Resultats de l'Associació de suport a l'estudi de la malaltia renal crònica alemanya (GCKD) de longitud relativa dels telòmers amb mortalitat en una gran cohort de pacients amb malaltia renal crònica moderada
Mar 12, 2022
Contacte: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Correu electrònic:audrey.hu@wecistanche.com
Federica Fazzini1, Claudia Lamina1, Julia Raschenberger & et al.
Kidney International (2020) 98, 488–497; https://doi.org/10.1016/j.kint.2020.02.034
Copyright ª 2020, Societat Internacional de Nefrologia. Publicat per Elsevier Inc. Aquest és un article d'accés obert sota la llicència CC BY
Se sap que la longitud dels telòmers està inversament associada amb l'envelliment i s'ha proposat com a marcador de malalties relacionades amb l'envelliment. El desgast dels telòmers es pot accelerar per l'estrès oxidatiu i la inflamació, tots dos presents habitualment en pacients amb malaltia renal crònica. Aquí, vam investigar si la longitud relativa dels telòmers s'associa amb la mortalitat en una gran cohort de pacients amb malaltia renal crònica en estadi G3 i A1-3 o G1-2 amb proteinúria oberta (A3) en el moment de la inscripció. La longitud relativa dels telòmers es va quantificar a la sang perifèrica mitjançant un mètode de PCR quantitatiu en 4.955 pacients de l'estudi GCKD, una cohort observacional prospectiva en curs. Es va disposar d'un seguiment complet de quatre anys de 4.926 pacients en els quals vam registrar 354 morts. La longitud relativa dels telòmers va ser un predictor fort i independent de la mortalitat per totes les causes. Cada disminució de 0,1 unitat de longitud relativa dels telòmers estava altament associada amb un augment del 14% del risc de mort (ràtio de perill 1,14 [interval de confiança del 95% 1.06-1,22]) en un model ajustat per edat, sexe, FGe inicial, relació albúmina/creatinina d'orina, diabetis mellitus, malaltia cardiovascular prevalent, colesterol LDL, colesterol HDL, tabaquisme, índex de massa corporal, pressió arterial sistòlica i diastòlica, proteïna C reactiva i albúmina sèrica. Això es va traduir en un risc un 75 per cent més gran per a aquells que es troben a la part més baixa en comparació amb el quartil més alt de longitud relativa dels telòmers. L'associació va ser impulsada principalment per 117 morts cardiovasculars (1,20 [1.05-1,35]) així com 67 morts per infeccions (1,27 [1.{07-1,50]). Així, els nostres resultats donen suport a una associació de longitud de telòmers més curta amb mortalitat per totes les causes, mortalitat cardiovascular i mort per infeccions en pacients amb malaltia renal crònica moderada.
PARAULES CLAU:malaltia renal crònica; infeccions; mortalitat; longitud relativa dels telòmers
Malaltia renal crònica(CKD) és una malaltia complexa i s'ha estimat que la seva heretabilitat és del 30% al 70% .9–12 En els últims anys, estudis d'associació a tot el genoma han identificat molts loci genètics associats amb la funció renal i la CKD.13–17.
No obstant això, els polimorfismes d'un sol nucleòtid índex als loci identificats expliquen només una part menor de l'heretabilitat i poden faltar contribuents genètics addicionals. Fins ara, només uns quants estudis petits han investigat l'associació entre TL i malaltia renal. Alguns estudis van trobar que el TL curt es correlaciona amb la funció renal deteriorada en la població general,18,19, així com en pacients amb insuficiència cardíaca.20 Recentment hem descrit un TL relatiu (RTL) significativament més curt en pacients amb ERC moderadament greu que tenen malaltia cardiovascular prevalent ( ECV),21, així com una associació amb la durada22 i la progressió de la CKD.23 Els pacients que han arribat a una insuficiència renal tractats per hemodiàlisi es descriuen com un TL reduït en comparació amb els controls sans,24–27 i una TL reduïda s'associa inversament amb la mortalitat. 28 Només s'han dut a terme unes poques investigacions en pacients renals no dependents de diàlisi21–23,29,30. Segons el nostre coneixement, l'estudi actual és el primer estudi prospectiu que investiga l'associació entre RTL de leucòcits i causes de mortalitat en un gran cohort d'ERC no dependent de la diàlisi.
