Plantes tailandeses amb alts nivells d'antioxidants, activitat d'eliminació de radicals lliures, activitat antitirosinasa i anticolagenasa

Contacte:

Contacte:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Moragot Chatatikun1 i Anchalee Chiabchalard2

Resum

Antecedents:La radiació ultraviolada de la llum solar indueix una sobreproducció d'espècies reactives d'oxigen (ROS) que resulta en un fotoenvelliment de la pell i trastorns d'hiperpigmentació. Els nous compostos blanquejadors i antiarrugues de productes naturals han adquirit un interès creixent recentment. L'objectiu d'aquest estudi era trobar productes que redueixin ROS en 14 extractes de plantes tailandeses.

Mètodes:Determinar fenòlics i totalsflavonoidecontingut,antioxidantactivitat,anti-tirosinasal'activitat i l'activitat anti-colagenasa, vam comparar extractes de 14 plantes tailandeses preparats amb diferents dissolvents (èter de petroli, diclorometà i etanol).AntioxidantLes activitats es van determinar mitjançant assajos DPPH i ABTS.

Resultats:El contingut fenòlic total dels 14 extractes de plantes tailandeses es va trobar als nivells més alts en etanol seguit d'extractes de diclorometà i èter de petroli, respectivament, mentre queflavonoideEl contingut es trobava normalment a la fracció de diclorometà. L'activitat d'eliminació va oscil·lar entre el 7 i el 99 per cent d'eliminació segons l'avaluació dels assajos DPPH i ABTS. L'extracte de fulla d'etanol d'Ardisia elliptica Thunb. tenia el contingut fenòlic més alt, activitat antioxidant i inhibició de col·lagenasa, mentre que Cassia alata (L.) Roxb. extracte tenia el més ricflavonoidecontingut. Curiosament, tres extractes de plantes, que eren les fraccions etanòliques d'Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb. i Senna alata (L.) Roxb. tenia altantioxidantcontingut i activitat i va inhibir significativament tots dostirosinasai col·lagenasa.

Conclusió:Els nostres resultats mostren que les fraccions d'etanol d'Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb. i Senna alata(L.) Roxb. mostra prometedors com a ingredients potencials per a productes cosmètics com ara agents antiarrugues i productes per blanquejar la pell.

Paraules clau:Ardisia elliptica Thunb.,Antioxidantcontingut, activitat de recollida,Antitirosinasaactivitat, activitat anti-collagenasa

El flavonoide és un dels elements decistanche

Fons

La radiació ultraviolada (UVR) de la llum solar és el factor de risc més significatiu per als càncers de pell no melanoma i melanoma [1]. La sobreexposició a la llum solar, en particular a UVA i UVB, indueix la sobreexpressió d'espècies reactives d'oxigen (ROS) que danyen els lípids, les proteïnes i els àcids desoxirribonucleics. El col·lagen és la base principal de la matriu extracel·lular a la capa dermis de la pell. L'excés de ROS augmenta l'expressió de col·lagenasa, una proteasa que degrada el col·lagen que pot provocar un fotoenvelliment i arrugues de la pell [2]. A més, l'exposició als raigs UV indueix la producció de melanina que resulta en una hiperpigmentació.Tirosinasaés l'enzim clau que inicia la pigmentació de la pell. En primer lloc, la L-tirosina s'hidroxila per formar 3,4-dihidroxifenilalanina (L-DOPA) per la tirosinasa. Posteriorment, la L-DOPA s'oxida a DOPA quinona per la tirosinasa. La DOPA quinona es converteix encara més en DOPAchrome que es pot convertir en àcid 5,6-dihidroxiindol (DHI) o 5,6-dihidroxiindol-2-àcid carboxílic (DHICA)[3]. Els tractaments actuals per a l'envelliment de la pell inclouen hidroxilàcid per pelar la capa epidèrmica, retinoides per reduir la pell rugosa i farciment de la pell administrat mitjançant la injecció de col·lagen a la pell. Tanmateix, aquests tractaments tenen efectes adversos, com hiperpigmentació, inflamació, citotoxicitat, irritació i infecció bacteriana [4]. L'agent blanquejador més popular és la hidroquinona, que inhibeixtirosinasa, però els seus efectes secundaris inclouen dermatitis, edema, reaccions al·lèrgiques i ocronosi [5]. Recentment, els investigadors s'han centrat en productes naturals que inhibeixen les ROS induïdes per UV, suprimeixen els enzims i redueixen la formació de melanina com a alternatives als tractaments actuals. Per exemple, fitocompostos actius, com arbutina, aloesina, àcid gentsic,flavonoides, hesperidina, regalèssia, niacinamida, derivats de llevats i polifenols, inhibeixen la melanogènesi sense citotoxicitat dels tomelanòcits [6]. Així, les plantes poden reduir la formació d'arrugues i la hiperpigmentació causades per l'exposició a la llum solar.

