Estudi comparatiu de la prova de límit microbià i criteris de peces de decocció de TCM entre la farmacopea dels Estats Units, la farmacopia europea, la farmacopia japonesa i la farmacopia xinesa ⅱ

2 Inspecció de bacteris de control

La inspecció dels bacteris de control és un element important en la inspecció deMedicaments a base d'herbes xinesos. Els ítems d’inspecció de bacteris de control s’estipulen habitualment a les quatre farmacopea, inclouen bacteris gram-negatius resistents a la bilis, Escherichia coli i Salmonella [{2}}]. La comparació dels seus mètodes d’inspecció es mostra a la taula 2. Cal assenyalar que USP43 classifica els bacteris gram-negatius resistents a la bilis a la inspecció del recompte microbià "2 0 21". A més, es va afegir el mètode d’inspecció d’estafilococ aureus a USP43 i JP17; USP43 també va complementar el mètode d’inspecció de Clostridium i va ser el primer a proposar el concepte d’avaluació de riscos microbians inacceptables. A més, USP43 només va introduir el principi de la prova d’adequació de medi de cultiu en el mètode d’inspecció de bacteris de control dels medicaments a base d’herbes xineses i no va aclarir el mètode d’operació específic ni va requerir la realització de la prova d’adequació del mètode; Mentre que EP10.0, JP17 i CHP2020 van donar una introducció relativament detallada a la prova d’adequació del medi de cultiu i a la prova d’adequació del mètode.

Una herba de medicina xinesa extracte que es va utilitzar al mercat dels Estats Units

 

2.1 Bacteris gram-negatius resistents a la bilis

En el pretractament, a diferència d’altres farmacopea que utilitzen el medi TSB com a diluent, USP43 afegeix pH 7,2 PBS com a diluent. Tot i que els requisits per al temps de recuperació de mostres són lleugerament diferents en cada farmacopea, tots requereixen recuperació durant almenys 2 h. En l’etapa d’enriquiment bacterià, EP1 0. 0 utilitza 4 concentracions d’inoculació de mostra de prova de 0. 1, 0. 0 1, 0,001 i 0. Bacteris gram-negatius resistents a la bilis que es poden detectar amb aquest mètode arriba a 1 × 104 CFU/g (o CFU/ml).
En comparació amb el mètode d’altres farmacopees mitjançant 3 concentracions d’inoculació de mostra de prova de 0. Els mètodes utilitzats en la separació selectiva de diverses farmacopoies són consistents i el medi VRBGA s’utilitza per identificar colònies sospitoses, però la temperatura i el temps de cultiu són lleugerament diferents.

 

Llista d'especificacions de Cishanche

 

2.2 Escherichia coli

EP1 0. 0 i jp17, respectivament, estipulen els mètodes de prova qualitatius i quantitatius per a Escherichia coli, mentre que USP43 i CHP2 0 2 0 només estableixen els mètodes de prova qualitatius. En el mètode de prova qualitativa, els principis de detecció de cada farmacopea són consistents. La solució de prova s’enriqueix amb un medi TSB, s’inocula en un medi de brou de MacConkey, i després es separa amb un medi selectiu. Entre ells, USP43 utilitza un medi d’agar MacConkey per a la separació i la cultura durant 18 a 24 hores, i es pot utilitzar un medi EMB per a la identificació d’Escherichia coli; Les altres tres farmacopees requereixen l’ús del medi d’agar de MacConkey per a la separació i el cultiu durant 18 a 72 hores, i els bacteris objectiu es determinen mitjançant mètodes d’identificació adequats. JP17 també pot utilitzar un medi d’agar cromogènic d’Escherichia coli en lloc del medi d’agar de MacConkey per separar i les mostres de cultiu. En el mètode de prova quantitativa, tant EP1 0. 0 com JP17 utilitzen el mètode MPN amb tres concentracions d’inoculació de mostres de prova de 0,1, 0,01 i 0,001 g (o ml) per comprovar Escherichia coli en mostres, proporcionant més opcions de mètode per a la inspecció de bacteris de control.