Benefici de Cistanche: millora la funció renal
RESULTATS
Característiques inicials de la població d'estudi
RTL es va quantificar en sang perifèrica mitjançant un mètode quantitatiu de reacció en cadena de la polimerasa en 4955 pacients de l'Alemanya.Malaltia renal crònicaestudiar. Es va disposar d'un seguiment complet de {{0}}anys de 4.926 pacients. Les característiques de referència d'aquests 4926 pacients segons quartils de l'RTL es proporcionen a la taula 1. L'RTL va oscil·lar entre un mínim de {{10}}.4{0 a un màxim de 2,31 (figura suplementària S1 ), amb una mitjana ± DE de 0,95 ±0,19 i una mediana de 0,92 (1r quartil ¼ 0,82; 3r quartil ¼ 1 .05). RTL es va correlacionar negativament amb l'edat (r ¼ -{{30}},36, P <0,001) i="" positivament="" amb="" la="" taxa="" de="" filtració="" glomerular="" estimada="" (egfr;="" r="" ¼="" 0,17,="" p=""><0,001) i="" l'albúmina="" d'orina-="" proporció="" de="" creatinina="" (r="" ¼="" 0,05,="" p=""><0,001). quan="" vam="" ajustar="" rtl="" per="" edat="" i="" sexe,="" ja="" no="" vam="" observar="" una="" correlació="" significativa="" amb="" egfr="" i="" la="" relació="" albúmina-creatinina="">
Seguiment prospectiu i mortalitat
Un total de 354 morts es van produir durant un període mitjà de seguiment de 4 anys (1483 dies). Les causes de mort van ser ECV incloent infart de miocardi, malaltia coronària, mort cardíaca sobtada, insuficiència cardíaca congestiva, embòlia pulmonar, malaltia valvular cardíaca i ictus isquèmic (117 pacients, 33,1 per cent), infeccions (67 pacients, 18,9 per cent), cerebrovascular no isquèmic. causes (9 pacients, 2,5 per cent ), malaltia vascular perifèrica (7 pacients, 2,0 per cent ), insuficiència renal (8 pacients, 2,3 per cent ), diverses altres causes (103 pacients, 29,1 per cent ) i causes desconegudes ( 43 pacients, 12,1 per cent).
Els diagrames d'incidència acumulada mostren que la incidència de mortalitat per totes les causes (figura 1a) augmenta amb un RTL més curt, amb la incidència més alta amb el quartil RTL més baix. A les corbes de funció d'incidència acumulada de mortalitat cardiovascular (figura 1b) i infecció (figura 1c), la diferència entre quartils era menys pronunciada, però l'ordre dels quartils era el mateix.
Figura 1|Funció d'incidència acumulada per a (a) mortalitat per totes les causes, (b) mortalitat per malaltia cardiovascular (CVD) i (c) mort per infeccions, per quartils (Q) de longitud relativa dels telòmers (RTL). Q1 és el quartil que inclou pacients amb el RTL més curt.
Els resultats dels models de regressió de Cox que apliquen diferents ajustos es proporcionen a la taula 2 i van mostrar una associació significativa entre un RTL més curt i el risc de mortalitat per totes les causes. Avaluada contínuament, cada disminució de 0.1 unitats RTL es va associar amb un 16% més de risc de mort en un model ajustat per edat i sexe (ràtio de perill [HR], 1,16; interval de confiança [IC] del 95%), 1.08–1,24; P ¼ 1,7e-05). L'associació es va mantenir significativa després d'un ajust ampli per a FGe, la proporció albúmina-creatinina d'orina, diabetis mellitus i malaltia cardiovascular prevalent (model 2: HR, 1,16; IC del 95 per cent, 1,08-1,24), així com els factors de risc de CVD addicionals de baixa densitat. colesterol de lipoproteïnes, colesterol de lipoproteïnes d'alta densitat, tabaquisme, índex de massa corporal, pressió arterial sistòlica, pressió arterial diastòlica, proteïna C reactiva i albúmina sèrica a la línia de base (model 3: HR, 1,14; IC del 95 per cent, 1,06-1,22; P ¼ 3,5e-04). Les anàlisis de spline P no lineals es donen a la figura 2 i van revelar una associació gairebé lineal de RTL amb mortalitat per totes les causes. Els pacients amb el RTL més curt (1r quartil) tenien un risc un 75 per cent més gran de mortalitat per totes les causes en comparació amb els del quartil amb el RTL més llarg (taula suplementària S1, model totalment ajustat: HR, 1,75; IC del 95 per cent, 1,22–2,50). ; P=0,0024).
A continuació, vam analitzar què està impulsant l'associació de RTL amb mortalitat per totes les causes (taula 2). Vam avaluar les 2 causes específiques de mort més freqüents i vam observar que cada disminució de 0,1 unitats RTL es va associar amb un 20 per cent més de risc de mort per ECV en el model totalment ajustat (HR, 1,2). 0; IC del 95 per cent, 1.05–1,35; P=0,0052). La reducció de RTL també es va associar de manera inversament significativa amb la mort a causa d'infeccions. Cada disminució de 0,1 unitat de RTL es va associar amb un risc de mort per infeccions 1,27- vegades més gran (HR, 1,27; IC del 95%, 1,07-1,50; P=0,0051). Si observem les estimacions dels diferents quartils de la taula complementària S1, es va revelar que les estimacions de mort per infeccions per a cadascun dels quartils 1, 2 i 3 eren igualment elevades en comparació amb les del quartil 4. L'anàlisi amb altres causes de mort com a així com les causes de mort desconegudes eren òbviament massa heterogènies i no van revelar cap associació amb RTL (dades no mostrades).
El gràfic dels residus de Schoenfeld escalats i la prova sobre els supòsits de perill proporcional no va suggerir cap efecte variable en el temps per a RTL en cap dels resultats investigats. Els HR de subdistribució tant per a la mort cardiovascular com per infecció, informats a la taula complementària S2, només estan lleugerament atenuats en comparació amb els HR específics de la causa.
