Diferències en la composició i l'eficàcia medicinal de les matèries primeres i els productes del vi processats al vapor de Cistanches Herba Ⅱ
Sep 10, 2024
2.3.3 Detecció de pes corporal i temperatura corporal
Les rates es van alimentar de manera adaptativa durant 1 setmana, es van registrar com a 0 dia, i es van registrar el pes corporal i la temperatura rectal; després que la injecció de succinat de sodi d'hidrocortisona es va administrar contínuament durant 14 dies, es va registrar com a 14 dies i es va registrar el pes corporal i la temperatura rectal; després d'un modelatge reeixit, el tractament amb fàrmacs es va dur a terme segons l'esquema de dosificació durant 30 dies, registrats com a 44 dies, i es va registrar el pes corporal i la temperatura rectal.
2.3.4 Detecció de freqüència d'activitat espontània
El nombre d'activitats de rata en 5 minuts es va registrar mitjançant un registrador d'activitat espontània de rata multifuncional. Les rates es van col·locar a l'instrument d'activitat espontània, els primers 3 minuts van ser el període d'adaptació i la gravadora va comptar el nombre d'activitats espontànies de les rates en els últims 5 minuts. L'habitació ha de ser tranquil·la, la temperatura de l'habitació s'ha de mantenir a 18-22 graus i la humitat s'ha de mantenir al 45%-65%. Es va registrar el nombre d'activitats espontànies als 0, 14 i 44 dies respectivament.
2.3.5 Detecció de l'índex sèric
Després d'anestesiar les rates, es va recollir sang de l'aorta abdominal, es va col·locar en un tub de coagulació i es va centrifugar a 2, 000 r/min durant 15 min per detectar el contingut de T, E2, CREA i BUN al sèrum.
CISTANCH D'ALTA QUALITAT PER A LA MALALTIA RENOL
Servei de Suport de Wecistanche
Correu electrònic:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Tel:+86 15292862950
2.3.6 Càlcul de l'índex d'òrgans
Després d'anestesiar les rates i recollir sang, es van eliminar els ronyons, testicles, epidídim, vesícules seminals i pròstata, es van eixugar amb paper de filtre i es va pesar immediatament la massa. L'índex d'òrgans es va calcular a partir de la massa de la rata.
Índex d'òrgans=massa d'òrgans/massa corporal
2.3.7 Detecció de teixits
Després d'eliminar els testicles de rata, es va pesar la massa i es va posar immediatament a una nevera de -80 graus per congelar-la. Abans de la mesura, es van treure, descongelar i es va afegir una solució salina fisiològica prèviament refredada per fer un homogeneït de teixit en condicions de bany de gel, i es va preparar un homogeneït de teixit al 10%. L'homogeneïtat es va centrifugar immediatament a 5,000 r/min durant 10 min i es va agafar el sobrenedant per utilitzar-lo. Segons els requisits del kit, es va utilitzar el mètode d'hidroxilamina per determinar el contingut de SOD al teixit testicular i el mètode TBA per determinar el contingut de MDA al teixit testicular.
Fig. 2 Diagrama de corrent iònic total de Cistanches Herba i Cistanches Herba guisat de vi en mode d'ions negatius
3 Resultats
3.1 Diferències en la composició de Cistanche deserticola abans i després del processament
3.1.1 Diagrama de flux d'ions totals
En aquest estudi, el detector d'espectròmetre de masses va utilitzar el mode d'ions negatius de font d'ionització electrospray (ESI−). La figura 2 mostra el diagrama de flux d'ions totals de Cistanche deserticola cru i productes guisats amb vi en mode d'ions negatius. Es pot veure que la composició de les mostres de Cistanche deserticola és molt complexa, i hi ha diferències òbvies entre els productes crus de Cistanche deserticola i els guisats amb vi. A més, mitjançant la cerca a la base de dades existent i la consulta de la literatura rellevant per a la composició elemental i la concordança de compostos, es van identificar un total de 45 compostos, tal com es mostra a la taula 3.
Taula 3 Compostos identificats en mostres de Cistanches Herba
3.1.2 Resultats PCA
Els diagrames PCA dels productes crus de Cistanche deserticola i guisats de vi es mostren a la figura 3, que es poden agrupar per separat. Es pot determinar que hi ha d'haver diferències en la composició de Cistanche deserticola abans i després del processament.
