Estudi sobre la funció neuroendocrina-immune dels glucòsids feniletanoides de l'herba Cistanche de la vida del desert en el model de rata perimenopàusica

per a més informació:ali.ma@wecistanche.com

Shuo Tiana, et al

Resum

Rellevància etnofarmacològica:

Viure al desertCistancheherbaes va gravar per primera vegada a "Shen Nong'Herbal Classic" i es va classificar com la medicina d'herbes de primer grau.Feniletanoideglicòsidssón components indicatius per a la identificació i la determinació del contingut de la vida al desertCistancheherbaen la farmacopea xinesa, que també és un dels principals components actius. En aquesta investigació, hem explorat el mecanisme defeniletanoideglicòsidsde la vida del desertCistancheherbaa les rates model perimenopàusiques.

Objectiu:

L'objectiu d'aquest estudi és investigar els efectes defeniletanoideglicòsidsde Desertliving Cistancheherb (PGC) alneuroendocrí-immunefunció de la síndrome perimenopausa per rates model perimenopàusiques.

Materials i mètodes:

Es van seleccionar rates femelles Wistar. Es van eliminar els ovaris esquerres de totes les rates, excepte en el grup control en blanc (BC), i els ovaris drets es van eliminar en un 80 per cent. El frotis vaginal va mostrar canvis irregulars del cicle estral per a les rates model perimenopàusiques. I les rates model perimenopàusiques van ser gavagedGengnian'an,FeniletanoideGlicòsidsde DesertlivingCistancheherbaalta, mitjana, una suspensió baixa que és de 450 mg/(kg dia), 133,33 mg/(kg dia), 66,67 mg/(kg dia), 33,33 mg/(kg dia); el grup de BC i el grup model (MC) van rebre aigua destil·lada en el mateix volum que el grup de fàrmacs durant 30 dies consecutius. Les puntuacions de l'exercici vertical horitzontal es van mesurar als 29 dies de dosificació. Després de l'última administració, es va prendre sang de l'aorta abdominal i es van mesurar els nivells d'E2, LH, FSH, GnRH, BGP en sèrum i els nivells -EP en plasma respectivament. Es van calcular els índexs d'òrgans del tim, la melsa i l'úter. Es va mesurar el contingut de receptors d'estrògens (ER) als teixits hipotàlamics, pituïtaris i uterins i el contingut de receptors d'andrògens (AR) a l'homogeneïtat hipotalàmic. Els canvis patològics del tim, la melsa, l'úter i l'ovari es van observar mitjançant la tinció HE.

Resultats:

En comparació amb MC, PGC augmenta l'activitat, l'índex d'òrgans (tim, melsa, úter), E2, T, nivell de BGP en sèrum, nivell -EP al plasma, nivell AR a l'hipotàlem, nivell ER a l'hipotàlem, pituïtària, úter en rates model perimenopàusiques. I també va reduir els nivells de FSH, LH, GnRH en sèrum i va millorar les lesions uterines i ovàriques en rates model perimenopausa.

Conclusió:

Cada dosi de PCG podria contrarestar el trastorn de l'hormona sexual en rates model perimenopàusiques, corregir el desequilibri dels nivells d'ER i AR, millorar i restaurar l'efecte de l'úter i les cèl·lules nervioses de l'hipotalàmic i millorarimmunefunció.

Paraules clau:Feniletanoideglicòsidsde la vida del desert,Cistancheherba, rates model perimenopàusiques,Neuroendocrí-immunefunció

FeniletanoideglicòsidsdeCistancheherbatéNeuroendocrí-immunefunció

Feu clic a la tija de Cistanche

1. Introducció

Amb l'envelliment de la població, la incidència de la síndrome perimenopausa augmenta. Alguns estudis han trobat que l'edat d'inici de la síndrome perimenopausa ha anat disminuint a nivell internacional i ha disminuït dels 65 als 35 anys. La medicina moderna creu que la síndrome perimenopausa fa referència als símptomes causats per la disminució de la funció ovàrica (Miao et al., 2017a,b). El nivell d'estrògens és baix, cosa que provoca funcions anormals com ara endocrines, nervioses iimmunefuncions. Les principals manifestacions clíniques són els sufocs, la sudoració, les palpitacions, l'insomni, la irritabilitat, la menstruació irregular, l'osteoporosi i la incidència de malalties cardiovasculars (Lobo et al., 2014; Alvarado-García et al., 2015), que afecten greument les vides. de dones perimenopàusiques. La teràpia de reemplaçament hormonal (TRH) és el mètode principal per al tractament d'aquesta síndrome, però la teràpia a llarg termini de substitució d'estrògens pot causar efectes adversos com ara coprofàgia, dolor distensió a la mama, carcinoma d'endometri, càncer de mama i augment de la incidència de malalties cardiovasculars i cerebrovasculars, i és susceptible de recurrència (Perrone et al., 2013). Aquests símptomes limiten la seva aplicació clínica, de manera que la gent està cada cop més atenta als problemes d'aquesta etapa especial de la menopausa.

