Efectes neuroprotectors aguts depenents de la dosi del poli (pro-17 estradiol) en un model de ratolí de lesió per contusió espinal

Resum

17 -L'estradiol (E2) confereix neuroprotecció en models preclínics de lesió medul·lar quan s'administra de manera sistèmica. L'objectiu d'aquest estudi era aplicar E2 localment a la medul·la espinal lesionada durant una durada sostinguda mitjançant biomaterials de pel·lícula poli (pro-E2).

A mesura que la gent aprèn més sobre les lesions medul·lars, ens estem començant a adonar de l'impacte que tenen en la salut física i mental de les persones. Tot i que les lesions medul·lars poden causar molts efectes adversos, afortunadament es pot controlar el seu impacte en la memòria.

En primer lloc, hem d'aclarir què és la lesió medul·lar. La medul·la espinal és un nervi protegit a la columna vertebral que s'encarrega de transmetre les instruccions del cervell a diverses parts del cos. Si es lesiona la medul·la espinal, algunes parts del cos perdran una bona connexió amb el cervell, donant lloc a un moviment, sensació i control autònom de les extremitats afectades.

Les lesions medul·lars poden tenir un cert impacte en la memòria de les persones, especialment en les primeres etapes de rehabilitació dels pacients amb lesions medul·lars. Les lesions de la medul·la espinal poden deteriorar l'atenció, la memòria de treball i la capacitat de processament emocional d'una persona, cosa que afectarà la capacitat de memòria d'una persona.

No obstant això, aquests efectes negatius disminuiran gradualment a mesura que els pacients es sotmeten a un tractament de rehabilitació. Els pacients poden millorar la seva memòria participant en jocs de memòria i altres entrenaments cognitius. Paral·lelament, la rehabilitació física també afavoreix la restauració de les funcions motrius i sensorials del cos, millorant així les funcions emocionals i cognitives.

Hem d'animar els pacients amb lesions medul·lars a participar activament en el tractament de rehabilitació i a persistir en l'entrenament de rehabilitació per millorar la salut física i mental. Si us plau, creieu que amb l'ajuda d'una cognició correcta i un tractament postoperatori, els pacients poden superar l'impacte de la lesió medul·lar en la memòria i continuar vivint una vida activa. Es pot veure que hem de millorar la memòria, i Cistanche pot millorar significativament la memòria perquè Cistanche també pot regular l'equilibri de neurotransmissors, com l'augment dels nivells d'acetilcolina i factors de creixement, que són molt importants per a la memòria i l'aprenentatge. A més, Cistanche també pot millorar el flux sanguini i promoure el lliurament d'oxigen, cosa que pot garantir que el cervell obtingui suficient nutrició i energia, millorant així la vitalitat i la resistència del cervell.

Feu clic a Coneix suplements per millorar la memòria

Després de lesions contusives de la medul·la espinal en ratolins mascles adults, es van implantar pel·lícules de poli (pro-E2) per via subdural i es va avaluar la neuroprotecció mitjançant immunohistoquímica 7 dies després de la lesió i la implantació. En aquests estudis, les pel·lícules de poli (pro-E2) van millorar modestament la neuroprotecció sense afectar la resposta inflamatòria. en comparació amb els controls ferits.

Per augmentar la dosi d'E2 alliberada, es van fabricar pel·lícules de poli (pro-E2) que alliberen bolus incorporant E2 no lligat a les pel·lícules de poli (proE2).

Tanmateix, en comparació amb els controls lesionats, les pel·lícules de poli (pro-E2) que alliberen bolus no van millorar significativament la neuroprotecció ni van limitar la inflamació als 7 o 21 dies després de la lesió. El treball futur es centrarà en el desenvolupament de biomaterials poli (pro-E2) capaços de més precisament alliberant dosis terapèutiques d'E2.

INTRODUCCIÓ

La lesió traumàtica de la medul·la espinal (SCI) és una afecció debilitant que afecta més de 18,000 persones cada any als Estats Units1, mentre que s'estima que la prevalença global de SCI és d'entre 236 i 1009 per milió.2

Els pacients afectats per SCI pateixen dèficits neurològics greus que inclouen pèrdua de sensibilitat, alteració de la funció intestinal/vesical i paràlisi.3,4 L'impacte principal sobre la medul·la espinal provoca la mort neuronal al lloc de la lesió, que s'agreuja encara més per diverses cascades de lesions secundàries que impliquen astròcits i macròfags. .

