4. Materials i Mètodes

4.1. Material vegetal

Les llavors africanes de S. aurea utilitzades per a aquest estudi es van adquirir d'una botiga especialitzada a Itàlia. Les plàntules es van conrear al Laboratori de Biologia Vegetal i Botànica Farmacèutica de la Universitat de Càller (UNICA). Al cap de 5 setmanes, es van col·locar en un hivernacle "Planta Medica", segons les necessitats ecofisiològiques de l'espècie. Les plantes es van recollir després de dos anys de creixement en el seu període de floració. Les parts aèries es van col·locar immediatament en un forn de ventilació forçada per aire (FD 115, BINDER) fins que s'assecaven completament (quan van assolir un pes constant). Es va dipositar un exemplar de val a l'Herbarium Karalitanum (CAG) de la Universitat de Càller, Itàlia, amb el número de val (6/23.8/V1).

El glicòsid de cistanche també pot augmentar l'activitat de la SOD en els teixits del cor i del fetge, i reduir significativament el contingut de lipofuscina i MDA a cada teixit, eliminant eficaçment diversos radicals reactius d'oxigen (OH-, H₂O₂, etc.) i protegint contra els danys de l'ADN causats. per radicals OH. Els glucòsids feniletanoides de Cistanche tenen una forta capacitat d'eliminació dels radicals lliures, una capacitat reductora superior a la de la vitamina C, milloren l'activitat de SOD en la suspensió d'esperma, redueixen el contingut de MDA i tenen un cert efecte protector sobre la funció de la membrana espermàtica. Els polisacàrids de Cistanche poden millorar l'activitat de SOD i GSH-Px en eritròcits i teixits pulmonars de ratolins senescents experimentalment causats per D-galactosa, així com reduir el contingut de MDA i col·lagen al pulmó i el plasma, i augmentar el contingut d'elastina. un bon efecte d'eliminació de DPPH, allarga el temps d'hipòxia en ratolins senescents, millora l'activitat de SOD al sèrum i retarda la degeneració fisiològica del pulmó en ratolins senescents experimentalment Amb la degeneració morfològica cel·lular, els experiments han demostrat que Cistanche té la bona capacitat antioxidant. i té el potencial de ser un fàrmac per prevenir i tractar malalties de l'envelliment de la pell. Al mateix temps, l'echinacòsid a Cistanche té una capacitat significativa per eliminar els radicals lliures de DPPH i té la capacitat d'eliminar espècies reactives d'oxigen i prevenir la degradació del col·lagen induïda pels radicals lliures, i també té un bon efecte reparador sobre el dany anònic dels radicals lliures de timina.

Feu clic a Suplement de Cistanche Tubulosa

【Per a més informació: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

4.2. Anàlisi d'olis essencials

L'oli essencial es va obtenir mitjançant 3 h d'hidrodestil·lació mitjançant un aparell de tipus Clevenger, segons les directrius de la Farmacopea Europea [89]. L'anàlisi posterior per cromatografia de gasos amb detecció d'ionització de flama (GC-FID) i cromatografia de gasos/espectrometria de masses (GC-MS) es va realitzar segons [13]. Breument, per a l'anàlisi GC, es va utilitzar una columna capil·lar HP 5, amb un procediment experimental de 82 min a diferents temperatures, respectivament, de 60 ◦C a 246 ◦C a una velocitat de 3 ◦C/min, que després es va mantenir a 246 ◦C durant 20 min. L'heli (puresa superior o igual al 99,9999 per cent) es va utilitzar com a gas portador a un cabal d'1 ml/min. Un total d'1 µL de la mostra diluïda (1:100 en n-hexà, p/p) es va injectar mitjançant un mostreig automàtic amb una proporció de divisió 1:20. Pel que fa a les condicions MS, es va utilitzar una línia de transferència de 240 ◦C, una font d'ions EI de 200 ◦C i 150 ◦C de temperatura de quadrupol, amb una energia d'ionització de 70 eV i 3,2 exploracions s-1 a m/z d'exploració. rang (de 30 a 480). Es va utilitzar el programari MSD ChemStation (Agilent, rev. E.01.00.237, Santa Clara, CA, EUA) per gestionar i elaborar cromatogrames i espectres de masses. Finalment, els compostos obtinguts es van identificar mitjançant la comparació de biblioteques NIST02 i Adams [37,38]. Els resultats es van contrastar encara més comparant l'índex de retenció experimental (RI) dels compostos amb les fases semipolars que RI va informar a la literatura. Els RI experimentals es van determinar mitjançant dues barreges estàndard de n-alcans com a referència (C8-C20 i C21-C40, respectivament) amb interpolació lineal [90]. Els percentatges dels components reportats es van calcular a les àrees màximes de GC sense correcció del factor de resposta FID.

4.3. Activitat antifúngica

Es van provar set soques de dermatòfits per a l'activitat antifúngica de S. aurea EO. Respectivament, es van obtenir tres soques clíniques de l'aïllament de les ungles i la pell: Epidermophyton floccosum FF9, Trichophyton mentagrophytes FF7 i Microsporum canis FF1. Mentre que les quatre soques de dermatòfits restants pertanyien a la Colección Española de Cultivos Tipo (CECT): T. mentagrophytes var. interdigital CECT 2958, T. rubrum CECT 2794, T. verrucosum CECT 2992 i M. gypseum CECT 2908. Totes les soques es van cultivar en agar dextrosa Sabouraud (SDA) o agar dextrosa patata (PDA) abans de cada prova per garantir la puresa i la viabilitat.