 

2.3 Salmonella

En termes de volum de mostreig, tret que EP1 0. 0, que requereix que 25 g (o 25 ml) de la mostra es cultivi en 225 ml de solució aquosa de peptona tamponada, les altres farmacopoies estipulen que 1 0 g (o 1 {{18 {18} ml) de la mostra de prova han de ser afegides a la mostra de prova. A l’etapa d’enriquiment bacteriana selectiva, USP43, EP1 0. 0 i CHP2020 utilitzen un medi RV a 30-35 grau, mentre que JP17 augmenta la temperatura del cultiu a (42 ± 0,5) grau per augmentar la selectivitat. En l'etapa de separació, el mètode USP43 pot seleccionar un o més de BGA, XLD o HE; EP10.0 i CHP2020 només requereixen l’ús de medi XLD, i JP17 també pot utilitzar un medi d’agar cromogènic de salmonel·la. En la identificació de microorganismes sospitosos, USP43 es projecta els bacteris objectiu mitjançant la prova de ferro de tres sucres; EP10.0 i JP17 utilitzen mètodes adequats per jutjar; CHP2020 integra els dos mètodes d’identificació anteriors, que és més flexible i raonable.

 

2.4 Altres bacteris de control

JP17 i USP43 Especifiquen el mètode de prova per a Staphylococcus aureus, mentre que EP1 0. 0 i CHP2020 no especifiquen aquest element. JP17 estipula que després de la mostra de prova es cultiva en medi TSB, s’ha de transferir al medi TSB que conté un 7,5% de clorur de sodi per al re-cultiu per inhibir els bacteris de fons; USP43 només utilitza un medi TSB per a un enriquiment bacterià únic. En separar els suports de cultiu selectiu, JP17 i USP43 utilitzen medi VJ i medi BP a més del medi MS. Quan s’identifiquen colònies sospitoses, USP43 utilitza la prova de coagulasa plasmàtica, mentre que JP17 pot utilitzar mètodes adequats per a la seva identificació. A més, USP43 també proporciona un mètode de detecció de Clostridium, que és el mateix que el mètode d’inspecció microbiològica per a productes no estèrils sota USP43 “62”.

Un laboratori de proves HPLC de Herb Herb xinès

 

3 estàndards de límit microbiològic

3.1 EP1 0. 0

EP1 0. 0 "5.1.8" divideix peces de medicina d'herbes xineses i els seus extractes en tres categories: mostres per al tractament d'aigua bullent (A), mostres tractades per altres processos (b) i mostres que no poden complir els requisits de B després d'altres processos (c) [10].
Per a mostres de classe A, l’estàndard límit per al recompte de TAMC és d’1 × 107 CFU/G (o CFU/ML), i l’estàndard límit per al recompte de TYMC és d’1 × 105 CFU/g (o CFU/ml); Al mateix temps, els resultats màxims de recompte acceptables s’estableixen sobre aquesta base, expressats com a factor de 5. L’estàndard més estricte per als articles de recompte de productes són els productes de classe B, els estàndards de límit dels quals per al recompte de TAMC són 1 × 104 CFU/G (o CFU/ml) i el recompte de TYMC són 1 × 102 CFU/G (o CFU/ML). Excepte les mostres de classe A, que no cal que es comprovin els bacteris gram-negatius resistents a la bilis, les mostres de classe B i la classe C s’han de comprovar si TAMC, recompte de TYMC i bacteris gramnegatius resistents a la bilis, Escherichia coli i Salmonella [10], vegeu la taula 3 per a detalls.

 

3.2 JP17

JP17 "G4" divideix les peces de medicina d'herbes xineses i els seus extractes en dues categories: mostres tractades amb aigua bullent (classe I) i mostres que s'utilitzen directament sense passar pel procés d'extracció (classe II) [11]. En comparació, els productes de la classe I de JP17 equivalen a la classe A de productes a EP1 0. 0, i la classe II a JP17 és similar a la de la classe C a EP1 0. 0. Tanmateix, JP17 no especifica els estàndards de límit dels productes de classe B a EP10.0, vegeu la taula 3 per obtenir més informació.

 

3.3 USP43

En comparació amb la classificació de peces de decocció a EP1 0. 0 i JP17, USP43 ha fet una classificació més detallada dels productes que contenen medicina xinesa (medicina vegetal) a l'estàndard de límit microbià "2023" per a suplements de nutrició i dieta no estèril. Hi ha 7 categories, incloses plantes seques o terrestres, extractes de plantes terrestres, etc., tal com es mostra a la taula 4. Entre elles, els requisits per a mostres de plantes seques o terrestres són comptes de TAMC menys o iguals a 1 × 105 CFU/g (o CFU/ml), el recompte de TYMC menys o igual a 1 × 103 CFU/G (o CFU/ML) per 10 g. Aquest requisit és superior als requisits d’EP10.0 i JP17 per a productes de la mateixa classificació.

