Patrons de l'expressió de l'ARNm d'arc al cervell de la rata després de la memòria dual de la informació adquirida socialment basada en la por i la recompensa (2)
Jun 02, 2023
Arc en el record de les associacions de por directes i socialment adquirides.
La nostra capacitat d'interpretar les nostres troballes sobre les nostres rates que pateixen la memòria de la por adquirida mitjançant l'aprenentatge directe es veu ajudada significativament pel bon caràcter del sistema subjacent a l'aprenentatge i el record de la por. Algunes de les àrees que hem examinat estan implicades en l'aprenentatge de la por o l'extinció (l'últim dels quals suposaríem que s'iniciava en Demostradors, ja que havien estat sotmesos a una presentació de CS no reforçada durant FCbP), específicament l'ACC, PLC i ILC30-32. ,37. Tot i que hi ha disponible un conjunt d'investigacions una mica més reduït sobre els mecanismes neuronals de la por social, els models proposats d'aprenentatge de la por social postulen que sistemes similars són la base de l'aprenentatge de la por social i directe28. Els nostres resultats indiquen que no hi ha cap paper global de l'ACC, PLC o ILC en el record d'una associació de por adquirida socialment o d'una associació de por adquirida directament (tot i que vegeu també "Discussió" de les diferències de sexe en l'activitat del PLC a continuació). Tanmateix, tal com s'ha descrit a la secció anterior, això probablement només indica que Arc no serveix com a indicador fiable d'activitat en aquest cas. L'examen d'aquestes àrees després de l'adquisició de la por probablement explicaria una història diferent. La dura investigació explícita de l'activitat d'Arc després de la recuperació de la por és limitada, hi ha algunes investigacions anteriors per extreure. Chia i Otto35 van trobar que les rates condicionades per la por tenien una expressió de proteïna Arc significativament més alta tant a l'hipocamp dorsal com ventral en comparació amb els controls no condicionats. En particular, l'Arc es va quantificar mitjançant l'anàlisi Western Blot de l'hipocamp ventral i dorsal homogeneïtzats en aquest experiment, de manera que no es disposava de localització precisa de l'activitat de l'hipocamp. Aquestes troballes probablement indiquen que, com a STFP, la transcripció d'Arc es podria induir en determinades zones de l'hipocamp al punt de temps de record 48-h per a un record de por. Els nostres resultats nuls també poden ser deguts a un record fallit per part dels observadors, ja que a diferència d'estudis anteriors al nostre laboratori12–14,26, no vam veure una congelació més alta del CS en els observadors en comparació amb els controls. No està clar si això es deu realment a una recuperació fallida dels observadors o al nostre procediment únic de recuperació de CS i la preexposició dels controls al CS.
Què fa el cistanche: Millora de la memòria
Paper potencial de l'escorça orbitofrontal ventral en el record de la informació adquirida socialment.
En un estudi històric, Lesburguères et al.24. van poder demostrar que, mentre que l'activitat de l'hipocamp dorsal (dHPC) era necessària per a l'adquisició i el record a curt termini d'un STFP adquirit, la memòria STFP finalment es va descarregar a l'OFC per a l'emmagatzematge a llarg termini. A més, Lesburguères et al. van poder demostrar que l'etiquetatge de neurones a l'escorça orbitofrontal durant l'adquisició de STFP és necessari per a l'emmagatzematge a llarg termini de les preferències alimentàries de transmissió social i que la interferència amb l'activitat de l'OFC després de l'adquisició perjudica la memòria 30 dies després de l'adquisició (tot i que vegeu també 38). Aquestes troballes suggeririen una comunicació entre el dHPC i l'OFC els primers dies o setmanes després de l'adquisició de STFP i la reorganització contínua de l'OFC en aquest moment per adaptar-se a l'emmagatzematge a llarg termini de la memòria STFP. Tot i que la manca de diferències generals en l'expressió d'arc OFC ventral o lateral entre demostradors, controls i observadors en aquest estudi desafiaria aquesta interpretació, vam detectar una correlació negativa significativa entre la nostra mesura combinada del rendiment global de l'aprenentatge social i les cèl·lules que expressen l'arc dual. en el COV. A més, aquesta correlació no es va observar entre una mètrica similar formada per als demostradors basada en el rendiment de la prova d'elecció i la congelació al CS. Com que la confiança en la informació adquirida socialment es pot considerar com una tria entre informació social potencialment poc fiable i els perills de l'aprenentatge mitjançant l'experiència directa, aquest paper inhibidor aparent de la veu en l'expressió de la informació adquirida socialment podria estar connectat amb el paper més ampli de l'OFC en valor. presa de decisions basada en 39–42.
Experiment de Cistanche deserticola
Diferències de sexe en la transcripció d'Arc.
diverses raons estadístiques i metodològiques. En primer lloc, la nostra mida de mostra ocasionalment baixa per a femelles, amb la mida del grup per a combinacions de sexe/condició que oscil·la entre n=2 i n=9 després de l'eliminació de rates sense prou seccions viables (encara que en particular, un n<5 was only present for female Controls in the vOFC and lOFC and female Demonstrators and Observers in the lOFC, see Table S5 for specific group sizes). Additionally, our lack of entirely undisturbed controls means that we have no way to determine whether these sex differences are the result of baseline or task-specific differences in Arc mRNA production. Finally, because the pre-in situ PFA wash was not introduced until all female sections had been processed, this difference in tissue processing might have affected the overall stain. That said, if this were the case, we might expect to see a broader and more consistent effect of sex across regions and types of Arc expression (nuclear, cytoplasmic, and dual). As it is, 18 regions/cellular areas of Arc expression combinations are examined, and only 10 display a significant overall effect of sex. Furthermore, this effect is not uniform in its direction, with males displaying greater overall Arc expression in 5 cases and females displaying greater expression in the other 5. Regardless, we feel that our findings here should serve only to inform possible future research into sex differences in Arc expression. As it is, the limitation of the current study would make drawing definitive conclusions regarding sex effects on Arc expression inappropriate. This should be kept in mind in reading the following discussion.
Tot i que hi ha hagut poca investigació sobre les diferències de sexe en l'expressió d'Arc, hi ha algunes troballes que indiquen que les rates femenines expressen més Arc en determinades regions de l'hipocamp dorsal després d'una exposició repetida a un entorn relativament enriquit43, tot i que també s'ha observat una tendència en sentit contrari. observat en rates provades sense intervenció conductual prèvia43. Els nostres resultats poden indicar que les diferències de sexe en la transcripció d'Arc estan presents després de determinades tasques o experiències generals de comportament. A la regió CG1 de l'ACC, vam trobar que els mascles, en general, tenien més cèl·lules actives en ambdós moments, possiblement a causa d'una arctranscripció de base més alta a l'ACC dels mascles o una major transcripció després de canvis de context/reexposició (gàbia domèstica → STFP). sala de proves → cambra de condicionament), ja que hi ha algunes proves, encara que limitades, del paper de l'ACC en la memòria a llarg termini de les memòries contextuals44. Les rates mascles també van mostrar un major nombre d'arcs nuclears i duals a l'ILC. Això es podria explicar pel paper de l'ILC en l'extinció i la inhibició de la por31,45,46 i les deficiències observades en la inhibició i l'extinció de la por apresa en les dones47–49. Si aquest és el cas, planteja la qüestió de per què no s'han observat diferències generals entre les nostres rates de control, observadors i demostradores si l'expressió d'arc s'estava activant per l'activitat infralímbica provocada per CS.
