La decocció de Tongluo Digui tracta la lesió renal en rates diabètics mitjançant la promoció de l'autofàgia dels podòcits

Contacte:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

HAN Jiarui, ZHANG Yage, SHI Xiujie, PENG Zining, XING Yufeng, PANG Xinxin

Resum

OBJECTIU:

Investigar els efectes de la decocció de Tongluo Digui sobre la lesió renal i l'autofàgia dels podòcits induïda per estreptozotocina en rates diabètiques.

MÈTODES:

Les rates masculines Sprague-Dawley es van dividir aleatòriament en sis grups: normal, model, decocció Tongluo Digui (dosi alta, mitjana i baixa) i valsartan. Es va injectar estreptozotocina per via intraperitoneal per replicar el model animal diabètic. Després de 8 setmanes, es va avaluar la proteinúria per establir el model de nefropatia diabètica. Els tractaments es van administrar diàriament per via intragàstrica. A les 16 setmanes després de la sonda, vam determinar la concentració de proteïnes de l'orina de 24 hores, la glucosa en sang, la creatinina sèrica i les concentracions de nitrogen ureic. A continuació, es van sacrificar rates i es van recollir els ronyons i es van tacar amb àcid-Schiff periòdic per avaluar els canvis patològics dels glomèruls, inclosos els podòcits glomerulars mitjançant microscòpia electrònica de transmissió. L'anàlisi de Western blot es va utilitzar per determinar l'expressió de la proteïna nefrina, podocina, p62, beclin-1, LC3Ⅱ/Ⅰ i p-mTOR/mTOR als teixits renals.

RESULTATS:

En comparació amb el grup model, la decocció de Tongluo Digui es va associar amb disminucions de la concentració de proteïnes d'orina de 24 hores, glucosa en sang, hemoglobina A1c, creatinina sèrica, concentracions de nitrogen ureic, proteïna sèrica total i albúmina. Paral·lelament, es va reduir l'eixamplament mesentèric mesangial i la fusió dels processos del peu, la membrana basal glomerular no es va engrossir significativament i es va augmentar el nombre de podòcits i el nombre d'autofagosomes als podòcits. A més, l'expressió de la proteïna nefrina, podocina, LC3Ⅱ i beclin-1 al teixit renal es va regular a l'alça, mentre que l'expressió de la proteïna p62 es va regular a la baixa i es va inhibir la fosforilació de mTOR.

CONCLUSIÓ:

La decocció de Tongluo Digui pot inhibir la progressió de la nefropatia diabètica mitjançant la inhibició de la fosforilació de mTOR, augmentant així l'autofàgia per protegir els podòcits i reduir la proteinúria.

Paraules clau:nefropaties diabètics; autofàgia; podòcit; Decocció Tongluo Digui

beneficis de la tija del cistancheperfunció renal

INTRODUCCIÓ

La nefropatia diabètica (DN) és una de les complicacions microvasculars greus de la diabetis, amb un 30% del -40% dels pacients diabètics que pateixen malaltia renal. Amb l'augment de la incidència de la diabetis, la DN s'ha convertit en la principal causa de malaltia renal en fase terminal a tot el món.1 Aquesta és una gran càrrega econòmica tant per a les famílies com per a la societat.

El dany dels podòcits és una causa important de la progressió de la DN. Com a cèl·lula diferenciada terminalment, l'autofàgia té un paper important en el manteniment de la funció fisiològica dels podòcits.2,3 En un estat fisiològic normal, hi ha un alt grau d'autofàgia dins dels podòcits que elimina proteïnes i orgànuls danyats.4 No obstant això, en el diabètic medi ambient, l'autofàgia dels podòcits s'inhibeix, cosa que suggereix que l'autofàgia dels podòcits té un paper important en la patogènesi de DN.5 DN pertany a les categories de "Xiao Ke", "Guan Ge" i "edema" a la medicina tradicional xinesa. La teoria de la Medicina Tradicional Xinesa és que l'estasi de la sang iYin deficiènciasón les causes més importants de la DN.6 Per tant, el tractament de la DN hauria de promoure la circulació sanguínia i nodrir el yin, i per això es va establir la decocció de Tongluo Digui. Anteriorment vam trobar que la decocció de Tongluo Digui tenia un efecte de tractament beneficiós a la DN. En aquest estudi, vam voler utilitzar el model de rata DN de tipus 1 induït per estreptozotocina (STZ) per avaluar l'efecte de la decocció de Tongluo Digui sobre la lesió renal, l'autofàgia i la via de senyalització mTOR. També vam explorar el mecanisme molecular subjacent de la decocció de Tongluo Digui per retardar la progressió de la DN i vam proporcionar proves per a la prevenció clínica i el tractament de la DN.