We also evaluated whether the effect of RTL on the 3 different outcomes differed between men and women and for patients with and without diabetes mellitus, but we did not detect a significant interaction for these variables, or for age (all P values of interaction >0.1 als models totalment ajustats). Atès que recentment vam observar una associació en forma d'U entre la durada de la CKD i la RTL22, vam realitzar una anàlisi de sensibilitat ajustant-se addicionalment per a la durada de la CKD a la línia de base definida com a menys de 6 mesos, entre 6 mesos i 5 anys i més de 5. anys. Aquest ajust addicional només va donar lloc a canvis marginals dels HR obtinguts per als 3 punts finals (taula complementària S3).
Benefici de Cistanche: millora la funció renal
DISCUSSIÓ
Els resultats d'aquest estudi van mostrar una associació significativa de RTL amb mortalitat per totes les causes en una cohort d'ERC no dependent de la diàlisi. Un RTL més curt es va associar amb un risc més elevat de mortalitat independentment de la funció renal i dels factors de risc tradicionals de CVD. Aquesta associació va ser motivada per la mort per ECV, així com per la mort per infeccions.
Associació amb mortalitat per totes les causes
Estudis previs,5,6,31–35amb poques excepcions,36,37 han demostrat una associació negativa entre RTL i mortalitat per totes les causes a la població general. L'estudi més gran fins ara (n ¼ 64.637) el va realitzar Rode et al., amb un HR ajustat per a la mortalitat d'1,40 per al decil amb el més curt versus el decil amb el RTL més llarg.35D'acord amb aquests resultats, el nostre estudi va mostrar que amb cada disminució de 0.1 unitats RTL un risc un 14% més gran de mortalitat per totes les causes, la qual cosa es tradueix en un risc un 75% més gran per a aquells que es troben en el nivell més baix en comparació amb el més alt. quartil de RTL. Segons el nostre coneixement, només Carrero et al.28han investigat la relació entre RTL i risc de mortalitat en pacients amb ERC. Van estudiar 175 pacients amb malaltia renal terminal tractats per hemodiàlisi, dels quals 70 van morir durant una mitjana de 31 mesos d'observació. Els autors van observar que TL va predir de manera independent la supervivència del pacient després d'un ajustament addicional per edat, sexe i inflamació. L'estudi actual amplia aquestes observacions al grup molt més gran d'individus amb ERC que no requereixen diàlisi.
Figura 2|Splines no lineals ajustades (i bandes de confiança del 95 per cent) per a l'associació entre l'augment de la longitud relativa dels telòmers (RTL) i la relació de risc (HR) de (a) mortalitat per totes les causes, (b) mort cardiovascular i (c) mort per infeccions. . Els recursos humans es donen com a escala logística dels impostos. Grayline: model d'ajust 1 (ajustat per edat i sexe). Blueline: model d'ajust 3 (ajustat per edat, sexe, estimació [continuació]
Associació amb la mortalitat per ECV
No hi ha estudis que han investigat fins ara l'associació de RTL amb la mortalitat per ECV en pacients amb ERC, tot i que aquesta és la principal causa de mort en aquests pacients. Depenent de l'ètnia investigada i dels models d'ajust de les dades, alguns estudis, però no tots, a la població general van informar d'una associació entre resultats baixos de RTL i CVD.33,38–41Un fort suport per a una associació causal va venir d'un estudi d'aleatorització mendeliana en què es va trobar que variants genètiques associades a un RTL més curt estaven associades a una cardiopatia isquèmica.40En el present estudi, hem identificat una associació significativa de RTL amb morts cardiovasculars, amb un risc un 20 per cent més gran amb cada disminució de RTL en 0,1 unitats, o un risc un 75 per cent més gran per a aquells. pacients del quartil amb el TL més curt en comparació amb el quartil amb el TL més llarg. Aquesta troballa està en línia amb el nostre informe anterior d'una associació amb esdeveniments cardiovasculars prevalents en aquesta població de pacients: cada disminució de RTL en 0,1 unitats es va associar significativament amb un 6% més de probabilitats de ECV prevalent en un model que s'ajustava per edat, sexe, tabaquisme, hipertensió, estat de diabetis, colesterol de lipoproteïnes de baixa densitat, d'alta densitat
colesterol de lipoproteïnes, proteïna C reactiva, eGFR i índex de massa corporal.21El seguiment prospectiu d'aquests pacients en la present investigació va revelar que especialment el quartil més baix de RTL es va associar amb un risc notablement augmentat, mentre que els altres 3 quartils mostraven estimacions molt similars (figura 1b).
Associació amb mort per infeccions
Tot i que l'evidència experimental admet el paper de la senescència cel·lular i la TL curta en la resposta immune deteriorada, els estudis epidemiològics són escassos, especialment en pacients amb ERC. Helby et al. va realitzar l'estudi prospectiu basat en la població més gran (n ¼ 75.309) que investigava RTL i el risc d'hospitalització per malaltia infecciosa i el risc de mort relacionada amb la infecció. Durant 7 anys de seguiment, van observar un risc més elevat de qualsevol infecció al quartil amb el més curt en comparació amb el quartil amb el RTL més llarg.42 Estudis anteriors amb mides de mostra més petites van informar de resultats contradictoris.32,43,44Les nostres troballes en pacients amb ERC descriuen per primera vegada l'associació entre RTL curt i un risc més elevat de mort a causa d'infeccions en aquesta població d'alt risc.
