Estudi sobre l'estàndard de qualitat de Cistanche Deserticola Gouqi Jujuepian

PU Hongli, ZHOU Bo, WEI Shuchang (Escola de Farmàcia, Universitat de Medicina Xinesa de Gansu, Lanzhou, Gansu, 730000, Xina)

ResumObjectiu Establir els mètodes de control de qualitat de Ｒoucongrong Gouqi Jujuepian．Mètodes TLC es va utilitzar per identificar Ｒoucongrong (Cistanches Herba) i Gouqizi (Lycii Fructus). una columna Hypersil BDS C18 (250．0 mm×4．6 mm,5 μm) a 25 graus ．Es va utilitzar una elució isocràtica amb metanol i 0．1 per cent d'àcid fòrmic a un cabal d'1 ml/min. Es va injectar una alíquota de 20 μL de solució de mostra a la columna i la longitud d'ona de detecció era de 330 nm. Els resultats de les característiques dels punts TLC de Ｒoucongrong (Cistanches Herba) i Gouqizi (Lycii Fruc tus) eren clars amb una forta especificitat. Els rangs lineals d'echinacòsid i verbascòsid eren de 41．8 a 418．0 ug/ml (r {{16}． {17}}) i de 40 a 400 ug/ml ( r=0． 999 9) ． La mitjana de recuperacions de mostres va ser de 99. 58% (ＲSD=0．85%) i 99．31% (ＲSD= 1．13%) ．Conclusió Els mètodes descrits en aquest article es poden utilitzar de manera científica i eficaç per avaluar la qualitat de Ｒoucongrong Gouqi Jujuepian.

Paraules clau: cistanche deserticola Gouqi Jujuepian; HPLC; TLC; equinacòsid; verbascosid; estàndard de qualitat

Cistanche deserticola i baies de goji

Cistanchedeserticolai les pastilles masticables de goji es componen de Cistanche i baies de goji, que tenen funcions per a la salut com retardar la fatiga i accelerar l'eliminació de la fatiga. Ajuden a regular les funcions del cos, milloren la immunitat i eliminen les condicions de salut.Actualment, a causa de les llargues jornades laborals i de l'alta pressió laboral, hi ha moltes persones en algunes indústries de la Xina que estan cansades i amb problemes de salut [1-3]. Aquests grups industrials són la principal població adequada per a aquest aliment saludable. L'hem desenvolupat com una pastilla masticable que es pot administrar a temps fins i tot en absència d'aigua. Després de mastegar la pastilla, és fàcil d'empassar i pot accelerar la dissolució del fàrmac, millorant l'efecte terapèutic [4]. Aquest article estudia els estàndards de qualitat de les pastilles masticables, i els mètodes d'anàlisi qualitatius i quantitatius obtinguts poden reflectir objectivament la qualitat interna de les pastilles masticables i servir com a estàndards de control de qualitat per a la formulació.

Materials medicinals xinesos com el cistanche deserticola

1. Instrument i fàrmac de prova

1.1 Instruments

Cromatògraf líquid d'alt rendiment Agilent1260 (Agilent, EUA), espectrofotòmetre ultraviolat UV Bluestar B (Beijing Laibetai Technology Co., Ltd.), analitzador ultraviolat de tres vies WFH-203 (ZF{-1) ( Shanghai Jingke Industry Co., Ltd.), Balança electrònica BT125D 1/100000 (Sartorius Scientific Instrument Co., Ltd.), DZF-6090 forn d'assecat al buit (Shanghai New Scientific Instrument Co., Ltd.), SY{ {10}}Màquina de neteja ultrasònica T (Shanghai Shengyuan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.), pel·lícula de poliamida (Fàbrica de plàstic bioquímic de Zhejiang Taizhou Luqiao Sijia).

1.2 Medicaments i reactius:

Equinacetinasubstància de referència (número de lot 111670-201505), substància de referència al costat de la piscina (número de lot 111530-201411), substància de referència Cistanche deserticola (número de lot 121101-200402) i substància de referència Lycium barbarum (número de lot {{3 }}) es van comprar a l'Institut Xinès per al Control d'Aliments i Medicaments. Les pastilles masticables Cistanche deserticola ma i Lycium barbarum van ser fetes per si mateixes pel Laboratori de Medicina Xinesa de l'Escola de Farmàcia de la Universitat de Medicina Tradicional Xinesa de Gansu, i el metanol era cromatogràficament pur, Tots els altres reactius són purs analítics.

