Activitat antinociceptiva i antiinflamatòria causada per Cistanche Deserticola en rosegadors

Contacte:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Li-Wei Lin, et al

Resum

En el present estudi, els rizomes deCistanchedeserticola(Orobanchaceae, abreujat com a CD) es van extreure amb etanol al 50 per cent i es van aïllar ordenadament amb acetat d'etil, n-butanol i aigua. L'analgèsic ianti-inflamatòriaes van avaluar els efectes de l'extracte de CD i tres capes en diversos models animals. CD(Cistanchedeserticola)Els extractes van inhibir eficaçment la resposta de retorçament induïda per l'1 per cent d'àcid acètic i les respostes de llepada bifàsiques causades per l'1 per cent de formalina, i també van reduir l'edema induït per l'1 per cent de carragenina però no de zimosà. A més, les capes butanoica i aquosa de CD(Cistanchedeserticola)L'extracte no només va reduir el dolor induït per l'àcid acètic i la formalina, sinó que també va reduir l'edema induït per la carragenina. Efectes de la capa butanoica de CD(Cistanchedeserticola)extracte són millors que els de la capa aquosa. A més, l'efecte de la capa butanoica de CD(Cistanchedeserticola)extracte no va ser abolit per la naloxona. Aquests resultats van revelar que té analgèsic ianti-inflamatòriaefectes, i les capes butanoica i aquosa són principalment constituents actius. A més, l'analgèsic ianti-inflamatòriaefectes de la capa butanoica de CD(Cistanchedeserticola)L'extracte no estaven relacionats amb els receptors opioides i el sistema immunitari.

Paraules clau:Cistanche deserticola; Activitat analgèsica; Activitat antiinflamatòria

1. Introducció

CistanchedeserticolaMa. (Orobanchaceae, abreujat com a CD), una herba autòctona a la Xina s'utilitza àmpliament en la medicina tradicional per a diversos tractaments terapèutics, com ara sedants, analgèsics i indicacions que milloren el sistema immunitari (Lee, 1986). Els estudis farmacològics moderns van assenyalar CD(Cistanchedeserticola)L'extracte posseïa una millora immune (Chin i Su, 1993), efecte eliminador de radicals lliures (Hsu et al., 1995) i l'augment de l'activitat SOD (Chang et al., 1995). En un estudi recent, la reacció dels radicals lliures va tenir un paper important en els processos inflamatoris (Arrigoni-Martelli, 1985). Per tant, el present estudi es va intentar investigar els efectes analgèsics putatius de la CD(Cistanchedeserticola)extracte en ratolins amb prova de contorsió induïda per àcid acètic (Taber et al., 1969) i prova de llepada induïda per formalina (Shibata et al., 1989). En segon lloc, també hem estudiat el possibleanti-inflamatòriaactivitats de CD(Cistanchedeserticola)extracte del procés inflamatori clàssic amb prova d'edema induïda per carragenina (Winter et al., 1962) i procés inflamatori alternatiu amb prova d'edema induïda per zimosà (Tarayre et al., 1989). Finalment, vam investigar capes actives d'extracte de CD separades amb diferents dissolvents. '

2. Materials i mètodes

2.1. Material vegetal i extractes

Rizomes de CD(Cistanchedeserticola)van ser comprats al mercat de Taiwan i confirmats pel professor MT Hsieh. Es va conservar una mostra de val (núm. CMC-ICPS-000626) a l'herbari de l'Institut de Ciències Farmacèutiques de la Xina de la Facultat de Medicina de la Xina per a una futura referència. Extracció i aïllament de CD(Cistanchedeserticola)es van seguir com els informes anteriors (Lu, 1998). CD(Cistanchedeserticola)extracte (el rendiment en 34,2 per cent) i tres capes*/capa d'acetat d'etil, capa butanòlica i capa aquosa (els seus rendiments en 3,4, 10,2, 30,6 per cent) (abreujats com a CDE, CDB i CDW, respectivament)* / es van utilitzar per la preparació d'extractes.

