Part 3: Funcions diferents per al domini de la deacetilasa de HDAC3 a l'hipocamp i l'escorça prefrontal medial en la formació i l'extinció de la memòria

per a més informació:ali.ma@wecistanche.com

Si us plau, feu clic aquí per tornar a la part 2

Feu clicCistanches i Cistanche per millorar la memòria

Agraïments

Un agraïment especial al Dr. Norbert J. Fortin per la seva ajuda amb l'anàlisi estadística.

Fonts de finançament: aquest treball va comptar amb el suport de subvencions de l'Institut Nacional sobre Abús de Drogues i l'Institut Nacional de Salut Mental (DA025922, DA036984, MH101491) a les subvencions de MAW i NIDA i de l'Institut Nacional d'Envelliment (NIA) (F32 DA043998 i T32 AG{{ 6}}) a YA.

Referències

Alenghat T, Meyers K, Mullican SE, Leitner K, Adeniji-Adele A, Avila J, Bucan M, Ahima RS, Kaestner KH, Lazar MA. El corepressor del receptor nuclear i la histona deacetilasa 3 regeixen la fisiologia metabòlica circadiana. Naturalesa. 2008; 456:997–1000. [PubMed: 19037247]

Balderas I, Rodríguez-Ortiz CJ, Salgado-Tonda P, Chavez-Hurtado J, McGaugh JL, Bermudez-Rattoni F. The consolidation of object and context recognitionmemòriaimplica diferents regions del lòbul temporal. Aprèn Mem. 2008; 15:618–624. [PubMed: 18723431]

Baltan S, Bachleda A, Morrison RS, Murphy SP. Expressió d'histones deacetilases en compartiments cel·lulars del cervell del ratolí i efectes de la isquèmia. Res. traç transl. 2011; 2:411–423. [PubMed: 21966324]

Barrett RM, Malvaez M, Kramar E, Matheos DP, Arrizon A, Cabrera SM, Lynch G, Greene RW, Wood MA. L'eliminació focal de l'hipocamp de la CBP afecta modificacions específiques d'histona, potenciació a llarg termini i a llarg termini.memòria. Neuropsicofarmacologia. 2011; 36: 1545–1556. [PubMed: 21508930]

Bowers ME, Xia B, Carreiro S, Ressler KJ. L'inhibidor HDAC de classe I RGFP963 millora la consolidació de l'extinció de la por. Aprèn Mem. 2015; 22:225–231. [PubMed: 25776040]

Broide RS, Redwine JM, Aftahi N, Young W, Bloom FE, Winrow CJ. Distribució de les histones deacetilases 1-11 al cervell de rata. J Mol Neurosci. 2007; 31:47–58. [PubMed: 17416969]

Burger C, Gorbatyuk OS, Velardo MJ, Peden CS, Williams P, Zolotukhin S, Reier PJ, Mandel RJ, Muzyczka N. Els vectors virals AAV recombinants pseudotipats amb càpsides virals dels serotips 1, 2 i 5 mostren una eficiència diferencial i un tropisme cel·lular després lliurament a diferents regions del sistema nerviós central. Mol Ther. 2004; 10:302–317. [PubMed: 15294177]

Dere E, Huston JP, De Souza Silva MA. La farmacologia, la neuroanatomia i la neurogenètica del reconeixement d'objectes en un sol assaig en rosegadors. Neurosci Biobehav Rev 2007; 31:673–704. [PubMed: 17368764]

Ennaceur A. Reconeixement d'objectes en un sol assaig en rates i ratolins: qüestions metodològiques i teòriques. Comportament Cervell Res. 2010; 215:244–254. [PubMed: 20060020]

Fanselow MS, Dong HW. L'hipocamp dorsal i ventral són estructures funcionalment diferents? Neurona. 2010; 65:7–19. [PubMed: 20152109]

Fischle W, Dequiedt F, Hendzel MJ, Guenther MG, Lazar MA, Voelter W, Verdin E. L'activitat enzimàtica associada als HDAC de classe II depèn d'un complex multiproteic que conté HDAC3 i SMRT/N-CoR. Cèl·lula Mol. 2002; 9:45–57. [PubMed: 11804585]

