Propietats neuroprotectores de l'{0}}aminopiridina

Contacte: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Correu electrònic:audrey.hu@wecistanche.com

Michael Dietrich, PhD, Hans-Peter Hartung, MD, PhD, FRCP i Philipp Albrecht, MD

Resum

Com a antagonista dels canals de potassi (Kv) dependents del voltatge, l'4-aminopiridina (4-AP) s'utilitza com a teràpia simptomàtica en diversos trastorns neurològics. La millora de la funció visual i les habilitats motrius i l'alleujament de la fatiga en pacients amb EM s'han atribuït a 4-AP. La seva formulació d'alliberament prolongat (fampridina) ha estat aprovada per al tractament simptomàtic de la discapacitat per caminar en l'EM. Els efectes beneficiosos es van explicar pel bloqueig dels canals Kv axonals, millorant així la conducció al llarg dels axons desmielinitzats. Tanmateix, un nombre creixent d'evidències suggereix que 4-AP pot tenir propietats addicionals més enllà del mode d'acció simptomàtic. En aquesta revisió, resumim les dades preclíniques i clíniques sobre possibles característiques neuroprotectores de 4-AP.

4-Aminopiridina en malalties neurològiques

Les aminopiridines són un grup de monoamines i diamino derivats de la piridina, que inhibeixen els canals de potassi (Kv) dependents del voltatge. Especialment, els 2 bloquejadors de canals de potassi d'ampli espectre 4-aminopiridina (4-AP) i 34-aminopiridina (3,4- DAP) s'han utilitzat com a substàncies noves en investigació. en diverses malalties neurològiques. Tot i que 3,4-DAP és un antagonista més potent dels canals de potassi, 4-AP creua la barrera hematoencefàlica més fàcilment1 i era clínicament superior en pacients amb EM, especialment per millorar la funció visual, fatiga2 ,3 cognició,4 i velocitat de caminar.1 A més, s'ha informat que 4-AP facilita la conducció neural en malalties neurològiques diferents de l'EM.5,6

Efectes del cistanche: Protegir les neurones

En els axons sans, els canals Kv1.1 i Kv1.2 s'agrupen prop dels nodes de Ranvier.7 Aquests canals queden exposats després de la desmielinització i migren a través del segment desmielinitzat. Al mateix temps, l'expressió d'aquests canals s'incrementa diverses vegades.8 Aquesta redistribució errònia dels canals Kv perjudica la transmissió dels potencials d'acció, donant lloc a una incapacitat permanent. 4-AP bloqueja aquests canals de potassi exposats i, per tant, millora la transducció del senyal.9,10El canal Kv1.3 es va descobrir a les cèl·lules T humanes,11 es va trobar que estava molt expressat en infiltrats inflamatoris del cervell de l'EM,12 i és expressat en macròfags, microglia i cèl·lules T de memòria efectora.13 Els bloquejadors de canals Kv1.3 selectius i no selectius podrien proporcionar propietats immunomoduladores inhibint la proliferació cel·lular i la secreció de citocines proinflamatòries.14 Els estudis anteriors al 2009 no van poder establir 4-AP com a tractament simptomàtic de l'EM perquè els nivells de fàrmacs en sang dels pacients eren impredictibles, amb dosis excessives associades amb el risc de convulsions epilèptiques i deteriorament de la consciència.15–18 Per tant, es va desenvolupar fampridina, la formulació d'alliberament prolongat de 4-AP i posteriorment s'ha aprovat per al tractament simptomàtic de la discapacitat per caminar en l'EM.19–23. Tots els efectes simptomàtics reconeguts, 4-AP pot tenir propietats protectores addicionals.