Les dones van mostrar nivells més alts d'expressió d'arc per a tots els recomptes del vCA3. La diferència en els recomptes nuclears podria haver estat el resultat d'una activació més gran després de l'exposició al CS o de la reexposició a la cambra de condicionament en les dones, mentre que els nivells més alts d'expressió d'arc citoplasmàtic al vCA3 després de la tasca alimentària poden indicar diferències de sexe en el paper d'Arc en el vCA3, ja sigui el reconeixement d'aliments "coneguts" (fins i tot per als observadors, l'olor seria familiar a causa de la seva interacció prèvia amb el Demostrador) o bé els processos de recompensa/consumatori generals. Aquesta femella també va mostrar un etiquetatge dual significativament més alt en el vCA3, encara que aquest efecte era petit, també podria indicar augments generalitzats en la transcripció de l'arc de vCA3 a les dones. Les rates femenines també van mostrar una transcripció d'Arc nuclear més alta al vOFC i nivells duals més alts d'ARNm d'Arc al lOFC, tot i que aquests resultats són més difícils d'interpretar a causa del baix nombre de rates de control femenines el teixit cerebral de les quals estava prou intacte per prendre recomptes d'OFC. (n=2 i 3 per a l'OFC lateral i ventral, respectivament). Les dades de les rates de control disponibles indiquen un possible augment mediat pel sexe en la producció d'ARNm d'OFC Arc, però és igual de possible que aquest efecte no persisteixi amb un n més alt. En particular, algunes investigacions anteriors han indicat diferències estructurals en l'OFC i diferències funcionals en els comportaments mediats per OFC entre rosegadors femenins i mascles50–52.
Extracte de Cistanche en pols
Possiblement, les nostres diferències sexuals més interessants en l'ARNm d'Arc es van detectar al PLC. Tere, els mascles van mostrar un nombre general més gran de cèl·lules que expressaven Arc al citoplasma i tant al citoplasma com al nucli (expressió dual) que les femelles. També vam trobar que, mentre que els demostradors i observadors masculins no van mostrar augments en la transcripció de l'arc sobre els controls en el moment del record de la por, les demostradores femenines van mostrar una transcripció d'arc nuclear significativament més alta que els controls, mentre que les observadores femenines van caure al mig entre els dos. Aquest efecte sexual pot estar motivat pels dèficits esmentats anteriorment observats en la inhibició i extinció de la por apresa que s'observen en dones de 47 a 49 anys, ja que investigacions anteriors han suggerit que el PLC està implicat de manera crítica en l'estimulació del comportament de la por45,53,54. A més, diversos estudis han implicat diferències en la senyalització i l'estructura del PLC com a possibles factors impulsors d'aquestes deficiències específiques del sexe en la inhibició i extinció de la por55–58. Tot i que no hem trobat cap diferència significativa en el comportament de congelació femení i masculí a la indicació, la regulació a l'alça de l'ARNm d'Arc en resposta a un CS associat a una por no reforçada en demostradors específicament femenins pot ser indicatiu d'una reestructuració neuronal diferencial al PLC que finalment podria conduir a diferències de sexe en l'expressió de la por.
Conclusions
Tot i que les troballes d'aquest estudi no van ampliar la nostra comprensió dels mecanismes cerebrals implicats en la recuperació de records adquirits socialment tant com esperàvem, els nostres resultats proporcionen algunes idees potencials sobre les diferències de sexe en l'expressió de l'arc, així com el paper (o manca d'aquesta) d'Arc en la memòria a llarg termini. Les nostres troballes suggereixen que, almenys a l'escorça prefrontal i vCA3, la inducció de l'activitat cerebral mitjançant el record de la informació adquirida socialment no sembla ser suficient per provocar augments de l'expressió d'arc respecte a les causades només pel procediment de prova. No obstant això, la validesa d'aquesta informació es posa en dubte pels resultats poc concloents de les nostres proves de comportament, ja que la mala retenció de la informació adquirida socialment podria ser la culpa d'aquesta manca d'efecte. Teoritzem que això podria ser perquè es desencadena una reestructuració neuronal mínima quan es produeix un record abans de la consolidació dels sistemes. Encara es garanteix una investigació addicional sobre el paper de la proteïna Arc en els processos de record d'aprenentatge social, ja que els nostres resultats de comportament no demostren l'aprenentatge social a les rates observadores. La investigació futura que examini la superposició dels mecanismes neuronals que regeixen diferents formes d'aprenentatge social també es podria beneficiar de la inclusió d'animals sotmesos a procediments d'adquisició i animals sotmesos a procediments de recordatori remot, ja que aquests punts de temps poden induir canvis de plasticitat i, per tant, canvis en l'expressió de l'arc. .
Suplement de Cistanche a prop meu-Millorant la memòria
Feu clic aquí per veure els productes Cistanche Improve Memory
【Demanar més】 Correu electrònic:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
Mètodes
Matèries. Els subjectes eren rates Sprague-Dawley mascles i femelles criades a casa al Centre de Recursos Animals de la Universitat de Texas a Austin. Set parelles reproductores van produir els subjectes de la cohort 1 (n=27 femelles, n=36 mascles) i vuit parelles reproductores van produir els subjectes de la cohort 2 (n=27 mascles, cap femella). Les femelles reproductores eren rates Sprague-Dawley (entre 215 i 260 g a l'arribada) obtingudes de Charles-Rivers (Wilmington, MA, EUA) mentre que els reproductors mascles eren rates Sprague-Dawley (entre 230 i 300 g a l'arribada) obtingudes de Harlan (ara). Envigo) (Houston, TX, EUA). Totes les rates es van allotjar amb un company de gàbia de sexe oposat fins que la femella va mostrar signes clars d'embaràs, moment en què les femelles van ser allotjades individualment. Els cadells van ser deslletats en tríades de germans del mateix sexe el dia 21 postnatal (P21) per ajudar a garantir l'aprenentatge de la por social26. Els cadells de recanvi es van deslletar en tríades o diades amb rates no relacionades i es van utilitzar en altres experiments a la Universitat de Texas a Austin. En altres experiments es van utilitzar cadells de la nostra segona cohort. Es va permetre que els cadells madurissin amb pertorbacions mínimes a part dels procediments rutinaris de cria d'animals (p. ex., canvis de gàbia) fins que van començar els procediments d'habituació (tríades femenines) o els procediments d'avaluació de la dominació (tríades masculines) (procediments de dominació i resultats detallats a Materials suplementaris). Les rates de la cohort 1 van començar els procediments entre P106 i P112 dies d'edat i les rates de la cohort 2 van començar entre els dies P99 i P118 d'edat. Tots els subjectes es van mantenir en un cicle invers fosc-llum de 12-h amb els llums apagats a les 15:00. Tots els procediments experimentals es van completar durant el cicle fosc dels subjectes sota llum vermella. Totes les parts d'aquest experiment es van dur a terme d'acord amb la Guia dels Instituts Nacionals de Salut per a la cura i l'ús d'animals experimentals i es van aprovar per al seu ús pel Comitè d'ús i cura dels animals de la Universitat de Texas a Austin.
