La interleucina derivada de cèl·lules T-22 impulsa l'expressió de CD155 per part de les cèl·lules canceroses per suprimir la funció de les cèl·lules NK i promoure la metàstasi
Oct 10, 2023
RESUM
Tot i que les cèl·lules T poden exercir una potent immunitat antitumoral, un subconjunt de cèl·lules T helper (Th) que produeixen interleucina-22 (IL{-22) en tumors de mama i pulmó està relacionat amb resultats desagradables dels pacients. Aquí, vam examinar els mecanismes pels quals aquestes cèl·lules T contribueixen a la malaltia. En models murins de càncer de pulmó i mama, la supressió constitucional i específica de cèl·lules T d'Il22 va reduir les metàstasis sense afectar el creixement del tumor primari. La supressió del receptor IL-22 a les cèl·lules canceroses disminueix la metàstasi en un grau similar al que s'observa en ratolins amb deficiència d'IL-22-. IL-22 va induir una alta expressió de CD155, que es va unir al receptor activador CD226 a les cèl·lules NK. L'activació excessiva va provocar una disminució de les quantitats de CD226 i les cèl·lules NK deteriorades funcionalment, la qual cosa va augmentar la càrrega metastàtica. La senyalització IL-22 també es va associar amb l'expressió de CD155 en conjunts de dades humans i amb resultats pobres per als pacients. En conjunt, les nostres troballes revelen un circuit immunosupressor activat per IL-22 derivada de cèl·lules T que promou la metàstasi pulmonar.
Beneficis de cistanche tubulosa-Antitumor
INTRODUCCIÓ
El segell principal de la progressió neoplàsica i la principal causa de mortalitat relacionada amb el càncer és la capacitat de les cèl·lules canceroses de disseminar-se a llocs secundaris i formar metàstasis.1,2 La formació de metàstasis es pot prevenir mitjançant la immunovigilància que implica un assassí natural (NK), citotòxic. , i les cèl·lules T helper (Th) 1.3,4 En canvi, les cèl·lules T reguladores (Treg), els monòcits circulants i la IL-17A derivada de cèl·lules Th formen un microentorn immunosupressor, que permet l'escapament immunitari i promou metàstasis. 4–6 Per tant, és fonamental identificar les cascades de senyalització que defineixen la funció de les cèl·lules immunitàries pro- vs. anti-tumorigèniques. i, en humans, també pel subconjunt Th1, conegut per promoure el creixement de cèl·lules canceroses, millorar la migració, protegir de l'apoptosi, induir la transició epitelial-mesenquimal i mantenir la mare de les cèl·lules malignes.9–13 També afavoreix la carcinogènesi primerenca, actuant sobre lesions precursores o cèl·lules mare de càncer immadures.14–18 Cèl·lules productores d'IL-22-, principalment cèl·lules Th, però també cèl·lules T gamma delta (gd), cèl·lules T assassines naturals (iNKT) invariants i cèl·lules limfoides innates (ILC). ), s'han detectat en lesions de càncer primari.19–24 IL-22 s'expressa a nivells biològicament rellevants al carcinoma de mama, còlon, pulmó, gàstric i hepatocel·lular.9,11,12,25,26 En la majoria dels estudis. , la seva expressió s'associa amb un mal pronòstic, un estadi més alt de la malaltia i una progressió tumoral més ràpida.13,22–24,27–29 IL-22 actua exclusivament a través del receptor IL-22 (IL{{40 }}R) formada per dues subunitats, IL-22RA1 i IL{-10RB.30,31 L'acció de la IL-22 secretada està modulada per un inhibidor, la IL{{47} } proteïna d'unió (IL-22BP, IL{-22RA2), un homòleg de IL{-22RA1, que és produïda principalment per cèl·lules mieloides.32,33 En condicions d'estat estacionari, IL -22 és una citocina homeostàtica essencial a les barreres epitelials com l'intestí, el pulmó i la pell.34,35 En aquests llocs, IL-22 promou la protecció, la regeneració i la reparació per mantenir la integritat de la barrera,36, 37 i la seva absència agreuja la carcinogènesi induïda per la inflamació.13,38 En conjunt, aquestes dades posen de manifest les funcions àmplies i dependents del context de la IL-22 tant en condicions fisiològiques com patològiques. En unir-se al receptor, IL-22 activa les cinases Janus Jak1 i Tyk2 per fosforilar STAT3, STAT1 o STAT5, però IL-22 pot iniciar altres vies aigües avall, inclosa la cascada de proteïnes cinases activades per mitogens (MAPK). o senyalització PI3K-AktmTOR, depenent del context cel·lular.13,36,39-44 Aquesta diversitat de vies de senyalització es reflecteix per la multitud d'efectes fisiològics que s'han associat amb la senyalització IL-22, inclosos els descrits anteriorment, així com la protecció del dany genotòxic i la inducció de pèptids antibacterians, moc, citocines pro i antiinflamatòries i quimiocines.36,38,39,45,46. Les cèl·lules canceroses indueixen la producció d'IL-22 de cèl·lules Th en pacients amb càncer de mama i de pulmó.12,47,48 L'alliberament d'IL-1b impulsat per l'inflamsoma NLRP3 indueix la producció d'IL-22 a partir de cèl·lules T del tumor, i tant IL-22+ Les cèl·lules Th i una signatura NLRP3-IL{-1b es poden trobar en mostres de tumors de càncer de mama i de pulmó.48,49 Aquí ens vam proposar delimitar un mecanisme pel qual IL-22 promou progressió del càncer de mama i pulmó. Hem trobat que IL-22 afavoreix la propagació de metàstasi al pulmó, revelant un circuit en què la IL-22 va mediar la immunosupressió al nínxol metastàsic en promoure l'expressió de CD155 a les cèl·lules canceroses, que es va associar amb una disminució de l'expressió de CD226. sobre cèl·lules NK i producció reduïda d'interferó-g (IFNg). Les dades clíniques indiquen que l'activació d'aquestes vies està relacionada amb els resultats del pacient.
RESULTATS
Beneficis del suplement de cistanche: augmenta la immunitat
IL-22 afecta les cèl·lules canceroses disseminades en models de ratolins singènics de carcinoma de pulmó i mama
To understand the impact of the IL-22-IL-22R1 signaling axis on cancer progression, we analyzed syngeneic murine models of breast and lung carcinoma. As cancer patients mostly succumb to metastatic disease, we recapitulated this with phenotypically relevant models. We implanted either 4T1 breast cancer or Line-1 lung cancer cells subcutaneously (s.c.) in the right flank of wild-type mice (WT) and mice lacking IL-22 expression (Il22 / ) (Figure 1A). IL-22 did not impact the outgrowth of the primary tumors in either model (Figures 1B and 1C). Upon reaching pre-defined termination criteria (tumor >225 mm2 o ulceració), els pulmons eren el lloc metastàsic principal del nostre model amb metàstasis ocasionals trobades en altres llocs (no mostrades). Els ratolins Il22 / van demostrar una disminució de la disseminació metastàtica de cèl·lules Line-1 i 4T1 al pulmó en comparació amb animals de tipus salvatge independentment de la mida del tumor primari mitjançant diferents mètodes de detecció de metàstasi (figures 1B, 1C i S1A). També hem observat un fenotip metastàtic similar en un model ortotòpic de càncer de mama, on es van implantar cèl·lules 4T1 al coixinet de greix mamari (figura S2B). Tots els mètodes utilitzats de recompte macroscòpic cec, assajos clonogènics o histologia van mostrar una gran consistència en la detecció de menor càrrega metastàtica en Il22 / animals (figures 1B, 1C i S1C). Això implica el paper fonamental de la IL-22 en el procés metastàtic. A continuació, vam forçar la metàstasi mitjançant la injecció intravenosa de cèl·lules canceroses, que evita la necessitat de despreniment i invasió de teixits (figura 1D). Les injeccions intravenoses (iv) d'ambdues línies cel·lulars van reflectir el fenotip del model subcutani. De fet, podríem confirmar una càrrega metastàtica menor en Il22 / ratolins (figures 1E i 1F). Aquests resultats indiquen un paper específic de la IL-22 a les cèl·lules disseminades en circulació. Per discernir els efectes específics de la soca, vam utilitzar un model de càncer de mama E0771 (figura 1G).50,51 La injecció intravenosa de cèl·lules E0771- GFP va revelar una càrrega metastàtica disminuïda en Il22 / animals validats per citometria de flux (figures 1H i S1D). De la mateixa manera, vam observar una menor càrrega metastàtica al fetge dels ratolins quan es van injectar cèl·lules E0771-GFP intraesplènicament (figura S1E). Tot el pulmó esquerre dels ratolins injectats amb E0771-GFP es va netejar òpticament seguint un protocol iDISCO per quantificar metàstasis amb microscòpia de làmines de llum in situ (figura 1I).52 Aquí, els ratolins Il22 / mostraven una propensió reduïda a desenvolupar metàstasis. , mentre que la mida de les metàstasis visualitzades no variava i no tenia cap patró específic de la seva localització (figura 1J). En resum, IL-22 va actuar sobre les cèl·lules canceroses disseminades, permetent metàstasis de càncer de mama i de pulmó al pulmó.