Les característiques de síndromes com "vísceres", "coagulació de la sang antiga", "malaltia del lliri", "síndrome de depressió" i "no desobediència" registrades a la medicina tradicional xinesa són similars a les de la síndrome de la menopausa mèdica moderna. Pertanyen a la categoria de diversos símptomes abans i després de la menopausa. "Suwen: Shanggu Tianzhen Lun", va dir: "El canal Ren és feble quan la gent tenia 49 anys, i el vaixell de la via pública s'ha de reduir, l'essència estimulant el sexe s'esgota i altres fenòmens, per tant, una dona perd la funció d'un fetus". I l'essència estimulant del sexe es transforma per l'essència renal, de manera que la medicina tradicional xinesa (MTC) creu que el principal patogen de la malaltia és la deficiència renal (Peng, 2014). Els estudis també han demostrat que la disminució de la funció ovàrica és la causa de la síndrome d'astènia renal en terminologia de la MTC. La reducció dels nivells d'E2, LH, FSH és una expressió de l'astènia renal (Liu et al., 2010), i l'estudi havia trobat que la majoria dels fàrmacs de reposició del yang del ronyó tenen un millor efecte de tractament sobre la síndrome perimenopausa (Zhang i Miao, 2011; Cao et al., 2016; Wang et al., 2016; Tian et al., 2017a, b), per la qual cosa hem de comprendre amb fermesa el paper de la "deficiència renal" en la terminologia de la MTC com a patogènesi principal en la clínica. tractament i posant èmfasi en l'objectiu principal de reposar el ronyó. Els estudis han demostrat que, en reposar els ronyons, la medicina xinesa pot regular la disfunció de l'eix HPO, retardar l'envelliment ovàric, regular laendocrí nerviós-immunesistema, millorar la immunitat i prevenir l'osteoporosi (Shi et al., 2007), entre altres efectes. Viure al desertCistancheherbaés una tija carnosa seca i escamosa de Cistanche deserticoLa YCMa o Cistanche tubulosa (Schenk) Wight, és una planta medicinal parasitària perenne. Té l'efecte de reposar el ronyó, reposar l'essència i la sang, afluixar l'intestí per alleujar el restrenyiment i altres efectes. Viure al desertCistancheherbas'utilitza habitualment en la medicina tradicional xinesa per revitalitzar el ronyó i enfortir el yang, que s'anomena "ginseng del desert". La investigació moderna ha demostrat que té efectes anti-envelliment, millora la immunitat del cos, millora la capacitat d'aprenentatge i memòria, efectes antiinflamatoris i anti-fatiga, entre d'altres (Li et al., 2010). La composició química de l'herba Desertliving Cistanche és complexa i el seu contingutfeniletanoideglicòsidsés el més alt en els materials medicinals originals. També és un dels principals components actius del DesertlivingCistancheherbaper exercir un efecte andrògen i propietats immunomoduladores (Zhao i Pan, 2013). I el PGC podria millorar el trastorn de l'hormona sexual (E2, T, FSH, LH) en ratolins perimenopàusics, i té un bon efecte terapèutic en ratolins perimenopàusics, vegeu l'estudi relacionat (Tian et al., 2017a, b).

Actualment, la investigació sobre la síndrome perimenopausa se centra en el sistema endocrí, sistema nerviós,immunefunció, etc., però el trastorn endocrí-immunela regulació és la principal causa de la síndrome perimenopausa (Wang et al., 1999; Zhang i Wang, 2001). Aquest estudi va examinar l'efecte de la PGC en les rates model perimenopàusiques des de la perspectiva de l'endocrí.immunefunció.

2. Materials i mètodes

2.1. Animals experimentals

Les rates femelles Wistar (210-230 g) es van comprar a ShandongLukang Pharmaceutical Co., Ltd., número de permís d'animals: 0017216, el certificat de laboratori núm. SYXK (Henan) 2010-001. Totes les rates es van mantenir amb accés lliure al menjar i l'aigua en gàbies de plàstic a 22 ± 2 graus, una humitat relativa del 50% al 60%. I els animals van ser allotjats durant una setmana abans dels experiments.

2.2. Materials i reactius

Carboximetil cel·lulosa de sodi, Tianjin Hengxing Chemical Reagent Manufacturing Co., Ltd., Lot núm.: 20120418; Benzilpenicil·lina potassi per injecció, Huabei China Pharmaceutical Co., Ltd., Especificació: 4 milions d'unitats, número de lot de producció: c1206807; Solució de formaldehid (pura analítica), Yantai Shuangshuang Chemical Co., Ltd., número de lot de producció: 20130902; hidrat de cloral, Tianjin Guangfu Fine Chemical Research Institute, número de lot 20120827; rata E2, T, FSH, LH, GnRH, AR, ER, BGP, -EP Caixa de reactius de detecció ELISA, R+D, número de lot: 20140101A.

2.3. Medicaments experimentals

S'ha publicat el mètode específic de preparació i la detecció de contingut de PGC. Consulteu la literatura i el contingut és del 66,47 per cent (Tian et al., 2017a,b). Càpsula Gengnian, ingredients: Rehmannia, Rehmannia glutinosa, Alisma, Ophiopogon japonicas, Scrophulariaceae, Cortex Moutan, Poria, Mare de perla, Curculigo, Schisandra, Magnet, Shouwu Vine, Uncaria, Blat flotant, Polygonum multiflorum. Indicacions: nutrició del yin i el yang, desfer-se dels problemes i calmar la ment, i s'utilitza per a la menopausa amb sudoració, vertigen, tinnitus, irritabilitat i insomni. Especificacions: 0,3 g per càpsula. Ús i dosificació: Oral, 3 càpsules alhora, 3 vegades al dia. Empresa de producció: Shanxi Tianxing Pharmaceutical Co., Ltd. Número de lot de producció: 121104. Número d'aprovació: National Medicine Zhunzi Z14021848.

FeniletanoideglicòsidsdeCistancheherbatéNeuroendocrí-immunefunció

2.4. Instrument experimental

Obertura de la cambra de proves d'activitat, Chengdu Taimeng Software Co., Ltd., model OFT-100; microscopi motoritzat, empresa japonesa OLYMPUS, model: BX61; lector de microplaques, empresa americana BIO-RAD, model: 680; Centrífuga refrigerada d'alta velocitat X3R, EUA Mercury Technology Co., Ltd.

2.5. Preparació i agrupació de models animals

Vuitanta rates preses amb un pes de 210-230 g, i 12 rates es van seleccionar aleatòriament com a grup BC, i les rates restants es van utilitzar per a models animals perimenopàusics. El mètode de preparació de rates model perimenopausa, mètode de la literatura de referència (Miao et al., 2015), va eliminar completament l'ovari esquerre, es va eliminar el 80 per cent de l'ovari del costat dret. Criat amb cura després de l'operació, i per a la prevenció de la infecció a la injecció de penicil·lina 20U/kg (0,1 ml) per via intramuscular, durant 3 dies consecutius, una vegada al dia. Després de 5 dies de cirurgia, l'examen de frotis vaginals de les rates es va realitzar un per un, un cop al dia i consecutiu durant 5 dies. Les rates amb reaccions d'estro es van descartar. Seixanta rates ovariectomitzades es van dividir aleatòriament i per igual en 5 grups per a ús experimental. Eren el grup model (MC), el grup Gengnian'an (GC),FeniletanoideGlicòsidsde DesertlivingCistancheherbaalta (PGC-HD), mitjana (PGC-MD), grup de dosis baixes (PGC-LD).