Aparell i estímuls. Condicionament de la por. Tots els procediments de condicionament de la por i condicionament de la por es van completar en cambres de condicionament estàndard (30,48 cm × 25,4 cm × 30,48 cm) construïdes amb parets de plexiglàs transparent a la part davantera i posterior, dues parets d'acer al costat i un sostre de plexiglàs amb un forat al centre. El sòl de la cambra era una filera de barres d'acer inoxidable connectades a un generador de xoc (Coulbourn Instruments, Allentown, PA). Totes les cambres estaven tancades en caixes d'aïllament acústic (Coulbourn Instruments) i il·luminades amb una llum vermella interna. El comportament es va registrar mitjançant càmeres de circuit tancat (Panasonic™ WV-BP334) muntades per sobre de les cambres de condicionament amb la lent inserida a través del forat del sostre de plexiglàs. Les cambres es van netejar completament amb una solució d'alcohol al 70 per cent entre cada subjecte. Tot el lliurament d'estímuls es va controlar mitjançant el programari Freeze Frame (Coulbourn Instruments). El CS era una pedra de 20 (5 kHz, 80 dB) i, en procediments amb múltiples presentacions de CS, un interval variable entre assaigs (ITI) amb una mitjana de 180 s. L'estímul no condicionat (EUA) va ser un xoc d'1 mA que va tenir una durada de 500 ms i es va acabar conjuntament amb l'estímul condicionat.
Transmissió social de la preferència alimentària. Tots els procediments STFP van tenir lloc en una sala adjacent a la sala que contenia les cambres de condicionament. Les noves dietes es van compondre barrejant 100 g de pols de rosegadors Purina 5LL2 amb 1 g de canyella mòlta McCormick (dieta Cin) o 2 g de cacau en pols Hershey (dieta Co). La dieta senzilla, que es va donar a totes les rates durant el període de restricció d'aliments i a les rates de control el dia final dels procediments experimentals, va ser un menjar de rosegadors Purina 5LL2 en pols sense adulterar. Tots els chows en pols, tant durant els procediments de restricció d'aliments com els experimentals, es van presentar en tasses de menjar penjants que es van construir a partir de 4 oz. pots de vidre i 12-filferro d'acer de calibre. Les tasses de menjar es van esbandir i després es van netejar amb una solució d'etanol al 70 per cent abans de rentar-se a fons amb aigua i sabó entre cada ús. Totes les fases consumatòries dels procediments experimentals STFP van tenir lloc en gàbies de rates estàndard (26, 7 cm × 48, 3 cm × 20, 3 cm), i cada rata va rebre una gàbia fresca. La fase d'interacció (fase d'adquisició de STFP) va tenir lloc en un contenidor de plàstic gran (50,5 cm × 39,4 cm × 37,5 cm) amb un llit de terra d'estella de fusta que es va substituir entre tots els grups. Els contenidors de plàstic es van netejar a fons amb Windex entre cada sessió.
Visió general del disseny experimental i dels procediments d'aprenentatge social.
(Vegeu la figura 2 per a una visió general gràfica).
Totes les rates estaven restringides durant cinc dies i estaven habituades a la manipulació i a la sala on tindrien lloc els procediments STFP durant quatre dies immediatament abans del dia 1 dels procediments experimentals. Tot i que els procediments d'habituació van acabar abans del dia 1 dels procediments experimentals, la restricció alimentària va continuar fins al final de l'experiment. Es va assignar una rata de cada tríada a una de les tres condicions: demostrador, observador o control. Les tríades masculines de la cohort 2 havien estat avaluades pel seu domini i totes mostraven una jerarquia clara i es van assignar de manera que la rata dominant era el Demostrador i un subordinat era l'Observador per millorar la transmissió social de la por13. Les tríades individuals es van subdividir aleatòriament en grups on el Demostrador i l'Observador rebrien una prova d'elecció en el record STFP (Elecció) i grups on només rebrien el menjar demostrat (Cin).
El dia 1 del procediment experimental, les rates assignades a la condició de demostrador es van traslladar a cambres de condicionament de por i es van deixar habituar-se durant 10 minuts abans d'estar exposades a 3 CS que van acabar amb un xoc dolorós (vegeu "Aparell i estímuls" per a especificitats). Després dels procediments de condicionament de la por, els demostradors van ser traslladats de nou a la seva gàbia original. El dia 2 dels procediments experimentals, 24 hores després del condicionament de la por, els demostradors van ser retornats a les cambres de condicionament amb el seu company de gàbia assignat a la condició d'observador i es van sotmetre al procediment FCbP (Fig. 2). Immediatament després del procediment FCbP, les rates Observer van ser retornades a la seva gàbia de casa mentre que els demostradors es van traslladar a una habitació adjacent i se'ls va donar 1 h per consumir pols de menjar amb aroma de canyella. Després d'haver passat una hora, els observadors van ser traslladats a un contenidor d'interacció amb els seus manifestants i es va permetre interactuar amb ells durant 30 minuts per permetre l'adquisició d'una preferència alimentària de transmissió social. Investigacions prèvies del nostre laboratori han validat aquests punts de temps com a suficients per a la transmissió STFP33. Després, les rates observadores van ser retornades a la seva gàbia domèstica mentre que les rates demostradores es van traslladar a un habitatge únic per evitar la transmissió STFP a l'observador o al control. El dia 3 dels procediments experimentals, les rates de control es van traslladar soles a les cambres de condicionament i, després de 10 minuts d'habituació a la cambra, es van presentar tres CS de 20 s sense xoc acompanyant. Això es va fer un dia a part per minimitzar la possibilitat que les feromones d'alarma persistents, que se sap que són alliberades per rates en resposta a estímuls amenaçadors i afecten l'aprenentatge conespecífic59, encara estiguin presents a la cambra.