Les concentracions inhibidores mínimes (MIC) i la concentració mínima letal (MLC) d'EO es van realitzar segons les modificacions suggerides pel protocol CLSI per a la microdilució [91]. Breument, l'EO es va diluir en DMSO (5–0,32 µL/mL) i després es va afegir als tubs d'assaig estèrils. L'inòcul es va preparar ajustant la terbolesa a 0.5 McFarland i després es va diluir en RPMI-1640 sense glutamina i amb 3-(N-morfolino) àcid propà sulfònic (MOPS) pH 7.{ {10}} a una concentració d'1–2 × 104 CFU/mL, que després es va afegir als tubs d'assaig que contenien l'EO. Després es van incubar els tubs durant 7 dies a 30 ºC. Després, es va avaluar el creixement dels fongs dels tubs i la concentració més baixa on no es va observar creixement es va considerar la concentració inhibidora mínima (MIC). La concentració més baixa on no es va observar creixement després de xapar els tubs negatius en SDA durant 7 dies a 30 ºC es va considerar la concentració letal mínima (MLC). Es va utilitzar un compost antifúngic de referència, fluconazol (Pfizer), per controlar la sensibilitat dels microorganismes provats. Els resultats es van obtenir a partir de tres experiments independents realitzats per duplicat, i els resultats es van expressar com a mitjana. També es van incloure controls negatius i positius, representats per un medi no inoculat i un medi inoculat amb la concentració màxima de DMSO (1 per cent), respectivament.

4.4. Activitat antiinflamatòria

4.4.1. Cultiu cel·lular

La línia cel·lular RAW 264.7 del macròfag leucèmic del ratolí, que pertanyia a la col·lecció de cultiu de tipus americana (ATCC TIB-71), es va cultivar tal com va informar anteriorment el nostre grup [92].

4.4.2. Producció d'òxid nítric

La producció de NO es va avaluar avaluant la concentració de nitrats en sobrenedants de cultiu mitjançant el reactiu de Griess [93]. Les cèl·lules (0,6 × 106 cèl·lules/pou) es van cultivar en 48-plaques de cultiu de pous. Els macròfags es van estabilitzar durant la nit, després es van tractar prèviament durant 1 h amb EO (0,08-1,25 µL/mL) diluït en DMSO i posteriorment es van activar amb 50 ng/mL de LPS durant 24 h. Els macròfags estimulats per LPS i els macròfags no tractats es van utilitzar com a controls positius i negatius, respectivament. La reacció de Griess es va dur a terme tal com es va descriure anteriorment al nostre grup [92]. El nostre grup ja havia demostrat que el DMSO a la concentració més alta utilitzada (0,4 per cent) no tenia cap activitat antiinflamatòria o citotoxicitat (dades no mostrades).

4.4.3. Expressió de proteïnes proinflamatòries, iNOS i COX-2 

Les cèl·lules RAW 264,7 (1,2 × 106 cèl·lules/pou) es van cultivar en 6-plaques de pous i es van estabilitzar durant la nit. A continuació, aquestes cèl·lules es van sotmetre a 1 h d'incubació amb EO a una concentració d'1, 25 µL/mL, seguida de 24 h d'activació de LPS (50 ng/mL). Es va constituir un control negatiu de les cèl·lules no tractades i un control positiu només es va constituir per cèl·lules tractades amb LPS. La preparació de lisats cel·lulars va seguir el protocol realitzat prèviament per Zuzarte et al. [92]

El contingut inductible d'òxid nítric sintasa (iNOS) i ciclooxigenasa {{0}} (COX{-2) es va avaluar mitjançant l'anàlisi Western blot tal com es va descriure anteriorment [13]. Per a la separació de proteïnes, es va realitzar una prova electroforètica amb gels de poliacrilamida SDS al 10 per cent (v/v) a 130 V durant 1,5 h. En conseqüència, les línies de proteïnes es van borrar a membranes de fluorur de polivinilidè (prèviament activades amb metanol) a 400 mA durant 3 h. A continuació, es van incubar les membranes durant 1 h a temperatura ambient amb IgG no específiques amb llet desnatada al 5% (p/v) en TBS-T. Es van incubar durant la nit a 4 ◦C amb anticossos específics anti-iNOS (1:500; R + D Systems) o anti-COX-2 (1:5000; Abcam, Cambridge, Regne Unit) . Finalment, es van rentar durant 30 min amb TBS-T (10 min, 3 vegades) i es van incubar durant 1 h a temperatura ambient amb anticossos secundaris (1:40,000; Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX, EUA). ) conjugat amb peroxidasa de rave picant. La detecció d'immunocomplexes es va realitzar mitjançant un escàner de quimioluminescència (Image Quant LAS 500, GE, Boston, MA, EUA). Es van utilitzar anticossos contra la tubulina (1:20.000; Sigma, St. Louis, MO, EUA) com a control de càrrega. Es va utilitzar la versió 6.1.0 del programari ImageLab (Bio-Rad Laboratories Inc., Hercules, CA, EUA) per a la quantificació de proteïnes.

4.5. Migració cel·lular

La línia cel·lular de fibroblasts embrionaris de ratolí NIH 3T3 (ATCC CRL-1658) es va cultivar tal com es va descriure anteriorment a [6].

4.5.2. Assaig de migració cel·lular

La migració cel·lular es va dur a terme mitjançant l'assaig de ferides de rascada segons Martinotti et al. [94] amb lleugeres modificacions, com s'ha informat anteriorment [13]. Breument, els fibroblasts NIH 3T3 es van sembrar a 2, 5 × 105 cèl·lules/ml i es van deixar arribar a la confluència. Després, es va infligir la ferida amb una punta de pipeta de 200 µL i es van eliminar les cèl·lules no adherents rentant-se amb PBS pH 7,4. DMEM amb un 2 per cent de FBS amb o sense afegir l'EO (1,25 µL/mL). Les imatges es van adquirir a les 0, 12 i 18 h després del rascat mitjançant un microscopi de contrast de fase i es va mesurar l'àrea de la ferida mitjançant el programari ImageJ/Fiji. Els resultats presentats s'han obtingut mitjançant l'equació següent:

4.6. Viabilitat cel·lular

L'efecte de diferents concentracions d'EO sobre la viabilitat dels macròfags i fibroblasts es va avaluar mitjançant l'assaig de reducció de resazurina, tal com es va informar anteriorment [6].

