Sarmentosamida, un compost anti-envelliment d'un Streptomyces Sp. APmarine042

Paraules clau:cistanche; Streptomycessp. APmarine042;anti edat; MMP-1; UVB; TNF-

Feu clic aquí per obtenir més informació sobre la cura de la pell Cistanche per a l'envelliment

1. Introducció

Envelliment de la pellestà induïda per dos processos principals, que resulten de factors intrínsecs i extrínsecs.Envelliment extrínsecés causada principalment per l'exposició a factors ambientals com la contaminació de l'aire [1] i radiació ultraviolada (UV) [2]. La llum UV està formada per UVA (315–400 nm), UVB (280–315 nm),i UVC (200–280 nm), dels quals se sap que els raigs UVB penetren a l'epidermis i contribueixen a la pell.fotoenvelliment [3]. El fotoenvelliment de la pell induït pels UVB causa danys a l'ADN [4] i espècies reactives d'oxigengeneració (ROS) [5] i altera la matriu extracel·lular [6]. L'envelliment intrínsec és causat pel naturalconseqüències del canvi fisiològic, com ara factors genètics, hormones i processos metabòlics.7]. A més, les citocines inflamatòries, com el factor de necrosi tumoral-alfa (TNF ), interleucina 1 alfa/beta(IL-1 / ), i la interleucina 6 (IL-6), augmenten crònicament amb l'edat. En particular, la necrosi tumoralfactor- (TNF ) se sap que accelera la degradació dels components de la matriu extracel·lular (ECM) viaAugment de l'expressió i l'activitat de les metaloproteinases de la matriu (MMP) a la pell envellida.8]. MMP-1 ésalliberat principalment pels fibroblasts de la dermis i la MMP-1 secretada és responsable de la degradacióde col·lagen dèrmic, que recolza l'estructura i la funció de la pell. Per tant, la modulació de MMP-1L'expressió en fibroblasts dèrmics podria ser un objectiu prometedor per al desenvolupament de l'anti-envellimentingredients cosmètics.

Estudis anteriors han informat que la radiació UVB indueix ROS (producció d'espècies reactives d'oxigen i condueix a l'activació de vies de senyalització intracel·lular i factors de transcripció (p. ex., AP-1, NF-kB) [9. Aquests factors de transcripció estan regulats pel mitogen -proteïnes quinases MAPKs activades), que indueixen MMP-1 i citocines proinflamatòries. Hi ha tres MAPKamilies diferents implicades en els estímuls UVB/ROS: quinases regulades per senyal extracel·lular (ERKs), c-Jun N-terminal

quinasa (NK) i p38. El nostre estudi va identificar un Streptomyces sp. Extracte d'APmarine042 que va mostrar un potent efecte inhibidor sobre l'expressió de MMP-1. Després, es va identificar un compost inhibidor de MMP-1 en aquest Streptomyces sp. L'extracte d'APmarine042 i la seva estructura química es van identificar mitjançant l'assistència d'anàlisi de RMN (1), un compost amb un fragment d'hexadienamida 101. A continuació, investiguem més si aquesta expressió de MMP-1 inhibida per compost en la pell humana irradiada per UVB i induïda per TNFa. fibroblasts, així com el seu paper en la regulació de les vies de senyalització subjacents. A més, vam examinar thL'activitat antioxidant del cistanche(1) mitjançant un 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPHI)assaig d'eliminació radical.

2. Resultats i discussió

2.1. cistanche (1) Aïllament i identificació

cistanche (1) es va aïllar mitjançant una combinació de HPLC-UV i aïllament guiat per bioactivitat. A partir de la comparació entre les dades de RMN (materials suplementaris) del compost identificat en aquest estudi (d'ara endavant anomenat compost 1") amb les dels compostos reportats anteriorment, el compost 1 es va identificar com a cistanche. El valor de rotació òptica del compost 1 va ser també coherent amb els informes anteriors, que recolzaven encara més aquesta assistència del compost 1 (figura 1).