Les cèl·lules T són la font rellevant d'IL-22 al nínxol metastàtic del pulmó
Abans vam identificar les cèl·lules T CD4+ com la font principal d'IL-22 en tumors primaris de pulmó humà i mostres de rentat broncoalveolar.12,47,48 Per delimitar la font d'IL-22 en el pulmons dels nostres models, vam injectar per via intravenosa cèl·lules E0771 a animals reporters Foxp3mRFP Il17aGFPIl22sgBFP i vam quantificar cèl·lules IL-22+ mitjançant citometria de flux (figures 2A i S2A).53 Les poblacions es van definir com a CD4+, CD{{15} }} i cèl·lules T doble negatives (DN) (CD4, CD8) ab (CD3+ gdTCR NK1.1 ), cèl·lules T gd (CD{3+ gdTCR+ NK1.1 ) i CD{{ 26}} Cèl·lules NK1.1+ i CD3 NK1.1+ (figures 2B i S2B). Hem observat un augment de la fracció de cèl·lules CD4+, CD8+ T i cèl·lules NK1.1+ que van produir IL-22 als pulmons d'animals injectats amb tumor ( Figures 2C, S2C i S2D). Aquí, les cèl·lules T CD4+ i CD8+ constituïen la majoria de cèl·lules productores de IL-22- en ratolins portadors de tumors (figura 2C). A més, vam identificar que aquestes cèl·lules T CD4+ produïen IL-22 però no IL-17A (figura 2D). Aquestes cèl·lules tenien una expressió baixa de CD44, confirmant el seu fenotip de memòria d'acord amb les nostres observacions anteriors (figura S2E).48 Per explorar aquestes troballes a través dels models, vam utilitzar una tinció intracel·lular per avaluar la producció d'IL-22 a la línia{ {56}} model sc, que va donar resultats similars excepte per a una fracció disminuïda de productors de cèl·lules T CD{8+ IL-22 (figures S2F-S2I). També podríem identificar que les cèl·lules IL-22+ no coexpressen IFNg, cosa que diferencia els productors IL-22 del ratolí del subconjunt Th1 (figura 2G).49 A més, vam utilitzar la microscòpia confocal en talls de precisió. rodanxes de pulmó d'animals reporters per interrogar la seva distribució espacial als pulmons de ratolins injectats amb tumor. Aquí, podríem identificar que aquests productors d'IL-22 i IL-17A es localitzen gairebé exclusivament als focus metastàtics (figura 2E). Tal com ha demostrat la citometria de flux, no hem trobat cap correlació entre IL-22 i IL-17una producció a partir de les cèl·lules informadores dels focus metastàtics, cosa que indica que IL{-22 i IL{-17 De fet, són produïts per dos subconjunts cel·lulars diferents. També vam confirmar que una gran part de les cèl·lules productores d'IL-22-són cèl·lules T CD4+ (figura 2E). Com que aquestes dades van indicar un paper predominant de les cèl·lules T en la producció d'IL-22, vam generar un ratolí Il22floxCd4cre amb una supressió condicional d'Il22 a totes les cèl·lules T madures (figura 2F). Quan es van desafiar amb cèl·lules E0771-GFP, els ratolins Il22floxCd4cre tenien una propensió reduïda a desenvolupar metàstasis al pulmó, que recordava el fenotip observat a l'Il22 / animals globals (figura 2F). Tanmateix, també podríem confirmar que la cre-recombinasa sota el control del promotor CD4 va abolir completament la producció d'IL-22 no només a CD4+, sinó també a les cèl·lules T CD8+ aïllades de la melsa. de ratolins Il22floxCd4cre i, per tant, aquest model no es va poder utilitzar per identificar una font específica d'IL-22 (figura S2J). Per confirmar el paper de les cèl·lules Th com a font crucial d'IL-22 al nostre model, vam transferir cèl·lules T de tipus salvatge i Il22 / CD4+ a animals Rag1 / II22/ que posteriorment van rebre E{{ 104}} Cèl·lules GFP iv (figura 2G). Aquí, podríem confirmar que la producció d'IL-22 mitjançant cèl·lules T CD4+ transferides de manera adoptiva és suficient per promoure metàstasis pulmonars en el nostre model, però s'elimina quan s'utilitzen cèl·lules T CD4+ aïllades de II22/animals (Figura 2G). És important destacar que les diferències de metàstasi es van veure afectades per l'empelt de cèl·lules T després de la transferència (figura S2K). En conclusió, vam identificar les cèl·lules Th com a font suficient d'IL-22 que condueix a metàstasis al pulmó de ratolins portadors de tumors i, a continuació, vam intentar identificar la cèl·lula objectiu rellevant.
Figura 1. IL-22-knockout redueix el nombre de metàstasis pulmonars però no afecta el creixement del tumor en models de ratolins singènics de carcinoma de pulmó i mama
Figura 2. Les cèl·lules T són la font principal d'IL-22 al pulmó dels ratolins portadors de tumors
L'expressió de IL-22RA1 a les cèl·lules tumorals és indispensable per a la formació de metàstasi
L'expressió IL-22RA1 està restringida a cèl·lules no hematopoètiques i serveix com a factor limitant per a la senyalització IL-22. Per interrogar la seva influència en el fenotip metastàtic, vam generar una supressió estable d'Il22ra1 a les cèl·lules 4T1 i Line -1 (figura 3A). D'acord amb les nostres troballes anteriors, el creixement del tumor de les cèl·lules 4T1 Il22ra1 no es va veure afectat en gran mesura en comparació amb les cèl·lules de control 4T1 (figura 3B). Tanmateix, els ratolins que es van injectar amb cèl·lules 4T1 Il22ra1 sc o iv tenien menys metàstasis macroscòpiques i clonogèniques al pulmó en comparació amb les cèl·lules control 4T1 (figures 3B i 3C). Per confirmar que aquest efecte no depèn del clon, vam generar i analitzar tres clons Line-1 Il22ra1 i els vam provar amb tres clons de control, que van donar resultats similars (figures 3D i 3E). Això confirma que les cèl·lules cancerígenes que expressen IL-22RA1- són l'objectiu rellevant de l'IL-22 per provocar metàstasis pulmonars. Per descartar els efectes fora de l'objectiu de la metodologia, hem utilitzat IL-22BP per inhibir la senyalització IL-22. Hem establert línies cel·lulars 4T1 i Line-1 que secretaven constitutivament IL-22BP (Il22ra{2+) (figura S3A). Quan es van injectar sc, les cèl·lules Line-1 Il22ra{2+ van créixer de manera comparable amb el control al lloc d'implantació, tal com es va veure anteriorment als models Il22ra1 i als ratolins Il22 /, tot i que les cèl·lules 4T1 Il22ra2+ van créixer. més lent (figura S3B). Aquí, les cèl·lules 4T1 Il22ra2+ tenien un nombre de metàstasis molt reduït quan es van injectar sc (figura S3B i S3C). Malgrat la major variabilitat, les cèl·lules Line-1 Il22ra{2+ també van formar menys metàstasis quan s'injectaven per via sc o iv (figura S3D i S3E). Així, la neutralització de IL{-22 mitjançant IL{-22BP va imitar en gran mesura el fenotip observat amb cèl·lules Il22ra1 i Il22 / ratolins, corroborant la rellevància de la citocina per al procés metastàtic.