3.1.3 Resultats OPLS-DA
Després del processament OPLS-DA, el diagrama S-Plot es mostra a la figura 4. Els dos extrems de la corba en forma de S de la figura representen els marcadors característics amb la contribució més gran de cada grup. Mitjançant l'anàlisi de les dades d'ions del fragment amb valors VIP superiors a 1 als dos extrems de la corba en forma de S i comparant-los amb el control, es van identificar quatre components diferencials: echinacòsid (tR =8.39 min, m / z 785. 250 9), verbascòsid (tR=11,51 min, m/z
623.198 1), isoverbascòsid (tR=13,38 min, m/z623.{198 1) i tubulòsid B (tR{{=18,41 min, m/z 665. 208 7).
LIQUOR DE CISTANCHE D'ALTA QUALITAT PER A LA MALALTIA RENOLÓS
3.2 Resultats experimentals amb animals
3.2.1 Observació de l'estat general
Després del modelatge, les rates van mostrar una sèrie de símptomes com agradar la calor i tenir por del fred, arrossegar-se i arquejar l'esquena, apatia, pèl apagat i desordenat, extremitats fredes, disminució de la gana, pes corporal reduït i orina clara. Després de l'administració, els símptomes anteriors a cada grup es van millorar significativament.
3.2.2 Canvis en la dieta i activitat voluntària de rates després del modelatge
Després de la injecció contínua de succinat de sodi d'hidrocortisona durant 14 dies, es va mesurar el pes corporal, el nombre d'activitats voluntàries en 5 minuts i la ingesta d'aliments, la ingesta d'aigua i la producció d'orina de les rates de cada grup per determinar si el model de deficiència de yang renal d'hidrocortisona es va establir amb èxit. Els resultats es mostren a la Taula 4. Tal com es mostra a la Taula 4, després de 14 dies d'administració d'hidrocortisona, en comparació amb el grup normal, tots els grups van mostrar una disminució del pes corporal, una disminució de la ingesta d'aliments, un augment de la ingesta d'aigua, un augment de la producció d'orina i una disminució de l'activitat voluntària, i hi va haver diferències significatives (P < 0.05). Segons la descripció d'alguns síndromes de deficiència de yang renal en el diagnòstic clínic i la terminologia del tractament de la medicina tradicional xinesa: "por al fred i les extremitats fredes, especialment per sota de la cintura i els genolls, pell pàl·lida o fosca, orina clara i llarga, micció freqüent a nit, llengua pàl·lida amb pelatge blanc, pols feble, etc." Combinat amb l'observació de l'estat general després del modelatge, els símptomes després del modelatge eren coherents amb la descripció de la deficiència de yang del ronyó, cosa que indica que el modelatge va tenir èxit.
| No. | Compost | t/min | Mode d'ionització | Fórmula molecular | Valor teòric (m/z) | Valor experimental (m/z) | Error (×10⁻⁶) | Informació del fragment (m/z) |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 1 | Sucre de Raïm | 0.79 | [M–H] | C₆H₁₂O₆ | 179.055 | 179.055 | 0.20 | 97, 89 |
| 2 | Taní de raïm | 0.81 | [M–H] | C₁₅H₁₄O₈ | 331.139 | 331.139 | 1.53 | 295, 313, 311 |
| 3 | Sorbitol | 0.88 | [M–H] | C₁₂H₂₂O₁₁ | 341.108 | 341.108 | 1.50 | 179, 161, 143, 131 |