Fuchs RA, Evans KA, Ledford CC, Parker MP, Case JM, Mehta RH, Vegeu RE. El paper de l'escorça prefrontal dorsomedial, l'amígdala basolateral i l'hipocamp dorsal en la restabliment contextual de la recerca de cocaïna a les rates. Neuropsicofarmacologia. 2005; 30:296–309. [PubMed: 15483559]

Fuchs RA, Eaddy JL, Su ZI, Bell GH. Les interaccions de l'amígdala basolateral amb l'hipocamp dorsal i l'escorça prefrontal dorsomedial regulen el restabliment de la recerca de cocaïna a les rates induïda pel context de la droga. Eur J Neurosci. 2007; 26:487–498. [PubMed: 17650119]

Gräff J, Tsai LH. Acetilació d'histones: mnemotècnia molecular de la cromatina. Nat Rev Neurosci. 2013; 14:97–111. [PubMed: 23324667]

Guenther MG, Barak O, Lazar MA. Els corepressors SMRT i N-CoR són cofactors activadors de la histona desacetilasa 3. Mol Cell Biol. 2001; 21:6091–6101. [PubMed: 11509652]

Guenther MG, Yu J, Kao GD, Yen TJ, Lazar MA. El muntatge del complex de repressió SMRT-histona desacetilasa 3 requereix el complex d'anell TCP-1. Genes Dev. 2002; 16:3130–3135. [PubMed: 12502735]

Haberland M, Montgomery RL, Olson EN. Els molts papers de les histones deacetilases en el desenvolupament i la fisiologia: implicacions per a la malaltia i la teràpia. Nat Rev Genet. 2009; 10:32–42. [PubMed: 19065135]

Hartig J, Stefanko DP, Multani ML, Figueroa DX, McQuown SC, Wood MA. La inhibició de l'HDAC modula a llarg termini depenent de l'hipocampmemòriaper a la localització d'objectes de manera dependent del CBP. Aprèn Mem. 2011; 18:71–79. [PubMed: 21224411]

Haettig J, Sun Y, Wood MA, Xu X. La inactivació específica del tipus cel·lular de l'hipocamp CA1 altera el reconeixement d'objectes depenent de la ubicació al ratolí. Aprèn Mem. 2013; 20:139–146. [PubMed: 23418393]

Isaac WL, Nonneman AJ, Neisewander J, Landers T, Bardo MT. Les lesions de l'escorça prefrontal alteren de manera diferenciada la preferència de llocs condicionats reforçats amb cocaïna, però no l'aversió al gust condicionada. Neurosciència del comportament. 1989; 103:345–355. [PubMed: 2706078]

Jenuwein T, Allis CD. Traducció del codi d'histona. Ciència. 2001; 293:1074–1080. [PubMed: 11498575]

Kalivas PW, McFarland K. Circuits cerebrals i restabliment del comportament de recerca de cocaïna. Psicofarmacologia (Berl). 2003; 168:44–56. [PubMed: 12652346]

Kojima N, Wang J, Mansuy IM, Grant SG, Mayford M, Kandel ER. Rescatant el deteriorament de la potenciació a llarg termini en ratolins amb deficiència de fyn mitjançant la introducció del transgen Fyn. Proc Natl Acad Sci US A. 1997; 94:4761–4765. [PubMed: 9114065]

Kouzarides T. Modificacions de la cromatina i la seva funció. Cèl·lula. 2007; 128:693–705. [PubMed: 17320507]

Krasnova IN, Li SM, Wood WH, McCoy MT, Prabhu VV, Becker KG, Katz JL, Cadet JL. Respostes transcripcionals als efectes de reforç de la cocaïna a l'hipocamp i l'escorça de la rata. Comportament del cervell dels gens. 2008; 7:193–202. [PubMed: 17640290]

Kwapis JL, Alaghband Y, López AJ, White AO, Campbell RR, Dang RT, Rhee D, Tran AV, Carl AE, Matheos DP, Wood MA. El context i la por auditiva estan regulades de manera diferent per l'activitat HDAC3 als subnuclis laterals i basals de l'amígdala. Neuropsicofarmacologia. 2017; 42:1284–1294. [PubMed: 27924874]