El dia final de l'experiment, el dia 4, es va iniciar un recordatori tant de la preferència alimentària transmesa socialment com dels records de condicionament de la por/condicionament de la por. A tots els observadors i demostradors de les tríades assignades a la condició d'elecció se'ls va permetre un accés ad libitum de 10 minuts tant a les dietes afavorides per la canyella com al cacau, mentre que els observadors i els demostradors de les tríades assignades a la condició Cin van tenir accés ad libitum de 10 minuts a la dieta de canyella. només. En totes les tríades, a les rates de control se'ls va donar accés ad libitum de 10 minuts a un menjar en pols normal. Immediatament després d'això, les rates van ser retornades a la seva gàbia de casa i es van deixar sense molèsties durant un període de 10-min abans de ser traslladades de nou a l'espai del laboratori i col·locades a les cambres de condicionament. A totes les rates se'ls va donar un període d'habituació de 3-min a la cambra abans de presentar-se amb un sol CS de 20 s. 5 minuts després del final del CS, totes les rates van ser sacrificades mitjançant la injecció d'una solució de pentobarbital i fenitoïna (Euthasol; Virbac Animal Health) i perfusades. Els seus cervells van ser processats més tard per a l'expressió d'ARNm d'Arc. Tenint en compte el transcurs del temps del nostre procediment terminal i el període de migració conegut de l'ARNm d'Arc28, l'augment de l'expressió citoplasmàtica de l'ARNm d'Arc es deuria als procediments de record STFP, mentre que l'expressió nuclear es deuria als procediments de record FC/FCbP, amb cèl·lules que mostren una activació dual. s'ha activat en ambdós períodes de temps (vegeu la figura 1; també vegeu "Anàlisi de teixits" per obtenir detalls sobre el tractament i processament de teixits).
Cistanche vivent del desert
Procediments.
Habituació i restricció alimentària. Tota l'habituació va tenir lloc just abans del primer dia de procediments experimentals. L'habituació va consistir en traslladar cada gàbia de rates a l'habitació on es portarien a terme tots els procediments experimentals STFP i que es permetés habituar-se a l'habitació durant 15 min. Durant aquest període, cada rata va ser recollida i manipulada per l'experimentador que tindria un comportament durant 2 minuts per habituar-los a la manipulació i a aquest individu. Tots els procediments d'habituació van tenir lloc en una habitació fosca sota llum vermella i totes les rates van rebre 4 dies d'habituació. La restricció alimentària va començar el dia abans de començar l'habituació i va persistir fins al final de l'experiment. Al començament de la restricció d'aliments, es van treure de la gàbia els pellets d'aliments que havien estat menjant tots els subjectes. Posteriorment, a totes les gàbies se'ls va donar accés diari ad libitum a un pot penjat ple de dieta pura i en pols de Purina 5LL2 a la seva gàbia domèstica durant 1 h. Les rates es van pesar diàriament a partir de l'inici de la restricció alimentària fins que l'experiment va acabar per assegurar-se que no hi hagués una pèrdua de pes inusual.
Puntuació conductual.
Tota la puntuació del comportament d'aquest experiment es va completar mitjançant el programari interactiu de recerca d'observació conductual (BORIS)60.
La por condicionant la puntuació de contacte social per intermediari. Les investigacions anteriors del nostre laboratori han indicat que hi ha una forta relació entre la quantitat de por que mostren els observadors a la prova de memòria a llarg termini i el temps dedicat a interactuar amb el seu Demostrador durant el CS en homes13 i després del CS en dones14,26. Com a tal, es van puntuar els vídeos de la fase d'adquisició social del condicionament de la por per proxy per a la interacció social entre l'observador i el demostrador per a cada període 20- durant la presentació de CS i el període 20- immediatament posterior a cada un. Presentació CS per proporcionar un índex secundari de l'adquisició de la por. El contacte social es va puntuar quan les rates observadores i demostradores van fer un contacte que no fos de passada durant el període d'indicació (durant el contacte CS) o en els 20 s següents al CS (contacte posterior al CS). Es va calcular el percentatge de cada període de puntuació passat en contacte amb el Demostrador. Les dades del percentatge de contacte durant el període d'indicació per als homes i les dades del percentatge de contacte immediatament després del període d'indicació per a les dones es van extreure i es van combinar en una única mesura de "contacte rellevant" per utilitzar-la en totes les anàlisis estadístiques finals.
Puntuació de la prova d'elecció. Els vídeos de la prova d'elecció per iniciar un record d'una preferència alimentària de transmissió social es van puntuar per la quantitat de temps que una rata donada va passar interactuant amb una tassa de menjar en funció de si contenia la dieta demostrada/ja consumida (dieta Cin) o la novel·la. dieta (dieta Co). Això es va fer com a mesura secundària potencial de la preferència alimentària, ja que preveiem que, a causa que la prova d'elecció era anormalment curta (10 min) per necessitat, potser no podríem detectar preferències en funció de la quantitat menjada sols. La interacció amb la tassa de menjar es va puntuar sempre que una rata estava físicament en contacte amb la tassa i no s'allunyava activament de la tassa (és a dir, les potes davanteres en contacte amb el pot, el cap dins del pot, pujar a la part superior del pot o menjar activament). del pot). Per a l'anàlisi estadística, hem calculat el percentatge de temps dedicat a interactuar amb una tassa que conté una dieta determinada en funció de la quantitat total de temps dedicat a interactuar amb qualsevol de les tasses (p. ex., per a la dieta Cin, Percentatge de temps= TimeDiet Cin/ (TimeDiet) Co més TimeDiet Cin)). La sessió de prova d'elecció completa de 10-min es va puntuar per a totes les rates que s'hi van sotmetre.
Anàlisi de teixits.
Per minimitzar la degradació de l'ARNm per la ribonucleasa (RNasa), tots els equips i superfícies utilitzats durant la preparació i processament del cervell es van desinfectar regularment amb RNase AWAY™ (Termo Scientity; Waltham, MA, EUA) o RNAseZap™ (Ambion; Grand Island, NY). , EUA).
Preparació del cervell. Immediatament després de l'eutanàsia, els subjectes van ser perfusos intracardialment amb una solució de paraformaldehid (PFA) al 4%. A continuació, es van eliminar els cervells i es van submergir en un 4% de PFA per permetre la fixació posterior durant 24-48 h. Un cop completada la post-fixació, els cervells es van transferir a una solució de sacarosa al 30% en solució salina tamponada amb fosfat per a la crioprotecció. Un cop els cervells s'havien enfonsat al fons del vial, cosa que indicava una captació suficient de sacarosa per a la crioprotecció, es van congelar ràpidament en gel sec en pols i es van traslladar a un congelador de -80 graus per emmagatzemar-los fins a la secció. A continuació, es van seccionar els cervells coronalment en un micròtom lliscant a 30 µm de gruix en sis sèries (així que les seccions posteriors en una sola sèrie estaven separades de 180 µm) i immediatament es van muntar i es van deixar assecar a l'aire abans de ser col·locats en una cambra de buit amb esponges d'humitat on estaven. deixar assecar completament durant 24 h. Només es van seccionar i processar les seccions de l'hipocamp (aproximadament -3,2 a -5,2 del bregma) o regions prefrontals (aproximadament més 3,7 a més 1,4 del bregma) que contenien les àrees d'interès. A continuació, es van col·locar les seccions muntades en una caixa de diapositives segellada sense RNasa i es van emmagatzemar a -80 graus fins al processament.
