Nanoportadors niosomals per a un millor lliurament de quercetina a la pell amb funcions antitirosinasa i antioxidant
Apr 04, 2023
Resum:
Aquest estudi tenia com a objectiu seleccionar un flavonoide eficaç amb capacitats prometedores de blanquejament i antioxidants, i dissenyar niosomes carregats de flavonoides per millorar la seva solubilitat, estabilitat i penetració. Es van realitzar experiments d'eliminació de radicals lliures in vitro anti-tirosinasa i 1,1-difenil-2-picrilhidrazil (DPPH) per investigar les capacitats blanquejadores i antioxidants de diversos flavonoides, incloent quercetina, morin, festin, miricetina, rutina. i breviscapina.
Es van estudiar la conductivitat, la viscositat i la mida de les partícules de la formulació basada en Span{{{0}}RH{40-de vesícules de tensioactius no iònics (niosomes) amb diferents proporcions de massa per determinar la formulació més adequada. Els niosomes carregats de fàrmacs es van caracteritzar per la mida, el potencial zeta, la morfologia i l'eficiència d'atrapament. També es van estudiar la fotoestabilitat, la solubilitat, el comportament d'alliberament, la penetració de fàrmacs ex vivo i la retenció de la pell. Els resultats van mostrar que la quercetina té capacitats de blanquejament i antioxidants considerables i que l'Span60-RH40 amb una proporció de massa de 9:11 forma niosomes esfèrics o ovalats de 97,6 ± 3,1 nm amb un rang de potencial zeta de 31,1 ± 0,9 mV, i el fàrmac. eficiència d'atrapament fins al 87,3 ± 1,6 per cent. Els niosomes van millorar notablement la solubilitat i la fotoestabilitat de la quercetina.
A més, en comparació amb la solució de quercetina, els liposomes de quercetina tenien els avantatges d'un alliberament sostingut i una millora de la penetració transdèrmica, amb una retenció de la pell 2,95 vegades superior a la de la solució de quercetina.
Un antioxidant és qualsevol substància que pot inhibir eficaçment la reacció d'oxidació dels radicals lliures a baixes concentracions. El seu mecanisme d'acció pot ser actuar directament sobre els radicals lliures, o bé consumir indirectament substàncies que són fàcils de generar radicals lliures per evitar reaccions posteriors. Tot i que el cos humà produeix inevitablement radicals lliures, també produeix naturalment substàncies antioxidants que resisteixen els radicals lliures per contrarestar els atacs oxidatius dels radicals lliures a les cèl·lules humanes. Els estudis han demostrat que el sistema antioxidant del cos humà és un sistema amb funcions completes i complexes comparables al sistema immunitari. Com més forta sigui la capacitat antioxidant del cos, més saludable és i més llarga és la seva vida. En la nostra investigació, vam trobar que Cistanche deserticola també té un efecte antioxidant. Cistanche deserticola és ric en polisacàrids, flavonoides, alcaloides, glucòsids flavonoides, àcids de flavones i altres components, i aquestes substàncies tenen forts efectes antioxidants. Poden resistir l'estrès oxidatiu i reduir el dany cel·lular capturant radicals lliures, reduint les reaccions d'oxidació i augmentant l'activitat enzimàtica antioxidant, jugant així un paper antioxidant.
Feu clic al producte suplementari cistanche deserticola
Paraules clau:
anti-tirosinasa; antioxidant; niosomes; fotoestabilitat; lliurament transdèrmic.
1. Introducció
Els flavonoides es distribueixen àmpliament en fruites, verdures i herbes, i tenen activitats biològiques àmplies, com ara antivirals, antiinflamatòries, anticancerígenes, antioxidants i antitirosinases [1,2]. Recentment, la recerca d'un nou inhibidor segur de la tirosinasa ha rebut molta atenció en el camp de la cosmètica, perquè alguns dels inhibidors coneguts, com l'àcid kògic, la hidroquinona i els corticoides, poden desencadenar problemes de salut, com ara dermatitis i irritació de la pell. , ocronosi, citotoxicitat i càncer de pell [3]. A causa de la seva baixa toxicitat i de les seves considerables activitats antioxidants i anti-tirosinases, els flavonoides han atret un gran interès com a possibles agents blanquejants i antioxidants naturals per al seu ús en productes per a la cura de la pell [4–6].
Tanmateix, els flavonoides tenen moltes estructures diferents, incloses diferents configuracions amb el mateix nucli mare, però encara no està clar quins tipus d'estructures posseeixen potents capacitats anti-tirosinasa i antioxidants. A més, la majoria dels flavonoides tenen poca solubilitat en aigua i liposolubilitat, i la lipofilia moderada i el baix pes molecular són factors coneguts per promoure una millor penetració. Un altre factor important que influeix en l'eficàcia dels components són les barreres biològiques de la pròpia pell, com l'estrat corni. Tot i que els mètodes fisicoquímics, inclosos la iontoforesi, l'ecografia, la microagulla, els sistemes d'injecció sense agulla i els potenciadors de la penetració, poden afavorir la penetració d'ingredients actius a través de l'estrat còrni, aquests mètodes poden ser invasius, irritar la pell i ser cars.
D'altra banda, han sorgit alguns nous sistemes de lliurament d'ingredients actius mediats per transportadors, com ara emulsió, micel·les, vesícules i ciclodextrina, per millorar l'eficàcia dels ingredients existents, especialment aquells amb poca solubilitat i biodisponibilitat. Les vesícules han rebut més atenció per al lliurament transdèrmic. Entre les vesícules, els transfersomes són liposomes ben deformables amb una permeabilitat percutània millorada i poden millorar la solubilitat i l'estabilitat del fàrmac. Els transfersomes estan formats per una proporció específica de fosfolípids i tensioactius, mentre que els fosfolípids són cars i fàcils d'oxidar.
Per tant, la recerca d'altres vesícules estables i substituïbles és un objecte d'investigació interessant. Els niosomes són sistemes vesiculars de tensioactius no iònics, que es van informar per primera vegada el 1979 quan s'aplicaven a la indústria cosmètica [7], però des de llavors s'han estudiat com a sistema d'administració de fàrmacs en farmacèutica [8-13]. Les propietats físiques, les tècniques de preparació i les estructures dels niosomes són molt semblants a les dels liposomes. Tanmateix, els niosomes també tenen avantatges en el lliurament de fàrmacs transdèrmics, com ara l'alliberament sostingut de fàrmacs, una millor penetració i una major retenció de la pell [14], són menys costosos de preparar i són més estables [15]. Per tant, els niosomes es poden aplicar a la indústria cosmètica [16–18].
Les primeres vesícules de tensioactius es van preparar mitjançant tensioactius iònics [19-22]. Els estudis exhaustius de toxicitat sobre tensioactius han indicat que els tensioactius catiònics són els més tòxics, seguits dels tensioactius aniònics, mentre que els tensioactius no iònics són els menys tòxics. Per tant, tenint en compte la seguretat i l'aplicació industrial, l'ús de liposomes que contenen tensioactius no iònics és una millor opció per al lliurament transdèrmic. A causa de l'estructura de les bicapes amfifíliques, un interval d'escala d'equilibri hidròfil-lipofílic (HLB) de 4 a 8 serà més fàcil de formar niosomes a partir de [14,23,24].
