre BNT162b2 per a les dosis 1, 2 i 3.

Respostes d'anticossos neutralitzadors de pseudovirus Com era d'esperar, alguns participants amb antecedents de COVID{0}} tenien anticossos neutralitzants detectables contra soques de tipus salvatge (9/16 [56%]) i variants (4/16 [25%]) a base, mentre que el grup ingenu de la COVID--19 tenia anticossos neutralitzants de base indetectables (figura 1A). La 2-sèrie de vacunació primària de dosi va provocar anticossos neutralitzants en ambdós grups contra les 6 soques analitzades, però per reduir els títols contra les variants, especialment entre el grup ingenu de la COVID{-19 (figura suplementària 2A i taula suplementària 2). ). Després de la sèrie primària, els títols neutralitzants van disminuir significativament amb el temps en ambdós grups fins a l'administració del reforç de la tercera dosi. Després de la vacunació de reforç, els anticossos neutralitzants van augmentar significativament en ambdós grups contra les 6 soques. La dosi de reforç va reduir efectivament la bretxa entre els participants ingènus i infectats prèviament amb COVID-19 i va proporcionar una major amplitud de respostes neutralitzants a les variants Delta i Omicron. Durant el 6-mes de seguiment posterior al reforç, els títols d'anticossos neutralitzants es van mantenir detectables en tots els grups i contra totes les variants. Tanmateix, els títols van disminuir gradualment, especialment en els participants ingènus de la COVID-19.

Taula 1. Característiques inicials de la cohort d'estudi

Anticossos ADCC

De manera semblant als anticossos neutralitzants, els anticossos ADCC es van detectar a nivells baixos a la línia de base contra les 6 soques SARS-CoV-2 en participants amb COVID-19 anterior, mentre que no es van detectar anticossos ADCC a la línia de base en COVID{{ 4}}-individus ingenus (figura 1B). La sèrie de vacunació primària de 2-dosi va provocar anticossos ADCC en ambdós grups contra les 6 soques analitzades, però a nivells més baixos entre el grup ingenu de la COVID{-19, especialment contra les variants d'Omicron (figura suplementària 2B i taula suplementària). 3). Els títols d'anticossos ADCC van disminuir amb el temps en ambdós grups contra totes les variants abans de l'administració d'un reforç de la tercera dosi. Després de la tercera dosi, els anticossos ADCC van augmentar significativament en ambdós grups contra les 6 variants del SARS-CoV-2. Durant el 6-mes de seguiment posterior al reforç, els anticossos ADCC van persistir en ambdós grups i contra totes les variants. Tanmateix, es van observar disminucions significatives dels títols d'anticossos contra les variants d'Omicron, especialment entre els participants ingènus de la COVID-19. Correlació entre anticossos neutralitzants i ADCC

Els títols d'anticossos neutralitzants i ADCC es van correlacionar significativament en ambdós grups de participants després de la dosi 2, que corresponia al moment dels títols màxims d'anticossos, amb l'excepció de BA.2.12.1 al grup COVID-19-naïf (complementari). Figura 3). La dissociació més gran entre la neutralització i els anticossos ADCC es va observar abans de la dosi de reforç en els individus ingènus de la COVID-19, que corresponia al nadir posterior a la vacuna d'anticossos neutralitzants a les variants del SARS-CoV-2. En aquell moment, diversos participants del grup vacunat ingenu de la COVID-19 tenien anticossos ADCC persistents en el marc d'anticossos neutralitzants indetectables.

DISCUSSIÓ

Aquest estudi de cohort longitudinal prospectiu va trobar que la 2-sèrie de dosis primària de la vacunació d'ARNm de COVID-19 va provocar anticossos de neutralització creuada i d'ADCC de tipus salvatge del SARS-CoV-2, Delta, i les variants Omicron, que van disminuir ràpidament. Una vacuna de reforç de la tercera dosi va reduir efectivament la bretxa entre els participants ingènus i infectats prèviament amb COVID{-19 i va proporcionar una major amplitud de respostes neutralitzants i ADCC a les variants Delta i Omicron. La tercera dosi també va millorar la durabilitat de les respostes serològiques, ja que els anticossos de les 6 soques es van mantenir detectables durant un 6-mes de seguiment. No obstant això, tant els títols d'anticossos neutralitzants com els de l'ADCC van disminuir gradualment als 6 mesos, especialment a la variant Omicron entre els individus ingènus de la COVID-19. Aquestes troballes donen suport a la indicació d'una vacunació de reforç posterior en el context d'una immunitat minvant. Com moltes altres infeccions víriques [16], s'ha trobat que els anticossos neutralitzadors del SARS-CoV-2 es correlacionen amb la protecció de la malaltia simptomàtica [9-11].

