L'estudi de les rodanxes de Cistanche Deserticola i el producte de vi processat al vapor de Cistanche Deserticola
Mar 10, 2022
La diferència de components químics i activitats biològiques de les rodanxes de les matèries primeres i el producte elaborat al vapor del vi de Cistanche
Contacte: emily.li@wecistanche.com
Ying Zhang,1,2 Yuewu Wang,3 Song Yang,1 Yunfeng Xiao,3 Haibin Guan,2 Xin Yue,2 Xiaoqin Wang,2 i Xiangri Li 1
Resum
Com a herba medicinal xinesa coneguda, elCistanche deserticolas'ha utilitzat per al tractament de la síndrome de deficiència renal a la Xina des de fa milers d'anys. Tant el producte cru deLlesques de Cistanche deserticola(RCD) i els seusProducte de vi processat al vapor(WSCD) s'utilitzen clínicament per a diferents efectes. En aquest estudi, les influències del procés de cocció al vapor amb vi (SPW) a partir deCistanche deserticolaes van investigar les composicions químiques i els efectes biològics. L'anàlisi de components principals (PCA) i l'anàlisi quantitativa es van utilitzar per estudiar les diferències en les composicions químiques. També es van investigar els efectes de nodrir els ronyons per comparar les diferències entre el RCD (rodanxes de Cistanche deserticola)i el WSCD (Producte de vi processat al vapor). Els resultats del PCA van indicar que la separació òbvia es va aconseguir en el RCD(rodanxes de Cistanche deserticola)i WSCD (Producte de vi processat al vapor). Els resultats de l'anàlisi quantitativa van mostrar que el WSCD té quantitats més altes de polisacàrids totals, PhG totals, isoacteòsids i osmantusid B que RCD.(rodanxes de Cistanche deserticola), mentre que el contingut de 2′-acetilacteòsid i acteòsid va disminuir després del SPW. La comparació de RCD i WSCD sobre activitats biològiques va demostrar que ambdues podrien restaurar el nivell d'hormona sexual en el model de deficiència de ronyó-yang i millorar l'efecte antioxidant. El WSCD(Producte de vi processat al vapor)va ser molt millor en augmentar el pes de les vísceresronyói vesícula seminal. Els resultats van indicar que SPW va canviar els seus components químics i va millorar les seves activitats biològiques.
1. Introducció
Cistanche deserticolaés una medicina tradicional xinesa comuna i s'ha utilitzat generalment com a tònic a la Xina i el Japó durant molts anys, coneguda comunament com a "ginseng del desert".Cistanche deserticolaes va registrar per primera vegada com a grau superior a "Shennong's Herbal Classic of Materia Medica (Shen Nong Ben Cao Jing)" cap al 100 aC i es va utilitzar per tractar diverses malalties, com ara deficiència renal, impotència, infertilitat femenina, leucorrea mòrbida, metrorràgia profusa (blancs) , sensació de fred a lloms i genolls, i restrenyiment crònic a la gent gran [1]. Fins ara, s'han aïllat diversos components principals, com ara polisacàrids [2, 3], glicòsids feniletanoides (PhGs) [1, 4], iridoides [1] i lignanoides [1, 5]. Entre ells, s'ha demostrat que els PhG i els polisacàrids són els principals components biològicament actiusCistanche deserticola[6–9]. Els experiments farmacològics moderns han demostrat que Cistanche deserticola pot millorar la producció de testosterona i protegir els espermatozoides, estimular la proliferació cel·lular i augmentar la taxa de supervivència cel·lular, mostrant activitats marcades per a la potència sexual, millorant la memòria, anti-envelliment, eliminació de radicals lliures i neuroprotecció [10]. –13].
Per reduir la toxicitat i/o millorar els efectes, la majoria de les herbes tradicionals xineses s'han de processar abans de la prescripció. Els passos tradicionals del procés inclouen la neteja, el procés d'aigua (molt en aigua, cocció al vapor i torrat) i el procés de foc (escalfament amb vi, vinagre, sal o mel) [14]. Durant el procés, els components químics es poden canviar: el contingut relatiu de certs components es pot canviar o es poden formar nous components [15]. El Procés deCistanche deserticolaté una llarga història iCistanche deserticolas'ha de processar remullant el vi d'arròs, cuinant al vapor tal com es descriu a la farmacopea xinesa (edició 2015) [16]. S'ha demostrat que SPW influeix en els seus efectes sobre el meridià renal segons la teoria de la medicina tradicional xinesa (TCM) [17]. WSCD(Producte de vi processat al vapor)es documenta per primera vegada a "Lei Gongs Treatise on Preparation and Boiling of Materia Medica (Lei Gong Pao Zhi Lun)" a les dinasties del nord i del sud de la Xina. El WSCD s'utilitza millor per tractar les deficiències renals i protegir el semen tal com es registra a "Taiping Shenghui Fang" a la dinastia Song de la Xina. Tanmateix, no hi va haver estudis comparatius sobre els components químics entre RCD(rodanxes de Cistanche deserticola)i WSCD(Producte de vi processat al vapor)fins ara.