| 4 | Sucre mitjà de llet | 1.10 | [M–H] | C₆H₁₂O₆ | 181.071 | 181.071 | 2.68 | 163, 101 |
| 5 | Nutrient d'origen vegetal C | 1.20 | [M–H] | C₂₈H₄₃O₁₂ | 561.197 | 561.197 | -0.01 | 543, 461, 399 |
| 6 | Sucre de pi | 1.21 | [M–H] | C₁₆H₂₀O₈ | 341.123 | 341.124 | 1.63 | 179, 161, 143, 131, 119 |
| 7 | Àcid succínic | 1.52 | [M–H] | C₄H₄O₄ | 117.018 | 117.019 | 3.40 | 99, 73 |
| 8 | Nutrient d'origen vegetal B | 2.04 | [M–H] | C₂₈H₃₃O₁₃ | 577.192 | 577.192 | -0.03 | 297, 208, 183, 178, 171, 153 |
| 9 | Flavonoides del te | 2.20 | [M–H] | C₇H₆O₆N₂ | 164.071 | 164.072 | 1.00 | 103 |
| 10 | Extracte de pera de Beijing | 3.73 | [M–H] | C₁₄H₁₂O₁₁ | 373.113 | 373.115 | 5.48 | 355, 327, 297 |
| 11 | Extracte de Baia de Goji | 4.28 | [M–H] | C₂₀H₂₄O₁₈ | 461.169 | 461.169 | 0.00 | 485, 293, 215, 197, 167 |
| 12 | Extracte de fulla de pinya | 4.74 | [M–H] | C₁₁H₁₂O₇ | 487.145 | 487.146 | 0.88 | 389, 179 |
| 13 | Extracte de flor d'hibisc | 4.63 | [M–H] | C₂₄H₂₈O₁₀ | 537.197 | 537.197 | 0.00 | 501, 415, 375, 357 |
| 14 | 8- -Hidroxilactona | 5.27 | [M–H] | C₁₂H₂₀O₈ | 241.096 | 241.097 | 0.04 | 213, 189 |
| 15 | Rhizoma Dioscoreae | 6.10 | [M–H] | C₁₈H₂₄O₈ | 361.115 | 361.113 | 2.20 | 309, 163, 137 |
| 16 | Extracte de flor de palla | 6.82 | [M–H] | C₁₅H₂₁O₁₀ | 327.108 | 327.109 | 1.00 | 307, 195 |
| 17 | Pol·len d'abella | 7.20 | [M–H] | C₁₄H₂₈O₈ | 437.472 | 437.472 | 0.00 | 393, 373, 355 |
| 18 | -Carotè | 7.53 | [M–H] | C₂₉H₄₆O₁₆ | 629.192 | 629.192 | 0.00 | 617, 479, 459, 315, 221 |
| 19 | Patata dolça morada | 7.70 | [M–H] | C₁₇H₂₄O₉ | 371.134 | 371.134 | 0.00 | 349, 328 |
| 20 | Extracte de pera de Beijing | 8.02 | [M–H] | C₁₇H₂₄O₉ | 371.134 | 371.134 | 0.00 | 349, 328 |
| 21 | Extracte de flor de préssec | 8.09 | [M–H] | C₂₈H₄₀O₁₂ | 561.197 | 561.197 | 0.00 | 543, 461, 399 |
| 22 | Extracte de ginseng | 10.39 | [M–H] | C₈H₁₈O₈ | 799.266 | 799.266 | 0.03 | 417, 439, 543, 561 |
| 23 | Extracte de te Oolong | 10.63 | [M–H] | C₂₄H₃₄O₁₆ | 539.149 | 539.149 | 0.10 | 637, 621, 471, 473 |
| 24 | Extracte de fulla de lotus | 11.51 | [M–H] | C₂₇H₃₄O₁₂ | 549.197 | 549.197 | 0.00 | 197, 153, 135 |
| 25 | Extracte de flor peluda | 11.51 | [M–H] | C₂₉H₄₈O₁₆ | 623.197 | 623.196 | -0.21 | 387, 531 |
| 26 | Extracte de brot de bambú | 11.51 | [M–H] | C₃₇H₄₈O₂₁ | 827.261 | 827.259 | -1.92 | 461, 315, 135, 297, 161 |
| 27 | Extracte de crisantem | 11.60 | [M–H] | C₂₁H₃₀O₉ | 429.118 | 429.118 | 0.00 | 663, 625, 413 |
| 28 | 6-Acetil flavona | 12.32 | [M–H] | C₁₈H₁₈O₆ | 345.118 | 345.119 | 0.02 | 301, 281 |
| 29 | Extracte de fruita de Longan | 13.41 | [M–H] | C₁₈H₁₈O₈ | 417.154 | 417.159 | -0.11 | 165, 119, 327, 129, 27 |
Fig. 3 Diagrama d'anàlisi de components principals de CistanchesHerba (1) i Cistanches Herba guisat de vi (2)
Fig. 4 Parcel·la S de Cistanches Herba i Cistanches Herba guisat de vi
Taula 4 Canvis en la dieta i l'activitat autònoma de les rates després del modelatge (xs ±, n=10)
| Grup | Pes corporal (g) | Ingesta d'aliments 24 h (g) | Ingesta d'aigua 24 h (ml) | Sortida d'orina de 24 h (ml) | Recompte d'activitats espontànies de 5 min |