L'objectiu d'aquest estudi va ser analitzar 14 plantes tailandeses extretes amb tres dissolvents diferents pel seu potencial com a ingredients anti-arrugues i per blanquejar la pell. El nombre deantioxidantfenols iflavonoidess'ha avaluat per a una correlació amb activitats d'eliminació de radicals lliures i anti-collagenasa ianti-tirosinasaactivitats. Els extractes tenienantioxidantsque va eliminar els radicals lliures i va inhibir els enzims implicats en la formació d'arrugues i pigments. Identifiquem Ardisia elliptica Thunb., Annona squamosa L. i Senna alata (L.) Roxb és un candidat molt prometedor per al seu ús en productes cosmètics.

culturisme cistanche

Mètodes

Productes químics i reactius

Reactiu fenol de Folin Ciocalteu, carbonat sòdic (Na2CO3), àcid gàlic, quercetina, clorur d'alumini al 10%, etanol, 2, 2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH), àcid ascòrbica, 2,2′-Azino- àcid bis(3-etilbenztiazolina-6-sulfònic)(ABTS), persulfat de potassi, àcid cògic, tirosinasa de bolets (EC 1.14.18.1), 3,4-dihidroxi-L-fenilalanina (L- DOPA), N-[3-({2-furil)acriloil]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA), col·lagenasa de Clostridium histolyticum (EC3.4.24.3), galat d'epigalocatequina (EGCG) , clorur de sodi, clorur de calci i sulfòxid de dimetil (DMSO) es van comprar a Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, MO, EUA). L'èter de petroli, el diclorometà, l'etanol absolut, el metanol, l'hidrogenfosfat disòdic i el dihidrogenfosfat sòdic es van comprar a Merck (Darmstadt, Alemanya). Tots els productes químics i reactius eren de grau analític.

Materials vegetals i extracció

Es van recollir tretze espècies de fulles tailandeses del jardí d'herbes de la princesa Sirindhorn, província de Rayong, Tailàndia. Els mangostàns es van obtenir de la província de Chanthaburi, Tailàndia. Aquestes plantes van ser autenticades i dipositades a l'Herbari, Departament de Botànica, Facultat de Ciències, Universitat de Chulalongkorn, Tailàndia. Els noms científics, els números de val i les parts de les plantes es mostren a la taula 1. Les plantes es van extreure utilitzant l'aparell Soxhlet. En resum, es van extreure per separat 10 g de planta seca amb èter de petroli, diclorometà i etanol. Els dissolvents es van eliminar mitjançant un evaporador rotatiu al buit a pressió reduïda mitjançant el concentrador MiVac Quattro. Les mostres concentrades es van dissoldre en DMSO a 100 mg/ml i es van emmagatzemar a -20 graus fins que s'utilitzen. Els rendiments d'extractes secs es presenten a la taula 1 com a percentatge p/p de materials vegetals secs.

Determinació del contingut fenòlic total

El contingut fenòlic total dels extractes de plantes es va avaluar mitjançant el mètode Folin-Ciocalteu [7]. Breument, es van barrejar 50 ul d'extractes a 1 mg/ml en aigua destil·lada amb 50 ul de reactiu Folin-Ciocalteu al 10 per cent i 50 ul de Na2CO3 0,1 M. La barreja de reacció es va incubar durant 1 h a temperatura ambient a la foscor. L'absorbància a 750 nm es va mesurar amb un lector de microplaques (Biotek, EUA). Es va utilitzar àcid gàl·lic d'1,56 a 100 ug/ml com a estàndard. El contingut fenòlic total dels extractes s'expressa com a mg d'equivalents d'àcid gàlic (GAE) per g de material vegetal sec. Totes les mostres es van analitzar per triplicat.

Determinació del contingut de flavonoides

TotalflavonoideEl contingut (TFC) es va determinar mitjançant l'assaig colorimètric de clorur d'alumini (AlCl3) [7]. Breument, 50 ul dels extractes a 1 mg/ml en etanol al 80 per cent es van barrejar amb 50 ul de solució d'AlCl3 al 2 per cent al pou d'una placa de paret 96. La placa es va incubar durant 15 minuts a temperatura ambient. L'absorbància a 435 nm es va mesurar mitjançant un lector de microplaques. La quercetina d'1,56 a 100 ug/ml va servir com a estàndard. El contingut total de flavonoides s'expressa com a mg equivalents de quercetina (QE) per g de material de planta seca. Les mostres es van analitzar per triplicat.

Activitat d'eliminació de DPPH

L'assaig d'activitat d'eliminació de DPPH es va realitzar tal com descriuen Yamasaki et al. [8]. La solució de DPPH es va preparar recentment per a cada assaig. Breument, 100 extractes ug/ml o 1,56 a 100 ug/ml estàndard d'àcid ascòrbic en metanol absolut es van barrejar amb 180 ul de reactiu DPPH en una placa de 96 pous. La barreja de reacció es va incubar durant 30 minuts a temperatura ambient a la foscor. A continuació, es va mesurar l'absorbància a 517 nm amb un lector de microplaques. Els experiments es van fer per triplicat. L'absorbància a 517 nm de DPPH va ser de 0,70 ± 0,02 i la disminució de l'absorbància va mesurar l'activitat d'eliminació. La capacitat d'eliminació es va calcular com a activitat d'eliminació (per cent)=100 per cent × [(훥A517 de control - 훥A517 de mostra)/ 훥A517 de control]. Els percentatges d'activitat d'eliminació de DPPH dels extractes es van comparar amb els de l'àcid ascòrbic i s'expressen en mgvitamina C equivalentantioxidantcapacitat (VCEAC) per material vegetal sec. La IC50 es va determinar a partir d'un gràfic d'inhibició percentual contra la concentració (de 0,78 a 100 ug/ml de cada extracte).