Les investigacions farmacològiques modernes han indicat que la WSCD podria tonificar el ronyó per assegurar l'essència estimulant l'eix hipotàlem-hipòfisi-gònades amb diferents graus i s'utilitza per al tractament de la deficiència del ronyó, com ara la deficiència del yang del ronyó [18]. No obstant això, fins ara, les diferències en les activitats biològiques entre RCD(rodanxes de Cistanche deserticola)i WSCD(Producte de vi processat al vapor)no s'han investigat. Recentment, per facilitar la investigació experimental, s'ha duplicat el model animal de deficiència de ronyó-yang mitjançant la injecció de rates amb una alta dosi d'hidrocortisona, en la qual les rates mostraran símptomes molt semblants als descrits en la deficiència de ronyó-yang de TCM [19, 20] . Les rates amb deficiència de yang renal sempre presenten alguns símptomes com ara pèrdua de pes, reducció del consum d'aliments, debilitat, augment de la ingesta d'aigua i disminució de l'activitat. A partir d'aquest model animal, es van detectar les diferències d'efectes nutritius del ronyó entre RCD i WSCD i fins i tot van revelar l'essència científica del procés tradicional xinès.
Cistanche deserticola té moltes funcions
2. Materials i Mètodes
2.1. Materials i productes químics
La substància estàndard com l'acteòsid, l'isoacteòsid, l'equinacòsid, el cistanòsid A i el 2′-acetilacteòsid es va comprar a Shanghai Yuanye Biotechnology Co. Ltd (Xangai, Xina). El cistanoside F, el cistanoside C, l'osmanthuside B i el tubulósid B es van comprar a Chengdu Pfeide Biotechnology Co. Ltd (Chengdu, Xina). La puresa de tots els estàndards no era inferior al 98 per cent. El metanol i l'acetonitril de grau HPLC es van comprar a Aladdin Chemistry Inc. (Xangai, Xina). L'aigua desionitzada es va obtenir mitjançant un sistema d'aigua reactiu MilliQ50 SP (Bedford, MA, EUA) per preparar mostres i solucions mòbils. Tots els altres dissolvents orgànics utilitzats en aquest estudi eren de grau analític i es van comprar a Shanghai Chemical Co. Ltd (Xangai, Xina).
2.2. Recollida de mostres
Tot cruCistanche deserticola(7 lots de mostres) van ser recollits per la Universitat Mèdica de Mongòlia Interior de les províncies de Mongòlia Interior i Ningxia. Tots van ser identificats comcistanche deserticolaYC Ma de Xiao-qin Wang, professor del Departament de Farmacognòsia de la Universitat Mèdica de Mongòlia Interior. Es va dipositar un exemplar de val a l'Escola de Farmàcia de la Universitat Mèdica de Mongòlia Interior. Després de la recollida, les inflorescències deCistanche deserticolaes van treure, les tiges es van tallar i assecar a temperatura ambient amb aire, i després les rodanxes es van dividir aleatòriament en dos grups a cada lot: un és RCD(rodanxes de Cistanche deserticola)i l'altre s'utilitza per a la preparació de WSCD(Producte de vi processat al vapor).
El WSCD(Producte de vi processat al vapor)es van preparar al laboratori segons la farmacopea xinesa (edició 2015) [16], el que significa que el RCD tallat a rodanxes(rodanxes de Cistanche deserticola)es van remullar en vi d'arròs amb un recipient tancat durant 6 hores fins que es van suavitar, es van posar al vapor al bany maria durant 12 hores addicionals fins que la superfície es torna negra i es van assecar a temperatura ambient amb aire.
2.3. Anàlisi de components principals (PCA)
L'anàlisi de components principals (PCA) és una tècnica sofisticada àmpliament utilitzada per reduir les dimensions dels problemes multivariants. Redueix la dimensionalitat del conjunt de dades original explicant la correlació entre un gran nombre de variables en termes d'un nombre menor de factors subjacents sense pèrdua significativa d'informació. En aquest estudi, les diferències entre RCD(rodanxes de Cistanche deserticola)i WSCD(Producte de vi processat al vapor)es van realitzar per PCA no supervisada mitjançant el programari SIMCA 13.0 basat en les àrees pics relatives a la cromatografia HPLC. Amb l'ajuda de PCA, es van trobar les principals influències dels productes químics en la classificació entre diferents mostres.
2.4. Preparació de la mostra
2.4.1. Preparació d'extractes per a animals
El RCD(rodanxes de Cistanche deserticola)i WSCD(Producte de vi processat al vapor)es van seleccionar a partir de les mostres recollides i preparades tal com es descriu a la secció 2.2.
RCD assecat a l'aire i tallat a rodanxes(rodanxes de Cistanche deserticola)va ser pols per un polveritzador (FW135, Tianjin Taisite Instrument Co., Ltd.), pesava amb precisió 1,0 kg i es va remull en etanol al 50 per cent durant 30 min, i les proporcions de planta/etanol utilitzades van ser 1/ 10 (p/p). I després, es va extreure sota reflux dues vegades durant 1 h cada vegada. Els dos extractes es van combinar i es van filtrar i es va recuperar l'etanol a pressió reduïda a 60 graus. L'extracte brut total de PhG es va assecar al buit a 60 ∘ C i es va purificar per resina macroporosa. Finalment, es va obtenir l'extracte PhGs de RCD i es va pesar amb precisió.
L'extracte de PhGs de WSCD(Producte de vi processat al vapor)s'ha obtingut seguint el mateix procediment anterior.
Els sediments de l'extracció dels PhG es van assecar a l'aire i es van decotar dues vegades durant 1,5 h cada vegada amb 20 vegades d'aigua. Els dos extractes es van combinar i es van centrifugar a 4000 rpm durant 10 min, i el sobrenedant es va concentrar i es va precipitar amb etanol al 95%. Després de la centrifugació, el precipitat es va assecar al buit a 60 graus. Finalment, l'extracte polisacàrid de RCD(rodanxes de Cistanche deserticola)es va obtenir i es va pesar amb precisió.