Avaluació de 4-AP utilitzant models in vitro

In vitro, s'han observat efectes neuroprotectors de 4-AP en nombrosos models. Quan les motoneurones (MNs) es van diferenciar de les cèl·lules mare pluripotents induïdes de pacients amb esclerosi lateral amiotròfica que portaven mutacions del gen FUS i SOD1 es van exposar a 4-AP, es van reparar els desequilibris dels canals iònics, es van augmentar els nivells d'activitat neuronal i el reticle endoplasmàtic. l'estrès va disminuir i l'activació de la caspasa es va atenuar. Els MN mutants van mostrar corrents de sodi i proporcions Na més / K més més baixes, que almenys en part poden ser la raó de la seva hiperexcitabilitat. Això es va revertir després del tractament amb 4-AP, que va provocar una disminució dels corrents de potassi i va restablir els patrons d'activitat espontània i l'entrada sinàptica als MN.24 4-El tractament amb AP va reduir l'alliberament de mediadors proinflamatoris de la microglia humana desafiada amb amiloide. beta i neurones de l'hipocamp de rata cultivades protegides banyades en sobrenedants de la microglia tractada amb beta amiloide.25 S'ha informat que un derivat 4-AP va reduir l'acumulació, l'oxidació, la inflamació i l'activació de la sinucleïna de la Rho cinasa en un model in vitro de la malaltia de Parkinson.26 Altres estudis in vitro van informar que l'4-AP va augmentar la fosforilació de proteïnes d'unió a l'element cAMP de resposta protegida de l'estrès cel·lular pel glutamat, NMDA i 3-àcid nitropropiònic exercit sobre les neurones de grànuls cerebel·losos neonatals de rata. El glutamat provoca una disminució de la viabilitat també a les cèl·lules precondicionades amb 4-AP però sense activació significativa de la caspasa-3. Aquestes observacions van suggerir que 4-AP és principalment eficaç contra l'excitotoxicitat necròtica.27 També es va demostrar que protegeix els cultius neuronals primaris de la privació d'oxigen-glucosa o de la toxicitat de l'ouabaïna/DL-tres- -àcid benziloxyaspàrtic.28.

efecte neuroprotector de Cistanche

Estudis preclínics in vivo sobre 4-AP

Diversos estudis han investigat els efectes protectors de la 4-AP en diversos models de malaltia (taula 1). En models de trituració nerviosa de dany als nervis perifèrics, el tractament profilàctic i precoç 4-AP va provocar la recuperació de la velocitat de conducció nerviosa, va promoure la remielinització i va augmentar l'àrea axonal. Aquestes últimes observacions es van explicar per efectes similars als que apareixen després de l'estimulació elèctrica, per exemple, elevacions dels nivells de factor neurotròfic neuronal derivat del cervell (BDNF).29 En un model de malaltia d'Alzheimer, injecció de beta-amiloide a l'hipocamp de Sprague Dawley. les rates van induir danys neuronals i van augmentar l'activació de la microglia. S'ha trobat que l'administració diària d'1 mg/kg 4-AP suprimeix l'activació de la microglia i proporciona neuroprotecció. Això es va atribuir a la capacitat de 4-AP per bloquejar el corrent no inactiva de rectificació exterior de K més a la microglia activada i reduir la producció cel·lular de citocines proinflamatòries.25 Les investigacions que utilitzen un model in vivo de neurotoxicitat hipocampal induïda per kainat van revelar efectes neuroprotectors robustos de 4-. {11}}AP que podria ser abrogada per l'antagonista no competitiu del receptor NMDA MK-801 i l'antagonista de l'adenosina A1 8-ciclopentil teofilina. Aquestes observacions suggereixen que els receptors NMDA són rellevants per a la 4-protecció mediada per AP en aquest model.30En un model animal de neuropatia autoimmune en rates Lewis, 4-AP va millorar la gravetat clínica i les troballes electrofisiològiques patològiques. Els autors van suggerir que la protecció axonal es va proporcionar bloquejant els corrents interiors mediats pel sodi en la fase inicial perquè els alts potencials de membrana en la fase aguda de la inflamació poden ser neurotòxics. En la fase crònica, la conducció nerviosa es va millorar potencialment bloquejant el corrent exterior mediat pel potassi.1

