Segona PART Els glucòsids de feniletanol protegeixen la hipertròfia del miocardi induïda per la constricció aòrtica abdominal mitjançant la inhibició de la desmetilació ECE 1 i la millora de la via ENOS PI3K PKB

Contacte: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Correu electrònic:audrey.hu@wecistanche.com

Feu clic aquí per a la primera part

En un estudi anterior, vam trobar que la desmetilació ECE-1 funcionava sobre la hipertensió i podria tenir efectes en la producció d'ET-1 [13]. En conseqüència, ens vam preguntar si els CPhG(GLICÒSIDE FENILETANOLIDE DE CISTANCHE)afectaria el nivell de desmetilació de l'ECE-1. Com es mostra a la figura 7, en comparació amb el grup simulat, el nivell de metilació de l'ECE-1 al teixit del miocardi es va augmentar significativament al grup AAC. Al mateix temps, es va reduir significativament en els grups d'AC 125, 250 i 500 mg/kg en comparació amb el grup d'AAC. -e el nivell de desmetilació del gen ECE-1 al grup de 125 mg/kg d'AC va ser significativament superior al del grup AV; no hi va haver cap diferència significativa en el grup d'AC 125 mg/kg, però es va trobar una caiguda significativa en el grup de 500 mg/kg d'AC en comparació amb el grup AV.

3.7. CPhG(GLICÒSID FENYLETHANOILD DE CISTANCHE)Disminució de l'expressió d'ECE-1 al teixit miocàrdic de rates després de la CAA.

Per entendre millor l'efecte de la metilació de l'ECE-1, vam detectar l'expressió d'ARNm, proteïnes i immunohistoquímica de l'ECE-1 al teixit del miocardi. Com es mostra a la figura 8, en comparació amb el grup simulat, els nivells d'expressió relatius de l'ARNm ECE-1, els nivells d'expressió relatius de proteïnes i l'àrea mitjana d'immunohistoquímica del miocardi es van reduir significativament al grup AAC. La figura 8 (c) revela que, en comparació amb el grup AAC, els nivells d'expressió relativa de l'ARNm ECE-1 es van reduir significativament en els grups de 250 i 500 mg/kg d'AC; en comparació amb el grup AV, eren significativament més alts en els grups d'AC 125 i 250 mg/kg, però no eren significativament diferents en el grup d'AC 500 mg/kg. Mentrestant, com es pot veure a les figures 8 (a) i 8 (b), en comparació amb el grup AAC, els nivells d'expressió relativa de la proteïna ECE-1 es van reduir significativament en el grup AC 250 i 500 mg/kg; tanmateix, no eren significativament diferents en el grup AC 250 i 500 mg/kg en comparació amb els del grup AV. Les figures 8 (d) i 8 (e) indiquen que, en comparació amb el grup AAC, l'àrea d'expressió d'ECE-1 al teixit del miocardi de rates es va reduir significativament en el grup AC 125, 250 i 500 mg/kg. ; tanmateix, en comparació amb el grup AV, va ser significativament més alt en els grups d'AC 125 i 250 mg/kg i no va mostrar cap diferència significativa en els grups d'AC 500 mg/kg.