L'extracte polisacàrid de WSCD(Producte de vi processat al vapor)s'ha obtingut seguint el mateix procediment anterior.
Els PhG i els extractes de polisacàrids de RCD(rodanxes de Cistanche deserticola)i WSCD(Producte de vi processat al vapor)es van barrejar suspensions en aigua, respectivament, quan les rates van ser tractades per via oral.
2.4.2. Preparació de mostres per a la determinació de PhG
Els extractes de PhG de la secció 2.4.1 es van pesar amb precisió com a 0,15 g i es van extreure per ultrasons amb 50ml de solució aquosa de metanol al 50% durant 40 min. Després del refredament, la pèrdua de pes es va reposar amb un 50 per cent de metanol. Totes les mostres i dissolvents es van filtrar a través d'una membrana de 0, 45 μm abans de l'anàlisi. El contingut de quatre PhG en RCD(rodanxes de Cistanche deserticola)i WSCD(Producte de vi processat al vapor)es va determinar mitjançant HPLC i els PhG totals es van determinar mitjançant espectrofotometria UV.
2.4.3. Preparació de mostres per a la determinació de polisacàrids
Els extractes de polisacàrids de la secció 2.4.1 es van pesar amb precisió com a 0.10 g i es van extreure per ultrasons amb 50 ml d'aigua calenta durant 40 min; després del refredament, la pèrdua de pes es va reposar amb aigua. Totes les mostres i dissolvents es van filtrar a través d'una membrana de 0, 45 μm abans de l'anàlisi.
2.5. Condició cromatogràfica de HPLC i determinació dels quatre PhG
La separació cromatogràfica es va realitzar en un sistema HPLC UltiMate 300{{40}} (Thermo Fisher Scientific, EUA), equipat amb una bomba de doble gradient, un compartiment de columna , i un detector DAD. Les dades es van recollir i processar mitjançant un sistema de dades de cromatografia ChromeLeon. Les mostres es van separar en un Agilent Zorbax SB-C18 (250mm × 4,6 mm, 5 μm) amb una columna de protecció C18 (4,6 mm × 12,5 mm, 5 μm). La fase mòbil estava formada per acetonitril (A) i 0, 1 per cent de solució d'àcid fosfòric (B) a un cabal d'1 ml/min. El gradient d'elució és el següent: inicial 0-13 min, canvi lineal de AB (5:95, v/v) a AB (15:85, v/v); 13–25 min, canvi lineal a AB (20:80, v/v); 25–43 min, canvi lineal a AB (25:75, v/v). La longitud d'ona del detector es va controlar a 330 nm. La temperatura de la columna es va establir a 30 graus i el volum de mostra injectat va ser de 10 μL [21]. La solució d'emmagatzematge que contenia quatre estàndards de referència es va preparar dissolent els estàndards de referència en un 50 per cent de metanol fins a una concentració final de 0,20 mg/mL per a 2-acetilacteòsid, 0,20 mg/mL per a acteòsid, 0,05 mg/mL per a osmantuside B, i 0,10 mg/ml per a l'isoacteòsid. La solució es va diluir a cinc concentracions diferents amb tres rèpliques per establir corbes de calibratge. El contingut de la mostra es va expressar en g/kg de pes brut.
L'estudi de les rodanxes de Cistanche deserticola i el Producte de Vi al Vapor de Cistanche deserticola
2.6. Determinació de PhG totals
Els PhG totals es van determinar mitjançant el mètode d'espectrofotometria UV a la longitud d'ona de 330nm a l'espectrofotòmetre UV1000 (Shanghai Tianmei Scientific Instrument Co., Ltd.). La solució d'emmagatzematge es va preparar mitjançant la dissolució dels estàndards d'echinacòsid en un 50 per cent de metanol fins a una concentració final de 0,10 mg/ml i després es va diluir a cinc concentracions diferents amb tres rèpliques per establir corbes de calibratge.
2.7. Determinació de polisacàrids
La determinació dels polisacàrids es va dur a terme mitjançant el mètode fenol-àcid sulfúric. Es va posar 1 ml de la solució de mostra en un tub d'assaig de 20 ml amb un tap de vidre i es va afegir 1 ml de solució de fenol al 6% i 5 ml d'àcid sulfúric concentrat i es va sacsejar durant 5 min. La mescla es va transferir a un bany d'aigua bullint durant 10 minuts i es va refredar a temperatura ambient per a la detecció d'ultraviolats. L'absorció ultraviolada es va controlar a 480 nm en un espectrofotòmetre UV1000. L'estàndard de referència de la D-glucosa anhidra es va pesar amb precisió i es va dissoldre en aigua destil·lada fins a una concentració final de 0,10 mg/ml. A continuació, la solució es va diluir a cinc concentracions diferents amb tres rèpliques per establir corbes de calibratge.
2.8. Experiments amb animals
2.8.1. Animals i Habitatge
Es van comprar rates SD mascles de maduresa sexual (180-200 g) a la granja experimental d'animals de Xinglong (Beijing) (edat: 6 setmanes) i la llicència d'animals de laboratori era SCXK (Jing):2016-0003. Tots els procediments amb animals van ser aprovats pel Comitè d'Investigació d'Animals de la Universitat Mèdica de Mongòlia Interior i es van dur a terme segons les directrius de l'Institut Nacional de Salut sobre els principis de cura dels animals (2004). Tots els animals es van mantenir en un sistema de barrera amb una temperatura regulada de 21-23 graus i una humitat relativa del 40-65 per cent i en un cicle fosc/llum de 12 hores. Les rates van rebre menjar i aigua ad libitum i es van aclimatar a l'entorn anterior durant una setmana.