En l'encefalomielitis autoimmune experimental (EAE), un model d'inflamació del SNC mediada per la immunitat que replica les característiques cardinals de l'EM, s'ha informat que el bloqueig del canal Kv inhibeix l'activació de les cèl·lules T, potencialment mitjançant el bloqueig dels canals de la subfamília Kv1.3 i la desmielinització axonal atenuada. i degeneració actuant sobre el canal K.3.1 de l'astròglia, induint potencialment el senyal BDNF. ling. En l'EAE induïda per proteïnes proteolípids en ratolins SJL, el tractament amb4-AP va millorar significativament les puntuacions digitals que es van confirmar patològicament. Es va observar que l'expressió de la proteïna àcida fibril·lar glial estava regulada a la baixa en ratolins tractats amb 4-AP i es va mitigar l'activació de cèl·lules T i la polarització Th1/17. Tanmateix, en el model d'EAE induït per pèptids de glicoproteïna d'oligodendròcits de mielina (MOG) crònic en ratolins C57BL/6,4-AP no va canviar el curs de l'EAE.5 Un altre estudi també va investigar els efectes de {{19} }AP en un model MOG-EAE en ratolins C57BL/6 i va informar d'efectes simptomàtics però sense efectes modificadors de la malaltia. Ni un tractament profilàctic ni terapèutic 4-AP va atenuar la gravetat del curs d'EAE digital, mentre que els animals tractats amb 4-AP van mostrar una mobilitat millorada avaluada per l'anàlisi de la petjada i la vareta rotativa. La desmielinització de la medul·la espinal, el dany neuronal i les imatges per ressonància magnètica dels canvis de volum cerebral no es van alterar. La proliferació, la producció d'IL17 o IFN-y de cèl·lules T CD4* tampoc es va veure afectada.3

Més recentment, hem demostrat que, a part dels seus efectes simptomàtics en la millora de la conducció neural, 4-AP pot prevenir la neurodegeneració de la retina durant la neuritis òptica experimental induïda per pèptids MOG (EAEON) en ratolins C5BL6.'Usant tomografia de coherència òptica in vivo( OCT), les proves de la funció visual i l'avaluació histològica, vam observar una reducció de l'extensió de la degeneració de les capes internes de la retina en models d'EAEON, tant per a l'administració d'AP 4-profilàctica com terapèutica. En aquest model, 4-AP va potenciar els efectes del tractament immunomodulador amb el modulador del receptor de l'esfingosina-1-fingolimod, suggerint maneres d'acció independents. És raonable suposar que aquest efecte no es limita al fingolimod sol i és aplicable a 4-AP combinat amb altres fàrmacs immunomoduladors de l'EM. En el nostre estudi, la histologia del nervi òptic va revelar que, a diferència del fingolimod, 4-AP no tenia cap influència significativa en l'activació de la microglia i/o la infiltració de limfòcits o macròfags, cosa que suggereix que els efectes protectors no estaven relacionats amb un mode antiinflamatori. d'acció. D'acord amb això, el tractament 4-AP no va interferir amb la inducció d'EAE, validada per un assaig de reestimulació de cèl·lules T. A més, vam observar una protecció significativa contra la neurodegeneració de la retina amb el tractament 4-AP també en el model d'aixafament del nervi òptic no inflamatori, mentre que, aquí, el fingolimod no va tenir cap efecte. Curiosament, el tractament in vitro, 4-AP no va poder protegir directament les cèl·lules ganglionars de la retina. En canvi, la histologia i els experiments in vitro van indicar l'estabilització 4-mediada per AP de les cèl·lules precursores de mielina i oligodendròcits. Aquest efecte es va associar amb l'augment de l'afluència de calci i la translocació nuclear del factor nuclear de les cèl·lules T activades (NFAT). Anteriorment s'ha demostrat que 4-AP regula l'homeòstasi del calci augmentant els nivells d'inositol trifosfat i, per tant, provoca l'alliberament de calci de les reserves intracel·lulars de calci. Tanmateix, estudis addicionals sobre 4-AP en models desmielinitzants, per exemple, el tractament amb cuprizona o els models de ratolins transgènics amb ablació d'oligodendròcits inducibles poden ser útils per confirmar aquestes condicions. Els estudis existents en models animals de desmielinització se centren principalment en la capacitat de 4-AP per restaurar el potencial d'acció, però no hi ha més investigacions sobre les cèl·lules oligodendroglials (figura).

És important esmentar que les dosis necessàries per obtenir aquests efectes in vitro són aproximadament 100-1,000xsuperiors a la concentració aconseguida en pacients. Per tant, mecanismes addicionals o altres poden ser rellevants per a les observacions realitzades in vivo i in vitro. Aquests inclouen, entre d'altres, una disminució de la dissipació d'energia dels axons desmielinitzats a causa del bloqueig de les fuites de potassi i de les capacitats protectores i reparadores més fortes del cervell, que es produeixen indirectament per una major mobilitat i un major exercici.