Equinósida, el principal component químic de Cistanche deserticola

2 Mètodes i resultats

2.1 Identificació per cromatografia en capa fina (TLC).

2.1.1 Identificació TLC de Cistanche deserticola

Preneu una quantitat adequada de pastilles masticables de Cistanche deserticola i baies de goji i tritureu-les en pols. Agafeu 1,5 g de pols fina i poseu-lo en un matràs cònic. Afegiu 20 ml de metanol i tracteu-ho amb ultrasons (potència 250 W, freqüència 40 kHz) durant 15 minuts. Refredar i filtrar. Concentreu el filtrat fins a gairebé assecar-se i dissoleu el residu en 5 ml de metanol com a solució de prova. Prendre 1 g de l'herba medicinal de referència Cistanche deserticola i preparar una solució de l'herba medicinal de referència utilitzant el mateix mètode. Prendre 0,5 g d'una mostra negativa sense Cistanche deserticola i preparar una solució de control negatiu utilitzant el mateix mètode que la solució de prova. Agafeu 0,5 cada una de la solució de prova, la solució de control negatiu i la solució medicinal de referència μ L. Col·loqueu les mostres a la mateixa pel·lícula de poliamida, desenvolupeu-les amb aigua d'àcid acètic glacial metanol (2:1:7) com a agent de desenvolupament, traieu-les i assequeu-les a l'aire. , i examinat sota llum ultraviolada (365 nm). Al cromatograma de la mostra de prova, hi ha 4 punts amb el mateix color a les posicions corresponents del cromatograma del material medicinal de referència i el control negatiu no té cap interferència. Consulteu la figura 1 per obtenir més informació.

Principals components químics de Cistanche deserticola

Feu clic aquí per veure els productes Cistanche

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

2.1.2 Identificació TLC de baies de goji

Agafeu una quantitat adequada de pastilles masticables de Cistanche deserticola i baies de goji, tritureu-les en pols, peseu 2,5 g de pols fina en un tub de centrífuga, dissoleu-les en 35 ml d'aigua, centrifugueu i extreu el sobrenedant amb 15 ml d'acetat d'etil. Agafeu una capa d'acetat d'etil i concentreu-la a 1 ml com a solució de prova. Agafeu 0,5 g de baia de goji com a material de referència, talleu-lo a trossos petits, afegiu-hi 35 ml d'aigua, escalfeu i bulliu durant 15 minuts, deixeu-ho refredar, centrifugueu i extreu el sobrenedant amb 15 ml. d'acetat d'etil. Agafeu una capa d'acetat d'etil i concentreu-la a 1 ml com a solució de material de referència. Agafeu 2 g de mostres negatives sense baies de goji i prepareu una solució de control negatiu mitjançant el mètode de preparació de la solució de prova. Agafeu 2 mostres de la solució de prova, 2 mostres de la solució de control negatiu i 2 mostres de la solució medicinal de referència μ L. Mostres puntuals a la mateixa pel·lícula de poliamida, desenvolupeu-les amb acetat d'etil cloroform àcid fòrmic (3:2:1) com l'agent revelador, retirar, assecar a l'aire i examinar sota llum ultraviolada (365 nm). Al cromatograma de la mostra de prova, hi ha un punt amb el mateix color a la posició corresponent amb el material medicinal de referència i el control negatiu no té cap interferència. Consulteu la figura 2 per obtenir més informació.

1. Materials medicinals de referència; 2, 3, mostra de prova; 4. Control negatiu.

Figura 1 Diagrama TLC de Cistanche deserticola

1. Materials medicinals de referència; 2. Control negatiu; 3. Mostra de prova.

Figura 2 Diagrama TLC de baies de goji

2.2 Anàlisi quantitativa de glicòsids de Fructus Moringa i Echinacetina

2.2.1 Preparació de la solució de referència Peseu amb precisió les quantitats adequades d'equinàcia i proporcioneu substàncies de referència, col·loqueu-les en un matràs aforat marró i afegiu-hi un 50 per cent de metanol per preparar una solució de referència mixta que contingui 0.836 mg d'equinàcia i 0,799 mg de piscina per mil·lilitre i obtenir [5].

