Determinació del contingut total de saponines a Boschniakia Rossica i Herba Cistanches mitjançant espectrofotometria Ⅰ

Resum:

Objectiu Aquest mètode quantitatiu s'estableix de saponines totals en Boschniakia rossica iCistanches d'herbai el contingut de laes determina les saponines totals． Mètodes El salidròsid es va seleccionar com a substància de referència, es va utilitzar la reacció de color amb vainillina i àcid perclòric. A continuació, es va determinar el contingut de saponines totals en Boschniakia rossica i Herba cistanches a 523 nm per espectrofotometria. Ｒresultats La corba de salidroside va ser lineal en el rang de 0． 05133 - 0． 2567mg·ml－ 1amb la correlació de 0． 9992, i l'equació de regressió lineal va ser Y=1． 611X + 0． 0573． Per a Boschniakia rossica, la recuperació mitjana de salidroside va ser de 99. 68% amb ＲSD d'1． 68% ( n=6); i per a les distàncies d'Herba, la recuperació mitjana de salidroside va ser de 101. 18% amb un ＲSD de 0． 94% (n=6)． Conclusió El mètode és precís, senzill i fiable. Per tant, es pot utilitzar per determinar el contingut de saponines totals en Boschniakia rossica i Herba cistanches.

Paraules clau:Boschniakia rossica;Cistanches d'herba; Saponines totals; Determinació; espectrofotometria; Salidròsid

QUANT TEMPS TREGA A FUNCIONAR CISTANCHE?

Cistanche deserticola Y. C. Ma i Bosehniakia rossica Fedtseh et Flerov són plantes medicinals paràsites que pertanyen a la família de les Orobanchiaceae. Cistanche deserticola és una planta parasitària que viu a les arrels de Haloxylon ammodendron, un arbre del desert. Es produeix principalment a Xinjiang i Alxa League, Mongòlia Interior. Es coneix com "ginseng del desert" pel seu baix rendiment i alt valor medicinal. Grasshopper [1] es produeix al nord-est del meu país [2]. Segons el folklore, té l'efecte d'immortalitat, per la qual cosa s'anomena "Herba de l'edat eterna" del nord-est. S'utilitza per a la impotència per deficiència renal, dolor de fred a la cintura i genolls, sequedat dels intestins i restrenyiment. Pot nodrir i enfortir el cos, retardar l'envelliment i és un autèntic recurs medicinal al nord-est [3]. Els dos tenen efectes similars, i tots dos tenen els efectes de tonificar els ronyons, enfortir el yang, humitejar els intestins i laxant [4]. Segons els registres sobre Cistanche deserticola al "Compendi de Materia Medica" de Li Shizhen de la dinastia Ming, "Aquesta substància és tònica però no dura, per la qual cosa s'anomena calma. És rar obtenir-la de Congrong, de manera que està plena de Cistanche deserticola". És a dir, Cistanche deserticola es va utilitzar antigament com a material medicinal alternatiu a Cistanche deserticola. La investigació moderna ha demostrat que tant Cistanche deserticola com Estuary deserticola tenen efectes farmacològics com ara anti-envelliment [5, 6], anti-fatiga [7, 8], millora de la funció immune [9, 10] i millora de la memòria [{{ 12}}].

El contingut de glucòsids totals en Grasshopper i Cistanche deserticola té el valor d'un estudi en profunditat. Tots dos contenen saponines, olis volàtils, sucres, aminoàcids i altres components. Els estudiosos han informat d'estudis comparatius sobre els components d'olis volàtils, sucres, aminoàcids i altres components dels dos [4, 14, 15], però la determinació del contingut total de glucòsids dels dos No hi ha hagut informes a la literatura. . Els components principals de Cistanche deserticola són glicòsids fenilpropanoides (sèrie de glucòsids A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, K) [16], i Cistanche deserticola són glicòsids feniletanoides (sèrie de Cistanche deserticola). )[17,18], les saponines de les dues són similars i comparteixen un component similar, el salidroside. Creiem que els glicòsids són ingredients actius importants d'ambdós, i explorem l'ús de l'espectrofotometria per determinar el contingut de glicòsids totals. , per proporcionar una base teòrica per al desenvolupament i la utilització posteriors dels recursos d'Echinacea deserticola i Cistanche deserticola.

1 Materials i instruments

1. 1 Material i reactius: Amaranth officinale, recollit al voltant de la muntanya Changbai, identificat com una planta de la família de les Orobanàcies

La planta sencera d'Orobanche coerulescens s'asseca, es renta la mostra i escorre l'aigua

Separar, col·locar-lo en una caixa d'assecat a temperatura constant a 40 graus, assecar a pes constant, aixafar, passar per un tamís de 40 malles i preparar

[19]; Cistanche deserticola, Hohhot Enhe Trading Co., Ltd., identificat com a llistat

Cistanche deserticola Y. C. La carn seca de la ma

Tiges, rentades, assecades a l'aire, assecades fins a un pes constant, triturades, passades per un tamís de malla 40-, reservar; vermell

Substància de referència de crassuside (proporcionada per l'Institut Xinès de Productes Farmacèutics i Biològics, número de lot 110818

- 200404, per a la determinació del contingut); tots els reactius experimentals utilitzats són de grau analític domèstic.

1. 2 Instruments Espectrofotòmetre UV-visible 752N (Xangai Jingke); Tu-1901 parell

Espectrofotòmetre UV de feix (Beijing Puxi General Co., Ltd.); balanç analític electrònic

AL104 1/100,000 (Mettler-Toledo Instrument Shanghai Co., Ltd.); FW-80

Trituradora universal d'alta velocitat (Shandong Hualu Electric Heating Instrument Co., Ltd.).