Amb el temps, aquests astròcits formen una cicatriu glial que impedeix l'extensió dels axons més enllà de la vora de la lesió.5 Fins ara, no hi ha fàrmacs neuroprotectors aprovats per la FDA per tractar la SCI.

La investigació que abasta diverses dècades s'ha centrat en l'administració sistèmica de biomolècules per prevenir la pèrdua neuronal a causa d'una lesió secundària i/o promoure la regeneració axonal, que finalment condueix a la restauració de la funció perduda.6 Una biomolècula que ha demostrat una promesa significativa en models preclínics de SCI és la femenina. hormona sexual, 17 -estradiol (E2).

L'administració d'E2 és àmpliament beneficiosa per al sistema nerviós central, ja que redueix la inflamació7–9, alleuja la reactivitat de les cèl·lules glials,10 limita l'estrès oxidatiu11–14 i mitiga la mort neuronal excitotòxica induïda pel glutamat.15 E2 millora la recuperació funcional en diversos models de rosegadors de SCI.10, 16,17 Curiosament, l'administració sistèmica de dosis múltiples d'E2 indueix la recuperació funcional més ràpidament18,19 en comparació amb els animals que reben només una dosi única.17

Com que l'E2 promou la recuperació funcional de manera més eficaç mitjançant règims de dosis múltiples, el nostre objectiu era alliberar de manera estable l'E2 localment al lloc de la lesió (per evitar efectes fora de l'objectiu) per evitar els problemes derivats de múltiples dosis/injeccions sistèmiques d'E2.

Amb aquesta finalitat, vam emprar una estratègia de biomaterial poli(profàrmac) en què el fàrmac natiu (E2) es va funcionalitzar primer amb grups al·lílics reactius i després es va polimeritzar mitjançant l'addició de radicals tiol-è fotoiniciat amb un oligo-(etilenglicol) ditiol flexible, tal com es va descriure anteriorment. .20 Hem obtingut cadenes de polímers d'alt pes molecular, que consisteixen en un profàrmac E2 com a unitat repetidora dins del polímer.

Després de la degradació hidrolítica, el polímer allibera gradualment E2 al medi circumdant. Els únics altres subproductes de l'alliberament són el diòxid de carboni i l'oligo(etilenglicol) (oEG) (figura 1). Les cadenes de poli(pro-E2) fabricades en pel·lícules o microfibres poden alliberar E2 a concentracions nanomolars in vitro en una escala de temps de mesos a anys. .20

L'E2 alliberat d'aquestes bastides poli (pro-E2) és bioactiva, i aquestes bastides promouen el neurotrofisme i la neuroprotecció in vitro protegint les neurones de l'estrès oxidatiu induït pel peròxid d'hidrogen. Aquí, vam aplicar les pel·lícules de poli (pro-E2) en un model murí de contusió SCI, immediatament després de la lesió, i vam avaluar la seva capacitat neuroprotectora in vivo.

El disseny de pel·lícula de poli (pro-E2) inicial va augmentar la neuroprotecció de manera aguda (7 dies després de la lesió) al lloc de la lesió sense afectar la resposta inflamatòria. Com que les pel·lícules de poli (pro-E2) alliberen nanogrames d'E2 per dia, vam desenvolupar una altra estratègia de llançament on unboundE2 es va incorporar a la matriu de poli (pro-E2). Vam plantejar la hipòtesi que l'alliberament de bolus d'E2 no unit pot proporcionar beneficis neuroprotectors addicionals.

Les pel·lícules de poli (pro-E2) van alliberar E2 de manera explosiva seguida d'un alliberament sostingut d'E2 del polímer a concentracions més baixes. La tinció immunohistològica va avaluar les neurones, els astròcits i els macròfags/micròglia presents al lloc de la lesió de manera aguda (7 dies després de la lesió) i de forma crònica (21 dies després de la lesió) després de la SCI en presència d'aquestes pel·lícules de poli (pro-E2) que alliberen bolus.