Processament de teixits. Tots els procediments es van modificar a partir dels protocols utilitzats a Lee et al.61 i Petrovich et al.62. Abans del processament de teixits, es va construir una sonda d'ARNc per a l'ARNm d'Arc començant amb un plasmidi que contenia un ADNc de longitud completa (~3.0 kbp) de la transcripció d'Arc. Per crear la sonda, primer es va tallar l'ADN barrejant el plasmidi amb un tampó de digestió de 10 × (NEBufer; Biolabs; Ipswich, MA, EUA), un enzim de restricció EcoRI de 10 × (Biolabs) i aigua purificada sense nucleases abans de ser incubat a 37 graus durant 2 h. Es va verificar el tall correcte de l'ADN mitjançant electroforesi, després de la qual cosa es va purificar l'ADN durant la nit en etanol. Després de la purificació, el pellet d'ADN es va escindir en una centrífuga, es va rentar amb EtOH, es va assecar completament i es va tornar a suspendre en un tampó TE. Per verificar que l'ADN estava correctament linealitzat, calcular la concentració d'arc i comprovar que no hi havia contaminants, es va provar una mostra de l'ADN mitjançant espectrofotometria (Nanodrop Lite; Thermo Scientific, Waltham, MA, EUA). La sonda marcada amb Digoxigenina (DIG) es va transcriure combinant l'ADN linealitzat amb aigua lliure de RNasa, un tampó de transcripció de 10 × (Ambion), bloc de RNAsa (Ambion), barreja d'etiquetatge d'ARN DIG (Roche Applied Science; Indianapolis, IN, EUA) , i una ARN polimerasa T7 (Ambion) abans d'incubar la solució a 37 graus durant 2 h. Finalment, la sonda es va diluir en aigua sense nucleases i es va purificar en una mini columna Quick-Spin (Roche).
Un cop construïda la sonda d'ARNc, les diapositives que contenien teixit de les rates mascles es van submergir durant 40 min en una solució de PFA al 4% per augmentar la integritat del teixit durant el processament in situ. El teixit de rates femelles es va processar sense aquest rentat de PFA. A continuació, es van rentar les diapositives i es van incubar en un tampó de proteïnasa K (PK) a 37 graus abans de ser tractades amb una solució d'anhídrid acètic al 0, 5 per cent / 1, 5 per cent de solució de trietanolamina que contenia àcid acètic glacial per a la permeabilització. A continuació, es van rentar les diapositives en un tampó de citrat de sodi salí (SSC) abans de ser deshidratades per submersió en concentracions ascendents d'etanol i assecar-les a l'aire. Finalment, cada diapositiva es va cobrir amb 300 µl d'un tampó d'hibridació que contenia ARNt de llevat (Invitrogen; Carlsbad, CA, EUA), DNA d'esperma de salmó (Ambion), ditiotreitol (Sigma; St. Louis, MO, EUA) i la sonda d'ARNc. (1:100). A continuació, cada diapositiva es va tapar i segellar al voltant de les vores amb un muntant DPX (Electron Microscopy Sciences; Hatfield, PA, EUA) abans de ser incubada a la solució d'hibridació durant 20 h a 60 graus. En particular, el cobertor va protegir el teixit de qualsevol contacte directe amb el muntant DPX, de manera que l'eliminació posterior del DPX endurit no va causar danys al teixit.
Un cop completada la hibridació, es van retirar amb cura els cobreobjectes i es van incubar els portaobjectes en un tampó 4xSSC barrejat amb tiosulfat de sodi (ST) a 60 graus durant una hora abans de ser tractats amb una solució a base d'àcid etilendiaminotetraacètic per inhibir l'activitat de la RNAsa a 37ºC. Després d'això, es van rentar les diapositives en concentracions descendents de solució SSC barrejada amb ST de nou a 60 graus. A continuació, es va rentar el teixit en una solució detergent (Tween20) abans de ser tenyit amb el sistema de fluoresceïna PerkinElmer TSA (NEL701001KT; PerkinElmer, Waltham, MA, EUA). Les diapositives es van col·locar en una cambra humida i es van tractar amb un tampó de bloqueig seguit d'un conjugat anti-DIG-HRP durant 2 h. A continuació, es van rentar breument les diapositives amb la solució de detergent abans de tornar-les a una cambra humida fosca i es van recobrir amb una solució que contenia reactiu de tiramida de fluoresceïna (FITC) i es van deixar reposar durant 30 min. Finalment, es van rentar les diapositives, es van deixar assecar a l'aire i es van col·locar amb un muntant que contenia la taca nuclear 4′,6-diamidino{-2-fenilinodol (DAPI) (Vectashield; Vector Lab, Burlingame, CA, EUA) . Les diapositives es van emmagatzemar a la foscor a -20 graus fins a la imatge.
Imatge. Totes les imatges es van completar amb un microscopi Axio Scope A1 (Zeiss; Tornwood, NY, EUA). Les regions d'interès es van identificar mitjançant la tinció DAPI mitjançant un objectiu d'10x amb l'ajuda de l'atles cerebral Paxinos i Watson63 i després es van fer imatges amb un objectiu de 40 × (ampliació real ~ 900 ×). Les imatges es van prendre tant per a les taques DAPI com per a FITC i posteriorment es van acolorir i es van fusionar automàticament mitjançant una macro personalitzada al programari ImageJ amb FIJI (NIH, Bethesda, MD). A causa de la degradació del teixit in situ, no totes les seccions o àrees d'interès potencial eren viables. Com a tal, les imatges no es van poder apilar de manera fiable i, en canvi, es van prendre en un sol pla. Es van fer imatges i es van comptar les regions següents: l'escorça prelímbica (més 3,72 a més 2,52 del bregma), l'escorça infralímbica (més 3,52 a més 2,2 del bregma), la lateral (més 3,72 a més 3,2 del bregma) i ventral (més 3,72). a més 3,0 del bregma) escorça orbitofrontal, la regió CG1 de l'escorça cingulada anterior (més 3,72 a més 2,52 del bregma) i la regió CA3 de l'hipocamp ventral (-4,3 a -4,8 del bregma) (Fig. S6). Tot i que els nuclis amígdalars també tenien un interès particular pel seu paper ben establert en l'aprenentatge de la por, el dany tissular esmentat tendeix a ser especialment greu en aquesta àrea. Com a tal, no vam poder obtenir una mida de mostra prou gran per incloure aquesta regió (es requeria un mínim de 6 imatges/regió viables perquè s'inclogués una rata a l'anàlisi estadística d'una àrea determinada).
