Els polisacàrids de Xinjiang Cistanche Deserticola tenen efectes antioxidants
Aug 30, 2023
abstracte
Es va estudiar l'activitat antioxidant del polisacàrid de Cistanche deserticola in vitro. Prenent l'àcid ascòrbic com a control, prenent la reacció semblant a Fenton per produir radicals hidroxil, la reacció d'autooxidació de la dopamina per produir radicals anions superòxid, la reacció de l'hipoclorit de sodi amb peròxid d'hidrogen per produir oxigen singlet, radicals difenil hidrazina amarga com a model experimental , els efectes dels polisacàrids Cistanche deserticola sobre els radicals anions superòxid, radicals hidroxil DPPH · radical lliure (radical difenil amarg hidrazina), l'efecte eliminador de l'oxigen singlet. Els resultats van mostrar que els polisacàrids de Cistanche deserticola tenien efectes d'eliminació evidents sobre els radicals lliures anteriors, i l'efecte d'eliminació es va correlacionar positivament amb la concentració de polisacàrids.
Paraules clau :Cistancel túbulosa Polysaccharide; Radical lliure
1. Introducció
El cos produeix contínuament diversos radicals lliures d'oxigen reactius (ROS) en el procés de metabolisme oxidatiu de les activitats vitals, que és el producte intermedi de la reacció d'oxidació-reducció del metabolisme aeròbic.La investigació ha descobert que l'excés de radicals lliures atacaran macromolècules de la vida i diversos orgànuls, causant diversos danys a nivell molecular, cel·lular, teixit i nivell d'òrgans, accelerant el procés d'envelliment del cos i induint malalties com la trombosi, la diabetis, l'aterosclerosi, tumors, etc. [1]. A causa de la toxicitat dels antioxidants sintetitzats químicament per al cos humà, la recerca d'antioxidants naturals amb alta eficiència i baixa toxicitat que puguin eliminar els radicals lliures d'oxigen s'ha convertit en un tema d'investigació candent en els camps de la medicina, els aliments, l'enginyeria química i altres camps. els últims anys.
Cistanche deserticola(YCMa.)és una medicina tradicional xinesa rara i es coneix com "ginseng del desert" [2]. Cistanche deserticola maEl polisacàrid és un dels principals components bioactius de Cistanche deserticola, però no hi ha cap informe sobre si el polisacàrid de Cistanche deserticola té l'efecte d'eliminar els radicals lliures. En aquest article, els efectes eliminadors del polisacàrid de Cistanche deserticola sobre el radical anió superòxid, el radical hidroxil, el radical lliure DPPH · i l'oxigen singlet es van determinar mitjançant anàlisi espectral, per avaluar la seva activitat antioxidant i proporcionar una base científica per al desenvolupament complet i la utilització de aquest recurs natural.
Cistanche d'herbes xineses
2. Part experimental
2.1 Instruments i reactius
Espectrofotòmetre UV-2401 UV-visible (Shimadzu, Japó); LumatLB9507 luminòmetre de tub ultrasensible (Alemanya
BertholdTechnologies); Evaporador rotatiu RE-52CS (Fàbrica d'instruments bioquímics de Shanghai Yarong); Bany d'aigua termostàtic electrònic HW-SY (Fàbrica d'instruments Jintan Xinhang); PHS-3C pH-metre (Shanghai Precision Scientific Instrument Co., Ltd.); Forn d'assecat al buit DZF-6020 (Shanghai Yiheng Technology Co., Ltd.). Cistanche deserticola: comprat a Kuitun Pharmaceutical Corporation. Luminol (Sigma, EUA), dopamina (Institut de la Xina per al Control de Productes Farmacèutics i Biològics), FeSO4, EDTA, vitamina C, H2O2, NaClO, Na2CO3, NaHCO3, etc. són reactius analítics domèstics. L'aigua experimental és aigua destil·lada d'intercanvi iònic.
2.2 Mètode experimental
2.2.1 Mètode d'extracció deCistanche deserticolapolisacàrid
Agafeu 30 g de pols de Cistanche deserticola i poseu-lo en un matràs cònic de 500 ml. Submergeix-lo en èter de petroli (60-90 grau), èter i solució calenta d'etanol al 80% (30 graus) durant 6 hores respectivament, i el residu es volatilitza per assecar el dissolvent. Remullar el residu del filtre en aigua a una proporció d'1 ∶ 10 durant 24 h, escalfar-lo a 30 graus i extreure-lo durant 100 minuts. Després de l'extracció, centrifugar per obtenir el sobrenedant. Després de concentrar el sobrenedant a pressió reduïda, es precipita amb etanol al 95% de 3 vegades el volum. Es deixa reposar durant 24 hores a 4 graus. Després de la centrifugació, es recull i es precipita. Després de l'assecat al buit, es pot obtenir el polisacàrid brut de Cistanche deserticola. Peseu 1,00 g de polisacàrid brut, dissolgueu-lo amb aigua i poseu-lo en un matràs aforat de 50 ml en espera.