Lahm A, Paolini C, Pallaoro M, Nardi MC, Jones P, Neddermann P, Sambucini S, Bottomley MJ, Lo Surdo P, Carfi A, Koch U, De Francesco R, Steinkuhler C, Gallinari P. Unraveling the hidden catalytic activity of histones deacetilases de classe IIa de vertebrats. Proc Natl Acad Sci US A. 2007; 104:17335–17340. [PubMed: 17956988]

LaLumiere RT, Niehoff KE, Kalivas PW. L'escorça infralímbica regula la consolidació de l'extinció després de l'autoadministració de cocaïna. Aprèn Mem. 2010; 17:168–175. [PubMed: 20332188]

Laurent V, Westbrook RF. La inactivació de l'escorça infralímbica però no de l'escorça prelímbica perjudica la consolidació i la recuperació de l'extinció de la por. Aprèn Mem. 2009; 16:520–529. [PubMed: 19706835]

Lebrón K, Milad MR, Quirk GJ. Recordatori retardat de l'extinció de la por en rates amb lesions de l'escorça prefrontal medial ventral. Aprèn Mem. 2004; 11:544–548. [PubMed: 15466306]

Levenson JM, Sweatt JD. Mecanismes epigenètics: un tema comú en vertebrats i invertebratsmemòriaformació. Cell Mol Life Sci. 2006; 63:1009–1016. [PubMed: 16596331]

López AJ, Kramar E, Matheos DP, White AO, Kwapis J, Vogel-Ciernia A, Sakata K, Espinoza M, Wood MA. Efectes específics del promotor de la modulació DREADD sobre la plasticitat sinàptica de l'hipocamp iFormació de la memòria. J Neurosci. 2016; 36:3588–3599. [PubMed: 27013687]

Malvaez M, Sanchis-Segura C, Vo D, Lattal KM, Wood MA. La modulació de la modificació de la cromatina facilita l'extinció de la preferència de llocs condicionats induïda per la cocaïna. Biol Psiquiatria. 2010; 67:36–43. [PubMed: 19765687]

Malvaez M, Mhillaj E, Matheos DP, Palmery M, Wood MA. La CBP al nucli accumbens regula l'acetilació d'histones induïda per la cocaïna i és fonamental per als comportaments associats a la cocaïna. J Neurosci. 2011; 31: 16941–16948. [PubMed: 22114264]

Narvaez M, McQuown SC, Rogge GA, Astarabadi M, Jacques V, Carreiro S, Rusche JR, Wood MA. L'inhibidor selectiu de l'HDAC3-millora l'extinció del comportament de recerca de cocaïna d'una manera persistent. Proc Natl Acad Sci US A. 2013; 110:2647–2652. [PubMed: 23297220]

Maren S. Neurobiologia de la por pavloviana a condicionar. Annu Rev Neurosci. 2001; 24:897–931. [PubMed: 11520922]

Marie-Claire C, Laurendeau I, Canestrelli C, Courtin C, Vidaud M, Roques B, Noble F. Fos però no Cart (transcripció regulada per cocaïna i amfetamines) està sobreexpressat per diverses drogues d'abús: un estudi comparatiu amb temps real Reacció quantitativa en cadena de la polimerasa al cervell de rata. Neurosci Lett. 2003; 345:77–80. [PubMed: 12821175]

McQuown SC, Wood MA. HDAC3 i la hipòtesi de pastilles de fre molecular. Neurobiol Learn Mem. 2011; 96:27–34. [PubMed: 21521655]

McQuown SC, Barrett RM, Matheos DP, Post RJ, Rogge GA, Alenghat T, Mullican SE, Jones S, Rusche JR, Lazar MA, Wood MA. HDAC3 és un regulador negatiu crític deformació de la memòria a llarg termini. J Neurosci. 2011; 31:764–774. [PubMed: 21228185]

