El lector RNA M6 A YTHDF2 controla la immunitat antitumoral i antiviral de cèl·lules NK Part 6

Model de melanoma metastàtic i repte MCMV

Les cèl·lules B16F10 (105) es van injectar iv en ratolins. 14 d després de la injecció, els ratolins van ser sacrificats per a l'anàlisi postmortem. Els nòduls metastàtics del pulmó es van analitzar macroscòpicament i es van comptar. La línia cel·lular B16F10 va ser proporcionada per Hua Yu (City ofHope, Los Angeles, CA). Els ratolins Ythdf2ΔNK i Ythdf2WT es van infectar amb una injecció ip de la soca Smith MCMV (2,5 × 104 PFU), que es va comprar a la American Type Culture Collection (VR-1399). Les mostres de sang perifèrica es van obtenir mitjançant punció submandibular els dies 0, 4 i 7 després de la infecció.

Els nòduls de metàstasi pulmonar es refereixen a nòduls formats per cèl·lules tumorals malignes d'altres llocs que migren als pulmons a través de la sang o el sistema limfàtic. Per a molts pacients, aquesta és una manifestació comuna del càncer de pulmó.

Tanmateix, tot i que els nòduls de metàstasi pulmonar representen una amenaça per a la salut física dels pacients, no hi ha una relació directa entre aquesta i la memòria. Per tant, hauríem d'afrontar activament els reptes del càncer de pulmó i els nòduls de metàstasi pulmonar, i no deixar que les emocions negatives i l'ansietat afectin la nostra salut física i mental.

Al mateix temps, podem mantenir i millorar la memòria mitjançant alguns mètodes positius. Per exemple, realitzar alguns entrenaments de la memòria, com ara càlculs matemàtics, llegir, escoltar música, jugar, etc. A més, adherir-se a bons hàbits de vida, com ara exercici regular, dormir prou, menjar sa, etc. millorar la nostra memòria.

El més important és mantenir una actitud positiva. Independentment de les dificultats que us trobeu, heu de creure en la vostra força i en la flexibilitat del vostre sistema nerviós i, mitjançant ajustaments i respostes positives, acabareu superant les dificultats amb èxit.

En resum, encara que els nòduls metastàtics als pulmons representen una amenaça per a la salut física, no estan directament relacionats amb la memòria. Hem d'afrontar-ho positivament i mantenir i millorar la nostra memòria ajustant el nostre estil de vida i mantenint una bona actitud. Es pot veure que hem de millorar la memòria, i Cistanche deserticola pot millorar significativament la memòria, perquè Cistanche deserticola també pot regular l'equilibri dels neurotransmissors, com augmentar els nivells d'acetilcolina i factors de creixement. Aquestes substàncies són molt importants per a la memòria i l'aprenentatge. A més, Cistanche deserticola també pot millorar el flux sanguini i promoure el lliurament d'oxigen, cosa que pot garantir que el cervell rebi suficients nutrients i energia, millorant així la vitalitat i la resistència del cervell. Es pot veure que hem de millorar la memòria, i Cistanche deserticola pot millorar significativament la memòria, perquè Cistanche deserticola també pot regular l'equilibri dels neurotransmissors, com augmentar els nivells d'acetilcolina i factors de creixement. Aquestes substàncies són molt importants per a la memòria i l'aprenentatge. A més, Cistanche deserticola també pot millorar el flux sanguini i promoure el lliurament d'oxigen, cosa que pot garantir que el cervell rebi suficients nutrients i energia, millorant així la vitalitat i la resistència del cervell.

Feu clic a Coneix suplements per augmentar la memòria

Per mesurar les càrregues virals a la sang perifèrica, la melsa i el fetge, l'ADN es va aïllar mitjançant un kit de sang i teixit QIAGEN DNeasy per a l'anàlisi qPCR. Es van utilitzar els primers següents: MCMV-IE1,59-AGCCACCAACATTGACCACGCAC-39 (en endavant) i MCMVIE1, ​​59-GCCCCAACCAGGACACACACAACTC-39 (invers).

Tractament in vivo del ratolí amb IL-15

Per al tractament in vivo del ratolí amb IL-15, es van injectar ratolins Ythdf2ΔNK i Ythdf2WT amb 2 µg ip recombinant IL-15 humana (número de cat. 745101; Institut Nacional del Càncer) durant 5 dies. A continuació, es van sacrificar els ratolins tractats i control per a una anàlisi citomètrica de flux.

Citometria de flux

Es van preparar suspensions unicel·lulars a partir de BM, sang, melsa, fetge i pulmó de ratolins Ythdf2ΔNK i Ythdf2WT tal com es va descriure anteriorment (Wang et al., 2018b). L'anàlisi de citometria de flux i la classificació de cèl·lules es van realitzar amb un LSRFortessa X-20 i un citòmetre de flux FACSAriaFusion (BD Biosciences), respectivament.

Les dades es van analitzar mitjançant el programari NovoExpress (Agilent Technologies).