4.7. Senescència induïda per etopòsids

La senescència es va avaluar utilitzant l'etopòsid com a inductor de senescència, tal com es va informar en altres llocs [95], amb algunes modificacions. Breument, després de 24 h d'etopòsid, les cèl·lules es van incubar més durant 72 h en presència o absència (TC) de S. aurea EO. La beta-galactosidasa es va avaluar mitjançant un kit disponible comercialment segons el protocol del fabricant (núm. 9860, Cell Signaling Technology Inc., Danvers, MA, EUA). La tinció de color blau diferent indica activitat beta-galactosidasa. Després del desenvolupament del color, els pous es van fotografiar per a la posterior anàlisi d'imatges. Es va utilitzar el programari ImageJ per a l'anàlisi quantitativa mitjançant l'avaluació del percentatge de cèl·lules senescents.

4.8. Anàlisi estadística 

Els experiments es van realitzar almenys per duplicat per a tres experiments independents. Els valors mitjans ± SEM (error estàndard de la mitjana) es presenten als resultats. La importància estadística dels assajos antiinflamatoris, de viabilitat cel·lular i de senescència es va avaluar mitjançant una anàlisi unidireccional de la variància (ANOVA) i la prova post hoc de Dunnett mitjançant GraphPad Prism versió 9.3.0 (GraphPad Software, San Diego, CA). , EUA). Tot i que la importància estadística dels assajos de migració cel·lular es va avaluar mitjançant ANOVA bidireccional seguida de proves de comparació múltiples de Sydák, els valors de p <0,05 es van acceptar com a significatius estadísticament.

5. Conclusions

Aquest treball reforça els efectes beneficiosos que se solen atribuir a Salvia spp. validant alguns dels usos tradicionals adscrits a S. aurea. A més, es va revelar una composició química singular amb 1,8 cineol, -pinè, cis-tujona, càmfora, (E)-cariofil·leno, trans-tujona, -pinè, canfeno i -humulè com a compostos principals. A continuació informem que l'EO exerceix efectes antifúngics, antiinflamatoris i de cicatrització de ferides, validant així els usos tradicionals associats a aquesta espècie per al tractament d'infeccions de la pell, malalties relacionades amb la inflamació i ferides.

A més, aquest estudi informa, per primera vegada, que aquesta espècie va poder exercir efectes antisenescència, promovent així encara més l'interès per aquesta espècie. Per tant, aquests resultats posen de manifest el paper de S. aurea en la mitigació de la inflamació i les infeccions associades a la pell, reforçant així l'interès per la dermocosmètica. Si bé aquest estudi ha demostrat que mitjançant el cultiu es pot promoure la producció de metabòlits d'alt valor amb activitats biològiques rellevants, és essencial una anàlisi química acurada de la planta cultivada, tenint en compte l'extrema variabilitat del perfil químic com a conseqüència de factors genètics i ambientals. (estrès, propietats del sòl, època de collita).

Contribucions de l'autor:LS i AM; validació, DM, EC, MJG, MTC i SP; anàlisi formal, JMA-S., MJG i AP; investigació, JMA-S., AM i AP; recursos, AM, MTC i LS; curació de dades, AP; redacció: preparació de l'esborrany original, EC, DM, JMA-S., AP i AM; redacció: revisió i edició, EC, DM, MTC, LS i AM; visualització, JMA-S.; supervisió, LS i AM; administració de projectes, LS; adquisició de finançament, LS i MTC Tots els autors han llegit i han acceptat la versió publicada del manuscrit.

Finançament: Aquest treball va ser finançat pel Programa Operatiu de Competitivitat i Internacionalització COMPETE 2020 i fons nacionals portuguesos a través de FCT—Fundação para a Ciência ea Tecnologia, en el marc dels projectes UIDB/04539/2020, UIDP/04539/2020 i LA/P/0058/ 2020.

Agraïments: Els autors agraeixen la valuosa contribució de Daniela Standen, The International Study and Language Institute (La Universitat de Reading, Regne Unit, d.standen@reading.ac.uk) pel suport tècnic.

Referències

1. Kaur, N.; Ahmed, T. Metabòlits secundaris bioactius de plantes medicinals i aromàtiques i les seves propietats contra les malalties. En Plantes Medicinals i Aromàtiques; Springer Nature: Basingstoke, Regne Unit, 2021; pàgines 113–142. ISBN 978-3-030-58974-5.

2. Pinto, E.; Pina-Vaz, C.; Salgueiro, L.; Gonçalves, MJ; Costa-De-Oliveira, S.; Cavaleiro, C.; Palmeira, A.; Rodrigues, A.; Martinez-De-Oliveira, J. Activitat antifúngica de l'oli essencial de Thymus pulegioides en espècies de Candida, Aspergillus i dermatòfits. J. Med. Microbiol. 2006, 55, 1367–1373. [Ref creuat]

3. Santos, EL; Freitas, PR; Araújo, ACJ; Almeida, RS; Tintino, SR; Paulo, CLR; Silva, ACA; Silva, LE; do Amaral, W.; Deschamps, C.; et al. Efecte antibacterià millorat dels antibiòtics per l'oli essencial d'Aloysia gratissima (Gillies & Hook.) Tronc. i el seu principal constituent beta-cariofil·leno. Phytomedicine Plus 2021, 1, 100100. [CrossRef]

4. Edris, AE Potencials farmacèutics i terapèutics dels olis essencials i els seus components volàtils: una revisió. Phytother. Res. 2007, 21, 308–323. [Ref creuat]

5. Ghorbani, A.; Esmaeilizadeh, M. Propietats farmacològiques de Salvia Officinalis i els seus components. J. Tradit. Complement. Med. 2017, 7, 433–440. [Ref creuat]

