Quant en saps sobre la malaltia renal crònica?
Mar 03, 2022
Contacte: emily.li@wecistanche.com
Avaluació de l'albumínúria i la seva relació amb la pressió arterial en gossos amb malaltia renal crònica
Àngela Bacic1, Marcia M. Kogika1, et al
Paraules claualbuminúria, canina,malaltia renal crònica, ELISA, hipertensió,funció renal
FonsLa microalbuminúria i la hipertensió s'han associat durant molt de temps amb un pronòstic cautelar en pacients humans amb una varietat de malalties. En veterinària, s'han utilitzat proves de microalbuminúria per detectar precoçmentdany renal, però hi ha poca informació sobre la seva associació amb la pressió arterial alta en gossos ambmalaltia renal crònica(ERC). Objectiu: L'objectiu d'aquest estudi va ser avaluar l'albuminúria i la seva associació amb la hipertensió arterial en gossos amb ERC.
MètodesEs va determinar la proporció d'albúmina urinària: creatinina (UAC), la relació proteïna urinària: creatinina (UPC) i la pressió arterial sistòlica en 39 gossos clínicament sans i 40 gossos amb ERC.
ResultatsLa UAC en gossos amb ERC (rang, {{0}}.002-7,99; mediana, {{1{0}},38) va ser estadísticament diferent del dels gossos control (interval, 0.0005–0.01; mediana, {{42} }.002). La microalbuminúria (UAC 0,03–0,3) i la microalbuminúria (UAC 4 0,3) es van detectar en el 32,5% i el 50% dels gossos amb ERC, respectivament. El seixanta per cent (24/40) dels gossos amb ERC tenien pressió sistòlica Z180 mmHg; en aquests gossos, la relació UAC (rang, 0,006-7,99; mitjana, 1,72) va ser significativament més alta que en gossos amb ERC i pressió sistòlica o 180 mmHg (rang, 0,002-4,83; mitjana, 0,10). Dels gossos hipertensos amb ERC, els amb UPC 41,0 normalment tenien macroalbuminúria, els amb UPC 0,5-1,0 normalment tenien microalbuminúria i els amb UPC o 0,5 normalment no tenien albuminúria.
ConclusionsLa relació UAC va ser més alta en gossos hipertensos que en gossos normotensos amb ERC. Les proves dissenyades per detectar la microalbuminúria poden ser útils per a gossos hipertensos amb ERC i una UPC 1.0 per detectar l'inici i la magnitud de l'albuminúria. Una vegada que la macroalbuminúria és oberta, la mateixa proporció UPC es pot utilitzar amb el mateix propòsit.
Cistanche tracta la malaltia renal
Introducció
La proteinúria ha estat implicada com a mediadora independent de la progressió demalaltia renal.1,2En rates amb proteinúria induïda experimentalment i en humans amb proteinúria d'origen naturalinsuficiència renal, la magnitud de la proteinúria es correlaciona amb la taxa de progressió deinsuficiència renal.3,4 Recentment, la mortalitat global i el nombre de crisis urèmiques es van associar amb proteinúria en gossos ambmalaltia renal crònica(ERC).5
La microalbuminúria es defineix generalment com l'albuminúria subclínica, és a dir, una taxa d'excreció d'albúmina que és anormalment elevada però que no es pot detectar mitjançant procediments estàndard de laboratori com el mètode de tira reactiva de rutina.6 Això significa que la taxa d'excreció d'albúmina està per sobre del nivell normal però per sota del nivell proteïnúric habitual. En humans, la microalbuminúria s'ha reconegut des de fa temps com un factor predictiu de la proteinúria clínica d'aparició tardana i la malaltia renal terminal.6així com del desenvolupament de la nefropatia diabètica.7De la mateixa manera, la microalbuminúria pot precedir la proteinúria en gossos amb nefropatia hereditària,8en gossos infectats amb Dirofilaria immitis,9i en Wheaten Terriers de revestiment suau predisposats genèticament al desenvolupament de la malaltia glomerular.10
La coexistència d'hipertensió i proteinúria ja s'ha informat en gossos amb hiperadrenocorticisme11–13i diabetis mellitus,14,15però no s'han publicat informes sobre l'associació de la pressió arterial sistèmica amb la gravetat de la proteinúria i/o albumínúria en gossos amb ERC. Whittemore et al16va esmentar que en gats hi ha una associació significativa entre la proporció d'albúmina urinària: creatinina (UAC), hipertensió i azotèmia, i es preveuen resultats similars en gossos, però l'estudi no va recolzar aquesta conclusió.