A més, no es poden descartar mecanismes immunomoduladors de 4-AP, especialment perquè s'ha demostrat una reducció de l'activació de les cèl·lules T i la polarització Th1/17 en EAE induïda per PLP en ratolins SJL.3 A més, es van trobar estudis preclínics d'altres models de malaltia. una activació atenuada i un alliberament reduït de mediadors proinflamatoris per part de la microglia. Aquests resultats controvertits posen de manifest els diversos mecanismes patològics dels diferents models animals, on les cèl·lules immunitàries són més o menys susceptibles a les estratègies de tractament. Les discrepàncies entre els nostres resultats i els informes anteriors de només efectes simptomàtics en EAE induït pel pèptid MOG en ratolins C57BL6" es poden explicar almenys en part per (1) diferències en la dosificació perquè altres van utilitzar dosis de 100 ug i 600 ug / ratolí / dia, mentre que vam administrar 250 ug/ratolí/d; (2) la durada del tractament (40, 60 i 90 dies per Göbel et al,* Moriguchi et al,3 i Dietrich et al, "respectivament); i (3) quantitat de MOG utilitzada per a la immunització perquè vam utilitzar 200 ug MOG per ratolí, mentre que altres només van utilitzar 100 ug MOG per ratolí. Les investigacions recents se centren en el paper de la microbiota intestinal a l'hora d'influir en la inducció i la gravetat de l'EAE alterant l'equilibri de les cèl·lules T i B reguladores i efectores. El microbioma dels rosegadors pot diferir entre les instal·lacions dels animals, donant lloc a diferències en la gravetat de l'EAE, el curs i, possiblement, fins i tot la resposta a la terapèutica. En conjunt, aquests factors podrien explicar l'heterogeneïtat dels resultats de l'estudi.

efecte neuroprotector de Cistanche

Enfocament clínic sobre 4-PA en pacients amb EM

Diversos assaigs clínics des de la dècada de 1980 ja van suggerir els efectes beneficiosos de la 4-AP en persones amb EM. Entre d'altres, van identificar una millora en les funcions motores40-2 i visuals-44 i la fatiga.5-7 Tanmateix, les limitacions de l'estudi, l'absència d'un disseny d'estudi homogeni i un nombre reduït de pacients van prohibir l'aprovació de {{ 5}}AP per les autoritats habituals i condueixen a un ús fora de l'etiqueta durant més de 3 dècades.4 D'altra banda, alguns d'aquests estudis van facilitar el desenvolupament de la formulació d'alliberament sostingut (SR-4-AP o fampridina) perquè van trobar que els nivells plasmàtics del compost original d'alliberament immediat eren inconsistents i impredictibles. El primer estudi clínic amb SR-4-AP va ser realitzat l'any 1997 per Schwid et al.49, demostrant una millora significativa de la velocitat de caminar i una tendència a la millora de la força muscular.

El sistema de tecnologia d'alliberament prolongat va ser desenvolupat per Elan Pharmaceuticals. Va utilitzar un sistema d'absorció de fàrmacs anomenat matriu, que consisteix en una matriu de polímer patentada que controla l'alliberament per difusió i erosió per part dels enzims gastrointestinals. Això va donar lloc a nivells màxims de fàrmacs més baixos i una durada d'acció més llarga.1 Inicialment, SR-4-AP es va provar en 4 assaigs. L'any 2007, Goodman et al.1 van realitzar increments de dosi de 5 mg de 10 a 40 mg dues vegades al dia amb 36 pacients amb EM. A la prova de caminada cronometrada de 25 peus (T25FW), no es va observar cap canvi significatiu, mentre que una anàlisi post hoc que convertia les dades en velocitat de marxa (ft/s) va assolir significació. A més, es va observar una millora de la fatiga autoinformada. En un assaig de comparació de dosis el 2008 (aleatoritzat, doble cec, controlat amb placebo), Goodman et al.2 van reclutar 206 pacients, que van rebre un placebo o dosis de 10, 15 o 20 mg dues vegades al dia. Un cop més, l'anàlisi post hoc que compara la millora de la velocitat de marxa va trobar resultats significativament millors per a tots els grups de tractament individualment i per a tots els pacients tractats amb SR-4-AP agrupats en comparació amb el placebo. La força de Muse es va millorar per als grups tractats amb 10-mg i 15-mg, però no per als grups tractats amb 20 mg en comparació amb els subjectes amb placebo. En els 2 assaigs clínics de fase Ⅲ posteriors (21-assaig aleatoritzat doble cec controlat amb placebo, 301 pacients i 14-assaig doble cec controlat amb placebo de 14-setmana, 239 pacients) amb 10 mg dues vegades al dia, els pacients es van dividir en un grup que responien i un grup que no responien, definits per una millora constant de T25FW. En ambdós estudis, l'augment de la velocitat de caminar va ser significatiu en comparació amb el grup que no responien o el grup placebo. A més, hi va haver una millora en la puntuació de l'12-Escala de marxa de l'element MS (MSWS-12) per als responents.2122