Meyers RA, Zavala AR, Neisewander JL. Les lesions de l'hipocamp dorsals, però no ventrals, alteren el condicionament del lloc de cocaïna. Neuroinforme. 2003; 14:2127–2131. [PubMed: 14600510]

Mullican SE, Gaddis CA, Alenghat T, Nair MG, Giacomin PR, Everett LJ, Feng D, Steger DJ, Schug J, Artis D, Lazar MA. La histona deacetilasa 3 és un fre epigenòmic en l'activació alternativa dels macròfags. Genes Dev. 2011; 25:2480–2488. [PubMed: 22156208]

Mumby DG. Perspectives sobre la memòria de reconeixement d'objectes després de danys a l'hipocamp: lliçons d'estudis en rates. Comportament Cervell Res. 2001; 127:159–181. [PubMed: 11718890]

Parkinson JA, Olmstead MC, Burns LH, Robbins TW, Everitt BJ. Disssociació dels efectes de les lesions del nucli i la closca del nucli accumbens sobre el comportament d'aproximació pavloviana apetitiva i la potenciació del reforç condicionat i l'activitat locomotora per D-amfetamina. J Neurosci. 1999; 19:2401–2411. [PubMed: 10066290]

Peixoto L, Abel T. El paper de l'acetilació d'histones en la formació de la memòria i els deterioraments cognitius. Neuropsicofarmacologia. 2013; 38:62–76. [PubMed: 22669172]

Penney J, Tsai LH. Histona deacetilases en memòria i cognició. Senyal Sci. 2014; 7:re12. [PubMed: 25492968]

Peters J, LaLumiere RT, Kalivas PW. L'escorça prefrontal infralímbica és responsable d'inhibir la recerca de cocaïna en rates extingides. J Neurosci. 2008; 28:6046–6053. [PubMed: 18524910]

Peters J, Kalivas PW, Quirk GJ. Els circuits d'extinció de la por i l'addicció es superposen a l'escorça prefrontal. Aprèn Mem. 2009; 16:279–288. [PubMed: 19380710]

Pfaffl MW. Un nou model matemàtic per a la quantificació relativa en RT-PCR en temps real. Àcids nucleics Res. 2001; 29:e45. [PubMed: 11328886]

Pfaffl MW, Georgieva TM, Georgiev IP, Ontsouka E, Hageleit M, Blum JW. Quantificació per RT-PCR en temps real del factor de creixement semblant a la insulina (IGF)-1, receptor IGF-1, receptor IGF{-2, receptor IGF{-2, receptor d'insulina, hormona del creixement receptor, proteïnes d'unió a IGF 1, 2 i 3 a l'espècie bovina. Domest Anim Endocrinol. 2002; 22:91–102. [PubMed: 11900967]

Quirk GJ, Russo GK, Barron JL, Lebron K. El paper de l'escorça prefrontal ventromedial en la recuperació de la por extingida. J Neurosci. 2000; 20:6225–6231. [PubMed: 10934272]

Quirk GJ, Garcia R, Gonzalez-Lima F. Mecanismes prefrontals en extinció de la por condicionada. Biol Psiquiatria. 2006; 60:337–343. [PubMed: 16712801]

Rescorla RA. Comparació de les taxes de canvi associatiu durant l'adquisició i l'extinció. J Exp Psychol Anim Behav Process. 2002; 28:406–415. [PubMed: 12395498]

Rogge GA, Singh H, Dang R, Wood MA. HDAC3 és un regulador negatiu de la formació de memòria associada al context de la cocaïna. J Neurosci. 2013; 33:6623–6632. [PubMed: 23575859]

Roozendaal B, Hernandez A, Cabrera SM, Hagewoud R, Malvaez M, Stefanko DP, Haettig J, Wood MA. L'activitat glucocorticoide associada a la membrana és necessària per a la modulació de la memòria a llarg termini mitjançant la modificació de la cromatina. J Neurosci. 2010; 30:5037–5046. [PubMed: 20371824]