6. Piras, A.; Maccioni, A.; Falconieri, D.; Porcedda, S.; Gonçalves, MJ; Alves-Silva, JM; Silva, A.; Cruz, MT; Salgueiro, L.; Maxia, A. Composició química i activitat biològica de l'oli essencial de Teucrium sodium L. subsp. cardioides (Schreb.) Arcang. (Lamiaceae) de l'illa de Sardenya (Itàlia). Nat. Prod. Res. 2022, 36, 5828–5835. [Ref creuat]

7. Maccioni, A.; Falconieri, D.; Porcedda, S.; Piras, A.; Gonçalves, MJ; Alves-Silva, JM; Salgueiro, L.; Maxia, A. Activitat antifúngica i composició química de l'oli essencial de les parts aèries de dos nous quimiotips de Teucrium capitatum L. de l'illa de Sardenya, Itàlia. Nat. Prod. Res. 2020, 35, 6007–6013. [Ref creuat]

8. Piras, A.; Porcedda, S.; Falconieri, D.; Maxia, A.; Gonçalves, M.; Cavaleiro, C.; Gonc¸alves, MJ; Salgueiro, L. Activitat antifúngica de l'oli essencial de Mentha spicata L. i Mentha pulegium L. creixent silvestre a l'illa de Sardenya (Itàlia). Nat. Prod. Res. 2021, 35, 993–999. [Ref creuat]

9. Walker, JB; Sytsma, KJ Evolució estamental en el gènere Salvia (Lamiaceae): evidència filogenètica molecular de múltiples orígens de la palanca estaminal. Ann. Bot. 2007, 100, 375–391. [Ref creuat]

10. Waller, SB; Cleff, MB; Serra, EF; Silva, AL; dos Reis Gomes, A.; de Mello, JRB; de Faria, RO; Meireles, MCA Plantes de la família Lamiaceae com a font de molècules antifúngiques en medicina humana i veterinària. Microbi. Pathog. 2017, 104, 232–237. [Ref creuat]

11. Cocco, E.; Maccioni, D.; Sanjust, E.; Falconieri, D.; Farris, E.; Maxia, A. Etnofarmacobotànica i diversitat de plantes endèmiques mediterrànies a la subregió de Marmilla, Sardenya, Itàlia. Plantes 2022, 11, 3165. [CrossRef]

12. Afonso, AF; Pereira, OR; Fernandes, Â.; Calhelha, RC; Silva, AMS; Ferreira, RCF; Cardoso, SM Composició fitoquímica i efectes bioactius dels extractes aquosos de Salvia africana, Salvia Officinalis "Icterina" i Salvia mexicana. Molècules 2019, 24, 4327. [CrossRef]

13. Alves-Silva, JM; Cocco, E.; Piras, A.; Gonçalves, MJ; Silva, A.; Falconieri, D.; Porcedda, S.; Cruz, MT; Maxia, A.; Salgueiro, L. Desvetllant la composició química i les propietats biològiques de Salvia cacaliifolia Benth. oli essencial. Plantes 2023, 12, 359. [CrossRef]

14. Nkomo, MM; Katerere, DD; Vismer, HH; Cruz, TT; Balayssac, SS; Malet-Martino, MM; Makunga, NN Inhibició de Fusarium per poblacions salvatges de la planta medicinal Salvia africana-lutea L. vinculada al perfil metabolòmic. Complement BMC. Altern. Med. 2014, 14, 99. [CrossRef]

15. Codd, LE Flora of Southern Africa: Part. 4 Lamiaceae; Institut de Recerca Botànica: Pretòria, Sud-àfrica, 1985; Volum 28, ISBN 0621082686.

16. Makunga, NP; Van Staden, J. Un sistema eficient per a la producció de plántules clonals de la planta aromàtica d'importància medicinal: Salvia africana-lutea L. Plant Cell Tissue Organ Cult. 2007, 92, 63–72. [Ref creuat]

17. Aston Philander, L. Una etnobotànica de la medicina arbustiva de Western Cape Rasta. J. Etnofarmacol. 2011, 138, 578–594. [Ref creuat]

18. Watt, JM; Breyer-Brandwijk, MG Les plantes medicinals i verinoses de l'Àfrica meridional i oriental: ser un compte dels seus usos medicinals i altres, la composició química, els efectes farmacològics i la toxicologia en l'home i l'animal; E. & S. Livingstone: Edimburg, Regne Unit, 1962.

19. Gupta, AK; Cooper, EA Actualització en teràpia antifúngica de dermatofitosi. Mycopathologia 2008, 166, 353–367. [Ref creuat]

20. Matiz, C.; Friedlander, SF Infeccions i abscessos del teixit subcutani. A Principis i pràctica de les malalties infeccioses pediàtriques; Elsevier: Amsterdam, Països Baixos, 2012; pàgines 454–462.e2. [Ref creuat]

21. De Oliveira, CB; Vasconcellos, C.; Sakai-Valente, Nova York; Sotto, MN; Luiz, FG; Belda Júnior, W.; Sousa, M. da GT de; Benard, G.; Criado, PR Receptors Toll-like (TLR) 2 i 4 expressions de queratinòcits de pacients amb dermatofitosi localitzada i disseminada. Rev. Inst. Med. Trop. Sao Paulo 2015, 57, 57–61. [Ref creuat]

22. Celestrino, GA; Reis, APC; Criado, PR; Benard, G.; Sousa, MGT Trichophyton rubrum provoca respostes fagocítiques i proinflamatòries en monòcits humans mitjançant el receptor Toll-Like 2. Front. Microbiol. 2019, 10, 2589. [CrossRef]

23. Sol, S.-C. La via NF-B no canònica en la immunitat i la inflamació. Nat. Reverent Immunol. 2017, 17, 545–558. [Ref creuat]

24. Rao, KMK Mecanismes moleculars que regulen l'expressió inos en diversos tipus cel·lulars. J. Toxicol. Entorn. Health Part B 2000, 3, 27–58. [Ref creuat]

25. Minghetti, L. Ciclooxigenasa-2 (COX-2) en malalties cerebrals inflamatòries i degeneratives. J. Neuropathol. Exp. Neurol. 2004, 63, 901–910. [Ref creuat]

