Una nova estratègia per a la detecció de components actius a Cistanche Tubulosa basada en l'anàlisi de la relació espectre-efecte i la farmacologia de la xarxa

Resum

Cistanche tubulosa(Schenk) R. Wight és una valuosa medicina a base d'herbes a la Xina. L'estudi pretenia explorar els mecanismes potencials deC. tubulosaactivatactivitat antioxidantutilitzant la relació i la xarxa espectre-efectefarmacologia i les possibilitats d'utilitzar excrements d'herbes. En aquest treball, diferents extractes deC. tubulosa, inclosos materials d'herbes, extractes d'aigua i residus d'herbes, es van avaluar mitjançant la tecnologia de cromatografia líquida d'alt rendiment (HPLC). A més, es van estimar les activitats antioxidants in vitro, incloent 2, 2-difenil-1-picrilhidrazil; anió superòxid; i assaigs d'eliminació de radicals hidroxil. Les relacions espectre-efecte entre les empremtes dactilars HPLC i les capacitats biològiques es van analitzar mitjançant regressió parcial de mínims quadrats, anàlisi de correlació bivariada i anàlisi de redundància. A més, es va utilitzar la farmacologia de xarxa per predirmecanismes potencialsdeC. tubulosaen el tractament demalalties relacionades amb els antioxidants. Segons els resultats, onze pics comuns van ser compartits per diferents extractes. L'àcid geniposidic, l'equinàcòsid, el verbascòsid, el tubulòsid A i l'isoacteòsid es van quantificar i comparar entre diferents formes deC. tubulosa. L'estudi de relació espectre-efecte va indicar que el pic A6 podria ser el component més decisiu entre les tres formes. Segons la farmacologia de la xarxa, hi havia 159 gens diana compartits per components actius i malalties relacionades amb antioxidants. Es van discutir els objectius relacionats amb l'activitat antioxidant i les vies rellevants. Els nostres resultats proporcionen una base teòrica per reciclar els residus d'herbes i els mecanismes potencials de C. tubulosa en el tractament de malalties relacionades amb els antioxidants.

Feu clic aquí per obtenir més informació sobre els components actius de Cistanche

Demaneu més detalls: wallence.suen@wecistanche.com 0015292862950

1. Introducció

Cistanche tubulosa(Schenk) R. Wight, una de les herbes més utilitzades de la família Cistanche, és coneguda com la "Ginseng del desert" pels seus diversos beneficis per a la salut [1]. Les investigacions farmacològiques modernes han descobert que la família Cistanche ofereix diversos efectes farmacèutics, com araantioxidant, anticancerígen, hipoglucèmic, antidepressiu, millora cognitiva, iefectes antimicrobians [2]. El clúster químic primari aHerba de Cistanchea és glicòsids feniletanoides (PhG) [1]. Els PhG derivats de les espècies de Cistanche poden elevar les activitats de la superòxid dismutasa (SOD) i la glutatió peroxidasa (GSH-Px).3]. Echinacòsid, un membre de la família PhG, reverteix eficaçmenten viuL'estrès oxidatiu induït per dietes altes en glucosa mitjançant la regulació a la baixa de l'activitat del sistema d'òxid nitrós (NOS) i l'expressió de fòsfor-eNOS.4]. L'esquelet bàsic del PhG està format per alcohol fenil etílic i fragments de glicosil. Es creu que els PhG tenen una activitat significativa a causa dels grups hidroxil fenòlics a la seva estructura. L'activitat antioxidant dels PhG augmenta amb la presència de grups hidroxil fenòlics.5].