És fonamental no només diagnosticar albuminúria i/o proteïnúria, sinó identificar i controlar altres factors que també l'agreugen.17–19Hipertensió sistèmica, molt probablement secundària en gossos ambmalaltia renal,20pot provocar glomeruloesclerosi, atròfia glomerular i glomerulitis proliferativa. Les lesions arteriolars renals hipertensives poden causar degeneració tubular renal i fibrosi intersticial.21
Els assaigs semiquantitatius (p. ex., varetes reactivas) sovint subestimen la proteinúria perquè els gossos amb ERC solen tenir mostres d'orina diluïdes. D'altra banda, la relació UAC està altament correlacionada amb la concentració d'albúmina urinària mesurada per la recollida cronometrada d'orina i corregeix la variabilitat en la diüresi i la concentració d'orina.22,23 En humans, la microalbuminúria es defineix com 30–3{00 mg d'albúmina/g de creatinina, amb una relació UAC de 0,03–0,3 mg/mg.24,25Així, l'objectiu d'aquest estudi era determinar la prevalença i la magnitud de l'albuminúria en gossos amb ERC i investigar si la hipertensió s'associa amb l'augment de l'excreció d'albúmina. Per assolir aquest objectiu, es va desenvolupar un ELISA de captura quantitativa per quantificar l'albúmina en mostres d'orina de gossos amb ERC i es va determinar la relació UAC per avaluar la gravetat de l'albuminúria.
Cistanche per millorarfunció renal
Materials i mètodes
Animals
Tots els procediments que impliquen l'ús d'animals van ser aprovats pel Comitè Ètic per a la Cura i l'Ús d'Animals de l'Escola de Medicina Veterinària de la Universitat de Sa˜o Paulo (protocol núm. 378/2003). El grup control estava format per 39 gossos normotensos clínicament sans d'ambdós gèneres (23 mascles i 16 femelles), d'1 a 5 anys i de diferents races. El grup d'ERC estava format per 40 gossos (20 mascles i 20 femelles), de 2 a 18 anys, i també de diferents races, amb un diagnòstic clínic d'ERC categoritzat en estadis 3 o 4 segons la classificació del sistema d'estadificació proposada per l'International Renal Interest. Societat.26 Els criteris per incloure gossos al grup d'ERC van ser: antecedents i troballes complementàries de laboratori compatibles amb ERC, incloent anèmia no regenerativa, isostenúria i azotèmia renal crònica (concentració sèrica de creatinina Z2,0 mg/dL durant 4 2 mesos). en gossos hidratats), així com sense administració prèvia de medicació antihipertensiva.
Pressió sanguínea
La pressió arterial sistòlica es va mesurar mitjançant el detector de flux Doppler (Doppler Ultrasound Parks Medical Model 811B, Las Vegas, NV, EUA). L'amplada del puny es va triar entre un 30 i un 40 per cent de la circumferència de l'extremitat al lloc de la col·locació. Per a aquest estudi, es va considerar que hi havia hipertensió quan hi havia la mitjana d'almenys 5 mesures diferents realitzades seguidesZ180 mmHg.27 Els gossos es van col·locar i mantenir en un entorn tranquil amb el propietari abans del procediment. El mateix metge va realitzar les mesures de pressió arterial en tots els gossos de l'estudi.
Anàlisi d'orina
Les mostres d'orina es van recollir de manera asèptica mitjançant cistocentesi o cateterisme uretral i es van presentar per a una anàlisi d'orina completa, inclosa l'avaluació microscòpica del sediment d'orina. Es van excloure els animals les mostres d'orina dels quals tenien evidència macroscòpica d'hematúria i/o evidència microscòpica de piúria i bacteriúria. Es van congelar alíquotes del sobrenedant d'orina i es van emmagatzemar a -201C durant un màxim d'1 any per a la posterior determinació de la relació UAC.