Per tant, els tensioactius no iònics formulats amb diferents valors de HLB seran més fàcils per a la formació de niosomes. Span, Tween i Brij són tensioactius no iònics comuns utilitzats per preparar liposomes [15,25–34]. Els tensioactius no iònics amb cadenes llargues d'hidrocarburs sense dobles enllaços són candidats elegibles perquè es poden formar niosomes estables amb el potencial d'augmentar la càrrega de fàrmacs. Span60, amb un valor HLB baix, s'ha utilitzat àmpliament per formar niosomes [15,29,31,33,34]. Els tensioactius no iònics amb alts valors de HLB, com ara Tween20, Tween60, Tween80, Brij35 i Brij58, no formen fàcilment niosomes sols o sense una quantitat òptima de colesterol [28,35,36], a causa del seu volum hidrofílic. capçals i cadenes curtes d'hidrocarburs. Per tant, només són capaços de formar niosomes amb l'addició de colesterol o quan es formulen amb altres tensioactius [10,27,31,37–39]. Cremophor RH40 és altament hidròfil i té una baixa toxicitat, i s'utilitza àmpliament en formulacions de fàrmacs orals, però cap informe ha indicat l'ús de Cremophor RH40 en la formulació de liposomes.
En aquest estudi, vam cercar flavonoides amb bons efectes blanquejants i antioxidants i vam investigar Span60-RH40, un sistema de tensioactius no iònics amb diferents proporcions de lípids per formar niosomes. Els niosomes carregats de quercetina es van caracteritzar per la mida de les vesícules, el potencial zeta, l'eficiència d'encapsulació i la microscòpia electrònica de transmissió (TEM), i també es va investigar la seva solubilitat i fotoestabilitat. A més, es van utilitzar rates per investigar la penetració transdèrmica de niosomes carregats de quercetina.
2. Resultats
2.1. Inhibició de la tirosinasa dels flavonoides
És ben sabut que els flavonoides posseeixen múltiples grups hidroxil (figura 1) que són importants per a l'activitat anti-tirosinasa. S'informa que el nombre i la posició dels grups hidroxil, així com la presència de fragments de sucre estan relacionats amb la inhibició de la tirosinasa. A la taula 1, Myricetin no va mostrar cap activitat anti-tirosinasa perquè forma fàcilment enllaços d'hidrogen intermoleculars forts que poden dificultar la quelació amb tirosinasa. La rutina i la breviscapina no van mostrar una activitat anti-tirosinasa prometedora, mentre que la quercetina, la morin i el festin van mostrar una activitat anti-tirosinasa considerablement més gran que l'arbutina, que és un agent blanquejador comú utilitzat en cosmètics.
2.2. Activitat antioxidant dels flavonoides
Flavonoids can scavenge free radicals as antioxidants by donating a hydrogen atom. The antioxidant activity of flavonoids is related to the number of hydroxyl groups and their structure. This includes (i) the presence of an ortho-hydroxyl group in the B ring; (ii) the presence of a C2-C3 double bond in the C ring; (iii) or the presence of a C-3 hydroxyl group [40–42]. As shown in Table 2, the 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity of the six compounds is in the following order: quercetin = fest in>miricetina=morin > rutina > BHT ≈ breviscapina. La quercetina i el festina tenien la capacitat d'eliminació radical més potent.
2.3. Formulació de niosomes
2.3.1. Conductivitat del sistema Span60-RH40
Els transfersomes són inestables perquè es componen principalment de fosfolípids que es poden oxidar fàcilment, provocant fuites de fàrmacs. Els niosomes es van identificar com una alternativa per als transfersomes en el lliurament transdèrmic. Tot i que molts tensioactius no iònics poden formar niosomes [15,26,28], els tensioactius no iònics amb cadenes d'hidrocarburs insaturats són menys estables que els tensioactius no iònics amb cadenes d'hidrocarburs saturats [37]. Per tant, en aquest estudi, hem escollit Span60 i RH40, que no tenen dobles enllaços, per formar niosomes per millorar la seva estabilitat.
Es van realitzar mesures de conductivitat per determinar el comportament d'agregació de tensioactius no iònics en una solució aquosa. La conductivitat de Span60-RH40 dispersa a l'aigua va augmentar gradualment des d'una relació de massa de 4:16 a 9:11, després es va establir entre les relacions de massa de 9:11 a 13:7 i va disminuir de 13:7 a 16. :4 (Figura 2a). Dos punts de ruptura poden suggerir canvis en la microestructura dels agregats. Com es mostra a la figura 3, amb una proporció de massa de 9:11, es van començar a formar niosomes.
2.3.2. Mida del sistema Span60-RH40
La mida de les partícules és l'índex important de l'avaluació de les partícules nanomètriques. Mesurar la mida del sistema Span60-RH40 amb diferents proporcions de massa de tensioactiu podria reflectir encara més el canvi en la microestructura dels agregats del sistema. Com es mostra a la figura 2b, inicialment, la mida de l'agregat era relativament petita i constant amb una relació de massa de 4:16 a 9:11. Després, la mida de l'agregat va augmentar molt a la proporció de massa de 9:11 a 13:7, i després va augmentar contínuament amb una proporció de massa de 13:7 a 16:4, que va arribar fins i tot a ~ 1 µm. La transició estructural espontània dels agregats Span60/RH40 es va confirmar encara més per la mida de l'agregat combinada amb la conductivitat i la viscositat.
2.3.3. Viscositat del sistema Span60-RH40
La viscositat del sistema Span60-RH40 que es mostra a la figura 2c va presentar els canvis corresponents. En primer lloc, la viscositat del sistema Span60-RH40 era baixa i constant amb una relació de massa de 4:16 a 9:11. Aleshores, a la proporció de massa de 9:11 a 13:7, la viscositat va canviar significativament, amb la viscositat augmentant i després disminuint. La conductivitat i la mida comentades anteriorment també es van produir corresponents a canvis en aquest rang de relació de massa de Span60-RH40. Posteriorment, a una proporció de massa de 13:7 a 16:4, la viscositat va augmentar bruscament.
2.4. Mida, potencial zeta, morfologia i eficiència d'atrapament de quercetina-niosomes
La quercetina es va carregar amb niosomes Span60-RH40 i després s'ha homogeneïtzat amb 1500 bar. Tal com mostra la taula 3, el diàmetre hidrodinàmic dels niosomes en blanc i de la quercetina-liposomes va ser de 146,4 ± 5,4 nm i 97,6 ± 3,1 nm, respectivament.
Es va estudiar el potencial zeta per entendre les càrregues superficials dels niosomes. El potencial zeta dels niosomes en blanc i quercetina-niosomes va ser de -41,2 ± 0,6 mV i -31,1 ± 0,9 mV, respectivament (taula 3). La imatge TEM de la figura 4b va mostrar que els niosomes de quercetina eren esfèrics o ovalats. L'eficiència d'atrapament de la quercetina-liposomes va ser del 87,3 ± 1,6 per cent, que era superior a les que es trobaven entre el 48,4 i el 78,4 per cent en treballs anteriors [37,43,44]. L'augment de l'eficiència d'atrapament de fàrmacs es pot atribuir a l'afinitat entre els fàrmacs i les bicapas dels niosomes [45].
2.5. Solubilitat en aigua i solubilitat en equilibri de la quercetina
Com es mostra a la figura 5, la solubilitat de la quercetina en aigua era extremadament baixa. La seva solubilitat no tenia cap diferència significativa (P > 0.05) en el tampó fosfat amb un pH diferent en comparació amb el de l'aigua. El resultat de la solubilitat en equilibri de la quercetina va mostrar que la quercetina era un component altament liposoluble. Com es veu a les figures 6 i 7, la solubilitat en equilibri de la quercetina es va mantenir estable en diferents proporcions d'aigua/n-octanol, però va disminuir a pH 8, 0 perquè l'estructura de la quercetina va canviar en condicions bàsiques, provocant un augment de la solubilitat en aigua.
