Nous glicòsids feniletanoides de Cistanche Tubulosa (SCHRENK) HOOK. FI

HIROMI KOBAYASHI. HIROKO OGUCHI, NOBUO TAKIZAWA, TOSHIO MIYASE, AKIRA UENO, KHAN USMANGHANI i MANSOOR AHMAD

Central Research Laboratories, Yomeishu Seizo Co., Ltd., 2132-37 Nakaminowa, Minowa-machi, Kamiina-gun, Nagano 399-46, Japó, Shizuoka College of Pharmacy,2-2-1 Oshika, Shizuoka- shi 422, Japó i Departament de Farmacognosia, Facultat de Farmàcia, Universitat de Karachi, c Karachi-32, Pakistan

Contacte:joanna.jia@wecistanche.com

Resum

Quatre nousfeniletanoideglicòsids, els tubulòsids A (II), B (VI), C (VII) i D (VIII), s'han aïllat deCistanchetubulosa(SCHRENK) GANCHO. f. (Orobanchaceae), juntament amb quatre conegudesfeniletanoideglicòsids, equinacòsid (I), acteòsid (III), isòmer acteòsid (IV) i 2'-acetilacteòsid (V). Les estructures de II, VI, VII i VIII es van establir a partir d'evidències químiques i dades espectrals. Els compostos VII i VIII tenen un fragment triacetil ramnosil com a sucre terminal.

Cistanchefeniletanoide glucòsidTé molts beneficis per a la salut

Paraules clau:Cistanchetubulosa; Orobanchaceae; planta parasitària;feniletanoide glucòsid; tubulòsid A; tubulòsid B; tubulòsid C; tubulósid D

En la nostra sèrie d'investigacions sobre els components químics de Cistanche spp. (Orobanchaceae), lafeniletanoideglucòsids1-3) i iridoide4) de la salsa Cistanche (CA MEY.) S'ha informat de G. BECK. El present article tracta sobre els glicòsids feniletanoides de Cistanche tubulosa (SCHRENK) HOOK. f. recollit al Pakistan. Cistanche tubulosa (SCHRENK) GANXO. f.5) és una planta parasitària que creix a les arrels de Salvadora i Calotropis spp., i es troba àmpliament al nord d'Àfrica, Aràbia, Àsia occidental fins al Pakistan i l'Índia. La planta sencera s'utilitza medicinalment al Pakistan com a remei per a la diarrea i les nafres.6)

Ara volem informar de l'aïllament de quatre nousfeniletanoideglicòsids, anomenats tubulòsids A (II), B (VI), C (VII) i D (VIII), així com quatre glucòsids feniletanoides coneguts, equinacòsid (I), acteòsid (III), isòmer acteòsid (IV) i 2' -acetillacteòsid (V). Les estructures d'aquests compostos es van determinar a partir d'evidències químiques i estudis espectroscòpics.

FeniletanoideGlicòsidsencistanchepot antiinflamatori

L'extracte etanòlic de tota la planta es va suspendre en aigua. Aquesta suspensió es va extreure amb acetat d'etil i després amb n-butanol saturat amb aigua. La fracció soluble en n-butanol es va cromatografiar en columnes de poliamida i gel de sílice i es va sotmetre a cromatografia líquida d'alt rendiment (HPLC) successivament, per donar vuitfeniletanoideglicòsids(I-VIII).

Els compostos I, III, IV i V es van aïllar com a pols amorfes, mostrant espectres similars als de l'equinacòsid, 1) acteòsid, 1) isòmer acteòsid7) i 2'-acetilacteòsid, 2) respectivament, i es van identificar per comparació directa amb autèntics. mostres [cromatografia en capa fina (TLC), infrarojos (IR), ressonància magnètica nuclear de protons (1H-NMR) i espectres de ressonància magnètica nuclear de carboni-13 (13C-NMR)].