Purificació de l'albúmina canina i immunització de conills
En primer lloc, l'albúmina canina liofilitzada (Fracció V, # A9263, Sigma, St Louis, MO, EUA) es va purificar encara més mitjançant cromatografia d'afinitat en columnes Blue Sepharose i Q-sepharose (GE Biotech, Piscataway, NJ, EUA). Posteriorment, es van vacunar per via intramuscular 2 conills
l'albúmina purificada a l'adjuvant de Freund a intervals de quinze dies i la IgG es va aïllar del sèrum.28
Electroforesi i Western blotting d'albúmina canina purificada
Western blotting es va aconseguir mitjançant la modificació d'un protocol descrit anteriorment.29 Breument, es van electroforitzar mostres d'orina no reduïdes d'un gos sa i un gos amb ERC, una mostra de sèrum d'un gos sa i albúmina canina purificada en gels de poliacrilamida de dodecil sulfat de sodi de l'11 per cent.30Les proteïnes es van transferir a làmines de membrana de nitrocel·lulosa ({{0}}, 22 mm de mida de porus, Sigma) a 15 V durant 2 h, mitjançant un sistema de transferència semisec (BioRad, Hercules, CA, EUA). Les membranes es van esbandir amb tampó de rentat (10 mM Tris, 150 mM NaCl, 0,1 per cent [v/v] Tween 20, pH 7,5) i després es van incubar amb una solució de bloqueig (5 per cent [v] /v] gelatina de pell de peix d'aigua freda [Sigma G7765] dissolta en tampó de rentat) durant 18 h a 41ºC. Les membranes es van incubar amb anticossos dissolts en tampó de rentat que contenia un 0, 5 per cent (v/v) de gelatina de peix durant 2 h a temperatura ambient sota agitació. Per avaluar l'especificitat dels anticossos contra l'albúmina canina purificada, les membranes es van incubar amb albúmina anti-canina IgG total de conill. Després del rentat, les tires es van incubar amb conjugat IgG-peroxidasa anti-conill de cabra (Sigma A6154) durant 2 h a temperatura ambient amb agitació. Tots els anticossos i conjugats es van diluir en un tampó de rentat que contenia un 0,5 per cent (v/v) de gelatina de peix. La reacció es va desenvolupar tal com s'ha descrit anteriorment.31
ELISA per albúmina canina en mostres d'orina
Per mesurar l'albúmina a les mostres d'orina, es van recobrir plaques de microtitulació (Maxisorp-Nunc Immunoplate, Montreal, Canadà) durant la nit a 41 °C amb una solució d'100 mg/mL d'albúmina anti-canina IgG de conill dissolta en 0, 1 M tampó carbonat (pH 9,6) i després bloquejat amb un 3% de caseïna dissolta en tampó carbonat. Es van construir corbes estàndard de sis punts per a l'albúmina utilitzant albúmina canina purificada, diluïda en sèrie (a concentracions de 250.0, 83,3, 27,8, 9,3, 3,1 i 1,0 ng/mL) en incubació. tampó (0,05 per cent de Tween 20 i 0,6 per cent de gelatina de peix en solució salina tamponada amb fosfat, pH 7,4). Les mostres d'orina també es van diluir adequadament (1:100, 1:300, 1:500, 1:1000, 1:10,000 i 1:50.000) en tampó d'incubació de manera que les reaccions es produeixen dins del rang lineal de la corba estàndard (1,03-250 ng/mL). Les mostres i els estàndards es van analitzar per triplicat. Es va utilitzar el mateix anticòs com a anticòs secundari, però es va conjugar amb biotina29,32 i es va utilitzar a una concentració de 3,15 ng/mL, dissolt en tampó d'incubació. A continuació, es van incubar les plaques amb 100 ng/ml de conjugat avidina-peroxidasa (Sigma A3151) i després amb un reactiu de desenvolupament de color fresc, tal com es descriu en un altre lloc.33 La concentració d'albúmina d'orina per a cada mostra es va extrapolar de la corba estàndard i els resultats es van corregir per la dilució inicial de la mostra.
Cistanche perronyó
Proporcions UAC i proteïna urinària: creatinina (UPC).