Les espècies reactives d'oxigen (ROS) tenen un paper crucial en molts processos fisiològics i mecanismes de protecció essencials. L'exposició freqüent a concentracions elevades de ROS pot contribuir a danys inespecífics a proteïnes, lípids i àcids nucleics. Les ROS poden ser molècules neutres (per exemple, peròxid d'hidrogen), ions (per exemple, anió superòxid) o radicals (per exemple, radicals hidroxil) i exerceixen els seus efectes mitjançant la regulació de les cascades de senyalització cel·lular.6]. La seva ràpida producció i eliminació estan influenciades per diversos mecanismes. Són lleugers i es difonen fàcilment a distàncies curtes [7]. L'anió superòxid () és un precursor de la majoria de ROS i una espècie intermèdia en reaccions oxidatives. radicals hidroxil () estan catalitzats per metalls de transició reduïts, que al seu torn poden ser reoxidats per. Un desequilibri entre la producció excessiva de ROS i les defenses antioxidants limitades condueix a diversos processos nocius també anomenats "estrès oxidatiu".8]. Si es pot corregir aquest desequilibri, es pot manipular la gestió de diversos mecanismes de defensa. L'estrès oxidatiu està implicat en diverses condicions patològiques, com ara càncer, malalties cardiovasculars, trastorns neurològics i diabetis.6]. A més, el radical 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH•) és acolorit i notablement estable, i per tant es troba entre els radicals més comuns considerats en nombrosos estudis [9]. Un assaig d'eliminació de DPPH és un mètode precís i fàcil d'implementar per mesurar les capacitats antioxidants totals dels extractes botànics o d'herbes.10]. Per tant, s'han utilitzat assajos de DPPH, anió superòxid i eliminació de radicals hidroxil per avaluar la capacitat antioxidant de diferents extractes deC. tubulosa.

Els passos de producció d'extractes per a la medicina tradicional xinesa (MTC) són complexos i impliquen tall, processament, extracció, concentració i assecat.11]. És inevitable que els components actius dels materials herbaris (HM) es perdin durant les etapes de fabricació tan sofisticades. Els PhG es caracteritzen per tenir almenys un fragment de glicosil al seu nucli, que determina les seves propietats. Aquests compostos són solubles en aigua i fàcils d'extreure mitjançant mètodes tradicionals. També és el cas que la tecnologia d'extracció d'aigua s'utilitza àmpliament en la producció de TCM [12]. Els extractes d'aigua (WE) resultants es formulen en diverses formes de dosificació, com ara pastilles, grànuls, càpsules i mescles. Inevitablement, la pèrdua d'ingredients biològics es produeix durant un procés de producció a gran escala. És per això que l'avaluació de la qualitat és un pas indispensable i es requereix per garantir la qualitat dels productes semielaborats a partir dels processos. Alguns investigadors ja han utilitzat aquests materials residuals mitjançant modificacions estructurals.Astragalus membranaceousEl residu es va purificar per produir un polisacàrid que millorava la disfunció cognitiva alterant la microbiota intestinal en ratolins diabètics.13]. Un polisacàrid neutre extret deCodonopsis pilosulaEl residu va mostrar un efecte hipoglucèmic [14]. A la Xina es fabriquen grans quantitats de residus d'herbes (HR). La reutilització dels recursos humans s'ha convertit en un camp d'investigació nou i nou a mesura que els processos de MTC s'han modernitzat.15]. El potencial de diferències entre les propietats antioxidants de diverses herbes i els seus WE s'ha convertit en un focus de la nostra atenció. A més de considerar els WE deC. tubulosa, s'espera determinar si els recursos humans poden resultar útils com a TCM candidats i explorar oportunitats per transformar els descartats.C. tubulosamaterial de rebuig en productes factibles.

