Tractament de la malaltia renal induïda per la diabetis: àcid oleanòlic

Per a més informació:Ali.ma@wecistanche.com

Prevenció de l'aparició de la malaltia renal crònica induïda per la diabetis durant la prediabetis: els efectes de l'àcid oleanòlic en marcadors seleccionats de la malaltia renal crònica en un model de rata prediabètica induïda per la dieta

Mlindeli Gamede, Lindokuhle Mabuza, Phikelelani Ngubane, Andile Khathi

1. Introducció

Aproximadament el 30-40 per cent del tipus 2diabetisels pacients amb DM2 desenvolupen complicacions renals tot i estar en tractament amb diversos fàrmacs convencionalsdiabetis[1]. Això es pot atribuir parcialment als efectes negatius d'aquests fàrmacs sobre la funció renal [2.Diabetisés una de les principals causes demalalties renals cròniques(ERC), inclosa la nefropatia diabètica [3]. Complicacions renals que es troben predominantment endiabetisinclouen hiperfiltració glomerular, trastorns tubulars renals i nefromegàlia [4]. Aquestes complicacions s'associen tradicionalment a la DM2 manifesta, però estudis recents ho han demostratdiabetis-associatronyóles complicacions comencen durant l'estat prediabètic [5. Estudis anteriors al nostre laboratori han informat que un model de rata prediabètica induïda per la dieta amb un alt contingut en greixos i hidrats de carboni es caracteritza per resistència a la insulina sistèmica, tolerància a la glucosa alterada (IGT) i estrès oxidatiu [6. Aquestes complicacions estan directament implicades en anomalies funcionals i estructurals de laronyó7I. L'IGT pot conduir a una hiperglucèmia sostinguda que resulta en la reacció no enzimàtica de la glucosa amb proteïnes renals locals que formen productes finals de glicació avançada (AGE) i espècies reactives d'oxigen (ROS) [8]. L'estrès oxidatiu està associatrenallesió i pèrdua de la integritat de la membrana basal glomerular. Això es caracteritza normalment per la regulació a l'alça deronyómolècula de lesió-1 (KM-1) i pèrdua de l'estructura del podòcit [7I. Aquestes anomalies estructurals també afecten la funcionalitat delronyóaugmentant la permeabilitat de la membrana basal glomerular (GBMP) que resulta en hiperfiltració [9. A més, l'IGT pot alterar-seronyófunciómitjançant l'augment de la filtració glomerular de la glucosa i la seva posterior reabsorció al túbul proximal que augmenta la reabsorció de sodi [101. L'augment de sodi plasmàtic i GBMP augmentat poden provocar un augment de l'eGFR i la pèrdua urinària de macromolècules com l'albúmina [11]. La hiperfiltració glomerular s'associa amb la pèrdua de podòcits i, per tant, la presència de podocina a l'orina [71.Diabetisestà implicat en l'alteració de l'electròlit renal i la manipulació de l'aigua que s'associa amb l'activació del sistema renina-angiotensina-aldosterona (RAAS) per contrarestar la pèrdua de sodi i aigua [2]. Les complicacions renals relacionades amb la diabetis es gestionen convencionalment amb agents farmacològics, inclosos els sensibilitzadors a la insulina i els bloquejadors de l'enzim convertidor d'angiotensina (ACE) [13]. A més, també es recomanen intervencions dietètiques en els casos en què aquestes complicacions sorgeixen a causa de la DM2 [14]. No obstant això, la intervenció dietètica sovint és complexa d'implementar i normalment s'associa amb un mal compliment del pacient [15]. Estudis recents al nostre laboratori mostren que compostos bioactius vegetals com araàcid oleanòlic(OA) presenten efectes de sensibilització a la insulina i cardioprotectors en la dieta induïdaprediabetis[16]. No obstant això, els efectes de l'OA (àcid oleanòlic)sobre la funció renal enprediabetisromanen desconeguts. Per tant, el present estudi es va dissenyar per avaluar els efectes de l'OA (àcid oleanòlic) en marcadors seleccionats d'ERC (malalties renals cròniques), estrès oxidatiu i inflamació a laronyonsde rates prediabètiques induïdes per la dieta.

Feu clic a Cistanches i productes Cistanche per a malalties renals

2. Mètodes i materials

21. Drogues i productes químics

Tots els productes químics i reactius provenien de proveïdors farmacèutics de confiança i eren de grau analític.

2.2. Mètode d'aïllament

OA (àcid oleanòlic)es va aïllar de Syzygium aromatic [(Linnaeus) Merill & Perry] [Myrcene] (claus) mitjançant un protocol establert de Khathi et al. [17].

