Relació entre sèrum Bcl-3, Gal-3, TGF- 1 i fibrosi intersticial renal en rates amb malaltia renal crònica

Resum:

Objectiu: investigar la relació entre Bcl-3, Gal-3, TGF- 1 i el sèrum induït per adeninafibrosi intersticial en rates amb malaltia renal crònica. Mètodes Vint rates mascles de grau SPF es van dividir aleatòriament en grup control (n=10) i grup model (grup CKD, n=10), i el grup model va rebre adenina per sonda i el grup control va ser donat el mateix volum de solució salina per sonda, i les rates es van executar a la 3a i 6a setmanes, respectivament, i es va deixar sang per detectar nitrogen ureic, creatinina i Bcl-3, Gal-3 i The renal. Es van observar canvis patològics mitjançant la tinció HE, la gravetat de la fibrosi intersticial mitjançant la tinció de Masson i l'expressió de la proteïna -SMA als teixits renals mitjançant una tinció immunohistoquímica. En comparació amb el grup control, els nivells d'urea en sangnitrogen,creatinina, Bcl{{0}}, Gal{-3 i TGF{- 1 van ser significativament més alts en el grup d'ERC en tots els moments (P＜0).0 5). L'àrea relativa de les fibres de col·lagen intersticial en el grup CKD va ser significativament superior a la del grup control (P <0.05). L'anàlisi de correlació va mostrar una correlació positiva entre els nivells sanguinis de Bcl-3, Gal-3, TGF{- 1 i l'àrea relativa de fibrosi intersticial renal (rs=0,776, P <0,001). rs=0,58, P <0,001; rs=0,52, P=0,001).

Conclusió Els nivells sèrics de Bcl-3, Gal-3 i TGF{- 1 van augmentar significativament en rates amb un model d'ERC induït per adenina i es van correlacionar estretament amb la gravetat de la malaltia.fibrosi renal, que s'espera que sigui un nou biomarcador per avaluarfibrosi renal.

Paraules clau:malaltia renal crònica; fibrosi intersticial; Bcl-3; Gal-3; TGF- 1

Feu clic aquí per obtenir més informació sobre com tracta CistancheMalaltia renal crònica

Malaltia renal crònica(ERC) és un problema públic mundial i la seva prevalença augmenta cada any [1].Malaltia renal crònica(CKD) és un problema públic mundial i la seva prevalença augmenta any rere any [1]. En canvi, la fibril·lació renal és la principal patologia de la progressió de la CKD fins a l'etapa terminal. La CKD és un canvi patològic important i una via comuna perquè tot tipus d'ERC progressi fins a l'etapa final. La gravetat de la fibrosi renal està estretament relacionada amb l'elecció del tractament i el pronòstic dels pacients. Per tant, és molt important avaluar amb precisió el grau de fibrosi renal [2]. Per tant, l'avaluació precisa del grau de fibrosi renal és de gran importància [2]. La biòpsia renal és l'estàndard d'or per al diagnòstic de la fibrosi renal i pot entendre amb precisió i visualment els canvis patològics del ronyó i determinar l'extensió de la fibrosi renal. No obstant això, és invasiu i té algunes limitacions en la implementació. L'ecografia B, la TC, la ressonància magnètica i altres mètodes no invasius es poden utilitzar fins a cert punt per determinar la fibrosi renal. Tanmateix, aquestes proves només poden reflectir indirectament la fibrosi renal mitjançant canvis anatòmics al ronyó. Tanmateix, aquestes proves només poden reflectir indirectament la fibrosi renal a través de canvis anatòmics al ronyó, i és difícil detectar i jutjar la seva gravetat en una fase inicial [3]. Tanmateix, aquestes proves només poden reflectir indirectament la fibrosi renal mitjançant canvis anatòmics al ronyó, cosa que dificulta la detecció precoç i la determinació de la seva gravetat [3]. En canvi, els biomarcadors poden avaluar o mesurar quantitativament els processos biològics i patològics d'una malaltia. Els biomarcadors poden avaluar o quantificar els processos biològics i patològics d'una malaltia, i també servir com a dianes terapèutiques per a la malaltia [4]. Els biomarcadors poden avaluar o quantificar els processos biològics i patològics d'una malaltia, i també servir com a dianes terapèutiques per a la malaltia [4]. S'han identificat diversos biomarcadors per al diagnòstic de fibrosi renal. Tanmateix, no hi ha cap marcador universalment acceptat per determinar la fibrosi renal. Per tant, és important explorar i seleccionar biomarcadors valuosos.