La concentració total de proteïnes d'orina (mg/dL) es va mesurar mitjançant un assaig Coomassie G{{0}}34; cada mostra es va analitzar per triplicat i es van obtenir valors a partir d'una 8-corba estàndard de punts (0.{025, 0.075, {{16} }},10, 0,50, 1,0, 1,5, 2,0, 2,5 i 3,0 mg/mL). La concentració de creatinina en orina (mg/dL) es va determinar mitjançant un assaig d'àcid pícric35 en un analitzador de química clínica automatitzada (Liasys, AMS, Roma, Itàlia) i es va executar amb controls de qualitat (Precinorm Uplus i Precipath Uplus, Roche Diagnostics, Mannheim, Alemanya). La UAC es va determinar mitjançant la concentració d'albúmina (mg/dL) obtinguda per ELISA. Com que totes les anàlisis es van informar com a mg/dL, UAC i UPC es van expressar sense unitats.
Anàlisi estadística
La distribució gaussiana es va investigar mitjançant la prova de Kolmogorov-Smirnov. Les proporcions UPC i UAC no estaven distribuïdes normalment, de manera que es va utilitzar la prova de Mann-Whitney en comparacions. Per a l'anàlisi estadística es va utilitzar el paquet de programari SigmaStat 3.1 (Chicago, IL, EUA). Les diferències amb P 0,05 es van considerar estadísticament significatives.
Resultats
L'albúmina anti-canina IgG de conill era específica per a l'albúmina canina purificada basada en Western blotting (figura 1), perquè només es va trobar una banda de proteïnes de massa molecular relativa similar a la de l'albúmina canina a tots els carrils. El protocol ELISA utilitzat per mesurar la concentració d'albúmina en mostres d'orina va ser extremadament sensible, amb un límit de detecció d'aproximadament 0,5 ng/mL.
La relació UPC en gossos normotensos clínicament sans (n {{0}}; rang, 0.{04–0,29; mediana, 0 .10) va ser significativament menor (P o.0{{30}}01) que en gossos amb ERC (n=40; rang, 0,13-25,08 ; mediana, 1.86). El seixanta-cinc per cent (26/40) dels gossos amb ERC tenia UPC 4 1,0, el 20 per cent (8/40) tenia una UPC entre 0,5 i 1,0 i el 15 per cent (6/40) tenia una UPC o 0,5 (taula 1). La majoria (38/40, 95 per cent) dels gossos amb CKD tenien una ràtio UPC Z0,2.
La proporció de UAC en gossos clínicament sans (rang, {{0}}.0005–0.01; mediana, 0,002) també va ser significativament menor (P o.0001) que en gossos amb ERC (rang, 0,002-7,99; mediana, 0,38) (figura 2). La proporció de UAC va oscil·lar entre 0,03 i 0,3 (microalbuminúria) en el 32,5 per cent (13/40) dels gossos amb ERC i va ser de 4 0,3 (macroalbuminúria) en el 50 per cent (20/40) dels gossos amb ERC (taula 1) ).
Es va detectar hipertensió en 24/40 (60 per cent) de gossos amb ERC. Els gossos amb hipertensió tenien entre 2 i 18 anys (mitjana més -SD, 9,1 més - 3,7 anys), mentre que els gossos normotensos oscil·laven entre 2 i 12 anys (7,9 més - 3,3 anys). ).
Tenint en compte la microalbuminúria com el rang UAC definit per als humans ({{0}}.{03–0,3), la microalbuminúria es va detectar amb més freqüència en normotensos (7/16, 43,7 per cent) que en hipertensos (6). /24, 25 per cent ) gossos amb ERC. Per contra, la macroalbuminúria es va observar amb més freqüència en gossos hipertensos (15/24, 62,5 per cent) que en gossos normotensos (5/16, 31,3 per cent) amb ERC. No es va observar albuminúria en 3/24 (12,5 per cent) de gossos hipertensos i en 4/16 (25,0 per cent) de gossos normotensos amb ERC (taula 1).
La relació UAC en gossos hipertensos amb ERC (n {{0}}; rang, {{10}}.006–7,99; mediana, 1,72 ) va ser significativament més gran (P =.0183) que en gossos normotensos amb CKD (n=16; rang, 0,002-4,83; mediana, 0,10) (figura 3). Es va observar hipertensió en 6/13 (46,1%) gossos microalbuminúrics i en 15/20 (75%) gossos macroalbuminúrics amb CKD. No es va observar cap diferència significativa (P =,062) en la relació UPC entre hipertensos (n=24; rang, 0,20-25,08; mediana, 3,07) i normotensos (n=16; rang, 0,13–4,70; mediana, 1,10) gossos amb ERC.