RESULTATS I DISCUSSIÓ

Les pel·lícules de poli(pro-E2) alliberen E2 a concentracions nanomolars, promouen el creixement neuronal del gangli de l'arrel dorsal i protegeixen les neurones de l'estrès oxidatiu induït pel peròxid d'hidrogen in vitro.20 L'estudi que es presenta aquí pretén determinar la capacitat del poli(pro-E2) pel·lícules per proporcionar neuroprotecció in vivo mitjançant un model murí de contusió SCI.

Es va induir una contusió SCI moderada en ratolins mascles adults i, immediatament després de la lesió, es van col·locar pel·lícules de poli (pro-E2) directament a sobre de la lesió (figura 2A). Per garantir que les pel·lícules de poli (pro-E2) es mantinguessin al seu lloc després de la implantació, es van implantar pel·lícules de poli (pro-E2) carregades amb rodamina B a les medul·les espinals dels animals ferits. Set dies després de la implantació, es van recollir les medul·les espinals i es van fer imatges mitjançant un microscopi de llum (figura 2B). En tots els animals, les pel·lícules de poli (pro-E2) carregades amb rodamina B implantades es van mantenir al lloc validant el protocol d'implantació.

Per provar la capacitat de les pel·lícules de poli (pro-E2) per proporcionar neuroprotecció i alleujar la inflamació, es van implantar pel·lícules de poli (pro-E2) (sense rodamina B) després d'una lesió de contusió espinal i es van recollir les medul·les espinals 7 dies després de la lesió i la implantació. Es van tallar seccions longitudinals (10 μm de gruix), centrades al voltant de l'epicentre de la lesió i immunomarcades per visualitzar neurones i macròfags a la medul·la espinal (figura 3).

Les seccions van ser etiquetades per a NeuN per avaluar la presència neuronal i l'anàlisi quantitativa de la tinció va revelar que les pel·lícules de poli (pro-E2) van augmentar significativament l'àrea positiva de NeuN al voltant de l'epicentre de la lesió en comparació amb els controls ferits que no van rebre implants de pel·lícula (Figura 3A; p).=0.0002). La tinció addicional d'axons mitjançant NFH (neurofilament heavychain) també va revelar l'efecte neuroprotector agut de les pel·lícules de poli (pro-E2) implantades (figura 3B; p=0.0017).

Vam observar que aquest canvi en la neuroprotecció no es va deure a un canvi en l'apoptosi (caspasa 3) al lloc de la lesió (figura de suport S1; p=0.9966). La tinció de macròfags activats (CD68) tampoc va revelar cap diferències significatives entre els animals tractats amb pel·lícula de poli (pro-E2) i els animals no tractats (figura 3C; p= 0.7207).

En conjunt, les pel·lícules de poli(pro-E2) augmenten modestament la neuroprotecció de manera aguda sense alterar la resposta inflamatòria. Les pel·lícules de poli(pro-E2) van augmentar la densitat neuronal gairebé un 20%, però les pel·lícules no tenien efectes antiinflamatoris evidents (basats en la quantificació de l'àrea ocupada pels macròfags activats) (Figura 3).

Aquesta manca de reducció de la inflamació pot indicar que les dosis antiinflamatòries i neuroprotectores d'E2 són diferents i que ambdues no es van aconseguir amb la formulació de pel·lícula actual. i permeten una resposta neuroprotectora més robusta.

Per augmentar la dosi d'E2 alliberada de manera aguda, es van modificar les pel·lícules de poli (pro-E2) de manera que l'alliberament d'E2 en bolus es produís immediatament després de la implantació. Després de l'alliberament en bolus d'E2, la degradació del polímer seguiria per alliberar E2 a la mateixa concentració que abans. L'experiment descrit anteriorment es va repetir utilitzant aquestes pel·lícules de poli (pro-E2) que alliberen bolus i es va avaluar la neuroprotecció i la inflamació als 7 dies després de la lesió (dpi).

Tanmateix, en lloc d'un benefici addicional, les pel·lícules de poli (pro-E2) alliberadors de bolus no van augmentar significativament l'àrea positiva NeuN en comparació amb els controls ferits i no tractats (figura 4A; p=0.6770). Les pel·lícules de poli (proE2) que alliberen bolus van augmentar l'expressió de CD68, però l'augment no va ser estadísticament diferent (p= 0.1780).