2.8.2. Dosificació i mostreig
Les rates es van transferir a gàbies metabòliques individuals i es van dividir aleatòriament en 6 grups (= 10 a cada grup). Se'ls va administrar una injecció intramuscular de succinat de sodi d'hidrocortisona de 15 mg/kg (comprat a Tianjin Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd., Tianjin, Xina) durant 2 setmanes, excepte el grup 1 que es va injectar amb un volum igual de solució salina fisiològica. El 14è dia, es van recollir el pes corporal, el consum d'aliments, la ingesta d'aigua, el volum d'orina i l'activitat espontània en 5 minuts per assegurar-se que el model de deficiència de ronyó-yang es va fer amb èxit. A partir del dia 15, es van tractar 6 grups de la següent manera: el grup 1 i el grup 2 (grup model, M) es van tractar amb un volum igual d'aigua destil·lada, grup 3 (extracte PhGs de RCD).(rodanxes de Cistanche deserticola)grup, PR) es van tractar amb 0, 42 g/kg d'extracte de PhGs de RCD, que era igual a uns 1, 8 g/kg de la cruaCistanche deserticolai els altres grups eren els mateixos, el grup 4 (extracte de PhGs de WSCD(Producte de vi processat al vapor)grup, PW) es van tractar amb una dosi de 0, 49 g/kg d'extracte de PhGs de WSCD(Producte de vi processat al vapor), grup 5 (extracte de polisacàrid de RCD(rodanxes de Cistanche deserticola)grup, SR) es van tractar amb 0,18 g/kg l'extracte de polisacàrid de RCD, i el grup 6 va ser (extracte de polisacàrid de WSCD(Producte de vi processat al vapor)grup, SW) es van tractar una dosi de 0,22 g/kg d'extracte de polisacàrid de WSCD. Totes les rates van ser tractades per perfusió gàstrica al dia. Després d'un mes de tractament, a les rates se'ls va negar menjar durant 12 hores abans de la recollida de sang. L'endemà, totes les rates van ser anestesiades i sacrificades. Durant la prova, les rates es van pesar una vegada a la setmana per ajustar la dosi i es van tornar a pesar abans de sacrificar-les. Es van recollir mostres de sang en un tub Eppendorf amb una solució d'EDTA-2Na al 10%. El sèrum es va separar mitjançant centrifugació a 2000 rpm durant 15 min i es va emmagatzemar a -80 graus per a un ús posterior. A més, es van extreure ronyons, testicles, epidídim, glàndula pròstata i vesícula seminal i es van pesar ràpidament. Després de pesar, els testicles es van congelar en nitrogen líquid per a la determinació de SOD i MDA.
2.9. Anàlisi dels efectes hormonals i antioxidants
El nivell de testosterona (T) i estradiol (E2) es va determinar al Centre d'Inspecció de Qualitat de Qingdao Kechuang mitjançant radioimmunitat i mètode colorimètric. Els testicles congelats es van pesar i es van barrejar amb 20 vegades de solució salina fisiològica freda (W/W). L'homogeneïtat testicular obtingut per l'homogeneïtat de teixit al bany de gel es va centrifugar per obtenir el sobrenedant. El contingut del SOD i MDA del testicle es va determinar mitjançant kits SOD i MDA seguint les instruccions.
2.10. Anàlisi estadística
La importància de les diferències entre grups es va comparar mitjançant una prova ANOVA unidireccional seguida de la prova de Scheffe amb un límit de significació de 0.05 utilitzant el programari SPSS 25.0. Totes les dades es van expressar com a mitjana ± desviació estàndard (SD) (n=3).
3. Resultats
3.1. L'anàlisi dels canvis de PhG després de SPW mitjançant PCA
Per comparar els canvis de PhG després de SPW, es van seleccionar 9 pics cromatogràfics com a pics característics i es van identificar. Les seves estructures es van mostrar a la figura 1, les àrees màximes relatives de les quals es van calcular per a l'expressió quantitativa. El cromatograma HPLC tal com es mostra a la figura 2, que indicava que el contingut relatiu dels PhG principals es va canviar durant SPW. Es va obtenir l'anàlisi PCA de les àrees pics relatives de 9 components per a la discriminació de diferents mostres. El RCD(rodanxes de Cistanche deserticola)i WSCD(Producte de vi processat al vapor)estaven lluny l'un de l'altre a la trama de les puntuacions (figura 3 (a)), cosa que indicava que les mostres es van classificar en dos grups. Per tant, es creu que els continguts dels components químics eren diferents. Per trobar encara més els marcadors químics potencials per a la discriminació, es va realitzar una anàlisi estadística ampliada per generar la trama Bi de càrrega (figura 3 (b)). Els pics 2, 3, 4, 6 i 7 disminuiran després del SPW, mentre que els pics 5, 8 i 9 augmentaran, i tots ells van ser els components més importants per distingir el RCD(rodanxes de Cistanche deserticola)i WSCD(Producte de vi processat al vapor). Els continguts relatius del pic 1 no varien gaire després de SPW.