Activitat de recollida d'ABTS

L'activitat d'eliminació de radicals lliures ABTS es va realitzar tal com es va descriure anteriorment [9]. El reactiu de treball ABTS• plus es va preparar barrejant 7 mM d'ABTS• i 2,45 mM de persulfat de potassi a una relació volum/volum de 8:12. La solució de treball es va mantenir durant 16 a 18 h a temperatura ambient a la foscor. La solució ABTS• plus es va diluir amb etanol absolut per donar una absorbància a 734 nm de 0,70 ± 0,02. A continuació, es van afegir extractes de 100 ug/ml o 1,56 a 100 ug/ml d'àcid ascòrbic estàndard en etanol absolut a 180 ul d'ABTS• més reactiu de treball als pous d'una placa de 96 pous. La placa es va incubar durant 45 min a temperatura ambient i es va mesurar l'absorbància a 734 nm. Els experiments es van fer per triplicat. La capacitat d'eliminació es va calcular com a activitat d'eliminació (percentatge)=100 × [(훥A734 de control - 훥A734 de mostra)/ 훥A734 de control]. Els percentatges d'activitat d'eliminació d'ABTS dels extractes es van comparar amb els de l'àcid ascòrbic i es presenten com a equivalent de vitamina C.antioxidantcapacitat (VCEAC) per g de material vegetal sec. La IC50 es va determinar a partir del gràfic del percentatge d'inhibició contra la concentració (de 15,62 a 1000 ug/ml de cada extracte).

Determinació de la inhibició de la tirosinasa de bolets

El mètode dopacrom es va realitzar amb una lleugera modificació [10]. Breument, 20 ul d'extractes de plantes o DMSO (com a control), 20 ul de 203,3 unitats/ml de tirosinasa de bolets i 140 ul de tampó fosfat de 20 mM a pH 6,8 es van pre-incubar durant 10 min a 25 graus. Després de la preincubació, es van afegir 20 ul de L-DOPA de 2, 5 mM i les mostres es van incubar durant 20 min addicionals a 25 graus. La quantitat de dopacrom es va mesurar a 492 nm amb un lector de microplaques. L'àcid kòjic (KA) va servir com a control positiu per a la inhibició. El percentatge d'inhibició de l'activitat de la tirosinasa (per cent) era expressa per centtirosinasainhibició {{0}} × [(훥A492 de control –훥A492 de mostra)/ 훥A492 de control]. Les concentracions finals dels extractes i l'àcid cògic van ser d'1 i 0,1 mg/ml, respectivament. IC50 es va determinar a partir del gràfic del percentatgetirosinasainhibició contra la concentració (de 15,62 a 1000 ug/ml de cada extracte).

culturisme cistanche

Determinació de la inhibició de la col·lagenasa

La inhibició de la col·lagenasa es va determinar mitjançant un mètode descrit anteriorment [11]. Breument, es van barrejar 40 ul de col·lagenasa de Clostridium histolyticum a 0,25 unitats/ml en tampó Tricina 50 mM que contenia 10 mM CaCl2 i 400 mM NaCl, i 10 ul de tampó Tricina 50 mM amb 10 ul. dels extractes o DMSO (com a control). Es va utilitzar el galat d'epigalocatequina (EGCG) com a control positiu. Després d'un 15-min d'incubació a temperatura ambient, es van afegir 50 ul de N-[{3-({2-furil)acriloil]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA). L'absorbància es va mesurar a 340 nm immediatament i contínuament durant 20 min. L'activitat enzimàtica es va avaluar mitjançant la disminució de l'absorbància durant l'interval de temps. El percentatge d'inhibició de l'activitat de la col·lagenasa es va calcular com a 100 × [(Activitat de control - Activitat de la mostra)/Activitat de control]. Les concentracions finals dels extractes i del galat d'epigalocatequina van ser d'1 i 0,1 mg/ml, respectivament. La IC50 es va determinar a partir del gràfic del percentatge d'inhibició de la col·lagenasa enfront de la concentració (de 15,62 a 1000 ug/ml de cada extracte).

Anàlisis estadístics

Tots els experiments es van dur a terme per triplicat i els resultats s'expressen com a mitjana ± error estàndard. La coeficiència de correlació (R2) entreantioxidantEl contingut i les activitats antioxidants es van determinar mitjançant el programari SigmaPlotversion 12.2. La diferència entre les dues mitjanes es va avaluar mitjançant la prova t de Student. Les diferències es van considerar significatives quan el valor P era inferior a 0,05.