En un assaig d'extensió obert d'aquests estudis, es va demostrar que la millora clínica es va perdre després de la retirada del fàrmac, però va tornar 2 setmanes després de reiniciar la teràpia de SR-4-AP.Ampyra/Fampyra, la formulació de comprimits de SR{ {3}}AP va rebre l'aprovació total de la Food and Drug Administration el gener de 2010 per millorar la marxa en pacients amb EM, però només una autorització de comercialització condicional el 2011 de l'Agència Europea de Medicaments (EMA). A partir dels assaigs esmentats, l'aprovació estava subjecta a la disposició per proporcionar més dades d'eficàcia i seguretat a llarg termini. Per tant, es va iniciar un estudi exploratori de fase II (MÒBIL) i un estudi de confirmació de fase I (ENHANCE).

En l'estudi exploratori MOBLE amb 132 participants, es va trobar una millora de la Impressió global del canvi del pacient (PGIC), MSWS-12 i la velocitat Timed Up and Go (TUG)23 Per avaluar l'eficàcia i la seguretat a llarg termini de Es va realitzar SR-4-AP, l'estudi confirmatori ENHANCE (10 mg dues vegades al dia en 646 pacients amb EM). A més de les millores informades a l'assaig MOBILE, els autors van trobar una millora significativa dels pacients tractats amb SR-4-AP a l'29-Escala d'impacte de l'ítem MS.5 L'EMA va concedir després l'aprovació incondicional de SR{{ {11}}AP per al tractament de pacients amb EM amb discapacitat per caminar. L'estudi observacional de la fase ENABLE amb 901 pacients va demostrar que el tractament amb SR-4-AP és beneficiós per als pacients amb EM mitjançant el funcionament físic autopercebut i la salut psicològica en un entorn real2 (taula 2).

A partir de les prometedores dades preclíniques sobre protecció contra la neurodegeneració de la retina descrites anteriorment, el nostre grup va realitzar un estudi OCT retrospectiu i multicèntric per comparar longitudinalment la neurodegeneració de la retina entre 52 pacients amb teràpia contínua 4-AP i 51 controls que es van emparellar per a totes les covariables rellevants. utilitzant un algorisme de concordança predefinit. D'acord amb les dades experimentals, durant la teràpia concurrent 4-AP, la degeneració de la capa de fibra del nervi retinià macular es va reduir durant 2 anys. No obstant això, aquestes troballes s'han de corroborar en estudis de cohorts independents i idealment prospectius, sobretot perquè la mida de l'efecte era baixa i les taxes de la capa de fibra nerviosa peripapil·lar de la retina i l'aprimament de la cèl·lula ganglionar macular/capa plexiforme interna no van variar significativament entre els grups. . Aquestes discrepàncies d'un efecte protector de 4AP només en el mRNFL, però ni en pRNFL ni a McGill, no es poden explicar fàcilment. És important esmentar que com que 4AP només està autoritzat per millorar la discapacitat per caminar en pacients amb EDSS 3.5-5, les taxes de canvi analitzades es van investigar en etapes posteriors de la malaltia i sense neuritis òptica aguda. En aquest entorn, només es produeixen canvis de retina molt subtils i es necessitarien grans cohorts per detectar els efectes del tractament. Per tant, l'estudi retrospectiu en pacients certament no tenia prou potència per detectar de manera fiable els efectes del tractament protector, i no sorprèn que només un dels resultats hagi resultat positiu. Possiblement, el mRNFL va ser la capa més sensible per a la detecció dels efectes del tractament.