2.6. Mètode de configuració del fàrmac

(1) Les dosis de PGC-HD, PGC-MD, PGC-LD són 133,33 mg/kg, 66,67 mg/kg i 33,33 mg/kg (volum d'administració 1 ml/100 g) respectivament. Mètode de configuració: peseu PGC 1333,3 mg, 666,7 mg, 333,3 mg, primer dissolt amb una petita quantitat d'aigua destil·lada, i després s'afegeix aigua destil·lada a 100 ml i es barreja bé, és a dir, el PGC-HD, PGC-MD, PGC requerit - Suspensió LD.

(2) La dosi de GC és de 450 mg/kg i el volum d'administració és el mateix que l'anterior, que equival a 10 vegades la dosi clínica. Mètode de configuració: agafeu 15 càpsules de GengnianCapsule, dissoleu-la primer amb una petita quantitat d'aigua destil·lada, després poseu-la a 100 ml i barregeu-la. Aquesta és la suspensió de GC desitjada.

2.7. Forma d'administració

A cada grup d'animals se li va donar el medicament corresponent el 10è dia després de l'operació. El grup GC es va administrar amb 450 mg/kg de suspensió de càpsula Gengnian i PGC-HD, PGC-MD, PGC-LD es van administrar respectivament amb suspensió PGC-HD, PGC-MD, PGC-LD, que és de 133,33 mg/kg, 66,67 mg. /kg, 33,33 mg/kg. El BC i el MCgroup es van administrar respectivament amb el mateix volum d'aigua destil·lada, una vegada al dia durant 30 dies.

2.8. Prova a camp obert

Les rates de cada grup es van provar per obtenir puntuacions d'exercici horitzontal-vertical als 29 dies d'administració. El dispositiu experimental és una caixa cúbica oberta amb una alçada de 40 cm i una llargada de 80 cm i una amplada de 80 cm. La paret perifèrica i la superfície inferior són negres, i la superfície inferior es compon de 25 blocs d'àrea igual, que estan dividits per línies blanques. Durant l'experiment, les rates es van col·locar al quadrat de la caixa oberta i es van observar les puntuacions d'activitat horitzontal dels raigs que passaven per la superfície inferior en 5 minuts (els quadrats en què es van introduir les quatre urpes) i l'activitat vertical. es va aixecar una puntuació del nombre de potes posteriors (les dues potes anteriors estaven desocupades o pujaven per la paret). Les femtes s'han d'eliminar completament després de cada experiment i mesurar-les una vegada després de 2 h d'administració. Aquest experiment es va dur a terme en una habitació tranquil·la.

2.9. Determinació del nivell d'E2, T, LH, FSH, GnRH, BGP en sèrum i nivells de -EP en plasma

Rates de cada grup després de l'última administració de 2 h (dejú durant 12 h), anestèsia abdominal, es va prendre la sang de l'aorta abdominal, es va separar el sèrum i el plasma (4 graus, 3500 rpm, 10 min), emmagatzemat a la nevera a -80 graus. Mitjançant un assaig immunoabsorbent lligat a enzims es va mesurar el nivell d'E2, T, LH, FSH, GnRH, BGP al sèrum i el nivell de -EP al plasma. El mètode d'operació específic es va realitzar segons les instruccions.

2.10. Determinació d'ER i AR en els homogeneïtats de l'hipotàlem, la hipòfisi i el teixit uterí

Després de prendre sang de l'aorta abdominal, es van sacrificar les rates. L'hipotàlem, la pituïtària i l'úter es van extreure del cos. Es van homogeneïtzar l'hipotàlem, la hipòfisi i 1/2 úter. El mètode d'homogeneïtzació va ser el següent:

El bloc de teixit es va esbandir amb clorur de sodi 0,9 per cent, es va treure la sang i es va utilitzar el paper de filtre per assecar el teixit, es va pesar el teixit i es va tallar en tubs d'homogeneïtat de vidre i s'homogeneïtzava mitjançant afegint un 0,9 per cent de clorur de sodi prerefredat (la proporció de teixit i 0,9 per cent de clorur de sodi és 1:9). El tub d'homogeneïtzació de mà esquerra s'insereix al recipient que conté la barreja d'aigua gelada. La mà dreta s'insereix a la carcassa verticalment i es gira cap amunt i cap avall diverses vegades (6-8 min), tritura completament, homogeneïtza el teixit, centrifuga (4 graus, 3500 rpm, 10 min) i emmagatzema a -80 graus a la nevera. .
El contingut d'ER en homogeneïtats d'hipotàlem, hipòfisi i teixits uterins i el contingut d'AR en homogeneïtats d'hipotàlem es va determinar mitjançant un assaig immunosorbent lligat a enzims (ELISA) segons les instruccions.

FeniletanoideglicòsidsdeCistancheherbatéNeuroendocrí-immunefunció

2.11. Càlcul de l'índex d'òrgans

Les rates de cada grup després de l'última administració de 2 h (dejuni durant 12 h), es van sacrificar les rates i es van eliminar el tim, la melsa, l'úter i el 20% restant del teixit ovàric, es van pesar els pesos humits i l'òrgan. es va calcular l'índex del tim, la melsa i l'úter. La fórmula és la següent:

Índex d'òrgans=Pes de l'òrgan humit (mg)/Massa corporal de rata (g)

2.12. Observació de la morfologia de l'úter, ovari, tim, melsa i mesura del gruix de l'escorça tímica i nòduls de la melsa

El tim, la melsa, l'úter i l'ovari es van fixar en una solució de formaldehid al 10%, es van incrustar en parafina, es van seccionar, es van tacar amb HE i es van observar canvis histomorfològics sota un microscopi de llum. Amb el micròmetre, es va mesurar el gruix de l'escorça del tim en els punts més gruixuts i estrets de cada rata de cada grup experimental. La mitjana és el gruix de l'escorça del tim. La línia de base del micròmetre es va col·locar als nòduls de la melsa al centre. Determinació del gruix de la melsa a ambdós costats amb l'artèria central com a centre, i la mitjana és el gruix de la melsa.