Resultats

Rendiments d'extracció

La taula 1 mostra els noms científics, el nombre de vals i les parts de les plantes de les 14 plantes tailandeses utilitzades en aquest estudi. Els rendiments percentuals dels extractes oscil·laven entre el 0,73% i el 31,11% en pes (Taula 1). Ardisia elliptica Thunb. va tenir el rendiment més alt en èter de petroli (19,89 per cent) i extractes d'etanol (31,11 per cent), mentre que Garcinia mangostanaL. va tenir el rendiment per cent més alt de l'extracció de diclorometà (11,07 per cent).

Contingut fenòlic de 14 plantes tailandeses

Per tant, el contingut fenòlic total de les plantes es va determinar pel mètode Folin-Ciocalteu. Els extractes tenien un ampli rang en el nombre de fenols, tal com es mostra a la taula 2, i els valors variaven 33- vegades entre els extractes. Ardisiaelliptica Thunb. tenia el contingut de fenol més alt en els tres tipus d'extractes, mentre que el contingut fenòlic més baix estava present al ganxo de Stemona curtissi. f. extracte d'èter de petroli.

Contingut de flavonoides de 14 plantes tailandeses

Similar als fenols, totalflavonoideel contingut va variar substancialment entre les espècies vegetals, oscil·lant entre 2,04 ± 0,16 a 31,38 ± 0,81 mg QE per g de material sec (taula 2). En general, l'extracció de diclorometà va donar la més altaflavonoidenivell comparat amb altres dissolvents. De tots els extractes, la quantitat més alta de flavonoides es va trobar a l'extracte d'etanol de les fulles de Senna alata (L.) Roxb (31,38 ± 0,81 mg de material sec QE perg). D'altra banda, Ardisia elliptica Thunb.(23,14 ± 1,10 mg QE per g de material sec). tenia el contingut de flavonoides més ric en la fracció de diclorometà. A més, Ipomoea pes-caprae (L.) R.br. tenia el contingut més alt de flavonoides entre els extractes d'èter de petroli (27,48 ± 2,59 mg QE per g de material sec). El nivell més baix de flavonoides detectables es trobava a l'extracte d'etanol de Daturametel L. Per contra,flavonoidesno es van trobar en extractes d'èter de petroli i diclorometà de Stemona curtisii Hook.f., i extractes d'èter de petroli de Streblus asper Lour. i Phyllanthus acidus (L.) Skeels. El contingut total de flavonoides no es correlacionava amb el contingut fenòlic total (R2=0.0284, Fig. 1a).

Activitat d'eliminació de radicals DPPH en diferents extractes de 14 plantes tailandeses

L'activitat d'eliminació de radicals lliures utilitzant DPPH com a indicador és bàsicaantioxidantassaig [12]. Com es mostra a la taula 3, les activitats d'eliminació dels extractes van variar molt, des del 7,11 ± 0,59 per cent fins al 96,17 ± 0,05 per cent. L'extracte d'etanol Ardisia ellipticaThunb va tenir l'activitat d'eliminació més alta al 96 per cent. A més, el següent més fortantioxidant activities (>90 per cent) es van observar en fraccions d'etanol de Stemonacurtisii Hook.f., Annona squamosa L., Phyllanthus acidus (L.) Skeels. i Garcinia mangostana Linn. Pel que fa als altres dissolvents, Ardisia elliptica Thunb també va tenir l'activitat d'eliminació més rica entre les fraccions d'èter de petroli, i Garcinia mangostana L. va tenir la més alta activitat antioxidant en les fraccions de diclorometà. La capacitat d'eliminació més baixa es va detectar a Croton sublyratus Kurz a la fracció d'èter de petroli. No es va detectar cap activitat d'eliminació en 7 extractes d'èter de petroli i 2 extractes de diclorometà.

Activitat d'eliminació radical d'ABTS en diferents extractes de 14 plantes tailandeses

AntioxidantL'activitat de les fases aquosa i lipídica a les plantes també s'ha avaluat mitjançant un assaig de decoloració mitjançant ABTS [13]. De nou, l'àcid ascòrbic va servir com a estàndardantioxidant. As with the DPPH assay, scavenging activity in the ABTS assay varied greatly among the plant preparations with a similarly broad range from 8.03 ± 0.54% to 99.84 ± 0.07% (Table 4). Furthermore, the next strongest scavenging activities (> 90%) were observed in the same 4 ethanol fractions as shown by the DPPH assay. In addition, no scavenging activity was found in the same 5 petroleum ether extracts. In general, the values obtained with the ABTS assay were higher than the DPPH values. Hence, activity in the ethanol extract from Senna alata (L.) Roxb. was now observed as >90 per cent, i es va detectar activitat carronyadora en tots els extractes de diclorometà i extractes d'èter de petroli d'Annona squamosa L. i Ipomoea pes-caprae (L.) R.br. que no va ser detectat per l'assaig DPPH.