Figura 1 Estructures químiques dels PhG aCistanche deserticolaYC Ma.
Figura 2 Cromatograma HPLC de la substància estàndard (a), RCD(rodanxes de Cistanche deserticola)(b) i WSCD(Producte de vi processat al vapor)(c). Cims: (1) cistàsid F, (2) equinacòsid, (3) cistàsid A, (4) acteòsid, (5) isoacteòsid, (6) cistanòsid C, (7) 2′-acetilacteòsid, (8) osmantuside B i (9) tubulòsid B.
Figura 3 Trama de puntuació PCA (a) i trama de càrrega Bi (b) de RCD(rodanxes de Cistanche deserticola)(cercle verd) i WSCD (cercle vermell). RCD i WSCD es van classificar en dos grups. Els pics 2, 3, 4, 6 i 7 són els components més importants per distingir RCD i WSCD, que es reduiran durant SPW; els pics 5, 8 i 9 també són els components més importants per a les diferències entre RCD i WSCD(Producte de vi processat al vapor), que augmentarà durant el SPW.
3.2. El contingut de polisacàrids totals i PhG va canviar després de SPW
Com es mostra a la figura 3 (b), 8 components (5, 8 i 9 van augmentar i 2, 3, 4, 6 i 7 van disminuir) havien canviat significativament i van tenir un impacte important en l'agrupació de mostres. Entre ells, l'isoacteòsid i l'osmanthuside B havien augmentat més, mentre que el 2′-acetilacteòsid i l'acteòsid van disminuir més. Per tant, el contingut d'isoacteòsid, osmanthuside B, 2′-acetilacteòsid i acteòsid es va determinar mitjançant HPLC. Com es mostra a la figura 1, el pic 4 era acteòsid, el pic 5 era isoacteòsid, el pic 7 era el 2′-acetilacteòsid i el pic 8 era l'osmantuside B. Els PhG totals en RCD(rodanxes de Cistanche deserticola)i WSCD(Producte de vi processat al vapor)es van determinar mitjançant el mètode UV i els polisacàrids totals es van dur a terme mitjançant el mètode fenol-àcid sulfúric, els resultats es van mostrar a la taula 1, l'isoacteòsid, l'osmanthuside B, els polisacàrids totals i els PhG en WSCD havien augmentat significativament en comparació amb RCD. El 2′-acetilacteòsid i l'acteòsid havien disminuït significativament.
Taula 1 El contingut de polisacàrids i PhG en RCD(rodanxes de Cistanche deserticola)i WSCD(Producte de vi processat al vapor)(mg/g) (n=3).
Nota. Diferències significatives amb RCD(rodanxes de Cistanche deserticola)es van designar com a *p < 0.05.
3.3. Es va fer el model de deficiència renal-yang induïda per hidrocortisona
En comparació amb el grup normal, després d'una injecció intramuscular de 2 setmanes de succinat sòdic d'hidrocortisona 15 mg/kg, el pes corporal, el consum d'aliments i l'activitat espontània es van reduir significativament (P).<0.05) and="" the="" water="" intake="" and="" urine="" volume="" were="" increased;="" the="" results="" were="" shown="" in="" table="" 2.="" the="" t="" and="" e2="" levels="" in="" the="" serum="" of="" the="" model="" group="" were="" lower="" than="" the="" normal="" group="" as="" shown="" in="" figure="" 4.="" from="" the="" above,="" the="" kidney-yang="" deficiency="" model="" was="" successfully="">
Taula 2 Els indicadors van canviar després de la injecció intramuscular de succinat de sodi d'hidrocortisona (n=10).
Nota. Les diferències significatives amb el grup N es van designar com# p<>
Figura 4 Els nivells de T i E2: (a) el nivell de T i (b) el nivell d'E2. Les diferències significatives amb el grup M es van designar com∗p < 0.05.="" les="" diferències="" significatives="" amb="" el="" grup="" n="" es="" van="" designar="">#p < 0.05.
3.4. L'impacte dels extractes sobre el pes i l'índex mitjà de les vísceres
Es van pesar totes les rates i les seves vísceres i després es va calcular l'índex mitjà de vísceres.
En comparació amb el grup N, el grup M havia disminuït significativament el pes de les vísceres del ronyó, la vesícula seminal, l'epidídim i el testicle, cosa que també va indicar que el model de deficiència de ronyó-yang induït per hidrocortisona es va fer amb èxit. En comparació amb el grup M, tots els pes de les vísceres observades havien augmentat en el grup PW i SR, el grup PR havia augmentat el pes del testicle, l'epidídim, la vesícula seminal i la glàndula pròstata i el grup SW havia augmentat el pes del ronyó, el testicle, l'epidídim, i vesícula seminal. En comparació amb els grups PR, el grup PW va ser millor al ronyó, la vesícula seminal i la pròstata. No hi va haver cap diferència significativa entre els grups SR i SW en el pes del testicle, l'epidídim, la vesícula seminal i la pròstata. Els resultats es van mostrar a la taula 3.
Taula 3 El pes de les vísceres (g) (n=10).
Nota. Les diferències significatives amb el grup M es van designar com∗p < 0.05.="" les="" diferències="" significatives="" amb="" el="" grup="" n="" es="" van="" designar="">#p < 0.05.