Beneficis del suplement de cistanche: augmenta la immunitat
IL-22 controla el creixement de les cèl·lules tumorals durant l'etapa inicial de l'empelt metastàtic
To determine the role of IL-22 signaling during the dissemination process, we analyzed the kinetics of metastatic seeding in our models. For this, we injected 4T1-GFP cells i.v. and analyzed lungs at 12 and 48 h after injection (Figure S4A). We used confocal microscopy to quantify the numbers of GFP+ colonies (defined as cell clusters of >100 mm) i cèl·lules individuals per mm2 de teixit pulmonar (figura S4B). No vam poder detectar diferències a les 12 h després de la injecció, cosa que indica que la sembra no es veurà afectada principalment per IL -22 (figures S4C i S4D). Tanmateix, en el moment de 48-h, el nombre de cèl·lules i colònies GFP+ va disminuir al pulmó de ratolins Il22 / (figures S4C i S4D). Això va suggerir un paper per a IL-22 en la generació de metàstasis primerenques als pulmons. Per avaluar la taxa de proliferació, vam co-injectar ratolins amb 5-etinil-20 -desoxiuridina (EdU) 4 h abans de la investigació a les 12, 24, 48 h i 7 dies després de la injecció del tumor (figura S4E) . De manera similar al recompte microscòpic, no vam detectar diferències en el nombre de cèl·lules GFP + abans de 48 h després de la injecció (figures S4F-S4G). En canvi, podríem detectar diferències en la incorporació d'EdU, la qual cosa indica una fracció més alta de cèl·lules en divisió només el dia 7 després de la injecció (figura S4G). Així, raonem que les diferències en la càrrega tumoral pulmonar afectada per IL-22 observades des de les 48 h estan mediades per un mecanisme independent de la proliferació.
Figura 3. L'expressió IL-22RA1 a les cèl·lules tumorals és indispensable per a la formació de metàstasis
IL-22 regula l'expressió de CD155 a les cèl·lules tumorals i, per tant, afavoreix la metàstasi
A partir de les nostres troballes que IL-22 actua sobre les cèl·lules canceroses IL{-22ra1+ per promoure la metàstasi, vam realitzar una seqüenciació d'ARN massiu de cèl·lules 4T1 tractades amb IL-22 per delimitar encara més. el mecanisme subjacent (GEO: GSE202314) (figura 4A). Vam descobrir 147 gens que estaven regulats de manera diferent. D'aquests, l'expressió de 133 gens es va incrementar i 14 van disminuir amb el tractament amb IL-22 (figures 4B i S5A). Vam validar Pvr (receptor de poliovirus, Pvr) com un dels objectius més significativament augmentats mitjançant qPCR (figura S5B). Això és notable perquè CD155, el producte de Pvr, està sobreexpressat en diversos càncers i posseeix propietats promotores del tumor, inclosa la metàstasi.54–56 Per confirmar les nostres troballes, vam avaluar l'expressió de CD155 en 4T1 estimulat per IL{20}}, Cèl·lules de línia -1 i E0771 per citometria de flux (figura 4C). Vam detectar un augment de l'expressió de CD155 a totes les línies cel·lulars durant 72 h (figures 4D i 4E), però aquest efecte estava absent a les cèl·lules que no tenien IL-22RA1 (figura S5C). A continuació, vam avaluar l'impacte de IL-22 en l'expressió de CD155 a les cèl·lules E0771-GFP dels pulmons de ratolins portadors de tumors (figura 4F). Aquí, podríem confirmar que les cèl·lules implantades a Il22 / ratolins tenien una expressió més baixa de CD155, que es correlacionava amb una fracció més petita de cèl·lules E0771-GFP detectades per citometria de flux (figures 4G i 4H). Per verificar el paper de CD155 en la metàstasi, vam establir línies cel·lulars Pvr Line -1 i 4T1 (figures 4I, S5D i S5G). Tot i que això va tenir poc efecte en la seva capacitat de créixer per via subcutània (figures S5E i S5F), va abolir la capacitat de formar metàstasis al pulmó (figures 4J i S5H). Podríem revertir aquest procés mitjançant l'expressió constitutiva de CD155 a les cèl·lules Pvr independentment de la regulació induïda per IL-22-(Pvr+).
Figura 4. La senyalització IL-22 augmenta l'expressió de CD155 a la superfície de les cèl·lules tumorals i confereix resistència al control de metàstasi
En aquest entorn, podríem induir metàstasis als pulmons de Il22 / ratolins, destacant la vinculació entre aquestes dues molècules i el seu paper com a mediadors del procés metastàtic (figures 4K i S5I).
CD155 a les cèl·lules tumorals s'associa amb una disminució de l'expressió de CD226 a les cèl·lules NK i una reducció de la producció d'IFNg
CD155 té un paper intrínsec en la proliferació i l'adhesió a les cèl·lules canceroses,54–57, entre d'altres. No vam detectar deficiències en la proliferació de cèl·lules Pvr Line-1 in vitro (dades no mostrades). És important destacar que el CD155 té un paper prometastàsic extrínsec de la cèl·lula en unir-se als receptors immunomoduladors CD96, CD226 o TIGIT a la superfície de les cèl·lules NK i T.54–56,58,59 Per identificar els socis d'unió de CD155, hem analitzat Respostes antitumorals als pulmons de ratolins que contenen cèl·lules 4T1-luciferasa+ (4T1-Luc) (figura 5A). Vam confirmar mitjançant un sistema d'imatge in vivo (IVIS) que els ratolins de tipus salvatge i Il22 / tenien una sembra similar de cèl·lules tumorals el dia 5 després de la injecció, i les diferències en la càrrega tumoral van augmentar al llarg de dues setmanes (figures 5B i 5C) . De fet, el defecte de la producció d'IFNg per part de les cèl·lules NK, però no altres tipus de cèl·lules, va mostrar la pèrdua de mecanismes efectors humorals (figures 5D, 5E i S6A) i es va correlacionar amb una càrrega tumoral més elevada (figura S6B). Aquest efecte es va trobar constantment al model Line-1 sc (figures S6C–S6E). Escrutades per citometria amb xips, 60 mostres de ratolins portadors de metàstasi pulmonar 4T1- van demostrar una expressió més gran de CD155 als focus metastàtics a WT, però no a Il22 / animals (figures 5F i S6F). Vam trobar una major infiltració de cèl·lules NK als focus metastàtics d'Il22 / però no animals WT, cosa que suggereix una activació més gran i confirma la dependència de les cèl·lules NK com a cèl·lules efectores antitumorals (figura 5F). CD226, però no TIGIT o CD96, es va expressar de manera diferencial per cèl·lules NK i, en menor mesura, per cèl·lules T CD8+ als pulmons dels animals de tipus salvatge i Il22 / (figures 5G i S6G–S6H). El CD226 és un co-receptor essencial per a l'activació de les funcions efectores de les cèl·lules T NK i CD8. Per tant, ens vam proposar explorar la seva rellevància fisiopatològica en el nostre model.61–64
cistanche tubulosa: millora el sistema immunitari
El bloqueig de CD226 deroga el fenotip antimetastàsic dels animals amb deficiència d'IL-22-
L'excés de senyalització mediada per CD155-present al microentorn del tumor pot induir la internalització i la degradació de CD226 a les cèl·lules efectores.61,63 Per delimitar el paper de l'expressió excessiva de CD155 en CD226 i la posterior resposta antitumoral, vam injectar control 4T1 i Les cèl·lules Pvr + iv en ratolins Il22/ i dos grups també van rebre anticossos de bloqueig anti-CD226 (480.1) (figura 6A). Tant les cèl·lules Pvr + com el bloqueig de CD226 podrien promoure de manera similar la metàstasi pulmonar en Il22 / ratolins, i aquests efectes no es van sintetitzar (figura 6B). De manera similar a les nostres observacions anteriors en animals de tipus salvatge, això va ser suficient per inhibir la producció d'IFNg per part de les cèl·lules NK (figura 6C). Finalment, vam detectar una disminució de l'expressió de CD226 a les cèl·lules NK en ratolins injectats amb Pvr+-en comparació amb les cèl·lules control. Això es va correlacionar amb la disminució de la capacitat d'aquestes cèl·lules NK per produir IFNg (figura 6D). A més, vam interrogar el potencial de l'anticòs TIGIT agonístic (IG9) per inhibir l'activació de cèl·lules NK a Il22 / animals i del bloqueig de CD96 (3.3) per evitar la inhibició de la funció de les cèl·lules NK (figura 6E). Ni l'agonista TIGIT ni l'antagonista CD96 van alterar el nombre de metàstasis en comparació amb Il22 / animals que van rebre cèl·lules control o Pvr+ 4T1, respectivament (figura 6F). Quan s'activa, TIGIT podria inhibir la producció d'IFNg a partir de les cèl·lules CD8+ T però no de les cèl·lules NK (figura 6G). Així, un eix IL-22- CD155 provoca una disminució de l'expressió de CD226 a les cèl·lules NK i les fa inerts en el microentorn del tumor.