En resum, un nombre creixent d'evidències in vivo suggereix que 4-AP, a més dels seus coneguts efectes simptomàtics, en prevenir la neurodegeneració pot modificar el curs de la malaltia d'EAEON i possiblement fins i tot els pacients amb EM. L'evidència preliminar in vitro implica la implicació dels nivells de calci cel·lular i la via NFAT, però calen més investigacions per dilucidar els mecanismes moleculars exactes subjacents a l'efecte neuroprotector de 4-AP en la desmielinització inflamatòria mediada per la immunitat. Aquestes troballes poden tenir un impacte marcat en les estratègies de tractament de l'EM si es confirmen en un assaig clínic controlat aleatoritzat prospectiu.

efecte de Cistanche

Referències

1. Leussink VI, Montalban X, Hartung HP. Restauració de la funció axonal amb 4-aminopiridina: eficàcia clínica en l'esclerosi múltiple i més enllà. Medicaments del SNC 2018;32:637–651.

2. Horton L, Conger A, Conger D, et al. Efecte de l'4-aminopiridina sobre la visió en pacients amb esclerosi múltiple amb neuropatia òptica. Neurologia 2013;80:1862–1866.

3. Morrow SA, Rosehart H, Johnson AM. L'efecte de Fampridine-SR sobre la fatiga cognitiva en un assaig aleatoritzat doble cec creuat en pacients amb EM. Mult Scler Relat Disord 2017;11:4–9.

4. Germà SD, Filli L, Geissler O, et al. Efectes positius de la fampridina sobre la cognició, la fatiga i la depressió en pacients amb esclerosi múltiple de més de 2 anys. J Neurol 2018; 265:1016–1025.

5. Hayes KC, Blight AR, Potter PJ, et al. Assaig preclínic d'4-aminopiridina en pacients amb lesió medul·lar crònica. Paraplegia 1993;31:216–224.

6. Iaci JF, Parry TJ, Huang Z, et al. La dalfampridina millora la funció sensoriomotora en rates amb dèficits crònics després de l'oclusió de l'artèria cerebral mitjana. Ictus 2013;44: 1942–1950.

7. Trimmer JS, Rhodes KJ. Localització de canals iònics dependents de voltatge al cervell dels mamífers. Annu Rev Physiol 2004;66:477–519.

8. Rodr´ ıguez-Rangel S, Bravin AD, Ramos-Torres KM, Brugarolas P, S´anchez Rodr´ ıguez JE. Estudis de relació estructura-activitat de quatre nous bloquejadors de canals d'4-aminopiridina K( més). Ciència Rep 2020;10:52.

9. Bostock H, Sears TA, Sherratt RM. Els efectes dels ions 4-aminopiridina i tetraetilamoni sobre les fibres nervioses dels mamífers normals i desmielinitzades. J Physiol 1981;313:301–315.

10. Huynh W, Pickering H, Howells J, et al. Efecte de la fampridina sobre l'excitabilitat axonal en l'esclerosi múltiple. Clin Neurophysiol 2016;127:2636–2642.

11. DeCoursey TE, Chandy KG, Gupta S, Cahalan MD. Canals K plus dependents de voltatge en limfòcits T humans: un paper en la mitogènesi? Nature 1984;307:465–468.

12. Rus H, Pardo CA, Hu L, et al. El canal de potassi Kv1.3 dependent de voltatge s'expressa molt en infiltrats inflamatoris del cervell d'esclerosi múltiple. Proc Natl Acad Sci USA 2005;102:11094–11099.

13. Wang X, Li G, Guo J, et al. Canal Kv1.3 com a diana terapèutica clau per a malalties neuroinflamatòries: estat de l'art i més enllà. Front Neurosci 2019;13:1393.

14. Wulffff H, Calabresi PA, Allie R, et al. El canal Kv1.3 K (plus) depèn de voltatge a les cèl·lules T de memòria efectora com a nou objectiu per a MS. J Clin Invest 2003;111:1703–1713.

15. Burton JM, Bell CM, Walker SE, O'Connor PW. 4-toxicitat per aminopiridina amb sobredosi no intencionada en quatre pacients amb esclerosi múltiple. Neurologia 2008;71: 1833–1834.

16. Johnson NC, Morgan MW. Un cas inusual de 4-toxicitat per aminopiridina. J Emerg Med 2006;30:175–177.

17. Schwam E. Sobredosi accidental greu d'4-aminopiridina a causa d'un error de la farmàcia. J Emerg Med 2011;41:51–54.

18. Etemadifar M, Saboori M, Chitsaz A, et al. L'efecte de la fampridina sobre el risc de convulsions en pacients amb esclerosi múltiple. Mult Scler Relat Disord 2020;43:102188.

19. Goodman AD, Cohen JA, Cross A, et al. Fampridine-SR en l'esclerosi múltiple: un estudi aleatoritzat, doble cec, controlat amb placebo i de dosi. Mult Scler 2007; 13:357–368.

