Les neurones de l'amígdala basolateral anterior comprenen un engrama de memòria de la por a distància, part 1

Introducció:

Els senyals ambientals amenaçadors sovint generen records de por duradors, però com es formen i s'emmagatzemen es continua investigant activament.

La memòria de la por és una forma de memòria al nostre cervell. És una forma de memòria molt especial que sovint ens fa sentir por, por i nerviosos. Però la relació entre aquest record de la por i la nostra memòria és molt complexa.

En primer lloc, els records de por no tenen res a veure amb la nostra memòria a curt termini. La majoria dels records de por s'emmagatzemen als nostres bancs de memòria a llarg termini. És per això que de vegades tenim records de temps enrere flotant a la nostra ment.

En segon lloc, els records de por no afecten necessàriament la nostra memòria. Tot i que pot provocar canvis en la nostra atenció i estat d'ànim, no hi ha proves que provoqui pèrdua de memòria. Moltes persones encara poden mostrar records molt forts després d'haver experimentat algunes coses terribles.

Finalment, no hem de permetre que els records temibles es converteixin en un tema de les nostres vides. Hem de prendre mesures positives per processar aquests records i avançar en una direcció més positiva. Això inclou rebre teràpia, ser socialment actiu, exercitar el cos i el cervell i mantenir una mentalitat positiva i una salut mental.

Per tant, tot i que els records de por ens poden causar molt estrès i malestar, hem de tenir fe en les nostres capacitats i esforços. Podem enfrontar-nos a aquests records temibles, enfortir la nostra memòria, créixer i ser persones millors i més segures. Es pot veure que hem de millorar la nostra memòria. Cistanche deserticola pot millorar significativament la memòria perquè Cistanche deserticola és un material medicinal tradicional xinès amb molts efectes únics, un dels quals és millorar la memòria. L'eficàcia de la carn picada prové dels diferents ingredients actius que conté, com ara àcid, polisacàrids, flavonoides, etc. Aquests ingredients poden promoure la salut del cervell de diverses maneres.

Feu clic a Coneix la memòria a curt termini com millorar

Es creu que el record d'una memòria de por recent reflecteix la reactivació de les neurones, en múltiples regions del cervell, activada durant la formació de la memòria, cosa que indica que els conjunts neuronals distribuïts anatòmicament i interconnectats inclouen engrames de memòria de por.

No obstant això, fins a quin punt els engrames de reactivació d'activació anatòmicament específics persisteixen durant la memòria de la por a llarg termini, roman en gran part sense explorar. Vam plantejar la hipòtesi que les neurones principals de l'amígdala basolateral anterior (BLA), que codifiquen la valència negativa, es reactiven de manera aguda durant la memòria remota de la por per impulsar el comportament de la por.

Mètodes:

Utilitzant descendència adulta de ratolins TRAP2 i Ai14, es va utilitzar tdTomatoexpression persistent per "TRAP" neurones aBLA que van patir l'activació de Fos durant el condicionament de la por contextual (descàrregues elèctriques) o el condicionament només del context (sense xocs) (n=5/grup) . Tres setmanes més tard, els ratolins es van tornar a exposar a les mateixes indicacions de context per a la memòria remota i després es van sacrificar per a la fosimmunohistoquímica.

Resultats:

Els conjunts neuronals TRAPed (tdTomato +), Fos + i reactivats (doble etiquetat) eren més grans per por que els ratolins condicionats pel context, amb la subregió mitjana i els quadrants dorsomedials mitjans/caudals d'aBLA mostrant les densitats més grans de les tres poblacions de conjunt.

Mentre que els conjunts de Tomato + eren predominantment glutamatèrgics en el context i els grups de por, el comportament de congelació durant la memòria remota no es va correlacionar amb la mida del conjunt de cap grup.

Debat:

Arribem a la conclusió que, tot i que un engrama de memòria de la por inclòs aBLA es forma i persisteix en un punt de temps remot, la plasticitat que afecta les respostes electrofisiològiques de les neurones de l'engram, no la seva mida de població, codifica la memòria de la por i impulsa les manifestacions conductuals de la memòria de la por a llarg termini.

Introducció

Els estímuls que provoquen la por sovint formen records associatius robusts i duradors que connecten senyals ambientals amb esdeveniments vitals amenaçadors.