Inhibició de l'activitat tirosinasa per extractes de plantes

La capacitat dels compostos de les plantes tailandeses per inhibir els boletstirosinasaL'activitat es va avaluar mitjançant un assaig in vitro amb L-DOPA com a substrat. L' àcid kòjic va servir com a inhibidor conegut i va provocar una inhibició màxima enzimàtica del 93,38 ± 1,63 per cent . Com es mostra a la taula 5, només els extractes d'etanol van inhibir significativament l'activitat de la tirosinasa, amb Ardisia elliptica Thunb. els preparatius són l'excepció. Les fraccions èter de petroli i diclorometà d'Ardisia elliptica Thunb. va inhibir l'activitat de la tirosinasa en un 20% aproximadament. La fracció d'etanol de Rhinacanthus nasutus (L.) Kurz (valor IC 50 de 271,50 ug/ml) va ser l'inhibidor de la tirosinasa més potent, seguit dels extractes d'etanol d'Ardisia ellipticaThunb. i Phyllanthus acidus (L.) Skeels. Altres fraccions d'etanol van disminuir significativament l'activitat enzimàtica en més d'un 20 per cent (taula 5), ​​mentre que els extractes restants no tenien activitat inhibidora detectable (dades no mostrades).

Inhibició de l'activitat col·lagenasa per 14 plantes

Els extractes es van provar per a l'activitat anti-collagenasa utilitzant la col·lagenasa de Clostridium histolyticum i la N-[3-(2-furil)acriloil]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA) com a substrat. El galat d'epigallatecatequina és un inhibidor de col·lagenasa conegut i una disminució de l'activitat enzimàtica en un 90,51 ± 2,79 per cent. Tal com es mostra a la taula 5, només 4 extractes d'etanol contenien activitat inhibidora de col·lagenasa detectable. Dels que causen la inhibició, Ardisia elliptica Thunb. (valor IC 50 de 157,78 ug/ml) va mostrar el nivell més alt d'inhibició de col·lagenasa, seguit per Annona squamosa L. (valor IC 50 de 426,67 ug/ml), Senna alata (L.) Roxb. i Croton sublyratusKurz en rang. ordre. Altres extractes de plantes no van inhibir significativament l'activitat de la col·lagenasa en les condicions de reacció utilitzades en aquest estudi (dades no mostrades).

Discussió

La radiació solar és un factor ambiental important en els danys a la pell i pot induir càncer de pell [14]. La radiació UV provoca una resposta proinflamatòria, degradació de la matriu extracel·lular iantioxidantesgotament [15, 16]. Els UV provoca la formació d'espècies reactives d'oxigen (ROS) que indueixen hiperpigmentació i expressió de col·lagenasa [17, 18]. El nostre estudi va investigar 14 plantes tailandeses extretes amb tres dissolvents diferents pel seu potencial com a ingredients antiarrugues i blanquejador de la pell. En aquest estudi, hem utilitzat èter de petroli, diclorometà i etanol per a l'extracció de plantes mitjançant l'aparell Soxhlet. Ardisia elliptica Thunb. va tenir el rendiment més alt en extractes d'èter de petroli i etanol, mentre que Garcinia mangostana L. va tenir el rendiment més alt de l'extracció de diclorometà. Aquests dissolvents són una sèrie de dissolvents orgànics amb polaritats creixents. La variació entre els percentatges de rendiment depenia de l'espècie vegetal i probablement reflectia diferències en la composició química de les plantes.

Els fenòlics són el grup més gran de fitoquímics que es troben a les plantes i tenen diverses activitats biològiques en animals, inclosos els humans [19]. El contingut fenòlic total de les plantes es va determinar pel mètode Folin Ciocalteu. En general, la fracció d'etanol tenia el contingut fenòlic més ric, seguida del diclorometà, mentre que l'èter de petroli amb baixa polaritat tenia el contingut fenòlic més baix en comparació amb els altres dissolvents. En aquest estudi, Ardisia elliptica Thunb. tenia el contingut fenòlic més alt en els tres tipus d'extractes. En estudis anteriors, els extractes de fulles de diclorometà d'Ardisia elliptica Thunb. tenen un contingut fenòlic d'101 ± 1,3 mg de GAE per g de material de planta seca, que és més que el contingut d'un extracte de branques [20]. A més, un extracte de metanol de fruita madura Ardisia contenia 5,64 ± 0,37 g de GAE per 100 g d'extracte [21]. Per tant, fulles i fruits d'Ardisia ellipticaThunb. tenen un alt contingut fenòlic que es pot extreure fàcilment amb metanol, diclorometà i etanol.

FlavonoidesSón pigments en flors, fulles, fruits i llavors. Aquests compostos són metabòlits secundaris de les plantes i estan àmpliament distribuïts entre espècies vegetals [22]. A continuació, es va avaluar el contingut de flavonoides a les plantes tailandeses mitjançant l'assaig colorimètric de clorur d'alumini. Els nostres resultats van mostrar que la quantitat més alta de flavonoides es va trobar a l'extracte d'etanol de Senna alata (L.) Roxbleaves. En un estudi anterior, es va trobar un alt contingut de flavonoides en aigua (4,25 mg QE per 100 g) i fraccions de metanol (3,97 mg QE per 100 g) de Senna alata (L.) Roxb.[23]. Així, les preparacions de Senna alata (L.) Roxb tenen un alt contingut de flavonoides quan s'extreuen amb dissolvents d'alta polaritat, com etanol, metanol i aigua. Ardisiaelliptica Thunb. tenia el contingut de flavonoides més ric en la fracció de diclorometà. El fruit d'aquesta planta també té un alt contingut en flavonoides de 36,91 ± 2,37 mg de QE per g d'extracte [24]. Per tant, el fruit i les fulles d'Ardisia elliptica Thunb. són flavonoides rics. El contingut total de flavonoides no es correlaciona amb el contingut fenòlic total. Malgrat això,flavonoidestenen moltes activitats biològiques com ara protecció UVB [25], antiinflamatòria [26], antihepatotoxicitat [27] i anticancerígen [28].