2.3. Cura dels animals

Tots els procediments dels animals i les condicions d'allotjament van ser aprovats pel Comitè d'Ètica d'Investigació Animal de la Universitat de KwaZulu-Natal (núm. ètic: AREC/035/016M). Les rates Sprague-Dawley mascles (130-160 g) van ser criades i allotjades a la Unitat de Recerca Biomèdica de la Universitat de KwaZulu-Natal. Els animals es van mantenir en condicions estàndard de laboratori de temperatura constant (22 ± 2 graus), contingut de CO2 (<5000 ppm.),="" relative="" humidity="" (55±5%),="" and="" illumination(12="" h="" light/dark="" cycle,="" lights="" on="" at="" 07h00="" a.m.).the="" noise="" level="" was="" maintained="" at="" less="" than="" 65="" decibels.="" the="" animals="" were="" allowed="" access="" to="" food="" and="" fluids="" ad="" libitum.="" the="" animals="" acclimatized="" to="" their="" new="" environment="" for="" one="" week="" while="" consuming="" standard="" rat="" chow="" and="" tap="" water="" before="" exposure="" to="" a="" well-established="" experimental="" high-fat,="" high="" carbohydrate="">

2.4. Inducció de prediabetis i programa d'alimentació

Els 36 mascles de rates Sprague-Dawley que pesaven entre 150 i 180 es van dividir aleatòriament en dos grups, el grup alimentat amb dieta normal (n=6) i el grup alimentat amb dieta alta en greixos i carbohidrats (n {{9}). }}). Els animals es van aclimatar al seu nou entorn durant una setmana mentre consumien menjar de rata estàndard i aigua de l'aixeta abans d'exposar-se a una dieta experimental alta en greixos (HFHC). Els animals que tenien prediabetis induït van rebre una dieta HFHC que es va desenvolupar prèviament al nostre laboratori feta per aliments AVI, Sud-àfrica, mentre que el control normal es va alimentar amb la dieta normal de rates de la unitat animal UKZN. El programa d'alimentació i les induccions de prediabetis van durar 20 setmanes. Durant aquest temps, es van controlar paràmetres com la glucosa en sang en dejú, la tolerància a la glucosa i els triglicèrids en sang cada quarta setmana. Per a aquest estudi, la prediabetis es va definir com un augment significatiu del pes corporal total, la glucosa en sang en dejú, la 2-tolerància a la glucosa per hores (durant la prova de tolerància oral a la glucosa) i els triglicèrids en sang que es van observar en animals alimentats amb dieta HFHC) .

2.5.Animals i grups

Els objectius generals de l'estudi eren determinar si OA (àcid oleanòlic)pot millorar els factors de risc induïts per la prediabetismalalties renals cròniquestant en presència com en absència d'intervenció dietètica. A la recerca d'investigar aquests objectius, el grup alimentat amb dieta normal es va considerar com a control no prediabètic (NPC) (n=6). Els animals que van rebre dieta HFHC i van desenvolupar prediabetis es van subdividir aleatòriament en cinc grups segons els seus respectius tractaments, grup de control prediabètic no tractat (PC), grup tractat amb metformina (MET), tractat amb metformina amb el grup d'intervenció dietètica (MET més DI, grup tractat amb oleanòlic (OA (àcid oleanòlic))i àcid oleanòlic tractats amb la intervenció dietètica (OA (àcid oleanòlic)més DI). Tots els grups eren n= 6.

3. Tractament d'animals prediabètics

El període de tractament va durar 12 setmanes, la qual cosa proporciona temps suficient per a la glicació de l'hemoglobina. Els animals van ser tractats cada tercer dia on els grups MET i MET més DI van rebre metformina (500 mg/kg p. o) mentre que l'OA (àcid oleanòlic)i els grups OA més DI van rebre àcid oleanòlic (80 mg/kg po). Aquesta dosi es considera no tòxica i té més eficàcia pels estudis anteriors al nostre laboratori [15. Els paràmetres, inclosa la ingesta de líquids i la producció d'orina, es van mesurar cada quarta setmana en tots els grups durant el període de tractament. El codi po és per a la dosi oral mitjançant sonda oral.

3.1. Recollida de sang i recol·lecció de teixits

Al final del període de tractament 12-setmana, es van sacrificar els animals mitjançant el mètode d'anestesia amb Isoform (100 mg/kg) (Safeline Pharmaceuticals(Pty)Ltd, Roodeport, Sud-àfrica) mitjançant una cambra d'anestèsia gasosa. (Unitat de recursos biomèdics, UKZN, Durban, Sud-àfrica) durant 3 minuts seguits de la decapitació i la sang es va recollir en tots els animals mitjançant el mètode de punxada cardíaca en recipients heparinitzats prèviament refrigerats. A continuació, es va centrifugar la sang (centrífuga Eppendorf 5403, Alemanya) a 4 graus C, 503 g durant 15 min, i el plasma es va recollir i emmagatzemar a - 80 graus en un congelador Bio Ultra (Snijders Scientific, Holanda) fins que llest per a l'anàlisi bioquímic. Elronyonses van retirar, esbandida amb solució salina normal freda i congelar-se ràpidament en nitrogen líquid abans d'emmagatzemar-se en un congelador Bio Ultra (Snijders Scientific, Tilburg, Països Baixos) a -80 graus fins que es va realitzar una anàlisi bioquímica addicional.

3.2. Recollida d'orina

Es van recollir mostres d'orina de tots els grups experimentals mitjançant un sistema de gàbia metabòlica, proporcionat per la Unitat de Recursos Biomèdics. Les mostres d'orina es van recollir en diversos punts del període de tractament, és a dir, les setmanes 0, 4, 8 i 12. Les mostres d'orina recollides es van emmagatzemar a -80 grau C.