26. Sharma, A.; Gupta, S. Manifestació protectora dels herbonanocèutics com a antifúngics: un possible medicament candidat per a la infecció dermatofítica. Ciència de la Salut. Rep. 2022, 5, e775. [Ref creuat]

27. Guo, S.; DiPietro, LA Factors que afecten la cicatrització de ferides. J. Dent. Res. 2010, 89, 219–229. [Ref creuat]

28. Zuzarte, M.; Gonçalves, MJ; Cavaleiro, C.; Canhoto, J.; Vale-Silva, L.; Silva, MJ; Pinto, E.; Salgueiro, L. Composició química i activitat antifúngica dels olis essencials de Lavandula viridis LHér. J. Med. Microbiol. 2011, 60, 612–618. [Ref creuat]

29. Martínez-Rossi, NM; Bitencourt, TA; Peres, NTA; Lang, EAS; Gomes, EV; Quaresemin, NR; Martins, diputat; Lopes, L.; Rossi, A. Dermatophyte resistance to antifúngic drugs: Mechanisms and prospectus. Davant. Microbiol. 2018, 9, 1108. [CrossRef]

30. Mourad, A.; Perfecte, JR La guerra contra la criptococosi: una revisió de l'arsenal antifúngics. Mem. Inst. Oswaldo Cruz 2018, 113, 7. [CrossRef]

31. Vonkeman, HE; van de Laar, MAFJ Antiinflamatoris no esteroides: efectes adversos i la seva prevenció. Semin. Artritis Rheum. 2010, 39, 294–312. [Ref creuat]

32. Kamatou, GPP; van Zyl, RL; van Vuuren, SF; Figueiredo, AC; Barroso, JG; Pedro, LG; Viljoen, AM La variació estacional de la composició d'olis essencials, la toxicitat de l'oli i l'activitat biològica dels extractes de dissolvents de tres espècies de salvia sud-africana. S. Afr. J. Bot. 2008, 74, 230–237. [Ref creuat]

33. Kamatou, GPP; van Zyl, RL; van Vuuren, SF; Viljoen, AM; Figueiredo, AC; Barroso, JG; Pedro, LG; Tilney, PM; Barroso, JG Composició química, tipus de tricomes de fulles i activitats biològiques dels olis essencials de quatre espècies relacionades de Salvia indígenes del sud d'Àfrica. J. Essent. Oli Res. 2006, 18, 72–79. [Ref creuat]

34. Najar, B.; Mecacci, G.; Nardi, V.; Cervelli, C.; Nardoni, S.; Mancini, F.; Ebani, VV; Giannecchini, S.; Pistelli, L. Volàtils i activitat antifúngica-antibacteriana-antiviral de Sud-àfrica Salvia spp. olis essencials cultivats en condicions uniformes. Molècules 2021, 26, 2826. [CrossRef]

35. Cowling, RM; Rundel, PW; Lamont, BB; Arroyo, MK; Arianoutsou, M. Diversitat vegetal a les regions de clima mediterrani. Tendències Ecol. Evol. 1996, 11, 362–366. [Ref creuat]

36. Médail, F. Ecosistemes: Mediterrani. A Encyclopedia of Ecology, Volum 3; Elservier Inc.: Oxford, Regne Unit, 2008; Volum 5, pàgs. 2296–2308.

37. Adams, RP Identificació de components d'olis essencials per cromatografia de gasos/espectrometria de masses quadrupol, 4a ed.; Allured Publishing Corporation: Carol Stream, IL, EUA, 2007.

38. National Institute of Standards and Technology Mass Spectral Library (NIST/EPA/NIH).

39. Guijarro-Muñoz, I.; Compte, M.; Álvarez-Cienfuegos, A.; Álvarez-Vallina, L.; Sanz, L. El lipopolisacàrid activa la via de senyalització NF-κB mediada per Toll-like Receptor 4 (TLR4) i la resposta proinflamatòria en els pericits humans. J. Biol. Chem. 2014, 289, 2457–2468. [Ref creuat]

40. Manning, J.; Goldblatt, P. Plantes de la regió florística del Gran Cap. 1: The Core Cape Flora; Institut Nacional de Biodiversitat de Sud-àfrica: Pretòria, Sud-àfrica, 2012; ISBN 1919976744.

41. Lim Ah Tock, MJ; Kamatou, GPP; Combrinck, S.; Sandasi, M.; Viljoen, AM Una avaluació quimiomètrica de la variació d'olis essencials de tres espècies de Salvia autòctones de Sud-àfrica. Phytochemistry 2020, 172, 112249. [CrossRef]

42. Fokou, JBH; Dongmo, PMJ; Boyom, FF; Fokou, JBH; Dongmo, PMJ; Boyom, FF Composició química i propietats farmacològiques de l'oli essencial. En olis essencials: olis de la natura; El-Shemy, H., Ed.; IntechOpen: Londres, Regne Unit, 2020; pàgines 13–36. ISBN 978-1-78984-641-6.

43. Figueiredo, AC; Barroso, JG; Pedro, LG; Scheffer, JJC Factors que afecten la producció de metabòlits secundaris a les plantes: components volàtils i olis essencials. Sabor. Fragr. J. 2008, 23, 213–226. [Ref creuat]

44. van Vuuren, S.; Ramburrun, S.; Kamatou, G.; Viljoen, A. Olis essencials indígenes de Sud-àfrica com a potencials antimicrobians per tractar l'olor dels peus (bromodosi). S. Afr. J. Bot. 2019, 126, 354–361. [Ref creuat]

45. Scott, G.; Springfield, EP; Coldrey, N. Un estudi farmacognòstic de 26 espècies vegetals sud-africanes utilitzades com a medicines tradicionals. Farmàcia Biol. 2004, 42, 186–213. [Ref creuat]