Les relacions espectre-efecte s'utilitzen per determinar components efectius en mescles complexes i reflectir la qualitat interna de la medicina herbal. És indispensable en el procés de modernització i internacionalització de la fitoterapia. Atès que la investigació de la relació espectre-efecte dels medicaments a base d'herbes es basa en l'empremta cromatogràfica, es requereix un mètode analític adequat per generar una empremta digital que reflecteixi els ingredients químics dels medicaments a base d'herbes. La cromatografia líquida d'alt rendiment (HPLC) és un mètode analític important que té molts avantatges, com ara una alta separació, bona estabilitat, alta eficiència i alta precisió quantitativa. PLSR (regressió de mínims quadrats parcials) simplifica l'estructura de dades i l'anàlisi de correlació entre dos conjunts de variables mitjançant l'ús de models de regressió.16]. En l'anàlisi de correlació bivariada (BCA), les puntuacions de les proves es correlacionen amb construccions relacionades conceptualment per tal d'establir evidències vàlides.17]. S'ha utilitzat RDA (anàlisi de redundància) per identificar les comunitats microbianes primàries relacionades amb la capacitat biològica especial, però ho hem aplicat a la relació espectre-efecte.18]. Per avaluar els coeficients de correlació es van utilitzar PLSR i BCA. A continuació, es van verificar els resultats mitjançant RDA per determinar quins models eren més adequats per estudiar la relació espectre-efecte ambC. tubulosa.

En les metodologies de "terapèutica multicomponent, xarxa biològica" en farmacologia en xarxa, s'intenta buscar dianes comunes entre molècules actives i malalties, que poden tenir un paper indispensable per proporcionar un referent per a la prevenció de malalties.Cistanche herbamostren propietats potencials multicomponent i multiobjectiu als informes anteriors [19, 20]. Es resumeixen els biomarcadors de dany oxidatiu associats a malalties humanes [21]. Pocs estudis aclareixen el mecanisme antioxidant deC. tubulosa. Per tant, es va adoptar la tecnologia de farmacologia de xarxa per investigar molècules bioactivesC. tubulosai mecanismes deC. tubulosacontra l'oxidació.

En aquest estudi, les empremtes dactilars cromatogràfiques i les activitats antioxidants de HM, WE i HR d'11 lots deC. tubulosaes van avaluar simultàniament mitjançant HPLC i assaigs antioxidants. Una relació espectre-efecte entre les empremtes dactilars HPLC i els efectes antioxidants deC. tubulosaes va revelar clarament mitjançant una sèrie d'anàlisis de correlació. Els estudis existents informen principalment sobre les propietats antioxidants deC. tubulosaherbes [22–24], però pocs d'ells destaquen les capacitats antioxidants dels HE. A més, es podria subestimar el paper dels recursos humans, i aquest estudi ofereix una nova oportunitat per aprofitar noves investigacions en aquest camp. L'objectiu d'aquesta investigació era identificar els principals ingredients actius dins i les activitats antioxidants dels HM, WE i HR deC. tubulosa. A continuació, es va aplicar la quimiometria per identificar les relacions espectre-efecte per als HM, WE i HR d'11 lots deC. tubulosa. Aquesta és la primera vegada que hi ha diferències entre HM, WE i HRC. tubulosas'han estudiat d'aquesta manera. A més, es va realitzar l'anàlisi de la farmacologia de la xarxa per dilucidar els mecanismes subjacentsC. tubulosaen el tractament de malalties relacionades amb els antioxidants.

1. Introducció

Cistanche tubulosa(Schenk) R. Wight, una de les herbes més utilitzades en elCistanchefamília, es coneix com la "Ginseng del desert" pels seus diversos beneficis per a la salut [1]. Les investigacions farmacològiques modernes han descobert que elCistancheLa família ofereix diversos efectes farmacèutics, com ara efectes antioxidants, anticancerígens, hipoglucèmics, antidepressius, millora cognitiva i antimicrobians [2]. El grup químic principal de Cistancheherb a és els glicòsids feniletanoides (PhGs) [1]. Els PhG derivats de les espècies de Cistanche poden elevar les activitats de la superòxid dismutasa (SOD) i la glutatió peroxidasa (GSH-Px) [3]. L'echinacòsid, un membre de la família PhG, reverteix eficaçment l'estrès oxidatiu in vivo induït per dietes altes en glucosa mitjançant la regulació a la baixa de l'activitat del sistema d'òxid nitrós (NOS) i l'expressió fosfo-eNOS [4]. L'esquelet bàsic del PhG està format per fragments d'alcohol feniletílic i glicosil. Es creu que els PhG tenen una activitat significativa a causa dels grups hidroxil fenòlics en la seva estructura. L'activitat antioxidant dels PhG augmenta amb la presència de grups hidroxil fenòlics [5].