3.3. Anàlisi bioquímica

El plasma i l'orina es van enviar a Global Clinical and Viral Laboratories (Amanzimtoti Sud-àfrica) per a l'anàlisi bioquímica. L'anàlisi d'orina va incloure la quantificació d'electròlits com el sodi, el potassi, l'albúmina i la creatinina.Ronyóanàlisi de teixits: Theronyóel teixit es va homogeneïtzar amb solució salina tampó fosfat (PBS) amb una proporció d'1 g (teixit): 9 mL (PBS) i l'homogeneïtat es va utilitzar per a l'assaig de malondialdehid (MDA) per quantificar la peroxidació lipídica i l'estrès oxidatiu mitjançant un protocol ben establert. . L'assaig MDA va anar acompanyat de la quantificació d'enzims antioxidants, incloses les concentracions de superòxid dismutasa (SOD) i glutatió peroxidasa (GPx), que es van fer mitjançant els kits ELISA d'Elabscience [10.11]. també s'han analitzat mitjançant els seus respectius kits ELISA de rata (Elabscience Biotechnology Co., Ltd) segons les instruccions del fabricant.

3.4. PCR quantitativa en temps real

L'àcid ribonucleic (ARN) es va extreure de mostres d'orina obtingudes durant la setmana 12 del període de tractament. L'extracció d'ARN es va fer amb el kit d'aïllament d'ARN d'orina ZR (zymo research, Estats Units d'Amèrica) d'Inqaba biotech (Sud-àfrica). Rendiment d'ARN es va determinar mitjançant nanodrop i es va estandarditzar la concentració d'ARN. L'àcid desoxiribonucleic convertit (ADNc) es va sintetitzar després mitjançant el kit de síntesi d'ADNc (ThermoFisher).

El ciclador de llum ThermoFisher SYBR Green I es va utilitzar per a l'amplificació d'acord amb les instruccions del fabricant del sistema ciclador de llum Thermo Fisher. Les condicions de ciclisme van ser: La preincubació es va dur a terme a 95 graus durant els 60 s. Seguida d'una 3-amplificació per passos de 45 cicles a 95 graus C durant 15 s, 60 graus durant els 30 s i 72 graus durant 30 s. La fusió es va efectuar a 95 graus durant 10 s, 65 graus durant els 60 s i 97 graus C durant 1 s. A més, el refredament es va aconseguir a 37 graus durant 30 s. La gliceraldehid-fosfat deshidrogenasa (GAPDH) com a control intern es va utilitzar per normalitzar les dades per determinar l'expressió relativa del gen d'interès. Els valors d'expressió gènica es representen mitjançant el mètode 248c. Es van utilitzar els primers següents.

3.5. Càlcul i equacions

La relació albúmina/creatinina urinària (Alb/Cr-R) es va calcular mitjançant l'albúmina [UAlb] i la creatinina [UCr] obtingudes a partir de mostres d'orina de 24 hores després de la setmana 12 de tractament. Les unitats d'Alb/Cr-R estan en (mg/mgCr). Relació ALB/Cr-R=albúmina a creatinina,[UALB]=concentració d'albúmina en orina i [UCr] =concentració de creatinina en orina

La quantificació de RT-PCR es va calcular mitjançant el mètode comparatiu

Canvi de plec a causa del tractament=2-△XR

ACT=CT(gen objectiu) i CT (gens de referència)

Un ACT= ACT(mostra objectiu)-ACT(mostra de referència)

3.6. Excreció d'electròlits per tracció

Excreció de fraccions de sodi (FENa)=WNex× 100 Excreció de fraccions de potassi (FEK)= Wes× 100

Sodi UNaunari, PCR-creatinina plasmàtica, UCR-creatinina urinària, PNa-sodi plasmàtic, potassi urinari del Regne Unit i potassi PK-plasmàtic.

3.7. Anàlisi estadística

Totes les dades es van expressar com a mitjanes ± SD Les comparacions estadístiques es van realitzar amb Graph Pad In-Stat Software (versió 7.00, Graph Pad Software, Inc., San Diego, Califòrnia, EUA) mitjançant una anàlisi unidireccional de variància (ANOVA) seguida de proves de comparació múltiples de Bonferroni per determinar simultàniament diferències estadístiques entre les mitjanes de dos grups independents.

4. Resultats

4.1. Efectes sobre la ingesta de líquids i la sortida d'orina

La ingesta de líquids i la producció d'orina per a tots els grups experimentals es van controlar cada quatre setmanes durant el període de tractament. Els resultats van mostrar que des de l'inici del període de tractament (setmana O), el grup de PC tenia una ingesta de líquids i una producció d'orina significativament més alta en comparació amb NPC (PC vs NPC) (p<0.05). however,="" the="" administration="" of=""> (àcid oleanòlic)amb i sense intervenció dietètica va donar lloc a una disminució progressiva significativa tant de la ingesta de líquids com de la producció d'orina durant les 12 setmanes en comparació amb PC. El tractament amb MET no va tenir cap diferència significativa amb el PC en la ingesta de líquids al llarg de les quatre setmanes. Mentre que el tractament amb MET més DI va reduir la ingesta de líquids fins al rang NPC. En la producció d'orina, MET va tenir un augment de la producció d'orina en comparació amb NPC i PC, especialment a les setmanes 8 i 12 (vegeu la figura 1).