No obstant això, la correlació dels anticossos neutralitzants amb la protecció és incompleta. Atès que també s'ha trobat que els anticossos efectors Fc es correlacionen amb la protecció en models preclínics [12, 13], la combinació d'anticossos efectors neutralitzants i Fc pot millorar la correlació amb la protecció. Els anticossos efectors de Fc es poden unir a llocs antigènics únics [17] que són diferents dels epítops neutralitzadors, facilitant el compromís de Fc amb el FcR a les cèl·lules efectores. Això implica que els anticossos funcionals Fc poden tenir la capacitat de conferir protecció contra COVID-19 malgrat la disminució dels anticossos neutralitzants després de la vacunació i en el context de l'aparició de COV [17]. Es necessiten estudis futurs per determinar l'eficàcia dels anticossos funcionals Fc en la prevenció de la COVID-19 causada pels COV que circulen actualment.

Beneficis de cistanche tubulosa-enfortir el sistema immunitari

Les limitacions del nostre estudi inclouen la petita mida de la cohort inscrita en un sol centre. Les dues cohorts no es van coincidir i les diferències en les característiques inicials podrien haver contribuït a les respostes immunes. Com que les vacunacions es van administrar com a estàndard d'atenció al proveïdor/ubicació escollit pels participants, hi va haver variabilitat en el moment de les dosis de la vacuna en relació amb el moment de la recollida de mostres. El moment de les inscripcions es va solapar amb l'aparició de la variant Omicron i les infeccions innovadores poden haver afectat els títols d'anticossos. Aquest estudi no va avaluar les respostes immunitàries després de la vacunació d'ARNm que contenia variants, que va ser autoritzada per la Food and Drug Administration dels Estats Units i recomanada després de completar aquest estudi. L'estudi tampoc va avaluar les respostes d'anticossos a altres variants del SARS-CoV-2, la durabilitat dels anticossos més enllà dels 6 mesos, les respostes immunes cel·lulars, altres respostes d'anticossos funcionals o l'eficàcia de la vacuna. En conclusió, la sèrie primària d'ARNm de COVID-19 i la vacunació de reforç van provocar títols elevats d'anticossos de neutralització creuada i d'ADCC creuats, que van disminuir gradualment durant 6 mesos, especialment contra les variants del SARS-CoV-2 i entre les COVID. -19: persones ingènues. Aquestes dades donen suport a la indicació per a la vacunació de reforç posterior en el context de la disminució de la immunitat i les variants emergents del SARS-CoV-2.

figura 1. Activitat neutralitzadora de pseudovirus i citotoxicitat mediada per cèl·lules (ADCC) dependent d'anticossos després de la vacunació contra la malaltia del coronavirus 2019 (COVID-19). Neutralització de pseudovirus (concentració efectiva a la qual es va neutralitzar el 50% del virus [EC50]) (A) i títols d'anticossos d'anticossos ADCC funcionals (B) per a la síndrome respiratòria aguda severa coronavirus 2 (SARS-CoV-2) Wuhan Hu{ Les variants {10}} (Wu-1), Delta i Omicron (BA.1, BA.2, BA.2.12.1 i BA.4/5) es van mesurar longitudinalment després de COVID-19 Vacunació amb ARN missatger en participants amb o sense antecedents de COVID-19. Es van calcular els títols mitjans geomètrics per a cada variant i punt de temps, i es van fer comparacions estadístiques de títols transformats en log mitjançant proves de Mann-Whitney. Les línies discontínues representen el límit inferior de detecció de l'assaig. *P < 0,05; **P < 0,01; ***P <.001; ****P <.0001; ns, no significatiu. Els mapes de calor mostren els títols d'anticossos de punt final neutralitzant pseudovirus (EC50) (C) i ADCC (D) contra variants del SARS-CoV-2 al llarg del temps.

Referències

1. Universitat Johns Hopkins i Medicina. Centre de recursos sobre coronavirus. Disponible a: https://coronavirus.jhu.edu/map.html. Accés el 30 de desembre de 2022.