Activitat d'eliminació de radicals lliures mitjançant DPPH i ABTSassay. En l'assaig DPPH, DPPH rep un hidrogenàtom d'unantioxidant[29]. Vam trobar que l'extracte d'etanol d'Ardisiaelliptica Thunb tenia l'activitat d'eliminació més alta. Altres investigadors també han informat de fraccions de diclorometà d'Ardisia elliptica Thunb. Les fulles i les tiges tenen alts nivells deantioxidantl'activitat es determina per l'assaig DPPH i, per tant, aquesta planta és molt interessant per investigar més com a tractament a base d'herbes [20]. Els extractes de la fracció d'etanol amb alta polaritat van mostrar clarament millorantioxidantactivitat que les fraccions amb polaritats més baixes que contenen diclorometà i èter de petroli. Els extractes d'etanol contenien els nivells més alts d'activitat d'eliminació de radicals lliures en comparació amb els altres extractes, i tots els extractes d'etanol eren actius. En l'assaig ABTS, ABTS es converteix en la seva radicalització mitjançant l'addició de persulfat de potassi. En presència d'un antioxidant, el catió ABTS reactiu (o ABTS• plus ) es converteix a la seva forma natural incolora [9]. D'acord amb l'assaig DPPH, els extractes d'etanol contenien els nivells més alts d'activitat de depuració en comparació amb els altres extractes. De nou, els extractes d'etanol, diclorometà i èter de petroli més alts d'activitats d'eliminació eren de les mateixes plantes que mostra l'assaig DPPH. Els resultats dels assaigs DPPH i ABTS estaven altament correlacionats com s'esperava (Fig. 1f).

Tanmateix, el totalflavonoideEl contingut dels extractes de plantes no es va correlacionar amb l'activitat eliminadora de radicals lliures detectada per l'assaig DPPH (Fig. 1c) o per l'assaig ABTS (Fig. 1e). Les nostres troballes de cap relació significativa entre ellsflavonoideEl contingut i l'activitat d'eliminació que utilitza l'assaig ABTS són coherents amb els resultats d'altres investigadors [30]. Per contra, el contingut fenòlic total de la preparació de plantes es va correlacionar positivament amb l'activitat d'eliminació mesurada pels dos assajos (Fig. 1b i d) d'acord amb un estudi anterior [31]. Notablement, l'activitat d'eliminació depenia del contingut fenòlic total i de dissolvents amb polaritats elevades, com l'etanol i el diclorometà. Aquests resultats suggereixen que el contingut fenòlic és el principal constituentantioxidantactivitat a les 14 plantes tailandeses.

La melanina, el pigment principal del color de la pell i el cabell, és sintetitzada pels melanòcits dins dels melanosomes. La sobreproducció i l'acumulació de melanina a la pell poden provocar trastorns topigmentaris i problemes estètics. La hiperpigmentació es produeix a les zones de la pell exposades al sol [32]. En la melanogènesi,tirosinasaés l'enzim clau en l'etapa limitadora de velocitat en què la L-tirosina s'hidroxila a L-DOPA, que s'oxida encara més en DOPAquinona. Després d'això, es converteix en DOPAchrome que és un substrat per a la síntesi de melanina [3]. Desregulació detirosinasas'ha proposat que l'activitat sigui responsable de la disminució de la producció de melanina. El desenvolupament de nous compostos fitoquímics blanquejants a partir de productes naturals s'ha convertit recentment en una tendència creixent. La nostra troballa va demostrar que la fracció d'etanol de Rhinacanthus nasutus (L.) Kurz era l'inhibidor de la tirosinasa més potent, seguit dels extractes d'etanol d'Ardisia elliptica Thunb. i Phyllanthus acidus (L.) Skeels. Òbviament, 7 plantes de 14 plantes tenien un alt contingut fenòlic, especialment Ardisiaelliptica Thunb. i Annona squamosa L. A més, Senna alata (L.) Roxb. tenia el més ricflavonoidecontingut que pot inhibir l'activitat de la tirosinasa. Els compostos actius de les plantes com l'arbutina, l'aloesina, l'àcid gentsic, els flavonoides, l'hesperidina, la regalèssia, la niacinamida, els derivats del llevat i els polifenols, poden inhibir la melanogènesi sense citotoxicitat per als melanòcits [6].