2.2. Preparació d'extractes i fàrmacs

CD(Cistanchedeserticola)extracte ({{0}},1, 0,3, 1 g/kg) i tres capes de CD(Cistanchedeserticola)extractes ({{0}}.03, 0.1, 0.3 g/kg) es van dissoldre en un 0,5 per cent de carboximetilcel·lulosa i es van administrar per via oral 60 minuts abans a la injecció d'un inductor. L'àcid acetilsalicílic (ASA) (100, 300 mg/kg) i la indometacina (IN DOL) (10 mg/kg) es van preparar com a suspensió amb un 0,5 per cent de carboximetilcel·lulosa i es van administrar per via intraperitoneal abans de la injecció d'un inductor. La naloxona (1 mg/kg) es va dissoldre amb solució salina normal.

2.3. Animals

Per a l'estudi es van utilitzar rates Sprague-Dawley mascles (200-250 g).anti-inflamatòriaactivitats. Es van utilitzar ratolins ICR mascles (20-25 g) per provar els efectes analgèsics. Tots els animals es van utilitzar en els experiments d'acord amb els Principis rectors amb la cura i l'ús d'animals de laboratori. Van estar allotjats durant almenys 1 setmana abans d'iniciar l'experiment en un entorn regulat amb una temperatura de 239/1 8C i un 60% d'humitat amb accés gratuït a aliments estàndard en pellets (subministrat i dissenyat per Fwusow Industry Co. LTD., Taiwan). ) i aigua de l'aixeta, on es va mantenir un cicle llum/fosc de 12-12 h (fase clar: 08:00-20:00 h). Després, es van administrar fàrmacs i l'analgèsic ianti-inflamatòriaEls assajos es van fer amb el mètode de doble cec. Després de la mesura del comportament, tots els animals van ser assassinats pel diòxid de carboni.

2.4. Estudi antinociceptiu

2.4.1. Resposta de retorsió abdominal induïda per àcid acètic en ratolins

Els ratolins es van dividir aleatòriament en diversos grups. A cada ratolí se li va administrar intraperitonealment una solució d'àcid acètic a l'1 per cent (10 ml/kg de pes corporal). Els ratolins es van col·locar a les caixes d'observació individuals. Els símptomes de la contorsió abdominal induïda per l'àcid acètic eren similars als descrits per Taber et al. (1969). Els animals de control van rebre solucions de vehicles en els mateixos experiments. Cinc minuts després de la injecció d'àcid acètic, es va comptar el nombre de respostes de retorçament per ratolí durant 10 minuts durant la retorsió abdominal induïda per l'àcid acètic. Finalment, el nombre de respostes contorsionades ens va permetre expressar el percentatge de protecció utilitzant la relació següent: (mitjana tractada amb la mitjana de control) /100/ mitjana de control.

2.4.2. Resposta de llepada induïda per formalina en ratolins

Aquest mètode va representar una modificació del descrit per Shibata et al. (1989). Cada ratolí es va col·locar a la cambra d'observació en un sòl de placa transparent acrílic durant 5 minuts abans de la injecció de formalina. Sota el terra, un gran mirall estava inclinat en un angle de 458 per tal de permetre una observació clara de les potes de l'animal. Als animals se'ls va administrar 25 ml de formalina a l'1 per cent al subplantar dret. Després, cada animal va ser retornat a la cambra i es van observar els dos períodes diferents de la resposta de llepada intensiva. El primer període (fase primerenca) es va registrar 0/5 min després de la injecció de formalina i el segon període (fase tardana) es va registrar 10/35 min després de la injecció. El temps (s) dedicat a llepar-se les respostes de la pota injectada es va mesurar com a indicador de la resposta al dolor.

