Permeabilitat intestinal i depressió en pacients amb malaltia inflamatòria intestinalⅠ
Dec 20, 2023
Resum: La depressió és un problema de salut global que requereix un diagnòstic precoç i precís per garantir un accés ràpid al tractament adequat. L'atenció recent s'ha centrat a analitzar l'eix cervell-intestí-microbiota entre múltiples camins psicopatològics. La barrera intestinal juga un paper clau i les disfuncions que es produeixen a aquest nivell tenen implicacions per a la salut mental. El present estudi pretén investigar el paper dels biomarcadors de permeabilitat intestinal, és a dir, la calprotectina, la zonulina, la proteïna d'unió a lipopolisacàrids (LBP) i la proteïna d'unió a àcids grassos intestinals (I-FAB), en la depressió en pacients amb malaltia inflamatòria intestinal (IBD). ).
Aquest és el primer estudi d'aquest tipus que es realitza a Romania, Europa de l'Est, amb èmfasi en pacients amb malaltia de Crohn i colitis ulcerosa. Les correlacions identificades entre depressió i calprotectina i depressió i LBP tenen el potencial d'aclarir el procés de diagnòstic ràpid de la depressió amb l'ajuda de biomarcadors. Atès que la depressió està correlacionada amb una disminució de la qualitat de vida dels pacients hospitalitzats amb MII, la necessitat d'accés a tractaments adequats ha de ser urgent.
1. Introducció
La depressió és una discapacitat individual, professional i social associada a morbilitats somàtiques [1,2] i amb un alt risc de mortalitat per suïcidi [3]. Tanmateix, l'accés a especialistes, un diagnòstic correcte i una cura eficaç són limitats [4]. Un diagnòstic precoç i precís [5,6], així com una selecció personalitzada del tractament [7], són necessaris per disminuir el patiment i la càrrega econòmica de la malaltia [3]. Segons els criteris diagnòstics del Manual Diagnòstic i Estadístic dels Trastorns Mentals (DSM V) [8], la depressió és un trastorn afectiu amb un grup heterogeni de símptomes. Per ser diagnosticat, cal la presència de cinc dels nou símptomes següents: estat d'ànim deprimit, falta de plaer, dificultat per dormir i gana, nivells d'energia baixos, canvis cognitius, sentiments de culpa i culpabilitat i idees suïcides. No es coneixen els mecanismes fisiopatològics per beneficiar-se d'un tractament eficaç. S'han posat en dubte diversos mecanismes, però les teories encara estan en desenvolupament.
Així, s'han investigat les disfuncions de l'eix hipotàlem-hipòfisi, neurotransmissors, nervi vag, metabòlits d'àcids grassos de cadena curta, triptòfan, factors inflamatoris i eix cervell-intestí-microbiota [9-12]. S'ha demostrat que els trastorns relacionats amb l'estrès no només provoquen canvis en la composició de la microbiota intestinal a través de l'eix hipotàlem-hipofisi-adrenal, sinó que també l'intestí afecta el
sistema nerviós central mitjançant l'estimulació vagal, la permeabilitat intestinal i l'alliberament de compostos inflamatoris i antiinflamatoris i canvis en els agents circulants a la sang [13]. Durant les últimes dues dècades, l'estudi de la implicació de l'eix cervell-intestí-microbiota en els trastorns mentals ha guanyat impuls [9,14]. En aquest context, el paper de la síndrome de l'intestí permeable ha rebut més atenció [15,16].