MATERIALS I MÈTODES

Animals

Rates Sprague-Dawley lliures de patògens específics (SPF) [n=60, mascles, (150 ± 10) g; número de certificat de qualificació: SCXK (Yu) 2017-0001] es van comprar al Henan Experimental Animal Center (Zhengzhou, Xina). Cicle d'il·luminació estàndard (14 h de llum, 10 h de nit), temperatura interior (23 ± 2) graus , humitat (40 per cent -50 per cent ), allotjament (tres animals per gàbia) i alimentació (aliment esterilitzat i aigua potable). L'experiment es va completar al Laboratori del Centre d'Imatge Cel·lular de l'Hospital de Medicina Tradicional Xinesa de Henan (Zhengzhou, Xina). Tots els experiments es van realitzar segons la guia per a la cura i l'ús d'animals de laboratori publicada pels Instituts Nacionals de Salut.

Drogues

Les càpsules de Valsartan (Val) es van comprar a Novartis Pharma Schweiz AG (X2307 CN-b, Pequín, Xina). La decocció de Tongluo Digui consta de Shuichi (Hirudo) 12 g, Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) 30 g, Dihuang (Radix Rehmanniae) 20 g, Huangqi (Radix Astragali Perparata) 20 g, Danggui (Radix Angelicae Sinensis, Zexima 30R) Alismatis) 10 g, Dahuang (Radix et Rhizoma Rhei) 15 g, Gancio (Radix Glycyrrhizae) 6 g. Les herbes xineses es van comprar a l'Hospital de Medicina Tradicional Xinesa de Henan (Zhengzhou, Xina).

Disseny experimental

Les rates es van dividir aleatòriament en sis grups, cadascun format per 10 rates: grup control (Ctrl), grup model DN (STZ), model DN amb grup de tractament Val (Val), model DN amb grup de tractament amb dosis altes de decocció Tongluo Digui (HTL) , model DN amb grup de tractament de dosis mitjanes de decocció Tongluo Digui (MTL) i model DN amb grup de tractament de dosis baixes de decocció Tongluo Digui (LTL). Els sis grups de rates es van sacrificar a les 16 setmanes després de la recol·lecció de ronyons i sonda.

Val (10 mg·kg－1·d－1) i la decocció de Tongluo Digui en tres dosis diferents es van administrar per sonda una vegada al dia durant 16 setmanes. Les dosis administrades es van basar en l'equació de conversió de dosis de fàrmacs entre animals i humans. Dosi en rata (mg/kg)=dosi en humans adults (mg/kg) × factor de conversió (6,25). Els grups de dosis altes, mitjanes i baixes de decocció de Tongluo Digui van rebre una sonda gàstrica de 5,4, 2,7 i 1,35 g·kg - 1·d - 1, respectivament. Les rates es pesaven setmanalment. L'orina 24-h es va recollir mitjançant gàbies metabòliques al final de les setmanes 0, 12 i 24. Després del final del tractament (a les 24 setmanes), les rates van ser anestesiades mitjançant injecció subcutània d'hidrat de cloral i es van recollir mostres de teixit de ronyó i sang i es van emmagatzemar a -80 graus. Les rates tenien accés gratuït a una dieta normal d'animals de laboratori i aigua neta (excepte com es descriu a continuació).