Les espècies reactives d'oxigen (ROS) tenen un paper crucial en molts processos fisiològics i mecanismes de protecció essencials. L'exposició freqüent a concentracions elevades de ROS pot contribuir a danys inespecífics a proteïnes, lípids i àcids nucleics. Les ROS poden ser molècules neutres (per exemple, peròxid d'hidrogen), ions (per exemple, anió superòxid) o radicals (per exemple, radicals hidroxil) i exerceixen els seus efectes mitjançant la regulació de les cascades de senyalització cel·lular [6]. La seva ràpida producció i eliminació estan influenciades per diversos mecanismes. Són lleugers i es difonen fàcilment a distàncies curtes [7]. L'anió superòxid () és un precursor de la majoria de ROS i una espècie intermèdia en reaccions oxidatives. Els radicals hidroxil () són catalitzats per metalls de transició reduïts, que al seu torn poden ser reoxidats per . Un desequilibri entre la producció excessiva de ROS i les defenses antioxidants limitades condueix a diversos processos nocius també anomenats "estrès oxidatiu" [8]. Si es pot corregir aquest desequilibri, es pot manipular la gestió de diversos mecanismes de defensa. L'estrès oxidatiu està implicat en diverses condicions patològiques, com ara càncer, malalties cardiovasculars, trastorns neurològics i diabetis [6]. A més, el radical 2,2-difenil{-1-picrilhidrazil (DPPH•) és acolorit i notablement estable, i per tant es troba entre els radicals més comuns considerats en nombrosos estudis [9]. Un assaig d'eliminació de DPPH és un mètode precís i fàcil d'implementar per mesurar les capacitats antioxidants totals dels extractes botànics o d'herbes [10]. Per tant, s'han utilitzat assajos de DPPH, anió superòxid i eliminació de radicals hidroxil per avaluar la capacitat antioxidant de diferents extractes deC. tubulosa.

Els passos de producció d'extractes per a la medicina tradicional xinesa (MTC) són complexos i impliquen tall, processament, extracció, concentració i assecat [11]. És inevitable que els components actius dels materials herbaris (HM) es perdin durant les etapes de fabricació tan sofisticades. Els PhG es caracteritzen per tenir almenys un fragment de glicosil al seu nucli, que determina les seves propietats. Aquests compostos són solubles en aigua i fàcils d'extreure mitjançant mètodes tradicionals. També és el cas que la tecnologia d'extracció d'aigua s'utilitza àmpliament en la producció de TCM [12]. Els extractes d'aigua (WE) resultants es formulen en diverses formes de dosificació, com ara pastilles, grànuls, càpsules i mescles. Inevitablement, la pèrdua d'ingredients biològics es produeix durant un procés de producció a gran escala. És per això que l'avaluació de la qualitat és un pas indispensable i es requereix per garantir la qualitat dels productes semielaborats a partir dels processos. Alguns investigadors ja han utilitzat aquests materials residuals mitjançant modificacions estructurals. El residu d'Astragalus membranaceus es va purificar per produir un polisacàrid que millorava la disfunció cognitiva alterant la microbiota intestinal en ratolins diabètics [13]. Un polisacàrid neutre extret del residu de Codonopsis pilosula va mostrar un efecte hipoglucèmic [14]. A la Xina es fabriquen grans quantitats de residus d'herbes (HR). La reutilització dels recursos humans s'ha convertit en un camp d'investigació nou i nou a mesura que els processos de TCM s'han modernitzat [15]. El potencial de diferències entre les propietats antioxidants de diverses herbes i els seus WE s'ha convertit en un focus de la nostra atenció. A més de considerar els WE de C. tubulosa, s'espera determinar si els HR poden resultar útils com a TCM candidats i explorar oportunitats per transformar els residus de C. tubulosa descartats en productes factibles.