 

3.4 CHP2020

Basat en la 2 0 15 Edition, Chp2020 "Regla General 1108" va revisar els estàndards de límit microbià per a medicaments herbes xinesos i en remull, i va afegir les disposicions per a TAMC, els recomptes de TYMC i Escherichia coli. Excepte el requisit de recompte de TYMC d’1 × 103 CFU/g, la resta són els mateixos que els estàndards de límit microbià per a mostres de classe C a EP10.0 (vegeu Taula 3). Tot i això, CHP2020 encara no ha establert un estàndard de límit unificat per a la inspecció de bacteris de control d’extractes de medicina xinesa. Es pot veure que els requisits de CHP2020 per als límits microbians dels medicaments a base d’herbes xineses, ja sigui la classificació de medicaments xinesos que necessiten controlar els microorganismes o els estàndards de límit microbià, no són tan complets com les altres tres farmacopea.

 

4 Discussió

L’edició 2 0 15 de la farmacopea xinesa ha inclòs alguns estàndards de límit microbià per a rodanxes de medicina d’herbes xineses, que ha tingut un paper positiu en l’orientació dels fabricants de medicina xinesa a parar atenció a la contaminació microbiana i estandarditzar el processament de rodanxes d’herbes xineses [15]. No obstant això, el nivell de producció general i les condicions tècniques de les llesques de medicina xinesa al meu país estan molt per darrere de les de països desenvolupats. La contaminació microbiana encara és freqüent en els productes i poden existir patògens condicionals [16-18]. Tot i que la majoria de les llesques de medicina xinesa han de ser processades per decocció i altres processos abans de l’ús, encara hi ha riscos potencials en el procés de medicació, i els microorganismes patògens residuals encara poden causar danys als pacients [3-4, 8, {17-19]. Actualment, tot i que CHP2020 ha revisat els "estàndards de límit microbià per a extractes de medicina d'herbes xineses i llesques de medicina d'herbes xineses", en comparació amb USP43, EP10.0 i JP17, les regulacions de CHP2020 sobre classificació de mostres, articles d'inspecció i normes de límit han de millorar més.

Els medicaments a base d'herbes xineses són productes processats primaris i un tipus especial de medicina. L’aplicabilitat dels seus mètodes d’inspecció és un enllaç important en el procés de configuració estàndard [14]. La contaminació de fons dels medicaments a base d’herbes xineses és alta, cosa que interfereix molt en la inspecció de bacteris de control i té el risc de detecció perduda [17]. Hi ha grans diferències en l’enriquiment bacterià i els efectes de separació dels diferents mètodes d’inspecció. Prenent la inspecció de Staphylococcus aureus en JP17 com a exemple, l’ús de medi TSB que conté un 7,5% de clorur de sodi per a l’enriquiment bacterià pot ajudar a inhibir el creixement de microorganismes de fons a la mostra i millorar la taxa de detecció de bacteris objectiu. USP43 i JP17 també afegeixen l’ús d’una varietat de medis de cultiu colorimètrics, que també és un mètode eficaç per distingir els bacteris objectiu. A més, les quatre farmacopoies permeten l’ús de mètodes d’inspecció microbiana alternatius, com ara mètodes electroquímics, mètodes d’inspecció de gasos, mètodes de quimioluminescència, etc. Entre ells, la tecnologia de detecció basada en biologia molecular ha demostrat els avantatges de l’alta sensibilitat, l’alta especificitat i la ràpida inspecció en els camps de la inspecció mèdica i la inspecció dels aliments i pot tenir un paper positiu en la música microbial de la seva interfície xinesa i pot tenir un paper microbial de la seva interfície microbial de la seva inspecció, i pot tenir un paper microbial a la infecció del xinès. La taxa de detecció dels bacteris de control en medicaments a base d'herbes [19-20]. En termes d’estàndards de límit, USP43 té la classificació més detallada dels medicaments xinesos i els requisits relativament estrictes per als estàndards de límit microbià de les llesques de medicina xinesa. Tot i que USP43 no especifica els tipus de microorganismes inacceptables, requereix que els fabricants avaluin activament els microorganismes inacceptables que puguin existir en els productes, especialment per controlar els microorganismes que poden causar efectes adversos sobre els productes i conduir a riscos de seguretat [12]. Aquest concepte d’avaluació de riscos i gestió de riscos val la pena aprendre i fer referència al meu país. En resum, aquest estudi va comparar i analitzar els mètodes d'enumeració microbiana, els mètodes d'inspecció de bacteris i els estàndards de límit relacionats amb els microbis de les rodanxes de medicina xinesa en quatre farmacopea. Segons l’estat actual de la contaminació microbiana i el control de les llesques de medicina xinesa, és necessari millorar encara més la inspecció microbiana i limitar els estàndards dels productes relacionats amb la medicina xinesa a la farmacopea, continuar recopilant i organitzant dades bàsiques de càrrega microbiana i guiar raonablement els fabricants de medicina xinesa per reforçar el control i la gestió de la contaminació microbiana i, finalment, assegurar la seguretat dels productes de medicina xinesa. Es recomana que, segons l’estat actual de la contaminació microbiana i el control de les llesques de medicina xinesa, els mètodes d’inspecció microbiana i els estàndards de limitació dels productes relacionats amb la medicina xinesa a la farmacopea s’haurien de millorar gradualment i s’haurien de perfeccionar els nivells de límit microbià dels productes corresponents.