planta de cistanche

Establiment del model DN

STZ (Sigma, St. Louis, MO, EUA) es va utilitzar per induir la diabetis tal com es va descriure anteriorment.7 Les 6 0 rates tenien un accés limitat a l'aigua durant 12 h abans dels experiments. D'aquestes, a 50 rates se'ls va administrar una única injecció intraperitoneal de STZ 60 mg/kg dissolt en tampó de citrat (0, 1 mol/L, pH 4, 5). La diabetis es va confirmar mesurant les concentracions de glucosa en sang 72 h després de la injecció de STZ. Els animals amb una concentració de glucosa superior o igual a 16,7 mmol/L durant tres dies consecutius es van considerar diabètics. Després de 8 setmanes, les rates es van allotjar en gàbies metabòliques separades i es va recollir l'orina durant 24 hores per mesurar la microalbúmina d'orina (UAE). El model DN es va confirmar en obtenir EAU superior o igual a 30 mg/ 24 h.

Indicadors bioquímics

Les valoracions sèriques i urinàries es van utilitzar per avaluar la funció renal dels animals. L'orina de rata es va avaluar mitjançant la gàbia metabòlica. Les mostres de sang de rata es van obtenir mitjançant el mètode del tall de la cua.8 Les mostres de sèrum i orina es van congelar a -80 graus fins al seu ús. Es van mesurar les concentracions de creatinina sèrica, nitrogen d'urea en sang, albúmina i proteïnes d'orina mitjançant radioimmunoassaig. Es van mesurar els nivells d'hemoglobina A1c (HbA1c), pèptid C i insulina mitjançant el kit ELISA HbA1c (Crystal Chem INC, Elk Grove Village, IL, EUA), el kit Elisa de pèptid C (Kainuo Bio Ltd., Beijing, Xina) i insulina Kit Elisa (Merck Millipore Co., Ltd., Bed Ford, MA, EUA) seguint les instruccions del fabricant respectivament. L'àcid úric, la proteïna sèrica total (TP), l'albúmina (ALB), l'alanina aminotransferasa (ALT) i l'aspartat aminotransferasa (AST) en rates es van determinar mitjançant un analitzador bioquímic automàtic.

Exploració histopatològica

El teixit renal fixat amb formalina es va incrustar en parafina, es va tallar en seccions de gruix de 3-4 μm i es va tenyir amb àcid periòdic-Schiff (PAS). Els canvis morfològics en el teixit renal, inclosa la proliferació de cèl·lules mesangials, la infiltració cel·lular i les alteracions de la matriu mesangial, es van examinar per a cada secció tenyida mitjançant microscòpia de llum (NIKON D3100) (× 400).

Microscopi electrònic de transmissió

Es va utilitzar TEM per observar la morfologia dels podòcits i les cèl·lules mesangials del teixit renal. Els teixits renals frescos es van dividir en blocs (< 1="" mm3="" ),="" were="" quickly="" fixed="" in="" 2%="" phosphate-buffered="" glutaraldehyde="" for="" at="" least="" 2="" h,="" washed="" three="" times="" with="" pbs,="" fixed="" in="" 1%="" osmium="" tetroxide="" for="" 2="" h,="" and="" then="" embedded="" in="" acetone="" wrap="" after="" dehydration.="" specimens="" were="" sliced="" in="" 50-60="" nm="" ultrathin="" sections,="" double-stained="" with="" 3%="" uranyl="" acetate="" and="" lead="" citrate,="" and="" then="" examined="" under="" a="" tem="" (jeol-jem-1400="" plus,="" japan="" electron="" optics="" laboratory,="">