El tubulòsid A (II) es va aïllar com una pols amorfa, [ƒ¿]D{{{0}}.7•‹ (MeOH), C37H48O21.3/2 H2O. L'espectre IR va suggerir la presència de grups hidroxil (3440 cm-1), un èster conjugat (1705 cm-1), un doble enllaç (1634 cm{-1) i anells aromàtics (1608, 1522 cm-1), i l'espectre ultraviolat (UV) va mostrar màxims d'absorció a 220, 250 sh, 292 sh i 334 nm. L'espectre 1H-RMN de II mostrava senyals d'un grup metil de ramnosa [6 1,07 (3H, d, J{= 6 Hz)], un senyal metil d'un grup acetoxil [{{27} },98 (3H, s)], protons de metilè bencílic [6 2,70 (2H, t, J{= 7 Hz)], dos protons glucosa-anomèrics [6 4,32, 4,54 (1H cadascun, d, J= 8 Hz)], un protó ramnosa-anomèric [6 5,11 (1H, br s)], dos protons transolefínics [{6 6,25 , 7,64 (1H cadascun, d, J= 16 Hz)] i protons aromàtics [{6 6.{5 7 .2 (6H)]. En l'acetilació, II va proporcionar l'acetat inferior (IIa), que era idèntic a l'acetat de dodeca d'echinacòsid (I). L'espectre 13C-RMN de II era gairebé idèntic al de I, excepte pels senyals deguts a la glucosa unida directament a l'aglicona i al grup acetoxil [6 20.9 (CH3), 171.5 (C {{62} }})], cosa que suggereix que el grup acetoxil està unit al fragment de glucosa. A l'espectre 13C-RMN de II, l'acilació es desplaça81 [-2,3 (C{-1), {-0,9 (C{-2) i-1 .0 (C-3)] es van observar a C{-1, C{-2 i C{-3 de la glucosa interna mitjançant una comparació detallada amb l'espectre de I, cosa que indica que el grup acetoxil està lligat al grup hidroxil C-2 del fragment glucosa a II. En la metanolisi de II amb clorur d'acetil en metanol, cafeat de metil i alcohol 3,4-dihidroxifenetílic es van detectar mitjançant TLC i HPLC. La hidròlisi àcida de II amb un 10 per cent d'àcid sulfúric va proporcionar glucosa i ramnosa en una proporció de 2 a 1.

A partir de l'evidència esmentada anteriorment, es va determinar que l'estructura del tubulòsid A era 2-(3,4-dihidroxi fenil)etil 0-aL-ramnopiranosil-(1•¨3)- [ƒÀ-D-glucopiranosil-(1-6)]-({4-O-caffeoy1){-2-O-acetil-fl-D-glucopiranòsid (II).

El tubulòsid B (VI) es va aïllar com una pols amorfa, [a]D,{{0}}.0•‹ (MeOH), C31 H38016, l'espectre de RMN 1H del qual mostrava la presència d'un grup acetoxil alifàtic. [6 1,98 (3H, s)]. L'espectre 13C-RMN de VI era molt similar al de l'isòmer acteòsid (IV), però difereix lleugerament en els senyals a causa de la part de glucosa i la presència del grup acetoxil [6 20,9 (CH3), 171,6 ( C =0)]. La ubicació del grup acetoxil a la part de glucosa de VI es va determinar a partir del seu espectre de RMN 13C mitjançant una comparació detallada amb la de IV.

Els senyals de C{{0}}, C{-2 i C{-3 de la part de glucosa van mostrar desplaçaments d'acilació (-2,5 (C-1 ),－0,6 (C-2) ​​i-1,4 (C{-3)], com en el cas de II, indicant que el grup acetoxi està lligat al C{ {12}} grup hidroxil de la fracció glucosa a VI. En l'acetilació, VI va donar l'octacetat (VIa) que era idèntic al no acetat de IV. En la metanolisi de VI amb clorur d'acetil en metanol, cafeat de metil i 3,{{ 14}}alcohol dihidroxifenetílic es va detectar per TLC i HPLC. La hidròlisi àcida de VI amb un 10 per cent d'àcid sulfúric va produir glucosa i ramnosa en una proporció d'1 a 1. Aquests resultats ens van portar a concloure que l'estructura del tubulòsid B és {{18} }(3,4-dihidroxifenil)etil 0-aL-ramnopiranosil-(1-3)-(6-0-cafeoy1)- 2-0-acety143-D -glucopiranòsid (VI).