L'expressió de CD155 complementa la signatura del gen IL-22 en pacients amb càncer de mama i pulmó
Finalment, es va avaluar la rellevància clínica de CD155 en el context de l'eix IL-22-IL{-22RA1. L'expressió de CD155 sola s'associa amb un pronòstic desfavorable en diverses entitats cancerígenes.54 Hem analitzat les dades de seqüenciació d'ARN de l'adenocarcinoma pulmonar de l'atles del genoma del càncer (TCGA) (TCGA: LUAD, n=504) i HER2- mostres de pacients positives del conjunt de dades de carcinoma de mama invasiu (TCGA: BRCA, n=110). Ens vam centrar en els gens clau relacionats amb IL-22-: IL22RA1, IL22RA2, IL10RB i PVR. Per estratificar les cohorts de pacients, vam utilitzar la agrupació aglomerativa, un mètode de agrupació no supervisada, que va donar lloc a tres grups principals (figures 7A i 7B). Això va revelar patrons d'expressió gènica distintius: clúster 0 (IL22RA1hi, IL22RA2lo, IL10RBmed, PVRhi), clúster 1 (IL22RA1lo, IL22RA2hi, IL1{0RBhi, PVRlo) i clúster 2 (IL22RA1lo, IL22RA2lo, IL10RBlo, PVRmed) (Figura 7C). Aquests grups es van distribuir uniformement en aquestes dues cohorts (figura 7D). Els pacients del clúster 0 i del conjunt de dades LUAD del clúster 2 van tenir pitjor supervivència que els pacients del clúster 1 (figura 7E). La supervivència dels grups 1 i 2 no va variar en ambdues cohorts (figura 7E). A més, vam calcular els temps de supervivència mitjans restringits (RMST) per als grups 0 i 1 per quantificar la diferència en el temps de supervivència esperat fins a cinc anys de seguiment, donant lloc a 361, 18 dies per a LUAD i 93, 23 dies per a BRCA (figura 7F). Els grups 0 i 1 tenien diferències en la freqüència de les etapes patològiques de la malaltia dins d'ells a la LUAD, però no a la cohort BRCA (figura 7G). És important destacar que aquestes diferències de supervivència entre els clústers (IL22RA1hiPVRhi) i 1 (IL22RA1loPVRlo) provenen principalment de pacients diagnosticats a les primeres etapes (I i II), però no avançades (III i IV) de la malaltia (Figura S7A). Per avaluar l'impacte de cada gen en la supervivència, hem utilitzat el model de perills proporcionals de Cox. Tant IL22RA1 (proporció de perill [HR]=1.23) com PVR (HR=1.28) afecten la supervivència, mentre que IL22RA2 i IL10RB no van canviar el perill a la cohort LUAD (figura S7B). A més, només CD226 (p=0.06), però no TIGIT ni CD96, van tendir a influir en la supervivència, d'acord amb les nostres troballes en models preclínics (figura S7B). Hem utilitzat l'algoritme de deconvolució CIBERSORTx a la cohort LUAD per avaluar si els patrons d'expressió gènica dels nostres clústers tenen un impacte en la infiltració de cèl·lules immunitàries en pacients. 0 i 2 en pacients amb LUAD, mentre que no hi va haver diferències en les cèl·lules NK en repòs o en les cèl·lules T de memòria CD4+ activades (figura S7C) amb una tendència similar a la cohort BRCA (figura S7D). En conjunt, aquests resultats de cohorts clíniques demostren la rellevància d'un vincle regulador entre IL-22 derivada de cèl·lules T i CD155.
Figura 5. L'expressió de CD226 és més alta a les cèl·lules NK en ratolins Il22–/–
DISCUSSIÓ
En aquest estudi, hem descobert un mecanisme pel qual les cèl·lules T produeixen IL-22 per promoure la metàstasi pulmonar en models de ratolí de càncer de pulmó i mama. Mecànicament, les cèl·lules T als focus metastàtics del pulmó, principalment CD4+, produeixen IL-22 que senyala directament a través del seu receptor expressat a les cèl·lules canceroses, promovent l'expressió de la molècula pro-metastàtica CD155.{{ 5}},58,59 Malgrat la ben estudiada expressió pan-càncer de CD155 i els seus papers intrínsecs i extrínsecs en la progressió del càncer,54 la via responsable de la regulació de CD155 a les cèl·lules malignes segueix sent esquiva.66–68 Hem demostrat que IL{{ 15}} va augmentar l'expressió de CD155 en línies cel·lulars de càncer de pulmó i mama in vitro i in vivo, mentre que la seva expressió constitutiva va permetre metàstasis en Il22 / ratolins, en comparació amb cèl·lules control i deficients. L'augment de l'expressió de CD155 al microambient pulmonar del tumor va provocar una reducció de la molècula coestimuladora CD226 a les cèl·lules NK, disminuint la seva localització a metàstasis i producció d'IFNg, que es va correlacionar amb una càrrega tumoral més elevada. En els nostres estudis anteriors, vam detectar una acumulació de cèl·lules T que produeixen IL-22-en mostres de tumors de pacients amb carcinoma de pulmó de cèl·lules no petites (NSCLC).12,48 Hem demostrat que les cèl·lules canceroses desencadenen NLRP3- secreció depenent d'IL-1b que indueix aquesta producció d'IL-22 principalment a partir de cèl·lules Th.18 Val la pena destacar que, en humans, a causa de les diferències en els perfils de citocines de les cèl·lules Th, IL{{ 31}} també s'indueix a les cèl·lules Th1. És concebible que això pugui afectar la resposta immune antitumoral. És important destacar que aquestes variants Th1 podrien explicar parcialment la hiperprogrés del càncer després de l'activació de les cèl·lules T després del bloqueig del punt de control.69 D'acord amb les nostres observacions anteriors, vam confirmar l'acumulació de CD4+ i CD{38} } Cèl·lules T, però també cèl·lules NK1.1+, al nínxol metastàtic del pulmó d'animals injectats amb tumor. És important tenir en compte que vam observar diferències específiques de la soca en l'acumulació d'aquestes cèl·lules T CD8+ que produeixen IL-22-en els nostres models. Tanmateix, abolir la producció d'IL-22 a les cèl·lules T madures totals va ser suficient per recapitular l'efecte que vam observar en animals amb deficiència d'IL-22-.70 També, la transferència adoptiva de cèl·lules T CD{4+ a Els ratolins Rag / II22 / van ser suficients per induir metàstasis pulmonars, assenyalant el paper primordial de les cèl·lules Th com a font d'IL-22. Per contra, les nostres troballes anteriors suggereixen que, malgrat l'acumulació de cèl·lules T CD8+ en mostres de tumors, la seva contribució al conjunt d'IL-22 és menor.48 En qualsevol cas, la caracterització d'aquest CD{{53} }} Les cèl·lules T que produeixen IL-22- és essencial per avaluar acuradament les seves propietats pro o antitumorals a mesura que sorgeixen noves dades sobre aquesta subpoblació.71,72 A més, el paper principal de les cèl·lules NK i NKT en el control del tumor supera el seu contribució potencial a la formació de metàstasi mitjançant IL-22, que es descobreix en un experiment de transferència Rag / II22 / adoptiva amb animals desproveïts de cèl·lules T madures però que tenen cèl·lules NK funcionals. focus on les cèl·lules NK es van trobar més abundantment que les cèl·lules T citotòxiques, destacant les cèl·lules NK com a actors essencials en el control del tumor en absència d'IL-22. És important tenir en compte que ens vam centrar en els productors d'IL-22 als focus metastàtics del pulmó, però no vam tenir en compte el seu origen, la clonalitat o la seva distribució a la sang o als òrgans limfoides. A més, diverses fonts d'IL-22 promouen la progressió del tumor d'una manera dependent del context mediada per l'acció pleiotròpica d'aquesta citocina. En aquesta línia, cèl·lules similars productores d'IL-22-en diversos compartiments (pulmó vs melsa vs gangli limfàtic) podrien afectar de manera diferent els fenotips protumorals o no tenir funció segons el context, cosa que caldrà investigar més a fons. Els estudis sobre càncer informen repetidament que la IL-22 afecta el desenvolupament i el creixement de tumors primaris i, eventualment, la progressió neoplàsica.26,73–76 Aquesta noció es justifica principalment per la capacitat de promoure la migració, la invasió i l'estrès de les cèl·lules canceroses. in vitro i, per tant, promouen la formació de metàstasis.76,77 És important destacar que l'ablació de IL-22 pot alleujar el microambient immunosupressor en un model de carcinoma de pulmó mutant Kras.14 En l'estudi actual, vam demostrar que l'augment de la càrrega metastàtica era un efecte directe de IL-22 sobre les cèl·lules tumorals IL-22RA1+ disseminades, que va provocar un augment del creixement de colònies. És important destacar que les nostres dades no descarten formalment un impacte en les cèl·lules no tumorals. Com a tal, la influència de IL-22 en la disseminació de cèl·lules tumorals mitjançant l'acció intrínseca de IL-22R expressada de manera endògena està àmpliament destacada per Giannou et al.78.