Anàlisi Western blot

La proteïna total es va extreure del teixit renal mitjançant un tampó de lisi de proteïnes (Solarbio Biotech, Beijing, Xina). Les concentracions de proteïnes del sobrenedant es van provar mitjançant un kit d'assaig de BCA (Solarbio Biotech, Beijing, Xina, PC0020). Les mostres que contenien 40 ug de proteïna es van separar en un 12 per cent d'electroforesi en gel SDS-poliacrilamida (SDS PAGE) (Applygen, Beijing, Xina, B1004) i després es van transferir a una membrana de filtre de nitrocel·lulosa (Solar biotech, Beijing, Xina). Després de bloquejar amb un 5% de llet desnatada a temperatura ambient durant 2 h, -actina (Proteintech, número d'article: 60008-1-lg), LC3II/I (Ab cam, número d'article: ab48394), P62 (Proteintech, número d'article: 18420-1-AP), beclin-1 (tecnologia de proteïnes, número d'article: 11306-1-AP), p-mTOR (CST, número d'article: #5536), mTOR (CST, número d'article: # 2983), nefrina (Abcam, número d'article: ab58968) i podocina (proteïna cadascuna, número d'article: 20384 -1-AP) i es van incubar a 4 graus durant la nit. A continuació, aquesta barreja es va rentar cinc vegades amb TBS més un 0,05 per cent de Tween-20 (Solar bio Biotech, Beijing, Xina) (TBS-T) durant 5 minuts abans d'afegir l'anticossos secundari (1∶2000) abans d'incubar a l'habitació. temperatura durant 1 h, rentant cinc vegades amb TBST durant 5 min, sotmetent-se a un desenvolupament de color amb quimioluminescència millorada (ECL, Millipore, Billerica, MA, EUA) i exposant mitjançant el programari ImageJ per a l'anàlisi en escala de grisos.

Anàlisi estadística

Les dades es van analitzar mitjançant el programari SPSS (IBM SPSS Statistics per a Windows, versió 23.0. 2014, Armonk, NY, EUA). Es van provar les diferències entre grups mitjançant una anàlisi de variància unidireccional seguida de la prova de Tukey. Les dades es van expressar com a mitjana ± desviació estàndard. P <0,05 es="" va="" considerar="">

luteolina

RESULTATS

Efecte protector de la decocció de Tongluo Digui sobre els ronyons de rata DN

Es van mesurar indicadors bioquímics com la glucosa en sang, l'hemoglobina glicada, la creatinina sèrica, la concentració de nitrogen d'urea en sang i la concentració de proteïnes d'orina {{0}}hora 16 setmanes després de la sonda. (Taula 1). Els resultats van mostrar que, en comparació amb el grup normal, la glucosa en sang, l'hemoglobina glicada, la creatinina sèrica, la concentració de nitrogen d'urea en sang, la concentració de proteïna d'orina 24-hora, la TP i l'ALB eren significativament més altes en el grup model (P < {{="" 7}}.01),="" indicant="" així="" que="" el="" grup="" model="" tenia="" una="" funció="" renal="" deteriorada.="" en="" el="" grup="" val,="" tant="" la="" concentració="" de="" creatinina="" sèrica="" com="" la="" concentració="" de="" proteïnes="" d'orina="" de="" 24="" hores="" es="" van="" reduir="" (p=""><0, 05).="" a="" més,="" en="" el="" grup="" de="" dosis="" altes="" de="" decocció="" de="" tongluo="" digui="" es="" va="" observar="" una="" reducció="" significativa="" de="" les="" concentracions="" de="" glucosa="" en="" sang,="" hba1c,="" creatinina="" sèrica="" i="" nitrogen="" ureic,="" així="" com="" excreció="" d'orina="" de="" 24="" hores="" (p=""><0, 01).="" aquests="" efectes="" depenien="" de="" la="" dosi.="" no="" hi="" va="" haver="" diferències="" significatives="" en="" els="" nivells="" d'àcid="" úric,="" insulina,="" alt="" i="" ast="" en="" cada="" grup="" de="" rates.="" en="" conjunt,="" els="" nostres="" resultats="" van="" demostrar="" que="" la="" decocció="" de="" tongluo="" digui="" va="" alleujar="" el="" dany="" renal="" i="" va="" millorar="" la="" funció="" renal="" a="" les="" rates="" dn="" de="" manera="" dependent="" de="" la="">

Els canvis en la patologia renal de la rata DN es van avaluar mitjançant la tinció de PAS després del tractament amb decocció de Tongluo Digui (figura 1). En comparació amb el grup normal, es va observar un augment significatiu de les cèl·lules mesangials glomerulars i l'estroma mesangial juntament amb un eixamplament de l'àrea mesangial al grup model. L'àrea mesangial glomerular va augmentar en cadascun dels tres nivells de dosi de decocció de Tongluo Digui i en el grup Val. A més, aquests quatre grups de tractament havien reduït l'amplada de la matriu mesangial en comparació amb el grup model, i l'àrea mesangial glomerular al grup de decocció de Tongluo Digui a dosis altes era menor que al grup Val. Aquestes troballes van indicar que la decocció de Tongluo Digui va retardar la progressió de les lesions glomerulars de DN.