2.5. Estudi antiinflamatori en rates

Elanti-inflamatòriaL'activitat es va determinar en rates mesurant l'augment mitjà del volum de la pota posterior després de la injecció subplantar d'agents inflamatoris com ara carragenina (Winter et al., 1962) o zimosà (Tarayre et al., 1989). Els animals van ser injectats amb 0,1 ml 1 per cent de carragenina o 2 per cent de zimosà al peu posterior dret sota l'aponeurosi plantar. La inflamació es va quantificar en mil·lilitres mitjançant un pletismòmetre (7150 Ugo Basile), que va registrar petites diferències de nivell d'aigua causades pel desplaçament del volum. Abans de qualsevol tractament, es va determinar el volum mitjà de les potes posteriors de cada animal (Vo) amb tres mesures que no difereixen de més del 4 per cent (precisió de l'aparell). Aleshores, 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240 min després de la injecció dels agents inflamatoris, es va determinar el volum mitjà de les potes posteriors de cada animal (Vt) amb tres mesures que no difereixen de més de 4 per cent.

Els percentatges d'edema a cada registre es van calcular comparant el volum mitjà de les potes posteriors de cada animal (Vt) després de la injecció dels agents inflamatoris amb el volum mitjà de les potes posteriors de cada animal (Vo) abans de qualsevol tractament (Palanichamy). i Nagarajan, 1990). Els percentatges d'inhibició es van obtenir per a cada grup utilitzant la relació següent: [(Vt-Vo)control /(Vt-Vo)tractat]-100/(Vt-Vo)control.

2.6. Anàlisi estadística

Totes les dades obtingudes durant l'analgèsic ianti-inflamatòriaL'activitat es va expressar en termes d'errors mitjans i estàndard i es va analitzar posteriorment mitjançant l'anàlisi de variància unidireccional ANOVA, seguida de la prova de Scheff. Quan la probabilitat (P) era inferior a 0,05, es va considerar que la diferència era significativa.

3. Resultats i discussió

Els animals de pretractament amb dosis orals de CD(Cistanchedeserticola)L'extracte (0.1-1 g/kg) va donar lloc a una inhibició significativa i dependent de la dosi de la resposta de retorçament induïda per l'àcid acètic (taula 1) i de les fases bifàsiques de les respostes de llepada induïdes per formalina en ratolins ( Fig. 1(A)). La inhibició causada per la CD(Cistanchedeserticola)L'extracte a 1 g/kg en la resposta de retorsió induïda per l'àcid acètic i les respostes de llepada induïdes per formalina van ser d'uns 54 i 45 per cent, respectivament. L'àcid acetilsalicílic de control positiu a 0.1-0,3 g/kg també va disminuir la resposta de retorçament induïda per l'àcid acètic amb la inhibició del 45-64 per cent (taula 1). No obstant això, l'altre control positiu indometacina a 10 mg/kg només va inhibir la fase tardana però no primerenca de la resposta de llepada induïda per formalina en ratolins amb la inhibició màxima del 32 per cent (Fig. 1 (A)). A més, només les capes butanòliques i aquoses entre tres capes de CD(Cistanchedeserticola)extracte a 0.1-0.3 g/kg també va produir una antinocicepció significativa, i aquests efectes analgèsics de la capa butanòlica van ser millors que els de la capa aquosa (taula 1 i figura 1 (B)) . En segon lloc, vam avaluar elanti-inflamatòriaactivitat de CD(Cistanchedeserticola)extracte i tres capes contra la formació d'edema clàssica (induïda per carragenina) i alternativa (induïda per zimosà). Hem trobat aquest CD(Cistanchedeserticola)extracte a 0.1-1g/kg també va inhibir significativament la formació d'edema induïda per carragenina d'una manera relacionada amb la dosi i la indometacina a 10 mg/kg també va inhibir eficaçment la formació d'edema induïda per carragenina a les rates (Fig. 2). Tanmateix, la formació d'edema induïda per zimosan no va ser inhibida per la CD(Cistanchedeserticola)extracte a 0.1-1 g/kg en rates (dades no mostrades). A més, només la capa butanòlica entre tres capes de CD(Cistanchedeserticola)l'extracte a 0.1-0.3 g/kg també va inhibir significativament la formació d'edema induïda per carragenina a les rates (Fig. 2). Segons informes fitoquímics, acteòsid i àcid succínic, pertanyents als ingredients de la capa butanòlica de CD(Cistanchedeserticola)extracte (Hsu et al., 1994, 1995), posseïa elanti-inflamatòriaactivitat sobre la formació d'edema induïda per productes químics (Murai et al., 1995; Kabachnyi et al., 1987). A partir de les nostres dades actuals i altres informes anteriors, vam suggerir rizomes de CD(Cistanchedeserticola)posseïa analgèsic ianti-inflamatòriaactivitat en rosegadors, i els components actius surten principalment a la capa butanòlica de CD(Cistanchedeserticola)extracte. Si l'acteòsid i l'àcid succínic són ingredients actius de la CD(Cistanchedeserticola), aïllarem i avaluarem els seus analgèsics ianti-inflamatòriaactivitat en el futur.