La barrera intestinal té el paper principal en la digestió i l'absorció de nutrients; secundàriament, controla estrictament el transport d'antígens de la llum a la submucosa, i manté l'equilibri entre la tolerància i la resposta immune que provoca la inflamació. La integritat de la barrera intestinal es pot veure afectada per la dieta, la disbiosi de la microbiota intestinal o per altres factors. Aquests tenen el potencial de causar immuneactivació mitjançant la translocació d'antígens microbians i metabòlits. Actualment, la zonulina sèrica, la proteïna d'unió d'àcids grassos intestinals (IFABP/FABP2) i el LBP, així com l'albúmina fecal, la calprotectina i la zonulina, s'han analitzat com a permeabilitat intestinal. marcadors [17].La calprotectina és una proteïna que uneix calci i zinc, inicialment aïllada dels leucòcits; és útil per diferenciar la malaltia inflamatòria intestinal de la síndrome de l'intestí irritable. Té un paper important durant la inflamació i es considera una proteïna de fase aguda [18]. ].
Els valors normals estan entre 10 i 50 o 60 (ug/g). Valors per sobre de 200 (ug/g) poden indicar una malaltia inflamatòria, i valors per sobre de 500-600 (ug/g) sens dubte indiquen l'existència d'una malaltia intestinal [19]. La proteïna d'unió a lipopolisacàrids (LBP) és un component lipídic essencial de la membrana externa. de bacteris Gram-negatius [20], que causa endotoxèmia [21]. Els LBPis produïts pels hepatòcits, el teixit adipós i les cèl·lules intestinals funcionen com una proteïna de fase I aguda i tenen un paper important en la resposta immune [22]. El LBP es presenta en sèrum a concentracions de 5-15 mg/ml i augmenta de 10 a 50 vegades durant la reacció en fase aguda. La funció de barrera es manté per la zonulina, coneguda com l'únic modulador fisiològic de les unions intracel·lulars properes (TJ) [15,23, 24]. La zonulina obre de manera reversible la TJ, actuant sobre el receptor 2 activat per proteasa situat a l'espai intracel·lular del complex d'unió [25]. El valor mitjà de la zonulina és de 34 ng/ml [26].
La proteïna d'unió d'àcids grassos intestinals (I-FABP/FABP2) és una de les nou FABP diferents identificades, que pertanyen a una superfamília de proteïnes que s'uneixen als lípids. El paper principal és el transport intracel·lular i la regulació de l'absorció d'àcids grassos [27]. Quan es produeix dany a la barrera intestinal epitelial, I-FABP s'allibera a la circulació i la seva concentració plasmàtica augmenta [28]. El valor llindar de l'I-FAPB es considera 2 ng/mL. En aquest context, ens vam proposar investigar el paper dels biomarcadors de permeabilitat intestinal en la depressió en pacients amb malaltia inflamatòria intestinal (IBD) mitjançant (i) examinant la relació entre calprotectina, zonulina, LBP. , IFABP/FABP2 i depressió i (ii) avaluant la influència de la depressió en la qualitat de vida.
2. Materials i Mètodes
2.1. Grup d'Estudi
El grup inicial va incloure 60 pacients de la Clínica de Gastroenterologia de l'Hospital Clínic del Comtat de Constanta entre abril i juny de 2021. Els criteris d'inclusió van ser un diagnòstic d'IBD, a partir de 18 anys, coneixements de lectura i escriptura i acord per participar en l'estudi. Els criteris d'exclusió eren la denegació del consentiment, la depressió severa o altres trastorns mentals greus per als quals se'ls va dirigir al servei psiquiàtric especialitzat. Després del consentiment informat, els pacients van ser contactats per telèfon per un investigador per aplicar un qüestionari sociodemogràfic sobre depressió i un qüestionari sobre qualitat de la depressió. En l'estudi es van incloure 30 pacients que van passar per totes les etapes de l'estudi.
2.2. Qüestionaris utilitzats
El qüestionari de salut del pacient-9 (PHQ-9) [29] es va aplicar als participants per avaluar el nivell de depressió que els afectava. Aquest qüestionari estàndard conté nou ítems als quals cal respondre en funció dels símptomes que ha tingut el pacient durant els darrers 14 dies. Les puntuacions es classifiquen de la següent manera: 1-4 depressió mínima, 5-9 depressió lleu, 10-14 depressió moderada, 15-19 depressió moderadament severa i 20-27 depressió severa. De la mateixa manera, vam aplicar un qüestionari de qualitat de vida (EQ{{{ 14}}D) [30,31] per recollir dades sobre la qualitat de vida. Els elements que inclou aquesta eina són la mobilitat del pacient, l'autocura, la participació en les activitats habituals, el dolor o malestar i l'ansietat o depressió experimentada. Els ítems es responen en una escala de cinc nivells.