Efecte de la decocció de Tongluo Digui sobre la lesió dels podòcits glomerulars en rates DN

Es va utilitzar l'anàlisi Western blot per determinar l'expressió de les proteïnes marcadores de podòcits nefrina i podocina (figura 2). En comparació amb el grup normal, l'expressió d'ambdues proteïnes del grup model es va reduir significativament (P <0.01), cosa="" que="" indica="" una="" lesió="" dels="" podòcits.="" a="" més,="" l'expressió="" de="" nefrina="" i="" podocina="" es="" va="" regular="" en="" els="" grups="" de="" decocció="" tongluo="" digui="" en="" comparació="" amb="" el="" grup="" model="" (p=""><0,>

Efecte de la decocció de Tongluo Digui sobre l'autofàgia dels podòcits glomerulars en rates DN

Es van observar canvis en els autofagosomes en els podòcits glomerulars sota TEM (figura 3). Els resultats van mostrar autofagosomes als podòcits glomerulars del grup normal. Els autofagosomes podòcits estaven absents al grup model, i els processos podòcits del peu també van desaparèixer. En els tres grups de dosi de decocció de Tongluo Digui i el grup de valsartan, vam observar autofagosomes de podòcits glomerulars, cosa que va suggerir que la decocció de Tongluo Digui millorava l'autofàgia dels podòcits en rates DN. Es va utilitzar Western blot per detectar l'expressió de proteïnes relacionades amb l'autofàgia P62, beclin-1 i LC3 Ⅱ (figura 4). En comparació amb el grup normal, l'expressió beclin-1 i LC3Ⅱ al grup model es va reduir significativament (P <0.01), mentre="" que="" l'expressió="" de="" p62="" va="" augmentar="" significativament="" (p="">< 0.01).="" aquestes="" troballes="" van="" indicar="" que="" l'autofàgia="" es="" va="" debilitar="" a="" les="" rates="" dn.="" en="" comparació="" amb="" el="" grup="" model,="" el="" grup="" de="" dosis="" altes="" de="" decocció="" tongluo="" digui="" tenia="" una="" expressió="" de="" beclin-1="" i="" lc3ⅱ="" regulada="" (p=""><0, 05),="" juntament="" amb="" una="" expressió="" baixada="" de="" p62.="" en="" conjunt,="" aquests="" resultats="" van="" demostrar="" que="" l'efecte="" protector="" renal="" de="" la="" decocció="" de="" tongluo="" digui="" en="" rates="" amb="" dn="" pot="" estar="" relacionat="" amb="" una="" autofàgia="" millorada="" a="" les="" cèl·lules="">

La decocció de Tongluo Digui millora l'autofàgia dels podòcits glomerulars en rates DN mitjançant la inhibició de la fosforilació mTOR

La inhibició de la fosforilació de mTOR millora l'autofàgia (figura 5). En comparació amb el grup normal, la fosforilació de mTOR al grup model es va millorar (P <{1}}.01), mentre="" que="" als="" grups="" de="" decocció="" tongluo="" digui="" es="" va="" inhibir="" (p=""><0, 05).="" això="" va="" suggerir="" que="" la="" decocció="" de="" tongluo="" digui="" va="" millorar="" l'autofàgia="" dels="" podòcits="" mitjançant="" la="" inhibició="" de="" l'activació="" de="" la="" via="" de="" senyalització="" mtor.="" estudis="" anteriors="" han="" demostrat="" que="" l'autofàgia="" protegeix="" els="" podòcits="" i="" millora="" la="" funció="">