Fig. 1. El gràfic de barres mostra els efectes de l'OA amb i sense intervenció dietètica i Met amb i sense intervenció dietètica (n {{0}}, per grup) sobre la ingesta de líquids i la producció d'orina en tots els grups experimentals de la setmana 0 a la setmana 12.

Els valors es presenten com la desviació estàndard de la mitjana ± SD. ★ {{0}}p <0,05 denota="" comparació="" amb="" npc;="p">< 0,05="" indica="" una="" comparació="" amb="">

4.2. Efectes sobre la fracció de sodi (FENa) i potassi (FEK)

Les concentracions d'electròlits en plasma i orina es van mesurar al final del període de tractament (setmana 12) mentre es calculava l'excreció fraccionada de sodi i potassi. El PC tenia un FENa significativament més baix en comparació amb el NPC (p <0,05). l'administració="" de=""> (àcid oleanòlic)amb i sense la intervenció dietètica (OA més DI i OA) va millorar significativament l'excreció de sodi en comparació amb PC (p< 0.05).="" the="" met-formin="" treated="" group="" (met)showed="" overt="" sodium="" retention,="" however,="" when="" metformin="" was="" combined="" with="" dietary="" intervention="" (met+dd,="" there="" was="" a="" significant="" improvement="" in="" sodium="" excretion="" by="" comparison="" with="" pc="" (p=""><>

Curiosament, el PC tenia un FEK significativament reduït en comparació amb NPC. No obstant això, l'administració d'OA (àcid oleanòlic)amb i sense intervenció dietètica (OA i OA més DI) va millorar significativament l'excreció de potassi. El MET sense intervenció dietètica va tenir una retenció de potassi oberta que era comparable a PC. Tanmateix, el MET combinat amb la intervenció dietètica (MET més DI) va millorar significativament l'excreció de potassi en comparació amb el PC.

4.3. Efectes sobre la depuració de creatinina (CRC)

El CRC es va calcular a partir de la creatinina sèrica, la creatinina d'orina de la setmana 12 i el volum per a tots els grups experimentals. Els resultats van mostrar que el grup de PC tenia un CRC significativament més alt en comparació amb NPC. L'administració de l'OA (àcid oleanòlic)amb i sense dieta (OA i OA més DD van donar lloc a una disminució significativa del CRC en comparació amb PC.MET va tenir un augment significatiu del CRC en comparació amb el. Mentre que MET més DI van disminuir el CRC fins al rang NPC (p.<0.05)(see>

Fig. 2.El gràfic de barres mostra els efectes de l'OA amb i sense intervenció dietètica i Met amb i sense intervenció dietètica (n=6, per grup) sobre l'excreció de fraccions percentuals de sodi i potassi de tots els grups experimentals.

Els valors es presenten com la desviació estàndard de la mitjana ± SD. ★{{0}}p <0,05 denota="" comparació="" amb="" npc;="p">< 0,05="" indica="" una="" comparació="" amb="">

4.4. Efectes sobre la proteinúria (proporció albúmina/creatinina)

La proteinúria es va examinar mitjançant Alb/Cr-R, que es va calcular amb albúmina d'orina i creatinina obtingudes a partir de l'orina de la setmana 12. Els resultats van mostrar que el grup de PC tenia un augment significatiu d'Alb/Cr-R en comparació amb NPC. No obstant això, l'administració d'OA amb i sense dieta (OA (àcid oleanòlic)i OA més DD van mostrar una disminució significativa d'Alb/Cr-R en comparació amb PC. MET i MET més DI també van disminuir l'Alb/Cr-R en comparació amb PC (p <0.05) (vegeu="" les="" figures="" 3="" i="">

Fig. 3.El gràfic de barres mostra els efectes de l'OA amb i sense intervenció dietètica i Met amb i sense intervenció dietètica (n {{{0}}, per grup) sobre la taxa d'eliminació de creatinina (CRC) de tots els grups experimentals. Els valors es presenten com la desviació estàndard de la mitjana ± SD. ★=p < 0.05="" denota="" comparació="" amb="" npc;="p">< 0,05="" indica="" una="" comparació="" amb="">

Fig. 4.El gràfic de barres mostra els efectes de l'OA amb i sense intervenció dietètica i Met amb i sense intervenció dietètica (n {{{0}}, per grup) sobre la relació albúmina/creatinina de tots els grups experimentals. Els valors es presenten com la desviació estàndard de la mitjana ± SD. ★=p < 0.05="" denota="" comparació="" amb="" npc;="p">< 0,05="" indica="" una="" comparació="" amb="">

Fig.5.El gràfic de barres mostra els efectes de l'OA (àcid oleanòlic)amb i sense intervenció dietètica i Metre amb i sense intervenció dietètica (n=6, per grup) sobre els nivells plasmàtics d'aldosterona de tots els grups experimentals. Els valors es presenten com la desviació estàndard de la mitjana ± SD.★=p<0.05 denotes="" comparison="" with="" npc;α=""><0.05 denotes="" comparison="" with="">