Les relacions espectre-efecte s'utilitzen per determinar components efectius en mescles complexes i reflectir la qualitat interna de la medicina herbal. És indispensable en el procés de modernització i internacionalització de la fitoterapia. Atès que la investigació de la relació espectre-efecte de les herbes medicinals es basa en el c

Figura 1 El procediment de processament de matèries primeres de C. tubulosa en diferents formes

2.3. Condició HPLC de Cistanche

La cromatografia es va realitzar amb un Vanquish™ Horizon UHPLC (Thermo Fisher Scientific, Massachusetts, EUA) amb un detector d'ultraviolats i una columna ACQUITY UPLC BEH C18 (2,1 mm × 100 mm, 1,7 μm) a 30 grau . La fase mòbil constava d'una solució d'àcid fosfòric (A) al 0,1 per cent en acetonitril (B) en mode d'elució gradient de la següent manera: 0-8 min 5 per cent -13 per cent B, 8-9 min 13 per cent -15 per cent B, 9 –19 min 15 per cent B, 19–20 min 15 per cent -5 per cent B i 20–26 min 5 per cent B. El cabal era de 0,3 ml/min, el volum d'injecció de la mostra era d'1 µL i el detector la longitud d'ona es va establir en 238 nm.

2.4. Preparació de mostres i estàndards per a l'anàlisi HPLC de Cistanche

2.4.1. Preparació de solucions de mostres

Les solucions de mostra es van preparar segons Zhen et al. amb modificacions [28]. Les herbes de Cistanche tubulosa i els excrements es van triturar en pols (65 malles). Les mostres polveritzades (1,0 g) es van remullar durant 3{{10}} min i es van extreure amb 50 ml de metanol aquós al 50% en un bany d'ultrasons durant 40 min. (250 W, 40 kHz). A continuació, les solucions es van filtrar a través d'una membrana microporosa de 0,22-μl. A continuació, es van extreure les mostres de WE (0, 2 g) amb 50 ml de metanol aquós al 50 per cent en un bany d'ultrasons durant 30 min (250 W, 40 kHz). A continuació, les solucions es van filtrar a través d'una membrana microporosa de 0,22-μL.

2.4.2. Preparació de Solucions Estàndard de Cistanche

Es van dissoldre quantitats adequades de cinc compostos de referència en metanol aquós al 50 per cent i després es van filtrar a través d'una membrana microporosa de 0,22-μL per obtenir una solució estàndard mixta. En afegir un 50 per cent de metanol aquós a un matràs aforat de 10-ml, la solució estàndard barrejada contenia àcid genipòdic,equinacòsid, verbascosid, tubulósidA, i isoacteòsid. Es van injectar solucions pures de compostos de referència al sistema HPLC per a una anàlisi qualitativa i es van registrar els seus temps de retenció. La comparació dels temps de retenció va permetre identificar compostos de referència.

2.5. Metodologia Validació de Cistanche

2.5.1. Precisió, reproductibilitat i estabilitat

La pols de HM1 es va preparar tal com es descriu a la secció 2.4. La precisió del mètode es va avaluar mitjançant sis injeccions successives d'una solució de mostra, mentre que la reproductibilitat es va estimar realitzant sis rèpliques d'una mostra. Les proves d'estabilitat es van realitzar replicant injeccions d'una solució de mostra que s'havia mantingut a 15 graus durant 0, 2, 4, 8, 12 i 24 h.