El principi actiu deCistancheté unanticancerígensefecte

El tubulòsid C (VII) es va aïllar com una pols amorfa, [a],-104.8•‹ (MeOH), C43H54024 H20, l'espectre 1H-RMN del qual mostrava la presència de quatre grups acetoxil alifàtics [{{7} },80, 1,92, 1,95 i 2,08 (3H cadascun, s)]. L'"espectre C-RMN de VII era gairebé idèntic al del tubulòsid A (II), que posseeix un grup acetoxil alifàtic a la glucosa interna, excepte els senyals deguts a la part de ramnosa. A més, a l'espectre de RMN 13C de VII. , canvis d'acilació') es van observar en els senyals a causa de C-2, C{-3 i C{-4 de la ramnosa en comparació detallada amb les dades de II. En conseqüència, les ubicacions Es va determinar que dels quatre grups acetoxil eren C-2 de la glucosa interna i C-2, C{-3, C-4 de la fracció ramnosa a VII. En l'acetilació, VII va donar l'octaacetat que era idèntic al tubulòsid A sota acetat (IIa). En la metanolisi de VII amb clorur d'acetil en metanol, es van detectar metil cafeat i alcohol 3,4-dihidroxifenetílic per TLC i HPLC. Hidròlisi àcida de VII amb un 10 per cent d'àcid sulfúric va proporcionar glucosa i ramnosa en una proporció de 2 a 1.

A partir dels resultats anteriors, es va determinar que l'estructura del tubulòsid C era 2-(3,4- dihidroxifenil)etil 2,3,4-tri-O-acetil-aL-thamnopiranosil- (1 - més 3)-[/9-D-glucopiranosil-(1 - més 6)]-(4-0-caffeoy1)-2-0-acetil-fl-D -glucopiranòsid (VII).

El tubulósid D (VIII) es va aïllar com una pols amorfa, [oc], -91,4 graus (MeOH), C43H54023. H2O, l'espectre 1H-RMN del qual mostrava la presència de quatre grups acetoxil alifàtics [6 1.81, 1.93, 1.96 i 2.09 (3H cadascun, s)]. Amb l'acetilació, VIII va donar l'heptaacetat (VIIa), l'espectre de RMN 1H del qual mostrava vuit alifàtics [6 1.87, 1.94, 1.96, 1.99, 2.10 (3H cadascun, s) i 2.02 (9H, s)] i tres senyals aromàtiques [6 2.27, 2.30 i 2.32 (3H cadascun, s)] acetoxil metil. L'espectre 13C-RMN de VIII era gairebé idèntic al del tubulòsid C (VII), excepte pels senyals deguts a la part d'àcid p-cumàric. En la metanolisi de VIII amb clorur d'acetil en metanol, p-cumarat de metil i alcohol 3,4-dihidroxifenetílic es van detectar per TLC i HPLC. La hidròlisi àcida de VIII amb un 10 per cent d'àcid sulfúric va donar glucosa i ramnosa en una proporció de 2 a 1.

A partir d'aquests resultats, es va determinar que l'estructura del tubulòsid D era 2-(3,4- dihidroxifenil)etil 2,3,4-tri-O-acetil-a-Lrhamnopiranosil- (1•¨3)-[ƒÀ-D-glucopiranosi-](1→6)} (4-0-p-cumary1)-2-0-acetil-fl-D-glucopiranosida (VIII).

Moltsfeniletanoideglicòsidscom el forsitòsid A,' grau ) leucosceptosid A, 7 isomar tynosidell) i així successivament, que té una part de ramnosa com a sucre terminal. En aquests casos, la part de la ramnosa no està acetilada. Els tubulòsids C (VII) i D (VIII) contenen una part de ramnosa acetilada i són els primers compostos naturals que tenen una part de triacetil ramnosa que s'han informat.