Discussió
Les proporcions de UAC obtingudes en gossos clínicament sans mitjançant la nostra tècnica ELISA de captura quantitativa eren similars a les informades per a persones sanes36,37i gats.38La magnitud de l'albuminúria en gossos amb ERC, avaluada per la UAC, va ser estadísticament superior a la dels gossos control sans. Tenint en compte que els gossos amb ERC es van classificar com a estadis 3 i 4 de la malaltia, la major magnitud d'albumínúria en aquest grup podria estar correlacionada amb la taxa de progressió de la malaltia renal, tal com es va demostrar anteriorment en rates i humans.3,4
La meitat dels gossos amb CKD tenien concentracions d'albúmina en l'orina en el rang macroalbuminúric, com s'esperaria, però el 32,5% dels gossos amb CKD eren microalbuminúrics i el 17,5% normoalbuminúrics. Per tant, en aquest darrer grup, l'ús de mètodes rutinaris per detectar la microalbuminúria podria ser d'algun benefici. A més, les proves per detectar la microalbuminúria es podrien utilitzar per controlar el tractament i seguir la progressió de la malaltia no només en gossos microalbuminúrics sinó també en gossos normoalbuminúrics amb ERC. L'ús d'aquestes proves en gossos normoalbuminúrics podria ajudar els metges a reconèixer l'aparició precoç de l'albuminúria i introduir les mesures terapèutiques adequades tan bon punt es detecti; d'altra banda, en gossos microalbuminúrics, l'objectiu seria afegir nous fàrmacs al règim de tractament i/o augmentar la dosi dels fàrmacs actuals per reduir la magnitud de l'albuminúria i, per tant, retardar la seva progressió a macroalbuminúria.
The data reported herein that all dogs with CKD and macroalbuminuria also had a UPC>1.0 pot suggerir que quan la macroalbuminúria ja s'ha manifestat, els valors UPC es poden utilitzar per als propòsits esmentats anteriorment, ja que els gossos han progressat a una proteinúria manifesta; seria innecessari utilitzar proves tan sensibles com l'ELISA. La majoria de gossos amb ERC amb proporcions UPC entre 0,5 i 1.0 presentaven microalbuminúria i la majoria dels que tenien UPC< 0.5="" were="" no="" albuminuria.="" these="" findings="" suggest="" that="" upc="" values="" between="" 0.5="" and="" 1.0="" reflect="" the="" presence="" of="" microalbuminuria.="" for="" upc=""><0.5, the="" specific measurement="" of="" albuminuria="" would="" be="" recommended to="" detect="" the="" initial="" development="" of="">
La hipertensió es va diagnosticar en el 60 per cent dels gossos amb CKD, una troballa d'acord amb estudis anteriors.20,39,40Un alt percentatge (62,5 per cent) de gossos amb hipertensió tenia ERC macroalbuminúrica. La pressió arterial sistòlica alta estava present en el 46,1% dels gossos amb ERC microalbuminúrica. Com que la proteinúria s'associa amb un major risc de desenvolupament de la crisi urèmica, progressió de la ERC i mort5, els tractaments dissenyats per disminuir la hipertensió podrien frenar la progressió de la insuficiència renal i allargar la supervivència en gossos hipertensos amb ERC. La comparació entre els valors de UAC en gossos normotensos i hipertensos amb ERC va demostrar ser estadísticament significativa, demostrant tant la probable relació entre aquests paràmetres com els efectes adversos que podria tenir la pressió arterial sistòlica elevada en el desenvolupament de l'albuminúria, similar al que s'ha demostrat per a els éssers humans.41–43
Es podrien plantejar preguntes sobre les diferències en els valors de UAC entre gossos hipertensos i normotensos amb ERC en aquest estudi, ja que es podrien atribuir a una distribució desigual dels animals; tanmateix, tots els gossos estaven en els estadis 3 i 4 de la malaltia, i la gravetat de l'anèmia i l'azotèmia eren similars per als dos grups, d'acord amb les etapes avançades de la malaltia.