Ginseng del desert: antioxidant
Feu clic aquí per veure els productes en pols de Cistanche
【Demanar més】 Correu electrònic:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
2.2.2 Prova sobre la capacitat d'eliminació deCistanche deserticolapolisacàrid a O-2 · radical lliure
La capacitat d'eliminació del polisacàrid de Cistanche deserticola a O{{0}} · es va provar mitjançant la producció de radicals lliures de superòxid (O-2 ·) a partir de l'autooxidació de dopamina [3]. Afegiu 3,0mL de {{10}},1 mmol/LpH=10,12 solució tampó de carbonat, 3,0mL d'aigua i {{18} }}.5mL de solució de mostra de polisacàrids de diferents concentracions al tub d'assaig d'assecat amb escala al seu torn. Després de preescalfar en un bany maria de 30 graus durant 5 minuts, afegiu 1,0mL de 2,0 mmol/L de dopamina preescalfat en un bany d'aigua de 30 graus, barregeu immediatament i temps, mantingueu la reacció a 30 graus. durant 5 min, i immediatament aturar la reacció amb 2 gotes de HCl 10mol/L. Utilitzeu la solució tampó com a referència, mesureu l'absorbància (mostra A) a 221 nm, substituïu la mostra (blanc A) per 0,5 ml d'aigua al grup en blanc i substituïu la mostra per 0,5 ml d'àcid ascòrbic al grup control. , mesura cada mostra tres vegades en paral·lel i pren el valor mitjà. O-2 · percentatge d'eliminació (%)=(A en blanc - Una mostra)/A en blanc × 100%
2.2.3 Prova sobre la capacitat d'eliminació deCistanche deserticolapolisacàrid a · OH radical lliure
Desert herba de cistanche viva—Antioxidant
Es va utilitzar el sistema EDTA-Fe (Ⅱ) - blau de metilè - H2O2 per provar la capacitat d'eliminació del polisacàrid de Cistanche deserticola sobre el radical hidroxil. El principi és que l'EDTA-Fe (Ⅱ) reacciona amb peròxid d'hidrogen per produir · radicals lliures OH, que redueixen el pic d'absorció característic de la solució de blau de metilè a 660 nm.
Afegiu 1,0mL de solució LFeSO4 de 5 mmol/L, 1,2 mL de solució LEDTA de 5 mmol/L, 2,0mL de 0.03mol/L NaH2PO{{ {12}}Solució tampó de Na2HPO4 (pH{=7,4) i 1,3 ml de solució de peròxid d'hidrogen a 2{0mmol/L en una sèrie de tubs d'assaig d'1{0ml amb taps, agiteu bé, afegiu 0,7 ml de solució de blau de metilè 0,2 mmol/L i, a continuació, afegiu 1,0 ml de la solució a provar i vitamina C1,0 de diferents concentracions respectivament, diluïu a 10.00 mL amb aigua, barrejar bé, mantenir a 37 graus durant 30 minuts i mesurar el valor d'absorbància de cada solució a 660 nm, el grup en blanc va substituir la solució de mostra per aigua. Cada mostra s'ha de mesurar tres vegades en paral·lel i s'ha de prendre el valor mitjà. · Taxa d'eliminació de radicals OH de la mostra (%)=[(A2-A1)/(A{0-A1) × En la fórmula del 100%: A0 -- absorbància valor del tub no danyat; Un 1 - valor d'absorbància del tub danyat; Un2 -- valor fotomètric després d'afegir la mostra.
2.2.4 Prova sobre DPPH · capacitat d'eliminació deCistanche deserticolapolisacàrid
Agafeu {{0}},1 ml de solució de polisacàrid de Cistanche deserticola i afegiu-lo a una solució de 5,0 ml de LDPPH ·, barregeu-lo ràpidament i deixeu-ho reposar 10 minuts a temperatura ambient.
Determineu el seu canvi d'absorbància a una longitud d'ona de 517 nm [4]. Cada mostra s'ha de mesurar tres vegades en paral·lel i s'ha de prendre el valor mitjà. La taxa d'eliminació de la mostra de DPPH · (%)=1 - [(AB)/A0] × En la fórmula d'100%: un0 -- valor d'absorbància de DPPH · (1,9mLDPPH ·+0,1mL50% etanol) sense mostra; A - valor d'absorbància de la mostra després de la reacció amb DPPH ·; B -- valor d'absorbància de la mostra en blanc (mostra 0,1 ml+1,9 ml etanol al 50%).