2.3. Recollida de mostres i anàlisi de laboratori
Es van recollir mostres serològiques de zonulina, IFABP/FABP2, LBP i mostres fecals de calprotectina segons el protocol de recollida i transport de mostres biològiques potencialment infeccioses. Les mostres de sèrum es van recollir mitjançant punció venosa, dejuni i al vacutainer amb un drap activador. Les mostres fecals es van recollir de femtes emeses espontàniament en recipients sense medi portador. El sèrum es va provar per a la zonulina amb MyBioSource Kit, Inc. (San Diego, CA, EUA). i IFABP/FABP2 i LBP amb Wuhan Fine Biotech Co., Ltd. Kit (Wuhan, Xina). Les mostres es van provar per calprotectina amb el kit EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG. Totes les proves es van realitzar mitjançant una prova d'immunosorbent relacionada amb l'enzim (ELISA) en un analitzador ADALTIS GEN-4 i Victor X4 segons les instruccions del fabricant del kit.
El fabricant del kit només va definir l'interval de valors normals per a la calprotectina de la següent manera: Menys o igual a 50.0 mcg/g com a normal, 50,1– 120,0 mcg/g com a valor límit i superior o igual a 120,1 mcg/g com a positiu per a malalties intestinals. Per a la zonulina, el fabricant del kit de reacció no va especificar cap límit inferior de detecció. El límit inferior de detecció per al kit IFABP/FABP2 va ser de 0,156 ng/mL, 3,125 ng/mL per a LBP i 3,125 ng/mL per a calprotectina. Per a la zonulina, I-FABP/FABP2 i LBS/LBP, el fabricant del kit no va comunicar un rang de valors normals i es van utilitzar els valors utilitzats per altres autors en els seus estudis. El sèrum es va extreure de cada mostra de sang per centrifugació a 3000 × g. durant 30 minuts amb una centrífuga Thermo Scientific SL16R.
Tots els sèrums obtinguts es van mantenir congelats a -200 ◦C fins que es van realitzar les anàlisis. Per a IFABP/FABP2 i LBP, les mostres es van diluir a 1/2 amb un tampó de dilució de mostra abans de la prova. Les mostres de femta es van mantenir a -20 ◦ C fins al dia de la prova. L'extracció de mostres de femta es va realitzar mitjançant un tampó d'extracció de 980 iui juntament amb 20 mg de femta, es va agitar durant 30 s i després es va centrifugar a 2000 × g durant 10 min amb la centrífuga Thermo Scientific SL16R. La dilució de les mostres es va realitzar després amb un tampó de mostra de 980 iu i un sobrenedant d'extracció de 20 iu.
Per als quatre marcadors, es van utilitzar microplaques amb 96 pous recoberts amb anticossos de captura: anticossos anti-calprotectina, anticossos anti-IFABP/FABP2, anticossos anti-LBP o anticossos anti-zonulina. Els principis de la prova eren els mateixos basats en la tecnologia de proves immunològiques relacionades amb enzims (ELISA). Més tard es van afegir mostres estàndard, mostres de prova i anticossos de detecció conjugats amb biotina als pous. Es van utilitzar substrats de TMB (3,30,5,50-tetrametilbenzidina) per visualitzar la reacció enzimàtica HRP (peroxidasa de rave picant). HRP va catalitzar TMB per produir un producte blau que va canviar a groc després de l'addició d'una solució d'aturada d'àcid.