DISCUSSIÓ

La DN es caracteritza principalment per signes i símptomes com la presència de proteïnes urinàries, glucosa en sang elevada, polidipsia, polifàgia i poliúria. Els símptomes són similars als de la medicina tradicional xinesa, com ara "Xiao Ke", "Guan Ge" i "edema". L'aparició i el desenvolupament de la DN són inseparables de la base patològica de la deficiència de yin i l'estasi de la sang.6 Amb el desenvolupament de la deficiència de Yin i l'estasi de la sang, el ronyó es danya gradualment, mostrant així una pèrdua de proteïna urinària, que condueix encara més a la formació de microtrombos i fibrosi del ronyó. Els pacients amb DN pateixen inevitablement una malaltia renal en fase terminal.11

La decocció de Tongluo Digui va ser establerta per Zhang Binghou, un famós metge de medicina tradicional xinesa, i basada en els seus anys d'experiència en el tractament de DN.12, 13 La decocció de Tougluo Digui consta de Shuichi (Hirudo), Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis), Dihuang (Radix Rehmanniae), Huangqi (Radix Astragali Perparata), Danggui (Radix Angelicae Sinensis), Ze Xie (Rhizoma Alismatis), Dahuang (Radix et Rhizoma Rhei), Gancio (Radix Glycyrrhizae). Entre ells, Shuizhi (Hirudo) i Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) són fàrmacs monarca, que creiem que tenen un paper important per nodrir el Yin i promoure la circulació sanguínia a la DN. Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) millora la immunitat i l'estat secretor del cos i retarda l'envelliment.14 Shuizhi (Hirudo) té efectes anticoagulants, antitumorals, antiinflamatoris i antifibròtics, entre altres accions farmacològiques, i pot millorar la funció renal. canvis patològics en la DN per reduir significativament la creatinina sèrica i les concentracions de nitrogen d'urea en sang, i reduir l'excreció de proteïnes urinàries.15,16 A la DN, la lesió dels podòcits té un paper important en la barrera de filtració de la membrana basal glomerular i en la formació de proteinúria.17 Nefrina i La podocina són totes dues proteïnes de membrana de porus a la superfície dels podòcits. Les dues proteïnes interaccionen per formar un complex que té un paper clau en la funció de la barrera de filtració glomerular.18 La distribució anormal de l'expressió de proteïnes condueix a diferents graus de proteinúria.19 En aquest estudi, les rates DN tipus 1 induïdes per STZ van mostrar un augment. en l'excreció de proteïnes urinàries i la funció renal deteriorada durant 24 h. A més, la tinció de PAS va mostrar que el nombre de cèl·lules mesangials i la matriu mesangial van augmentar al grup del model, indicant així que el model es va establir amb èxit. Diferents dosis de decocció de Tongluo Digui van reduir les concentracions de proteïna de l'orina i creatinina sèrica de 24 hores i van millorar la patologia renal de rates DN amb cèl·lules mesangials i matriu reduïdes. L'anàlisi de Western blot va mostrar que l'expressió de nefrina i podocina al grup de decocció Tongluo Digui era més alta que la del grup model, cosa que indica que aquesta fórmula retarda la progressió de la DN a les rates protegint els podòcits.

L'autofàgia és una via per a la degradació de les proteïnes lisosomals a les cèl·lules i té un paper crucial en l'eliminació de proteïnes danyades o sobreexpressades que mantenen l'homeòstasi i la integritat cel·lular.20 L'autofàgia és integral a l'homeòstasi lisosomal dels podòcits en la diabetis, i l'autofàgia millorada pot reduir la lesió dels podòcits. .5 Després d'eliminar específicament el gen relacionat amb l'autofàgia Atg5 als podòcits, els ratolins van mostrar gradualment una agregació de proteïnes omnipresents, danys mitocondrials i activitat d'autofàgia als podòcits; els podòcits es van danyar i els processos del peu van desaparèixer i es van fusionar, fet que indicava que es mantenia l'autofàgia. És important mantenir la funció normal dels podòcits.21,22 En aquest estudi, hem investigat l'efecte de la decocció de Tongluo Digui sobre l'autofàgia en podòcits glomerulars mitjançant l'anàlisi TEM i Western blot. TEM va demostrar que el nombre d'autofagosomes de podòcits a cada grup de dosi de decocció de Tongluo Digui va augmentar en comparació amb el grup model. A més, el Western blot va mostrar l'expressió de les proteïnes relacionades amb l'autofàgia LC3, beclin-1 i p62. En comparació amb el grup model, l'expressió LC3Ⅱ i beclin-1 es va incrementar significativament al grup de decocció Tongluo Digui, mentre que l'expressió de la proteïna p62 es va reduir significativament. Aquestes troballes van indicar que la decocció de Tongluo Digui va augmentar el nivell d'autofàgia en els podòcits glomerulars.