En comparació amb el grup N, els índexs de vísceres del ronyó, testicle, epidídim i vesícula seminal es van reduir al grup M. En comparació amb el grup M, el grup PW i SR havien augmentat l'índex de ronyó, testicle, glàndula pròstata i vesícula seminal, els grups PR havien augmentat l'índex del testicle, glàndula pròstata i vesícula seminal, i el grup SW havia augmentat augmentar l'índex de ronyó, testicle i vesícula seminal. En comparació amb els grups PR, el grup PW va ser millor al ronyó, la vesícula seminal i la pròstata. Els grups SW i SR tenien un índex similar de ronyó, testicle, vesícula seminal i epidídim. Els resultats es van mostrar a la taula 4.
Taula 4 L'índex mitjà de vísceres (g/100g) (n=10).
Nota. Les diferències significatives amb el grup M es van designar com∗p < 0.05.="" les="" diferències="" significatives="" amb="" el="" grup="" n="" es="" van="" designar="">#p < 0.05.
3.5. L'impacte de l'extracte sobre el nivell d'hormona (T i )
Com es mostra a la figura 4, en comparació amb el grup M, els nivells de T i E2 en tots els grups de tractament (grup PW, PR, SW i SR) havien augmentat significativament (P<0.05). however,="" the="" pw="" group="" was="" better="" than="" the="" pr="" group="" at="" levels="" t="" and="" e2.="" the="" sr="" and="" sw="" groups="" had="" no="" significant="">
3.6. L'impacte dels extractes sobre l'efecte antioxidant
La SOD és un enzim antioxidant important. MDA és el producte de la peroxidació lipídica que és l'indicador de reflectir el grau de dany oxidant. El contingut de SOD i MDA reflecteix l'extensió de la capacitat oxidant i antioxidant. Com es mostra a la figura 5, en comparació amb el grup M, l'efecte antioxidant en tots els grups de tractament (PW, PR, SW i SR) s'havia millorat. El grup SW va tenir el més granantioxidantefecte.
Figura 5 El contingut de MDA i SOD: (a) el contingut de MDA i (b) el contingut de SOD. Les diferències significatives amb el grup M es van designar com∗p< 0.05.="" significant="" differences="" with="" the="" n="" group="" were="" designated="" as=""><>
4. Discussió
Abans de l'aplicació clínica, els materials bruts s'han de sotmetre a tècniques de procés tradicionals xinesos. El vapor és un dels enfocaments tradicionals de processament d'algunes herbes medicinals xineses, que dóna un color negre produït per la reacció de Maillard [22], augmentant les quantitats d'alguns components bioactius [23] i activitats farmacològiques. WSCD(Producte de vi processat al vapor)ja que un dels productes del procés és millor en termes de nutrició dels ronyons en comparació amb RCD(rodanxes de Cistanche deserticola)tal com es documenta a l'edició de 2015 de la farmacopea xinesa. En aquest estudi, els resultats del PCA van indicar que el SPW havia canviat el perfil químic del RCD(rodanxes de Cistanche deserticola). A més, 8 components dels PhG havien canviat significativament. Els PhG totals, els polisacàrids totals, l'isoacteòsid i l'osmanthuside B havien augmentat més, mentre que el 2′-acetilacteòsid i l'acteòsid van disminuir després del SPW. Els resultats van indicar que SPW podria canviar els components químics de RCD(rodanxes de Cistanche deserticola). El contingut de PhG amb fragments de glucopiranosil 1,3,4-trisubstituïts (com l'acteòsid, el 2′-acetilacteòsid i el cistàsid C) va disminuir en WSCD(Producte de vi processat al vapor), tanmateix, les concentracions dels seus isòmers amb 1,3,5-part glucopiranosil trisubstituït (com l'isoacteòsid i el tubulòsid B) van augmentar, la qual cosa va indicar que la transformació dels components químics es podria produir durant el SPW, i la reacció d'hidròlisi serà una. dels motius. Les vies de transformació proposades es van mostrar a la figura 6. L'augment dels polisacàrids després de SPW també s'havia informat al ginseng [24].
Figura 6 Propostes de vies de transformació dels PhG a Cistanche deserticola YC Ma durant SPW.
Cistanche deserticolaEs va documentar que estimulava el ronyó i revertia la reducció del nivell de testosterona i posseïa efecte antioxidant i acció antiinflamatòria [25], i els PhG i els polisacàrids eren els dos components biològicament actius principals de Cistanche deserticola. Com a PhG, l'isoacteòsid i l'osmanthuside B tenien efectes antioxidants i antiinflamatoris [26, 27]. Així doncs, la comparació dels efectes farmacològics en el nivell de testosterona i l'efecte antioxidant de RCD i WSCD(Producte de vi processat al vapor)es va estudiar. En el model de deficiència renal-yang induïda per hidrocortisona, l'endocrí es va alterar i el nivell d'hormona sexual es va reduir molt a la sang. En aquest estudi, els resultats de l'anàlisi d'hormones sexuals van mostrar que tant RCD(rodanxes de Cistanche deserticola)i WSCD podria augmentar significativament el nivell de T i E2, i tant els PhG com els polisacàrids van mostrar la millora de les hormones sexuals. El WSCD era millor que el RCD(rodanxes de Cistanche deserticola), especialment en grups d'extracte de PhGs. Els resultats dels índexs de vísceres van mostrar que tant els PhG com els polisacàrids poden millorar els pesos de les vísceres i els seus índexs de pesos. En els grups d'extracció de PhG, el WSCD(Producte de vi processat al vapor)és millor que RCD per augmentar els pesos i els índexs del ronyó i la vesícula seminal. A més,Cistanche deserticolaté un efecte antioxidant important, especialment els grups d'extracte de polisacàrids amb WSCD. Com s'ha comentat anteriorment, tots dos RCD(rodanxes de Cistanche deserticola)i WSCD podria millorar la síndrome de deficiència de ronyó-yang; tanmateix, WSCD és millor que RCD per augmentar el nivell de T, E2, els pesos i els índexs de l'epidídim i el testicle. Els resultats de l'estudi dels efectes farmacològics van indicar que SPW havia canviat els components químics dels PhGs i augmentat el contingut de polisacàrids, que al seu torn augmentava el nivell d'hormones sexuals i millorava elantioxidantefecte.