Benefici de Cistanche: millora la funció renal
Mecanisme potencial
El mecanisme biològic subjacent a la relació entre RTL i mortalitat encara no està clar. L'associació identificada pel nostre estudi no dilucida si l'escurçament de RTL està relacionat causalment amb malalties cardiovasculars i infeccions. Tanmateix, un estudi d'associació a tot el genoma seguit d'una anàlisi de la puntuació de risc genètic que combina variants de plom a 7 loci genètics va mostrar una associació dels al·lels associats a un RTL més curt amb un major risc de malaltia de l'artèria coronària. Aquesta troballa proporciona un possible suport per a un possible paper causal de RTL en les ECV.45,46A més, la senescència cel·lular induïda pel desgast dels telòmers podria ser un desencadenant de l'aterosclerosi i també de l'arteriosclerosi. L'acumulació de cèl·lules senescents al vas contribueix a la formació de plaques ateroscleròtiques i a les calcificacions mediàtiques que donen lloc a un augment de la rigidesa arterial com a característica dominant de la malaltia arterial urémica.47La majoria dels estudis han mesurat RTL a l'ADN de leucòcits perifèrics. Tanmateix, s'ha demostrat una estreta correlació entre el leucòcit i el teixit de la paret aòrtica TL.48Per tant, la senescència cel·lular podria afectar les cèl·lules endotelials provocant una disfunció de la paret vascular i afavorint l'adhesió de les cèl·lules immunitàries, un esdeveniment primari en l'aterosclerosi. A més, els telòmers curts activen p53 i l'autofàgia a les cèl·lules progenitores cardíaques, desestabilitzant l'equilibri de quiescència i proliferació cap a la diferenciació i la senescència, donant lloc a un esgotament de les cèl·lules progenitores cardíaques.49S'ha demostrat que la disfunció dels telòmers indueix una profunda repressió p53-depenent dels reguladors mestres de la biogènesi i la funció mitocondrial, la qual cosa condueix a un compromís bioenergètic a causa de la fosforilació oxidativa deteriorada i la generació de trifosfat d'adenosina.50,51
També hi ha diversos enllaços entre RTL i infeccions. S'ha observat la pèrdua de telòmers durant la diferenciació de cèl·lules T,52en infeccions víriques cròniques,53i amb l'edat.54A més, s'ha informat que el TL de leucòcits curts és un factor de risc en diverses malalties relacionades amb el sistema immunitari.55i diabetis.56La TL més curta de leucòcits provoca una senescència cel·lular seguida d'una reducció de la capacitat proliferativa de les cèl·lules immunitàries. TL també pot estar implicat en disminucions relacionades amb l'edat de la funció immune relacionades amb una resposta insuficient a les vacunes i les infeccions agudes.57–59Un paper potencial de TL en les infeccions també està recolzat per un recent estudi d'associació a tot el genoma en una població xinesa. Dorjee i els seus col·legues van observar una associació entre un al·lel reductor de TL i la mort a causa d'una infecció respiratòria.60El desgast de RTL pot ser fortament desencadenat per la presència d'un estrès oxidatiu elevat, una condició comuna en la CKD.61 Diversos estudis in vitro i in vivo van demostrar que l'estrès oxidatiu accelera el desgast dels telòmers.62,63De fet, els telòmers, amb el seu alt contingut en guanina, són molt susceptibles al dany oxidatiu,64i les ruptures d'ADN d'una sola cadena induïdes per l'estrès oxidatiu podrien ser un factor important per a l'escurçament dels telòmers durant la replicació de l'ADN.65
Benefici de Cistanche: millora la funció renal
Fortaleses i limitacions
Els punts forts d'aquesta investigació inclouen la gran mida de la mostra d'una població ben definida amb un seguiment mitjà de 4 anys gairebé sense pèrdua de seguiment, l'homogeneïtat de la població d'estudi i una avaluació centralitzada de TL i mesures de resultat. La mesura de RTL especialment és de màxima importància perquè l'estandardització entre laboratoris no és fàcil d'aconseguir i, per tant, el procés s'ha de realitzar al mateix laboratori en exactament les mateixes condicions pel que fa a protocol, gen de referència, instrument, personal66 i ADN. procediment d'extracció.67
Aquest estudi té algunes limitacions. Primer, es va mesurar RTL en leucòcits perifèrics. Se sap que la velocitat de progressió cap a la senescència difereix entre els subconjunts de limfòcits. 59Malauradament, no hi havia dades disponibles sobre la composició del tipus de cèl·lules sanguínies a l'AlemanyaMalaltia renal crònicaestudi i, per tant, no ha estat possible investigar aquest aspecte. Conèixer RTL de diversos tipus de cèl·lules renals seria d'interès, però no és possible obtenir-ho en un gran estudi epidemiològic ja que això requeriria material tisular de biòpsies. La segona limitació inclou el disseny observacional de l'estudi, que no permet aclarir la causalitat o el mecanisme biològic. En tercer lloc, l'estudi va reclutar principalment pacients amb CKD en l'etapa G3 o A3, i els resultats poden no ser generalitzables a altres estadis de CKD. En quart lloc, l'associació amb causes específiques de mort podria haver estat limitada pel poder estadístic, però encara estava present per a les dues causes principals de mort específiques. Finalment, tot i que les nostres anàlisis es van ajustar per als factors de risc cardiovascular tradicionals, així com els paràmetres de la funció renal, no podem excloure la possibilitat de confusió residual per desconeguts o no mesurats.
les variables. Tanmateix, va ser molt interessant veure que les estimacions ajustades per edat i sexe de RTL per a diversos resultats eren molt estables amb un ajust addicional per a les altres variables, cosa que indica que RTL és relativament independent d'altres variables quan les dades s'ajusten per edat i sexe.