La proteïna diana de la rapamicina (mTOR) és un dels principals reguladors de l'autofàgia.23 Es troba àmpliament distribuïda a l'escorça renal i la medul·la i té un paper en el desenvolupament de la lesió del podòcit DN24,25. En situacions d'alt nivell de glucosa i estrès, mTOR s'activa i fosforila, la qual cosa condueix a la fosforilació dels seus objectius aigües avall i a la inhibició de l'autofàgia. Liu et al 26 van demostrar que l'inhibidor de mTOR, la rapamicina, es va unir específicament a la mTOR quinasa i va inhibir l'activitat de mTOR, va millorar l'autofàgia dels podòcits i va protegir la funció renal. Vam trobar que la fosforilació de mTOR es va millorar al grup model i que la decocció de Tongluo Digui va inhibir aquest procés, cosa que va suggerir que la decocció de Tongluo Digui va millorar l'autofàgia en els podòcits i pot inhibir l'activació de la via de senyalització de mTOR.

En resum, la decocció de Tongluo Digui pot inhibir l'autofàgia en els podòcits, protegir els podòcits glomerulars, mantenir la integritat de la membrana de filtració glomerular, reduir l'excreció de proteïnes d'orina de 24 hores i retardar la progressió de la DN inhibint l'activació de mTOR. Aquestes troballes proporcionen informació per entendre millor l'efecte protector de la decocció de Tongluo Digui a la DN, però, el mecanisme subjacent implicat encara està per dilucidar.