2.2. Efectes citotòxics del cistanche (1) sobre els fibroblasts dèrmics humans

Per investigar els efectes citotòxics del cistanche, es van tractar fibroblasts dèrmics humans normals (NHDFor cèl·lules de fibroblast de prepuci humà (Hs68) amb cistanche a diferents concentracions (6, 12, 25, 50, 100 ug/mL) durant 24 h, després de les quals la cèl·lula. Es va realitzar un assaig del kit de recompte-8 (CCK{-8) ​​per quantificar la viabilitat cel·lular. La sal de tetrazoli soluble en aigua (WST-8) en solució de CCK-8 es va reduir per activitats de deshidrogenasa en cèl·lules per donar un colorant formazà de color groc, la quantitat del qual era proporcional al nombre de cèl·lules vives. Tal com es mostra a la figura 2, el cistanche no va causar efectes citotòxics observables ni en cèl·lules NHDF ni Hs68 a concentracions que oscil·laven entre {{15} } ug/ml

Figura 2. Prova de viabilitat cel·lular de cistanche sobre fibroblasts. (ab) La viabilitat cel·lular detractat amb cistancheEls fibroblasts dèrmics humans normals (NHDF) (a) i les cèl·lules de fibroblasts de prepuci humà (Hs68) (b) a les 24 h es van mesurar mitjançant un assaig CCK (kit de recompte de cèl·lules). * p < 0.05, ** p < 0,01 vs. grup no tractat).

2.3. cistanche (1) Inhibeix l'expressió i la secreció de MMP-1 en cèl·lules NHDF irradiades amb UVB

A continuació, els NHDF en absència i presència de radiació UVB (25 mJ/cm2) es van tractar amb cistanche (2, 5 ug/mL) durant períodes curts i es van quantificar els nivells d'expressió d'ARNm de MMP-1 relatius mitjançant quantitativa en temps real. Anàlisi PCR. Es va trobar que cistanche regulava a la baixa els nivells d'ARNm de MMP-1 fins a un 16 per cent i un 17 per cent en absència (figura 3a) i en presència (figura 3bof UVB, respectivament. La radiació UVB, un important factor de risc extrínsec d'envelliment de la pell, pot penetren a l'epidermis i arriben a la dermis superior, donant lloc a la generació de la producció de MMP d'espècies reactives d'oxigen (ROS) i una regulació a la baixa de la síntesi de col·lagen. Per tant, el nostre estudi va intentar investigar si la secreció de MMP-1 inhibida per cistanche en la irradiació UVB. Cèl·lules NHDF. Els nivells de secreció de MMP-1 en medis de cultiu cel·lular es van mesurar mitjançant ELISA i les quantitats relatives de secreció de MMP-1 es van normalitzar a la proteïna otal en lisats de cèl·lules senceres, que es van mesurar mitjançant un bicinconínic. assaig de quantificació de proteïnes àcids (BCA). La irradiació UVB (25 mJ/cm2) va augmentar notablement la secreció de MMP-1(8,3- vegades) en comparació amb el grup no irradiat amb UVB (figura 3c) i el cistanche -inhibeix la secreció de MMP-1 a les cèl·lules NHDF irradiades amb UVB de manera dependent de la dosi.

Figura 3. Efecte del cistanche sobre l'expressió de metaloproteïnases-1 (MMP-1) en NHDF irradiats amb UVB. ( a, b ) Els nivells relatius d'ARNm de MMP -1 a les cèl·lules NHDF van irradiar UVB (25 mJ/cm2) o tractats amb cistanche (2,5 ug/mL) durant 16 h. El gen RPLPO es va utilitzar com a control intern. * p < {{10}}.05.*** p < 0.001 (C) Després de la irradiació UVB (25 mJ/cm2) , es va tractar cistanche en medis sense sèrum durant 48 h, i després es van analitzar els nivells de secreció relatius de MMP-1 en medis de cultiu cel·lular mitjançant ELISA### p <0,001 (en comparació amb el grup control no UVB); ** p <0,01; *** p <0,001 (grup control irradiat amb UVB).

Demana més:

Correu electrònic:wallence.suen@wecistanche.com whatsapp: més 86 15292862950