Conclusions
El TL relatiu curt quantificat a partir de leucòcits de sang perifèrica es va associar de manera independent amb la mortalitat per totes les causes durant 4 anys de seguiment en pacients amb ERC moderadament greu. Aquesta associació va ser motivada per la mort per ECV, així com per la mort per infeccions.
Benefici de Cistanche: millora la funció renal
MÈTODES
Estudi de població
L'alemanyMalaltia renal crònica study is an ongoing prospective multicenter observational cohort. A detailed description of the study has been published previously.68 Briefly, 5217 patients under regular care by nephrologists were enrolled. Inclusion criteria were moderately reduced kidney function defined as eGFR of 30–60 ml/min per 1.73 m2 (stage G3, A1–A3) or an eGFR >60 ml/min per 1,73 m2 en presència de proteinúria manifesta (estadi G1–G2, A3). Els criteris d'exclusió van ser l'ètnia no caucàsica, el trasplantament d'òrgans sòlids o de medul·la òssia, la malignitat activa dins dels 24 mesos anteriors al cribratge, la insuficiència cardíaca en fase IV de la New York Heart Association i l'assistència legal o la incapacitat per donar el consentiment. Tots els paràmetres de laboratori presentats es van mesurar a partir de biomostres recollides en un laboratori central, tal com es va descriure anteriorment.68 La informació sobre factors sociodemogràfics, antecedents mèdics i familiars, medicaments i qualitat de vida relacionada amb la salut va ser obtinguda per personal format mitjançant qüestionaris estandarditzats. La malaltia cardiovascular prevalent a l'inici es va definir com una història d'infart de miocardi no mortal, empelt de bypass de l'artèria coronària, angioplàstia coronària transluminal percutània, ictus i intervencions a les artèries caròtides (endoarterectomia caròtida i/o angioplàstia amb globus caròtidi o implantació de stent).
Tots els participants van proporcionar el consentiment informat per escrit i l'estudi va ser aprovat pels comitès d'ètica de totes les institucions participants i registrat al registre nacional d'estudis clínics (DRKS 00003971). Tots els mètodes es van dur a terme d'acord amb les directrius aprovades i la Declaració d'Hèlsinki. Les dades es recullen i es gestionen mitjançant Askimed (https://www.askimed.com) com a plataforma web basada en núvol per a la recollida i gestió de formularis d'informes de casos i dades de laboratori.
Criteris clínics durant el seguiment prospectiu
Tal com s'ha descrit recentment, 69 pacients són seguits anualment per personal format alternant visites presencials amb visites telefòniques. Durant aquestes visites, les dades sobre hospitalitzacions, esdeveniments de resultat i història clínica s'actualitzen com a part d'una entrevista estructurada. Qualsevol informe d'alta hospitalària es recull dels metges i/o hospitals tractants. Els punts finals s'extreuen contínuament d'aquests informes per un comitè de punts finals format i supervisat format per 3 metges independents d'acord amb un catàleg de punts finals especificat prèviament. La informació sobre la causa de la mort s'extreu d'aquests informes, així com dels certificats de defunció recollits a les oficines del registre civil sempre que el personal de l'estudi s'informa de la mort d'un participant de l'estudi.
L'anàlisi actual inclou tots els punts finals que es van produir fins al 4-any de seguiment. Si un pacient es va perdre la visita de seguiment d'un 4-any, vam incloure tots els punts finals fins als 4,5 anys després de la visita de referència corresponent. Per tant, el temps de censura era la data de seguiment de l'4-any o 4,5 anys després de la línia de base. El resultat primari va ser la mortalitat per totes les causes. Per avaluar si les associacions identificades es podrien atribuir a una causa específica de mort, es van considerar les morts per causes cardiovasculars i malalties infeccioses com a resultats secundaris. El grup de mort per ECV va incloure infart de miocardi, malaltia coronària, mort cardíaca sobtada, insuficiència cardíaca congestiva, embòlia pulmonar, malaltia valvular cardíaca i ictus isquèmic. També es van registrar altres causes de mort, però aquests subgrups no eren prou grans per dur a terme més anàlisis específiques de la causa.