Tanmateix, la poca solubilitat en aigua de la quercetina es limitava a la seva aplicació. D'acord amb la taula 4, la solubilitat de la quercetina va millorar en els tensioactius que es discuteixen a continuació, especialment en el 0,6 per cent de Tween80 (P <0,05). Tanmateix, la seva solubilitat es va millorar encara més carregant-la en niosomes. La quercetina (300 µg/mL) es va carregar als niosomes i l'alta encapsulació del sorollós Span60-RH40 va ser del 87,3 ± 1,6 per cent, per tant, la solubilitat de la quercetina als niosomes va ser de 261,9 ± 4,8 µg/mL, que va ser {{ 17}} vegades més alt que el de l'aigua (P < 0,05).
2.6. Fotosestabilitat de Quercetina-Niosomes
La quercetina té poca fotosestabilitat i es degrada ràpidament sota l'exposició a la llum solar o a la irradiació UV [46–48], possiblement perquè la quercetina pateix fotooxidació després de la irradiació UV [49]. Tanmateix, la fotoestabilitat és necessària perquè la quercetina mostri les seves activitats. Tal com es mostra a la figura 8, els niosomes van millorar eficaçment la fotoestabilitat de la quercetina i es van mantenir al 88, 06 per cent després de 10 dies d'exposició a una forta il·luminació. La quercetina estava protegida de la irradiació UV perquè estava encapsulada a les bicapes dels niosomes. Molècules 2019, 24, x PER A REVISIÓ PER PEER 8 de 18 d'exposició a una il·luminació forta. La quercetina estava protegida de la irradiació UV perquè estava encapsulada a les bicapes dels niosomes.
2.7. Comportament d'alliberament in vitro de quercetina-niosomes
Es va seleccionar el medi d'alliberament adequat per mantenir les condicions d'enfonsament, per tant es va avaluar la solubilitat de la quercetina en els diferents medis. Els resultats de la taula 5 demostren que la quercetina tenia una solubilitat més alta en Tween80 aquós i la seva solubilitat augmentava gradualment amb l'augment de la concentració de Tween80. La solubilitat de la quercetina va augmentar fins a 76,07 ± 3,11 µg/mL en condicions àcides. Per tant, tenint en compte el pH de la pell humana, es va escollir un 0,8 per cent de Tween80 (pH 5,0) com a mitjà d'alliberament per estudiar el comportament d'alliberament de quercetina lliure i quercetina-niosomes.
Com es veu a la figura 9, en comparació amb la quercetina-niosomes, la quercetina lliure es va alliberar molt més ràpidament en el medi d'alliberament, demostrant que els niosomes tenien un efecte d'alliberament sostingut. L'alliberament sostingut redueix el temps d'aplicació, redueix la toxicitat i manté la concentració efectiva del fàrmac.
2.8. Estudis de permeació i retenció de pell ex vivo
En aquest estudi es va utilitzar una solució de {{0}},6% Tween80 com a mitjà d'alliberament de penetració. En el nostre estudi de penetració exvivo, la quercetina no es va poder determinar en el medi d'alliberament de penetració, cosa que va il·lustrar que la quercetina no va penetrar a la dermis i no va arribar al medi d'alliberament, però els niosomes van millorar notablement la retenció de la quercetina a la pell (P <0).{ {20}}5). Com es mostra a la taula 6, la retenció de la pell dels quercetina-niosomes (1,92 més 0,74 ug/cm?), quercetina-niosome-1 percentatge de propandiol (2,34 més 0,40 ug? /cm?), i els transfersomes de quercetina (2,53 més 0,40 ug/cm-) eren significativament més alts en comparació amb els de Quercetina-propandiol (0,65 més 0,10 ug/cm2) (P <0,05).
3. Discussió
Estudis anteriors han determinat que el grup hidroxil lliure a la posició C-3 va tenir un paper important en la inhibició de la tirosinasa [50–52]. Per contra, els 3-O-glicòsids poden dificultar la seva unió als llocs actius de la tirosinasa i pot ser el motiu pel qual la rutina no mostrés activitat antitirosinasa. En canvi, la part de sucre situada a la posició C-7 va tenir poc efecte sobre l'activitat anti-tirosinasa i no va bloquejar la quelació amb tirosinasa [51].
Tanmateix, la presència d'un grup hidroxil addicional a la posició C-30 de l'anell B va augmentar la inhibició de la tirosinasa [53,54]. La breviscapina no va mostrar activitat anti-tirosinasa perquè no tenia el grup hidroxil C-3 i el grup hidroxil C{-30 que podria haver tingut un efecte sobre l'activitat anti-tirosinasa en lloc de la presència de 7- O-glicòsids. En analitzar la relació estructura-activitat de la quercetina i la morina, vam observar que el valor IC50 de la morina és aproximadament 1/3 del de la quercetina i l'única diferència entre l'estructura de la quercetina i la morina és la posició dels grups hidroxil a l'anell B.
Per tant, la presència de grups o-dihidroxil a l'anell B va augmentar l'activitat anti-tirosinasa. El valor IC50 de festina era aproximadament 1/20 del de la quercetina i l'única diferència entre l'estructura de la quercetina i la festina és que el festina és l'absència d'un grup hidroxil C-5 a l'anell A. El grup hidroxil a la posició C-5 també juga un paper important en l'augment de l'activitat d'inhibició de la tirosinasa, ja que pot quelar Cu2 més al lloc actiu de la tirosinasa amb un carbonil a la posició C-4 [50 ]. La quercetina posseeix grups hidroxil lliures, no només a les posicions C-3 i C-5 de l'anell C, sinó també a la posició C-30 de l'anell B. Així, la quercetina presenta una inhibició molt més potent de la tirosinasa en comparació amb els altres flavonoides.
Els flavonoides no només tenen una activitat anti-tirosinasa prometedora, sinó que també tenen una potent activitat antioxidant. La quercetina té un grup hidroxil C-5 addicional; tanmateix, tant la quercetina com la fisetina tenien la mateixa capacitat antioxidant, cosa que suggereix que el grup hidroxil C-5 va tenir poc impacte en l'eliminació de radicals. La miricetina posseeix més grups hidroxil a l'anell B, però no va mostrar una activitat antioxidant més forta que la quercetina o la fisetina. Això pot ser perquè la miricetina pot formar enllaços d'hidrogen intermoleculars forts i reduir la donació d'àtoms d'hidrogen.
De la mateixa manera, la morin va mostrar una capacitat antioxidant més baixa que la quercetina i el festina a causa de la configuració hidroxil de l'anell B, que va il·lustrar que l'o-dihidroxil a l'anell B és important per augmentar la capacitat d'eliminació de radicals. Tanmateix, la rutina i la breviscapina tenien capacitats antioxidants significativament més baixes perquè la rutina té glucòsids a la posició C-3 produint un obstacle estèric. La breviscapina té un sol grup hidroxil a l'anell B i té menys grups hidroxil lliures. En conseqüència, els resultats d'aquest article indiquen que la configuració hidroxil de l'anell B va ser significativa per a la capacitat antioxidant dels flavonoides, mentre que l'anell A va tenir poc impacte en la capacitat d'eliminació de radicals. A més, bloquejar o eliminar el grup hidroxil a la posició C-3 pot reduir la capacitat d'eliminació de radicals dels flavonoides.
Span60 i RH40 no són capaços d'ionització. Per tant, les càrregues semblen originar-se de la interacció entre els grups de capçalera hidròfils de Span60 i RH40 que formen enllaços d'hidrogen [55], quan els agregats carregats es formen entre els Span60 lipòfils i RH40 hidròfils.