El principi actiu deCistancheténeuroprotectorefecte

Experimental

Els punts de fusió es van determinar en un aparell de micropunt de fusió Mitamura i no es corregeixen. Les rotacions òptiques es van mesurar amb un polarímetre digital JASCO DIP-140. Els espectres IR es van registrar amb un espectrofotòmetre d'infrarojos Hitachi 270-30 i els espectres UV amb un espectròmetre Hitachi 200-20. 'H-NMR i "CN MR espectres es van registrar amb una màquina JEOL FX-90Q (89,55 i 22,5 MHz, respectivament). Els canvis químics es donen a l'escala de 6 (ppm) amb tetrametilsilà (TMS) com a interna. estàndard (s, singlet; d, doblet; t, triplet; br, ample). La cromatografia gas-líquid (GC) es va realitzar en un aparell Shimadzu GC-4CM amb un detector d'ionització de flama. La HPLC es va realitzar en un Màquina Hitachi 655A-11. Es va utilitzar gel de sílice (Wako gel C-300, Wako Pure Chemical) per a la cromatografia en columna. Es van utilitzar plaques prerevestides Kieselgel 60 F254 (Merck) per a TLC i la detecció es va dur a terme per polvorització 10 per cent d'H2SO4 seguit d'escalfament.

Aïllament

Les plantes senceres fresques de C. tubulosa (22 kg), recollides el desembre de 1984, a Karachi, Pakistan, es van extreure amb EtOH. L'extracte etanòlic es va suspendre en H2O i es va extreure amb EtOAc i després amb n-BuOH saturat amb H20. L'extracte de n-BuOH (99,1 g) es va absorbir en una columna Diaion HP-20 (Nippon Rensui Co.) i la resina es va eluir amb Me0H després de rentar-se amb H20 . L'eluat Me0H (15,4 g) es va cromatografiar en una columna de poliamida C{-200 (Wako Pure Chemical) mitjançant H20 i després Me0H. La fracció eluïda amb Me{{50}}H es va concentrar per donar un residu (glicòsids fenòlics bruts) (8,0 g). Després de cromatografia repetida del residu sobre gel de sílice amb CHC13—Me0H—H20 (70:30:5) i HPLC amb un sistema de dissolvents H2O—CH3CN o H2O—MeOH, es van aïllar vuit glicòsids (I{29}}VIII). I, 230 mg; II, 200 mg; III, 240 mg; IV, 60 mg; V, 210 mg; VI, 100 mg; VII, 60 mg; VIII, 65 mg. Condicions per a HPLC: columna, Develosil ODS-10 (20 x 250 mm); dissolvent, I, II (17 per cent de CH3CN), III, IV (20 per cent de CH3CN), V (22 per cent de CH3CN), VI (25 per cent de CH3CN), VII (53 per cent de Me0H), VIII (55 per cent de Me0H); detector (UV), 220 nm; cabal, 6,9 ml/min.

Echinacòsid (I)

Pols amorfa. IR 0,;,Eas,r, cm-1: 3400, 1690, 1625, 1600, 1518. 11-I-RMN (metanol-d4) 6: 1,09 (3H, d , J=6 Hz, CH3 de ramnosa), 2,79 (2H, t, J= 7 Hz, Ar-CH{2-), 4,29, 4,37 (1H cadascun, d, J{{ 28}} Hz, H-1 de glucosa), 5,16 (1H, d, J=1 Hz, H{-1 de ramnosa), 6,26 (1H, d, J{{38} } Hz, Ar-CH=CH-), 6.4-7,1 (6H, H aromàtic), 7,59 (1H, d, J{=16 Hz, Ar-CH{{ 51}}CH-). 13C-RMN: Taula I.

Tubulòsid A (H)

Pols amorfa, [a]{{0}},7 (c=1,08, Me0H). Anal. Calculat per a C371-14021 3/2 H20: C, 51,93; H, 6,01. Trobat: C, 51,80; H, 5,81. IR vrtr, cm': 3440, 1732, 1705, 1634, 1608, 1522. UV An?" nm (log e): 220 (4,14), 250 sh (3,85), 292 sh (3,95), 334 (4,13). 1H-RMN (metanol-d4): vegeu text 13C-RMN: Taula I.

Acteòsid (III)

Pols amorfa. IR v cm-1: 3420, 1696, 1634, 1606, 1520. 1H-RMN (metanol-d4) 5: 1,10 (3H, d, J{=6 Hz, CH3 de ramnosa), 2,78 ( 2H, t, J= 7 Hz, Ar-CH{2-), 4,36 (1H, d, J{= 8 Hz, H-1 de glucosa), 5,17 (1H, d, J=1 Hz, H-1 de ramnosa), 6,25 (1H, d, J{=16 Hz, Ar-CH {=CH-), 6.{{ 40}},1 (6H, H aromàtic), 7,58 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-). 13C-RMN: Taula I.