Figura 6. La senyalització de CD226 és indispensable per a la producció d'IFNg a partir de cèl·lules NK
Hem demostrat que Pvr és un dels gens amb una expressió més gran a les cèl·lules canceroses després del tractament amb IL-22. En aquest context, les cèl·lules deficients de CD155-formaven poques metàstasis, tant en ratolins de tipus salvatge com Il22 / i, sobretot, la reintroducció de CD155 ens va permetre reconstituir el fenotip metastàtic. El paper intrínsec del CD155 a les cèl·lules canceroses ha estat ben estudiat i se sap que afecta la sembra, la proliferació de cèl·lules tumorals i la migració.56,57 No obstant això, les cèl·lules Pvr no van mostrar proliferació o migració inhibida a les nostres mans, ni la sembra de cèl·lules tumorals. no es va veure afectat en Il22 / ratolins. Inicialment identificat a les cèl·lules presentadores d'antigen, CD155 serveix com a promotor extrínsec de la progressió del tumor que suprimeix la funció de les cèl·lules NK i T en unir-se a CD96 i TIGIT a la seva superfície i indueix la internalització i la regulació a la baixa de CD226.56,61-64,79-85Due a la seva funció immunosupressora, el CD155 al càncer i a les cèl·lules hostes exerceix propietats pro-metastàtiques i es proposa com a objectiu per al bloqueig d'inhibició del punt de control.61,86 Les cèl·lules NK reben un senyal coestimulador de les cèl·lules presentadores d'antigen mitjançant CD226. 87 No obstant això, l'estimulació excessiva de CD226 en el microambient tumoral condueix a la internalització i la degradació.63 Això es contraresta normalment amb CD96 i TIGIT, que s'uneixen a CD155 amb una afinitat més gran.58 Curiosament, se sap que les cèl·lules 4T1 indueixen una regulació a la baixa de CD226 en la infiltració del tumor. limfòcits i suprimeixen la producció d'IFNg.88 Aquí, vam demostrar que la deficiència d'IL-22 preservava l'expressió de CD226 a les cèl·lules T NK i CD8+. Tanmateix, només les cèl·lules NK tenien capacitats de producció d'IFNg dramàticament més altes i es correlacionaven inversament amb la càrrega metastàtica. Curiosament, l'activació de la senyalització TIGIT al nostre estudi va inhibir la producció d'IFNg a partir de cèl·lules CD8+ T, però no NK, i no va ser suficient per augmentar la càrrega metastàtica. De la mateixa manera, un altre receptor per a CD155, CD96, no estava regulat de manera diferent en Il22 / ratolins ni la seva inhibició va prevenir la metàstasi, cosa que indica que CD155 no suprimeix les cèl·lules NK mitjançant CD96 al nostre model. Això posa de manifest la regulació específica del tipus cel·lular de les respostes antitumorals per part del CD155 i els seus diferents socis d'unió.
Beneficis del suplement de cistanche: com enfortir el sistema immunitari
Feu clic aquí per veure els productes Cistanche Enhance Immunity
【Demanar més】 Correu electrònic:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
S'estableix l'impacte del CD155 en el pronòstic i el seu paper en la patogènesi del càncer de pulmó, mama, còlon i altres tipus de càncer.79–85 Hi ha una àmplia evidència sobre la rellevància pronòstica de la IL-22 i els seus gens relacionats. en diverses entitats de càncer.10,21,27,75,89–91 No obstant això, alguns estudis informen que no hi ha cap influència de l'expressió IL-22 en la supervivència.12 Tot i que aquestes discrepàncies poden ser degudes a l'heterogeneïtat poblacions de pacients, mostreig i problemes d'informe, molts d'aquests estudis se centren en un sol gen relacionat amb la senyalització IL-22. Aquí, hem utilitzat agrupacions aglomeratives per discernir patrons d'expressió d'IL22RA1, IL22RA2, IL10RB i PVR en cohorts LUAD i BRCA a TCGA i afiliar-los a les dades clíniques. Aquí, vam identificar tres patrons d'expressió d'aquests gens: el patró 0 (IL22RA1hi, IL22RA2lo, PVRhi), el patró 1 (IL22RA1lo, IL22RA2hi, PVRlo) i el patró 2 (IL22RA1lo, IL22RA2lo, PVRmed). Vam identificar que l'alta expressió de la IL22RA1 va coincidir amb una alta expressió de PVR, que també es va traduir en mals resultats de supervivència global, especialment en pacients diagnosticats amb estadis patològics precoços (I i II), però no avançats (III i IV), destacant el paper específic de l'etapa d'aquest mecanisme. Per contra, l'alta expressió d'IL22RA2, també coneguda com IL-22BP, es va correlacionar amb una expressió de PVR més baixa i una millor supervivència.18,34 El tercer patró corresponia a una expressió totalment baixa i representava tumors immunològicament freds.92 En aquesta línia. , la deconvolució CIBERSORTx va indicar que el clúster 1 caracteritzat per una alta expressió IL22RA2 presenta una signatura gènica per a cèl·lules NK activades, però no en repòs, en comparació amb altres clústers. S'ha demostrat que l'expressió de CD226 estratifica els pacients pel resultat en diversos assaigs clínics de NSCLC.93 No obstant això, a causa de la doble forma de regulació pre- i post-traduccional de CD226, l'expressió no sempre es reflecteix en les dades de seqüenciació de l'ARNm.94 Per tant, els estudis que se centren sobre la regulació post-traduccional de CD226 avaluar la seva expressió en mostres clíniques mitjançant la tinció d'anticossos. }}.24, p=0.06), mentre que TIGIT i CD96 no van demostrar cap correlació amb la supervivència. És important destacar que les cèl·lules tumorals dissenyades per secretar IL-22BP van formar menys metàstasis, posant de manifest el potencial de la via IL{-22 per a una intervenció terapèutica dirigida. Això podria contrarestar la sobreexpressió del tumor CD155, ja que l'orientació directa continua sent un repte a causa d'una complexa xarxa de co-receptors. A més, cal destacar que els efectes a llarg termini de la neutralització de IL-22 sobre la metàstasi són desconeguts, però podrien tenir un impacte directe en la consideració terapèutica de les cèl·lules T o proporcionar la justificació per a la neutralització de IL{-22 mitjançant anticossos amb un perfil de seguretat beneficiós, com ara Fezakinumab (assaig NCT01941537) o IL-22 dissenyat amb disseny basat en l'estructura.39,95 En resum, vam identificar la sobreexpressió de CD155 induïda per IL-22- a les cèl·lules tumorals com un mecanisme que beneficia el creixement metastàsic. Aquest paper essencial en el pronòstic va subratllar el potencial de la IL-22 com a objectiu terapèutic en càncer. Fins ara, la neutralització de la IL-22 es proposa principalment com una estratègia per tractar malalties autoimmunes.31,49 Les nostres dades sobre IL-22BP com a neutralitzador de la IL{-22, que va fenocopiar la La deficiència global d'IL-22 va apuntalar el potencial terapèutic per orientar-se a l'eix IL{-22-IL{-22R1 i s'hauria d'explorar més en estudis preclínics i clínics.