 

Referències

[1] Txec E, Kneifel W, Kopp B. Estat microbiològic
de medicaments medicinals disponibles comercialment, un estudi de cribratge [J]. Planta Medica, 2001, 67 (3): 263-269.
[2] Enayatifard R, Asgarirad H, Sani BK. Qualitat microbiana d’algunes formes de dosificació sòlida a base d’herbes [J]. Africà j
Biotechnol, 2010, 9 (11): 1701-1705.
[3] Fan Yiling, Li Qiongqiong, Fang Rui, et al. Estudi sobre contaminació microbiana de 10 tipus de medicaments a base d'herbes xinesos a Xangai [J]. Xinesa Herbal Medicine, 2015, 46 (13): 1908-1913.
[4] Le Wei, Ding Anwei, Qiu Rongli. Visió general de la investigació sobre les vies de la infecció microbiana i els mètodes de control de materials medicinals xinesos [J]. Jiangsu Journal of Traditional Chinese Medicine, 2010, 42 (2): 80-81.
[5] Yan Dan, Yuan Xing, Jie Dashuai, et al. Estat de la investigació i pensament en esterilització de medicaments a base d'herbes xineses [J]. Xinesa Herbal Medicine, 2016, 47 (8): 1425-1429.
[6] Duan Jinlian, Li Yue, Zhang Lumei, et al. Contaminació microbiana de materials medicinals xinesos per a les injeccions de medicina xinesa [J]. Journal of Yunnan University of Traditional Chinese Medicine, 2019, 42 (4): 1-8.
[7] Comitè Nacional de Farmacopea. Farmacopea de la República Popular Xina. Part IV [S]. Edició 2015. Beijing: China Medical Science and Technology Press, 2015.
[8] Liu Peng, Xu Huayu, Te Yuxiang, et al. Investigació i pensament sobre els límits microbians dels medicaments a base d'herbes xineses [J]. Revista xinesa de Medicina Tradicional Xinesa, 2002, 27 (8): 628-629.
[9] Jia Qian. Reflexions sobre la modernització i la internacionalització de la medicina xinesa [J]. Revista xinesa d’informació de medicina tradicional xinesa, 2003, 10 (6): 1-4.
[1 0] Comissió Europea de Farmacopea. Farmacopea europea [S]. 10.0 Edició. Estrasburg. Direcció Europea per a Medicaments de Qualitat, 2019: 68-97.
[11] Agència de productes farmacèutics i dispositius mèdics del Japó.
La farmacopea japonesa [S]. 17a edició. Tòquio: El Ministeri de Salut, Labor i Benestar, 2016: 138-147.
[12] Convenció farmacopeial dels Estats Units. USP 43- NF38 [S/OL].
(2019-10-04) [2020-06-29]. https://www.uspnf.com/notices/usp-nf-final-print-edition.
[13] Comitè de Farmacopea de la Xina. Farmacopea de la República Popular Xina. Part IV [S]. 2020
edició. Beijing: China Medical Science and Technology Press, 2020: 171-177.
[14] Peng Aina, Huang Jianghong, Yue Zhaoxia. Explorar mesures efectives per millorar la qualitat dels medicaments a base d'herbes xinesos i la inspecció de llesques de medicina xinesa [J]. Inner Mongolia Journal of Traditional Chinese Medicine, 2016, 35 (11): 108, 117.
[15] Wang Jie, Qiao Xiyao, Lin Fei, et al. Estat actual del desenvolupament i anàlisi de les llesques de medicina d'herbes xineses en la gestió de la qualitat [J]. Revista xinesa de Medicina Tradicional Xinesa, 2014, 39 (22): 4475-4478.
[16] Deng Yan, Wang Yake, Han Xiaoyu, et al. Estudi sobre la tolerància a la sal biliar de diferents varietats de medicaments a base d'herbes d'arrel xinès

Contaminació de bacteris gramnegatius [J]. Revista xinesa de Medicina Tradicional Xinesa, 2017, 42 (21):
4135-4141