4.5. Efectes sobre el nivell plasmàtic d'aldosterona

Les concentracions plasmàtiques d'aldosterona es van mesurar mitjançant el kit ELISA. Els resultats van mostrar que la PC tenia una aldosterona plasmàtica significativament més alta en comparació amb la NPC. No obstant això, l'administració d'OA (àcid oleanòlic)amb i sense intervenció de la dieta (OA i OA més DI) va donar lloc a una disminució significativa de l'aldosterona plasmàtica en comparació amb PC.MET va tenir un augment significatiu de la concentració d'aldosterona en comparació amb l'NPC. Mentre que MET més DI van disminuir la concentració d'aldosterona fins al rang NPC. (pàg<0.05) (see="">

4.6. Efectes sobre l'estrès oxidatiu renal

L'estrès oxidatiu renal es va avaluar mitjançant mesures de MDA SOD i GPx alronyóteixit. Els resultats van mostrar que la PC tenia una concentració de MDA significativament més alta en comparació amb la NPC (p<0.05). furthermore,="" pc="" had="" significantly="" lower="" sod="" and="" gpx="" concentrations="" when="" compared="" to="" npc.="" however,="" the="" administration="" of=""> (àcid oleanòlic)amb i sense intervenció dietètica va provocar una disminució significativa de les concentracions de MDA en comparació amb PC (p<0,05), while="" the="" levels="" of="" sod="" and="" gpx="" were="" within="" the="" npc="" range="" met="" had="" a="" significant="" increase="" on="" mda="" and="" reduced="" sod="" and="" gpx="" concentrations="" in="" comparison="" to="" npc.="" however,="" met+di="" increased="" the="" sod="" and="" gpx="" to="" the="" npc="" range.="" (p="" <="" 0.05)(see="" table="">

4.7. Efectes sobre els nivells d'expressió de la podocina urinària

La podocina urinària es va quantificar en l'orina obtinguda a partir de la setmana 12. El control prediabètic havia augmentat l'expressió de la podocina en orina en relació amb l'NPC estandarditzat. Tanmateix, l'administració d'intervenció amb i sense dieta (OA i OA més DI) va donar lloc a una disminució significativa de l'expressió de podocina en orina en relació amb PC. MET i MET més DI també van disminuir l'expressió de podocina d'orina en relació amb PC. (pàg<0.05)(see fig="">

Taula 1:Efectes de l'OA (àcid oleanòlic) i METonronyóMDA, SOD i GPxof prediabètic. Els valors es presenten com a desviació estàndard de la mitjana ± SD.*=p< 0.05="" denotes="" comparison="" with="" npc;α=""><0.05 denotes="" comparison="" with="">

Fig. 6. El gràfic de barres mostra els efectes de l'OA amb i sense intervenció dietètica i Met amb i sense intervenció dietètica (n {{0}}, per grup) sobre els nivells d'expressió de podocina urinària de tots els grups experimentals. Els valors es presenten com la desviació estàndard de la mitjana ± SD. ★=p < 0.05="" indica="" relatiu="" a="" npc;="p">< 0,05="" indica="" en="" relació="" amb="" el="" pc.="" nb.="" pc="" és="" relatiu="" a="" npc="" que="" és="1" i="" tots="" els="" altres="" tractaments="" són="" relatius="" a="">

4.8. Efectes sobre la molècula de lesió renal-1(KIM-1)

Les concentracions de KIM-1 en plasma es van mesurar mitjançant el kit ELISA. Els resultats van mostrar que la PC tenia una comparació de KIM-lin de plasma significativament superior amb NPC. No obstant això, l'administració d'OA (àcid oleanòlic)amb i sense intervenció de la dieta (OA i OA més DD van donar lloc a una disminució significativa de KIM-1 plasmàtic en comparació amb PC. MET va tenir un augment significatiu de KIM-1 en comparació amb l'NPC. Mentre que MET més DI va reduir el KIM-1 a l'interval NPC. (pàg< 0.05)(see="">

Fig. 7.El gràfic de barres mostra els efectes de l'OA amb i sense intervenció dietètica i Met amb i sense intervenció dietètica (n {{{0}}, per grup) en el KIM-1 de plasma de tots els grups experimentals. Els valors es presenten com la desviació estàndard de la mitjana ± SD. ★=p < 0.05="" indica="" comparació="" amb="" npc;="p">< 0,05="" indica="" una="" comparació="" amb="">

5. Discussió

Estudis anteriors han informat que l'estat prediabètic induït per la dieta s'associa amb un major risc de desenvolupar malalties cardiovasculars i ERC en fase inicial. (malalties renals cròniques) [18]. Prediabetises caracteritza per proteinúria, augment de la FGe i un desequilibri electròlit, que són tots factors de risc d'ERC. (malalties renals cròniques). Convencionalment,prediabetises gestiona mitjançant la combinació de farmacoteràpia i modificacions de l'estil de vida com la intervenció dietètica [19I. Les modificacions de l'estil de vida s'associen amb un baix compliment del pacient que afecta l'eficàcia de la farmacoteràpia [20]. Els estudis realitzats al nostre laboratori han demostrat que l'administració d'OA (àcid oleanòlic)en la prediabetis induïda per la dieta restableix la sensibilitat a la insulina i millora el risc de complicacions cardiovasculars associades aprediabetistant en presència com en absència d'intervenció dietètica [21]. No obstant això, els efectes d'aquest triterpè derivat de plantes sobre els factors de risc associats amb el desenvolupament de la CKD (malalties renals cròniques)encara no han estat investigats. Per tant, aquest estudi pretenia investigar els efectes dels derivats de les plantesàcid oleanòlic(OA) sobre els factors de risc seleccionats d'ERC (malalties renals cròniques)tant en absència com en presència d'intervenció dietètica en un model de rata prediabètica induïda per la dieta. Els factors de risc seleccionats investigats en aquest estudi inclouenronyóestrès oxidatiu, taxa de filtració glomerular (GFR), un component del sistema renina-angiotensina-aldosterona, albuminúria, líquid renal i manipulació d'electròlits en tots els grups experimentals.