També es van observar tendències creixents en la reactivitat glial i la inflamació microglial en presència de les pel·lícules de poli (pro-E2) que alliberen bolus a causa de l'augment de l'expressió GFAP (astròcits) i Iba1 (micròglia); tanmateix, aquests augments no van ser estadísticament superiors al que es va observar en els controls ferits i no tractats (p=0.3233 i p=0.3053, respectivament). En conjunt, les pel·lícules de poli (pro-E2) que alliberen bolus no van millorar la neuroprotecció i la reactivitat dels astròcits i la presència de macròfags/micròglia no es van reduir com es va plantejar inicialment.

Atès que no es van observar diferències entre els animals ferits, no tractats i els animals ferits i tractats amb pel·lícula de poli(proE2) alliberador de bols en el punt de temps agut de 7 dpi, es va seleccionar un punt de temps crònic per a una investigació posterior ja que les pel·lícules de poli (pro-E2) pot alliberar E2 a llarg termini.20 L'experiment descrit anteriorment es va repetir amb les pel·lícules d'alliberament de bolus (pro-E2), però els animals es van avaluar de manera crònica a 21 dpi (figura 5).

Les medul·les espinals es van etiquetar per als mateixos tipus de cèl·lules indicats anteriorment. Després de l'anàlisi, es va observar un augment de la fracció d'àrea de NeuN en els animals implantats amb pel·lícula de poli (pro-E2) alliberador de bolus en comparació amb els animals ferits i no tractats (Figura 5A; p=0.0897) A més, es van observar tendències on les pel·lícules de poli (pro-E2) que alliberen bolus van disminuir la fracció d'àrea de l'expressió de CD68 i GFAP en comparació amb les dades de controls d'animals ferits no tractats (figura 5B, C; p=0.0859 i p.=0.2780).

Tanmateix, cap de les tendències va ser estadísticament diferent. D'altra banda, les seccions de teixit marcades amb Iba1 d'animals tractats amb poli (pro-E2) que alliberaven bolus van mostrar una expressió més gran en comparació amb les dades dels controls ferits no tractats (p < 0.0001). El nostre treball anterior mostra que poli (pro -E2) les pel·lícules emeses en cobertors de 15 mm × 15 mm alliberen uns 266 ng d'E2 al dia, 20 que es tradueixen en uns 2 ng d'E2 al dia de les pel·lícules (1 mm × 1,8 mm) que s'utilitzen aquí. Les pel·lícules de poli (pro-E2) que alliberen bolus alliberen 40 ug addicionals d'E2 no lligat de manera aguda després de la implantació.

La investigació centrada en l'ús d'E2 en models de SCI de rosegadors mostra que dosis baixes d'estrògens (10 ug/kg) administrades per via intravenosa atenuen la gliosi reactiva i proporciona neuroprotecció alhora que atenuen els esdeveniments inflamatoris, inhibeixen l'apoptosi i augmenten l'angiogènesi. efectes adversos que inclouen un augment de les taxes de trombosi venosa profunda i càncer22,23 i el desenvolupament de trets físics femenins en els homes. Això és digne de menció, ja que la majoria de la investigació sobre E2 s'ha centrat en l'administració sistèmica d'E2, ja sigui per via intravenosa o intraperitoneal.

Tenint en compte els problemes de seguretat amb l'ús de dosis altes d'E2 de manera sistèmica, és important optimitzar la concentració d'E2 per al lliurament local a la medul·la espinal lesionada per prevenir efectes secundaris. Fins ara, només un estudi ha lliurat E2 d'un biomaterial utilitzant nanopartícules per lliurar focalment E2 (2,5 ug o 25 ug). L'alliberament de nanopartícules va disminuir ràpidament la inflamació en un model de contusió SCI de rata.9 La manca d'una resposta estadísticament significativa a les nostres dades (figures 4 i 5) pot ser deguda a un desequilibri en la quantitat d'E2 que estem lliurant localment a la medul·la espinal amb massa E2 (40 ug) s'allibera de manera aguda mentre que molt poc (2 ng) s'allibera de manera crònica.

Tot i que el que observem a partir d'aquestes dades són tendències modestes, aquest estudi destaca la importància de la dosificació d'E2 per promoure la neuroprotecció in vivo. Reduir la dosi inicial d'E2 i ajustar la cinètica de degradació del biomaterial poli (pro-E2) podria ajudar a alleujar aquest problema i, potencialment, proporcionar millors resultats neuroprotectors.