Les trobades posteriors amb amenaces percebudes de manera semblant donen lloc a comportaments protectors més robusts, que reflecteixen el record de la por. Els errors en el processament de l'associació de la por poden produir resultats psiquiàtrics de valència negativa, com ara l'ansietat i el trastorn per estrès postraumàtic (TEPT) (Tovote et al., 2015).

Entendre tota la complexitat dels mecanismes subjacents a la memòria de la por és essencial per identificar anomalies del circuit funcional que promouen malalties psiquiàtriques relacionades amb la por i suggereixen nous objectius terapèutics per restaurar el processament normal de la por.

Durant les últimes dècades, la investigació sobre la memòria de la por s'ha centrat en gran mesura en la formació, l'emmagatzematge i el record de la memòria a curt termini (Kimand Jung, 2006; Kim i Cho, 2020; Lee et al., 2021).

Els estudis han implicat conjunts neuronals del SNC interconnectats àmpliament distribuïts com a responsables de la formació i l'emmagatzematge de la memòria de la por (Ramirez et al., 2013; Liu et al., 2014; Roy et al., 2022). L'activació d'aquests conjunts per amenaces percebudes dóna lloc a una transmissió sinàptica potenciada que representa una empremta física persistent coneguda com a engrama de memòria (Yuan et al., 2011; Miyawaki i Mizuseki, 2022).

Es creu que la memòria a curt termini reflecteix la reactivació dels mateixos conjunts neuronals que es van activar originalment durant la formació de la memòria, amb proves que indiquen que fins i tot l'activació parcial d'un únic conjunt neuronal pot provocar comportaments relacionats amb la por, indicatiu de la memòria (Roy et al., 2022). ). Tot i que els engrames de circuits potenciats estanatòmicament estables poden explicar la memòria de la por a curt termini, encara no està clar fins a quin punt participen en la memòria de la por a llarg termini.

Tot i que es creu que la consolidació de la memòria de la por a llarg termini depèn del reforç progressiu o esporàdic de la memòria a curt termini, diversos estudis recents suggereixen que els conjunts neuronals de la memòria de la por a curt termini pateixen una organització dependent del temps, donant lloc a la migració de la memòria emmagatzemada a un conjunt neuronal diferent, ja sigui dins la mateixa regió cerebral (DeNardo et al., 2019) o regions cerebrals diferents en conjunt (Frankland i Bontempi, 2005; Do Monte et al., 2016).

L'amígdala basolateral (BLA) és una regió cerebral integral a la memòria de la por i s'ha implicat tant en la memòria de la por recent com remota (Maren et al., 1996; Gale et al., 2004; Kitamura et al., 2017; Liu et al., 2017; ., 2022).

En particular, els informes han descrit un engrama específic de memòria de por a curt termini al BLA que (1) s'activa durant la formació de la memòria, (2) es reactiva durant la recuperació de la memòria i (3) és capaç de conduir comportaments semblants a la por en contextos sense por ( Royet al., 2022; Zaki et al., 2022). Tanmateix, fins a quin punt el conjunt neuronal aBLA activat durant la formació de la memòria es reactiva durant la recuperació remota de la memòria no s'ha resolt.

En aquest estudi, vam provar la hipòtesi que la reactivació d'un conjunt de memòria BLAfear s'observa en un moment remot 3 setmanes després del condicionament de la por. D'especial importància, els circuits domèstics BLA contribueixen tant al comportament aversió com a la recerca de recompenses (Hu, 2016), amb neurones de valència negativa que responen als estímuls de por localitzats específicament al BLA anterior (aBLA) (Goosensand Maren, 2001; Kim et al., 2016, 2017; Zhang et al., 2020).

Centrant-nos en l'aBLA, vam emprar ratolins transgènics de segona generació TargetedRecombination in Activated Populations (TRAP2) (DeNardo et al., 2019), en els quals l'activitat de Cre-recombinasa està lligada a elements potenciadors immediats del promotor gènic primerenc de c-fos mitjançant un Cre millorat. - Complex del receptor d'estrògens (RE). Les neurones que expressen aquest complex poden experimentar una recombinació persistent de Cre, és a dir, pot ser "TRAPED", mitjançant l'administració de l'agonistamoxifè ER o el seu anàleg d'acció més curta 4-hidroxitamoxifè (4-OHT), permetent l'expressió persistent de Cre. -Molècules reporters efectores dependents.