Per tant, la conductivitat pot ser deguda a la combinació de Span60 i RH40. La conductivitat va augmentar inicialment, possiblement perquè l'addició de Span60, que s'associa amb RH40, forma micel·les mixtes carregades. L'augment de Span60 també va augmentar el nombre d'agregats carregats i la conductivitat va augmentar gradualment. Es va produir un punt d'interrupció a la relació de massa de 9:11. El canvi sobtat suggereix que la microestructura dels agregats pot canviar i es poden formar niosomes. Posteriorment, la conductivitat va disminuir lleugerament i es va mantenir relativament constant, cosa que pot indicar la formació de niosomes, ja que les càrregues estaven tancades. Un altre punt d'interrupció es va produir a la relació de massa de 13:7 i la conductivitat va disminuir bruscament, tanmateix, la mida dels agregats va augmentar amb l'augment de Span60, possiblement a causa dels densos grups de niosomes multilamel·lars més grans que es van formar i l'aparició de precipitats blancs [56]. ,57], provocant la disminució dels àrids de càrrega gratuïta.
La transició estructural espontània dels agregats Span60-RH40 es va confirmar encara més per la mida de l'agregat combinada amb la conductivitat i la viscositat. Quan la fracció de massa de RH40 era dominant, la mida de l'agregat era relativament constant i petita. El sistema tenia una viscositat semblant a l'aigua i es poden formar micel·les mixtes. Amb una fracció de massa creixent de Span60, la hidrofobicitat del sistema va augmentar i la viscositat i la mida dels agregats van augmentar. L'augment de Span60 pot induir la formació de niosomes. Tanmateix, amb un augment més de Span60, la viscositat i la mida també van augmentar bruscament a causa de l'existència d'abundants niosomes multilamel·lars més grans, que van provocar la formació de precipitats. La formació de niosomes també es va verificar per TEM (figura 3).
Quan la concentració de Span60 era baixa, el sistema Span60-RH40 tenia una viscositat semblant a l'aigua i la mida de l'agregat era relativament petita, cosa que indicava la formació de micel·les mixtes. De la proporció de massa de 9:11 a 13:7, la viscositat i la terbolesa del sistema van augmentar simultàniament. El canvi evident de viscositat pot estar relacionat amb la transició de la micel·la a un sorollós rígid i viscós, ja que els tensioactius estan ben empaquetats i es formen bicapa; aquesta observació era coherent amb la literatura [57,58]. Entre les proporcions de massa de 13:7 i 16:4, la viscositat va augmentar significativament, possiblement a causa de l'existència d'abundants niosomes multilamel·lars més grans que van provocar la formació de precipitats.
Curiosament, els niosomes de quercetina tenien mides més petites que els niosomes en blanc, que va ser per estudis publicats anteriorment [43]. S'ha il·lustrat que si s'incorporessin a les bicapas molècules que mostressin una bona afinitat amb els tensioactius constituents dels niosomes, es produiria una reducció de la mida de les vesícules. Aquesta observació es pot deure a l'efecte d'una forta afinitat per les drogues i els niosomes en mantenir diferents lamines juntes, fent que la membrana sigui més rígida [14]. El valor absolut del potencial zeta per a quercetina-liposomes era inferior al dels liposomes buits (taula 3). Això pot ser degut a la interacció de la quercetina amb el grup principal de tensioactius neutralitzant les càrregues negatives a la superfície dels niosomes. Aquesta observació també es va informar anteriorment; que els fàrmacs podrien reduir les càrregues superficials negatives [59].
Vam determinar que la quercetina era insoluble en aigua i tampó fosfat. En estudis anteriors, per mantenir una condició d'enfonsament de fàrmacs poc solubles en un medi d'alliberament de penetració, sovint s'utilitzen cosolvents, inclosos alcohols i tensioactius [14], per tant, es va utilitzar una solució Tween80 del 0,6 per cent com a mitjà d'alliberament de penetració per mantenir l'estat de la pica.
Tanmateix, tenint en compte l'eficàcia, per a la cura de la pell i el tractament de malalties de la pell, és més eficaç i segur retenir components o fàrmacs a la profunditat de la pell que no pas entrar a la circulació sanguínia. En el nostre estudi, tot i que la quercetina no va penetrar a través de la dermis al medi, els experiments de retenció de la pell van demostrar que, en comparació amb la quercetina lliure, els niosomes van millorar la penetració de la quercetina a l'epidermis.
Per tant, els niosomes poden ser un sistema de lliurament prometedor amb finalitats cosmètiques i el tractament de malalties de la pell. La quercetina és altament liposoluble i la seva baixa solubilitat en aigua ha limitat el seu desenvolupament i aplicació. Els niosomes carregats de quercetina no només han millorat la solubilitat en aigua sinó també l'absorció transdèrmica de la quercetina. Els niosomes de quercetina tenien un augment de 3- vegades en la retenció de la pell respecte a la solució de quercetina-propandiol. Després d'afegir un 1% de propandiol, un potenciador de la penetració, a la formulació original dels niosomes Span60-RH40, la seva absorció transdèrmica va millorar, comparable a la dels transfersomes de quercetina.
4. Materials i Mètodes
4.1. Materials
Quercetina, morin, festin, miricetina, rutina i breviscapina es van comprar a DATIAN Biology Co (Shanxi, Xina), -arbutina de Beijing Brilliance Biochemical Co, Ltd (Beijing, Xina) i 1,1-difenil{{ 3}}picrylhydrazil (DPPH) de Guangzhou Qiyun Bio-technology Co (Guangzhou, Xina). El dihidrogen fosfat de sodi, l'hidrogen fosfat disòdic, el dimetilsulfòxid (DMSO) i l'alcohol etílic absolut es van comprar a DAMAO CHEMICAL REAGENT FACTORY (Tianjin, Xina). Span60 es va comprar a Tianjin Kemiou Chemical Reagent Co, Ltd (Tianjin, Xina) i Cremophor RH40 a Guangzhou Jiefu Trading Co, Ltd (Guangzhou, Xina). Es van utilitzar rates Sprague-Dawley mascles (200 ± 20 g) que van ser subministrades pel Centre d'Experimentació Animal de Guangdong (Guangzhou, Xina). Les rates es van mantenir en condicions estàndard de temperatura, humitat i llum, amb una dieta estàndard de rosegadors i aigua. La investigació va ser aprovada pel Comitè d'Ètica Animal Experimental de la Universitat Farmacèutica de Guangdong (Nº SPF2017120, Guangzhou, Xina).
4.2. Activitat d'inhibició de la tirosinasa in vitro dels flavonoides
L'assaig d'inhibició de la tirosinasa es va realitzar a partir d'un estudi anterior amb lleugeres modificacions [2]. L'activitat de la inhibició de la tirosinasa es va determinar mitjançant un espectrofotòmetre controlant la formació de dopacrom a 493 nm. El sistema de reacció, tal com es mostra a la taula 7, contenia 0,5 ml de diferents concentracions de flavonoides, incloent arbutina, quercetina, morin, festin, rutina i breviscapina, i 0,5 ml de tirosinasa (120 unitats/mL en tampó fosfat, pH 6,8), que es van combinar amb 1,5 mL de tampó fosfat (pH 6,8). Després de la incubació a 30 ◦ C durant 10 min, es van afegir 0, 5 ml de l-tirosina als sistemes. Els sistemes de reacció es van incubar a 30 ◦ C durant 20 min i es va determinar l'absorbància a 493 nm. L'arbutina es va utilitzar com a control positiu. El grau d'inhibició de la mostra es va expressar com una concentració d'inhibició del 50 per cent (IC50).
4.3. Activitat antioxidant in vitro dels flavonoides
L'activitat antioxidant dels flavonoides es va mesurar per la taxa de blanqueig de DPPH, informada per Blois [60]. En la seva forma radical, el DPPH s'absorbeix a la longitud d'ona de 515 nm, però la seva absorció disminueix quan es redueix per un antioxidant o un compost radical. L'activitat d'eliminació de radicals DPPH dels flavonoides es va avaluar segons el mètode descrit per Rui Yang, amb algunes modificacions [61]. Breument, es van barrejar 5 mL de DPPH (30 µg/mL) amb 0,1 mL d'alcohol etílic absolut i 0,1 mL de mostres amb diferents concentracions. A continuació, es va determinar l'absorbància de les mescles a 515 nm. L'activitat d'eliminació de radicals DPPH es va calcular de la següent manera:
4.4. Formulació de niosomes
A partir d'investigacions anteriors i articles publicats que van demostrar que Span60 és un tensioactiu comú utilitzat per formar niosomes [15,27,31], vam dissenyar un sistema de formulació de tensioactius no iònics utilitzant Span60 i RH40 a diferents proporcions de massa. La conductivitat, la viscositat i la mida com a índexs es van investigar per determinar la proporció adequada de tensioactius no iònics que formen liposomes.