La col·lagenasa és una peptidasa de zinc transmembrana que trenca l'enllaç X-Gly del col·lagen. El col·lagen és una proteïna estructural abundant i un component de la matriu extracel·lular [33]. La disminució de les fibres de col·lagen i elastina augmenta amb l'edat i el dany de la radiació UV que indueix la pell arrugada[34]. S'ha proposat la inhibició de la col·lagenasa per prevenir l'envelliment de la pell. Dels que causen inhibició en el nostre estudi, Ardisiaelliptica Thunb. va mostrar el nivell més alt d'inhibició de col·lagenasa, seguit per Annona squamosa L., Senna alata (L.) Roxb. i Croton sublyratus Kurz en ordre de classificació. En un estudi anterior, l'extracte de beina de cacau tenia àcid fenòlic iflavonoidesque va inhibir l'activitat elastasa i col·lagenasa [35]. En particular, tres extractes d'etanol (Ardisia elliptica Thunb., Annona squamosa L. i Senna alata (L.) Roxb. van inhibir ambdóstirosinasai col·lagenasa. Aquestes plantes també tenien alts nivells de fenòlics i flavonoides, iantioxidantActivitat. Curiosament, aquests extractes tenen possibles usos com a ingredients per a productes cosmètics.

Conclusió

Els nostres resultats demostren que els extractes de 14 plantes tailandeses tenen diferents graus de fenòlic total iflavonoidecontingut així com activitats d'eliminació de radicals lliures, depenent dels dissolvents d'extracció. Hi va haver una alta correlació entre el contingut fenòlic total i l'activitat d'eliminació de radicals lliures avaluada pels assajos DPPH i ABTS. La fracció d'etanol d'Ardisia ellipticaThunb. tenia el contingut fenòlic més alt, seguit d'Annona squamosa L. Ambdues plantes van inhibir significativament les activitats de la tirosinasa i la col·lagenasa, mentre que Rhinacanthusnasutus (L.) Kurz va mostrar la inhibició de la tirosinasa més alta. A més, Senna alata (L.) Roxb. era el més ric en contingut de flavonoides, i també s'exposavatirosinasai comportament inhibidor de la col·lagenasa. La fracció d'etanol de tres plantes, a saber, Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb i Senna alata (L.) Roxb., tenen el potencial de ser ingredients en productes cosmètics per a l'anti-arrugues i el blanquejament de la pell. Calen estudis addicionals per investigar els components actius i la seguretat d'aquests extractes.

culturisme cistanche

Referències

1. Moehrle M. Esports a l'aire lliure i càncer de pell. Clin Dermatol. 2008;26(1):12–5.

2. López-Camarillo C, Ocampo EA, Casamichana ML, Perez-Plasencia C,Alvarez-Sanchez E, Marchat LA. Proteïnes quinases i activació de factors de transcripció en resposta a la radiació UV de la pell: implicacions per a la carcinogènesi. Int J Mol Sci. 2012;13(1):142–72.

3. Iwata M, Corn T, Iwata S, Everett MA, Fuller BB. La relació entre l'activitat de la tirosinasa i el color de la pell en els prepucis humans. J Investig Dermatol.1990;95(1):9–15.

4. RS de popa. Tractament del fotoenvelliment. N Engl J Med. 2004;350(15):1526–34.

5. Levin CY, Maibach H. Ocronosi exògena. Una actualització sobre les característiques clíniques, els agents causants i les opcions de tractament. Am J Clin Dermatol. 2001;2(4):213–7.

6. Zhu W, Gao J. L'ús d'extractes botànics com a agents tòpics per aclarir la pell per a la millora dels trastorns de la pigmentació de la pell. J Investig DermatolSymp Proc. 2008;13(1):20–4.

7. Zongo C, Savadogo A, Ouattara L, Bassole IHN, Ouattara CAT, Ouattara AS,Barro N, Koudou J, TraoreI AS. Contingut de polifenols, activitats antioxidants i antimicrobianes d'Ampelocissus grantii (forner) Planch. (Vitaceae): planta medicinal de Burkina Faso. Int J Pharmacol. 2010;6(880–887)

8. Yamasaki K, Hashimoto A, Kokusenya Y, Miyamoto T, Sato T. Mètode electroquímic per estimar els efectes antioxidants dels extractes de metanol de fàrmacs bruts. Chem Pharm Bull (Tòquio). 1994;42(8):1663–5.

9. Re R, Pellegrini N, Proteggente A, Pannala A, Yang M, Rice-Evans C. Activitat antioxidant aplicant un assaig de decoloració radical ABTS millorat. Radic Lliure Biol Med. 1999;26(9–10):1231–7.

10. Nithitanakool S, Pithayanukul P, Bavovada R, Saparpakorn P. Estudis d'acoblament molecular i activitat anti-tirosinasa de l'extracte del nucli de llavors de mango tailandès. Molècules. 2009;14(1):257–65.

11. Bonvicini F, Antognoni F, Iannello C, Maxia A, Poli F, Gentilomi GA. Activitat rellevant i selectiva de Pancratium Illyricum L. contra aïllats clínics de Candida Albicans: un efecte combinat sobre el creixement i la virulència del llevat. BMCComplement Altern Med. 2014;14(1):409.

12. Sharma OP, Bhat TK. Assaig antioxidant DPPH revisat. Química dels Aliments. 2009;113(4):1202–5.

13. MacDonald-Wicks LK, Wood LG, Garg ML. Metodologia per a la determinació de la capacitat antioxidant biològica in vitro: una revisió. J Sci Food Agric. 2006;86(13):2046–56.