Bcllinfoma3 (Bcl-3), Bcl-3 en rates i Bcl-3 en rates s'han identificat com els biomarcadors més importants per al diagnòstic de fibrosi renal. Bcl-3 (Bcl-3) i galectina-3 (Gal{-3) són marcadors renals potencials prometedors en els darrers anys. anys, però el seu valor No obstant això, cal investigar-ne més. En aquest estudi, teníem com a objectiu establir un model de rata de CKD induïda per adenina i investigar el valor de la galectina 3. En aquest estudi, vam establir un model de rata de CKD induïda per l'adenina i vam mesurar el sèrum Bcl-3, Gal -3, factor transgènic 1 i altres biomarcadors en rates. L'objectiu d'aquest estudi era establir un model de rata d'ERC induïda per l'adenina i mesurar els nivells sèrics de Bcl-3, Gal{-3, factor de creixement transformador- 1 (TGF{{16}). }}) i TGF- 1.

(TGF- 1) i analitzar la seva relació amb la fibrosi intersticial renal, per explorar si poden ser la base per determinar la fibrosi renal. Es van analitzar els nivells de TGF- 1, Gal-3 i TGF{- 1 per determinar si podrien ser nous biomarcadors de fibrosi renal.

1 Materials i mètodes

1.1 Animals d'experimentació

Vint rates mascles SD de grau SPF, pes corporal (200 ± 10) g, de 8 setmanes d'edat, es van comprar al Centre d'Animals Experimentals de la Southwest Medical University [SCXK (Chuan) 2018-17]. Les rates es van allotjar i es van recollir a la sala d'animals del Centre de Recerca de Medicina Integrativa de l'Hospital Afiliat de Medicina Tradicional Xinesa de la Southwest Medical University [SYXK (Chuan) 2018-065]. L'experiment va seguir el principi "3R" d'atenció humana. El comitè d'ètica animal experimental de la Southwest Medical University va aprovar l'estudi (swmu20220018).

1.2 Principals instruments i reactius

Adenine (Sigma, EUA); Kit ELISA Gal-3 (Jiangsu Enzyme Free Industry Co., Ltd., Xina), Kit ELISA Rat TGF- 1 (Jiangsu Enzyme Free Industry Co.

Ltd., Xina), rat Bcl-3 kit ELISA (Jiangsu Enzyme Free Industry Co., Ltd., Xina); solució de tinció de Masson (Hefei Bomei Biotechnology Co., Ltd., Xina); -Anticossos SMA (Wuhan PhD Bioengineering Co., Ltd., Xina); centrífuga de congelació d'alta velocitat (Eppendorf Co. Ltd.

Ltd., Alemanya); analitzador bioquímic automàtic (Siemens, Alemanya); microscopi de parafina (Thermo, EUA); microscopi de llum (Nikon, Japó); instrument d'estandardització d'enzims (Rayto, RT-6100).

1.3 Mètodes experimentals

1.3.1 Agrupació experimental i preparació del model Vint rates mascles SD de grau SPF es van dividir aleatòriament en grups control (n=10) i models (CKD, n=10) després d'una setmana d'alimentació adaptativa. L'adenina es va dissoldre en aigua destil·lada per fer una suspensió del 2,5 per cent. Es van administrar 250 mg/(kg-d) de suspensió d'adenina al grup de CKD per sonda periòdica regularment des de la 1a fins a la 4a setmana, i 125 mg/(kg-d) de suspensió d'adenina es van donar al grup control del 5 a la 4a setmana. la 6a setmana; es va donar el mateix volum de solució salina al grup control per sonda, i ambdós grups van ser alimentats amb menjar normal. Totes les rates es van alimentar i regar lliurement, amb la meitat de la llum i la meitat del temps fosc, i la temperatura ambient era de 18 graus -25 graus.