Els recomptes es van completar regió per regió i a tots els fitxers d'imatge se'ls va assignar un codi numèric aleatori per cegar l'experimentador que completava els recomptes a partir de qualsevol detall relacionat amb la imatge en el moment del recompte. Tots els recomptes de cèl·lules es van fer a ImageJ amb el paquet FIJI i es van fer mitjançant l'eina de recompte de cèl·lules. Es van comptar les cèl·lules per a l'expressió d'ARNm d'Arc nuclear i citoplasmàtic per separat i les cèl·lules que mostraven una expressió superposada es van comptar com a expressió dual. Els recomptes finals per a les cèl·lules que expressaven l'arc nuclear i les cèl·lules que expressaven l'arc citoplasmàtic només incloïen aquelles cèl·lules que s'expressaven només en aquesta regió (és a dir, no incloïen cèl·lules d'expressió dual). Es van fer recomptes complets de cèl·lules tenyides amb DAPI i es va calcular el percentatge de cèl·lules que mostraven expressió a cada àrea determinada seguit del percentatge mitjà de cèl·lules que mostraven cada tipus d'activació en rates individuals. Per evitar que les puntuacions de rates amb un nombre més gran d'imatges tinguin un efecte desproporcionat en les nostres estadístiques i per evitar una inflació de la mida de la mostra, només es van utilitzar aquestes mitjanes en la nostra anàlisi final.
Visió general de l'anàlisi estadística. Totes les anàlisis estadístiques es van completar mitjançant el programari de codificació R. El codi complet es pot veure gratuïtament al nostre dipòsit de dades a https://dataverse.tdl.org/dataverse/MonflsFearMemoryLab. Llevat que s'indiqui el contrari, el tall perquè una prova es considerés estadísticament significativa es va establir a p<0.05. All of our Arc results, unless otherwise mentioned, were tested for significance using a series of two-way ANOVAs (type 2) containing sex and condition as between-subject variables (Sex and Condition) with an individual ANOVAs run for each area of expression (nucleus, cytoplasm, and dual). Similarly, a series of one-way ANOVAs were run with a combined variable containing the food task (diet Cin only or Choice test for Demonstrators and Observers; plain chow only for all Controls) for each area of expression. Sex was not included as a secondary variable as the relatively low number of female rats made sample sizes too small for certain condition/food task combinations. When ANOVA assumptions were violated, data were transformed using either a log(y+1) function or by taking the inverse square root. As these transforms did not always succeed in bringing ANOVAs in line with assumptions, Kruskal-Wallace tests were performed on datasets where transforms were not effective. Pairwise t-tests were performed for posthoc analyses against a Bonferroni-corrected alpha value when ANOVAs indicated a significant effect of condition (α=0.017) or a significant sex and condition interaction (α=0.008; conditions tested against each other within each sex-only) with between-group effect sizes calculated using Cohen's d. To provide a better gauge of variability for our smaller group sizes, the MSError obtained from our ANOVA was used in the denominator of post hoc t-tests. Effect sizes for ANOVAs were calculated using the standard partial η2 formula and for Kruskal-Wallace tests using the formula η2 H =(H − k+1)/(n – k). For simplicity of data presentation, unless the addition of the food task grouping variable resulted in a significant effect or unless a significant contribution of sex was detected all data were presented graphically split up by area of expression and overall experimental condition only. Any rats that had fewer than 6 viable images counted in a given brain region were excluded from the analysis for that area.
Es van calcular correlacions bivariades per a les rates Observador i Demostrador per avaluar les possibles relacions entre les mesures de comportament i el recompte de cèl·lules d'Arc per a l'expressió en els moments adequats (p. Els coeficients de correlació de Pearson es van utilitzar si no es va detectar cap valor atípic en cap conjunt de dades amb una prova de Grubbs. Si es detectaven valors atípics, es va utilitzar el coeficient de correlació de Spearman. Per avaluar si una relació entre l'aprenentatge social i l'Arc en cèl·lules d'expressió dual a Observers, es va calcular una mètrica global de l'aprenentatge social, a partir d'ara com a mètrica d'aprenentatge social (SLM), prenent la mitjana de les puntuacions estandarditzades ( z-score) per al percentatge del total menjat que va ser l'aliment demostrat i el percentatge de temps passat en contacte amb el Demostrador durant la fase d'aprenentatge social de FCbP durant la presentació de CS (mascles) o després de la presentació de CS (dones). Notablement, el percentatge de congelació de la senyal l'últim dia no es va utilitzar per a les rates observadores perquè els nostres resultats i els resultats del nostre experiment de seguiment (vegeu Materials suplementaris) van indicar que les condicions del nostre procediment de prova de comportament van donar lloc a un comportament de congelació fins i tot en Controla les rates, almenys en els mascles, i, com a tal, potser no és el millor indicador de la força de la resposta de la por adquirida socialment. Com a tal, tenint en compte les nostres troballes anteriors que les interaccions amb el Demostrador durant o després del CS (segons el sexe) preveien altament la congelació posterior a la indicació12–14, es va provar la interacció amb el Demostrador en el moment adequat per al sexe per a les correlacions amb l'activitat de l'Arc nuclear. en comptes de congelar-se al moment de l'últim dia per a les rates Observer. Per als demostradors, es va calcular una mètrica similar basant-se en la congelació estandarditzada de la indicació de l'últim dia i el percentatge del total menjat que era la dieta familiar (Diet Cin) i es va comprovar amb l'activitat de l'Arc dual. Per corregir les múltiples proves executades a cada conjunt de dades de comportament (6, per a cada regió del cervell), el valor p crític per a les correlacions va ser Bonferroni ajustat a 0.0083.
Referències
1. Dawson, G., Meltzof, AN, Osterling, J., Rinaldi, J. i Brown, E. Els nens amb autisme no s'orienten cap als estímuls socials naturals. J. Autisme Dev. Desordre. 28, 479–485 (1998).
2. Zeeland, AAS-V., Dapretto, M., Ghahremani, DG, Poldrack, RA & Bookheimer, SY Processament de recompenses en l'autisme. Autisme Res.
3, 53–67 (2010). 3. Chevallier, C., Kohls, G., Troiani, V., Brodkin, ES & Schultz, RT La teoria de la motivació social de l'autisme. Tendències Cogn. Ciència. 16, 231–239 (2012).
4. Öst, L.-G. Formes d'adquirir fòbies i resultat dels tractaments conductuals. Comportament. Res. Ter. 23, 683–689 (1985).
5. Ollendick, TH i King, NJ Orígens de les pors infantils: una avaluació de la teoria de Rachman de l'adquisició de la por. Comportament. Res. Ter. 29, 117–123 (1991).