|---|---|---|---|---|---|
| Normal | 285.14 ± 9.26 | 15.81 ± 2.19 | 20.86 ± 3.59 | 11.09 ± 2.57 | 100.4 ± 14.7 |
| Model | 226.67 ± 12.14* | 11.92 ± 3.69* | 32.53 ± 4.65* | 15.58 ± 6.38* | 72.7 ± 11.6* |
| PR | 222.89 ± 9.87* | 10.65 ± 4.20* | 31.54 ± 3.55* | 19.36 ± 5.20* | 68.9 ± 18.0* |
| PW | 219.16 ± 10.75* | 12.37 ± 3.42* | 29.11 ± 4.78* | 16.01 ± 3.96* | 62.8 ± 14.9* |
| JK | 230.02 ± 7.95* | 10.22 ± 2.26* | 34.57 ± 5.36* | 19.13 ± 7.57* | 69.3 ± 11.3* |
Notes:
Comparació amb el grup normal: *P < 0.05.
*P <0,05 vs grup normal.
Taula 5 Canvis en el pes corporal de les rates durant el cicle de dosificació (xs ±, n=10)
| Grup | Pes corporal (g) | 0 d | 14 d | 44 d |
|---|---|---|---|---|
| Normal | 192.12 ± 5.48 | 285.14 ± 9.26 | 430.02 ± 6.14 | |
| Model | 187.24 ± 4.56* | 226.67 ± 12.14* | 328.33 ± 14.77* | |
| PR | 185.07 ± 5.11 | 222.89 ± 9.87* | 345.25 ± 8.22*# | |
| PW | 183.48 ± 6.44 | 219.16 ± 10.75* | 362.17 ± 7.82*#Δ | |
| JK | 194.13 ± 5.90 | 230.02 ± 7.95* | 356.94 ± 7.47*# |
Notes:
*P <0,05 vs grup normal.
*P＜{{0}}.05 vs grup normal; #P<0.05 vs grup de models; △P<0,05 vs PRgroup. Igual que a continuació.
3.2.3 Canvis en el pes corporal de les rates
A partir dels canvis de pes corporal de tres vegades durant 0, 14 i 44 dies, es va analitzar l'efecte de la injecció de succinat de sodi d'hidrocortisona sobre el pes corporal de les rates i la recuperació del pes corporal de la rata després del tractament d'intervenció amb fàrmacs. Els resultats es mostren a la taula 5.
A la taula 5 es pot veure que després d'una setmana d'alimentació adaptativa, el pes corporal de les rates va augmentar i va ser relativament equilibrat. Els pesos corporals de les rates eren tots (200 ± 20) g. No hi va haver cap diferència significativa entre els grups, cosa que indica que l'entorn d'alimentació i les condicions dietètiques adequades per a la supervivència de les rates. Després de 14 dies d'administració d'hidrocortisona, en comparació amb el grup normal, l'augment del pes corporal de les rates del grup model i de cada grup de medicaments es va reduir i hi va haver una diferència significativa (P<0.05). The body weight of the rats in the normal group was
3.2.4 Canvis en la temperatura corporal de rates
A partir dels canvis de temperatura corporal de tres vegades durant 0, 14 i 44 dies, es va analitzar l'efecte de la injecció intramuscular d'injecció de succinat de sodi d'hidrocortisona sobre la temperatura corporal de les rates i la recuperació de la temperatura corporal de les rates després de la intervenció de fàrmacs. . Els resultats es mostren a la taula 6.
3.2.5 Canvis en les activitats espontànies de les rates
A partir dels canvis en el nombre d'activitats espontànies en 3 dies en 0, 14 i 44 dies, l'efecte de la injecció de succinat de sodi d'hidrocortisona sobre el nombre d'activitats espontànies en rates i la recuperació del nombre d'activitats espontànies es van analitzar les activitats en rates després del tractament d'intervenció amb fàrmacs. Els resultats Vegeu la taula 7.