2.2.2 Preparació de la solució d'assaig

Agafeu una quantitat adequada de pastilla masticable Cistanche deserticola nespra, tritureu-la en pols (passeu per un tamís de 60 malla), peseu 1,4 g amb precisió, col·loqueu-la en un matràs aforat marró de 50 ml, afegiu-hi un 50 per cent de metanol a la bàscula. , agiteu-lo, peseu-lo, remulleu-lo durant 30 min, tracteu-lo amb ultrasons (potència 250 W, freqüència 40 kHz) durant 40 min, refredeu-lo, peseu-lo, utilitzeu un 50 per cent de metanol per compensar la reducció de pèrdues, agiteu-lo aixecar-lo, quedar-se quiet, agafar el sobrenedant, utilitzar un filtre de 0,45 μ amb una membrana microporosa i agafar el filtrat continu per obtenir [6].

Principals components químics de Cistanche deserticola

2.2.3 Preparació de la solució de control negatiu

Agafeu una quantitat adequada de mostra negativa sense Cistanche deserticola, tritureu-la en pols (tamisada amb un tamís de malla 60), peseu amb precisió 1,4 g i prepareu una solució de control negatiu segons el mètode de "2.2.2".

2.2.4 Condicions cromatogràfiques

La columna cromatogràfica és Hypersil BDS C18 (250.0 mm × 4．6 mm,5 μm) La longitud d'ona de detecció és de 330 nm, amb metanol com a fase mòbil A i àcid fòrmic al 0,1 per cent. com la fase mòbil B. L'elució en gradient es realitza segons la Taula 1; Caudal 1 ml/min; La temperatura de la columna és de 25 graus. En les condicions cromatogràfiques anteriors, extreu el 20 per cent de la solució de referència, el 20 per cent de la solució de prova i el 20 per cent de la solució de control negatiu, respectivament μ Injecteu la mostra L i registreu el cromatograma, tal com es mostra a la figura 3. Els resultats va demostrar que altres components no interferien amb la determinació de la piscina i l'equinàcia, i la separació de la piscina i l'equinàcia era bona.

Taula 1 Condicions d'elució del gradient per a la fase mòbil de metanol (A) -0,1 per cent d'àcid fòrmic (B)

2.2.5 Inspecció de relacions lineals

Mesureu amb precisió {{0}}.5, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0 i 5.{ {31}} ml de solució de referència mixta d'equinàcia i al costat de la piscina, col·loqueu-los respectivament en matràs aforats marrons de 10 ml, diluïu-los amb metanol al 50 per cent a l'escala i determineu l'àrea del pic segons les condicions cromatogràfiques a "2.2.4". . La regressió lineal es va realitzar utilitzant el valor integral de l'àrea màxima com a ordenada (Y) i el volum d'injecció com a abscissa (X). Les equacions de regressió per a l'equinacòsid i la piscina es van calcular com a Y=1493.8X-8.0748 (r=0.{999 9) i Y{=1895.8X{{ 25}}.486 (r=0.999 9), respectivament. Els resultats van mostrar que les antocianines d'Equinàcia i Moringa estaven entre 41.8-418.0 i 40-400, respectivament μ Hi ha una bona relació lineal dins del rang de g/mL.

2.2.6 Prova de precisió

Mesureu amb precisió la solució de referència mixta de glucòsid d'equinàcia i 20 μ L al costat de la piscina. Injecteu 5 mostres consecutives i registreu l'àrea del pic. Els resultats van mostrar que els RSD de la pineal i de la piscina eren de 0, 62 per cent i 0, 51 per cent, respectivament, cosa que indica una bona precisió de l'instrument.

2.2.7 Prova d'estabilitat

Agafeu el mateix lot de la solució de prova i injecteu-lo a les 0, 4, 8, 16 i 32 hores respectivament, registrant l'àrea del pic. Els resultats van mostrar que la RSD de la pineal i la piscina era de l'1,30 per cent i l'1,35 per cent, respectivament, cosa que indica que la solució de prova era estable en 32 hores.