Rumbaugh G, Sillivan SE, Ozkan ED, Rojas CS, Hubbs CR, Aceti M, Kilgore M, Kudugunti S, Puthanveettil SV, Sweatt JD, Rusche J, Miller CA. La selectivitat farmacològica dins de les histones deacetilases de classe I prediu efectes sobre la funció sinàptica i el rescat de la memòria. Neuropsicofarmacologia. 2015; 40:2307–2316. [PubMed: 25837283]

Sando R 3r, Gounko N, Pieraut S, Liao L, Yates J 3r, Maximov A. HDAC4 governa un programa transcripcional essencial per a la plasticitat sinàptica i la memòria. Cèl·lula. 2012; 151:821–834. [PubMed: 23141539]

Sierra-Mercado D Jr, Corcoran KA, Lebron-Milad K, Quirk GJ. La inactivació de l'escorça prefrontal ventromedial redueix l'expressió de la por condicionada i perjudica el record posterior de l'extinció. Eur J Neurosci. 2006; 24:1751–1758. [PubMed: 17004939]

Stafford JM, Raybuck JD, Ryabinin AE, Lattal KM. L'augment de l'acetilació d'histones a la xarxa hipocamp-infralímbica millora l'extinció de la por. Biol Psiquiatria. 2012; 72:25–33. [PubMed: 22290116]

Stefanko DP, Barrett RM, Ly AR, Reolon GK, Wood MA. Modulació de la memòria a llarg termini per al reconeixement d'objectes mitjançant inhibició HDAC. Proc Natl Acad Sci US A. 2009; 106:9447–9452. [PubMed: 19470462]

Sun Z, Feng D, Fang B, Mullican SE, You SH, Lim HW, Everett LJ, Nabel CS, Li Y, Selvakumaran V, Won KJ, Lazar MA. La funció independent de la desacetilasa de HDAC3 en la transcripció i el metabolisme requereix un corepressor del receptor nuclear. Cèl·lula Mol. 2013; 52:769–782. [PubMed: 24268577]

Tzschentke TM, Schmidt WJ. Les lesions discretes d'àcid quinolínic de l'escorça prefrontal medial prelímbica de rata afecten la cocaïna i la MK-801-, però no la recompensa i l'activació psicomotora induïda per morfina i amfetamina, tal com es mesura amb el paradigma de condicionament de preferència de lloc. Comportament Cervell Res. 1998; 97:115–127. [PubMed: 9867237]

Tzschentke TM, Schmidt WJ. Heterogeneïtat funcional de l'escorça prefrontal medial de rata: efectes de lesions específiques de subàrea discreta sobre la preferència de llocs condicionats induïts per fàrmacs i la sensibilització del comportament. Eur J Neurosci. 1999; 11:4099–4109. [PubMed: 10583498]

Vogel-Ciernia A, Matheos DP, Barrett RM, Kramar EA, Azzawi S, Chen Y, Magnan CN, Zeller M, Sylvain A, Haettig J, Jia Y, Tran A, Dang R, Post RJ, Chabrier M, Babayan AH, Wu JI, Crabtree GR, Baldi P, Baram TZ, Lynch G, Wood MA. La subunitat reguladora de la cromatina específica de la neurona BAF53b és necessària per a la plasticitat sinàptica i la memòria. Nat Neurosci. 2013; 16:552–561. [PubMed: 23525042]

Vogel-Ciernia A, Wood MA. Remodelació de la cromatina específica de la neurona: un enllaç que falta en els mecanismes epigenètics subjacents a la plasticitat sinàptica, la memòria i els trastorns de la discapacitat intel·lectual. Neurofarmacologia. 2014; 80:18–27. [PubMed: 24140580]

White AO, Kramar EA, López AJ, Kwapis JL, Doan J, Saldana D, Davatolhagh MF, Alaghband Y, Blurton-Jones M, Matheos DP, Wood MA. BDNF rescata la plasticitat sinàptica depenent de BAF53b i la memòria associada a la cocaïna al nucli accumbens. Nat Commun. 2016; 7:11725. [PubMed: 27226355]

Winters BD, Saksida LM, Bussey TJ. Memòria de reconeixement d'objectes: mecanismes neurobiològics de codificació, consolidació i recuperació. Neurosci Biobehav Rev 2008; 32:1055–1070. [PubMed: 18499253]