46. ​​Oosthuizen, CB; Gasa, N.; Hamilton, CJ; Lall, N. Inhibició de la micotiol disulfur reductasa i del biofilm micobacterià per plantes sud-africanes seleccionades. S. Afr. J. Bot. 2019, 120, 291–297. [Ref creuat]

47. Alves, M.; Gonçalves, MJ; Zuzarte, M.; Alves-Silva, JM; Cavaleiro, C.; Cruz, MT; Salgueiro, L. Desvetllant el potencial antifúngic de dos olis essencials de farigola ibèrica: efecte sobre el tub germinal de C. albicans i biofilms realitzats. Davant. Pharmacol. 2019, 10, 446. [CrossRef]

48. Shukla, R.; Singh, P.; Prakash, B.; Dubey, NK Antifúngic, inhibició de l'aflatoxina i activitat antioxidant de l'oli essencial dolç de Callistemon lanceolatus (Sm.) i el seu component principal 1,8-cineol contra els aïllats de fongs de les llavors de cigrons. Food Control 2012, 25, 27–33. [Ref creuat]

49. Yu, D.; Wang, J.; Shao, X.; Xu, F.; Wang, H. Modes d'acció antifúngics de l'oli d'arbre de te i els seus dos components característics contra Botrytis cinerea. J. Appl. Microbiol. 2015, 119, 1253–1262. [Ref creuat]

50. Mòrcia, C.; Malnati, M.; Terzi, V. Activitat antifúngica in vitro de terpinè-4-ol, eugenol, carvona, 1,8-cineol (eucaliptol) i timol contra patògens vegetals micotoxigènics. Addició d'aliments. Contam. Part A 2011, 29, 415–422. [Ref creuat]

51. Kim, H.-M.; Kwon, H.; Kim, K.; Lee, S.-E. Activitats antifúngiques i antiaflatoxigèniques de 1,8-cineol i t-cinamaldehid sobre Aspergillus afflatus. Appl. Ciència. 2018, 8, 1655. [CrossRef]

52. da Silva, ACR; Lopes, PM; de Azevedo, MMB; Costa, DCM; Alviano, CS; Alviano, DS Activitats biològiques dels enantiòmers a-pinene i -pinene. Molècules 2012, 17, 6305–6316. [Ref creuat]

53. Jang, S.-K.; Lee, S.-Y.; Kim, S.-H.; Hong, C.-Y.; Park, M.-J.; Choi, I.-G. Activitats antifúngiques d'olis essencials de sis coníferes contra Aspergillus fumigatus. J. Korean Wood Sci. Tecnol. 2012, 40, 133–140. [Ref creuat]

54. de Macêdo Andrade, AC; Rosalen, PL; Freires, IA; Scotti, L.; Scotti, MT; Aquino, SG; de Castro, RD Activitat antifúngica, mode d'acció, predicció d'acoblament i efectes anti-biofilm d'enantiòmers (a més)- -pinè contra Candida spp. Curr. Superior. Med. Chem. 2018, 18, 2481–2490. [Ref creuat]

55. Shin, S. Activitats antifúngiques dels olis essencials de Glehnia littoralis sols i en combinació amb ketoconazol. Nat. Prod. Ciència. 2005, 11, 92–96.

56. Iraji, A.; Yazdanpanah, S.; Alizadeh, F.; Mirzamohammadi, S.; Ghasemi, Y.; Pakshir, K.; Yang, Y.; Zomorodian, K. Screening de les activitats antifúngiques dels monoterpens i els seus isòmers contra espècies de Candida. J. Appl. Microbiol. 2020, 129, 1541–1551. [Ref creuat]

57. Jaafar, M.; Mitri, S.; Na'was, T. Inhibició del creixement bacterià gramnegatiu i la formació de biofilm per alfa tujona. IOSR J. Pharm. Biol. Ciència. 2018, 13, 2. [CrossRef]

58. Teker, T.; Sefer, Ö.; Gazda ˘glı, A.; Yörük, E.; Varol, G.˙I.; Albayrak, G. -thujone presenta activitat antifúngica contra F. graminearum induint estrès oxidatiu, apoptosi, alteracions epigenètiques i reducció de la síntesi de toxines. Eur. J. Plant Pathol. 2021, 160, 611–622. [Ref creuat]

59. Huo, H.; Paio.; Cao, Y.; Liu, N.; Jia, P.; Kong, W. Activitat antifúngica de càmfora contra quatre fitopatogens de Fusarium. S. Afr. J. Bot. 2022, 148, 437–445. [Ref creuat]

60. Wu, K.; Lin, Y.; Chai, X.; Duan, X.; Zhao, X.; Chun, C. Mecanismes d'acció antibacteriana en fase de vapor de l'oli essencial de Cinnamomum camphora var. linaloofera Fujita contra Escherichia coli. Ciència de l'alimentació. Nutr. 2019, 7, 2546–2555. [Ref creuat]

61. Magiatis, P.; Skaltsounis, A.-L.; Chinou, I.; Haroutounian, SA Composició química i activitat antimicrobiana in vitro dels olis essencials de tres espècies d'Aquillea gregues. Z. Für Nat. C 2002, 57, 287–290. [CrossRef] [PubMed]

62. Dahham, S.; Tabana, Y.; Iqbal, M.; Ahamed, M.; Ezzat, M.; Majid, A.; Majid, A. Les propietats anticancerígenes, antioxidants i antimicrobianes del sesquiterpè-cariofil·lè de l'oli essencial d'Aquilaria crassna. Molècules 2015, 20, 11808–11829. [Ref creuat]

63. Pieri, FA; de Castro Souza, MC; Vermelho, LLR; Vermell, MLR; Perciano, PG; Vargas, FS; Borges, APB; da Veiga-Junior, VF; Moreira, MAS Ús de -cariofil·lè per combatre la formació de placa dental bacteriana en gossos. BMC Vet. Res. 2016, 12, 216. [CrossRef]

