Contacte: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Correu electrònic:audrey.hu@wecistanche.com

YANG Jian-hua1' 2 , HU Jun-ping2, RENA • Kasimu2 ,〔DU Nian-sheng

(1. Hospital de tumors afiliat, Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, Xina; 2. College of Pharmacy, Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, Xina)

Resum:Objectiu: Estudiar les relacions estructura-activitat dels glucòsids feniletanoides en plantes de salsa Cistanche sobre l'activitat antioxidant. Mètodes: Mitjançant els sistemes d'assaig de DPPH •, l'activitat antioxidant de sis glicòsids feniletanoides de plantes deCistancheLa salsa es va determinar per investigar la relació entre les activitats antioxidants i les característiques estructurals dels glucòsids feniletanoides. Resultats: L'activitat antioxidant dels glicòsids feniletanoides va ser una variant amb un efecte depenent de la dosi. Es va demostrar que la seqüència de la força de l'activitat antioxidant dels sis components era2 ^Acetilacteòsid > Acteòsid Tubulòsid BN Isoacteòsid > Echinacòsid > Cistanòsid A. Conclusió: l'activitat antioxidant dels glicòsids feniletanoides està relacionada amb el nombre d'hidroxils fenòlics, l'obstacle estèric, l'{0}}acetil a la glucopiranosa mitjana i la ubicació de l'hidroxil fenòlic. A més, pot estar relacionat amb la j3-cetona insaturada del fenol-2-propenil.

Paraules clau: Cistanche salsa ( CA Mey. ) G, Beck; glucòsids feniletanoides; activitat antioxidant; Estructura-activitat; DPPH

Echinacòsid

La medicina tradicional xinesaCistancheés la salsa Cistanche (CA Mey.) G. Beck, una tija carnosa seca amb escates i fulles. Es va publicar per primera vegada a "Shen Nong's Materia Medica". La freqüència d'ocurrència és la més alta, només per darrere del ginseng en les receptes de medicina xinesa anti-envelliment i anti-envelliment, i té la reputació de "ginseng del desert". Els glucòsids de feniletanoil són components característics deCistancheplantes del gènere. Actualment, més de 30 compostos d'aquest tipus s'han aïllat d'aquest gènere. Els estudis farmacològics, bàsicament, han deixat clar que aquests compostos són la base material principalCistancheexercir activitats farmacològiques).

El radical dibenzopicril (DPPH •) és un radical lliure relativament estable amb un electró lliure al seu N. La solució de metanol de DPPH- és de color violeta amb un pic d'absorció màxim a 517 nm. Quan hi ha un eliminador de radicals lliures, la seva absorció desapareix gradualment a causa del seu aparellament d'un electró. El seu grau de decoloració està relacionat quantitativament amb el nombre d'electrons que accepta. Per tant, l'ús de l'espectrofotometria per detectar el canvi en l'absorbància de DPPH després de la reacció amb la solució de mostra es pot utilitzar per provar la capacitat de la mostra per eliminar radicals lliures i resistir l'oxidació (3). Actualment, hi ha informes sobre la investigació antioxidant dels glucòsids d'alcohol fenetílic en el puré d'albergínia en l'eliminació de radicals lliures, però no hi ha cap anàlisi de la relació estructura-activitat entre les seves propietats antioxidants i les substàncies actives. En aquest article, s'utilitza per primera vegada el mètode d'anàlisi de radicals lliures DPPH per provar l'activitat antioxidant de 6 monòmers de glucòsids d'alcohol fenetílic a Rouhuanrong. A partir de les característiques estructurals i els resultats de la determinació de l'activitat d'aquests compostos, es dedueixen preliminarment els components del glicòsid de l'alcohol fenetílic. Relació estructura-activitat de l'activitat antioxidant.

1 Aparells i materials

Echinacòsid, cistanche glicòsid A,verbascosid, glucòsid d'isoverbasin, 2,-acetil verbascòsid, substància de referència d'antocianina B del tub (aïllada i preparada a partir de salsa Cistanche, UV, IR, EI-ms/h -nmrJ3c-nmr Les dades d'acord amb el valor de la literatura, el contingut està determinat per l'àrea HPLC mètode de normalització, la puresa és superior al 95 per cent, la fórmula estructural es mostra a la figura 1 i la taula 1); El radical difenil picril (DPPH •) es va comprar a Sigma; altres reactius Tots ells són nacionalment purs.

Detector d'activitat biològica de longitud d'ona completa multifuncional SpectraMax M5 (Anthos Co. Austria), 96-placa de cultiu de pous (Costar), balanç electrònic AB{104-N]Mettler-Toledo Instr. (Shang Hai) Ltd.]

Figura 1 Les fórmules estructurals de sis glicòsids de fenetanoil a Cistanche

Taula 1 Substituents en 6 compostos de glicòsids de fenetanol a Cistanche

Nota: Ac és acetil, Cf és trans-cafeoil, Glc * pD-gluviolanosa i Rha és aL-ramnosa

2 Preparació de la solució d'assaig

DPPH • Prepareu una solució de reserva amb una concentració d'1. 3 x 10'2mol/L amb etanol, guardeu-la a la nevera, diluïu la solució de reserva amb etanol a 1-3 xl{{7} }^mol/L immediatament abans de l'ús; 6 tipus de glucòsids d'alcohol fenetílic La substància de referència i la vitamina C es formulen en una solució amb una concentració de 0.05-50,0 ptg/mL amb etanol.