REFERÈNCIES
1. Hanahan, D. i Weinberg, RA (2011). Característiques del càncer: la propera generació. Cel·la 144, 646–674. https://doi.org/10.1016/j.cell.2011. 02.013.
2. Massague´ , J., i Obenauf, AC (2016). Colonització metastàtica per cèl·lules tumorals circulants. Natura 529, 298–306. https://doi.org/10.1038/ nature17038.
3. Renner, P., Rovira, J., Klein, C., Schlitt, HJ, Geissler, EK i Kroemer, A. (2014). Les cèl·lules assassines naturals KLRG1(+) protegeixen contra la malaltia metastàtica pulmonar mitjançant la immunovigilància. OncoImmunology 3, e28328. https://doi.org/10.4161/onci.28328.
4. Mohme, M., Riethdorf, S. i Pantel, K. (2017). Cèl·lules tumorals circulants i disseminades: mecanismes de vigilància i fugida immune. Nat. Reverent Clin. Oncol. 14, 155–167. https://doi.org/10.1038/nrclinonc. 2016.144.
5. Briukhovetska, D., Do¨ rr, J., Endres, S., Libby, P., Dinarello, CA i Kobold, S. (2021). Interleucines en càncer: de la biologia a la teràpia. Nat. Rev. Càncer 21, 481–499. https://doi.org/10.1038/s41568-021-00363-z.
6. Kitamura, T., Qian, BZ i Pollard, JW (2015). Promoció de la metàstasi de les cèl·lules immunitàries. Nat. Reverent Immunol. 15, 73–86. https://doi.org/10.1038/ nri3789.
7. Galon, J. i Bruni, D. (2020). Immunologia tumoral i evolució tumoral: històries entrellaçades. Immunitat 52, 55–81. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2019.12.018.
8. Page`s, F., Mlecnik, B., Marliot, F., Bindea, G., Ou, FS, Bifulco, C., Lugli, A., Zlobec, I., Rau, TT, Berger, MD , et al. (2018). Validació internacional del consens Immunoscore per a la classificació del càncer de còlon: un estudi de pronòstic i precisió. Lancet 391, 2128–2139. https://doi. org/10.1016/S0140-6736(18)30789-X.
9. Rui, J., Chunming, Z., Binbin, G., Na, S., Shengxi, W. i Wei, S. (2017). IL-22 promou la progressió del càncer de mama mitjançant la regulació de HOXB-AS5. Oncotarget 8, 103601–103612. https://doi.org/10.18632/ oncotarget.22063.
10. Kryczek, I., Lin, Y., Nagarsheth, N., Peng, D., Zhao, L., Zhao, E., Vatan, L., Szeliga, W., Dou, Y., Owens, S. ., et al. (2014). Les cèl·lules T IL-22(+)CD4(+) promouen la tija del càncer colorectal mitjançant l'activació del factor de transcripció STAT3 i la inducció de la metiltransferasa DOT1L. Immunitat 40, 772–784. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2014.03.010.
11. Jiang, R., Tan, Z., Deng, L., Chen, Y., Xia, Y., Gao, Y., Wang, X. i Sun, B. (2011). La interleucina-22 promou el carcinoma hepatocel·lular humà mitjançant l'activació de STAT3. Hepatologia 54, 900–909. https://doi.org/10.1002/ hep.24486.
12. Kobold, S., Vo¨ lk, S., Clauditz, T., K€ superior, NJ, Minner, S., Tufman, A., D€ uwell, P., Lindner, M., Koch, I ., Heidegger, S., et al. (2013). La interleucina-22 s'expressa amb freqüència en el càncer de pulmó de cèl·lules petites i grans i promou el creixement de cèl·lules canceroses resistents a la quimioteràpia. J. Thorac. Oncol. 8, 1032–1042. https://doi.org/10.1097/JTO.0b013e31829923c8.
13. Hernández, P., Gronke, K. i Diefenbach, A. (2018). Una trampa-22: interleucina-22 i càncer. Eur. J. Immunol. 48, 15–31. https://doi.org/10. 1002/eji.201747183.
14. Khosravi, N., Caetano, MS, Cumpian, AM, Unver, N., De la Garza Ramos, C., Noble, O., Daliri, S., Hernandez, BJ, Gutierrez, BA, Evans, SE, et al. (2018). IL22 promou el càncer de pulmó mutant Kras mitjançant la inducció d'una resposta immune protumoral i la protecció de les propietats de la tija. Càncer Immunol. Res. 6, 788–797. https://doi.org/10.1158/ 2326-6066.CIR-17-0655. 15. Li, H., Mou, Q., Li, P., Yang, Z., Wang, Z., Niu, J., Liu, Y., Sun, Z., Lv, S., Zhang, B. ., i Yin, C. (2019). MiR-486-5p inhibeix la transició epitelial-mesenquimal induïda per IL-486-5de les cèl·lules canceroses de mama reprimint Dock1. J. Càncer 10, 4695–4706. https://doi.org/10.7150/jca.30596.
16. Kim, K., Kim, G., Kim, JY, Yun, HJ, Lim, SC i Choi, HS (2014). La interleucina-22 promou la transformació de cèl·lules epitelials i la tumorigènesi de mama mitjançant l'activació de MAP3K8. Carcinogènesi 35, 1352–1361. https:// doi.org/10.1093/carcin/bgu044.
17. Katara, GK, Kulshrestha, A., Schneiderman, S., Riehl, V., Ibrahim, S. i Beaman, KD (2020). La interleucina-22 promou el desenvolupament de lesions malignes en un model de ratolí de càncer de mama espontani. Mol. Oncol. 14, 211–224. https://doi.org/10.1002/1878-0261.12598.
18. Huber, S., Gagliani, N., Zenewicz, LA, Huber, FJ, Bosurgi, L., Hu, B., Hedl, M., Zhang, W., O'Connor, W., Jr., Murphy, AJ, et al. (2012). IL-22BP està regulada per l'inflamsoma i modula la tumorigènesi a l'intestí. Natura 491, 259–263. https://doi.org/10.1038/ nature11535.
19. Perez, LG, Kempski, J., McGee, HM, Pelzcar, P., Agalioti, T., Giannou, A., Konczalla, L., Brockmann, L., Wahib, R., Xu, H., et al. (2020). La senyalització de TGFbeta a les cèl·lules Th17 promou la producció d'IL-22 i el càncer de còlon associat a la colitis. Nat. Commun. 11, 2608. https://doi.org/10.1038/ s41467-020-16363-w.
20. Meyer, A., Stark, M., Karstens, JH, Christiansen, H. i Bruns, F. (2012). Histiocitosi de cèl·lules de Langerhans de la base cranial: és efectiva la radioteràpia a dosis baixes? Cas Rep. Oncol. Med. 2012, 789640. https:// doi.org/10.1155/2012/789640.
21. Zhuang, Y., Peng, LS, Zhao, YL, Shi, Y., Mao, XH, Guo, G., Chen, W., Liu, XF, Zhang, JY, Liu, T., et al. (2012). L'augment intratumoral de cèl·lules T CD4(+) i cèl·lules Th22 que produeixen IL-22-es correlaciona amb la progressió del càncer gàstric i prediu una mala supervivència del pacient. Càncer Immunol. Immunoaltre. 61, 1965–1975. https://doi.org/10.1007/s00262-012- 1241-5.
22. Chen, X., Wang, Y., Wang, J., Wen, J., Jia, X., Wang, X. i Zhang, H. (2018). L'acumulació de cèl·lules T-helper 22, interleucina-22 i cèl·lules supressores derivades de mieloides afavoreix la progressió del càncer gàstric en pacients grans. Oncol. Lett. 16, 253–261. https://doi.org/10.3892/ol.2018.8612.
23. Doulabi, H., Rastin, M., Shabahangh, H., Maddah, G., Abdollahi, A., Nosratabadi, R., Esmaeili, SA i Mahmoudi, M. (2018). Anàlisi de cèl·lules Th22, Th17 i CD4(+) que coprodueixen IL-17/IL{-22 en diferents estadis del càncer de còlon humà. Biomed. Pharmacother. 103, 1101–1106. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2018.04.147.