En medicina humana, la troballa concurrent de microalbuminúria i hipertensió generalment demana l'adopció d'estratègies terapèutiques específiques. L'ús d'inhibidors de l'enzim convertidor d'angiotensina en humans amb diabetis mellitus tipus 1, hipertensió i microalbuminúria pot disminuir el curs progressiu a la proteinúria massiva.44Aquest mateix tractament també és beneficiós en diabètics normotensos microalbuminúrics.45,46En rates hipertenses amb restesronyons,El tractament amb enalapril va mantenir la pressió arterial sistèmica a nivells normals i va limitar dràsticament el desenvolupament de proteinúria i lesions glomerulars.47Els nostres resultats indiquen que les proves de microalbuminúria es poden utilitzar com a eina de seguiment per avaluar la progressió de la malaltia i establir enfocaments terapèutics i preventius en pacients canins, especialment quan la microalbuminúria empitjora gradualment a causa de la hipertensió.
En conclusió, les proporcions de UAC en gossos hipertensos amb ERC en el nostre estudi van ser més altes que les dels gossos normotensos, cosa que suggereix que la pressió sistòlica elevada podria estar associada a canvis en l'estructura glomerular. Les proves dissenyades per detectar la microalbuminúria poden ser útils en gossos hipertensos amb ERC i UPC 1.0 per detectar l'aparició de l'albuminúria o per controlar la dosi de fàrmacs antihipertensius. Una vegada que la macroalbuminúria és oberta, la mateixa proporció UPC es pot utilitzar amb el mateix propòsit.
Cistanche per millorarfunció renal
Agraïments
Amb el suport d'una subvenció (#03/10,426-3) de la Fundaca˜o de Amparo a` Pesquisa do Estado de Sa˜o Paulo – FAPESP.
Divulgació: els autors han indicat que no tenen afiliacions o implicació financera amb cap organització o entitat amb un interès financer en, o en competència financera amb, el tema o els materials tractats en aquest article.
De: 'Avaluació de l'albuminúria i la seva relació amb la pressió arterial en gossos amb malaltia renal crònica' perÀngela Bacic1, Marcia M. Kogika1, et al
-----Veterari Clin Pathol39/2 (2010) 203–209 c 2010 Societat Americana de Patologia Clínica Veterinària DOI:10.1111/j.1939-165X.2009.00207.x
Referències
1. Burton C, Harris KP. El paper de la proteinúria en la progressió de la insuficiència renal crònica. Am J Kidney Dis. 1996;27:765–775.
2. Remuzzi G. Naturalesa nefropàtica de la proteinúria. Curr Opin Nephrol Hypertens. 1999;8:655–663.
3. Praga M, Hernandez E, Montoyo C, et al. Efectes beneficiosos a llarg termini de la inhibició de l'enzim convertidor d'angiotensina en pacients amb proteinúria nefròtica. Am J Kidney Dis. 1992;20:240–248.
4. Williams PS, Fass G, Bone JM. La patologia renal i la proteinúria determinen la progressió de la insuficiència renal crònica lleu/moderada no tractada. QJ Med. 1988;67:343–354.
5. Jacob F, Polzin DJ, Osborne CA, et al. Avaluació de l'associació entre la proteinúria inicial i la taxa de morbiditat o mort en gossos amb insuficiència renal crònica natural. J Am Vet Med Assoc. 2005;226:393–400.
6. Viberti GC, Hill RD, Jarrett RJ, et al. La microalbuminúria com a predictor de la nefropatia clínica en la diabetis mellitus insulinodependent. Lanceta. 1982;1: 1430–1432.
7. Mogensens CE, Christensen CK. Predicció de la nefropatia diabètica en pacients dependents d'insulina. N Engl J Med. 1984;311:89–93.
8. Lees GE, Jensen WA, Simpson DF, et al. L'albumínúria persistent precedeix l'aparició de la proteinúria oberta en gossos mascles amb nefropatia hereditària lligada a X. J Vet Intern Med. 2002;16:353.
9. Grauer GF, Oberhauser EB, Basaraba RJ, et al. Desenvolupament de microalbuminúria en gossos amb malaltia del cuc del cor. J Vet Intern Med. 2002;16:352.