Aquí, vam creuar ratolins TRAP2 i la línia de reporters tdTomato dependents de Cre Ai14 (Madisen et al., 2010) i vam quantificar fins a quin punt les neurones aBLA TRAPed (tdTomatopositive) durant el condicionament de la por contextual es reactiven (expressa la proteïna immunoreactiva Fos) durant la memòria remota. 3 setmanes després.

Igual que en la memòria de la por a curt termini, els nostres resultats donen suport a la presència de conjunts neuronals de memòria de por glutamatèrgica a llarg termini a l'aBLA.

No obstant això, destaca que la mida dels conjunts neuronals aBLA, ja sigui activat durant el condicionament o la memòria remota o ambdues coses, no es va correlacionar amb el comportament de la por, cosa que indica que la naturalesa de la plasticitat associada a l'aprenentatge de la por i el seu impacte final en la memòria de la por remota recorden les respostes electrofisiològiques associades de les neurones del conjunt. , no la mida de la població conjunta, impulsa principalment el comportament remot de la memòria de la por.

Materials i mètodes

Aprovació ètica

Els procediments experimentals van ser aprovats pel Comitè Institucional de Cura i Ús d'Animals de la Universitat de Texas Health SanAntonio i s'ajustaren a la Guia del National Research Council per a la cura i l'ús d'animals de laboratori.

Els animals

Parelles reproductores de ratolins homozigots Fos2A−iCreER/2A−iCreER knockin (TRAP2, #030323) i R26Ai14/+ (Ai14, #007914) (Jackson Laboratories) es van creuar per produir hemizygousTRAP2:Ai14Ai14Figura masculina. Després del deslletament, els ratolins es van agrupar i es van allotjar en gàbies de plàstic (29 × 18 × 13 cm) que contenien roba de llit de rosegadors (Sani-chips; Harlan Teklad, Madison, WI, EUA). :10 h cicle llum-foscor (llums encesos a les 0600 h). El menjar i l'aigua estaven disponibles ad libitum. Els experiments es van iniciar quan els ratolins van arribar als 3 mesos d'edat.

Habitació conductual

Com en estudis publicats anteriorment (DeNardo et al., 2019), els ratolins es van sotmetre a cinc dies consecutius d'entrenament d'habituació immediatament abans del condicionament de la por contextual per minimitzar la inducció de CFO en resposta a condicions experimentals que no s'estan investigant (per exemple, manipulació, exploració de context nou, etc.) ( Figura 1B).

Cada sessió d'habituació diària va durar 3 minuts i va consistir en l'exposició a la cambra de condicionament (HabitestModular System, Coulbourn Instruments). Els senyals sensorials de la cambra consistien en (1) etanol al 70% (indicació olfactiva), (2) terra de reixeta metàl·lica (indicació hàptica), (3) fons estampat (indicació visual) i (4) llum visible (indicació visual).

A més, tots els ratolins es van portar a mà durant un minut abans de col·locar-los a la cambra de condicionament i es van "fregar" suaument durant 10 segons en sortir de la cambra. Les sessions d'habituació es van dissenyar per imitar la manipulació que experimentarien els ratolins el dia del condicionament, excepte que no es van realitzar injeccions intraperitoneals (IP).

Condicionament contextual de la por

A continuació, els ratolins es van assignar aleatòriament a grups condicionats per la por (xoc) i condicionats pel context (sense xoc/només context). El condicionament va començar el dia 0 i va consistir en que els ratolins es col·locaven a la cambra de condicionament i es deixaven explorar durant 2 anys. min. Durant els 4 minuts posteriors, els ratolins condicionats per la por van rebre una sèrie de xocs de cinc peus d'1 s de durada i una intensitat de 0,75 mA.

Els xocs es van lliurar als ratolins a intervals impredictibles, però coherents entre els ratolins. Els ratolins condicionats per context es van sotmetre a un protocol idèntic excloent els cops de peus (figura 1C). En acabar la tasca, cada ratolí va rebre una injecció d'{3}}hidroxitamoxifè (4-OHT, 100 mg/kg, IP) dissolt en un còctel 4:1 d'oli de gira-sol i ricí preparat tal com s'ha descrit anteriorment (DeNardo et al., 2019).

Aleshores, els ratolins van ser retornats a les gàbies de casa on es van deixar tranquils a l'habitació adjacent a la suite de comportament durant almenys 72 hores abans de reprendre l'habitatge normal.