24. Zeng, H., Liu, Z., Wang, Z., Zhou, Q., Qi, Y., Chen, Y., Chen, L., Zhang, P., Wang, J., Chang, Y. ., et al. (2020). Les cèl·lules productores de IL22-intratumorals defineixen el càncer de bufeta muscular invasiu del subtipus immunoevasiu (2017). Una funció protectora de la IL-22BP en la isquèmia-reperfusió i la lesió hepàtica induïda per acetaminofè. J. Immunol. 199, 4078–4090. https://doi. org/10.4049/jimmunol.1700587.
25. Jiang, R., Wang, H., Deng, L., Hou, J., Shi, R., Yao, M., Gao, Y., Yao, A., Wang, X., Yu, L. ., i Sun, B. (2013). IL-22 està relacionat amb el desenvolupament del càncer de còlon humà mitjançant l'activació de STAT3. BMC Cancer 13, 59. https://doi.org/10.1186/1471-2407-13-59.
26. Fukui, H., Zhang, X., Sun, C., Hara, K., Kikuchi, S., Yamasaki, T., Kondo, T., Tomita, T., Oshima, T., Watari, J. ., et al. (2014). IL-22 produït pels fibroblasts associats al càncer promou la invasió de cèl·lules canceroses gàstriques mitjançant la senyalització STAT3 i ERK. Br. J. Càncer 111, 763–771. https://doi.org/ 10.1038/bjc.2014.336.
27. Liu, T., Peng, L., Yu, P., Zhao, Y., Shi, Y., Mao, X., Chen, W., Cheng, P., Wang, T., Chen, N. ., et al. (2012). L'augment de les cèl·lules Th22 i Th17 circulants s'associa amb la progressió del tumor i la supervivència del pacient en càncer gàstric humà. J. Clin. Immunol. 32, 1332–1339. https://doi.org/10.1007/ s10875-012-9718-8.
28. Niccolai, E., Taddei, A., Ricci, F., Rolla, S., D'Elios, MM, Benagiano, M., Bechi, P., Bencini, L., Ringressi, MN, Pini, A. ., et al. (2016). Les cèl·lules Th22 que produeixen IFN gamma intratumorals es correlacionen amb l'estadi TNM i els pitjors resultats en càncer de pàncrees. Clin. Ciència. 130, 247–258. https:// doi.org/10.1042/CS20150437.
29. Xu, X., Tang, Y., Guo, S., Zhang, Y., Tian, Y., Ni, B. i Wang, H. (2014). L'augment dels nivells intratumorals d'interleucina 22 i les freqüències de cèl·lules T CD22-productores d'interleucina4+ es correlacionen amb la progressió del càncer de pàncrees. Pàncrees 43, 470–477. https://doi.org/10.1097/MPA.000000000000 0055.
30. Kotenko, SV, Izotova, LS, Mirochnitchenko, OV, Esterova, E., Dickensheets, H., Donnelly, RP i Pestka, S. (2001). Identificació del complex receptor funcional d'interleucina-22 (IL-22): la cadena IL{-10R2 (IL{-10Rbeta ) és una cadena comuna d'ambdues IL{{7 Complexos receptors }} i IL-22 (factor inducible derivat de cèl·lules T relacionats amb IL{- 10-, IL-TIF). J. Biol. Chem. 276, 2725–2732. https://doi.org/10.1074/jbc.M0078 37200.
31. Ouyang, W. i O'Garra, A. (2019). IL-10 Citocines familiars IL-10 i IL{- 22: de la ciència bàsica a la traducció clínica. Immunitat 50, 871–891. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2019.03.020.
32. Kempski, J., Giannou, AD, Riecken, K., Zhao, L., Steglich, B., L€ ucke, J., Garcia-Perez, L., Karstens, KF, Wo¨ stemeier, A. , Nawrocki, M., et al. (2020). IL22BP media els efectes antitumorals de la limfotoxina contra els tumors colorectals en ratolins i humans. Gastroenterologia 159, 1417– 1430.e3. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2020.06.033.
33. Kotenko, SV, Izotova, LS, Mirochnitchenko, OV, Esterova, E., Dickensheets, H., Donnelly, RP i Pestka, S. (2001). Identificació, clonació i caracterització d'un nou receptor soluble que s'uneix a IL-22 i neutralitza la seva activitat. J. Immunol. 166, 7096–7103. https://doi. org/10.4049/jimmunol.166.12.7096.
34. Dudakov, JA, Hanash, AM i van den Brink, MRM (2015). Interleucina-22: immunobiologia i patologia. Ann. Reverent Immunol. 33, 747–785. https://doi.org/10.1146/annurev-immunol-032414-112123.
35. Wolk, K., Kunz, S., Witte, E., Friedrich, M., Asadullah, K. i Sabat, R. (2004). IL-22 augmenta la immunitat innata dels teixits. Immunitat 21, 241–254. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2004.07.007.
36. Sabat, R., Ouyang, W. i Wolk, K. (2014). Oportunitats terapèutiques del sistema IL-22-IL-22R1. Nat. Rev. Drug Discov. 13, 21–38. https://doi. org/10.1038/nrd4176.
37. Zenewicz, LA, Yancopoulos, GD, Valenzuela, DM, Murphy, AJ, Stevens, S. i Flavell, RA (2008). La interleucina innata i adaptativa-22 protegeix els ratolins de la malaltia inflamatòria intestinal. Immunitat 29, 947–957. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2008.11.003.
38. Gronke, K., Hernández, PP, Zimmermann, J., Klose, CSN, Kofoed Branzk, M., Guendel, F., Witkowski, M., Tizian, C., Amann, L., Schumacher, F., et al. (2019). La interleucina-22 protegeix les cèl·lules mare intestinals contra l'estrès genotòxic. Natura 566, 249–253. https://doi.org/10.1038/ s41586-019-0899-7.
39. Saxton, RA, Henneberg, LT, Calafiore, M., Su, L., Jude, KM, Hanash, AM i Garcia, KC (2021). Les funcions protectores dels teixits de la interleucina-22 es poden desacoblar de les accions proinflamatòries mitjançant un disseny basat en l'estructura. Immunitat 54, 660–672.e9. https://doi.org/10. 1016/j.immuni.2021.03.008.
40. Dumoutier, L., Louahed, J. i Renauld, JC (2000). Clonació i caracterització del factor inducible derivat de cèl·lules T (IL-TIF) relacionat amb IL-10-, una nova citoquina estructuralment relacionada amb IL-10 i induïble per IL-9. J. Immunol. 164, 1814–1819. https://doi.org/10.4049/jimmunol.164. 4.1814.
41. Lejeune, D., Dumoutier, L., Constantinescu, S., Kruijer, W., Schuringa, JJ i Renauld, JC (2002). La interleucina-22 (IL-22) activa les vies de la cinasa JAK/STAT, ERK, JNK i p38 MAP en una línia cel·lular d'hepatoma de rata. Rutes que es comparteixen amb IL-10 i es diferencien d'elles. J. Biol. Chem. 277, 33676–33682. https://doi.org/10.1074/jbc.M204204200.
42. Nagalakshmi, ML, Rascle, A., Zurawski, S., Menon, S. i de Waal Malefyt, R. (2004). La interleucina-22 activa STAT3 i indueix IL-10 per les cèl·lules epitelials del còlon. Int. Immunofarmacol. 4, 679–691. https://doi. org/10.1016/j.intimp.2004.01.008.
43. Mitra, A., Raychaudhuri, SK i Raychaudhuri, SP (2012). La proliferació cel·lular induïda per IL-22- està regulada per la cascada de senyalització PI3K/Akt/mTOR. Citocina 60, 38–42. https://doi.org/10.1016/j.cyto.2012.06.316.
44. Bachmann, M., Ulziibat, S., H€ ardle, L., Pfeilschifter, J. i M€ uhl, H. (2013). IFNalpha converteix IL-22 en una citocina que activa de manera eficient STAT1 i els seus objectius aigües avall. Bioquímica. Pharmacol. 85, 396–403. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2012.11.004.
45. Zheng, Y., Valdez, PA, Danilenko, DM, Hu, Y., Sa, SM, Gong, Q., Abbas, AR, Modrusan, Z., Ghilardi, N., de Sauvage, FJ i Ouyang , W. (2008). La interleucina-22 media la defensa primerenca de l'hoste contra l'adhesió i l'eliminació de patògens bacterians. Nat. Med. 14, 282–289. https://doi. org/10.1038/nm1720.