Les relacions de massa de Span60 i RH40 investigades van ser 4:16, 6:14, 8:12, 9:11, 10:10, 12:8, 13:7, 14:6 , 15:5 i 16:4 (pes total: 2 g). Span60 es va fondre a 80 ◦ C i després es va barrejar amb RH40 mitjançant un agitador durant 2 min. A continuació, les mescles es van hidratar amb 100 ml d'aigua a 80 ◦ C durant 10 min, respectivament. La conductivitat (DDS-11un conductòmetre, Shanghai Ridao Scientific Instruments Co., Ltd., Xangai, Xina), la viscositat (viscosímetre Ubbelode, 0,4-0,5 mm, Shanghai Liangjing Glass Instrument Factory, Xangai, Xina) i la mida (Nano-ZS90, Malvern, Malvern, Regne Unit) de sistemes tensioactius no iònics es van mesurar a temperatura ambient.
4.5. Preparació i avaluació de niosomes carregats de quercetina
4.5.1. Preparació de niosomes carregats de quercetina
A partir de la imatge TEM del sistema Span{{0}}RH40 (figura 3), Span60 i RH40 amb una relació de massa de 9:11, sembla que es formen niosomes esfèrics o ovalats. Per tant, es van preparar niosomes carregats de quercetina amb la relació de massa Span60/RH40 de 9:11 mitjançant un aparell d'agitació magnètica. Span60 (0,9 g), RH40 (1,1 g) i quercetina (30 mg) es van fondre junts. A continuació, es van afegir 100 ml d'aigua purificada a 80 ◦ C a la mescla i es van hidratar durant 10 min. Els niosomes carregats de quercetina es van formar i després es van refredar a temperatura ambient. Els niosomes clars es van adquirir processant amb homogeneïtzació a alta pressió a 1500 bar.
4.5.2. Mida, potencial zeta i morfologia dels niosomes carregats de quercetina
La mida i el potencial zeta dels niosomes buits i els niosomes carregats de quercetina es van mesurar mitjançant Malvern Zetasizer (ZS90 més MPT-2, Malvern, Malvern, Regne Unit). La morfologia dels niosomes carregats de quercetina es va caracteritzar per microscòpia electrònica de transmissió. Les mostres de quercetina-niosomes es van dipositar sobre una reixeta de coure i després d'1 minut, l'excés de mostra es va eliminar amb paper de filtre. Es va utilitzar un TEM per observar les mostres després de la tinció negativa per àcid fosfotúngstic.
4.5.3. Eficiència de l'atrapament de drogues
L'eficiència d'atrapament de fàrmacs dels niosomes carregats de quercetina es va determinar mitjançant la tècnica de centrifugació en minicolumna. La minicolumna es va preparar mitjançant una dispersió hidratada de Sephadex G50 en una xeringa de 5 ml, que es va centrifugar durant 30 s a 900 rpm. Es va introduir una alíquota de niosomes carregats de quercetina (400 µL) a la minicolumna i els eluïts es van recollir mitjançant centrifugació a 1500 rpm durant 3 min. Els eluïts es van diluir a 10 ml amb metanol i es van vortexar, i es van injectar 10 µL de les mostres filtrades en cromatografia líquida d'alt rendiment (HPLC). A continuació, la quercetina lliure es va eluir per centrifugació amb 25 ml de metanol al 80% i el contingut de quercetina es va determinar per HPLC.
4.6. Solubilitat en aigua i solubilitat en equilibri de la quercetina
La solubilitat en aigua de la quercetina es va mesurar amb 15 ml d'aigua purificada, tampons de fosfat amb diferents valors de pH (pH 5.0, 6.0, 6.8, 7.4, 8.0) , i l'excés de quercetina, i es col·loca en vials. Els vials es van agitar durant 24 h en un bany d'aigua a 37 ◦ C i el sobrenedant es va determinar per HPLC després de la centrifugació.
La solubilitat en equilibri de la quercetina es va realitzar mitjançant un sistema n-octanol-aigua amb proporcions de n-octanol/aigua d'1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:6, 1: 7 i 1:8. A continuació, es van preparar 70 µg/mL de solució de quercetina amb una solució de n-octanol saturada d'aigua i es va prendre 1 mL de solució de quercetina de 70 µg/mL en vuit vials i després 1 mL, 2 mL, 3 mL, 4 mL, 5 mL. , es van afegir 6 ml, 7 ml i 8 ml d'aigua purificada als vials respectius.
També es va estudiar la solubilitat en equilibri de la quercetina en sistemes tampó n-octanol a diferents valors de pH. La proporció de n-octanol-tampó es va escollir a 1:2 en funció del resultat de la solubilitat en equilibri de la quercetina en el sistema n-octanol-aigua. Es va afegir un volum de 2 ml de 70 µg/ml de solució de quercetina i 4 ml de solucions tampó fosfat saturat de n-octanol a diferents valors de pH als vials i els vials es van agitar durant 24 h a 37 ◦C. bany d'aigua. A continuació, es van prendre 0,2 ml de solució de quercetina a la capa de n-octanol i es van diluir a 5 ml (uns 2,8 µg/mL) mitjançant la fase mòbil (metanol{21}} percentatge d'àcid fosfòric=60:40). Les mostres es van determinar per HPLC. La solució estàndard de quercetina n-octanol (70 µg/mL) es va diluir i es va determinar tal com es descriu anteriorment.
4.7. Fotosestabilitat de Quercetina-Niosomes
Es va afegir una solució de quercetina metanol (300 µg/mL) a vials transparents i es va col·locar sota la llum del sol. Aleshores, el contingut de quercetina es va determinar per HPLC a les 0, 12, 24, 36, 48, 60 i 72 h. Els niosomes de quercetina es van dividir en alícuotes en vials transparents i es van col·locar dins de la cambra de prova d'estabilitat a la llum (PTOP-500B, Zhejiang TOP Instrument Co., Ltd., Zhejiang, Xina) amb una il·luminació de 4500 ± 500 LX durant 10 dies. Es va extreure una mostra de 0,2 g de quercetina-liposomes els dies 0, 5 i 10 i es va dissoldre en 10 ml d'etanol. Les mostres es van determinar per HPLC després de la centrifugació i la filtració amb una membrana de filtre Millipore de 0,22 µm. La fotoestabilitat es va avaluar pel percentatge de quercetina restant en diferents temps d'irradiació, en comparació amb mostres no exposades.
4.8. Estudi de publicació in vitro
4.8.1. La solubilitat de la quercetina en diferents medis d'alliberament
La solubilitat de la quercetina es va investigar en diferents medis d'alliberament, com ara {{0}},1 per cent, 0,2 per cent, 0,3 per cent, 0,4 per cent, {{10}},6 per cent i 0,8 per cent de solució aquosa de Tween8{0, així com 0,2 per cent, 0,4 per cent i Solució aquosa SDS al 0,6 per cent. Es va col·locar una solució aquosa de 15 ml de Tween80 i SDS a diferents concentracions i un excés de quercetina a cadascun dels vials. Els vials es van agitar en un bany maria a 32 ◦ C durant 24 h. Després de 24 h, es van centrifugar 5 mL de suspensió a 3000 RMP durant 15 min i 0, 2 mL del sobrenedant es van diluir a 2 mL i es van determinar mitjançant HPLC.