5. Conclusió
L'estudi va ser descobrir el canvi de PhGs, polisacàrids totals i l'efecte farmacològic en RCD.(rodanxes de Cistanche deserticola)i WSCD sobre la rata de deficiència de ronyó-yang, especialment pel que fa al nivell hormonal i l'efecte antioxidant. Aquest estudi ha demostrat que el procés de les herbes tradicionals xineses pot alterar els seus components químics i afectar la seva bioactivitat. També s'admet que els productes en brut i els productes processats es prescriuen de manera diferent a la clínica.
Disponibilitat de dades
Les dades utilitzades per donar suport a les conclusions d'aquest estudi estan disponibles a l'autor corresponent a petició.
Conflictes d'interès
Els autors declaren que no tenen conflictes d'interessos.
Aportacions dels autors
Ying Zhang i Song Yang van dissenyar els experiments. Ying Zhang, Yuewu Wang i Yunfeng Xiao van dur a terme la recollida i preparació de mostres. Ying Zhang va analitzar les dades i va redactar el document. Xiangri Li i Xiaoqin Wang van ser els responsables de la supervisió de l'estudi. Tots els autors van participar escrivint i donant comentaris sobre el treball. Tots els autors han llegit i aprovat el treball final.
Agraïments
Aquest treball va comptar amb el suport de subvencions dels procediments de processament per a les llesques preparades de fàrmacs crus xinesos (núm. YP-PZ-2014). Gràcies especials a Wenjia Qu i Tianying Jia per la seva gran ajuda en la col·lecció deCistanche deserticola.
Referències
1. Y. Jiang i P.-F. Tu, "Anàlisi de constituents químics en espècies de Cistanche", Journal of Chromatography A, vol. 1216, núm. 11, pàgines 1970–1979, 2009.
Veure a: Lloc de l'editor|Google Scholar
2. W. Zhao, H. Yan, Z.-Y. Liang, Y.-J. Zhang, i X.-Q. Jiao, "Anàlisi estructural del polisacàrid SPA soluble en aigua aïllat de la tija delCistanche deserticolaMa", Chemical Journal of Chinese Universities, vol. 26, núm. 3, pàg. 461–463, 2005.
Veure a: Google Scholar
3. Q. Dong, J. Yao, J.-N. Fang i K. Ding, "Caracterització estructural i activitat immunològica de dos polisacàrids extraïbles en aigua freda deCistanche deserticolaYC Ma", Carbohydrate Research, vol. 342, núm. 10, pàg. 1343–1349, 2007.
Veure a: Lloc de l'editor|Google Scholar
4. X.-M. Wu i P.-F. Tu, "Aïllament i caracterització de -(1→6)-glucans deCistanche deserticola," Journal of Asian Natural Products Research, vol. 7, núm. 6, pàg. 823–828, 2005.
Veure a: Lloc de l'editor|Google Scholar
5. B. Košíková, A. Ebringerová i R. Naran, "Caracterització de les fraccions lignina-hidrats de carboni aïllades del paràsit de la fustaCistanche deserticolaYC Ma.", Holzforschung, vol. 53, núm. 1, pàgs. 33–38, 1999.
Veure a: Google Scholar
6. G. Sheng, X. Pu, L. Lei, P. Tu i C. Li, "El tubuloside B de la salsa Cistanche rescata les cèl·lules neuronals PC12 de la induïda per ions 1-metil-4-fenilpiridini. apoptosi i estrès oxidatiu", Planta Medica, vol. 68, núm. 11, pàgines 966–970, 2002.
Veure a: Lloc de l'editor|Google Scholar
7. M. Deng, J.-Y. Zhao, X.-D. Ju, P.-F. Tu, Y. Jiang i Z.-B. Li, "Efecte protector del tubulósido B sobre l'apoptosi induïda per TNF alfa a les cèl·lules neuronals", Acta Pharmacologica Sinica, vol. 25, núm. 10, pàgs. 1276–1284, 2004.
Veure a: Google Scholar
8. X. Geng, L. Song, X. Pu i P. Tu, "Efectes neuroprotectors dels glicòsids feniletanoides de la salsa de Cistanches contra el 1-metil-4-fenil-1,2,3 ,6-toxicitat dopaminèrgica induïda per tetrahidropiridina (MPTP) en ratolins C57", Biological & Pharmaceutical Bulletin, vol. 27, núm. 6, pàgines 797–801, 2004.
Veure a: Lloc de l'editor|Google Scholar
9. H. Chen, FC Jing, CL Li, PF Tu, QS Zheng i ZH Wang, "Echinacoside impedeix que els nivells extracel·lulars estriatals de neurotransmissors monoamines disminueixin en les rates de 6-hidroxidopamina", Journal of Ethnopharmacology, vol. . 114, núm. 3, pàgines 285–289, 2007.