3.8. CPhG(GLICÒSID FENYLETHANOILD DE CISTANCHE)S'ha reduït el nivell d'ET-1 de plasma en rates després de la CAA.

També vam mesurar els nivells plasmàtics d'ET-1 a rates mitjançant ELISA, tal com es mostra a la figura 9, en comparació amb el grup simulat, els nivells plasmàtics d'ET-1 al grup AAC es van augmentar significativament. Mentrestant, els nivells plasmàtics d'ET-1 van mostrar una tendència ascendent en el grup d'AC 125 mg/kg, però no van indicar cap diferència significativa en els grups d'AC 250 i 500 mg/kg en comparació amb els del grup AV. 3.9. CPhG(GLICÒSID FENYLETHANOILD DE CISTANCHE)S'ha augmentat l'expressió de la via PI3K/PKB/eNOS a les rates després de l'AAC. PI3K/PKB/eNOS és una via important en el procés d'hipertròfia del miocardi i té una connexió important amb ET-1 [14–16]. -per tant, vam detectar encara més els nivells d'expressió de proteïnes de la via PI3K/PKB/eNOS al teixit del miocardi de rata. Com es mostra a la figura 10, en comparació amb el grup simulat, el relatiuels nivells d'expressió de les proteïnes p-PI3K, p-PKB i p-eNOS al grup AAC es van reduir significativament; tanmateix, en comparació amb el grup AAC, els nivells d'expressió relativa de p-PI3K van augmentar significativament en els grups de 250 i 500 mg/kg d'AC. Al mateix temps, els nivells d'expressió relativa van mostrar una tendència descendent en el grup d'AC 125 mg/kg i no van mostrar cap diferència significativa en els grups de 250 i 500 mg/kg d'AC en comparació amb els del grup AV. Com es mostra a la figura 10 (b), en comparació amb el grup AAC, els nivells d'expressió relativa de p-PKB es van augmentar significativament en el grup AC 250 i 500 mg/kg. Mentrestant, eren significativament més baixos en el grup d'AC 125 mg/kg i no eren significativament diferents en els grups d'AC 250 i 500 mg/kg en comparació amb els del grup AV. Tal com es mostra a la figura 10 (c), en comparació amb el grup AAC, els nivells d'expressió relativa de p-eNOS van augmentar significativament en els grups d'AC 125, 250 i 500 mg/kg; tanmateix, en comparació amb el grup AV, els nivells d'expressió relativa van presentar una tendència significativament a la baixa en els grups AC 125 i 250 mg/kg, però no van mostrar cap diferència significativa en el grup AC 500 mg/kg.

PRESTACIÓ CISTANCHE

4. Discussió

En comparació amb els pacients amb hipertensió, els que tenen hipertensió i hipertròfia cardíaca tenen una probabilitat 6-8 més gran d'infart agut de miocardi, insuficiència cardíaca crònica i fins i tot mort cardíaca sobtada, que afecta greument el tractament i el pronòstic de la hipertensió [23, 24] . En aquestes circumstàncies, el tractament de la hipertensió no s'ha de limitar al control de la pressió arterial. En conseqüència, la reversió de la hipertròfia cardíaca, com a factor clau, també mereix una gran preocupació. En pacients amb hipertròfia cardíaca, la síntesi de proteïnes de cardiomiòcits augmenta en nombre, augmenta de mida, s'engrossi a les parets cel·lulars, juntament amb l'aparició de més sarcòmers, proliferació de fibroblasts intersticials i proliferació de col·lagen cardíac. Al mateix temps, també augmenta l'expressió de marcadors d'hipertròfia cardíaca, com ara l'ARNm ANP, BNP i -MHC [25–27]. Com a medicina tradicional xinesa per al tractament de la infertilitat femenina i la impotència masculina, la tija deCistanche tubulosaes va registrar per primera vegada a la Materia Medica de Shen Nong el ca. 100 aC i actualment s'utilitza àmpliament com a mena d'aliment saludable a la zona del sud-est asiàtic [28]. En els darrers anys,Cistanche tubulosaha cridat l'atenció de la comunitat mèdica per la seva important activitat biològica. Com a herba antifatiga tradicional, no nomésCistanche tubulosaté la funció de protecció muscular, però també el seu extracte pot millorar l'emmagatzematge d'ATP i reduir el dany muscular després de l'exercici en rates [29]. Segons els resultats d'experiments ex vivo, Cistanche tubulosa també té un efecte protector contra la toxicitat muscular induïda per estatines amb l'ajuda de la via de la caspasa [30]. A més, els investigadors han estudiat els efectes farmacològics de Cistanche tubulosa en la protecció cardiovascular i altres aspectes i han trobat queCistanche tubulosapodria inhibir l'augment de la glucosa en sang en dejú i la glucosa en sang postprandial, millorar la resistència a la insulina i millorar la dislipèmia, així com inhibir la pèrdua de pes en ratolins db/db [31].