Zhang J, Kalkum M, Chait BT, Roeder RG. El complex corepressor del receptor nuclear N-CoR-HDAC3 inhibeix la via JNK a través de la subunitat integral GPS2. Cèl·lula Mol. 2002; 9:611–623. [PubMed: 11931768]

Destacats

► El bloqueig de l'activitat de la deacetilasa HDAC3 a l'hipocamp dorsal va millorar la memòria a llarg termini de la ubicació de l'objecte, però no va tenir cap efecte en la formació de memòria associada a la cocaïna. ► La deterioració del domini HDAC3 deacetilasa a l'escorça prelímbica no va tenir cap efecte en la formació de memòria associada a la cocaïna. ► El bloqueig de l'activitat de la desacetilasa HDAC3 a l'escorça infralímbica no va tenir cap efecte sobre l'extinció. ► La interrupció de l'activitat de la desacetilasa HDAC3 a l'hipocamp dorsal va provocar l'extinció facilitat.

Figura 1.

El virus mutant puntual negatiu dominant (HDAC3(Y298H)-v5 s'expressa eficaçment a l'hipocamp dorsal. (A) Es va afegir l'epítop V5 al virus mutant puntual. (B) Imatge representativa d'immunofluorescència que mostra l'expressió de l'epítop V5 (verd) a l'epítop. hipocamp dorsal (DH) després de la infusió d'AAV-HDAC3(Y298H)-v5. No es va observar cap tinció de V5 amb el virus de control AAV-EV. Les cèl·lules es van contrastar amb DAPI (blau). (C) L'ARNm de V5 va augmentar significativament a la DH. ratolins infusionats amb AAV-HDAC3(Y298H)-v5, AAV-EV n {{20}}, HDAC3(Y298H)-v5 n=4. (D) HDAC3 també va augmentar significativament en el Ratolins DH infusos amb AAV-HDAC(Y298H)-v5 en comparació amb els controls AAV-EV, AV-EV n=6, HDAC3(Y298H)-v5 n=6. *p < 0,05.

Figura 2.

Bloquejar l'activitat HDAC3 a la memòria millorada de DH per a la ubicació d'objectes (OLM), però no per al reconeixement d'objectes (ORM). (A) Els ratolins van rebre entrenament subllindar (3 min) en un entorn amb dos objectes idèntics i van rebre una prova de retenció 24 hores després en què un objecte es trasllada a una nova ubicació. L'esquema descriu mètodes per a B i C. (B) Els ratolins que van rebre AAV-HDAC3(Y298H)-v5 van mostrar una preferència significativa per la ubicació de l'objecte nou 24 hores després de l'entrenament en comparació amb els controls EV, AAV-EV n {{10 }}, HDAC3(Y298H)-v5 n=6. (C) Els grups no difereixen en el temps total d'exploració dels dos objectes. (D) Els ratolins van rebre entrenament subllindar (3 min) en un entorn amb dos objectes idèntics i van rebre una prova de retenció 24 hores després en què un objecte es va substituir per un de nou (ORM), AAV-EV n=9, HDAC3(Y298H)-v5 n=7. L'esquema descriu mètodes per a E i F. (E) Ni el control AAV-EV ni els ratolins AAV-HDAC3(Y298H)-v5 van mostrar una preferència significativa pel nou objecte. (F) Els grups no difereixen en el temps total d'exploració dels dos objectes. *p <>

Figura 3.

El bloqueig de l'activitat HDAC3 a l'hipocamp dorsal no té cap efecte sobre la formació de la memòria CPP induïda per la cocaïna. (A) Esquema del procediment de cocaïna-CPP. (B) Expressió de cocaïna-CPP indicada per la puntuació mitjana de CPP (temps passat en parella de cocaïna (CS més) menys parella de solució salina (CS−) ± sem). A una dosi de condicionament de cocaïna de 5 mg/kg, els ratolins AAV-HDAC3(Y298H)-v5 van mostrar una puntuació CPP similar als controls EV durant la prova posterior, AAV-EV n=15, HDAC3 (Y298H) -v5 n {{ 19}}.