què és un cistancheper malaltia renal

REFERÈNCIES
1 Tesch GH. Nefropatia diabètica: això és un trastorn immune? Clin Sci 2017; 131(16): 2183-2199.
2 Li JJ, Kwak SJ, Jung DS, et al. Biologia dels podòcits en la nefropatia diabètica. Kidney Int Suppl 2007; (106): S36-S42.
3 Liu N, Xu L, Shi Y, Zhuang S. Podocyte autophagy: un potencial objectiu terapèutic per prevenir la progressió de la nefropatia diabètica. J Diabetes Res 2017; 2017 (4): 1-6.
4 Mizushima N, Komatsu M. Autophagy: renovació de cèl·lules i teixits. Cèl·lula 2011; 147(4): 728-741.
5 Tagawa A, Yasuda M, Kume S, et al. La deterioració de l'autofàgia dels podòcits agreuja la proteinúria en la nefropatia diabètica. Diabetis 2016; 65(3): 755-767.
6 Sun C, Xie QY, Meng QG. Estudi sobre la llei de distribució de la síndrome de TCM de la nefropatia diabètica. Beijing Zhong Yi Yao Da Xue Xue Bao 2015; 38(4): 266-270.
7 Szkudelski T. El mecanisme de l'acció de l'aloxà i l'estreptozotocina a les cèl·lules B del pàncrees de rata. Physiol Res 2001; 50(6):537-546.
8 Dang WY, Hou LY, Wu HM, Yan XM, Zheng XF, Hao J. Efectivitat de la decocció de Qingre Lishi Yishen sobre la fibrosi glomerular de la nefropatia d'immunoglobulina A en un model de rata. J Tradit Chin Med 2019; 39(4): 516-523.
9 Lu MK, Gong XG, Guan KL. mTOR en la funció dels podòcits: la rapamicina és bona per a la nefropatia diabètica? Cicle cel·lular 2011; 10(20): 3415-3416.
10 Hartleben B, Godel M, Meyer-Schlesinger C, et al. L'autofàgia influeix en la susceptibilitat a la malaltia glomerular i manté l'homeòstasi dels podòcits en ratolins envellits. J Clin Invest 2010; 120(4): 1084-1096.
11 Sun GD, Li CY, Cui WP, et al. Revisió de la medicina tradicional xinesa a base d'herbes per al tractament de la nefropatia diabètica. J Diabetes Res 2016; 2016: 5749857.
12 Zhao WJ, Cai Z, Meng Y, et al. Aplicació del mètode nutritiu Yin del ronyó de Zhang Binghou en el tractament de la malaltia renal crònica. Beijing Zhong Yi Yao 2016; 35(4): 341-343.
13 Duan YF, Zhang HB. Presentació de l'experiència d'aplicació del professor Zhang Binghou. Xin Zhong Yi 2012; 44 (4): 147-149.
14 Yu XJ, Chen SH, Lu GY. Una enquesta de la investigació sobre la farmacodinàmica de la tortuga "Ziyin Bushen". Dang Dai Yi Xue 2009; 15(10): 15-17.
15 Pang XX, Tong Y, Li HP, Han JR. Progrés de la investigació de la sangonera i els seus extractes en el tractament de la nefropatia diabètica. Guang Ming Zhong Yi 2019; 34(1): 168-171.
16 Zhang ZL, Dong H. Progrés de la investigació de la sangonera i els seus ingredients actius en el tractament de la nefropatia diabètica Zhong Xi Yi Jie He Yan Jiu 2018; 10(02): 106- 110.
17 Dai H, Liu Q, Liu B. Progrés de la investigació sobre el mecanisme d'esgotament dels podòcits en la nefropatia diabètica. J Diabetes Res 2017; 2017: 2615286.
18 Martin CE, Jones N. Senyalització de nefrina al podòcit: una visió actualitzada de la regulació del senyal al diafragma de l'escletxa i més enllà. Front Endocrinol (Lausana) 2018; 9:302.
19 Jaakko P, Karl T. Composició molecular de la barrera de filtració glomerular. Biochem Bioph Res Co 2010; 396(1): 164-169.
20 Noboru M, Beth L, Ana Maria C, Klionsky DJ. L'autofàgia combat la malaltia mitjançant l'autodigestió cel·lular. Natura 2008; 451(7182): 1069.
21 Lenoir O, Jasiek M, Henrique C, et al. Cèl·lula endotelial
i l'autofàgia dels podòcits protegeixen sinèrgicament de la glomeruloesclerosi induïda per la diabetis. Autofàgia 2015; 11(7): 1130-1145.
22 Ilatovskaya DV, Levchenko V, Lowing A, Shuyskiy LS, Palygin O, Staruschenko A. Lesió dels podòcits en la nefropatia diabètica: implicacions de l'activació depenent de l'angiotensina Ⅱ dels canals TRPC. Sci Rep 2015; 5: 17637.
23 Rabanal-Ruiz Y, Otten EG, Korolchuk VI. mTORC1 com a porta d'entrada principal a l'autofàgia. Assajos Biochem 2017; 61 (6): 565-584.
24 Kim YC, Guan KL. mTOR: un objectiu farmacològic per a la regulació de l'autofàgia. J Clin Invest 2015; 125(1): 25-32.
25 Li XY, Wang SS, Han Z, et al. El triptolide restaura l'autofàgia per alleujar la fibrosi renal diabètica mitjançant la via miR-141-3p/PTEN/Akt/mTOR. Mol Ther Nucleic Acids 2017; 9: 48-56.
26 Liu L, Yang L, Chang B, Zhang J, Guo Y, Yang X. Els efectes protectors de la rapamicina sobre l'autofàgia cel·lular en els teixits renals de rates amb nefropatia diabètica mitjançant la via de senyalització mTORS6K1-LC3 Ⅱ. Ren Fail 2018; 40(1): 492-497.