4.8.2. Alliberament de fàrmacs per diàlisi
L'estudi de solubilitat de la quercetina presentat a la taula 5 va il·lustrar que la solució aquosa de 0,8 per cent de Tween80 (pH 5.0) complia les condicions d'enfonsament i corresponia al valor de pH de la pell humana. Per tant, es van investigar els comportaments d'alliberament de quercetina lliure i quercetina-liposomes a la solució aquosa de 0,8% Tween80 (pH 5,0).
La bossa de dialitzat (8000–14,000 tall de pes molecular) es va processar amb solucions de NaHCO3 al 2% i 1 mmol/ml d'EDTA. Es van afegir 10 ml de (300 µg/mL) quercetina-niosomes i una solució de quercetina-propandiol a bosses de diàlisi i es van col·locar en recipients de dissolució que contenien 1.000 ml de solució aquosa de Tween80 al 0,8 per cent (pH 5,0) a 32 ◦C. Els recipients de dissolució es van col·locar en un agitador magnètic a la velocitat de 100 rpm. El medi d'alliberament (2 ml) es va retirar a 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 i 24 h i es va substituir per un medi d'alliberament en blanc (2 ml). Els 2 ml de medi d'alliberament retirats es van centrifugar a 3000 r / min durant 15 min i es van filtrar. La quercetina alliberada es va quantificar per HPLC.
4.9. Estudis de permeació de fàrmacs i retenció de pell ex vivo
Les rates es van sacrificar per luxació cervical, es va afaitar el cabell de l'abdomen i després es va separar la pell abdominal i es va col·locar en solució salina fisiològica. Després, es va eliminar el teixit subcutani (múscul, greix i vascule) amb tisores quirúrgiques i pinces hemostàtiques i després es va emmagatzemar a 4 ◦ C amb solució salina fisiològica per a una investigació posterior.
Els estudis de permeació i retenció de la pell de fàrmacs de quercetina-niosomes, quercetin-niosomes-1 percentatge de propandiol, quercetina-transfersomes (compostos per fosfolípids i Tween80 en una proporció de massa de 9:11) i quercetina lliure Es va dur a terme una solució de propandiol per investigar el seu lliurament transdèrmic mitjançant un dispositiu de difusió transdèrmica TK-20B amb una àrea de difusió efectiva de 2,99 cm2. Aleshores, es va seleccionar la solució de 0,6 per cent Tween80 com a mitjà d'alliberament de penetració. Es van col·locar teixits de la pell entre la cèl·lula de difusió i la cèl·lula receptora i es van aplicar 0,4 ml de preparats de quercetina (equivalent a 120 µg de quercetina) a la pell. El medi de penetració (0, 5 ml) es va retirar de la cèl·lula receptora a 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 i 24 h amb la substitució del medi de penetració fresc (0, 5 ml). Els medis de penetració retirats en diferents moments es van diluir a 7 ml amb metanol i es van determinar per HPLC després de la centrifugació i la filtració.
Després de l'experiment de permeació, es va realitzar l'experimentació de retenció de la pell de fàrmacs. Després de 24 h, es van aïllar els teixits de la pell, després es van tallar completament en 7 ml de metanol després de rentar la quercetina de la superfície amb aigua destil·lada i extreure's durant 4 0 minuts per ultrasons. A continuació, es van vortexar les mostres i es van centrifugar i es va analitzar el sobrenedant mitjançant HPLC després de filtrar-les a través d'una membrana de filtre Millipore de 0, 22 µm.
4.10. Mètode HPLC
La columna analítica era Dimark C18 (150 mm × 4,6, 5 µm). La fase mòbil estava composta per metanol i un 1% d'H3PO4 (60:40, v/v). El cabal es va establir a 1 mL/min a 30 ◦C i un volum d'injecció de 10 µL. El pic de quercetina es va detectar a 363 nm.
4.11. Anàlisi estadística
Les dades s'expressen com la mitjana dels experiments ± la desviació estàndard (SD) i es van analitzar mitjançant l'anàlisi de variància unidireccional (ANOVA), seguida de la comparació múltiple posterior a la prova de Tukey. Les diferències estadístiques que produeixen P < 0,05 es consideren estadísticament significatives.
5. Conclusions
Vam examinar la quercetina, un flavonoide natural que posseeix potents capacitats blanquejadores i antioxidants, i vam formular liposomes mitjançant un sistema tensioactiu no iònic per millorar la solubilitat, la fotoestabilitat i la capacitat de penetració de la quercetina a la pell.
Contribucions de l'autor:
Conceptualització, WC i XL; metodologia, WC; programari, YH; validació, BL, YH i ZC; anàlisi formal, BL; investigació, JY; recursos, HX; curació de dades, BL; redacció: preparació de l'esborrany original, BL; redacció—revisió i edició, XL; visualització, WC; supervisió, XL; adquisició de finançament, XL
Finançament:
Aquesta investigació no va rebre cap finançament extern.
Conflictes d'interès:
Els autors declaren no conflicte d'interessos.
Referències
1. Chhikara, N.; Kaur, R.; Jaglan, S.; Sharma, R.; Gat, Y.; Panghal, A. Compostos bioactius i aplicacions farmacològiques i alimentàries de Syzygium cumini: una revisió. Funció Alimentació. 2018, 9, 6096. [CrossRef] [PubMed]
2. Carol López de Dicastillo Carol López Bustos, F.; Valenzuela, X.; López-Carballo, G.; Vilariño, JM; Galotto, MJ Baia xilena, Ugni molinae, Turcz. Extracte de fruites i fulles amb interessants propietats antioxidants, antimicrobianes i inhibidores de la tirosinasa. Alimentació Res. Int. 2017, 102, 119–128.
3. Chiari, ME; Vera, DM; Palacios, SM; Carpinella, MC activitat inhibidora de la tirosinasa d'una flavanona substituïda d'isoprenoides aïllada de Dalea elegans. Bioorg. Med. Chem. 2011, 19, 3474–3482. [CrossRef] [PubMed]
4. Sirat, HM; Rezali, MF; Ujang, Z. Aïllament i identificació de l'eliminació de radicals i la inhibició de la tirosinasa de polifenols de Tibouchina semidecandra. J. Agric. Química dels Aliments. 2010, 58, 10404–10409. [CrossRef] [PubMed]
5. Xiong, Z.; Liu, W.; Zhou, L.; Chen, J. Polifenol oxidasa inhibida per l'apigenina de bolets (Agaricus bisporus): anàlisis multiespectroscòpics i simulació d'acoblament computacional. Química dels Aliments. 2016, 203, 430–439. [CrossRef] [PubMed]
6. Yan-Zhen, Z.; Da-Fu, C.; Geng, D.; Guo, R. The Substituent Effect on the Radical Scavenging Activity of Apigenin. Molècules 2018, 23, 1989.