1. Substància de referència mixta; 2. Mostra de prova; 3. Control negatiu;

A. Equinacetina; B. Glucòsid de flors Maorui.

Figura 3 Diagrama de HPLC d'equinacetina i glicòsid de Fructus Moringae

2.2.8 Prova de repetibilitat

Prendre 5 mostres del mateix lot i preparar-les i mesurar-les en seqüència segons el mètode de preparació de la solució de prova. Els resultats van mostrar que la RSD de la pineal i la piscina eren del 0,82% i del 0,75%, respectivament, cosa que indica una bona repetibilitat d'aquest mètode.

2.2.9 Prova de recuperació de la mostra

Preneu 5 mostres amb continguts coneguts d'antocianina i antocianina, afegiu-les a les mostres de control d'antocianina i antocianina, prepareu la solució de prova segons el mètode de "2.2.2" i determineu la velocitat de recuperació segons les condicions cromatogràfiques de "2.2". .4". Els resultats van mostrar que les recuperacions mitjanes de glucòsid d'equinàcia i al costat de la piscina van ser del 99,58 per cent i del 99,31 per cent, respectivament, amb una RSD de 0,85 per cent i 1,13 per cent. Consulteu les taules 2 i 3 per obtenir més informació.

2.2.10 Determinació del contingut de la mostra

Utilitzeu el mètode de determinació anterior per determinar el contingut d'echinacòsid i al costat de la piscina en tres lots de mostres. Els resultats es mostren a la taula 4.

Taula 2 Resultats de la prova de taxa de recuperació de l'addició de glucòsids d'equinàcia

Taula 3 Resultats de la prova de taxa de recuperació per a l'addició de glucòsids de flors de Maorui

Taula 4 Resultats de la determinació del contingut de tres lots de mostres

3 Discussió

Com que Cistanche deserticola és el fàrmac dominant en la prescripció de comprimits masticables Cistanche deserticola i Lycium barbarum, representa una gran proporció de la formulació. Per tant, es va realitzar una anàlisi qualitativa i quantitativa de Cistanche deserticola i una anàlisi qualitativa de llavors de Lycium barbarum. El mètode utilitzat és senzill, sensible i té una forta especificitat, que pot tenir un bon paper de control de qualitat.

Suplement de Cistanche a prop meu

En l'anàlisi quantitativa, per aconseguir una millor dissolució de l'echinacòsid i la piscina, la pols de la mostra es va remullar primer en metanol al 50 per cent durant 30 minuts i després es va sotmetre a un tractament ultrasònic. Per determinar amb precisió el contingut d'echinacòsid i al costat de la piscina en pastilles masticables, es va investigar el temps d'extracció d'ultrasons. En comparació amb les mostres extretes durant 30, 40 i 50 minuts, es va trobar que l'echinacòsid i la piscina es poden extreure completament després de 40 minuts.. El mètode establert en aquest article pot controlar eficaçment la qualitat de les pastilles masticables.

referència:

[1] Gao Mingyou. Investigació sobre les activitats subsanitàries i esportives dels empleats del banc agrícola a les zones urbanes de la ciutat de Yulin [J]. Journal of Yulin University, 2015 (4): 60-64

[2] Li Huishang, Chen Minghai, Dong Xiaoxia, et al. Anàlisi de l'estat de salut i factors d'influència dels taxistes [J]. Xina Food and Nutrition Journal, 2009 (11): 62-64

[3] Ruan Huili, Ruan Ying, Li Yonghong. Investigació i anàlisi de l'estat de fatiga de les infermeres d'urgències [J]. Contemporary Journal of Nurses, 2015 (4): 98-100

[4] Shi Xinlei, Huang Shengwu. Progrés de la investigació sobre comprimits masticables [J]. China Pharmaceutical, 2008, 17 (14): 17-19

[5] Comissió Nacional de Farmacopea. Farmacopea de la República Popular de la Xina (Part 1) [M]. Beijing: Xina Medical Science and Technology Press, 2015:135

[6] Zhang Siju, Liu Li, Zhang Shuyun, et al. Estudi sobre els estàndards de qualitat dels materials medicinals Cistanche deserticola [J]. Revista Xinesa de Medicina Tradicional Xinesa, 2000, 25 (6): 359