Mesura de RTL
L'ADN genòmic es va extreure de sang sencera en un laboratori central amb el mòdul I de separació magnètica química (PerkinElmer chromagen Technologie GmbH, Baesweiler, Alemanya). L'anàlisi actual es va basar en 4.926 pacients per als quals estaven disponibles mesures de RTL en mostres de sang inicials i dades sobre mortalitat. L'RTL es va mesurar per quadruplicat mitjançant un assaig quantitatiu basat en la reacció en cadena de la polimerasa desenvolupat per Cawthon70 i modificat tal com s'ha descrit anteriorment. 71 mostres d'ADN es van executar en reaccions de 15-ml que contenien 1x mescla mestra de PCR Quantifast TM SYBR Green PCR (Qiagen, Hilden, Alemanya), 10 ng d'ADN, 1 mM de cebador telòmer o 250 nm de cebador del gen 36B4 de neteja. Es va determinar la proporció relativa entre el nombre de còpia repetida del telòmer (T) i el nombre de còpia del gen d'una còpia única (gen 36B4, que codifica la fosfoproteïna ribosòmica PO, situada al cromosoma 12; S). Les relacions T/S són proporcionals a RTL individual. L'automatització d'aquest procediment d'alt rendiment va donar lloc a mesures de control de qualitat molt bones amb un baix coeficient de variació entre assaigs de les relacions T/S. Es va utilitzar un ADN comercialment disponible inclòs a totes les plaques quantitatives de reacció en cadena de la polimerasa per comprovar el rendiment de l'assaig durant tot l'estudi. El coeficient de variació interassaig de les relacions T/S d'aquesta mostra analitzada en 112 experiments independents va ser del 9,6 per cent abans de la normalització i va disminuir fins al 4,0 per cent després de la normalització (figura suplementària S2).
Anàlisi estadística
Es van comparar les característiques inicials dels participants (taula 1) mitjançant la prova de Kruskal-Wallis per a variables contínues i proves de chi quadrat per a variables categòriques. Es van utilitzar corbes de funció d'incidència acumulada per estimar la incidència acumulada de les diferents causes de mort que tenen en compte el risc competitiu.72 Es van realitzar models de regressió de riscos proporcionals de Cox per avaluar les associacions de RTL amb 3 resultats: (i) mortalitat per totes les causes, ( ii) mort per ECV, i (iii) mort per infecció. Per als dos punts finals específics de la causa (ii i iii), els pacients van ser censurats, si la mort es va produir per qualsevol altra causa. A més, es van examinar les associacions amb aquests efectes específics de la causa mitjançant regressió de supervivència de riscos competitius, considerant totes les morts per altres causes com a esdeveniments competitius. Per tant, tant els HR específics de la causa com els HR de subdivisió s'informen de mort per ECV o infeccions. Els models de risc proporcional de Cox es van ajustar mitjançant 3 nivells diferents d'ajust: el model 1 ajustat per edat i sexe; el model 2 també s'ha ajustat per a l'eGFR inicial, la relació albúmina-creatinina d'orina, ECV prevalent i diabetis; El model 3 s'ha ajustat encara més als factors de risc tradicionals de ECV del colesterol de lipoproteïnes de baixa densitat, colesterol de lipoproteïnes d'alta densitat, índex de massa corporal, tabaquisme, pressió arterial sistòlica i diastòlica, proteïna C reactiva i albúmina. La selecció de variables ajustades en els diferents models es va basar en les diferències en les característiques clíniques entre els quartils de RTL proporcionats a la Taula 1. En els models de regressió, RTL es va analitzar de manera contínua i com a predictor categòric (en quartils de RTL). Atès que els resultats inicials indicaven un risc més elevat, especialment per a valors baixos de RTL, també s'informa de l'HR (específic de la causa) per als quartils 1, 2 i 3 en comparació amb el quartil 4 com a referència (taula suplementària S1). L'anàlisi posterior es va basar en la inspecció visual de la P-spline per obtenir la forma de la relació entre RTL i risc de mortalitat. Hem utilitzat el coeficient de correlació de rang de Spearman per avaluar l'associació entre les variables d'estudi. Totes les anàlisis estadístiques es van realitzar mitjançant R 3.3.2 (https://www.r-project.org); Valors P<0.05 were="" considered="" statistically="">
REFERÈNCIES
1. Moyzis RK, Buckingham JM, Cram LS, et al. Una seqüència d'ADN repetitiva altament conservada, (TTAGGG)(n), present als telòmers dels cromosomes humans. Proc Natl Acad Sci US A. 1988;85:6622–6626.
2. Baird DM. Dinàmica dels telòmers en cèl·lules humanes. Bioquímia. 2008;90:116–121.
3. von Zglinicki T, Martin-Ruiz CM. Telòmers com a biomarcadors de l'envelliment i malalties relacionades amb l'edat. Curr Mol Med. 2005;5:197–203.
4. Forero DA, González-Giraldo Y, López-Quintero C, et al. Longitud dels telòmers a la malaltia de Parkinson: una metaanàlisi. Exp Gerontol. 2016;75:53–55.
5. Mons U, Müezzinler A, Schöttker B, et al. Longitud dels telòmers de leucòcits i mortalitat per totes les causes, malalties cardiovasculars i càncer: resultats de la metaanàlisi de dades de participants individuals de 2 grans estudis de cohort prospectius. Am J Epidemiol. 2017;185:1317–1326.
6. Wang Q, Zhan Y, Pedersen NL, et al. Longitud dels telòmers i mortalitat per totes les causes: una metaanàlisi. Aging Res Rev. 2018;48:11–20.