2. Harvey WT, Carabelli AM, Jackson B, et al. Variants del SARS-CoV-2, mutacions de punta i fugida immune. Nat Rev Microbiol 2021; 19:409–24.

3. Organització Mundial de la Salut. Classificació d'Omicron (B.1.1.529): variant del SARS-CoV-2 preocupant. 2021. Disponible a: https://www.who.int/news/item/26-11- 2021-classification-of-omicron-(b.1.1.529)-sars-cov-2-variant-of- preocupació. Accés el 30 de desembre de 2022.

4. Centres per al Control i la Prevenció de Malalties. Seguidor de dades de COVID. 2023. Disponible a: https://covid.cdc.gov/covid-data-tracker/#variant-proportions. Accés el 9 de gener de 2023.

5. Iuliano AD, Brunkard JM, Boehmer TK, et al. Tendències en la gravetat de la malaltia i la utilització de l'atenció sanitària durant el període inicial de la variant d'Omicron en comparació amb períodes anteriors d'alta transmissió del SARS-CoV-2-Estats Units, desembre de 2020 a gener de 2022. MMWR Morb Mortal Wkly Rep 2022; 71:146–52.

6. Havers FP, Patel K, Whitaker M, et al. Hospitalitzacions associades a COVID-19 confirmades per laboratori entre adults durant el predomini de la variant de SARS-CoV-2 Omicron BA.2- COVID-19-Xarxa de vigilància d'hospitalització associada, 14 estats, 20 de juny de 2021 al 31 de maig, 2022. MMWR Morb Mortal Wkly Rep 2022; 71:1085–91.

7. Adjei S, Hong K, Molinari NM, et al. Risc de mortalitat entre pacients hospitalitzats principalment per COVID-19 durant els períodes pandèmics de variants Omicron i Delta -Estats Units, abril de 2020 a juny de 2022. MMWR Morb Mortal Wkly Rep 2022; 71: 1182–9.

8. Cao Y, Wang J, Jian F, et al. Omicron escapa de la majoria dels anticossos neutralitzadors del SARS-CoV-2 existents. Natura 2022; 602:657–63.

9. Feng S, Phillips DJ, White T, et al. Correlacions de protecció contra la infecció simptomàtica i asimptomàtica per SARS-CoV-2. Nat Med 2021; 27:2032–40.

10. Gilbert PB, Montefiori DC, McDermott AB, et al. Anàlisi de correlació immune de l'assaig clínic d'eficàcia de la vacuna de l'ARNm-1273 COVID{-19. Ciència 2022; 375: 43–50.

11. Khoury DS, Cromer D, Reynaldi A, et al. Els nivells d'anticossos neutralitzants són molt predictius de la protecció immune de la infecció simptomàtica per SARS-CoV-2. Nat Med 2021; 27:1205–11.

12. Mercado NB, Zahn R, Wegmann F, et al. La vacuna Ad26 d'un sol cop protegeix contra SARS-CoV-2 en macacs rhesus. Natura 2020; 586:583–8.

13. Gorman MJ, Patel N, Guebre-Xabier M, et al. Fab i Fc contribueixen a la màxima protecció contra SARS-CoV-2 després de la vacuna de la subunitat NVX-CoV2373 amb la vacunació Matrix-M. Cell Rep Med 2021; 2:100405.

14. Chen X, Rostad CA, Anderson LJ, et al. El desenvolupament i la cinètica de la citotoxicitat mediada per cèl·lules depenent d'anticossos funcionals (ADCC) a la proteïna espiga del SARS-CoV-2. Virologia 2021; 559:1–9.

15. Rostad CA, Chen X, Sun HY, et al. Respostes d'anticossos funcionals a les variants del SARS-CoV-2 en nens amb COVID{-19, MIS-C i després de dues dosis de vacunació BNT162b2. J Infect Dis 2022; 226:1237–42.

16. Plotkin SA. Correlats de protecció induït per la vacunació. Clin Vaccine Immunol 2010; 17:1055–65.

17. Kaplonek P, Fischinger S, Cizmeci D, et al. Els anticossos induïts per la vacuna ARNm-1273 mantenen les funcions efectores de Fc en les variants de SARS-CoV-2 preocupants. Immunitat 2022; 55:355–365.e4.