Es pot veure a la taula 7 que 14 dies després de la injecció d'hidrocortisona, en comparació amb el grup normal, el nombre d'activitats espontànies en 5 minuts de l'altre grup va disminuir significativament i hi va haver una diferència significativa (P).<0.05). One month after administration, compared with the model group, the number of spontaneous activities of rats in each Cistanche deserticola administration group increased (P<0.05); compared with the normal group, there was no significant difference in the number of spontaneous activities of rats in each Cistanche deserticola administration group; Compared with the JK group, there was no significant difference in the number of spontaneous activities among the Cistanche deserticola administration groups. It shows that Cistanche deserticola extract can increase the number of spontaneous activities in rats with kidney-yang deficiency, and after 30 days of treatment, the number of spontaneous activities is close to that of normal rats.
3.2.6 Índex d'òrgans
Després de 30 dies d'administració contínua, les rates es van dejunar durant 12 hores i es van sacrificar. Es va mesurar la qualitat dels òrgans. Els efectes del model de deficiència de yang renal induït per hidrocortisona en els òrgans de rates i l'administració de diferents extractes de Cistanche deserticola es van observar a nivell d'òrgans. Recuperació d'òrgans de rata després de prendre el fàrmac. Després de l'administració d'hidrocortisona, el pes corporal de les rates va variar molt i la massa dels òrgans també va canviar significativament. Aquest experiment va utilitzar l'índex d'òrgans com a indicador a tenir en compte
Els efectes sobre els òrgans es van observar abans i després de l'administració. Els resultats es mostren a la taula 8.
Es pot veure a la taula 8 que, en comparació amb el grup normal, després de la injecció intramuscular de succinat de sodi d'hidrocortisona a rates, els índexs d'òrgans dels ronyons, testicles, epidídim i pròstata del grup model van disminuir (P).<0.05), indicating that hydrocortisone-induced The kidney-yang deficiency model in rats will cause changes in the indexes of the kidneys, testicles, epididymis and prostate, but has little effect on the seminal vesicles.
En general, en comparació amb el grup model, es van millorar els índexs d'òrgans de cada grup d'administració, cosa que indica que Cistanche deserticola crua, vi Cistanche deserticola i les píndoles Jingui Shenqi podrien alleujar la disminució de l'índex d'òrgans en el model de deficiència renal-yang.
Des de la perspectiva de cada òrgan, en comparació amb el grup model, el grup de vi Cistanche deserticola pot augmentar significativament l'índex d'òrgans del ronyó (P<0.05). Comparing different drug administration groups, the wine Cistanche deserticola group is better than the raw Cistanche deserticola group (P<0.05). ; From the perspective of testicular index, compared with the model group, each administration group can significantly increase the organ index of the testis (P<0.05). Comparing different administration groups, the wine Cistanche deserticola group has a significant advantage over the raw Cistanche deserticola group. (P < 0.05); from the perspective of epididymal index, compared with the model group, each administration group can significantly increase the organ index of the epididymis (P < 0.05); from the perspective of seminal vesicle index, compared with the model group , the wine Cistanche deserticola group can significantly improve the organ index of the seminal vesicles (P<0.05). Comparing different administration groups, the wine Cistanche deserticola group is significantly better than the raw Cistanche deserticola group (P<0.05); from the perspective of the prostate, compared with the model group In comparison, the raw Cistanche deserticola group and the wine Cistanche deserticola group could significantly increase the prostate organ index (P<0.05).
3.2.7 Detecció d'indicadors de funció renal
BUN i CREA reflecteixen la funció renal. CREA en sèrum és el producte final de la matèria orgànica que conté nitrogen, i BUN en sèrum és el principal producte final del metabolisme de les proteïnes. Tots dos s'excreten principalment per filtració glomerular [10-11]. Quan la funció renal està danyada, la funció de filtració glomerular disminueix i les concentracions d'ambdós augmenten. Els nivells de BUN en sang i CREA en sang reflecteixen l'estat de la funció renal: com més alts siguin els seus nivells, més greu serà el dany a la funció renal. En aquest experiment, es van detectar els continguts de BUN i CREA en sèrum de rata per avaluar els efectes de cada grup d'administració sobre la funció renal en rates amb deficiència de yang renal induïda per hidrocortisona.