7. Wills LP, Schnellmann RG. Telòmers i telomerasa en salut renal. J Am Soc Nephrol. 2011;22:39–41.
8. Kordinas V, Tsirpanlis G, Nicolaou C, et al. Hi ha una connexió entre la inflamació, l'activitat de la telomerasa i l'estat transcripcional de la transcriptasa inversa de la telomerasa en la insuficiència renal? Cell Mol Biol Lett. 2015;20:222–236.
9. Cañadas-Garre M, Anderson K, Cappa R, et al. Susceptibilitat genètica a la malaltia renal crònica: algunes peces més per al trencaclosques de l'herència. Front Genet. 2019;10:453.
10. Satko SG, Freedman BI. L'agrupació familiar de la malaltia renal i els fenotips relacionats. Med Clin North Am. 2005;89:447–456.
11. Regele F, Jelencsics K, Shiffman D, et al. Estudis a tot el genoma per identificar els factors de risc de la malaltia renal amb un enfocament en pacients amb diabetis. Trasplantament de Nephrol Dial. 2015;30:iv26–iv34.
12. Wuttke M, Köttgen A. Coneixements sobre malalties renals a partir d'estudis d'associació a tot el genoma. Nat Rev Nephrol. 2016;12:549–562.
13. Böger CA, Gorski M, Li M, et al. Associació de loci relacionats amb eGFR identificats per GWAS amb CKD incident i ESRD. PLoS Genet. 2011;7: e1002292.
14. Chambers JC, Zhang W, Lord GM, et al. Els loci genètics que influeixen en la funció renal i la malaltia renal crònica. Nat Genet. 2010;42:373–375.
15. Köttgen A, Pattaro C, Böger CA, et al. Nous loci associats amb la funció renal i la malaltia renal crònica. Nat Genet. 2010;42:376–384.
16. Pattaro C, Teumer A, Gorski M, et al. Les associacions genètiques en 53 loci destaquen els tipus cel·lulars i les vies biològiques rellevants per a la funció renal. Nat Commun. 2016;7:10023.
17. Wuttke M, Li Y, Li M, et al. Un catàleg de loci genètics associats a la funció renal a partir d'anàlisis d'un milió d'individus. Nat Genet. 2019;51:957–972.
18. Bansal N, Whooley MA, Regan M, et al. Associació entre la funció renal i la longitud dels telòmers: l'estudi del cor i l'ànima. Sóc J Nephrol. 2012;36:405–411.
19. Eguchi K, Honig LS, Lee JH, et al. La curta longitud dels telòmers s'associa amb una insuficiència renal en subjectes japonesos amb risc cardiovascular. PLoS One. 2017;12:e0176138.
20. Wong LSM, Van Der Harst P, De Boer RA, et al. La disfunció renal s'associa amb una longitud dels telòmers més curta en la insuficiència cardíaca. Clin Res Cardiol. 2009;98:629–634.
21. Raschenberger J, Kollerits B, Titze S, et al. Associació de la longitud relativa dels telòmers amb la malaltia cardiovascular en una gran cohort de malalties renals cròniques: l'estudi GCKD. Aterosclerosi. 2015;242:529–534.
22. Raschenberger J, Kollerits B, Titze S, et al. Els telòmers tenen una plasticitat més gran del que es pensava? Resultats de l'estudi alemany de malaltia renal crònica (GCKD) com a població d'alt risc. Exp Gerontol. 2015;72: 162–166.
23. Raschenberger J, Kollerits B, Ritchie J, et al. Associació de la longitud relativa dels telòmers amb la progressió de la malaltia renal crònica en dues cohorts: modificació de l'efecte pel tabaquisme i la diabetis. Sci Rep. 2015;5:1–8.
24. Betjes MGH, Langerak AW, Van Der Spek A, et al. Envelliment prematur de les cèl·lules T circulants en pacients amb malaltia renal terminal. Ronyó Int. 2011;80:208–217.
25. Hirashio S, Nakashima A, Doi S, et al. Longitud de la cua G telomèrica i hospitalització per esdeveniments cardiovasculars en pacients en hemodiàlisi. Clin J Am Soc Nephrol. 2014;9:2117–2122.
26. Ramírez R, Carracedo J, Soriano S, et al. Senescència prematura induïda per l'estrès en cèl·lules mononuclears de pacients en hemodiàlisi a llarg termini. Am J Kidney Dis. 2005;45:353–359.
27. Tsirpanlis G, Chatzipanagiotou S, Boufidou F, et al. L'activitat de la telomerasa es redueix a les cèl·lules mononuclears de la sang perifèrica dels pacients en hemodiàlisi. Sóc J Nephrol. 2006;26:91–96.
28. Carrero JJ, Stenvinkel P, Fellström B, et al. El desgast dels telòmers s'associa amb inflamació, nivells baixos de fetuïna-A i alta mortalitat en pacients amb hemodiàlisi prevalents. J Intern Med. 2008;263:302–312.
29. Mazidi M, Rezaie P, Covic A, et al. Desgast dels telòmers, funció renal i malaltia renal crònica prevalent als Estats Units. Oncotarget. 2017;8:80175–80181.