2.13. Anàlisi estadística

L'anàlisi de dades utilitza el paquet d'estadística mèdica SPSS21.0 per dur a terme el processament estadístic de les dades, i les dades metrològiques s'expressen com a mitjana ± desviació estàndard (x(-) ± s), la comparació entre els grups utilitza un sol factor anàlisi de la variància. Es va utilitzar el mètode LSD per a l'homogeneïtat de la prova de variància, el mètode Games-Howell per a la prova de variància desigual i la prova de Ridit per a les dades de qualificació.

3. Resultats experimentals

3.1. Efectes del comportament en rates model perimenopàusiques

A partir de la figura 1 (A i B). Es pot veure que, en comparació amb BC, les puntuacions de moviment horitzontal i vertical de les rates del grup MC es van reduir significativament (P <0.01), cosa="" que="" reflecteix="" la="" curiositat="" de="" les="" rates="" sobre="" allò="" desconegut.="" medi="" ambient.="" en="" comparació="" amb="" mc,="" cada="" grup="" podria="" augmentar="" significativament="" la="" puntuació="" d'exercici="" horitzontal="" de="" les="" rates="" (p=""><{8}}.01), i="" el="" pgc-hd,="" pgc-md,="" pgc-ld="" va="" augmentar="" significativament="" la="" puntuació="" de="" moviment="" vertical="" de="" les="" rates="" (p).=""><0,05). el="" grup="" pgc-ld="" va="" tenir="" la="" tendència="" a="" augmentar="" la="" integral="" de="" moviment="" vertical="" de="" les="">

3.2. Efecte de l'índex d'òrgans relacionats en rates model perimenopàusiques

A la figura 2 (A, B, C), vam poder veure que, en comparació amb la glucosa, l'índex d'òrgans del tim, la melsa i l'úter de les rates del grup MC es va reduir significativament (P <0.{{3}). }1),="" que="" indica="" que="" el="" tim,="" la="" melsa="" i="" l'úter="" semblaven="" reduir-se="" en="" rates="" model="" perimenopàusiques="" causades="" per="" l'eliminació="" incompleta="" de="" l'ovari.="" en="" comparació="" amb="" mc,="" l'índex="" d'òrgans="" del="" tim="" i="" la="" melsa="" de="" les="" rates="" model="" perimenopausa="" va="" augmentar="" significativament="" en="" cada="" grup="" de="" fàrmacs="" (p=""><0.01). els="" grups="" pgc-hd,="" pgc-md="" i="" gc="" van="" augmentar="" significativament="" l'índex="" uterí="" de="" les="" rates="" model="" de="" perimenopausa="" (p=""><0, 01).="" pgc-md="" va="" augmentar="" significativament="" l'índex="" de="" l'úter="" de="" rates="" model="" perimenopàusiques="" (p=""><0,>

3.3. Efecte dels indicadors bioquímics en rates model perimenopàusiques

Com es mostra a la figura 3. (A, B, C, D), en comparació amb el grup BC, els nivells d'E2 i T en sèrum al grup MC es van reduir significativament (P <0.{{4 }}1),="" i="" els="" nivells="" de="" lh="" i="" fsh="" van="" augmentar="" significativament="" (p=""><0.{{10}}1), cosa="" que="" indica="" que="" l'eliminació="" incompleta="" de="" l'ovari="" en="" rates="" model="" perimenopàusiques="" provoca="" al="" trastorn="" de="" les="" hormones="" sexuals,="" les="" rates="" model="" perimenopàusiques="" es="" van="" replicar="" amb="" èxit.="" en="" comparació="" amb="" el="" grup="" mc,="" cada="" grup="" de="" fàrmacs="" podria="" augmentar="" significativament="" els="" nivells="" d'e2,="" t="" al="" sèrum="" i="" reduir="" els="" nivells="" de="" fsh="" (p=""><0, 01);="" el="" grup="" pgc-md,="" gc="" podria="" reduir="" significativament="" els="" nivells="" elevats="" de="" lh="" (p=""><0, 01),="" pgc-hd="" podria="" reduir="" significativament="" el="" nivell="" de="" lh="" (p="">< 0,="" 05);="" pgc-ld="" podria="" reduir="" el="" nivell="" de="">

A la figura 3 (E, F), en comparació amb el grup BC, el nivell de GnRH del grup MC al sèrum va augmentar significativament i el nivell de -EP al plasma es va reduir significativament (P <{2}}. 01),="" s'indica="" que="" l'ablació="" ovàrica="" incompleta="" condueix="" a="" un="" trastorn="" de="" les="" hormones="" sexuals="" en="" les="" rates="" model="" perimenopàusiques,="" i="" les="" hormones="" relacionades="" secretades="" per="" l'hipotàlem="" també="" es="" van="" desordenar="" a="" causa="" de="" la="" regulació="" de="" la="" retroalimentació="" negativa.="" en="" comparació="" amb="" el="" grup="" mc,="" el="" nivell="" de="" gnrh="" a="" cada="" grup="" de="" fàrmacs="" es="" va="" reduir="" significativament="" (p=""><0.01); el="" nivell="" de="" -ep="" va="" augmentar="" significativament="" al="" grup="" pgc-hd,="" pgc-md,="" gc="" (p=""><0, 01),="" el="" nivell="" de="" -ep="" al="" plasma="" es="" va="" elevar="" significativament="" a="" pgc-ld="" (p="">< 0,="">