Tres setmanes després del condicionament de la por (dia 21), els ratolins es van sotmetre a proves de memòria remota (figura 1D) que consistien en la reexposició a la cambra de prova amb indicis sensorials idèntics als presents durant el condicionament. Es va permetre als ratolins explorar la cambra durant 5 minuts durant els quals es va puntuar el comportament de la por (congelació postural) mitjançant el programari de seguiment de vídeo FreezeFrame 4 (ActiMetrics, Wilmette IL, EUA).

Fixació cerebral i histologia

Noranta minuts després de les proves de memòria, els ratolins van ser anestesiats profundament amb isoflurà (5% en oxigen) i després van ser sotmesos a perfusió transcàrdica amb 30 ml de solució salina isotònica heparinitzada (100 U/ml) seguit de 100 ml de paraformaldehid al 4% (PFA). ) en tampó fosfat 0,1 M.

Es van eliminar els cervells, es van fixar posteriorment en PFA al 4% durant 6 h a temperatura ambient (~ 22 ◦ C) i es van crioprotegir en sacarosa al 30% -0, 01 M tampó fosfat salí (PBS) durant almenys 2 dies.

A continuació, es van tallar els cervells en seccions coronals de 30 µm de gruix en un micròtom de congelació (Leica Microsystems, Wetzlar, Alemanya) i les seccions que contenien l'aBLA (Paxinos i Franklin, 2019), es van emmagatzemar en un crioprotector de polivinilpirrolidona (PVP) a -20 ◦ C.

Immunohistoquímica

La immunotinció es va realitzar tal com es va descriure anteriorment (Mitchell et al., 2018; Maruyama et al., 2019).

Breument, es van rentar les seccions en PBS per eliminar el crioprotector de PVP i es van incubar durant 3 0 min en PBS que contenia borohidrur de sodi (0, 5%) per eliminar els aldehids autofluorescents generats durant la fixació. Després de rentats addicionals de PBS, les seccions es van incubar en tampó de bloqueig (3% sèrum de cabra, 0, 05% Triton-X-100 en PBS) durant 2 h a ∼22◦C seguit d'incubació a 4◦C en tampó de bloqueig que contenia conill apoliclonal c. - Anticòs primari Fos (Ab) durant 72 h (1:1.500, sistemes sinàptics #226 003) o Ab primary CaMKII de ratolí monoclonal durant 24 h (1:500, Enzo Life Sciences, #ADI-KAM-CA002).

Després d'un rentat addicional, les seccions de Fos i CaMKII es van incubar per separat durant 2 h a ∼22◦C en Ab secundari anti-conill de cabra biotinilada (1:250 EMD Millipore #AP132B) seguit d'un rentat en sèrie a 0. Solució salina tamponada amb tris 05 M (TBS) i acetat de sodi 0,1 M després exposats a estreptavidina-Alexa Fluor 488 (1:250, Invitrogen # S11223) durant 1 h en solució de bloqueig basada en TBS.

Finalment, es van rentar les seccions al tampó Tris i es van muntar en diapositives amb Fluoromount-G (Invitrogen, #00-4958-02).

Imatge i anàlisi

Es va utilitzar un tub fotomultiplicador de bits A{{{0}}bit connectat amb un microscopi confocal d'exploració làser Zeiss LSM710, equipat amb línies làser adequades, per capturar imatges aBLA mitjançant un objectiu de 20 × (NA 0,8) i una mida de forat de capçal d'escaneig de 47,5 µm. Per a cada imatge, es va utilitzar el programari ImageJ (NIH, Bethesda, MD) per generar mapes de píxels separats de fluorescència tdTomato (és a dir, TRAPed, vermell) i Alexa-488(Fos, verd).

La intensitat del llindar de píxels i la detecció de superposició de longituds d'ona per a l'etiquetatge dual es van determinar comparant seccions de teixit processades amb i sense Ab primari de Fo tal com es va descriure anteriorment (Mitchell et al., 2018; Maruyama et al., 2019). Les dades de recompte de cèl·lules i co-localització es van obtenir utilitzant Aquest connector ImageJ semiautònom EzColocalization (Stauffer et al., 2018).