Isòmer de l'acteòsid (IV)

Pols amorfa. IR v cm-1: 3280, 1686, 1624, 1602, 1512. 11-I-RMN (metanol-d4) 6: 1,26 (3H, d, J{=6 Hz, CH3 de ramnosa), 2,77 (2H, t, J= 7 Hz, Ar-Cl.2-I.2 4,33 (3H, d, J{=8 Hz, H{ {26}} de glucosa), 5,18 (1H, br s, H-1 de ramnosa), 6,28 (1H, d, 1=16 Hz, Ar-CH =CH-), 6.4-7.1 (6H, H aromàtic), 7,54 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-) 13C-RMN: Taula I.

2'-acetilacteòsid (V)

Pols amorfa. IR vT cm-1: 3450, 1735, 1705, 1640, 1610, 1535. 1H-RMN (metanol-d4) 6: 1,07 (3H, d, 1= 6 Hz, CH3 de ramnosa), 1,99 (3H, s, OAc), 2,69 (2H, t, J=7 Hz, Ar-CH{2-), 4,50 (1H, d, J{=8 Hz, H{{30 }} de glucosa), 5,16 (1H, br s, H-1 de ramnosa), 6,25 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH{=CH-), 6 .5-7,2 (6H, H aromàtic), 7,59 (1H, d, J= 16 Hz, Ar-CH =CH-). 13C-RMN: Taula I.

Tubulòsid B (VI)

Pols amorfa, [{{0}}.0 grau (c= 1,05, Me0H). Anal. Calculat per Cm H38016: C, 55,85; H, 5,75. Trobat: C, 55,91; H, 6.00. IR v:,111 cm-1: 3420, 1734, 1696, 1634, 1608, 1522. UV 4ear nm (log e): 220 (4,32), 246 sh (4,09), 292 sh (4,21), 292 sh (4,21) (4.31). 1H-RMN (metanol-d4) 6: 1,24 (3H, d, J=6 Hz, CH3 de ramnosa), 1,98 (3H, s, OAc), 2,69 (2H, t, J{= 7 Hz, Ar-CH2-), 4,48 (1H, d, J{=8 Hz, H{-1 de glucosa), 6,32 (1H, d, J{=16 Hz, Ar-CH - CH-), 6.5-7.2 (6H, H aromàtic), 7.61 (1H, d, J{=16 Hz, Ar-CH =CH-). 13C-RMN: Taula I.

Tubulòsid C (VII)

Pols amorfa, [a] - iO4.8© (c=1.86, Me0H). Anal. Calculat per a C43H54024' H20: C, 53,08; H, 5,80. Trobat: C, 53,28; H, 5,68. IR v cm': 3440, 1748, 1634, 1608, 1522. UV 2" nm (log c): 220 sh (4,06), 250 sh (3,7), 292 sh (3,88), 333 (4,04). 1H-NMR (metanol-d4) 6: 1,02 (3H, d, J=6 Hz, CH3 de ramnosa), 1,80, 1,92, 1,95, 2,08 (3H cadascun, s, OAc), 2,70 (2H, t, J{{ {57}} Hz, Ar-CH{2-), 4,32, 4,56 (1H cadascun, d, J=8 Hz, H{-1 de glucosa), 5,02 (1H, br s, H-1 de ramnosa), 6,30 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-), 6.{5-7,2 (6H, H aromàtic ), 7,66 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH {=CH-). 13C-RMN: Taula I.