Extracte de Cistanche tubulosa

Estudis anteriors van demostrar que els CPhG(GLICÒSIDE FENILETANOLIDE DE CISTANCHE)pot reduir el dany dels radicals lliures a la membrana mitocondrial del miocardi i l'omentum plasmàtic, reduir el contingut de malondialdehid, reduir el dany ultraestructural del miocardi, augmentar l'activitat de l'enzim antioxidant mitocondrial del miocardi, reduir la mida de l'infart de miocardi, millorar l'activitat de la fosfocreatina al teixit del miocardi i tenir un efecte protector. efecte sobre el miocardi isquèmic [9, 10, 32]. El nostre objectiu és explorar els efectes dels CPhG sobre la hipertròfia cardíaca induïda per la sobrecàrrega de pressió. En aquest estudi, es va trobar que els CPhG van disminuir els nivells de gens de LVPWT, LVED, HWI, AMC i hipertròfia cardíaca (és a dir, ANP, BNP i -MHC), van augmentar EF i FS, van inhibir la hipertròfia cardíaca i van millorar la funció cardíaca en rates. . A més, la inflamació és un dels fenotips clau en la patogènesi de la hipertròfia cardíaca [33]. Alguns estudiosos havien trobat que la supressió de IL-6 podria atenuar la hipertròfia i la disfunció del ventricular esquerre induïts per la sobrecàrrega de pressió [34]. I vam trobar que els CPhG no només podrien disminuir el nivell plasmàtic d'IL-6 de rates després de l'AAC, sinó que també podrien reduir altres proinflamatoris, com ara COX{-1, IL{-1 i TNF-. A més, els CPhG també poden reduir la proteïna COX-2 i HMGB{-1 relacionada amb la inflamació. -e els efectes dels CPhG depenien de la dosi amb l'augment de les dosis de fàrmacs. A més, val la pena esmentar que el grup de dosis altes de CPhGs va tenir un efecte protector significatiu sobre rates hipertròfiques, similar a l'efecte del grup positiu valsartan. -per tant, els CPhG podrien ser un agent farmacològic potencial per inhibir la hipertròfia cardíaca induïda per la sobrecàrrega de pressió. La metilació de l'ADN es refereix a un procés de modificació de metilació molecular de l'ADN en què la S-adenosil-L-metionina actua com a donant metil per obtenir un grup metil mitjançant un enllaç covalent sota la catàlisi de les metiltransferases d'ADN [35]. És ben sabut que ET-1 és el vasoconstrictor més potent i pot contraure fortament les artèries medul·lars i medul·lars, donant lloc a una disminució de la natriuresi i un augment de la pressió arterial [36–38]. En ser l'enzim clau en el pas final de la producció d'endotelina, ECE- 1 no només coexisteix amb ET-1 en malalties cardiovasculars, sinó que també pot regular la producció d'ET-1. -us, ECE-1 pot ser més aviat essencial per al desenvolupament i la progressió de la malaltia [39]. En experiments in vitro amb cèl·lules endotelials vasculars, la metilació de l'illa CpG a la regió promotora de l'ECE-1c disminueix la seva activitat transcripcional, donant lloc a una disminució de l'expressió d'ECE-1c, donant lloc a més a una disminució de la producció d'ET. -1 i disminució de la pressió arterial in vivo, i aquesta línia de canvis suggereix que la metilació de l'ECE-1 pot estar implicada en la patologia de la hipertensió [40, 41]. En el nostre estudi anterior, també hem trobat un augment de la desmetilació de l'ECE-1 en pacients hipertensos [35]. Els resultats del present estudi van demostrar que els CPhG van reduir significativament la desmetilació de l'ECE-1, van disminuir l'expressió d'ARNm i proteïnes de l'ECE-1 i van reduir els nivells d'ET-1 plasmàtics al miocardi de rates amb sobrecàrrega de pressió. -hipertròfia cardíaca induïda després de la CAA. No s'ha aclarit si els CPhG afecten els nivells de desmetilació de l'ECE-1 i si protegeixen contra la hipertròfia cardíaca a les rates. PI3K és la via final per a la hipertròfia dels cardiomiòcits del tipus contràctil a hipertròfic [42]. Les dues isoformes de PI3K poden estar implicades en la hipertròfia dels cardiomiòcits, en la qual Pll0 està implicada en la hipertròfia fisiològica, mentre que p110c està implicada en la hipertròfia patològica. El P110, quan s'elimina en ratolins, pot protegir contra estímuls patològics cardiomiopàtics i té un paper crucial en el desenvolupament i la progressió de la hipertròfia dels cardiomiòcits [43]. PKB és central en aquesta via de senyalització. La seva activació pot modular la funció molecular activant o inhibint efectes aigües avall o molècules mitjançant la fosforilació [44]. PI3K/PKB també és una via de senyalització clau darrere de l'ET-1, i els estudis han demostrat que l'ET-1 pot induir independentment la resistència dels fifibroblasts a l'apoptosi mitjançant l'activació de la senyalització PI3K/PKB [45].