7. Handjani-Vila, RM; Ribier, A.; Rondot, B.; Vanlerberghie, B. Dispersions de fases lamel·lars de lípids no iònics en productes cosmètics. Int. J. Cosmet. Ciència. 1979, 1, 303–314. [CrossRef] [PubMed]
8. Yoshida, H.; Lehr, CM; Kok, W.; Junginger, HM; Verhoef, JC; Bouwstra, JA Niosomes per al lliurament oral de fàrmacs pèptids. J. Control. Publicació 1992, 21, 145–153. [Ref creuat]
9. Uchegbu, IF; Doble, JA; Kelland, LR; Turton, JA; Florence, AT L'activitat dels niosomes de doxorubicina contra una línia cel·lular de càncer d'ovari i tres models de tumors de ratolí in vivo. J. Objectiu de drogues. 1996, 3, 399–409. [Ref creuat]
10. Alsarra, IA; Bosela, AA; Ahmed, SM; Mahrous, GM Proniosomes com a portador de fàrmacs per al lliurament transdèrmic de ketorolac. Eur. J. Pharm. Biofarm. 2005, 59, 485–490. [Ref creuat]
11. Hong, M.; Zhu, S.; Jiang, Y.; Tang, G.; Pei, Y. Orientació eficient del tumor de liposomes PEGilats carregats amb hidroxicamptotecina modificats amb transferrina. J. Control. Versió 2009, 133, 96–102. [CrossRef] [PubMed]
12. Tavano, L.; Muzzalupo, R.; Picci, N.; de Cindio, B. Co-encapsulation of antioxidants into liposomal carriers: Gastrointestinal release studies for nutraceutical applications. Surf coloide. B Biointerface 2014, 114, 82–88. [CrossRef] [PubMed]
13. Sohrabi, S.; Haeri, A.; Mahboubi, A.; Mortazavi, A.; Dadashzadeh, S. Niosomes de moxifloxacina incrustat en gel de Chitosan: un sistema híbrid antimicrobià eficient per a la infecció per cremades. Int. J. Biol. Macromol. 2016, 85, 625–633. [CrossRef] [PubMed]
14. Kumar, N.; Goindi, S. Vesícules de tensioactius no iònics dissenyades estadísticament per al lliurament dèrmic d'itraconazol: caracterització i avaluació in vivo mitjançant un model d'infecció estandarditzat per Tinea pedis. Int. J. Pharm. 2014, 472, 224–240. [CrossRef] [PubMed]
15. Cerqueira-Coutinho, C.; Dos Santos, EP; Mansur, CR Niosomes com a sistemes de nano-entrega en el camp farmacèutic. Crit. Reverent Ther. Drogues Carr. Syst. 2016, 33, 195. [CrossRef]
16. Sí, MI; Huang, HC; Liaw, JH; Huang, MC; Huang, KF; Hsu, FL Lliurament dèrmic per niosomes d'extracte de te negre com a agent de protecció solar. Int. J. Dermatol. 2013, 52, 239–245. [CrossRef] [PubMed]
17. Manconi, M.; Sinico, C.; Valenti, D.; Loy, G.; Fadda, AM Niosomes com a portadors de la tretinoïna. I. Preparació i propietats. Int. J. Pharm. 2002, 234, 237–248. [CrossRef] 18. Manconi, M.; Valenti, D.; Sinico, C.; Lai, F.; Loy, G.; Fadda, AM Niosomes com a portadors de tretinoïna: II. Influència de la incorporació vesicular en la fotoestabilitat de la tretinoïna. Int. J. Pharm. 2003, 260, 261–272. [Ref creuat]
19. Kunitake, T.; Takahata, Y. Una membrana de bicapa sintètica. Melmelada. Chem. Soc. 1977, 99, 3860–3861. [Ref creuat]
20. Brady, JE; Evans, DF; Kachar, B.; Ninham, BM Vesícules espontànies. Melmelada. Chem. Soc. 1984, 106, 4279–4280. [Ref creuat]
21. Kaler, E.; Murthy, A.; Rodríguez, B.; Zasadzinski, J. Formació espontània de vesícules en mescles aquoses de tensioactius d'una sola cua. Ciència 1989, 245, 1371–1374. [CrossRef] [PubMed]
22. Kaler, EW; Herrington, KL; Murthy, Alaska; Zasadzinski, JAN Comportament en fase i estructures de mescles de tensioactius aniònics i catiònics. J. Phys. Chem. 1992, 96, 6698–6707. [Ref creuat]
23. Uchegbu, IF; Vyas, SP Vesícules a base de tensioactius no iònics (niosomes) en el lliurament de fàrmacs. Int. J. Pharm. 1998, 172, 33–70. [Ref creuat]
24. Mahale, NB; Thakkar, PD; Mali, RG; Walunj, DR; Chaudhari, SR Niosomes: nous sistemes vesiculars estables no iònics d'alliberament sostingut: una visió general. Adv. Interfície col·loide Sci. 2012, 183–184, 46–54. [CrossRef] [PubMed]
25. Udupa, N.; Chandraprakash, KS; Umadevi, P.; Pillai, GK Formulació i avaluació de niosomes de metotrexat. Desenvolupador de drogues. Commun. 1993, 19, 12. [CrossRef]
26. Uchegbu, IF; Florence, AT Vesícules de tensioactius no iònics (niosomes): Química física i farmacèutica. Adv. Interfície col·loide Sci. 1995, 58, 1–55. [Ref creuat]
27. Yoshioka, T.; Sternberg, B.; Florence, AT Preparació i propietats de vesícules (niosomes) de monoèsters de sorbitan (Span 20, 40, 60 i 80) i d'un trièster de sorbitan (Span 85). Int. J. Pharm. 1994, 105, 1–6. [Ref creuat]
28. Manosroi, A.; Wongtrakul, P.; Manosroi, J.; Sakai, H.; Sugawara, F.; Yuasa, M.; Abe, M. Caracterització de vesícules preparades amb diversos tensioactius no iònics barrejats amb colesterol. Surf coloide. B Biointerface 2003, 30, 129–138. [Ref creuat]
29. Alsarra, IA Avaluació de proteasomes com a estratègia alternativa per optimitzar el lliurament transdèrmic de piroxicam. J. Microencapsul. 2009, 26, 272–278. [Ref creuat]
30. Sharma, S.; Das, A.; Dasgupta, A.; Lee, WM; Kim, JO; Oh, DH; Kim, DD; Kim, JS; Jo, BY; Choi, HG; et al. Formulació i avaluació in vitro de niosomes de minoxidil per millorar el lliurament a la pell. Int. J. Pharm. 2009, 377, 1–8.