Estudis anteriors al nostre laboratori han informat que els animals prediabètics induïts per la dieta desenvolupen obesitat amb una tolerància deteriorada a la glucosa i una disminució de la glucosa en dejuni com a resultat de la resistència a la insulina. L'IGT augmenta la glucosa circulant, la qual cosa augmenta l'osmolaritat plasmàtica[22. Això pot augmentar la pressió osmòtica del plasma i, posteriorment, la sensació de set que resulta en la ingesta de líquids [23]. A més, l'obesitat també es caracteritza per l'activació del sistema renina-angiotensina que també està implicada en el desenvolupament de la DM2. L'estudi actual va revelar que els animals prediabètics havien augmentat la ingesta de líquids i el volum d'orina durant 24 hores. Això es pot atribuir a l'augment dels nivells d'angiotensina II com a resultat de l'obesitat i la resistència a la insulina. Curiosament, els animals prediabètics també van augmentar la producció d'orina, cosa que és contradictòria amb el conegut efecte de l'activació de RAS. Tractament amb OA (àcid oleanòlic), amb i sense intervenció dietètica van mostrar una restauració progressiva de la ingesta de líquids i la producció d'orina, que van ser més pronunciades durant la setmana 12. Això podria suggerir que l'OA (àcid oleanòlic)pot restablir la regulació de l'hormona antidiürètica. No obstant això, aquest mecanisme encara està per establir.

L'activació de RAS es va confirmar encara més per les concentracions elevades d'aldosterona plasmàtica en animals prediabètics. A més de l'augment de la reabsorció de sodi a la nefrona, l'aldosterona també redueix la sensibilitat perifèrica a la insulina provocant IGT, que és un factor de risc per a la ERC. (malalties renals cròniques).[24]. Curiosament, aquest estudi va trobar que els animals prediabètics tenien concentracions plasmàtiques de sodi normals però reduïen les concentracions de sodi en l'orina. Això pot suggerir que l'augment de l'aldosterona plasmàtica va tenir un efecte sobre la reabsorció de sodi de la nefrona, donant lloc a un baix nivell de sodi urinari o una reducció de l'excreció fraccionada de sodi (FENa) [25]. OA (àcid oleanòlic)El tractament tant en presència com en absència d'intervenció en la dieta va provocar una disminució de la concentració plasmàtica d'aldosterona i una millora de l'excreció de sodi. Aquestes troballes coincideixen amb els estudis anteriors, que van informar que OA (àcid oleanòlic)redueix la pressió arterial mitjana mitjançant la desactivació del sistema renina-angiotensina-aldosterona (RAAS) i la reducció de la reabsorció de sodi [26]. La normalització del RAAS va ser evident per la disminució de la concentració de sodi en plasma i aldosterona [Nat][27. Tanmateix, això també es pot atribuir a la reducció del succinat, un producte del cicle de l'àcid cítric que s'eleva durant l'IGT. [28I. S'ha informat que el succinat estimula l'alliberament de renina de les cèl·lules de la màcula densa que inicien la senyalització que resulta en l'activació de RAAS mitjançant la interacció amb el metabòlit del receptor 91 de la proteïna G (GPR91) [29]. Els efectes antihiperglucèmics de l'OA també podrien haver donat lloc a una disminució del substrat de glucosa per a la glucòlisi que després va provocar una baixa producció de piruvat, que entra al cercle de l'àcid cítric i produeix succinat [30J. A més, la intervenció dietètica pot haver tingut un paper important en la reducció de la glucosúria, la producció de succinats i la secreció de renina mitjançant la reducció dels metabòlits de carbohidrats [31].