30. Kidir V, Aynali A, Altuntas A, et al. Activitat de la telomerasa en pacients amb malaltia renal crònica en fase 2-5D. Nefrologia. 2017;37:592–597.
31. Batsis JA, Mackenzie TA, Vasquez E, et al. Associació d'adipositat, longitud dels telòmers i mortalitat: dades del NHANES 1999-2002. Int J Obes. 2018;42:198–204.
32. Fitzpatrick AL, Kronmal RA, Kimura M, et al. Longitud i mortalitat dels telòmers de leucòcits en l'estudi de salut cardiovascular. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2011;66A:421–429.
33. Needham BL, Rehkopf D. Longitud i mortalitat dels telòmers de leucòcits a l'Enquesta Nacional d'Examen de Salut i Nutrició, 1999-2002. Epidemiologia. 2015;26:528–535.
34. Pusceddu I, Kleber M, Delgado G, et al. Longitud i mortalitat dels telòmers a l'estudi de risc i salut cardiovascular de Ludwigshafen. PLoS One. 2018;13:e0198373.
35. Rode L, Nordestgaard BG, Bojesen SE. Longitud i mortalitat dels telòmers de leucòcits de sang perifèrica entre 64 637 individus de la població general. J Natl Cancer Inst. 2015;107:djv074.
36. Loprinzi PD, Loenneke JP. Longitud i mortalitat dels telòmers de leucòcits entre adults nord-americans: modificació de l'efecte pel comportament de l'activitat física. J Sports Sci. 2018;36:213–219.
37. Gao X, Zhang Y, Mons U, et al. Longitud dels telòmers de leucòcits i puntuació de risc de mortalitat basada en epigenètica: associacions amb mortalitat per totes les causes entre adults grans. Epigenètica. 2018;13:846–857.
38. D'Mello MJJ, Ross SA, Briel M, et al. Associació entre la longitud escurçada dels telòmers de leucòcits i els resultats cardiometabòlics: revisió sistemàtica i metaanàlisi. Circ Cardiovasc Genet. 2015;8:82–90.
39. Haycock PC, Heydon EE, Kaptoge S, et al. Longitud dels telòmers de leucòcits i risc de malaltia cardiovascular: revisió sistemàtica i metaanàlisi. BMJ. 2014;349:g4227.
40. Madrid AS, Rode L, Nordestgaard BG, et al. Corta longitud de telòmers i
cardiopatia isquèmica: estudis observacionals i genètics en 290.022 individus. Clin Chem. 2016;62:1140–1149.
41. Mwasongwe S, Gao Y, Griswold M, et al. Longitud dels telòmers de leucòcits i malalties cardiovasculars en afroamericans: l'estudi del cor de Jackson. Aterosclerosi. 2017;266:41–47.
42. Helby J, Nordestgaard BG, Benfield T, et al. La longitud dels telòmers de leucòcits més curta s'associa amb un major risc d'infeccions: un estudi prospectiu de 75.309 individus de la població general. Haematologica.2017;102:1457–1465.
43. Cawthon RM, Smith KR, O'Brien E, et al. Associació entre la longitud dels telòmers a la sang i la mortalitat en persones de 60 anys o més. Lanceta. 2003;361:393–395.
44. Njajou OT, Hsueh WC, Blackburn EH, et al. Associació entre la longitud dels telòmers, causes específiques de mort i anys de vida saludable en salut, envelliment i composició corporal: un estudi de cohorts basat en la població. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2009;64:860–864.
45. Codd V, Nelson CP, Albrecht E, et al. Identificació de set loci que afecten la longitud mitjana dels telòmers i la seva associació amb la malaltia. Nat Genet. 2013;45:422–427.
46. Zhan Y, Hägg S. Longitud dels telòmers i risc de malaltia cardiovascular. Curr Opin Cardiol. 2019;34:270–274.
47. Stenvinkel P, Luttropp K, McGuinness D, et al. L'expressió CDKN2A/p16INK4a s'associa amb la progèria vascular en la malaltia renal crònica.
Envelliment (Albany. NY). 2017;9:494–507.
48. Wilson WRW, Herbert KE, Mistry Y, et al. El contingut d'ADN del telòmer de leucòcits sanguinis prediu el contingut d'ADN del telòmer vascular en humans amb i sense malaltia vascular. Eur Heart J. 2008;29:2689–2694.
49. Matsumoto C, Jiang Y, Emathinger J, et al. Els telòmers curts indueixen p53 i autofàgia i modulen els canvis associats a l'edat en el destí de les cèl·lules progenitores cardíaques. Cèl·lules mare. 2018;36:868–880.
50. Lai L, Leone TC, Zechner C, et al. Els coactivadors transcripcionals PGC-la i PGC-lb controlen els programes superposats necessaris per a la maduració perinatal del cor. Genes Dev. 2008;22:1948–1961.
51. Moslehi J, Depinho RA, Sahin E. Telòmers i mitocondris al cor envellit. Circ Res. 2012;110:1226–1237.
52. Rufer N, Brümmendorf TH, Kolvraa S, et al. Les mesures de fluorescència dels telòmers en granulòcits i subconjunts de limfòcits T apunten a un alt.