20. Goodman AD, Brown TR, Cohen JA, et al. Assaig de comparació de dosis de fampridina d'alliberament sostingut en esclerosi múltiple. Neurologia 2008;71:1134–1141.

21. Goodman AD, Brown TR, Krupp LB, et al. Fampridina oral d'alliberament sostingut en l'esclerosi múltiple: un assaig aleatoritzat, doble cec i controlat. Lancet 2009;373: 732–738.

22. Goodman AD, Brown TR, Edwards KR, et al. Un assaig de fase 3 de dalfampridina oral d'alliberament prolongat en l'esclerosi múltiple. Ann Neurol 2010;68:494–502.

23. Hupperts R, Lycke J, Short C, et al. Fampridina d'alliberament prolongat i caminar i equilibri en EM: assaig aleatori controlat MOBILE. Mult Scler 2016;22:212–221.

24. Naujock M, Stanslowsky N, Bufler S, et al. 4-L'activitat induïda per aminopiridina rescata les neurones motores hipoexcitables de les cèl·lules mare pluripotents induïdes per pacients amb esclerosi lateral amiotròfica. Cèl·lules mare 2016;34:1563–1575.

25. Franciosi S, Ryu JK, Choi HB, Radov L, Kim SU, McLarnon JG. Efectes d'ampli espectre de l'4-aminopiridina per modular la senyalització cel·lular induïda per la beta amiloide1-42- i les respostes funcionals a la microglia humana. J Neurosci 2006;26:11652–11664.

26. Li S, Wei D, Mao Z, et al. Disseny, síntesi, avaluació d'immunocitoquímica i investigació de l'acoblament molecular de diversos derivats de 4-aminopiridina com a agents neuroprotectors potencials per al tractament de la malaltia de Parkinson. Bioorg Chem 2017;73:63–75.

27. Smith AJ, Tauskela JS, Stone TW, Smith RA. El precondicionament amb 4-aminopiridina protegeix les neurones de grànuls cerebel·losos contra l'excitotoxicitat. Brain Res 2009;1294: 165–175.

28. Tauskela JS, Aylsworth A, Hewitt M, Brunette E, Blondeau N. Fracàs i rescat de la neuroprotecció induïda pel precondicionament en insults greus semblants a un ictus. Micologia Neurophar 2016;105:533–542.

29. Tseng KC, Li H, Clark A, et al. 4-L'aminopiridina afavoreix la recuperació funcional i la remielinització en lesions agudes dels nervis perifèrics. EMBO Mol Med 2016;8:1409–1420.

30. Ogita K, Okuda H, Watanabe M, Nagashima R, Sugiyama C, Yoneda Y. El tractament in vivo amb el bloquejador de canals K plus 4-aminopiridina protegeix contra la mort de cèl·lules neuronals induïda per kainat mitjançant l'activació dels receptors NMDA en murí hipocamp. Neurofarmacologia 2005;48:810–821.

31. Moriguchi K, Miyamoto K, Kusunoki S. 4-L'aminopiridina millora la neuritis autoimmune experimental en rates Lewis. J Neuroimmunol 2017;305:72–74.

32. Schmalhofer WA, Bao J, McManus OB, et al. Identificació d'una nova classe d'inhibidors del canal de potassi dependent de voltatge, Kv1.3, amb propietats immunosupressores. Bioquímica 2002;41:7781–7794.

33. Varga Z, Company T, Papp F, et al. Expressió del canal de potassi en CD4 humà més cèl·lules T reguladores i na¨ ıve de subjectes sans i pacients amb esclerosi múltiple. Immunol Let 2009;124:95–101.

34. Jukkola P, Gu Y, Lovett-Racke AE, Gu C. Supressió de la desmielinització inflamatòria i la degeneració dels axons mitjançant la inhibició dels canals Kv3. Front Mol Neurosci 2017;10:344.

35. Moriguchi K, Miyamoto K, Fukumoto Y, Kusunoki S. 4-L'aminopiridina millora l'encefalomielitis autoimmune experimental recurrent i recurrent en ratolins SJL/J. J Neuroimmunol 2018;323:131–135.

36. Gobel K, Wedell JH, Herrmann AM, et al. 4-L'aminopiridina millora la mobilitat, però no el curs de la malaltia en un model animal d'esclerosi múltiple. Exp Neurol 2013;248: 62–71.