3.4. Efecte dels nivells de BGP en sèrum en rates model perimenopàusiques

Es pot veure a la figura 4 que el nivell de BGP en sèrum al grup MC era significativament inferior al grup BC (P <0.01), cosa="" que="" indica="" que="" el="" nivell="" de="" bgp="" en="" les="" rates="" model="" perimenopàusiques="" amb="" ovaris="" incomplets="" es="" van="" reduir.="" en="" comparació="" amb="" el="" grup="" mc,="" els="" nivells="" de="" bgp="" al="" grup="" pgc-hd,="" pgc-md,="" pgc-ld,="" gc="" van="" augmentar="" significativament="" (p=""><0,>

3.5. Efecte de ER, AR en rates model perimenopàusiques

Es pot veure a la figura 5 que, en comparació amb el grup BC, els nivells d'ER i AR a les rates model perimenopàusiques es van reduir significativament (P <0.01), va="" indicar="" que="" l'hormona="" es="" van="" reduir="" els="" receptors="" dels="" teixits="" relacionats="" amb="" el="" cos="" de="" les="" rates="" model="" perimenopàusiques="" causades="" per="" una="" ovariectomia="" incompleta,="" la="" qual="" cosa="" va="" reduir="" els="" efectes="" biològics="" dels="" estrògens="" i="" els="" andrògens.="" com="" es="" mostra="" a="" la="" figura="" 5="" (a,="" b,="" c),="" en="" comparació="" amb="" el="" grup="" mc,="" cada="" grup="" de="" fàrmacs="" podria="" augmentar="" significativament="" el="" nivell="" d'er="" a="" l'hipotàlem,="" la="" hipòfisi="" i="" l'úter="" (p=""><{10}},01); a="" partir="" de="" la="" figura="" 5="" (d),="" els="" nivells="" d'ar="" a="" l'hipotalàmic="" del="" grup="" pgc-hd,="" pgc-md,="" gc="" van="" augmentar="" significativament="" (p=""><0,>

3.6. Efecte de la morfologia patològica de l'úter en rates model perimenopàusiques

Segons els canvis en l'endometri, les glàndules i les capes musculars de les rates de cada grup, es van utilitzar criteris semiquantitatius per classificar la histopatologia en quatre nivells de "-, més, més més, més més més". A partir de la prova de Ridit, es pot veure a la figura 6 i a la taula .1 que, en comparació amb BC, l'úter de MC va mostrar canvis patològics significatius (P <0.01). en="" comparació="" amb="" mc,="" cada="" grup="" de="" fàrmacs="" podria="" millorar="" significativament="" les="" lesions="" patològiques="" dels="" teixits="" de="" l'úter="" (p=""><0,>

3.7. Efecte de la morfologia patològica sobre el teixit ovàric en rates model perimenopàusiques

A partir dels canvis dels fol·licles ovàrics, el cos luti, les cèl·lules de la granulosa i els vasos sanguinis a diferents nivells en els grups experimentals, es van adoptar els criteris semicuantitatius per classificar la morfologia del teixit patològic en quatre nivells: "-, més , més més , més més més". A partir de la prova de Ridit, es pot veure a la figura 7 i a la taula .2 que, en comparació amb el grup BC, l'ovari del grup MC mostrava lesions patològiques significatives (P <0.01. ).="" en="" comparació="" amb="" el="" grup="" mc,="" cada="" grup="" de="" fàrmacs="" podria="" millorar="" significativament="" els="" canvis="" patològics="" del="" teixit="" ovàric="" (p=""><0,>

3.8. Efecte de la morfologia del teixit del tim en rates model perimenopàusiques

Es pot veure a la figura 8 que el gruix de l'escorça del tim al grup MC va disminuir significativament en comparació amb el grup BC (P <0.01), cosa="" que="" indica="" que="" l'atròfia="" del="" tim.="" es="" va="" observar="" en="" les="" rates="" model="" perimenopàusiques.="" en="" comparació="" amb="" el="" grup="" mc,="" tots="" els="" grups="" podrien="" augmentar="" significativament="" el="" gruix="" cortical="" del="" tim="" (p=""><0,>

Fig. 8. Efecte de la morfologia patològica del teixit del tim en rates model perimenopàusiques. (A): Canvis patològics del timus (HE × 200); (B): gruix timicocortical (μm); A B, "a" representa que hi ha una diferència significativa entre el grup MC i el grup BC (P <0,01); "b"="" representa="" que="" hi="" ha="" una="" diferència="" significativa="" entre="" els="" diferents="" grups="" d'administració="" i="" el="" grup="" mc="" (p=""><0, 01),="" n="" ​​="12">

3.9. Efectes de la morfologia del teixit de la melsa en rates model perimenopàusiques

Es pot veure a la figura 9 que, en comparació amb BC, el volum dels nòduls de la melsa del grup MC es va reduir significativament (P <0.01), cosa="" que="" indica="" que="" es="" va="" observar="" l'atròfia="" de="" la="" melsa="" en="" les="" rates="" model="" perimenopàusiques.="" en="" comparació="" amb="" mc,="" el="" nivell="" de="" volum="" dels="" nòduls="" esplènics="" va="" augmentar="" significativament="" al="" grup="" pgc-hd,="" pgc-md,="" gc="" (p=""><0,>

Fig. 9. Efecte de la morfologia patològica de la melsa de rates model perimenopàusiques. (A): Histopatologia de la melsa (HE × 200); (B): Gruix dels nòduls esplènics (μm); A B, "a" representa que hi ha una diferència significativa entre el grup MC i el grup BC (P <0,01); "b"="" representa="" que="" hi="" ha="" una="" diferència="" significativa="" entre="" els="" diferents="" grups="" d'administració="" i="" el="" grup="" mc="" (p=""><0, 01),="" n="" ​​="">