64. Goren, AC; Piozzi, F.; Akcicek, E.; Kılıç, T.; Çarıkçı, S.; Mozio ˘glu, E.; Setzer, WN Composició d'oli essencial de vint-i-dues espècies de Stachys (te de muntanya) i les seves activitats biològiques. Fitoquímica. Lett. 2011, 4, 448–453. [Ref creuat]

65. Yadav, N.; Chandra, H. Supressió de les respostes inflamatòries i d'infecció als macròfags pulmonars per l'oli d'eucaliptus i el seu constituent 1,8-cineol: paper dels receptors de reconeixement de patrons TREM-1 i NLRP3, el regulador de la MAP quinasa MKP{{5 }} i NFκB. PLoS ONE 2017, 12, e0188232. [Ref creuat]

66. Cervesa, AM; Zagorchev, P.; Filipova, DM; Lukanov, J. Efectes de 1,8-cineol sobre l'activitat de les isoformes de la ciclooxigenasa i la ciclooxigenasa 1 i la ciclooxigenasa 2. Nat. Prod. Chem. Res. 2017, 5, 1000253. [CrossRef]

67. Bastos, VPD; Gomes, AS; Lima, FJB; Brito, TS; Soares, PMG; Pinho, JPM; Silva, CS; Santos, AA; Souza, MHLP; Magalhães, PJC inhalat 1,8-cineol redueix els paràmetres inflamatoris a les vies respiratòries dels conillets d'índies amb problemes d'ovalbúmina. Bàsic. Clin. Pharmacol. Toxicol. 2011, 108, 34–39. [Ref creuat]

68. Juergens, LJ; Racké, K.; Tuleta, I.; Stoeber, M.; Juergens, UR Els efectes antiinflamatoris de l'1,8-cineol (eucaliptol) milloren els efectes dels glucocorticoides in vitro: un nou enfocament de la teràpia addicional d'estalvi d'esteroides per a la MPOC i l'asma? Sinèrgia 2017, 5, 1–8. [Ref creuat]

69. Santos, FA; Rao, VSN Efectes antiinflamatoris i antinociceptius de l'1,8-cineol, un òxid terpenoide present en molts olis essencials vegetals. Phytother. Res. 2000, 14, 240–244. [Ref creuat]

70. Mohammed, HA; Mohammed, SAA; Khan, O.; Ali, HM La pomada tòpica d'eucaliptol accelera la cicatrització de ferides i exerceix efectes antioxidants i antiinflamatoris en el model de cremada a la pell de rates. J. Oleo Sci. 2022, 71, es22214. [Ref creuat]

71. Juergens, UR; Dethlefsen, Estats Units; Steinkamp, ​​G.; Gillissen, A.; Repges, R.; Vetter, H. Activitat antiinflamatòria de l'1.8-cineol (eucaliptol) en l'asma bronquial: un assaig doble cec controlat amb placebo. Respir. Med. 2003, 97, 250–256. [Ref creuat]

72. Lima, PR; de Melo, TS; Carvalho, KMMB; de Oliveira, Í.B.; Arruda, BR; de Castro Brito, GA; Rao, VS; Santos, FA 1,8-cineol (eucaliptol) millora la pancreatitis aguda induïda per la ceruleïna mitjançant la modulació de citocines, l'estrès oxidatiu i l'activitat de NF-κB en ratolins. Ciència de la vida. 2013, 92, 1195–1201. [Ref creuat]

73. Coté, H.; Boucher, M.-A.; Pichette, A.; Legault, J. Activitats antiinflamatòries, antioxidants, antibiòtiques i citotòxiques de Tanacetum vulgare l. oli essencial i els seus components. Medicaments 2017, 4, 34. [CrossRef]

74. Rufino, AT; Ribeiro, M.; Judes, F.; Salgueiro, L.; Lopes, MC; Cavaleiro, C.; Mendes, AF Activitat antiinflamatòria i condroprotectora del ( més )- -pinè: selectivitat estructural i enantiomèrica. J. Nat. Prod. 2014, 77, 264–269. [Ref creuat]

75. Schepetkin, IA; Kushnarenko, SV; Özek, G.; Kirpotina, LN; Utegenova, GA; Kotukhov, YA; Danilova, AN; Özek, T.; Ba¸ser, KHC; Quinn, MT Inhibició de les respostes de neutròfils humans per l'oli essencial d'Artemisia kotuchovii i els seus components. J. Agric. Química dels Aliments. 2015, 63, 4999–5007. [Ref creuat]

76. dos Santos, E.; Leitão, MM; Aguero Ito, CN; Silva-Filho, SE; Arena, AC; de Souza Silva-Comar, FM; Nakamura Cuman, RK; Oliveira, RJ; Nazari Formagio, AS; Leite Kassuya, CA Efectes articulars analgèsics i antiinflamatoris d'oli essencial i càmfora aïllats de fulles d'Ocimum kilimandscharicum Gürke. J. Etnofarmacol. 2021, 269, 113697. [CrossRef]

77. Adhikari, A.; Bhandari, S.; Pandey, DP Compostos antiinflamatoris càmfora i metilsalicilat de la planta de curació del dolor utilitzada tradicionalment Equisetum arvense LJ Nepal Chem. Soc. 2019, 40, 1–4. [Ref creuat]

78. Silva-Filho, S.; de Souza Silva-Comar, F.; Wiirzler, L.; do Pinho, R.; Greenspan, R.; Bersani-Amado, C.; Cuman, R. Efecte de la càmfora sobre el comportament dels leucòcits in vitro i in vivo en la resposta inflamatòria aguda. Trop. J. Pharm. Res. 2015, 13, 2031. [CrossRef]

79. Cho, JY; Chang, H.-J.; Lee, S.-K.; Kim, H.-J.; Hwang, J.-K.; Chun, HS Millora de la colitis induïda per sulfat de dextrano de sodi en ratolins mitjançant l'administració oral de -cariofil·lè, un sesquiterpè. Ciència de la vida. 2007, 80, 932–939. [Ref creuat]