2 mètodes

2. 1 Preparació de la solució de referència

Utilitzeu una balança analítica per pesar amb precisió el salidroside 15. 40mg, dissoleu-lo en metanol transferiu-lo a un 25-matràs aforat i ajusteu el volum a la marca. Prepareu-vos per contenir 0,0% de salidroside per ml. La solució de 616 mg s'utilitza com a solució de referència i es tanca a la nevera per al seu ús posterior.

2. 2 Preparació de la solució d'assaig

Utilitzeu una balança analítica per pesar amb precisió les pols medicinals de Grasshopper i Cistanche deserticola. 2. 0g, col·loqueu-lo en un matràs de fons rodó, afegiu-hi 40 ml d'etanol al 90%, escalfeu i extracció de Grasshopper per reflux una vegada, i escalfeu i reflux Cistanche deserticola dues vegades, cada temps d'extracció és d'1, 5 h, després filtració d'aspiració, combinar el filtrat, concentrar-se a sec en un bany maria, afegir 25 ml d'aigua per dissoldre, extreure 3 vegades amb èter de petroli, 25 ml cada vegada, descartar el líquid d'èter de petroli a la capa superior i, a continuació, continuar extreint 3 vegades. amb n-butanol saturat d'aigua. 25 ml cada vegada, combineu tres extractes de n-butanol, evaporeu el líquid de n-butanol en un bany d'aigua en una campana de fum, diluïu-lo amb metanol en un matràs aforat de 10 ml, barregeu-ho bé, després mesureu amb precisió 1 ml de la solució i diluïu-lo amb metanol a 25 ml de volum. ampolla, barregeu-la bé i utilitzeu-la com a solució de prova per a un ús posterior.

2. 3. Selecció de la longitud d'ona de mesura

1. Col·loqueu 25 ml de la solució de referència i la solució de prova en tubs d'assaig graduats amb taps, evaporeu el dissolvent de metanol en un bany d'aigua a temperatura constant a 60 graus i afegiu 0. Es van fer reaccionar 2 ml de solució d'àcid acètic-vainillina-glacial al 5% i 0,8 ml de solució d'àcid perclòric en un bany d'aigua de 60 graus durant 15 min. Traieu la proveta i refredeu-la immediatament amb aigua gelada durant 5 min. Afegiu 5 ml d'àcid acètic glacial i agiteu bé [20]. Prepareu la solució de referència amb metanol de la mateixa manera. La solució després del desenvolupament del color es va sotmetre a una exploració de longitud d'ona i la longitud d'ona d'absorció màxima de 523 nm després de la reacció de color del salidroside es va seleccionar entre 400 i 800 nm com a longitud d'ona de mesura dels glucòsids totals d'Escherichia coli i Cistanche deserticola. Els patrons d'exploració de la substància de control i de la substància d'assaig es mostren a la figura 1.

2. 4. Investigació de la relació lineal: Utilitzeu una pipeta per dibuixar amb precisió la solució de referència 0. 5,1. 0,

1. 5,2. 0,2． Es van posar 5 ml en tubs d'assaig tapats numerats de l'1 al 5 i la reacció de color es va dur a terme segons els passos de "2. 3". Es va realitzar un experiment en blanc amb metanol en condicions paral·leles i es va mesurar l'absorbància a una longitud d'ona de 523 nm. L'absorbància A (Y ) és l'ordenada, concentració mg·ml-1

(X) és l'abscissa, es realitza una regressió lineal i l'equació de regressió és Y {{0}}. 611X +0. 0573 ( r=0. 9992), el resultat mostra que la concentració en massa de salidroside és a 0. La relació lineal és bona dins l'interval de 05133-0.2567mg·ml-1. Els resultats es mostren a la figura 2.

2. 5 Prova d'estabilitat

Mesureu amb precisió una quantitat adequada de la solució de prova de Grasshopper i Cistanche deserticola, desenvolupeu el color segons el mètode de "2.3" i mesureu el valor d'absorbància de manera uniforme en 6 vegades en 30 minuts. Això demostra que dins dels 30 minuts després del desenvolupament del color, Grasshopper i Cistanche deserticola faran L'estabilitat de la solució de prova és relativament bona. Els resultats es mostren a la taula 1.

2. 6 Prova de precisió

Mesureu amb precisió una quantitat adequada de la solució de referència, desenvolupeu el color segons el mètode de "2.3" anterior i mesureu l'absorbància 6 vegades contínuament. Els resultats es mostren a la Taula 2. Els resultats mostren que la precisió d'aquest instrument experimental és bona.

Figura 1 Patrons d'escaneig de capa fina de substància de referència de salidroside (A), solució de prova de llagosta (B) i solució de prova de cistanche deserticola (C)

2. 7. Prova de repetibilitat.

Peseu amb precisió 6 porcions de pols de llagosta i cistanche deserticola, cada porció conté 2. 0g, després de l'escalfament i l'extracció per reflux mitjançant el procés d'extracció òptim que s'ha determinat, seguiu els passos de "2.3" i mesureu el absorbància a una longitud d'ona de 523 nm. Els resultats de la mesura es mostren a la taula 3 i a la taula 4.

2. 8. Prova de taxa de recuperació de la mostra.

Pesar amb precisió 6 mostres de Grasshopper i Cistanche deserticola amb un percentatge de massa conegut dels glucòsids totals. Cada mostra és de 12 mg. Afegiu amb precisió 2 ml de solució de referència de salidroside. Seguiu "2. 2" Extraieu la mostra sota l'element, determineu el contingut total de glucòsids després del desenvolupament del color segons l'element "2.3" i calculeu la taxa de recuperació de la mostra. Els resultats es mostren a la taula 5 i a la taula 6.