4. Discussió

4.1. Selecció de models animals

Amb el desenvolupament de la investigació sobre la síndrome perimenopausa, també sorgeixen contínuament els mètodes de preparació de diversos models animals perimenopàusics, com ara models animals de castració, destrucció per irradiació de raigs X del model animal ovàric (Li et al., 2012), {{ 2}}anell de vinil Model animal d'esgotament del fol·licle d'etilè (Brooks et al., 2016), un model animal de lesió ovàrica induïda per l'alcohol (Huang et al., 2007), un model animal de depressió perimenopausal (Miao et al., 2017a,b), un model animal de síndrome perimenopausa amb sofocos (Zhang et al., 2010), model animal natural perimenopausa (Cai et al., 2007), etc. Diferents models animals tenen les seves pròpies aplicacions i les seves característiques. Aquest estudi es basa en l'anàlisi del model animal de les característiques dels símptomes clínics de la síndrome perimenopàusica (Tian et al., 2015) d'acord amb el nou mètode d'avaluació del model animal de medicina tradicional xinesa establert a les primeres fases del nostre laboratori (Tian et al., 2015). al., 2017a,b) i la redacció d'un model animal per a la síndrome perimenopausa (Draft) (Miao et al., 2018). En aquest estudi es van utilitzar rates model perimenopàusiques amb el mètode de castració incompleta, i aquest model animal s'utilitza àmpliament per estudiar dones perimenopàusiques amb osteoporosi, obesitat, aterosclerosi i altres afeccions, i també va utilitzar els estudis sobre factors relacionats amb l'acció dels estrògens, com ara la relació entre estrògens i autoimmunitat, càncer (Sun i Jin, 2005), i el model té una alta taxa d'èxit, madur i estable, i és àmpliament utilitzat pels investigadors. A més, l'ovari no només sintetitza estrògens sinó que també participa en els del cosimmunefunció, secretant i sintetitzant altres hormones. I la funció dels ovaris perimenopàusics humans no es perd completament, el model animal de castració incompleta està més a prop de la perimenopausa humana. És més coherent amb les característiques dels símptomes clínics.

4.2. Selecció de control positiu

Aquest estudi va prendre la càpsula Gengnian'an com a fàrmac de control positiu, la càpsula Gengnian'an és un fàrmac reconegut clínicament per al tractament de la síndrome perimenopausa, pot millorar eficaçment els símptomes clínics de la síndrome perimenopausa de la febre mareal amb sudoració, vertigen i tinnitus, vigília, inquietud, i altres. I estudis clínics i experimentals han demostrat que la càpsula Gengnian'an regula l'endocrí iimmunefuncions de les pacients perimenopàusiques en el seu conjunt, i podria millorar els símptomes clínics de les dones perimenopàusiques de diverses maneres. Té un bon efecte terapèutic sobre la síndrome perimenopausa (Ou et al., 2011; Wang et al., 2010; Yu et al., 2010; Li i Liu, 2011; Xie, 2003).

FeniletanoideglicòsidsdeCistancheherbatéNeuroendocrí-immunefunció

4.3. Efectes sobre el sistema neuroendocrí

L'eix HPO humà és un sistema neuroendocrí coordinat i està controlat pel sistema nerviós central. En circumstàncies normals, l'hipotàlem secreta GnRH i promou la síntesi i l'alliberament de FSH i LH a la hipòfisi, afavorint així la secreció d'hormones sexuals i el creixement i desenvolupament dels fol·licles. La interacció de l'HPO manté l'endocrí reproductor femení relativament estable. Quan les dones entren en el període perimenopausa, la funció ovàrica disminueix, la secreció d'estrògens disminueix i la retroalimentació negativa a l'hipotàlem i la hipòfisi es debilita, la glàndula pituïtària segrega una gran quantitat de FSH i LH, donant lloc a un desequilibri de l'HPO, un trastorn. d'un sistema endocrí, i així assistir als símptomes de sofocos, sudoració, osteoporosi i altres símptomes relacionats.

Els canvis en el contingut de FSH i LH són expressions directes de la funció de secreció pituïtària. Els canvis en el contingut de GnRH i -EP reflecteixen directament l'estat de secreció de l'hipotàlem a l'eix HPO. La secreció d'E2 i T està determinada per l'estat funcional de l'ovari. L'hipotàlem, la hipòfisi, l'úter i altres teixits tenen distribució ER, AR es distribueix àmpliament al sistema nerviós central i a l'escorça cerebral, de manera que pot representar la funció de l'eix HPO i reflectir l'estat del sistema neuroendocrí on es detecta la FSH. , LH, GnRH, - EP, E2, T, ER, AR en els teixits, sèrum i plasma pertinents. A més, el nivell de BGP pot reflectir directament l'activitat dels osteoblasts (Xun i Wang, 2017), els estrògens poden inhibir el nombre i l'activitat dels osteoclasts, té un impacte en el metabolisme ossi, la determinació d'aquest índex pot reflectir la rata perimenopausa. cas d'osteoporosi. Per tant, aquest experiment va provar els indicadors bioquímics anteriors i va observar els canvis patològics de l'úter i l'ovari en rates perimenopàusiques, per tal de determinar millor l'efecte defeniletanoideglicòsidssobre el sistema neuroendocrí de rates perimenopàusiques.

4.4. Efectes sobre la funció immune

La glàndula tim és un centre importantimmuneòrgan (Han i Lu, 2017), i també és un òrgan endocrí. Durant el període de perimenopausa, a causa de la manca d'estimulació fisiològica d'estrògens i la reducció dels receptors d'estrògens intracel·lulars, es pot reduir l'estructura del tim i es pot reduir la secreció de timosina, l'atròfia del tim inevitablement afectarà directament la cèl·lula.immunefunció i té un efecte indirecte sobre la immunitat humoral. Les cèl·lules immunoactives del tim poden alliberar factors polipeptídics i passar la informació al sistema neuroendocrí, produint respostes fisiològiques o fisiopatològiques rellevants, com ara que el nivell d'estrògens es redueix, pot reduir la producció d'IL-2 , -EP, i altres substàncies immunomoduladores enimmunecèl · lules. La melsa és el perifèric més granimmuneòrgan i també és un lloc per rebre estimulació antigènica i resposta immune. La melsa i el tim són components importants del sistema immunitari del cos. Per tant, el del cosimmuneLa funció pot reaccionar indirectament amb l'índex del tim i la melsa.