La densitat de la taca groga era proporcional a la quantitat de mostra capturada a la placa. La intensitat del color es va mesurar a 450 nm al lector de microplaques i després es va calcular la concentració objectiu.
2.4. Anàlisi estadística
L'anàlisi estadística es va realitzar mitjançant el programari d'estadístiques IBM SPSS versió 23 (Armonk, NY, EUA: IBM Corp.). Les dades es presenten com a mediana i IQR (interquartilrang P75–P25) per a variables contínues en cas de distribucions esbiaixades o com a percentatges per a variables categòriques.
Com que el test de normalitat de Shapiro-Wilk va indicar, en el cas de les variables contínues analitzades, valors estadístics del test la probabilitat (p) del qual era inferior al nivell de significació {{0}},05, la condició de la normalitat no es va complir, llevat de les variables LBP i PHQ 9, per a les quals p >=0,05. Vam considerar que l'enfocament anonparamètric de l'estudi de la correlació entre les variables en qüestió, amb la presentació del coeficient de correlació rho de Spearman (ρ) i la probabilitat (p) associada a aquest, era més adequat. El nivell de significació es va establir en 0,05.
Herbes medicinals naturals per alleujar el restrenyiment-Cistanche
Cistanche és un gènere de plantes paràsites que pertany a la família de les Orobanchaceae. Aquestes plantes són conegudes per les seves propietats medicinals i s'han utilitzat en la medicina tradicional xinesa (MTC) durant segles. Les espècies de Cistanche es troben predominantment a les regions àrides i desèrtiques de la Xina, Mongòlia i altres parts de l'Àsia Central. Les plantes de Cistanche es caracteritzen per les seves tiges carnoses i groguenques i són molt apreciades pels seus beneficis potencials per a la salut. En TCM, es creu que Cistanche té propietats tòniques i s'utilitza habitualment per nodrir el ronyó, millorar la vitalitat i donar suport a la funció sexual. També s'utilitza per abordar problemes relacionats amb l'envelliment, la fatiga i el benestar general. Tot i que Cistanche té una llarga història d'ús en medicina tradicional, la investigació científica sobre la seva eficàcia i seguretat és contínua i limitada. Tanmateix, se sap que conté diversos compostos bioactius com ara glicòsids feniletanoides, iridoides, lignans i polisacàrids, que poden contribuir als seus efectes medicinals.
Wecistanche'scistanche en pols, pastilles de cistanche, càpsules de cistanche, i altres productes es desenvolupen utilitzantdesertcistanchecom a matèries primeres, totes les quals tenen un bon efecte per alleujar el restrenyiment. El mecanisme específic és el següent: Es creu que Cistanche té beneficis potencials per alleujar el restrenyiment en funció del seu ús tradicional i de determinats compostos que conté. Tot i que la investigació científica específicament sobre l'efecte de Cistanche sobre el restrenyiment és limitada, es creu que té múltiples mecanismes que poden contribuir al seu potencial per alleujar el restrenyiment. Efecte laxant:Cistanches'ha utilitzat durant molt de temps a la medicina tradicional xinesa com a remei per al restrenyiment. Es creu que té un efecte laxant lleu, que pot ajudar a promoure els moviments intestinals i induir el restrenyiment. Aquest efecte es pot atribuir a diversos compostos de Cistanche, com ara glicòsids feniletanoides i polisacàrids. Humitejar els intestins: basat en l'ús tradicional, es considera que Cistanche té propietats hidratants, dirigides específicament als intestins. La promoció de la hidratació i la lubricació dels intestins pot ajudar a suavitzar les eines i facilitar el pas, alleujant així el restrenyiment. Efecte antiinflamatori: el restrenyiment de vegades es pot associar amb una inflamació del tracte digestiu. Cistanche conté determinats compostos, inclosos els glicòsids feniletanoides i els lignans, que es creu que tenen propietats antiinflamatòries. En reduir la inflamació als intestins, pot ajudar a millorar la regularitat del moviment intestinal i alleujar el restrenyiment.