Tot i que aquest estudi es va realitzar únicament en homes, és crucial avaluar l'efecte d'aquestes pel·lícules de poli (pro-E2) en ambdós sexes per establir un potencial de traducció vàlid per a aquest biomaterial. La investigació ha demostrat que després de la SCI, l'augment dels nivells d'estrògens en les dones pot ser parcialment responsable dels seus resultats funcionals millorats en comparació amb els homes.24Com que hi ha una presència més gran d'estrògens a les dones, qualsevol estratègia de biomaterial que utilitzi estrògens ha de tenir en compte aquest augment del nivell i modificar el material. alliberar la cinètica en conseqüència per garantir que la dosi lliurada segueix sent la mateixa per a homes i dones.

MÈTODES

Fabricació de pel·lícules de poli(pro-E2).

El polímer poli(pro-E2) P1 es va sintetitzar i caracteritzar tal com s'ha descrit en detall anteriorment.20 El polímer té un pes molecular mitjà en pes de MW ~ 80 kDa i una dispersitat de ± ~ 3, segons la cromatografia de permeació de gel (GPC). Les pel·lícules de poli(pro-E2) es van fabricar dissolent el polímer en cloroform (5% en pes/pes; polímer/cloroform), llançant la solució sobre cobertors de vidre de 15 mm × 15 mm (solució de 100 μL per cobertor) i deixant-los. assecar durant la nit al buit (<100 mTorr) at room temperature (RT). In a subset of experiments, the polymer solution was supplemented with rhodamine B (0.005 wt %/wt; rhodamine B/chloroform) (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) to verify the presence of the poly(pro-E2) films in animals post-implantation.
Per crear pel·lícules de poli(pro-E2) amb E2 no lligat, les pel·lícules es van fabricar afegint E2 no lligat (Abcam, Cambridge, MA) a la solució de polímer (0,0625% en pes/pes; E2/cloroform) abans de la colada en gota. la solució sobre els cobreobjectes. Abans de la implantació, els cobertors amb pel·lícules es van esterilitzar mitjançant radiació ultraviolada (UV) durant 30 min i les pel·lícules es van pelar de les cobertes en un armari de bioseguretat estèril. A continuació, les pel·lícules de poli (pro-E2) es van tallar en peces d'1 mm × 1, 8 mm, adequades per a la implantació en un ratolí adult tal com es descriu a continuació.

Contusió Lesió medul·lar i implantació de pel·lícules de poli(pro-E2).

Tots els procediments d'atenció quirúrgica i postoperatòria van ser aprovats pel Rensselaer PolytechnicInstitute i els Comitès Institucionals de Cura i Ús d'Animals de la Universitat Estatal d'Ohio (IACUC). Per induir una contusió SCI, els ratolins C57BL/6 mascles adults (de 10- a 12-setmanes), comprats a Jackson Laboratory (núm. d'estoc 000664; Bar Harbor, ME), van ser anestesiats amb una injecció intraperitoneal. de ketamina (80 mg/kg) i xilazina (10 mg/kg). El llom dels animals es va afaitar i es va preparar de manera asèptica amb etanol al 70% i betadina.

Després de la col·locació de l'animal en un coixinet de calefacció mantingut a 37 graus, es van obrir les capes de pell i músculs per exposar la columna vertebral i es va realitzar una laminectomia dorsal a la vèrtebra toràcica novena (T9) per exposar la medul·la espinal. Es va induir una contusió SCI moderada (75 kdyn) en aquest nivell mitjançant un impactador Infinite Horizons (Precision Systems and Instrumentation, Lexington, KY).

Després d'aconseguir l'hemostàsia, es va obrir la duramadre (figura 2) i es va col·locar una pel·lícula de poli (pro-E2) o una pel·lícula de poli (pro-E2) que allibera un bol (1 mm × 1,8 mm) sota la duramadre i per sobre de la medul·la espinal, cobrint el lloc de la lesió. En animals control, es va obrir la duramadre però no es van implantar les pel·lícules de poli (pro-E2). A continuació, es van tancar les capes musculars amb sutures estèrils i la pell es va tancar amb clips metàl·lics estèrils per ferides.