Fig. 1. Efecte del CD(Cistanchedeserticola)extracte ({{0}},1, 0,3 i 1 g/kg), acetat d'etil, butanòlica i capes aquoses de CD(Cistanchedeserticola)extracte (CDE, CDB i CDW) ({{0}}.03, 0,1 i 0,3 g/kg) i indometacina (INDOL, 10 mg/kg) en la fase inicial (0/5 min) i tardana (10/35 min) de la resposta de llepada induïda per formalina en ratolins. Cada valor es representa com a mitjana9/SE (N/7). *PB/0,05, *** PB/0,001, en comparació amb el grup VEH.

Fig. 2. Efecte del CD(Cistanchedeserticola)extracte ({{0}},1, 0,3 i 1 g/kg), acetat d'etil, butanòlica i capes aquoses de CD(Cistanchedeserticola)extracte (CDE, CDB i CDW) ({{0}}.03, {{{0}},1 i 0,3 g/kg) i indometacina (INDOL, 10 mg/kg) sobre l'edema de pota induït per carragenina en rates. Cada valor es representa com a mitjana9/SE (N/6). *PB/0,05, ** PB/0,01, en comparació amb el grup VEH

A més, Shibata et al. (1989) suggereixen que la fase inicial de la resposta de llepada induïda per formalina estava relacionada amb la bradicinina i la substància P, i la fase tardana estava relacionada amb la bradicinina, l'autocrina i la prostaglandina. Les nostres dades actuals van assenyalar que la naloxona no va aboliranti-inflamatòriaactivitat de la capa de butanol del CD(Cistanchedeserticola)extracte en ambdues fases de la resposta de llepada induïda per formalina (Fig. 3) i l'efecte analgèsic sobre la resposta de retorçament induïda per l'àcid acètic (Taula 1). Per tant, l'analgèsic ianti-inflamatòriaEls efectes de la capa de butanol de l'extracte de CD poden no estar relacionats amb els receptors opioides. A més, CD(Cistanchedeserticola)L'extracte i la seva capa butanòlica només van inhibir la formació d'edema induïda per carragenina a les rates. L'edema induït per carragenina mitjançant la infiltració de leucòcits polimorfonuclears i el sistema de cinina activat, especialment la bradicinina, és diferent de l'edema induït per zimosà mitjançant l'afluència de monòcits i el sistema immunitari activat (Damas et al., 1990; Dawson et al., 1991). L'àcid succínic, un ingredient de la capa butanòlica de l'extracte de CD, va inhibir la funció dels leucòcits polimorfonuclears (Rotstein et al., 1985). Aquests resultats van revelar que l'analgèsic ianti-inflamatòriaefectes de la capa de butanol de CD(Cistanchedeserticola)L'extracte podria estar relacionat amb el sistema de cinina, però no amb els receptors opioides i els sistemes immunitaris encara que amb la MC(Cistanchedeserticola)posseïa l'efecte immunopotenciador (Chin i Su, 1993). Per detallar el mecanisme de l'analgèsic ianti-inflamatòriaactivitat, investigarem més amb capes actives o ingredients de l'extracte de CD.