2.5.2. Linealitat

Es van injectar i analitzar les solucions de referència mixtes amb diferents concentracions de gradient. Els intervals de concentració d'àcid geniposidic, equinacòsid, verbascòsid, tubulòsid A i isoacteòsid eren {{0}}.0011–{{10}}. 3414 mg/ml, 0.0081–2,421 mg/ml, 0,001–0,3132 mg/ml, 0,0005–0,1518 mg/ml i 0,0004–0,1116 mg/ml, respectivament. Les corbes analítiques per a cada estàndard es van obtenir considerant la correlació entre l'àrea del pic (y) i la concentració (x, mg/mL) mitjançant un model de mínims quadrats lineal.

2.5.3. Recuperació de la mostra

La recuperació de la mostra es va investigar afegint una quantitat precisa de solució estàndard a 0,5 g de pols de mostra HM1. Es van preparar nou mostres en paral·lel segons la secció 2.4. Es va determinar la recuperació mitjana de la mostra de cada component.

2.5.4. Determinació de la mostra

Tal com es descriu a la secció 2.4, es van preparar HM, Wes i HR en paral·lel. Aquestes solucions de mostra es van injectar seguint les condicions cromatogràfiques descrites a la secció 2.3. Es va registrar l'àrea del pic i es va calcular el contingut. Les dades es van analitzar mitjançant GraphPad Prism 8 (GraphPad Software, Califòrnia, EUA). els valors es van calcular mitjançant l'anàlisi de variància unidireccional seguida pel mètode Tukey. es va considerar estadísticament significatiu.

2.6. Establiment d'empremtes digitals i avaluació de Cistanche

Les dades cromatogràfiques HPLC es van extreure del programari Chromeleon 7.2.8 (Thermo Fisher Scientific, Massachusetts, EUA) en format CDF i TXT. Els valors de similitud HM-WE, WE-HR i HM-HR es van calcular mitjançant un sistema d'avaluació de similitud dissenyat per a empremtes dactilars cromatogràfiques dins del programari TCM (versió 2004A). Les empremtes dactilars HPLC es van dibuixar mitjançant el programari Origin 2021 (OriginLab, Massachusetts, EUA).

2.7. Avaluació de l'activitat antioxidant de Cistanche

Els procediments de mesura del nivell d'antioxidants es van dur a terme segons les instruccions proporcionades als diferents kits. Els valors d'absorbància es van mesurar mitjançant un Shimadzu UV-2600i (Shimadzu, Japó). Cada mostra es va executar per triplicat i es van registrar les dades mitjanes. Es van registrar diverses concentracions de mostres i els seus corresponents valors d'absorbància (A). La concentració inhibidora del 50 per cent (IC50) es va calcular mitjançant GraphPad Prism 8 (GraphPad Software, Califòrnia, EUA).

Es va utilitzar etanol deshidratat per ajustar-se a zero.

2.7.2. Assaig

Primer, es van extreure 0,1 g de pols HM, WE i HR utilitzant 1 ml d'una solució aquosa d'etanol al 80%. El material resultant es va sonicar durant 30 min i es va centrifugar a durant 5 min. Es va afegir una mostra de 100 μL als fluids de treball (taula S2). Després que la reacció es va deixar prosseguir a 37 graus durant 10 min, es va registrar l'absorbància a 570 nm i es va convertir en activitat d'eliminació de radicals () com segueix:

Es va utilitzar aigua purificada per ajustar-se a zero.

2.8. Anàlisi de dadesde Cistanche

2.8.1. Anàlisi PLSR

Les principals àrees de pics cromatogràfiques van servir com a variables independents (X) i els nivells d'activitat antioxidant per als diferents assajos van ser les variables dependents (Y). El modelatge PLSR es va realitzar mitjançant el programari Unscrambler X 10.4 (CAMO Software, Bangalore, Índia). Els coeficients de regressió ponderats van revelar correlacions entre les àrees màximes i els nivells d'activitat antioxidant, i els coeficients de regressió en brut van definir l'equació del model.