80. Gushiken, LFS; Beserra, FP; Hussni, MF; Gonzaga, MT; Ribeiro, VP; de Souza, PF; Campos, JCL; Massaro, TNC; Hussni, CA; Takahira, RK; et al. Beta-cariofil·leno com a activitat antioxidant, antiinflamatòria i de reepitelització en un model d'excisió de ferides de pell de rata. Òxid. Med. Longev cel·lular. 2022, 2022, 1–21. [Ref creuat]

81. Brito, LF; Oliveira, HBM; Neves Selis, N.; Souza, CLS; Júnior, MNS; Souza, EP; da Silva, LSC; Souza Nascimento, F.; Amorim, AT; Campos, GB; et al. Activitat antiinflamatòria de -cariofil·lè combinat amb àcid docosahexaenoic en un model de sèpsia induïda per Staphylococcus aureus en ratolins. J. Sci. Alimentació Agrícola. 2019, 99, 5870–5880. [Ref creuat]

82. Sousa, LFB; Oliveira, HBM; das Neves Selis, N.; Morbeck, LLB; Santos, TC; da Silva, LSC; Viana, JCS; Reis, MM; Sam pati, BA; Campos, GB; et al. -El cariofil·lè i l'àcid docosahexaenoic, aïllats o associats, tenen potencials efectes antinociceptius i antiinflamatoris in vitro i in vivo. Ciència. Rep. 2022, 12, 19199. [CrossRef]

83. Scandiffio, R.; Geddo, F.; Cottone, E.; Querio, G.; Antoniotti, S.; Gallo, MP; Maffei, ME; Bovolin, P. Efectes protectors de (e)- -cariofil·lè (bcp) en la inflamació crònica. Nutrients 2020, 12, 3273. [CrossRef]

84. Salas-Oropeza, J.; Jiménez-Estrada, M.; Pérez-Torres, A.; Castell-Rodriguez, AE; Becerril-Millan, R.; Rodríguez-Monroy, MA; Jarquin-Yañez, K.; Canales-Martinez, MM Activitat de cicatrització de ferides de -pinene i -felandrè. Molècules 2021, 26, 2488. [CrossRef]

85. Rocha Caldas, GF; da Silva Oliveira, AR; Araújo, AV; Lafayette, SSL; Albuquerque, GS; da Costa Silva-Neto, J.; Costa-Silva, JH; Ferreira, F.; da Costa, JGM; Wanderley, AG Mecanismes gastroprotectors del monoterpè 1,8-cineol (eucaliptol). PLoS ONE 2015, 10, e0134558. [Ref creuat]

86. Chabane, S.; Boudjelal, A.; Nàpols, E.; Benkhaled, A.; Ruberto, G. Composició fitoquímica, antioxidants i activitats de cicatrització de ferides de Teucrium polium subsp. capitatum (L.) Briq. oli essencial. J. Essent. Oli Res. 2021, 33, 143–151. [Ref creuat]

87. Tran, TA; Ho, MT; Cançó, YW; Cho, M.; Cho, SK Camphor indueix activitats proliferatives i antisenescència en fibroblasts dèrmics primaris humans i inhibeix la formació d'arrugues induïda pels UV a la pell del ratolí. Phytother. Res. 2015, 29, 1917–1925. [Ref creuat]

88. Rodenak-Kladniew, B.; Castro, A.; Stärkel, P.; Galle, M.; Crespo, R. 1,8-Cineole promou l'aturada del cicle cel·lular G{0/G1 i la senescència induïda per l'estrès oxidatiu a les cèl·lules HepG2 i sensibilitza les cèl·lules a fàrmacs antisenescència. Ciència de la vida. 2020, 243, 117271. [CrossRef]

89. Direcció per a la Qualitat dels Medicaments i Atenció Sanitària del Consell d'Europa. Farmacopea Europea; EDQM: Estrasburg, França, 2010; ISBN 978-92-871-6700-2.

90. Van den Dool, H.; Kratz, PD Una generalització del sistema d'índex de retenció que inclou cromatografia de partició gas-líquid programada a temperatura lineal. J. Cromatogr. 1963, 11, 463–471. [Ref creuat]

91. CLSI Clinical and Laboratory Standards Institute. Mètode de referència per a les proves de sensibilitat antifúngica de dilució de brou de fongs filamentosos. Document CLSI M38-A2, estàndard aprovat, 2a ed.; Clinical and Laboratory Standards Institute: Wayne, PA, EUA, 2008; Volum 28, ISBN 1-56238-668-9.

92. Zuzarte, M.; Alves-Silva, JM; Alves, M.; Cavaleiro, C.; Salgueiro, L.; Cruz, MT Nous coneixements sobre el potencial antiinflamatori i el perfil de seguretat dels olis essencials de Thymus carnosus i Thymus camphoratus i els seus principals compostos. J. Etnofarmacol. 2018, 225, 10–17. [Ref creuat]

93. Verd, LC; Wagner, DA; Glogowski, J.; Patró, PL; Wishnok, JS; Tannenbaum, SR Anàlisi de nitrats, nitrits i nitrats [15N] en fluids biològics. Anal. Bioquímica. 1982, 126, 131–138. [Ref creuat]

94. Martinotti, S.; Ranzato, E. Assaig de cicatrització de ferides per esgarrapada. In Epidermal Cells: Methods in Molecular Biology; Turksen, K., Ed.; Humana: Nova York, NY, EUA, 2019; Volum 2109, pàgs. 225–229. [Ref creuat]

95. Moreira, P.; Sousa, FJ; Matos, P.; Brites, GS; Gonçalves, MJ; Cavaleiro, C.; Figueirinha, A.; Salgueiro, L.; Batista, MT; Branco, PC; et al. Composició química i efecte contra les alteracions cutànies dels extractes bioactius obtinguts per la hidrodestil·lació de fulles d'Eucalyptus globulus. Farmacèutica 2022, 14, 561. [CrossRef]

【Per a més informació: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】