10. Vaden SL, Jensen WA, Longhofer SL, et al. Estudi longitudinal de la microalbuminúria en terriers de blat de revestiment tou. J Vet Intern Med. 2001;15:300.
11. Ortega TM, Feldman EC, Nelson RW, et al. Pressió arterial sistèmica i relació proteïna/creatinina d'orina en gossos amb hiperadrenocorticisme. J Am Vet Med Assoc. 1996;209:1724–1729.
12. Cavalcante CZ, Kogika MM, Simo˜es DMN, et al. Microalbuminúria en gossos amb hiperadrenocorticisme i relació amb la pressió arterial. J Vet Intern Med. 2007;21:647.
13. Cavalcante CZ, Kogika MM, Santoro ML, et al. Avaluació de l'electroforesi de proteïnes urinàries i albuminúria en gossos amb hiperadrenocorticisme i relació amb la pressió arterial sistèmica. J Vet Intern Med. 2008;22:798–799.
14. Struble AL, Feldman EC, Nelson RW, et al. Hipertensió sistèmica i proteinúria en gossos amb diabetis mellitus. J Am Vet Med Assoc. 1998;213: 822–825.
15. Kogika MM, Cavalcante CZ, Simo˜es DMN, et al. Microalbuminúria en gossos amb diabetis mellitus. J Vet Intern Med. 2007;21:647.
16. Whittemore JC, Miyoshi Z, Jensen WA, et al. Associació de la microalbuminúria i la relació albúmina-creatinina d'orina amb malaltia sistèmica en gats. J Am Vet Med Assoc. 2007;230: 1165–1169.
17. Brown SA, Walton CL, Crawford P, Bakris GL. Efectes a llarg termini dels règims antihipertensius sobre l'hemodinàmica renal i la proteinúria. Ronyó Int. 1993;43:1210–1218.
18. Brown SA, Finco DR, Brown CA. Avaluació dels efectes de la inhibició de l'enzim convertidor d'angiotensina amb enalapril en gossos amb insuficiència renal crònica induïda. Am J Vet Res. 2003;64:321–327.
19. Grauer GF, Greco DS, Getzy DM, et al. Efectes d'enalapril versus placebo com a tractament per a la glomerulonefritis idiopàtica canina. J Vet Intern Med. 2000;14:526–533.
20. Ross LA. Fisiopatologia i maneig de la hipertensió sistèmica associada adisfunció renal. A: Osborne CA, Finco DR, eds. Nefrologia i Urologia Canina i Felina. Baltimore, MD: Lippincott Williams & Wilkins; 1995: 392–399
21. Bartges JW, Willis AM, Polzin DJ. Hipertensió imalaltia renal. Veterinària Clin North Am Small Anim Pract. 1996;26:1331–1345.
22. Bakker AJ. Detecció de microalbuminúria. L'anàlisi de la corba característica de funcionament del receptor afavoreix la relació entre albúmina i creatinina sobre la concentració d'albúmina. Atenció a la diabetis. 1999;22:307–313.
23. Harvey JN, Hood K, Platts JK, et al. Predicció de la taxa d'excreció d'albúmina a partir de la relació albúmina-creatinina. Atenció a la diabetis. 1999;22:1597–1598.
24. Weir GC, Nathan DM, Singer DE. Normes d'atenció a la diabetis. Atenció a la diabetis. 1994;17:1514–1522.
25. Sabharwal RK, Singh P, Arora MM, Somani BL, Ambade V. Incidència de microalbuminúria en pacients hipertensos. Indian J Clin Biochem. 2008;23:71–75.
26. Polzin DJ, Osborne CA, Ross S. Malaltia renal crònica. A: Ettinger SJ, Feldman E, eds. Llibre de text de medicina interna veterinària. 6a ed. Filadèlfia, PA: Saunders; 2005: 1767–1785.
27. Brown S, Atkins C, Bagley R, et al. Pautes per a la identificació, avaluació i gestió de la hipertensió sistèmica en gossos i gats. J Vet Intern Med. 2007;21:542–558.
28. Mckinney MM, Parkinson A. Un procediment senzill i no cromatogràfic per purificar les immunoglobulines del sèrum i del líquid ascites. J Mètodes Immunol. 1987;96:271–278.