Tubulòsid D (VIII)

Pols amorfa, [a]P{{0}},4 graus (c= 1,85, Me0H). Anal. Calculat per a C43H54023 'H20: C, 54.00; H, 5,90. Trobat: C, 54,10; H, 5,75. IR v:,111 cm-1: 3440, 1750, 1634, 1608, 1518. UV 2,',1,2" nm (log a): 228 (4,16), 292 sh (4,21), 302 sh (4,26), 318 (4,35). 11-I-RMN (metanol-d4) 6: 1.00 (3H, d, J{=6 Hz, CH3 de ramnosa), 1,81 , 1,93, 1,96, 2,09 (3H cadascun, s, OAc), 2,70 (2H, t, J=7 Hz, Ar-CH{2-), 4,32, 4,53 (1H cadascun, d, J{ {68}} Hz, H-1 de glucosa), 5,03 (1H, br s, H-1 de ramnosa), 6,38 (1H, d, J{=16 Hz, Ar-CH =CH-), 6.52-6,75 (3H, H aromàtic), 6,84 (2H, d, J= 9 Hz, H{-3, H{{90 }} d'àcid p-cumàric), 7,54 (2H, d, J=9 Hz, H-2, H-6 d'àcid p-cumàric), 7,74 (1H, d, J =16 Hz, Ar-CH =CH-). RMN-13C: taula I.

Acetilació de II i VII

El tractament de II o VII (30 mg) amb Ac20 (1 ml) i piridina (1 ml) a temperatura ambient durant la nit seguit del tractament habitual va proporcionar un acetat brut, que es va purificar per cromatografia sobre gel de sílice. amb benzè-acetona (5:1) per donar el subacetat (IIa) (25 mg) de II o l'octaacetat (22 mg) de VII, com a agulles incolores de Me0H, pf 130-131 C. IR v cm ': 1775, 1660, 1523, 1450. 1H-RMN (CDC13) 6: 1,05 (3H, d, J= 6 Hz, CH3 de ramnosa), 1,89, 1,96, 1,97, 2,01, 3H, 11 cada una s, OAc), 2,03 (9H, s, OAc x 3), 2,29 (3H, s, Ar-OAc), 2,31 (9H, s, Ar-OAc x 3), 2,88 (2H, t, J{52 }} Hz, Ar-CH2-), 6,35 (1H, d, J{= 16 Hz, Ar-CH {= CH-), 7.0-7,4 ( 6H, H aromàtic), 7,66 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-). Es va trobar que aquests productes eren idèntics al dodecaacetat d'equinacòsid (I) per comparació directa (TLC, PF mixt, IR i 1H-NMR).

Acetilació de VI

El compost VI (40 mg) es va acetilar de la mateixa manera que es descriu per a II i el producte de reacció es va purificar per cromatografia sobre gel de sílice amb benzè-acetona (9: 1) per donar l'octaacetat (VIa) (30 mg) com a amorf. pols. IR v cm': 1742, 1630, 1498. 1H-RMN (CDC13) 6: 1,14 (3H, d, J=6 Hz, CH3 de ramnosa), 1,95, 2,03, 2,05, 2,09, 2,13 (3 H cadascuna). , s, OAc), 2,27, 2,31 (6H cadascun, s, Ar-OAc x 2), 2,87 (2H, t, J=7 Hz, Ar-CH{2-), 6,42 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH=CH-), 6.9-7,5 (6H, H aromàtic), 7,64 (1H, d, J{= 16 Hz, Ar CH=CH-). Es va trobar que VIa era idèntic al no acetat de l'isòmer acteòsid (IV) per comparació directa (TLC, IR i 11-1-RMN.

Acetilació de VIII

El compost VIII (35 mg) es va acetilar de la mateixa manera que es descriu per II per donar l'heptaacetat (VIIIa) (30 mg) com una pols amorfa. IR v cm': 1760, 1638, 1604, 1510. 1H-RMN (CDC13) 6: 1,03 (3H; d, J= 6 Hz, CH3 de ramnosa), 1,87, 1,94, 1,96, 2,19 (1,96) 3H cadascun, s, OAc), 2,02 (9H, s, OAc x 3), 2,27, 2,30, 2,32 (3H cadascun, s, Ar-OAc), 2,88 (2H, t, J=7 Hz, Ar -CH2-), 6,36 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-), 7.{0-7.2(3H, H aromàtic) , 7,25 (2H, d, J=9 Hz, H{-3, H{-5 d'àcid p-cumàric), 7,57 (2H, d, J{=9 Hz, H -2, H{-6 d'àcid p-cumàric), 7,72 (1H, d, J= 16 Hz, Ar-CH =CH-).