1.3.2 Recollida d'exemplars

Les rates es van executar al final de la 3a i 6a setmana, respectivament, i es va recollir sang de l'aorta abdominal; Els teixits renals es van fixar en una solució de formalina neutra al 10 per cent i es van convertir en seccions de parafina, i l'altra part dels teixits renals es van congelar i emmagatzemar a 80 graus. L'altra part del teixit renal es va congelar i es va emmagatzemar a 80 graus a la nevera.

1.3.3 Indicadors de nitrogen ureic sanguini, creatinina, Bcl-3, Gal-3 i TGF- 1

La funció renal de les rates es va mesurar mitjançant un analitzador bioquímic totalment automàtic. Es va utilitzar ELISA d'immunoassaig lligat a enzims per determinar Bcl-3, Gal-3 i TGF- 1. Les quantitats de Bcl-3, Gal-3 i TGF- 1 es van determinar mitjançant ELISA. Tots els kits es van comprar a Jiangsu Enzyme Free Industrial Co. Tots els kits es van comprar a Jiangsu Enzyme Free Industrial Co.

1.3.4 Tinció amb HE del teixit renal Els teixits renals fixats es van deshidratar, incrustar, seccionar i desparafinar.

Els teixits renals fixats es van deshidratar, incrustar, seccionar i desparafinar a l'aigua

Taula 1 Comparació de la funció renal entre dos grups de rates (&x±s)

2.2 Comparació dels nivells sèrics de Bcl-3, Gal-3 i TGF{- 1 entre els dos grups En comparació amb el grup control, el Bcl-3, Gal-3 en sang i els nivells de TGF- 1 al grup de CKD eren més alts que els del grup control. En comparació amb el grup control, els nivells sanguinis de Bcl-3, Gal-3 i TGF{{{10}} van ser significativament més alts en el grup de CKD en tots els moments (P <{{14} }}.05). Els nivells de TGF- 1 van ser significativament més alts en el grup de CKD (P <0, 05); dins del grup de CKD, els nivells de Bcl-3 3 van ser significativament més alts a les 6 setmanes en comparació amb les 3 setmanes del grup de CKD (P <0, 05). Vegeu la figura 1

2.3 Tinció amb HE dels teixits renals en els dos grups No hi va haver canvis patològics evidents en els teixits renals del grup control en cada moment, mentre que els teixits renals del grup CKD es van observar en cada moment. No hi va haver canvis patològics evidents en els teixits renals del grup control en cada moment, mentre que en el grup CKD, renal. Les cèl·lules epitelials renals del grup CKD van mostrar necrosi degenerativa, dilatació, proliferació de teixit fibrós intersticial i infiltració de cèl·lules inflamatòries. Els canvis van ser més evidents a la setmana 6 que a la setmana 3, vegeu la figura 2

2.4 Tinció de Masson dels teixits renals i puntuacions de fibril·lació intersticial dels dos grups de rates L'interstici de les rates del grup control al final de la 3a i 6a setmana No es va observar cap deposició evident de fibra de col·lagen a l'interstici de les rates control al final de 3a i 6a setmana. L'augment de la deposició de fibres de col·lagen a l'interstici de les rates CKD al final de la 6a setmana en comparació amb el final de la 3a setmana (L'àrea relativa de les fibres de col·lagen intersticial en el grup CKD també va ser significativament superior a la del grup control). . L'àrea relativa de les fibres de col·lagen intersticial en el grup d'ERC també va ser significativament més alta que la del grup control, i va ser més alta al final de la setmana 6 que al final de la setmana 3 (P <{{10} }.05). (P <0,05). Vegeu la figura 3.

Figura 3 Resultats de la tinció de Masson i puntuació de l'àrea relativa de les fibres de col·lagen a l'interstici renal