En condicions fisiològiques, l'augment de l'aldosterona plasmàtica augmenta la reabsorció tubular de Nat a través dels canals d'ATPasa Nat/Kf donant lloc a l'excreció de K [32. No obstant això, la resistència a la insulina pot estar associada amb la producció de cetones hepàtiques, que augmenta el pH sanguini i l'excreció d'ions d'hidrogen (H) a través de l'intercanviador de sodi-hidrogen a Kexcretion [33I. Curiosament, aquest estudi va observar que l'augment de la reabsorció de sodi es va associar amb excreció insignificant de potassi a l'OA (àcid oleanòlic)-animals tractats. Això es pot atribuir a l'estimulació de l'antiport de sodi-hidrogen com a resultat d'un augment del pH sanguini a causa de la producció de cetoacidosi [6]. Això pot explicar l'augment de la reabsorció de sodi sense una excreció pronunciada de potassi [34j. Aquestes observacions van coincidir amb les troballes d'estudis anteriors que han informat que OA (àcid oleanòlic)augmenta l'excreció de sodi i, per tant, redueix la pressió arterial sistèmica [6]. Tanmateix, els resultats d'aquest estudi suggereixen que l'OA promou l'excreció de sodi mitjançant l'excreció antiport de sodi-hidrogen en lloc de les ATPases de sodi i potassi [6]. Estudis anteriors també han informat que les dietes que tenen més proteïnes derivades de plantes milloren l'acidosi metabòlica i alentiren la progressió de la nefropatia diabètica [33I. Això també pot suggerir que la intervenció dietètica podria haver contribuït a la millora de l'excreció de sodi.

La hiperglucèmia moderada enprediabetisestà implicat de manera independent en la disfunció mitocondrial i va augmentar la producció d'espècies d'oxigen que reaccionen (ROS), que posteriorment es tradueix en estrès oxidatiu [35I. Estudis anteriors han eludit que l'estrès oxidatiu renal s'associa amb un augmentronyólesions. pèrdua de la integritat de la membrana basal glomerular i proteinúria [36]. De fet, aquest estudi va demostrar que els animals prediabètics havien augmentat la peroxidació lipídica renal, elevadaronyómolècula de lesió-1(KIM-1)podocina urinària i augment de la relació albúmina-creatinina. Això es pot atribuir a la gran entrada de glucosa a laronyóa causa de la resistència perifèrica a la insulina que pot donar lloc a la formació de ROS i productes finals de glicosilació avançada (AGEs) [371. La hiperglucèmia condueix a l'activació de l'enzim nicotinamida adenina dinucleòtid fosfat hidrogen (NADPH)oxidasa, que catalitza la producció de superòxid (O2) a partir de les cèl·lules renals [37I. A més, l'estrès oxidatiu i la hiperglucèmia també estan fortament associats amb la generació de productes finals de glicació avançada (AGE) mitjançant la reacció no enzimàtica de la glucosa amb proteïnes, greixos o àcids nucleics [38I. El ROS s'associa amb la interrupció de les unions d'adhesió cèl·lula-cèl·lula i matriu cèl·lula que condueixen al despreniment de cèl·lules endotelials de la membrana basal, donant lloc al moviment de KIM-1 a la sang [39].

Els ROS i els AGE estan associats amb el dany de la capa de podòcits de la membrana basal glomerular [40]. Això pot comprometre encara més una de les funcions principals de la nefrona, que és prevenir la filtració de proteïnes que condueix a la proteinúria. No obstant això, l'administració d'OA (àcid oleanòlic)amb i sense la intervenció de la dieta va provocar una disminució de la peroxidació lipídica, una reducció de KIM-1, una reducció de la podocina d'orina i una disminució de la relació albúmina-creatinina. Això es pot atribuir a la millora significativa dels enzims antioxidants renals superòxid dismutasa (SOD) i glutatió peroxidasa (GPx) que es va observar en grups tractats amb OA. El superòxid (O2) és neutralitzat pel SOD i produeix peròxid d'hidrogen (HzO2)[41. Mentre que l'HO2 es converteix encara més en HO i O no tòxics, per l'acció de GPx[42. Aquests resultats es correlacionen amb les troballes de Gamede et al., 2019 que van informar que OA (àcid oleanòlic)millora la disponibilitat d'antioxidants en animals prediabètics induïts per la dieta [21. Això pot explicar encara més la reducció deronyólesions i danys dels podòcits observats en els animals que van recitar OA (àcid oleanòlic)amb i sense intervenció dietètica. La restauració de la integritat de la membrana basal glomerular mitjançant la prevenció de la pèrdua de podòcits es pot atribuir a la reducció de la relació albúmina-creatinina observada a l'OA. (àcid oleanòlic)-animals tractats.

També s'ha informat d'hiperfiltració renal (augment del CRC) en pacients amb DM2 recentment diagnosticats i s'ha demostrat que precedeix la disminució de la funció renal [43]. La alteració de l'homeòstasi de la glucosa amb hiperinsulinèmia està implicada en l'elevació del CCR, que se sap que precedeix el dany glomerular [44]. S'ha informat anteriorment que el model actual de rata prediabètica induït per la dieta té complicacions cardiovasculars com la pressió arterial alta sistèmica. A més, l'estudi actual també va observar que el grup prediabètic havia augmentat el CRC. L'augment del CRC significa l'elevació de la filtració glomerular que es pot atribuir a diversos mecanismes com la vasodilatació glomerular aferent com a resultat de l'elevació de la insulina plasmàtica i els AGE renals [45I. Tractament amb OA (àcid oleanòlic)va donar lloc a la restauració del CRC, que es pot atribuir a un control glucèmic reeixit que va provocar la reducció de la insulina plasmàtica i els AGE renals. A més, s'ha informat anteriorment que l'OA redueix la hiperinsulinèmia i millora l'homeòstasi de la glucosa [6]. Sovint es recomana una dieta baixa en sodi per a un pacient amb augment de la GFR, i aquest s'ha considerat com un dels mètodes utilitzats per prolongarronyósupervivència [6]. Aquest estudi també va trobar que OA (àcid oleanòlic) amb i sense intervenció dietètica té efectes més potents en alguns factors de risc deronyómalaltiacom ara KIM-1 i GFR en comparació amb el medicament estàndard metformina.