Veure a: Lloc de l'editor|Google Scholar
10 J. Pan, C. Yuan, C. Lin, Z. Jia i R. Zheng, "Activitats farmacològiques i mecanismes dels glucòsids fenilpropanoides naturals", Die Pharmazie, vol. 58, núm. 11, pàgs. 767–775, 2003.
Veure a: Google Scholar
11. G. Fu, H. Pang i YH Wong, "Glucòsids feniletanoides d'origen natural: potencials pistes per a noves terapèutiques", Current Medicinal Chemistry, vol. 15, núm. 25, pàgines 2592–2613, 2008.
Veure a: Lloc de l'editor|Google Scholar
12. X.-W. Wang, X.-F. Wang, i L.-Y. Wu, "Millora de la memòria dels ratolins dels glucòsids feniletanoides deCistanche deserticola," Chinese Pharmacological Bulletin, núm. 19, pàg. 41-42, 2002.
Veure a: Google Scholar
13. J.-X. Xie i C.-F. Wu, "Efecte de l'extracte etanòlic deCistanche deserticolasobre el contingut de neurotransmissors monoamines al cervell de rata", Drogues tradicionals i herbes xineses, núm. 24, pàgs. 417–419, 1993.
Veure a: Google Scholar
14. H. Wu i C.-J. Hu, Chinese Medicine Process Discipline, People's Medical Publishing House, Beijing, Xina, 2012.
15. ZZ Zhao, ZT Liang, K. Chan et al., "A unique issue in the standardization of Chinese materia medica: processing", Planta Medica, vol. 76, núm. 17, pàgines 1975–1986, 2010.
Veure a: Lloc de l'editor|Google Scholar
16. Comissió de Farmacopea Xinesa, Farmacopea de la República Popular Xina 2015, vol. IV, Farmacopea de la República Popular de la Xina, Beijing, Xina, 2015.
17. J.-M. Chen, Enlightening Primer of Materia Medical, Traditional Chinese Medicine Ancient Books Press, Beijing, Xina, 2009.
18. B.-R. Li i Y.-C. Ella, "Efectes dels medicaments tonificants del ronyó en l'eix hipotàlem-hipòfisi-gònades (HPG)", Journal of Traditional Chinese Medicine, núm. 7, pàgs. 63–65, 1984.
Veure a: Google Scholar
19. M. Chen, L. Zhao i W. Jia, "Estudi metabonòmic sobre els perfils bioquímics d'un model animal induït per hidrocortisona", Journal of Proteome Research, vol. 4, no. 6, pàgines 2391–2396, 2005.
Veure a: Lloc de l'editor|Google Scholar
20. Q. Chen i N.-Y. Yi, "Els models animals i fàrmacs per a la deficiència de Yin i la deficiència de Yang", a Metodologia experimental d'investigació farmacològica en medicina tradicional xinesa, Publicació de la Salut del Poble, Beijing, Xina, 1993.
Veure a: Google Scholar
21. Z.-G. Ma, Z.-L. Yang, P. Li i C.-H. Li, "Determinació simultània de vuit glicòsids feniletanoides en diferents espècies del gènere Cistanche per cromatografia líquida d'alt rendiment", Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies, vol. 31, núm. 18, pàgines 2838–2850, 2008.
Veure a: Lloc de l'editor|Google Scholar
22. Z. Liu, Z. Chao, Y. Liu, Z. Song i A. Lu, "Reacció de Maillard implicada en el procés de vaporització de l'arrel de Polygonum multiflorum", Planta Medica, vol. 75, núm. 1, pàgs. 84–88, 2009.
Veure a: Lloc de l'editor|Google Scholar
23. W.-T. Chang, YH Choi, R. Van Der Heijden, et al., "El processament tradicional afecta fortament la composició del metabòlit per hidròlisi a les arrels de Rehmannia glutinosa", Chemical & Pharmaceutical Bulletin, vol. 59, núm. 5, pàgines 546–552, 2011.
Veure a: Lloc de l'editor|Google Scholar
24. Y. Jin, Y.-J. Kim, J.-N. Jeon et al., "Efecte del ginseng blanc, vermell i negre sobre les propietats fisicoquímiques i els ginsenòsids", Plant Foods for Human Nutrition, vol. 70, no. 2, pàgines 141–145, 2015.
Veure a: Lloc de l'editor|Google Scholar
25. T. Wang, X.-Y. Zhang i W.-Y. Xie,"Cistanche deserticolaYC Ma, 'desert Ginseng': A review", American Journal of Chinese Medicine, vol. 40, núm. 6, pàgs. 1123–1141, 2012.
Veure a: Lloc de l'editor|Google Scholar
26. S.-Y. Nam, H.-Y. Kim, M.-S. Yoou et al., "Efectes antiinflamatoris de l'isoacteòsid d'Abeliophyllum distichum", Immunofarmacologia i Immunotoxicologia, vol. 37, núm. 3, pàgines 258–264, 2015.
Veure a: Lloc de l'editor|Google Scholar
27. S. Chae, JS Kim, KA Kang, et al., "Antioxidant activity of isoacteoside from Clerodendron trichotomum", Journal of Toxicology and Environmental Health, Part A. Current Issues, vol. 68, núm. 5, pàgines 389–400, 2005.
Veure a: Lloc de l'editor|Google Scholar
De: Medicina alternativa i complementària basada en l'evidència / 2019 / Article
Volum 2019 |ID de l'article 2167947|https://doi.org/10.1155/2019/2167947