Els ratolins van rebre 2 ml de solució salina estèril injectada per via subcutània i es van tornar a les seves gàbies i es van col·locar en un escalfador de portaobjectes a 37 graus durant la nit. Per garantir una hidratació adequada i prevenir infeccions, els ratolins es van injectar per via subcutània amb 1-2 ml de solució salina estèril i Gentocina (1 mg/kg) diaris durant els primers 5 dies després de la lesió (dpi). Les bufetes es van expressar manualment dues vegades al dia durant la durada dels experiments. Tots els animals estaven allotjats en condicions convencionals en un cicle de llum-foscor de 12-hores amb accés ad libitum a menjar i aigua.

Recollida de teixits.

En els punts de temps terminals designats de 7 o 21 dpi, es va injectar als ratolins una dosi letal de ketamina/xilazina (1, 5 × dosi quirúrgica) i es van perfondre transcardialment amb solució salina tamponada amb 0.1 Mfosfat (PBS; pH 7, 4) seguit de paraformaldehid al 4% (PFA; pH 7,4). Les medul·les espinals es van retirar, es van fixar posteriorment durant 2 h en PFA al 4% i després es van transferir a 0, 2M tampó fosfat (PB; pH 7,4) durant la nit.

Les medul·les espinals es van crioprotegir en sacarosa al 30% durant 48 h a 4 graus i després es van bloquejar en segments de 10 mm centrats al voltant del lloc de lesió amb les columnes dorsals cap amunt. Aquestes seccions es van incrustar en un medi de temperatura de tall òptim Tissue-Tek (VWR International, Radnor, PA) i es van congelar ràpidament sobre gel sec. Waltham, MA), i després s'emmagatzema a -20 graus fins que s'utilitza per a la immunotinció.

Immunohistoquímica i quantificació.

Les diapositives es van descongelar en un escalfador de diapositives durant 1 h i després es van esbandir 3 vegades en 0,1 MPBS. L'activitat de la peroxidasa endògena es va apagar incubant les diapositives en un 6% d'H2O2 diluït en metanol durant 15 min a temperatura ambiente. Després de rentar 3 vegades en 0,1 M PBS, les seccions es van incubar amb un 4% de BSA i 0,1% Triton X{-100 en 0,1 M PBS durant 1 h seguit de la incubació durant la nit dels anticossos primaris a 4 graus o RT (taula 1).

Les diapositives es van incubar amb anticossos secundaris biotinilats adequats (1:1000; Vector Laboratories, Burlingame, CA) a RT durant 1 h. Per visualitzar l'anticòs lligat, les diapositives es van incubar amb Vectastain Elite-ABC (Vector Laboratories) durant 1 h i es van desenvolupar amb ImmPACT3,3'-diaminobenzidine (DAB) o substrat Vector SG (Vector Laboratories) durant 10 min.

Aquestes seccions es van deshidratar mitjançant incubacions seqüencials de 2 × 2 min en etanol al 70% i 90%, 2 × 3 min en etanol al 100%, seguits de 3 × 3 min a Histoclear i, finalment, es van cobrir amb Permount (ThermoFisher Scientific). Per a l'anàlisi de quantificació es van utilitzar sis seccions per animal, separades 100 μm de la medul·la espinal lesionada.

Les seccions immunomarcades es van fotografiar mitjançant un microscopi d'imatge Axioplan 2 equipat amb una càmera AxioCamdigital i el programari AxioVision versió 4.8.2 (Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Alemanya) i un objectiu 5 ×.

El nombre de píxels positius a cadascuna de les seccions es va comptar mitjançant el programari d'anàlisi d'imatges MIPAR (MIPAR, Worthington, OH) per calcular el percentatge de fracció d'àrea positiva per secció. Es va calcular el percentatge mitjà d'àrea positiva de les sis seccions per animal per a cadascuna de les taques i es va informar.

Anàlisi estadística.

Totes les dades es presenten com a mitjana ± desviació estàndard. L'anàlisi estadística es va realitzar amb el programari estadístic GraphPad Prism 9 (GraphPad Software, San Diego, CA). En tots els experiments, es van utilitzar 5-6 animals per grup, procedents d'almenys dos lots d'animals diferents. Per provar les diferències entre els grups de pel·lícules control i poli (pro-E2), es va utilitzar la prova t de Student (figures 3, 4 i 5). La significació es va establir a p Menor o igual a 0,05.