Com es pot veure a la taula 9, en comparació amb el grup normal, els continguts de BUN i CREA en el grup model es van incrementar i hi va haver una diferència significativa (P<0.05), indicating that hydrocortisone caused kidney damage to rats. Compared with the model group, the wine Cistanche deserticola and raw Cistanche deserticola groups can reduce the content of CREA (P<0.05), thereby alleviating kidney damage to a certain extent.
3.2.8 Detecció d'indicadors d'hormones sexuals
Els ronyons són la base de la innatació i tenen un paper important en el creixement, desenvolupament i processos vitals de l'ésser humà. La medicina tradicional xinesa creu que els ronyons regeixen la reproducció i la relació entre els ronyons i el sistema reproductor és molt estreta. Cada cop més investigadors han descobert que els pacients amb deficiència de ronyó-yang presenten canvis significatius en l'eix hipotàlem-hipofisi-gonadal, sovint acompanyats de símptomes de disminució de les hormones sexuals com T i E2 [12]. En aquest experiment, es van mesurar els continguts de T i E2 en sèrum per determinar els efectes de cada grup d'administració sobre les hormones sexuals en rates amb deficiència de yang renal induïda per hidrocortisona.
Com es pot veure a la taula 10, en comparació amb el grup normal, els continguts de T i E2 del grup model van disminuir (P<0.05), indicating that hydrocortisone can cause a decrease in rat sex hormone levels. Compared with the model group, each administration group was able to significantly increase the levels of T and E2 in serum (P<0.05) and improve the decrease in sex hormones induced by hydrocortisone. Comparing different administration groups, the wine Cistanche deserticola group was better than the raw Cistanche deserticola group (P<0.05). Generally speaking, wine Cistanche deserticola has obvious performance in increasing T and E2 in the serum of rats with kidney yang deficiency, which is consistent with literature reports that phenylethanol glycosides, the main components of wine Cistanche deserticola, have hormone-like effects [13].
3.2.9 Detecció d'índex d'antioxidants
SOD és un antioxidant que reflecteix la capacitat del cos per eliminar els radicals lliures, mentre que MDA és el producte final de la reacció d'estrès oxidatiu i pot reflectir el grau de dany oxidatiu al cos. En aquest experiment, es van mesurar els continguts de SOD i MDA als testicles per determinar l'activitat antioxidant de cada grup d'administració contra el model de deficiència de yang renal induït per hidrocortisona.
Com es pot veure a la taula 11, en comparació amb el grup normal, el contingut de SOD en el grup model va disminuir (P<0.05). After 1 month of administration, compared with the model group, the SOD content in the raw Cistanche deserticola group and the wine Cistanche deserticola group increased. Compared with the normal group, the MDA content in the model group increased (P<0.05), indicating that the testicular tissue of rats with kidney-yang deficiency induced by hydrocortisone was oxidatively damaged. After being given Cistanche deserticola extract or Jingui Shenqi Pill positive medicine, each administration group was able to significantly reduce the content of MDA in testicular tissue and alleviate the oxidative damage caused by hydrocortisone. Taken together, both raw Cistanche deserticola and wine Cistanche deserticola can improve the body's ability to resist oxidative damage and alleviate oxidative damage caused by hydrocortisone.
(1) Agrupació: les rates tenien accés gratuït a l'aigua i la dieta. Després d'una setmana d'alimentació adaptativa, es van dividir aleatòriament en 5 grups (taula 2), amb 10 rates a cada grup, és a dir, grup normal, grup model, grup Cistanche deserticola cru (PR), grup Cistanche deserticola guisat al vi (PW) , i control positiu Jinkui Shenqi Pill group (JK). (2) Modelatge: excepte el grup normal, els altres quatre grups van ser injectats amb succinat de sodi d'hidrocortisona im, amb una dosi de 20 mg/kg, durant 14 dies consecutius. Al grup normal se li va injectar la mateixa dosi de solució salina normal. Es va observar l'estat general de les rates de cada grup per determinar si presentaven símptomes com ara por al fred, preferència per la calor, extremitats fredes, orina clara i llarga, esquena arrossada i arquejada, cabell apagat i desordenat i depressió mental. Al mateix temps, es va mesurar el pes corporal, el nombre d'activitats espontànies, la ingesta d'aliments, la ingesta d'aigua, la producció d'orina i altres indicadors de les rates de cada grup.