Figura 4.

La supressió del gen homozigot focal de Hdac3 a l'hipocamp dorsal no té cap efecte sobre la formació de la memòria CPP induïda per la cocaïna. (A) Esquema del procediment de cocaïna-CPP. (B) Expressió de cocaïna-CPP indicada per la puntuació mitjana de CPP (temps passat en parella de cocaïna (CS més) menys parella de solució salina (CS−) ± sem). A una dosi de condicionament de cocaïna de 5 mg/kg, els ratolins Hdac3flox/flox van mostrar una puntuació CPP similar als controls Hdac3 plus/plus durant la prova posterior. (C) Imatge d'immunofluorescència representativa que mostra l'expressió de HDAC3 (verd) a l'hipocamp dorsal després de la infusió d'AAV2.1 Cre infusa en ratolins Hdac3 plus / plus i Hdac3flox/flox. Les cèl·lules es van tacar amb DAPI (blau). (D) La quantificació de la immunotinció va confirmar que HDAC3 es va reduir significativament en els ratolins Hdac3flox/flox en comparació amb els controls Hdac3 plus/plus, Hdac3 plus/plus n=12, Hdac3flox/flox n=11. *p <>

Figura 5.

El bloqueig de l'activitat HDAC3 a l'escorça prelímbica (PrL) no té cap efecte sobre la formació de la memòria CPP induïda per la cocaïna. (A) Esquema del procediment de cocaïna-CPP. (B) Expressió de cocaïna-CPP indicada per la puntuació mitjana de CPP (temps passat en parella de cocaïna (CS més) menys parella de solució salina (CS−) ± sem). A una dosi de condicionament de cocaïna de 5 mg/kg, els ratolins AAV-HDAC3(Y298H)-v5 van mostrar una puntuació CPP similar als controls EV durant la prova posterior, AAV-EV n=12, HDAC3 (Y298H) -v5 n {{ 19}}. (C) Imatge d'immunofluorescència representativa que mostra l'expressió de l'epítop V5 (verd) després de la infusió d'AAV-HDAC3 (Y298H) -v5 dirigida al PrL. No es va observar cap tinció de V5 amb el virus de control AAV-EV. Les cèl·lules es van tacar amb DAPI (blau) i les neurones es van tacar amb NeuroTrace (vermell). L'expressió V5 es va limitar en gran mesura a la regió prelímbica de l'escorça prefrontal medial. (D) Infusió viral dirigida a la PrL. Les regions ombrejades de les imatges de l'atles del ratolí il·lustren l'extensió representativa de la infusió viral.

Figura 6.

El bloqueig de l'activitat HDAC3 a l'escorça infralímbica (IL) no té cap efecte sobre l'extinció de la memòria CPP induïda per la cocaïna. (A) Esquema del procediment cocaïna-CPP. (B) Expressió de cocaïna-CPP indicada per la puntuació mitjana de CPP (temps passat en parella de cocaïna (CS més) menys parella de solució salina (CS−) ± sem). Els animals van ser entrenats inicialment amb 20 mg/kg de cocaïna. Posteriorment, els animals van rebre infusions virals intra-IL AAV-EV o AAV-HDAC3 (Y298H) -v5 i es va examinar la memòria d'extinció. Els ratolins AAV-HDAC3(Y298H)-v5 van mostrar una puntuació CPP similar als controls EV durant les proves posteriors 2-5, AAV-EV n=17, HDAC3 (Y298H)-v5 n=16. (C) Imatge representativa d'immunofluorescència que mostra l'expressió de l'epítop V5 (verd) després de la infusió d'AAV-HDAC3 (Y298H) -v5 dirigida a IL. No es va observar cap tinció de V5 amb el virus de control AAV-EV. Les cèl·lules es van tacar amb DAPI (blau) i les neurones es van tacar amb NeuroTrace (vermell). L'expressió V5 es va limitar en gran mesura a la regió infralímbica de l'escorça prefrontal medial. (D) Infusió viral dirigida a la IL. Les regions ombrejades de les imatges de l'atles del ratolí il·lustren l'extensió representativa de la infusió viral.