Material complementari

Consulteu la versió web de PubMed Central per obtenir material suplementari.

AGRAÏMENTS

Els autors agraeixen a Wenmin Lai la seva ajuda amb les cirurgies del ratolí.

Finançament

Aquest treball va rebre el suport de la Craig H. Neilsen Foundation Fellowship (Grant 468116) i la Paralyzed Veteransof America Research Foundation Fellowship (Grant 3171) a MKG i de NIH R01 (Grant NS092754) i la Subvenció Institucional de Suport Institucional de la Junta de Revisió de lesions medul·lars de l'estat de Nova York a 32RJ45GG. Tot el treball animal es va realitzar amb l'ajuda del nucli quirúrgic del Departament de Neurociència de la Universitat Estatal d'Ohio amb el suport de NINDS Grant P30NS104177.

REFERÈNCIES

(1). Centre Nacional d'Estadística de lesions medul·lars. (2020) Fets i xifres de lesions de la medul·la espinal a un cop d'ull, Universitat d'Alabama a Birmingham, Birmingham, AL.

(2). Cripps RA, Lee BB, Wing P, Weerts E, MacKay J i Brown D (2011) Un mapa global per a l'epidemiologia de lesions de la medul·la espinal traumàtica: cap a un dipòsit de dades viu per a la prevenció de lesions. Medul·la espinal. 49, 493–501. [PubMed: 21102572]

(3). Donovan WH (2007) Lesió medul·lar: passat, present i futur. Journal of Spinal CordMedicine 30, 85–100.

(4). Pickelsimer E, Shiroma EJ i Wilson DA (2010) Investigació estatal sobre condicions de salut adverses assistides mèdicament de persones amb lesió medul·lar. J. Med. medul·la espinal. 33 (3),221–231. [PubMed: 20737795]

(5). Silver J i Miller JH (2004) La regeneració més enllà de la cicatriu glial. Nat. Reverent Neurosci. 5 (2),146–156. [PubMed: 14735117]

(6). Varma AK, Das A, Wallace G, Barry J, Vertegel AA, Ray SK i Banik NL (2013) Spinal Cord Injury: A Review of Current Therapy, Future Treatments, and Basic Science Frontiers.Neurochem. Res. 38, 895–905. [PubMed: 23462880]

(7). Zendedel A, Mönnink F, Hassanzadeh G, Zaminy A, Ansar MM, Habib P, Slowik A, Kipp M i Beyer C (2018) L'estrogen atenua l'expressió i l'activació de l'inflamasoma local després d'una lesió medul·lar. Mol. Neurobiol. 55 (2), 1364–1375. [PubMed: 28127698]

(8). Lee JY, Choi HY, Ju BG i Yune TY (2018) L'estrogen alleuja el dolor neuropàtic induït després de la lesió de la medul·la espinal mitjançant la inhibició de l'activació de la microglia i els astròcits. Biochim. Biofísica. Acta, Mol. Base Dis. 1864 (7), 2472–2480. [PubMed: 29653184]

(9). Cox A, Varma A, Barry J, Vertegel A i Banik N (2015) L'estrogen de nanopartícules a la lesió de la medul·la espinal de rata provoca efectes antiinflamatoris ràpids en el plasma, el líquid cefaloraquidi i el teixit.J. Neurotrauma 32 (18), 1413–1421. [PubMed: 25845398]

(10). Sribnick EA, Samantaray S, Das A, Smith J, Matzelle DD, Ray SK i Banik NL (2010) El tractament amb estrògens posterior a la lesió de la lesió medul·lar crònica millora la funció locomotora en rates. J. Neurosci. Res. 88 (8), 1738–1750. [PubMed: 20091771]

(11). Honda K, Shimohama S, Sawada H, Kihara T, Nakamizo T, Shibasaki H i Akaike A (2001) Transducció de senyal antiapoptòtica no genòmica per estrògens en neurones corticals cultivades. J.Neurosci. Res. 64 (5), 466–475. [PubMed: 11391701]

(12). Sribnick EA, Wingrave JM, Matzelle DD, Ray SK i Banik NL (2003) L'estrogen com a agent neuroprotector en el tractament de la lesió medul·lar. Ann. NY Acad. Ciència. 993.125–133. [PubMed: 12853305]

For more information:1950477648nn@gmail.com