Metanolisi de II, VI, VII i VIII

El compost II, VI, VII o VIII (aproximadament 1 mg) es va posar a reflux amb CH3COCl metanòlic al 5% (2 ml) durant 30 min, i després es van evaporar els reactius. La presència de cafeat de metil i alcohol 3,4- dihidroxifenetílic al residu de II, VI i VII, i p-cumarat de metil i alcohol 3,4-dihidroxifenetílic en el residu de VIII, es va demostrar mitjançant TLC [CHC13—MeOH (20: 1)] i HPLC [columna, TSK GEL LS-410AK (4 x 300 mm); dissolvent, H20—Me0H (4: 6); detector (UV), 250 nm; cabal, 1,0 ml/min]. Cafeat de metil [R•¬ 0,20, tR (min) 10,8], p-cumarat de metil [R•¬ 0,40, tR (min) 15,6], 3.4-alcohol dihidroxifenetílic [R•¬ 0,06, tR (min) ) 2,8].

Hidròlisi àcida de II, VI, VII i VIII

Es va escalfar una solució de glucòsid (aproximadament 2 mg) en 10 per cent d'H2SO4 (1 ml) en un bany d'aigua bullint durant 30 min. La solució es va fer passar per una columna Amberlite IR-45 i l'eluat es va concentrar per donar un residu, que es va reduir amb borohidrur de sodi (aproximadament 3 mg) durant 1 h. La mescla de reacció es va passar per una columna Amberlite IR-120 i es va concentrar fins a sequedat. L'àcid bòric es va eliminar per destil·lació amb MeOH i el residu es va acetilar amb Ac2O (1 gota) i piridina (1 gota) a 100•Ž durant 1 h. Els reactius es van evaporar. L'acetat de glucitol i l'acetat de ramnitol es van detectar en una proporció de 2 a 1 de II, VII i VIII, i d'1 a 1 de VI per GC. tR (min): 2,0 (acetat de ramnitol), 5,5 (acetat de glucitol). Condicions per a GC: columna, 1,5 per cent OV-17 (3 mm x 1,5 m); temp. columna, 180•Ž; gas portador, N2 (30 ml/min).

Reconeixement

Agraïm al Prof. Dr. SI Ali, Departament de Botànica, Universitat de Karachi, la seva identificació de la planta.

Referències i notes

1) H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase i S. Fukushima, Chem. Farmàcia. Bull., 32, 3009 (1984).

2) H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase i S. Fukushima, Chem. Farmàcia. Bull., 32, 3880 (1984).

3) a) H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase i S. Fukushima, Chem. Farmàcia. Bull., 33, 1452 (1985); b) H. Karasawa, H. Kobayashi, N. Takizawa, T. Miyase i S. Fukushima, Yakugaku Zasshi, 106, 562 (1986); c) Idem, ibid., 106, 721 (1986).

4) a) H. Kobayashi i J. Komatsu, Yakugaku Zasshi, 103, 508 (1983); b) H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase i S. Fukushima, Chem. Farmàcia. Bull., 32, 1729 (1984); c) Ídem, ibid., 33, 3645 (1985).

5) E. Nasir i SI Ali, "Flora of West Pakistan", Vol. 98, Shamin Printing Press, Karachi, 1976, pàg. 4.

6) SR Baquar i M. Tasnif, "Plantes medicinals del sud-oest del Pakistan", vol. 3, Butlletí/Monografia del Consell de Recerca Científica i Industrial del Pakistan, Karachi, 1967, pàg. 56.

7) T. Miyase, A. Koizumi, A. Ueno, T. Noro, M. Kuroyanagi, S. Fukushima, Y. Akiyama i T. Takemoto, Chem. Farmàcia. Bull., 30, 2732 (1982).

8) K. Yoshimoto, Y. Itatani i Y. Tsuda, Chem. Farmàcia. Bull., 28, 2065 (1980).

9) I. Kitagawa, HK Wang, M. Saito, A. Takagi i M. Yoshikawa, Chem. Farmàcia. Bull., 31, 698 (1983).

10) K. Endo, K. Takahashi, T. Abe i H. Hikino, Heterocycles, 16, 1311 (1981). 11) I. Calis, MF Lahloub, E. Rogenmoser i O. Sticher, Phytochemistry, 23, 2313 (1984).