En aquest article, a través de l'estudi del tim, l'índex d'òrgans de la melsa, els canvis histopatològics, el gruix cortical del tim, el gruix dels nòduls esplènics, etc., respon que la PGC té l'efecte de millorar elimmunefunció de rates model perimenopàusiques, i millora dels canvis patològics del tim i la melsa.

5. Conclusió

Cada dosi de PGC no només podria contrarestar el trastorn de les hormones sexuals (E2, T, FSH, LH) en la síndrome perimenopausa, augmentar els nivells d'hormones sexuals, sinó també millorar el desequilibri dels nivells del receptor d'andrògens (ER, AR), i també millorar el cosimmuneFunciona i corregeix l'osteoporosi, pot millorar i restaurar l'índex d'òrgans de les organitzacions relacionades i millorar els canvis patològics de l'úter, el tim i la melsa. A més, en comparació amb GC, PGC no té cap diferència significativa en el moviment horitzontal-vertical, l'índex d'òrgans, el trastorn de les hormones sexuals, etc. Fins i tot amb la millora del nivell d'E2 en el sèrum, va reduir el nivell de FSH en el sèrum, va millorar el nivell d'expressió d'ER a l'úter i hipotalàmic, i els canvis patològics dels teixits relacionats que tenen més eficàcia que el GC, especialment el PGC-HD i el PGC-MD. Això indica que el PGC està regulat pel sistema endocrí iimmunesistema en conjunt, no només juga el paper dels estrògens, sinó que millora els símptomes i la qualitat de vida mitjançant diversos mecanismes, proporciona una base experimental per a una àmplia gamma d'aplicacions clíniques per a Desertliving.Cistancheherbai desenvolupament de nous fàrmacs per a les medicines tradicionals xineses. En el seguiment d'aquest estudi s'estan duent a terme mecanismes rellevants per tal d'aclarir el mecanisme d'acció concret defeniletanoideglicòsidsdel neuroendocrí-immunexarxa en el tractament de la síndrome perimenopausa.

A més, aquest estudi va demostrar que la PGC podria augmentar el nivell de BGP en sèrum de rates model perimenopausa, i té un efecte sobre el metabolisme ossi, cosa que suggereix que la PGC pot tenir un millor efecte terapèutic sobre l'osteoporosi causada per la síndrome de la perimenopausa, la investigació rellevant. que l'osteoporosi causada per la síndrome de la perimenopausa es pugui dur a terme en una fase posterior, i desenvolupar noves aplicacions. Aquest estudi proporciona una bona base experimental per al nou ús clínic del PGC, i aporta noves idees de recerca per a l'estudi de fàrmacs similars.

Declaració de les contribucions de l'autor

Mingan Miao i Xiumin Li van dissenyar i guiar els experiments, Mingsan Miao, Xiumin Li, Shuo Tian, ​​Ming Bai, Yanyi Wu i Zhenzhen Wei van realitzar els experiments i van analitzar les dades mesurades, Miao Mingsan i Xiumin Li va fer la conclusió final. Tots dos autors van revisar el manuscrit.

Agraïments

Base nacional de cooperació internacional (2016–65); Estudiós de la Xina central (162101510003); Avenç científic i tecnològic de la província de Henan (162102310181). Donem les gràcies al Sr. Henry Ehrlich per llegir i editar el nostre manuscrit.

FeniletanoideglicòsidsdeCistancheherbatéNeuroendocrí-immunefunció

Referèncias

Alvarado-García, A., Hernández-Quijano, T., Hernández-Valencia, M., Negrín-Pérez, MC, Ríos-Castillo, B., València-Pérez, GU, Vital-Reyes, VS, BasavilvazoRodríguez, MA, Torres-Arreola, LP, Ortiz-Luna, GF, Sánchez-Aguirre, F., Montaño-Uscanga, A., 2015. Diagnòstic i tractament de la postmenopausa i perinemopausa. Reverent Med. Inst. Mex. Segur Soc. 53, 214–225.
Brooks, HL, Pollow, DP, Hoyer, PB, 2016. El model de ratolí VCD de la menopausa i la perimenopausa per a l'estudi de les diferències de sexe en la malaltia cardiovascular i la síndrome metabòlica. Fisiologia 31, 250–257.
Cao, S., Tian, ​​S., Bai, M., Liu, SY, Jia, JJ, Miao, MS, 2016. Efectes dels glucòsids totals de Curculigo orchioides en el model de perimenopausa del ratolí d'organització i òrgans relacionats Morfologia. Bangla Desh J. Pharmacol. 11, S72–S81.
Cai, X., Huang, H., Wang, L., 2007. Avenços en la investigació sobre models animals climatèrics. Revista xinesa de fórmules mèdiques tradicionals experimentals 13, 71–73.
Han, SH, Lu, JB, 2017. L'efecte de la timectomia sobre el cos i noves teràpies alternatives. Chin J Cell Mol Immunol 12, 1722–1726.
Huang, C., Zhu, XF, Ye, P., 2007. Avenços en la investigació experimental amb animals sobre la prevenció i el tractament de la síndrome climatèrica mitjançant la medicina tradicional xinesa. Revista de la Universitat de Jiangxi de TCM 19, 92–93.
Lobo, RA, Davis, SR, De Villiers, TJ, Gompel, A., Henderson, VW, Hodis, HN, Lumsden, MA, Mack, WJ, Shapiro, S., Baber, RJ, 2014. Prevenció de malalties després de la menopausa . Climateric 17, 540–556.
Li, H., Liu, GZ, 2011. Estudi clínic sobre el tractament de la síndrome climatèrica per càpsula gengnianan. J. Shanxi Coll. Tradit. Barbeta. Med. 2, 34–35.