2.2.5Cistanche deserticolaProva d'oxigen 1O2 d'eliminació de polisacàrids
L'oxigen d'una línia (1O2) es produeix per la reacció química de NaClO i H2O2 a 37 graus [5]. La solució utilitzada per a la determinació d'1O2 és 100 μ L2.8mmol/L solució de NaClO, 400 μ L5mmol/LNaOH solució, 300 μ L10mmol/LH2O2 solució, 50 μ L1mmol/solució Luminol. Durant la reacció, la solució de reacció s'afegeix a la solució de mostra i l'instrument de quimioluminescència registra automàticament el procés de reacció alhora. Preneu NaClO-H2O2-NaOH-Luminol com a control en blanc. Inicieu la reacció i afegiu la solució de reacció al tub de mostra de l'ampolla d'emmagatzematge de l'instrument de quimioluminescència segons la quantitat fixada pel procediment. A continuació, es registra la intensitat de quimioluminescència de la mescla de reacció al paper de registre cada 5 segons, es mesura cada mostra tres vegades en paral·lel i es pren el valor mitjà.
La taxa d'eliminació es calcula d'acord amb la fórmula següent: taxa d'eliminació (%)=(intensitat lluminosa de control - intensitat lluminosa de la mostra)/intensitat lluminosa de control × 100%
3 Resultats i discussió
3.1 Efecte d'eliminació deCistanche deserticolapolisacàrid sobre O-2 ·
Beneficis de cistanche tubulosa—Antioxidant
La propietat química de l'O-2 · és activa, la qual cosa pot fer que els àcids grassos del biofilm produeixin peròxid i després destrueixin les cèl·lules [6]. En aquest article, es va utilitzar el mètode de la dopamina per determinar la capacitat d'eliminació d'O-2 ·. La capacitat d'eliminació de Cistanche deserticola a O-2 · es mostra a la figura 1. Els resultats van mostrar que el polisacàrid de Cistanche deserticola podria inhibir l'O-2 · produït per l'autooxidació de la dopamina, i va augmentar amb l'augment de concentració dins del rang de concentració mesurat (0-8mg/mL), però la capacitat d'eliminació era inferior a la de l'àcid ascòrbic.
3.2 Efecte d'eliminació deCistanche deserticolapolisacàrid · OH
·OH és un dels radicals lliures d'oxigen més actius de les espècies d'oxigen actiu. Pot reaccionar amb gairebé qualsevol macromolècula biològica de les cèl·lules vives i pot provocar processos bioquímics com ara la peroxidació de lípids, la polimerització i despolimerització de proteïnes, la ruptura d'àcids nucleics, etc. en el teixit corporal, provocant malalties dels teixits i cèl·lules, donant lloc a l'aparició de diverses malalties i accelerant l'envelliment del cos [7]. La capacitat d'eliminació del polisacàrid de Cistanche deserticola a · OH es mostra a la figura 2. Els resultats van mostrar que el polisacàrid de Cistanche deserticola tenia un bon efecte d'eliminació de · OH, i va augmentar amb l'augment de la concentració.
3.3 La capacitat d'eliminació del polisacàrid de Cistanche deserticola a DPPH ·
DPPH · (radical difenil amarg hidrazina) és un radical lliure estable, que és de color violeta en dissolvent orgànic i té una forta absorció a prop de 517 nm. Després de l'addició d'antioxidants, s'eliminen alguns radicals lliures, fet que debilita l'absorció, que es pot utilitzar per avaluar l'activitat antioxidant d'aquesta substància [8]. Vegeu la figura 3 per a la capacitat d'eliminació de DPPH · del polisacàrid de Cistanche deserticola. Els resultats experimentals van mostrar que la capacitat d'eliminació del polisacàrid de Cistanche deserticola en DPPH · estava positivament correlacionada amb la seva concentració, i la capacitat d'eliminació era superior a la de l'àcid ascòrbic.
3.4 Capacitat d'eliminació del polisacàrid de Cistanche deserticola a 1O2
L'oxigen d'una línia és oxigen molecular excitat amb propietats químiques actives. Com que els electrons no aparellats tenen tendència a aparellar-se, els radicals lliures mostren propietats químiques més actives [9]. La capacitat d'eliminació del polisacàrid de Cistanche deserticola a 1O2 es mostra a la figura 4. Els resultats experimentals van mostrar que la capacitat d'eliminació del polisacàrid de Cistanche deserticola era inferior a la de l'àcid ascòrbic en el rang de 0-4.0mg. /mL, i la capacitat d'eliminació del polisacàrid de Cistanche deserticola era superior a la de l'àcid ascòrbic quan la concentració era superior a 4,0mg/mL.
4. Conclusió
L'activitat antioxidant dels polisacàrids de Cistanche deserticola in vitro es va estudiar en detall mitjançant diferents sistemes reactius de radicals lliures d'oxigen.A partir dels resultats experimentals, es pot veure que dins del rang de concentració experimental, l'extracte de polisacàrid de Cistanche deserticola té efectes depuradors sobre O-2 ·, · OH, DPPH · i 1O2, i els efectes eliminadors són diferents per a diferents sistemes.Els resultats ho van demostrarEl polisacàrid de Cistanche deserticola és un antioxidant natural exògen eficaç, que és digne de més investigació, desenvolupament i utilització integral.
Cistanche tubulosa 200 mg—Antíoxidant