6. Merckelbach, H., Arntz, A. i de Jong, P. Condicionament d'experiències en aranya fòbica. Comportament. Res. Ter. 29, 333–335 (1991).
7. Jeon, D. et al. L'aprenentatge observacional de la por implica un sistema de dolor defectuós i canals Cav1.2 Ca2 més a l'ACC. Nat. Neurosci. 13, 482–488 (2010).
8. Yusufshaq, S. i Rosenkranz, JA L'aïllament social posterior al deslletament afecta el condicionament observacional de la por. Comportament. Cervell Res. 242, 142–149 (2013).
9. Kavaliers, M., Choleris, E. i Colwell, DD Aprendre dels altres per fer front a les mosques que mosseguen: aprenentatge social de l'analgèsia condicionada induïda per la por i l'evitació activa. Comportament. Neurosci. 115, 661–674 (2001).
10. Kavaliers, M., Colwell, DD i Choleris, E. Aprendre a témer i fer front a un estrès natural: corticosterona adquirida individualment i socialment i respostes d'evitació a les mosques que mosseguen. Horm. Comportament. 43, 99–107 (2003).
11. Kavaliers, M., Colwell, DD i Choleris, E. El parentiu, la familiaritat i l'estatus social modulen l'aprenentatge social sobre "micropredadors" (mosques que mosseguen) en ratolins de cérvol. Comportament. Ecol. Sociobiol. 58, 60–71 (2005).
12. Bruchey, AK, Jones, CE i Monfls, M.-H. Condicionament de la por per proxy: transmissió social de la por durant la recuperació de la memòria. Comportament. Cervell Res. 214, 80–84 (2010).
13. Jones, CE i Monfls, M.-H. L'estat de domini prediu la transmissió de la por social a les rates de laboratori. Anim. Cogn. 19, 1051–1069 (2016).
14. Agee, LA, Jones, CE i Monfls, M.-H. Diferents efectes de la familiaritat/parentesc en la transmissió social de les associacions de por i les preferències alimentàries en rates. Anim. Cogn. 22, 1013–1026 (2019).
15. Mitchell, CJ, Heyes, CM, Gardner, MR i Dawson, GR Limitacions d'un procediment de control bidireccional per a la investigació de la imitació en rates: senyals d'olor al manipulandum. QJ Exp. Psic. B 52, 193–202 (1999).
16. Galef, BG i Wigmore, SW Transferència d'informació sobre aliments distants: una investigació de laboratori de la hipòtesi del "centre d'informació". Anim. Comportament. 31, 748–758 (1983).
17. Galef, BG, Mason, JR, Preti, G. & Bean, NJ Disulfur de carboni: una elecció de dieta induïda socialment per mediació semioquímica en rates. Physiol. Comportament. 42, 119–124 (1988).
18. Galef, BG Un cas pràctic en anàlisi conductual, síntesi i atenció al detall: Aprenentatge social de les preferències alimentàries. Comportament. Cervell Res. 231, 266–271 (2012).
19. Posadas-Andrews, A. & Roper, TJ Transmissió social de les preferències alimentàries en rates adultes. Anim. Comportament. 31, 265–271 (1983).
20. Countryman, RA, Orlowski, JD, Brightwell, JJ, Oskowitz, AZ i Colombo, PJ Fosforilació de CREB i expressió de c-Fos a l'hipocamp de rates durant l'adquisició i el record d'una preferència alimentària de transmissió social. Hipocamp 15, 56–67 (2005).
21. Boix-Trelis, N., Vale-Martínez, A., Guillazo-Blanch, G., Costa-Miserachs, D. & Martí-Nicolovius, M. Effects of nucleus basalis magnocellularis stimulation on a socially transmitted food preference and c -Fos expressió. Aprèn. Mem. 13, 783–793 (2006).
22. Ross, RS i Eichenbaum, H. Dinàmica de l'activació de l'hipocamp i cortical durant la consolidació d'una memòria no espacial. J. Neurosci. 26, 4852–4859 (2006).
23. Smith, CA, Countryman, RA, Sahuque, LL i Colombo, PJ Curs temporals d'expressió de Fos a l'hipocamp i el neocòrtex de rata després de l'adquisició i el record d'una preferència alimentària de transmissió social. Neurobiol. Aprèn. Mem. 88, 65–74 (2007).
24. Lesburguères, E. et al. L'etiquetatge precoç de les xarxes corticals és necessari per a la formació de memòria associativa duradora. Science 331, 924–928 (2011).
25. Knapska, E. et al. La transferència d'informació emocional entre subjectes evoca patrons específics d'activació de l'amígdala. Proc. Natl. Acad. Ciència. 103, 3858–3862 (2006).
26. Jones, CE, Riha, PD, Gore, AC & Monfls, M.-H. Transmissió social de la por pavloviana: condicionament de la por per proxy en rates femelles relacionades. Anim. Cogn. 17, 827–834 (2014). 27. Twining, RC, Vantrease, JE, Love, S., Padival, M. & Rosenkranz, JA Un circuit intraamígdala regula específicament l'aprenentatge de la por social. Nat. Neurosci. 20, 459–469 (2017).
28. Olsson, A., Knapska, E. & Lindström, B. Te neural and computational systems of social learning. Nat. Reverent Neurosci. 21, 197–212 (2020).
29. Guzowski, JF, McNaughton, BL, Barnes, CA i Worley, PF Expressió específica del medi ambient del gen Arc immediat i primerenc en conjunts neuronals de l'hipocamp. Nat. Neurosci. 2, 1120–1124 (1999).
30. Kim, JJ & Jung, MW Circuits neuronals i mecanismes implicats en el condicionament de la por de Pavlovià: una revisió crítica. Neurosci. Comportament biològic. Rev. 30, 188–202 (2006).
31. Laurent, V. & Westbrook, RF La inactivació de l'escorça infralímbica però no de l'escorça prelímbica perjudica la consolidació i la recuperació de l'extinció de la por. Aprèn. Mem. 16, 520–529 (2009).
32. Tovote, P., Fadok, JP & Lüthi, A. Neuronal circuits for fear and anxiety. Nat. Reverent Neurosci. 16, 317–331 (2015).
33. Agee, LA & Monfls, M.-H. Efecte de la fiabilitat del demostrador i la recentitat de l'última demostració sobre l'adquisició d'una preferència alimentària de transmissió social. R. Soc. Obre Sci. 5, 172391 (2018).
34. Nikolaienko, O., Patil, S., Eriksen, MS i Bramham, CR Proteïna Arc: un centre flexible per a la plasticitat i la cognició sinàptica. Semin. Desenvolupament cel·lular Biol. 77, 33–42 (2018).