Cistanchetubulosaté molts efectes, feu clic aquí per saber-ne més

Referències

Arrigoni-Martelli, E., 1985. Farmacologia de l'eliminació de radicals lliures en la inflamació. International Journal of Tissue Reactions 7, 513/ 519.
Chang, Y., Wu, H., Wang, SN, Cheng, HC, 1995. Estudi sobre els efectes forts deCistanchedeserticolaMa., Cistanche salsa (CA Mey) G. Beck i Cistanche tubulosa (Schenk) R Wight. Xina Journal of Chinese Materials and Medicine 26, 143/146.
Chin, HL, Su, YC, 1993. Estudi sobre els efectes farmacològics deCistanchedeserticolaMa. Xina Journal of Chinese Materials and Medicine 19, 143/146.
Damas, J., Bourdon, V., Remacle-Volon, G., Adam, A., 1990. Kinines i exsudats peritoneals induïts per carragenina i zimosà en rates. British Journal of Pharmacology 101, 418/422.

Dawson, J., Sedgwick, AD, Edwards, JC, Lees, P., 1991. Un estudi comparatiu de les respostes cel·lulars, exsudatives i histològiques a la carragenina, el dextran i el zimosà en el ratolí. International Journal of Tissue Reactions 13, 171/185.

Hsu, WH, Chu, SH, Chao, CH, Hsu, Y., Yuan, KW, Yen, CH, Chi, CY, Chan, C., 1994. Estudi sobre els constituents químics deCistanchedeserticolaMa. Xina Journal of Chinese Materials and Medicine 25, 509/513.
Hsu, WH, Chu, SH, Sheng, LC, Yuan, KW, Mao, CN, 1995. Estudi sobre els components químics i els efectes farmacològics deCistanchedeserticolaMa. i salsa Cistanche (CA Mey) G. Beck. Drogues a base d'herbes tradicionals xineses 26, 143/146.
Kabachnyi, VI, Chernykh, VP, Drogovoz, SM, Golubenko, Iu.A., Bogutskaia, EE, 1987. Cercaranti-inflamatòriapreparats entre els derivats d'heteril amides de l'àcid succínic. Farmakologiia i Toksikologiia 50, 94/97.
Lee, SL, 1986. Pen-Tsao-Kun-Mu. Publicacions de l'Institut Nacional de Recerca de Medicina Xinesa, Taipei, pàg. 20.
Lu, MC, 1998. Estudis sobre l'efecte sedant deCistanchedeserticola. Revista d'Etnofarmacologia 59, 161/165.
Murai, M., Tamayama, Y., Nishibe, S., 1995. Feniletanoides a l'herba de Plantago lanceolata i efecte inhibidor sobre l'edema de l'oïda del ratolí induït per l'àcid araquidònic. Planta Medica 61, 479/480.
Palanichamy, S., Nagarajan, S., 1990. Activitat analgèsica de l'extracte de Cassia alata i el kemp Eerol 3-0-Sophorosid. Revista d'Etnofarmacologia 29, 73/78.
Rotstein, OD, Pruett, TL, Fiegel, VD, Nelson, RD, Simmons, RL, 1985. L'àcid succínic, un subproducte metabòlic de les espècies de Bacteroides, inhibeix la funció dels leucòcits polimorfonuclears. Infecció i immunitat 48, 402/408.
Shibata, M., Ohkubo, T., Takahashi, H., Inoki, R., 1989. La prova de formalina modificada: resposta al dolor bifàsica característica. Dolor 38, 347/ 352.
Taber, RI, Greenhouse, DD, Rendell, JK, Irwin, S., 1969. Interaccions agonistes i antagonistes dels opioides en l'estirament abdominal induït per àcid acètic en ratolins. Revista de Farmacologia i Terapèutica Experimental 169, 29/38.
Tarayre, JP, Delhon, A., Aliaga, M., Barbara, M., Bruniquel, F., Caillol, V., Puech, L., Consul, N., Tisne-Versailles, J., 1989.
Estudis farmacològics sobre la inflamació del zimosà en rates i ratolins. 1: Edema de pota induït per Zymosan en rates i ratolins. Investigació Farmacològica 21, 375/384.
Winter, CA, Risley, EA, Nuss, GW, 1962. Edema induït per carragenina a la pota posterior de la rata com a assaig per aanti-inflamatòriadrogues. Actes Societat de Biologia Experimental i Medicina 111, 544/547.