29. Harlow E, Lane D. Antibodies: A Laboratory Manual. Nova York, NY: Cold Spring Harbor Laboratory; 1988: 471–510.
30. Laemli Regne Unit. Escissió de proteïnes estructurals durant el muntatge del cap del bacteriòfag T4. Naturalesa. 1970;227:80–685.
31. Pukac LA, Carter JE, Morrisonn KS, et al. Millora del senyal colorimètric de diaminobenzidina en immunoblot. Biotècniques. 1997;23:385–388.
32. Olovsson M, Larsson A. Etiquetatge amb biotina d'anticossos de pollastre i el seu ús posterior en ELISA i immunohistoquímica. Comp Immunol Microbiol Infect Dis. 1993;16:145–152.
33. Santoro ML, Barbaro KC, Flores da Rocha TR, et al. Aïllament simultani del factor plaquetari 4 i del complex de glicoproteïna IIb-IIIa de plaquetes de conill, i caracterització d'anticossos específics de pollastre per analitzar-los. J Mètodes Immunol. 2004;284:55–72.
34. Bradford MM. Un mètode ràpid i sensible per a la quantificació de quantitats de micrograms de proteïna utilitzant el principi d'unió proteïna-colorant. Bioquímica anal. 1976;72:248–254.
35. Lustgarden JA, Wenk RE. Mètode cinètic senzill, ràpid i per mesurar la creatinina sèrica. Clin Chem. 1972;8:1419–1422.
36. Lima CSP, Bottini PV, Garlipp CR, et al. Precisió de la relació entre albúmina urinària i creatinina com a predictor de l'albuminúria en adults amb anemia falciforme. J Clin Pathol. 2002;55:973–975.
37. Jefferson SA, Greene MA, Smith RF, et al. Relació albúmina d'orina a creatinina-resposta a l'exercici en diabetis. Arch Dis Child. 1985;60:305–310.
38. Syme HM, Markwell PJ, Pfeiffer D, et al. Supervivència dels gats amb cròniques naturalsinsuficiència renalestà relacionada amb la gravetat de la proteinúria. J Vet Intern Med. 2006;20:528–535.
39. Jacob F, Polzin DJ, Osborne CA, et al. Associació entre la pressió arterial sistòlica inicial i el risc de desenvolupar una crisi urèmica o de morir en gossos amb insuficiència renal crònica. J Am Vet Med Assoc. 2003;222: 322–329.
40. Cowgil L, Kallet A. Hipertensió sistèmica. A: Kirk R, ed. Teràpia Veterinària actual IX. Filadèlfia, PA: WB Saunders; 1986: 360–364.
41. Ruilope LM, Rodicio JL. Rellevància clínica de la proteinúria i la microalbuminúria. Curr Opin Nephrol Hypertens. 1993;2:962–967.
42. Ritchie CM, Mcknight JA, Hadden DR, et al. Prevalència d'hipertensió i albuminúria en una clínica de diabetis d'un hospital docent. Diabetes Res Clin Pract. 1995;27:69–76.
43. Campos-Pastor MM, Escobar-Jimenez F, Mezquita P, et al. Factors associats a la microalbuminúria en la diabetis mellitus tipus 1: un estudi transversal. Diabetes Res Clin Pract. 2000;48:43–49.
44. Hermans MP, Birchard SM, Colin I, et al. Reducció a llarg termini de la microalbuminúria després de 3 anys d'inhibició de l'enzim convertidor d'angiotensina per perindopril en pacients diabètics hipertensos tractats amb insulina. Am J Med. 1992;92(Suppl 4B):102S–107S.
45. Mathiesen ER, Hommel E, Giese J, et al. Eficàcia de captopril en l'ajornament de la nefropatia en pacients diabètics insulinodependents normotensos amb microalbuminúria. BMJ. 1993;303:81–87.
46. Marre M, Chatelier G, Leblanc I, et al. Prevenció de la nefropatia diabètica amb enalapril en pacients diabètics normotensos amb microalbuminúria. BMJ. 1999;302:210–216.
47. Anderson S, Rennke HG, Brenner BM. Avantatge terapèutic d'inhibidors de l'enzim convertidor en la detenció progressivamalaltia renalassociada a la hipertensió sistèmica a la rata. J Clin Invest. 1986;77:1993–2000.