2.8.2. Anàlisi BCAde Cistanche

Les àrees pics eren les variables independents (X) i els nivells d'antioxidants dels diferents assajos es van tractar com a variables dependents (Y). A continuació, es va analitzar el BCA entre X i Y mitjançant un model de Pearson. Aquest procediment s'ha realitzat mitjançant el programari estadístic SPSS (SPSS per a Windows 26.0, SPSS Inc., San Francisco, EUA).

2.8.3. Gràfic de mapa de calor, gràfic de Venn i RDAde Cistanche

Els gràfics de mapes de calor es van dibuixar amb GraphPad Prism 8 (GraphPad Software, Califòrnia, EUA). A partir dels models PLSR i BCA, els valors de relació entre l'àrea del pic i les capacitats antioxidants d'11 pics es van classificar de gran a petit i es van registrar els cinc primers graus. Aquests pics es van utilitzar per dibuixar diagrames de Venn en línia (https://bioinformatics.psb.ugent.be/webtools/Venn/). Les dades de les diferents àrees màximes i els nivells d'antioxidants de les tres formes de C. tubulosa es van visualitzar mitjançant RDA. Les proves RDA es van realitzar amb el programari CANOCO (Biometris—Plant Research International, Wageningen, Països Baixos).

2.9. Anàlisi farmacològica en xarxa de Cistanche

2.9.1. Detecció de principis actius de C. tubulosa

Tots els components químics de C. tubulosa es van obtenir mitjançant la farmacologia de sistemes de medicina tradicional xinesa (TCMSP, https://www.tcmsp-e.com/). Els llindars de cribratge de cada component químic es van establir com a biodisponibilitat oral (OB) superior o igual al 30 per cent i semblança de fàrmac (DL) superior o igual a 0,18, respectivament. L'InChIKey d'ingredients bioactius es va recollir a través de la base de dades PubChem (https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/). Les dianes de proteïnes dels compostos actius es van seleccionar a través de la base de dades SwissTargetPrediction (https://www.swisstargetprediction.ch/). Els noms objectiu es van convertir en noms de gens mitjançant la base de dades de proteïnes UniPort (https://www.uniprot.org/).

2.9.2. Construcció d'una xarxa component-objectiu

La paraula clau "antioxidant" es va utilitzar per cercar objectius relacionats amb malalties a la base de dades GeneCards (https://www.genecards.org/) i la base de dades OMIM (https://omim.org/). Les interseccions de gens entre components actius i objectius relacionats amb la malaltia es van visualitzar mitjançant un diagrama de Venn en línia (https://bioinformatics.psb.ugent.be/webtools/Venn/). Els objectius d'ingredients bioactius de C. tubulosa es van mapar als gens objectiu mitjançant el programari Cytoscape 3.9.1 (https://cytoscape.org/) per construir la xarxa de components-objectiu (CT).

2.9.3. Ontologia gènica i anàlisis d'enriquiment de l'enciclopèdia de Kyoto de gens i genomes

L'enriquiment de l'ontologia gènica (GO) en processos biològics (BP), el component cel·lular (CC) i la funció molecular (MF) i l'enriquiment de la via de l'enciclopèdia de Kyoto de gens i genomes (KEGG) es van analitzar en línia mitjançant la base de dades Metascape (https:// www.metascape.org/) amb la configuració "Homo sapiens". El gràfic de bombolles de visualització i l'histograma GO es van formar en línia (https://www.bioinformatics.com.cn/).

2.9.4. Establiment de xarxes d'interacció proteïna-proteïna i component-objectiu-via

The overlapping antioxidation-related and predicted targets from active components were used to construct a protein-protein interaction (PPI) using the STRING database (https://stringdb.org/). The conditions were set as described by Xin et al. [29]. The PPI network was visualized using the Cytoscape software. Degree centrality (DC), betweenness centrality (BC), and closeness centrality (CC) were calculated through the "network analysis" function. DC, BC, and CC were set as >100, >0.03, and >0.3, respectivament. Segons les vies KEGG i els gens objectiu, es va utilitzar el programari Cytoscape per construir una xarxa de via component-objectiu (CTP).