Les imatges de l'aBLA es van dividir en tres subregions rostro-caudals de mida gairebé igual, amb cada subregió definida per un rang específic de coordenades estereotàxiques rostral-caudals relatives al tobregma: rostral, −0,8 a −1,1 mm; mig, −1,2 a −1,5 mm; i caudal, de −1,6 a −1,9 mm (Paxinos i Franklin, 2019). A continuació, es va utilitzar el gestor de la regió d'interès (ROI) a ImageJ per dividir l'aBLA al llarg dels seus quadrants dorsal-ventral i medial-lateral en relació al seu perímetre. Aquesta plantilla es va aplicar posteriorment a totes les imatges dins de cada subregió rostral-caudal especificada.

La demarcació aBLAperimeter es va utilitzar amb el connector ImageJ EzColocalizationper generar una gràfica espacial 2-D de tots els recomptes neuronals a cada imatge. Aleshores es van superposar per separat les trames espacials dins de les subregions rostral, mitjana i caudal. Això va donar lloc a 10 trames de por i 10 de context per a la subregió rostral, 10 de por i 13 de context per a la subregió mitjana i 12 de por i 13 de context per a la subregió caudal.

Per corregir un nombre més gran de trames d'imatge de subregions al grup de context, factors de correcció d'1.0(1{0/1{0), 0,77 (10/13) i 0,92 (12/13) es van aplicar, respectivament, a les parcel·les de la subregió rostral, mitjana i caudal del grup context. Per evitar esbiaixar la distribució topogràfica dels recomptes a les dades del context, es va utilitzar un generador de nombres aleatoris a MS Excel per identificar quins recomptes específics s'havien d'excloure de cada subregió aBLA.

A continuació, vam dividir encara més les subregions aBLA en quadrants, designats 1-4 (vegeu la figura 2D). Per fer-ho, la coordenada d'intersecció (0,0) es va determinar en MS-Excel com el punt del pla2-D en què l'àrea de cada quadrant era aproximadament igual a una quarta part. de la superfície total de cada subregió rostral-caudal. Els eixos del quadrant i les coordenades xy de cada recompte es van determinar i es van girar 30◦ en el sentit de les agulles del rellotge, alineant-los així amb l'eix anatòmic de l'aBLA.

Per tenir en compte les petites variacions en la mida de les subregions i els seus quadrants, les dades de recompte es van normalitzar a la superfície (recomptes/mm2) de manera que els valors reportats representin la densitat dels recomptes per subregió o quadrant.

Per avaluar el fenotip excitatori de les neurones capturades pel nostre sistema TRAP2, es va quantificar la co-localització de tdTomatoexpression condicionada amb TRAPed amb proteïna quinasa II dependent de calci-calmodulina (CaMKII), un marcador establert de neurones glutamatèrgiques (McDonald et al., 2002). imatges d'almenys tres seccions aBLA per ratolí mitjançant el connector del comptador de cèl·lules ImageJ.

Estadístiques

Les proves estadístiques es van realitzar amb el programari Prism 9.5.1 (GraphPad, San Diego, CA, EUA) i van incloure proves per a la distribució normal de tots els conjunts de dades mitjançant una prova de Shapiro-Wilk. proves t o per ANOVA de dues o tres vies seguit de la prova de comparació múltiple de Sidak i Tukey, respectivament, per a comparacions per parelles després d'interaccions ANOVA significatives.

Es va realitzar una anàlisi de correlació dins del grup per determinar el coeficient r de Pearson i el valor P corresponent. Les correlacions es van comparar entre grups mitjançant la transformació Z de Fisher (taula suplementària 1). Les dades del grup s'expressen com a mitjana ± SEM. La significació estadística es va establir a P <0.05.

Resultats

El condicionament de la por indueix un engrama de memòria por remota

Per establir fins a quin punt les neurones aBLA activades durant la formació de la memòria de la por es reactiven durant la memòria remota, els ratolins van patir un condicionament de por (n=5) o de context (n=5) seguit de la injecció de 4-OHT (Figures 1A-C).

Examinant la formació de la memòria de la por (és a dir, l'aprenentatge de la por), es va observar una interacció significativa entre el tractament (xoc vs. sense xoc) i el temps (interval de 30 s després de cada xoc) en el comportament de congelació [ANOVA bidireccional, F(5, 40)=6.733, P=0.0001]. Els ratolins condicionats per la por van mostrar un augment del temps de congelació respecte a la línia de base després del xoc 3 (275 ± 68% de BL, P=0,0203), 4 (486 ± 76% de BL, P <0,0001) i 5 (402 ± 26). % de BL, P <0,0001) i en relació amb els ratolins condicionats per context després del xoc 4 (251 ± 38% del context, p <0,0001) i 5 (375 ± 25% del context, p <0,0001).