46. Andoh, A., Zhang, Z., Inatomi, O., Fujino, S., Deguchi, Y., Araki, Y., Tsujikawa, T., Kitoh, K., Kim-Mitsuyama, S., Takayanagi , A., et al. (2005). La interleucina-22, membre de la subfamília IL-10, indueix respostes inflamatòries en miofibroblasts subepitelials del còlon. Gastroenterologia 129, 969–984. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2005.06.071.
47. Tufman, A., Huber, RM, Vo¨ lk, S., Aigner, F., Edelmann, M., Gamarra, F., Kiefl, R., Kahnert, K., Tian, F., Boulesteix, AL, et al. (2016). La interleucina-22 està elevada en el rentat de pacients amb càncer de pulmó i altres malalties pulmonars. BMC Cancer 16, 409. https://doi.org/10.1186/s12885-016- 2471-2.
48. Voigt, C., May, P., Gottschlich, A., Markota, A., Wenk, D., Gerlach, I., Voigt, S., Stathopoulos, GT, Arendt, KAM, Heise, C., et al. (2017). Les cèl·lules canceroses indueixen la producció d'interleucina-22 a partir de cèl·lules T CD4(+) de memòria mitjançant la interleucina-1 per promoure el creixement del tumor. Proc. Natl. Acad. Ciència. EUA 114, 12994–12999. https://doi.org/10.1073/pnas.17051 65114.
49. Markota, A., Endres, S. i Kobold, S. (2018). Orientació a la interleucina-22 per a la teràpia contra el càncer. Brunzit. Vacuna. Immunoaltre. 14, 2012–2015. https:// doi.org/10.1080/21645515.2018.1461300.
50. Ewens, A., Mihich, E. i Ehrke, MJ (2005). Metàstasi a distància d'adenocarcinoma medul·lar de mama E0771 cultivat per via subcutània. Res. anticancerígena 25, 3905–3915.
51. Sugiura, K., i Stock, CC (1952). Estudis en un espectre tumoral. I. Comparació de l'acció de la metil bis (2-cloroetil)amina i la 3-bis ({2-cloroetil)aminometil-4-metoximetil -5-hidroxi{{7} }metilpiridina en el creixement de diversos tumors de ratolí i rates. Càncer 5, 382–402. https://doi.org/10.1002/1097-0142(195203)5:2<382::aidcncr2820050229>3.0.co;2-3.
52. Renier, N., Wu, Z., Simon, DJ, Yang, J., Ariel, P. i Tessier-Lavigne, M. (2014). iDISCO: un mètode senzill i ràpid per immunomarcar mostres de teixit grans per obtenir imatges de volum. Cel·la 159, 896–910. https://doi.org/10. 1016/j.cell.2014.10.010.
53. Kleinschmidt, D., Giannou, AD, McGee, HM, Kempski, J., Steglich, B., Huber, FJ, Ernst, TM, Shiri, AM, Wegscheid, C., Tasika, E., et al.
54. O'Donnell, JS, Madore, J., Li, XY i Smyth, MJ (2020). Funcions immunes intrínseques i extrínseques del tumor del CD1
55. Semin. Càncer Biol. 65, 189–196. https://doi.org/10.1016/j.semcancer.2019.11.013. 55. Molfetta, R., Zitti, B., Lecce, M., Milito, ND, Stabile, H., Fionda, C., Cippitelli, M., Gismondi, A., Santoni, A. i Paolini, R. (2020). CD155: una molècula multifuncional en la progressió del tumor. Int. J. Mol. Ciència. 21, 922. https://doi.org/10.3390/ijms21030922.
56. Gao, J., Zheng, Q., Xin, N., Wang, W. i Zhao, C. (2017). CD155, una molècula oncoimmunològica en tumors humans. Càncer Ciència. 108, 1934– 1938. https://doi.org/10.1111/cas.13324.
57. Morimoto, K., Satoh-Yamaguchi, K., Hamaguchi, A., Inoue, Y., Takeuchi, M., Okada, M., Ikeda, W., Takai, Y. i Imai, T. ( 2008). La interacció de les cèl·lules canceroses amb les plaquetes mediada pel receptor Necl-5/poliovirus millora la metàstasi de cèl·lules canceroses als pulmons. Oncogen 27, 264–273. https://doi.org/10.1038/sj.onc.1210645.
58. Chan, CJ, Martinet, L., Gilfillan, S., Souza-Fonseca-Guimaraes, F., Chow, MT, Town, L., Ritchie, DS, Colonna, M., Andrews, DM i Smyth, MJ (2014). Els receptors CD96 i CD226 s'oposen entre si en la regulació de les funcions de les cèl·lules assassines naturals. Nat. Immunol. 15, 431–438. https://doi.org/10.1038/ni.2850.
59. Fuchs, A., Cella, M., Giurisato, E., Shaw, AS i Colonna, M. (2004). Avantguarda: CD96 (tàctil) afavoreix l'adhesió de cèl·lules NK a les cèl·lules diana mitjançant la interacció amb el receptor del poliovirus (CD155). J. Immunol. 172, 3994– 3998. https://doi.org/10.4049/jimmunol.172.7.3994.
60. Jarosch, S., Ko¨ hlen, J., Wagner, S., D'Ippolito, E. i Busch, DH (2022). ChipCytometry per a la detecció multiplexada de marcadors de proteïnes i ARNm en mostres de teixit FFPE humà. STAR Protoc. 3, 101374. https://doi.org/10.1016/j.xpro.2022.101374.
61. Chauvin, JM, Ka, M., Pagliano, O., Menna, C., Ding, Q., DeBlasio, R., Sanders, C., Hou, J., Li, XY, Ferrone, S., et al. (2020). L'estimulació IL15 amb bloqueig TIGIT reverteix la disfunció de les cèl·lules NK mediada per CD155- en el melanoma. Clin. Càncer Res. 26, 5520–5533. https://doi.org/10.1158/ 1078-0432.CCR-20-0575.
62. Weulersse, M., Asrir, A., Pichler, AC, Lemaitre, L., Braun, M., Carrie´ , N., Joubert, MV, Le Moine, M., Do Souto, L., Gaud, G., et al. (2020). La pèrdua dependent de l'eoma del receptor coactivador CD226 frena les funcions antitumorals de les cèl·lules T CD8(+) i limita l'eficàcia de la immunoteràpia contra el càncer. Immunitat 53, 824–839.e10. https://doi.org/10.1016/j.immuni. 006/09/2020.
63. Braun, M., Aguilera, AR, Sundarrajan, A., Corvino, D., Stannard, K., Krumeich, S., Das, I., Lima, LG, Meza Guzman, LG, Li, K., et al. (2020). CD155 a les cèl·lules tumorals impulsa la resistència a la immunoteràpia induint la degradació del receptor activador CD226 a les cèl·lules T CD8(+). Immunitat 53, 805–823.e15. https://doi.org/10.1016/j.immuni. 01/09/2020.
64. Lepletier, A., Madore, J., O'Donnell, JS, Johnston, RL, Li, XY, McDonald, E., Ahern, E., Kuchel, A., Eastgate, M., Pearson, SA, et al. (2020). L'expressió del tumor CD155 s'associa amb la resistència a la immunoteràpia antiPD1 en el melanoma metastàtic. Clin. Càncer Res. 26, 3671–3681. https://doi.org/10.1158/1078-0432.CCR-19-3925.
65. Newman, AM, Steen, CB, Liu, CL, Gentles, AJ, Chaudhuri, AA, Scherer, F., Khodadoust, MS, Esfahani, MS, Luca, BA, Steiner, D., et al. (2019). Determinació de l'abundància i expressió del tipus cel·lular a partir de teixits a granel amb citometria digital. Nat. Biotecnologia. 37, 773–782. https://doi.org/10.1038/s41587-019-0114-2.
66. Soriani, A., Zingoni, A., Cerboni, C., Iannitto, ML, Ricciardi, MR, Di Gialleonardo, V., Cippitelli, M., Fionda, C., Petrucci, MT, Guarini, A., et al. (2009). La regulació depenent de l'ATM-ATR dels lligands DNAM-1 i NKG2D en cèl·lules de mieloma múltiple per agents terapèutics dóna lloc a una millora de la susceptibilitat de les cèl·lules NK i s'associa amb un fenotip senescent. Sang 113, 3503–3511. https://doi.org/10.1182/blood- 2008-08-173914.