37. Dietrich M, Koska V, Hecker C, et al. Efectes protectors de l'4-aminopiridina en la neuritis òptica experimental i l'esclerosi múltiple. Cervell 2020;143:1127–1142.

38. Grimaldi M, Atzori M, Ray P, Alkon DL. Mobilització de calci de les reserves intracel·lulars, potenciació dels transitoris de calci induïts per neurotransmissors i entrada capacitiva de calci per 4-aminopiridina. J Neurosci 2001;21:3135–3143.

39. van Diemen HA, Polman CH, Koetsier JC, van Loenen AC, Nauta JJ, Bertelsmann FW. 4-Aminopiridina en pacients amb esclerosi múltiple: dosificació i nivell sèric relacionats amb l'eficàcia i la seguretat. Clin Neuropharmacol 1993;16:195–204.

40. Davis FA, Stefoski D, Rush J. La 4-aminopiridina administrada per via oral millora els signes clínics de l'esclerosi múltiple. Ann Neurol 1990;27:186–192.

41. Stefoski D, Davis FA, Faut M, Schauf CL. 4-L'aminopiridina millora els signes clínics de l'esclerosi múltiple. Ann Neurol 1987;21:71–77.

42. Stefoski D, Davis FA, Fitzsimmons WE, Luskin SS, Rush J, Parkhurst GW. 4- Aminopiridina en l'esclerosi múltiple: administració prolongada. Neurologia 1991;41: 1344–1348.

43. Jones RE, Heron JR, Foster DH, Snelgar RS, Mason RJ. Efectes de l'4-aminopiridina en pacients amb esclerosi múltiple. J Neurol Sci 1983;60:353–362.

44. van Diemen HA, Polman CH, van Dongen TM, et al. Els efectes de l'4-aminopiridina sobre els signes clínics de l'esclerosi múltiple: un estudi creuat, aleatoritzat, controlat amb placebo, doble cec. Ann Neurol 1992;32:123–130.

45. Polman CH, Bertelsmann FW, van Loenen AC, Koetsier JC. 4-aminopiridina en el tractament de pacients amb esclerosi múltiple. Eficàcia i seguretat a llarg termini. Arch Neurol 1994;51:292–296.

46. ​​Romani A, Bergamaschi R, Candeloro E, Alfonsi E, Callieco R, Cosi V. Fatigue in multiple sclerosis: multidimensional assessment and response to symptomatic treatment. Mult Scler 2004;10:462–468.

47. Rossini PM, Pasqualetti P, Pozzilli C, et al. Fatiga en l'esclerosi múltiple progressiva: resultats d'un assaig encreuat, aleatoritzat, doble cec, controlat amb placebo, d'4-aminopiridina oral. Mult Scler 2001;7:354–358.

48. Hauser SL, Johnston SC. 4-aminopiridina: nova vida per a una droga antiga. Ann Neurol 2010; 68:A8–A9.

49. Schwid SR, Petrie MD, McDermott MP, Tierney DS, Mason DH, Goodman AD. Avaluació quantitativa de la 4-aminopiridina d'alliberament sostingut per al tractament simptomàtic de l'esclerosi múltiple. Neurologia 1997;48:817–821.

50. Goodman AD, Bethoux F, Brown TR, et al. Seguretat i eficàcia a llarg termini de la dalfampridina per al deteriorament de la marxa en pacients amb esclerosi múltiple: resultats de les extensions obertes de dos assaigs clínics de fase 3. Mult Scler 2015;21:1322–1331.

51. Hobart J, Ziemssen T, Feys P, et al. Avaluació de millores clínicament significatives en la capacitat de caminar autoinformada en participants amb esclerosi múltiple: resultats de l'assaig de fase III, aleatoritzat, doble cec, ENHANCE de fampridina d'alliberament prolongat. Medicaments del SNC 2019;33:61–79.

52. Macdonell R, Nagels G, Lapland DA, et al. Millora de l'impacte de l'esclerosi múltiple sobre la salut informat pels pacients: l'estudi ENABLE de PR-fampridina. Mult Scler 2016;22: 944–954.

53. Noble M, Tseng K-CC, Li H, Elfar JC. 4-Aminopiridina com a agent únic de diagnòstic i tractament per a lesions greus per aixafament de nervis. Mil Med 2019;184(suppl 1):379–385.