Acteòsid

3 mètodes i resultats

3. 1 Mètode Primer afegiu 10 |xL de mostra als pous de mostra, afegiu 10|jlL d'etanol als pous en blanc i, a continuació, afegiu-hi 190 jiL de DPPH • amb una concentració de 1,3 xlO^mol/L, i col·loqueu-los en la foscor a temperatura ambient durant 30 minuts. Utilitzeu el detector d'activitat biològica multifunció SpectraMax M5 de longitud d'ona completa per mesurar l'absorbància (A) a 517 nm. Cada absorbància es va mesurar 3 vegades en paral·lel i es va prendre el valor mitjà. La taxa d'eliminació es calcula de la següent manera: percentatge d'eliminació (percentatge)=(Una mostra en blanc-A)/Un blanc x 100 per cent

3.2 Resultats Els resultats de la determinació es mostren a la Taula 2. A la Taula 2 es pot veure que els sis glicòsids d'alcohol fenetílic a diferents concentracions tenen diferents graus d'efectes eliminadors sobre la DPPH • i la seva capacitat d'eliminació de radicals lliures té una dosi significativa. efecte relació amb la concentració. Glicòsid sobre DP PH • La mida de l'efecte depurador augmenta amb l'augment de la concentració.

Taula 2 La taxa d'eliminació de mostres amb diferents concentracions de DPPH • («=3)

Nota: el control positiu és l'àcid ascòrbic (vitamina C), el número de mostra és 7

According to the IC5 of each sample. According to the value, the scavenging ability of 6 kinds of phenylethanoid glycosides on DPPH • is in order: 2'-acetyl verbascoside> verbascoside BN isophorbasin glycoside> echinacoside>cistanche glicòsid A. Els efectes dels sis glucòsids d'alcohol fenetílic a la mateixa concentració que el control positiu Vitamina C són lleugerament inferiors als de la vitamina C.

verbascosid

4 Discussió

Els resultats d'aquest estudi van confirmar a més que els glucòsids d'alcohol fenetílic generalment tenen activitat antioxidant. Analitzant i comparant les seves estructures químiques, el verbascòsid, el glucòsid iso-verbasin, el 2'-acetil verbasin glicòsid i l'anortosita B del tub són tots glucòsids, mentre que l'equinàcòsid icistancheA són triglicèrids, amb gran impediment estèric. L'augment de l'efecte d'obstacle estèric fa que l'echinacòsid i el solanacòsid A siguin difícils d'apropar als radicals lliures, de manera que la seva capacitat antioxidant és relativament feble; la diferència estructural entre equinacòsid i estriada: equinacòsid A només és El R5 del primer és un grup hidroxil fenòlic i el segon és un grup metoxi. El grup hidroxil o-fenòlic es considera un grup funcional important per a l'activitat antioxidant. El grup hidroxil difenol desapareix i l'efecte antioxidant es redueix significativament. Analitzant l'estructura del compost i combinant els resultats de la mesura, es dedueix que l'activitat antioxidant dels fenetilglicòsids a la pasta d'albergínia està relacionada amb el nombre d'aglicones i grups hidroxil fenòlics del grup fenilacriloil, la posició de connexió del fenòlic. grup hidroxil, la mida de l'obstacle estèric del compost i la glucosa central 2 Hi ha una certa relació entre la substitució del grup acetil a la posició, que també pot estar relacionada amb el fragment d'estructura de cetona insaturada a,/3 a el grup acil estirè, però té poca relació amb la posició de substitució del grup fenilacriloil.

DPPH • és un radical lliure relativament estable centrat en N, amb una forta absorció a 517 nm. Després d'afegir la substància de prova, detectant el canvi d'absorbància a 517 nm després que els radicals • DPPH reaccionin amb la solució de la mostra, es pot verificar la capacitat de la mostra per eliminar els radicals lliures i l'antioxidació. Els experiments mostren que l'ús de DPPH • per establir un model de dany dels radicals lliures in vitro no requereix equips complicats i reactius cars. És senzill i fàcil d'utilitzar, sensible, fiable i reproduïble. És un bon mètode per a la detecció d'eliminadors de radicals lliures.

Actualment la vitamina C és reconeguda com un antioxidant molt actiu i àmpliament utilitzat. Per tant, aquest experiment va triar la vitamina C com a control positiu de la capacitat antioxidant dels glucòsids de l'alcohol fenetílic en l'eliminació de radicals lliures.

referències

[1] Lei Li, Song Zhihong, Tu Pengfei. Recerca sobre els components químics de Cistanche Progrés de la investigació[J].Chinese Herbal Medicine, 2003,34(5):473476.

[2] Song Zhihong, Lei Li, Tu Pengfei. Avenços en la investigació sobre les activitats farmacològiques de les plantes de Cistanche[J]. Chinese Herbal Medicine, 2003, 34(9): Adjunt 16-18.

[3] Xu Shenhong, Hang Hu. Un mètode senzill per a la detecció d'eliminadors de radicals lliures [J]. Chinese Herbal Medicine, 2000, 31(2): 96-97.

[4] Fu Rong, Zhu Jiuwei. Determinació de l'activitat antioxidant de Chuanling, Rhodiola Rosea i Huang Zhi mitjançant espectrofotometria radical de pirateria difenil [J]. Journal of Dalian University of Light Industry, 2004, 23 (2) ): 114-117.