Com era d'esperar, la reexposició a la cambra de condicionament per a la recuperació de la memòria remota el dia 21, després del condicionament, va revelar que els ratolins condicionats per la por mostraven molt més temps de congelació en comparació amb els controls de context[346 ± 18%, prova t no aparellada, t(8) {{7} }.16, P <0.0001] (Figura 1D).
Col·lectivament, les dades de la figura 1 indiquen que el nostre protocol de condicionament de la por va provocar una formació robusta de memòria de la por i un record remot de la memòria de la por.

L'aprenentatge de la por indueix un aBLA robust específic per a la subregió per al conjunt

L'anàlisi dels recomptes de TRAPed (tdTomato +) va revelar una població aBLA activada per fos significativament més gran en ratolins condicionats per la por (110 ± 6,2) que en ratolins condicionats pel context (77 ± 3,1) [prova t no aparellada, t (8)=4 .782, P=0.0014] (Taula 1). Com era d'esperar, el ∼70% de les neurones contextualitzades i el 80% de les neurones TRAPED per la por (n=6 aBLAsections/grup) eren CaMKII + (figures suplementàries 1A, B), cosa que indica que eren principalment neurones de projecció glutamatèrgica.

De manera similar als informes anteriors (Kim et al., 2016), vam dividir l'aBLA en tres subregions rostrocaudals: rostral, mitjana i caudal (figures 2A-C) i vam comparar les densitats de recompte de TRAPed (recomptes/mm2) entre subregions dins i entre grups de tractament (figura 2D). L'ANOVA bidireccional va revelar una interacció significativa entre la subregió i el tractament [F(2,24)=7.7099,P=0.0038].

Les anàlisis dins del grup van revelar que la densitat de TRAPed era més gran a la subregió mitjana aBLA en grups de por (239 ± 9) i context (144 ± 12) en relació amb el rostral (por: 86 ± 6,P <{{ {8}}.0001; context: 81 ± 9, P=0,0035) i caudal (por: 123 ± 15, P <0,0001; context: 90 ± 12, P {{20) }}.0132) subregions.

L'anàlisi entre grups va revelar que la densitat de recompte de TRAPed era significativament més gran a la subregió mitjana dels ratolins condicionats per la por (P <{3}}.0001).

Per delimitar encara més la ubicació de les neurones TRAPed, hem subdividit les subregions aBLA rostral, mitjana i caudal en quatre quadrants cadascuna (figura 2E). A la subregió mitjana, es va observar un efecte de tractament principal sobre la densitat del recompte [ANOVA de tres vies, F(1,32)=17.44, P=0.0002] amb major densitat de TRAPedcount a la por que el grup de context als quadrants 3 (218 ± 29 vs. 107 ± 17, P=0,0031) i 4 (240 ± 16 vs.101 ± 12, P <0,0001).

També vam avaluar les densitats de recompte de TRAPed dins del grup i dins del quadrant a les subregions d'aBLA (figura 2E i taula suplementària 2). Notablement, en comparació amb la subregió rostral (59 ± 8), el quadrant 2 del grup de por tenia una densitat TRAPed més alta tant al centre (245 ± 21, P <0.0001) com al caudal (172 ± 23, P=0.0040) subregió.

A continuació, es va avaluar la relació entre el comportament de congelació i la mida del conjunt neuronal TRAPed a tot l'aBLA, a la seva subregió mitjana i als quadrants de les subregions mitjanes i caudals on les densitats de recompte de conjunts diferien entre el context i els grups condicionats per la por. No es van observar correlacions significatives ni en el grup de por ni en el context (figura 2F), cosa que suggereix que el comportament de la por no reflecteix la mida del conjunt d'aprenentatge de la por a les subregions aBLA.

Col·lectivament, els resultats de la figura 2 indiquen que el condicionament de la por va donar lloc a un conjunt fos més gran a l'aBLA que el condicionament del context. Les neurones del conjunt estaven més densament localitzades a la subregió aBLA mitjana, però el comportament de la por no es correlacionava amb la mida de la població del conjunt.

For more information:1950477648nn@gmail.com