Li, Y., Song, YY, Zhang, HQ, 2010. Avenços en la investigació de components químics i activitat medicinal de cistanche. Barbeta. Planta salvatge Res. 29, 7–11.

Liu, YL, Song, ZM, Ding, Y., 2010. Estudi experimental sobre la relació entre la depressió de la menopausa i l'hipocamp i l'escorça 5-HTR1A mRNA. Recerca en medicina i matèria mèdica de Lishizhen 21, 1898–1900.

Li, RQ, Bai, M., Miao, MS, 2012. Característiques i perspectives dels models animals de la síndrome de la menopausa. Xina revista de medicina xinesa 27, 708–710.
Miao, MS, Guo, L., Wang, T., Wang, T., Cao, S., Liu, SY, Fang, XY, 2015. Efectes dels glucòsids totals curculigo en el model de rates de síndrome perimenopausal basat en la teoria de les hormones endocrines. Clin bàsic. Pharmacol. Toxicol. 117, 5–6.
Miao, MS, Tian, ​​S., Bai, M., Xin, WY, 2017a. Glucòsids totals del rizoma Curculigo al model de ratolins de període perimenopausal. Pak. J. Pharm. Ciència. 30, 975–978.
Miao, MS, Tian, ​​S., Guo, L., Bai, M., Fang, XY, Liu, SY, 2017b. L'efecte del curculigoside en un model de ratolí de depressió perimenopausa. Saudita J. Biol. Ciència. 24, 1894–1902.
Miao, MS, Tian, ​​S., Xin, WY, Bai, M., 2018. Estàndard (esborrany) per a la preparació del model de síndrome perimenopausal. China Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy 3, 996–1000.
Ou, Y., Zhang, YP, Xu, J., Kong, DM, 2011. Estudi experimental sobre l'efecte del compost de ligustrum lucidum en la regulació del neuro-endocrí -immunefunció en ratolins femelles d'edat. J. Guiyang Coll. Tradit. Barbeta. Med. 33, 18–19.
Perrone, G., Capri, O., Galoppi, P., Patacchioli, FR, Bevilacqua, E., De Stefano, MG, Brunelli, R., 2013. Símptomes de la menopausa després de la suspensió de la teràpia de substitució hormonal a llarg termini en dones menors de 60 anys: un seguiment de 3-anys. Ginecol. Obstet. Investig. 76, 38–43.
Peng, X., 2014. Desenvolupaments recents en la medicina tradicional xinesa per a la síndrome perimenopàusica. CJGMCM 29, 1118–1120.
Shi, HB, Miao, YB, Zhong, CL, Wang, W., 2007. Efecte del grànul de Fushun sobre el sistema neuroendocrí en rates amb deficiència de yin de la menopausa. Revista xinesa de ciència i tecnologia mèdica tradicional 14, 16–17.
Sun, YH, Jin, RM, 2005. Progrés de la investigació sobre l'establiment de models animals de síndrome climatèric femení. Recerca en medicina i matèria mèdica de Lishizhen 16, 570–573.
Tian, ​​S., Miao, MS, Bai, M., Wei, ZZ, 2017a.Feniletanoideglicòsidsdecistanchesobre el model de síndrome de la menopausa en ratolins. Farmàcia saudita. J. 25, 537–547.
Tian, ​​S., Bai, M., Miao, MS, 2015. Característiques clíniques en models animals basats en la síndrome perimenopausa. Revista xinesa de fórmules mèdiques tradicionals experimentals 21, 217–221.
Tian, ​​S., Cao, LH, Miao, MS, Bai, M., 2017b. Un nou mètode per a l'avaluació de models animals utilitzats en la medicina tradicional xinesa basat en les característiques clíniques de la medicina xinesa i occidental. Farmacologia i Clíniques de Materia Medica Xinesa 33, 165–169.
Wang, R., Fu, Q., Li, LF, Ma, SP, 2010. Efecte de la càpsula de gengnianan sobre l'ovariectomia de ratolins femelles. Recerca farmacèutica i clínica 18, 247–249.
Wang, T., Miao, MS, Li, Y., Li, M., Zhang, Y., Tian, ​​S., 2016. Efecte dels flavonoides de Monomorium sobre la morfologia del model de ratolins de depressió perimenopausa. Saudi Pharmacertical Journal 24, 322–328.
Wang, WJ, Yu, J., Li, DJ, Bu, SZ, 1999. Observació sobre els canvis dels nivells d'ER esplènic, IL-2 i TNF en rates femelles envellides. Chin J Endocrinol Metab 15, 225–228.
Xie, CX, 2003. Es va utilitzar una càpsula georgiana per tractar 100 casos de síndrome climatèrica. Revista Hunan de medicina tradicional xinesa 6, 44.
Xun, CF, Wang, LZ, 2017. Correlació entre els nivells d'estrògens i els canvis dels marcadors metabòlics ossis en dones perimenopàusiques. Cura de la salut materna i infantil de la Xina 32, 1229–1232.
Yu, LL, Kong, DM, Zhang, YP, 2010. Estudi experimental sobre els efectes de la càpsula gengnianyi sobre la funció d'increció en rates ovariectomitzades. Medicina de Lishizhen i investigació mèdica de materials 21, 3131–3132.
Zhang, Y., Miao, MS, 2011. Estudi de la medicina tradicional xinesa d'ús comú que tonifica el yang renal en el tractament de la síndrome climatèrica. Xina revista de medicina xinesa 26, 1084–1087.
Zhao, W., Pan, YN, 2013. Avanç en la investigació de l'activitat farmacològica defeniletanoideglicòsidsen cistanche. Medicina Tradicional Àsia-Pacífic 9, 77–79.
Zhang, YP, Wang, XX, 2001. Efecte de la píndola de kunningan sobre l'endocrí reproductiu.immunefunció en pacientsambla síndrome climatèrica. ITCM 18, 52–54.
Zhang, XP, Liu, ZP, Xiang, Q., Wang, W., Zhang, X., Li, N., 2010. Estudi comparatiu de dos models animals de sofocos de dones menopàusiques. Investigació en salut 39, 110–111.