35. Chia, C. & Otto, T. Hippocampal Arc (Arg3.1) expressió és induïda per la memòria i es requereix per a la reconsolidació de la memòria en el condicionament de la por traça. Neurobiol. Aprèn. Mem. 106, 48–55 (2013).
36. Pilarzyk, K. et al. La pèrdua de funció de la fosfodiesterasa 11A4 mostra que les memòries a llarg termini recents i remotes es poden desacoblar. Curr. Biol. 29, 2307-2321.e5 (2019).
37. Jones, CE Te Transmissió social de la por associativa en rosegadors: diferències individuals en el condicionament de la por per proxy Vol. 17 (Springer, 2021).
38. Smith, CA, East, BS i Colombo, PJ L'escorça orbitofrontal no és necessària per a l'adquisició o el record remot de les preferències alimentàries transmeses socialment. Comportament. Cervell Res. 208, 243–249 (2010).
39. Rudebeck, PH, Walton, ME, Smyth, AN, Bannerman, DM i Rushworth, MFS Les vies neuronals separades processen diferents costos de decisió. Nat. Neurosci. 9, 1161–1168 (2006).
40. Rolls, ET i Grabenhorst, F. Te orbitofrontal cortex and beyond: From affect to decision-making. Prog. Neurobiol. 86, 216–244 (2008).
41. Wallis, JD Estudis entre espècies de còrtex orbitofrontal i presa de decisions basada en valors. Nat. Neurosci. 15, 13–19 (2012).
42. Izquierdo, A. Heterogeneïtat funcional dins de l'escorça orbitofrontal de rata en l'aprenentatge de recompensa i la presa de decisions. J. Neurosci. 37, 10529–10540 (2017).
43. Randesi, M. et al. Diferències de sexe després de l'estrès crònic en l'expressió de gens relacionats amb els opioides, l'estrès i la neuroplasticitat a l'hipocamp de la rata. Neurobiol. Estrès 8, 33–41 (2018).
44. Maren, S., Phan, KL i Liberzon, I. El cervell contextual: implicacions per al condicionament de la por, l'extinció i la psicopatologia. Nat. Reverent Neurosci. 14, 417–428 (2013).
45. Vidal-Gonzalez, I., Vidal-Gonzalez, B., Rauch, SL i Quirk, GJ La microestimulació revela influències oposades de l'escorça prelímbica i infralímbica sobre l'expressió de la por condicionada. Aprèn. Mem. 13, 728–733 (2006).
46. Sierra-Mercado, D., Padilla-Coreano, N. & Quirk, GJ Rols dissociables de les escorces prelímbiques i infralímbiques, l'hipocamp ventral i l'amígdala basolateral en l'expressió i extinció de la por condicionada. Neuropsicofarmacologia 36, 529–538 (2011).
47. Baran, SE, Armstrong, CE, Niren, DC, Hanna, JJ i Conrad, CD Estrès crònic i diferències de sexe en el record del condicionament i l'extinció de la por. Neurobiol. Aprèn. Mem. 91, 323–332 (2009).
48. Greiner, EM, Müller, I., Norris, MR, Ng, KH i Sangha, S. Diferències de sexe en la regulació de la por i els comportaments de recerca de recompensa en una tasca de discriminació de por-seguretat-recompensa. Comportament. Cervell Res. 368, 111903 (2019).
49. Day, HLL i Stevenson, CW La base neurobiològica de les diferències de sexe en la por apresa i la seva inhibició. Eur. J. Neurosci. 52, 2466–2486 (2020).
50. van Hasselt, FN et al. Les variacions individuals en l'atenció materna a principis de la vida es correlacionen amb la presa de decisions posteriors i l'expressió c-fos a les subregions prefrontals de les rates. PLoS ONE 7, e37820 (2012).
51. Bayless, DW i Daniel, JM Diferències de sexe en els nivells de proteïnes associades a la mielina dins i la densitat de les projeccions entre l'escorça frontal orbital i l'estriat dorsal de rates adultes: implicacions per al control inhibitori. Neuroscience 300, 286–296 (2015).
52. Orsini, CA i Setlow, B. Diferències de sexe en models animals de presa de decisions. J. Neurosci. Res. 95, 260–269 (2017).
53. Corcoran, KA & Quirk, GJ L'activitat a l'escorça prelímbica és necessària per a l'expressió del apresos, però no innat. Pors. J. Neurosci. 27, 840–844 (2007).
54. Burgos-Robles, A., Vidal-Gonzalez, I. & Quirk, GJ Les respostes condicionades sostingudes a les neurones prefrontals prelímbiques es correlacionen amb l'expressió de la por i el fracàs d'extinció. J. Neurosci. 29, 8474–8482 (2009).
55. Fenton, GE et al. L'activitat persistent de l'escorça prelímbica contribueix a millorar l'expressió de la por apresa en les dones. Aprèn. Mem. 21, 55–60 (2014).
56. Fenton, GE, Halliday, DM, Mason, R., Bredy, TW i Stevenson, CW Les diferències de sexe en l'expressió i extinció de la por apreses impliquen oscil·lacions gamma alterades a l'escorça prefrontal medial. Neurobiol. Aprèn. Mem. 135, 66–72 (2016).
57. Kirry, AJ et al. La senyalització del polipèptid activador de l'adenilat ciclasa pituïtària (PACAP) a l'escorça prefrontal modula l'aprenentatge de la por, però no la memòria de treball espacial, en rates femelles. Neurofarmacologia 133, 145–154 (2018).
58. Day, HLL, Suwansawang, S., Halliday, DM i Stevenson, CW Les diferències de sexe en la discriminació de la por auditiva s'associen amb la funció alterada de l'escorça prefrontal medial. Ciència. Rep. 10, 6300 (2020).
59. Kikusui, T., Takigami, S., Takeuchi, Y. i Mori, Y. La feromona d'alarma millora la hipertèrmia induïda per l'estrès en rates. Physiol. Comportament. 72, 45–50 (2001).
60. Friard, O. & Gamba, M. BORIS: Un programari gratuït i versàtil de registre d'esdeveniments de codi obert per a la codificació de vídeo/àudio i observacions en directe. Mètodes Ecol. Evol. 7, 1325–1330 (2016). 61. Lee, HJ, Haberman, RP, Roquet, RF i Monfls, M.-H. L'extinció i la recuperació més l'extinció de la por condicionada activen de manera diferent l'escorça prefrontal medial i l'amígdala a les rates. Davant. Comportament. Neurosci. 9, 1–10 (2016).
62. Petrovich, GD, Holland, PC i Gallagher, M. Les vies amígdalars i prefrontals cap a l'hipotàlem lateral s'activen mitjançant una senyal apresa que estimula l'alimentació. J. Neurosci. 25, 8295–8302 (2005).
63. Paxinos, G. & Watson, C. Te Rat Brain in Stereotaxic Coordinates: Hard Cover. (Elsevier, 2006).