No es recomana l'ús de metformina en estadis avançats de la MRC (malalties renals cròniques)[46. Això es deu a les contraindicacions associades a la metformina, com ara l'acidosi làctica, que pot provocar insuficiència renal[47]. En aquest estudi, vam trobar que l'administració de metformina sense intervenció de la dieta no té cap efecte beneficiós sobre factors com la manipulació de líquids renals, eGFR, la manipulació d'electròlits i els animals prediabètics induïts per la dieta per l'estrès oxidatiu renal. Tanmateix, quan es va combinar la metformina amb la intervenció de la dieta, es va millorar l'eficàcia. Això coincideix amb els estudis anteriors que suggereixen que la metformina depèn de modificacions de l'estil de vida, com ara canvis en la dieta i l'exercici.

Millorar la funció renal-cistanche

6. Conclusió i recomanacions

Els resultats d'aquest estudi suggereixen que l'administració d'OA (àcid oleanòlic)tant la presència com l'absència d'intervenció dietètica millora els marcadors associats a l'ERC (malalties renals cròniques)Això va ser evident en el canvi observat en paràmetres com la ingesta d'aigua, la producció d'orina i la manipulació d'electròlits renals. La millora de l'electròlit renal i la manipulació de l'aigua explica encara més la disminució de la pressió arterial sistèmica que es va observar en rates prediabètiques no tractades. A més, aquest estudi també informa que l'administració de l'OA (àcid oleanòlic)enprediabetisprevé l'estrès oxidatiu renal,ronyólesions, i posterior proteinúria. En conjunt, els resultats d'aquest estudi suggereixen que aquest tri-terpè derivat de plantes es pot utilitzar com a tractament alternatiu, ja que posseeix propietats renoprotectores en la dieta induïda.prediabetisTanmateix, cal fer més estudis per investigar el mecanisme exacte pel qual aquest compost exerceix els seus efectes.

7. Limitacions de l'estudi

El GSH i GSSG, l'oxidació de proteïnes, la capacitat antioxidant total i l'expressió gènica dels gens antioxidants es poden analitzar per avaluar el desequilibri redox que no es va poder analitzar a causa de les limitacions pressupostàries. A més, aquest estudi no ha pogut analitzar tots els electròlits que poden estar implicats en l'alteració de la funció renal.

Referències

[1] MCThomas, ME.Cooper, P.Zimmet, Epidemiologia canviant de tipus 2diabetismellitus i associatscrònicaronyómalaltia, Nat. Rev.Nephrol.12(2)(2016)73-81.

[2] M. May, C.Schindler, Interaccions clínicament i farmacològicament rellevants de fàrmacs antidiabètics Ther. Adv.Endocrinol. Metab.7 (2)(2016)69-83.

[3] SB Ghaderan, F.Hayatl, S.Shayanpour, S.SB. Mousavi,Diabetis, i malaltia renal en fase terminal; un article de revisió sobre nous conceptes, J. Ren.Inj.Prev.4(2)(2015)28.

[4] C. Mora-Fernandez, V.Dominguez-PImentel, MM Fuentes,JL.Gomez, A. Martfnez-Caselao.J,EF. Navaho-Gonzalez,DiabetisronyómalaltiaDe la fisiologia a la terapèutica, J.Physlol.592 (18)(2014)3997-4012.

[5] L. Rato, M.Alves T.Dlas, G.Lopes, J.Cavaco, S.Socorro, P.Olveilra, Highenergdets poden induir un estat prediabètic alterant el perfil metabòlic glicolític testicular i els paràmetres reproductius masculins, Andrologia 1 (3)(2013)495-504.

[6]L. Mabuza, M. Gamede, S. Maikoo, LBooysen, P.Ngubane, A.Khathi, Efectes d'un complex de bases de ruteni Schiff sobre l'homeòstasi de la glucosa en rates prediabètiques induïdes per la dieta, Molècules 23 (7) (2018) 1721.

[7] ML.B.Duran-Salgado,AF.Rubio-Guera, Diabetic nephropathy, and inflammation, Worl J.Diabetis5(3) (2014)393.

[8] N.Rabbanl, PJ Thornalley, Advanced glycation end products in the pathogenesis ofcrònicaronyómalaltia. RonyóInt. 93 (2018) 803-813.

[9] A. Chagnac, B.Zingemman, B.Rozen-Zv, M.Herman-Edelstein, Conseqüències de la hiperfiltració glomerular: el paper de les forces físiques en la patogènesi decrònicaronyómalaltiaendiabetisi l'obesitat, Nephron 143(1)(2019)38-42.

[10] C. Reclo, L Lazaro, A.Ogulza, L Lopez-Sanz, S.Bernal, J.Blanco, J. Egldo, C. Gomez-Guerrero, Suppressor of cytokine signaling1 peptidomimetic limits progression of diabetic nephropathy, J. Am. Així que Nephrol.28(2)(2017) 575-585.