Suplement de Cistanche tubulosa

Altres estudis han demostrat que ET-1 pot regular l'activitat d'eNOS i l'alliberament de NO mitjançant el receptor d'endotelina B1 [46]. Com a vasodilatador important, el NO pot antagonitzar els efectes vasoconstrictors de l'ET-1 des de múltiples nivells i mantenir la funció cardiovascular normal [47]. En aquest estudi, els CPhG de dosis mitjana i alta(GLICÒSIDE FENILETANOLIDE DE CISTANCHE)els grups van mostrar un augment significatiu de p-PI3K, p-PKB i p-ENOS. Tanmateix, el grup de CPhGs a dosis altes va tenir el mateix efecte que el grup AV, que va demostrar a més que els CPhG podrien inhibir la hipertròfia cardíaca en rates després de l'AAC activant la via de senyalització PI3K/PKB/eNOS. Altres estudis també han trobat un vincle entre la via PI3K/PKB i les respostes inflamatòries [48, 49]. Zou i altres investigadors han informat que en l'asma, els gens relacionats amb Brahman tenen un paper essencial en el manteniment de la inflamació de les vies respiratòries i afectant la via PI3K/Akt/mTOR [50]. A més, els CPhG també van disminuir l'expressió de gens relacionats amb la inflamació al teixit del miocardi. -per tant, vam especular que els CPhG poden atenuar la resposta inflamatòria en rates amb sobrecàrrega d'estrès augmentant la via de senyalització PI3K/PKB/eNOS. En general, el nostre estudi és el primer que demostra l'efecte protector dels CPhG sobre la hipertròfia cardíaca induïda per la sobrecàrrega de pressió en rates després de l'AAC, que pot estar relacionat amb el paper que tenen els CPhG en la reducció eficaç del nivell de desmetilació de l'ECE-1 i la millora. la via PI3K/PKB. -La troballa ofereix una nova idea per a la investigació clínica de la hipertròfia de la hipertensió i el desenvolupament de nous fàrmacs terapèutics per prevenir, controlar i revertir la hipertròfia. Tot i que encara hi ha moltes preguntes clau a l'espera de ser abordades, una major comprensió dels mecanismes pels quals CPhGs i PI3K/PKB medien les respostes inflamatòries pot aportar una nova llum sobre l'exploració del tractament de la hipertròfia cardíaca en el futur.

5. Conclusions

Els nostres resultats van mostrar que els CPhG(GLICÒSIDE FENILETANOLIDE DE CISTANCHE)Rates amb hipertròfia miocàrdica millorades per AAC, que poden estar relacionades amb la inhibició de la desmetilació ECE-1 i la millora de PI3K/PKB/eNOS

Suplement de Cistanche tubulosa

Disponibilitat de dades

Totes les dades incloses en aquest estudi estan disponibles a petició mitjançant contacte amb l'autor corresponent. Conflictes d'interessos: els autors declaren que no hi ha conflictes d'interessos.