14. Armstrong BK, Kricker A. L'epidemiologia del càncer de pell induït per UV. JPhotochem Photobiol B Biol. 2001;63(1–3):8–18.

15. Bashir MM, Sharma MR, Werth VP. La UVB i la citocinesia proinflamatòria activen de manera sinèrgica la producció de TNF als queratinòcits mitjançant la transcripció del gen. J Investig Dermatol. 2009;129(4):994–1001.

16. Watson RE, Gibbs NK, Griffiths CE, Sherratt MJ. Danys a la matriu extracel·lular de la pell induïts per l'exposició UV. Senyal antiòxid Redox. 2014;21(7):1063–77.

17. D'Orazio J, Jarrett S, Amaro-Ortiz A, Scott T. La radiació UV i la pell. Int JMol Sci. 2013;14(6):12222–48.

18. Pittayapruek P, Meephansan J, Prapapan O, Komine M, Ohtsuki M. Rol ofmatrix Metalloproteinases in Photoaging and Photocarcinogènesi. Int J MolSci. 2016;17(6):868.

19. Sulaiman CT, Balachandran I. Els fenòlics totals i els flavonoides totals van seleccionar plantes medicinals índies. Indian J Pharm Sci. 2012;74(3):258–60.

20. Mamat N, Jamal JA, Jantan I, Husain K. Activitats inhibidores de la Xanthine Oxidase i eliminació de radicals DPPH d'algunes espècies de Primulaceae. SainsMalaysiana. 2014;43(12):1827–33.

21. Wetwitayaklung P, Charoenteeraboon J, Limmatvapirat C, Phaechamud T.Activitats antioxidants d'algunes fruites tailandeses i exòtiques cultivades a Tailàndia.Res J Pharm, Biol Chem Sci. 2012;3(1):12–21.

22. Falcone Ferreyra ML, Rius SP, Casati P. Flavonoides: biosíntesi, funcions biològiques i aplicacions biotecnològiques. Planta davantera Sci. 2012;3:222.

23. Devendra K, Kiran D, Ritesh V, Satyendra B, Abhishek K. Per a l'avaluació dels fenòlics i flavonoides totals en diferents plantes de Chhattisgarh. JPharmacognosy Phytochem. 2013;2(4):116–8.

24. Siti-Azima AM, Northam A, Nurhuda M. Activitats antioxidants de SyzygiumCumini i ArdisiaElliptica en relació amb les seves composicions fenòliques i propietats cromàtiques estimades. Int J Biosci Biochem Bioinform. 2013;3(4):314–7.

25. Solovchenko A, Schmitz-Eiberger M. Importància dels flavonoides de la pell per a la protecció UV-B en fruites de poma. J Exp Bot. 2003;54(389):1977–84.

26. Gonzalez-Gallego J, Sánchez-Campos S, Tunon MJ. Propietats antiinflamatòries dels flavonoides dietètics. Nutr Hosp. 2007;22(3):287–93.

27. Sudha A, Sumathi K, Manikandaselvi S, Prabhu NM, Srinivasan P. Activitat antihepatotòxica de la fracció flavonoide bruta de Lippia Nodiflora L. lesió hepàtica induïda per onetanol en rates. Asian J Anim Sci. 2013;7(1):1–13.

28. Sak K. Cytotoxicity of dietary flavonoids on different human cancer types.Pharmacogn Rev. 2014;8(16):122–46.

29. Kedare SB, Singh RP. Gènesi i desenvolupament del mètode DPPH d'assaig d'antioxidants. J Food Science Technol. 2011;48(4):412–22.

30. Boo HO, Kim TS, Koshio K, Shin JH, Chon SU. Nivells de fenòlics totals i propietats antioxidants en extractes de metanol de diverses plantes silvestres vietnamites. Korean J Plant Res. 2011;24(6):659–65.

31. Dudonne S, Vitrac X, Coutiere P, Woillez M, Merillon JM. Estudi comparatiu de propietats antioxidants i contingut fenòlic total de 30 extractes de plantes d'interès industrial mitjançant assaigs DPPH, ABTS, FRAP, SOD i ORAC. J AgricFood Chem. 2009;57(5):1768–74.

32. Slominski A, Tobin DJ, Shibahara S, Wortsman J. Melanin pigmentation inmammilian skin and its hormonal regulation. Physiol Rev. 2004;84(4):1155–228.

33. Shoulders MD, Raines RT. Estructura i estabilitat del col·lagen. Annu RevBiochem. 2009;78:929–58.

34. Cua AB, Wilhelm KP, Maibach HI. Propietats elàstiques de la pell humana: relació amb l'edat, el sexe i la regió anatòmica. Arch Dermatol Res. 1990;282(5):283–8.

35. Karim AA, Azlan A, Ismail A, Hashim P, Gani SSA, Zainudin BH, Abdullah NA. Composició fenòlica, antioxidant, anti-arrugues i activitats inhibidores de la tirosinasa de l'extracte de beina de cacau. Complement BMC Altern Med. 2014;14(381):1–13.