31. Junyaprasert, VB; Singh, P.; Suksiriworapong, J.; Chantasart, D. Propietats fisicoquímiques i permeació de la pell de Span 60/Tween 60 niosomes d'àcid elàgic. Int. J. Pharm. 2012, 423, 303. [CrossRef] [PubMed]
32. Manosroi, A.; Khanrin, P.; Lohcharoenkal, W.; Götz, F.; Manosroi, W.; Manosroi, J. Millora de l'absorció transdèrmica a través de la pell de rata de gallidermina carregada en liposomes. Int. J. Pharm. 2010, 392, 304–310. [CrossRef] [PubMed]
33. Auda, SH; Fathalla, D.; Fetih, G.; El-Badry, M.; Shakeel, F. Niosomes com a sistema de lliurament de fàrmacs transdèrmics per a celecoxib: estudis in vitro i in vivo. Políma. Bou. 2016, 73, 1229–1245. [Ref creuat]
34. Manosroi, A.; Jantrawut, P.; Manosroi, J. Activitat antiinflamatòria del gel que conté nous niosomes elàstics atrapats amb diclofenac dietil-amoni. Int. J. Pharm. 2008, 360, 156–163. [CrossRef] [PubMed]
35. Shahiwala, A.; Misra, A. Estudis en aplicació tòpica de nimesulida normalment atrapada. J. Pharm. Farmàcia. Ciència. 2002, 5, 220–225. [PubMed]
36. Pardakhty, A.; Varshosaz, J.; Rouholamini, A. Estudi in vitro de niosomes de polioxietilè alquil èter per al lliurament d'insulina. Int. J. Pharm. 2007, 328, 130–141. [CrossRef] 37. Abdelbary, G.; El-Gendy, N. Gentamicina encapsulada amb niosomes per a un lliurament controlat oftàlmic. Aaps Pharmscitech 2008, 9, 740–747. [CrossRef] [PubMed]
38. Wadda Abbad, S.; Yu, F.; Munyendo, WLL; Wang, J.; Lv, H.; Zhou, J. Formulació, caracterització i farmacocinètica de niosomes d'hidrat de Morin preparats a partir de diversos tensioactius no iònics. Int. J. Pharm. 2013, 456, 446–458. [Ref creuat]
39. Mishra, J.; Swain, J.; Mishra, AK Sondejant els canvis depenents de la temperatura de la hidratació i la viscositat interfacial de Tween20: Membrana del niosoma de colesterol (1:1) utilitzant Fisetin com a sonda molecular fluorescent. Phys. Chem. Chem. Phys. 2018, 20, 13279–13289. [Ref creuat]
40. Procházková, D.; Boušová, I.; Wilhelmová, N. Propietats antioxidants i prooxidants dels flavonoides. Fitoterapia 2011, 82, 513–523. [Ref creuat]
41. Cherrak, SA; Mokhtari-Soulimane, N.; Berroukeche, F.; Bensenane, B.; Cherbonnel, A.; Merzouk, H.; Elhabiri, M. Antioxidant in vitro versus propietats quelants d'ions metàl·lics dels flavonoides: una investigació de l'activitat estructural. PLoS ONE 2016, 11, e0165575. [CrossRef] [PubMed]
42. Amic, D.; Davidovic-Amic, D.; Beslo, D.; Rastija, V.; Lucic, B.; Trinajstic, N. SAR i QSAR de l'activitat antioxidant dels flavonoides. Curr. Med. Chem. 2007, 14, 827–845. [CrossRef] [PubMed]
43. Machado, ND; Fernando, SO; De Rossi, RH; Fernandez, MA Niosomes modificats per ciclodextrina per encapsular compostos hidròfils. RSC Adv. 2018, 8, 29909–29916. [Ref creuat]
44. Imran, M.; Shah, senyor; Ullah, F.; Ullah, S.; Elhissi, AMA; Nawaz, W.; Ahmad, F.; Sadiq, A.; Ali, I. Nanoportador liposomal basat en glicòsids per al rendiment millorat in vivo de Cefixima. Int. J. Pharm. 2016, 505, 122–132. [CrossRef] [PubMed]
45. Hao, Y.; Zhao, F.; Li, N.; Yang, Y.; Li, K. Estudis sobre una alta encapsulació de colquicina per un sistema sorollós. Int. J. Pharm. 2002, 244, 73–80. [Ref creuat]
46. Anandam, S.; Selvamuthukumar, S. Fabricació de nanoesponges de ciclodextrina per al lliurament de quercetina: caracterització fisicoquímica, fotosestabilitat i efectes antioxidants. J. Mater. Ciència. 2014, 49, 8140–8153. [Ref creuat]
47. Lv, X.; Liu, T.; Ma, H.; Tian, Y.; Li, L.; Li, Z.; Gao, M.; Zhang, J.; Tang, Z. Preparació de microemulsions a base d'olis essencials per millorar la solubilitat, l'estabilitat del pH, la fotoestabilitat i la penetració de la quercetina a la pell. AAPS PharmSciTech 2017, 18, 3097–3104. [Ref creuat]
48. Azzi, J.; Jraij, A.; Auezova, L.; Fourmentin, S.; Greige-Gerges, H. Noves troballes per a l'encapsulació i conservació de quercetina amb ciclodextrines, liposomes i fàrmacs en ciclodextrina en liposomes. Food HydroColloid 2018, 81, 328–340. [Ref creuat]
49. Smith, GJ; Thomsen, SJ; Markham, KR; Andary, C.; Cardon, D. La fotoestabilitat de les 5-hidroxiflavones, els flavonols, els seus glucòsids i els seus complexos d'alumini d'origen natural. J. Photochem. Fotobiol. Una química. 2000, 136, 87–91. [Ref creuat]
50. Kubo, I.; Kinsthori, I. Flavonols de la flor del safrà: activitat inhibidora de la tirosinasa i mecanisme d'inhibició. J. Agric. Química dels Aliments. 1999, 47, 4121–4125. [Ref creuat]
51. Kim, YJ; Uyama, H. Inhibidors de la tirosinasa de fonts naturals i sintètiques: estructura, mecanisme d'inhibició i perspectiva de futur. Cèl·lula. Mol. Ciència de la vida. 2005, 62, 1707–1723. [CrossRef] [PubMed]
52. Kim, D.; Park, J.; Kim, J.; Han, C.; Yoon, J.; Kim, N.; Seo, J.; Lee, C. Flavonoides com a inhibidors de la tirosinasa de bolets: un estudi d'extinció de la fluorescència. J. Agric. Química dels Aliments. 2006, 54, 935–941. [CrossRef] [PubMed]
53. Fan, M.; Zhang, G.; Hu, X.; Xu, X.; Gong, D. Quercetina com a inhibidor de la tirosinasa: activitat inhibidora, canvi conformacional i mecanisme. Alimentació Res. Int. 2017, 100, 226–233. [CrossRef] [PubMed]
54. Didem ¸Söhreto ˘glu Suat, S.; Burak, B.; Özel, A. Inhibició de la tirosinasa per alguns flavonoides: activitat inhibidora, el mecanisme per estudis in vitro i silico. Bioorg. Chem. 2018, 81, 168–174. [CrossRef] [PubMed]
55. Gopinath, D.; Ravi, D.; Karwa, R.; Rao, B.; Shashank, A.; Rambhau, D. Farmacocinètica de la zidovudina després de l'administració en bolus intravenós d'una nova preparació de niosomes sense colesterol. Arzneimittelforschung 2011, 51, 924–930. [CrossRef] [PubMed]
56. Ghosh, S.; Ghatak, C.; Banerjee, C.; Mandal, S.; Kuchlyan, J.; Sarkar, N. Transició espontània de micel·la-vesícula-micel·la en una barreja de tensioactiu catiònic i líquid iònic semblant a tensioactiu aniònic: una plantilla vesicular unilamel·lar petita no lipídica pura utilitzada per a l'estudi de relaxació rotacional i solvent. Langmuir 2013, 29, 10066–10076. [Ref creuat]
57. Sakai, T.; Ikoshi, R.; Toshida, N.; Kagaya, M. Formació de vesícules termodinàmicament estables i transició de vesícula a micel·la del tensioactiu aniònic de cua única a l'aigua. J. Phys. Chem. B 2013, 117, 5081. [CrossRef]
58. Ghosh, S.; Mondal, S.; Pan, A.; Mitra, RK; Ghosh, S. Transició de micel·la a vesícula mediada per líquid iònic d'un tensioactiu gemini catiònic: una investigació espectroscòpica. Matèria suau 2018, 14, 4185–4193.
59. Mukherjee, B.; Patra, B.; Layek, B.; Mukherjee, A. Alliberament sostingut d'aciclovir a partir de nano-liposomes i nano-liposomes: un estudi in vitro. Int. J. Nanomed. 2007, 2, 213–225.
60. Blois, MS Determinacions d'antioxidants mitjançant l'ús d'un radical lliure estable. Natura 1958, 181, 1199–1200. [Ref creuat]
61. Rui, Y.; Ying, G.; Weixin, W.; Chen, H.; Ell, Z.; Jia, A.-Q. Capacitat antioxidant dels fenòlics a les flors de Camellia nitidissima Chi i la seva identificació mitjançant HPLC Triple TOF MS/MS. PLoS ONE 2018, 13, e0195508.
Disponibilitat de mostra:
Els autors no disposen de mostres dels compostos.
© 2019 dels autors. Llicenciat MDPI, Basilea, Suïssa. Aquest article és un article d'accés obert distribuït sota els termes i condicions de la llicència Creative Commons Attribution (CC BY) (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).
Rebut: 2 d'abril de 2019; Acceptat: 21 de juny de 2019; Publicat: 24 de juny de 2019
For more information:1950477648nn@gmail.com