Aportacions dels autors

Shu-Ping You, Tao Liu, Jun Zhao i Qiong-Ling Fan van concebre i dissenyar els experiments. Qiong-Ling Fan, Jia-Wei Wang i Shi-Lei Zhang van treballar per a la metodologia. Qiong-Ling Fan, Jia-Wei Wang, Shi-Lei Zhang i Shu Ping You van analitzar les dades. Qiong-Ling Fan, Jia-Wei Wang i Shi-Lei Zhang van escriure el manuscrit. Shu-Ping You, Tao Liu i Jun Zhao van revisar el manuscrit. Tots els autors van llegir i aprovar el manuscrit final.

Agraïments

Aquest treball va ser finançat per un projecte important del National Key Laboratory establert conjuntament per la provincial i el ministeri a la regió autònoma uigur de Xinjiang (SKLHIDCA-2018-3), la National Natural Science Foundation of China (núm. 8156140127) i un projecte juvenil d'Investigació en Ciències Naturals a la Institució d'Educació Superior de la Regió Autònoma Uigur de Xinjiang (XJEDU2019Y027).

Referències

[1] RE Katholi i DM Couri, "Hipertròfia ventricular esquerra: un factor de risc important en pacients amb hipertensió: actualització i aplicacions clíniques pràctiques", International Journal of Hypertension, vol. 2011, ID d'article 495349, 10 pàgines, 2011.

[2] ED Frohlich, "Hipertròfia ventricular esquerra: un factor important de risc en pacients hipertensos negres", American Journal of Hypertension, vol. 27, núm. 1, pàg. 1-2, 2014.

[3] TM Okwuosa, EZ Soliman, F. Lopez, KA Williams, A. Alonso i KC Ferdinand, "Left ventricular hypertrophy and cardiovascular disease risk prediction and reclassification in blacks and whites: the atherosclerosis risk in community study", American Heart. Diari, vol. 169, núm. 1, pàgs. 155–161 e5, 2015.

[4] PM Okin, RB Devereux, KE Harris et al., "La resolució durant el tractament o l'absència d'hipertròfia ventricular esquerra electrocardiogràfica s'associa amb una disminució de la incidència de diabetis mellitus de nova aparició en pacients hipertensos: la intervenció de losartan per a la reducció del punt final de la hipertensió. Estudi (LIFE)," Hypertension, vol. 50, no. 5, pàgines 984–990, 2007.

[5] M. Salvetti, A. Paini, F. Bertacchini, et al., "Changes in left ventricular geometry during antihipertensive treatment", Recerca farmacològica, vol. 134, pàgines 193–199, 2018.

[6] Y. Ye, H. Gong, X. Wang, et al., "El tractament combinat amb agents antihipertensius millora l'efecte de qiliqiangxin sobre la hipertròfia cardíaca induïda per la sobrecàrrega de pressió crònica i la remodelació en ratolins masculins", Journal of Cardiovascular Pharmacology, vol. 65, núm. 6, pàgines 628–639, 2015.

[7] C. Fu, J. Li, A. Aspire, et al., "Cistanche tubulosa phenylethanoid glycosides induce apoptos in Eca-109 cells via the mitocondria-dependent pathway", Oncology Letters, vol. 17, núm. 1, pàgines 303–313, 2018.

[8] SP You, L. Ma, J. Zhao, SL Zhang i T. Liu, "Els glucòsids de feniletanol de Cistanche tubulosa suprimeixen l'activació de cèl·lules estelades hepàtiques i bloquegen la conducció de les vies de senyalització en TGF- 11/smad as potencials agents anti-fibrosi hepàtica", Molecules, vol. 21, núm. 1, pàg. 102, 2016.