Es van utilitzar els següents anticossos marcats amb colorant de fluorescència de BD Biosciences, BioLegend, Invitrogen o Cell Signaling Technology: CD3ε (145-2C11), CD19 (1D3), Gr-1 (RB{6-8C5). ),TER-119 (TER-119), CD11c (N418), CD4 (GK1.5), CD8 (53-6.7),CD122 (5H4), CD132 (TUGm2), NK1.1 (PK136), CD11b (M1/70), CD27 (LG.3A10), CD117 (2B8), CD127 (SB/199), CD135 (A2F10.1), KLRG1 (2F1), CD45 ({{46) }}F11), CD45.1 (A20), CD45.2 (104), IFN- (XMG1.2), 2B4 (m2B4), granzima B (QA16A02), perforina (S16009A), Ly49H (3D10), Ly49D ( 4e5), CD69 (H1.2F3), CD226 (TX42.1), NKG2D (CX5), NKG2A (16A11), NKp46 (29A1.4), TIGIT (1G9), PD-1 (J43), annexina V, Ki67 (b56), Tbet (4b10) i Eomes (WD1928), fosfo-p44/42 Erk1/2 (Thr202/Tyr204, #9101), fosfo-Akt (Ser473, #5315), proteïna ribosòmica fosfo-S6 ,phospho-Stat3 (Tyr705, #9145) i fosfo-Stat5 (Tyr694, #9539).

Per a l'avaluació de la proliferació de cèl·lules NK, les cèl·lules es van marcar amb 5 µM CTV (Invitrogen) segons el protocol del fabricant abans de transferir-les a ratolins receptors. La tinció intracel·lular de Ki67, Tbet i Eomes es va realitzar mitjançant la fixació i la permeabilització amb el kit de tinció Foxp3/Transcription Factor (eBioscience).

Per a la detecció de proteïnes fosforilades, les cèl·lules NK esplèniques purificades es van tractar prèviament amb IL-15 humana recombinant (50 ng/ml) durant 1 h i després es van fixar amb Phosflow Fix Buffer I seguit de permeabilització amb Phosflow Perm Buffer III (BD Biosciences) i tinció amb anticossos.

Transferència cel·lular adoptiva

Per avaluar l'efecte de la deficiència de Ythdf2 sobre la maduració de les cèl·lules NK, es va cotransferir una barreja de 5 × 106 cèl·lules BM en una proporció 1:1 de ratolins CD45.1 o Ythdf2ΔNK CD45.2 a ratolins Rag2-/-Il2rg-/-. La reconstitució dels receptors es va avaluar mitjançant citometria de flux8 setmanes després del trasplantament.

Per als experiments de proliferació homeostàtica induïts per la limfopènia, es va cotransferir un nombre igual de cèl·lules NK esplèniques purificades de ratolins CD45.1 o Ythdf2ΔNK CD45.2 a ratolins Rag2−/−Il2rg−/− seguit d'una avaluació dels percentatges relatius de les cèl·lules WT i YthdfKΔNK transferides a les cèl·lules NK2. de receptors Rag2−/−Il2rg−/− mitjançant citometria de flux en els punts de temps indicats.

Per al melanomamodel metastàtic, es van injectar iv 106 IL-2-cel·lules NK expandides de Ythdf2ΔNK o Ythdf2WTmice en ratolins Rag2−/−Il2rg−/−. 1 d després, les cèl·lules B16F10 (105) es van injectar iv en ratolins. 14 dies després de la injecció, els ratolins van ser eutanasiats per a l'anàlisi postmortem. En alguns experiments, les cèl·lules es van etiquetar amb CTV (5 µM, Invitrogen) per rastrejar la proliferació cel·lular abans de la transferència.

Assaig de tràfic in vivo

Per detectar el tràfic de cèl·lules NK des de la BM a la sang perifèrica, es va injectar 1 µg iv d'anticòs anti-CD45 marcat amb APC als ratolins C57BL/6. Dos minuts després de la injecció d'anticossos, es van sacrificar immediatament els gels i es van recollir les cèl·lules BM per citometria de flux després que les cèl·lules es tinguessin amb anticossos CD3 i NK1.1. Les cèl·lules NK del parènquima es van identificar per la manca de tinció de CD45, mentre que les cèl·lules NK sinusoïdals es van identificar per la presència de l'etiquetatge CD45. Per tant, la proporció de cèl·lules NK als sinusoides (CD45+) i a les regions parenquimàtiques (CD45−) indica el tràfic de cèl·lules NK des de la sang perifèrica BM en estat estacionari.

RT-qPCR en temps real i immunoblot

L'ARN es va aïllar mitjançant un RNeasy Mini Kit (QIAGEN) i després es va transcriure inversament a cDNA amb PrimeScript RT Reagent Kit amb gDNA Eraser (Takara Bio) segons les instruccions del fabricant. Els nivells d'expressió d'ARNm es van analitzar mitjançant SYBRGreen PCR Master Mix i un sistema QuantStudio 12K Flex Real-TimePCR (tots dos de Thermo Fisher Scientific). Les seqüències d'encebadors es mostren a la taula S1.

La immunoblotting es va realitzar segons procediments estàndard, tal com es va descriure anteriorment (Denget al., 2015; Yu et al., 2006). Es van utilitzar els anticossos següents: METTL3 (núm. cat. 15073-1-AP; Proteintech), METTL14 (núm. cat.26158-1-AP; Proteintech), YTHDF1 (núm. cat. 17479-1-AP ; Proteintech), YTHDF2 (núm. cat. RN123PW; MBL), YTHDF3 (núm. cat.25537-1-AP; Proteintech), ALKBH5 (núm. cat. ab195377; Abcam),FTO (núm. cat. ab124892; Abcam), MDM2 (núm. cat. 33-7100; Invitrogen), TDP-43 (núm. cat. PA{5-29949; Invitrogen) i -actina (núm. cat. {{20} }}Ig; Proteintech).

assaig d'eliminació de siRNA

IL-2–expanded NK cells were transfected with Accell mouse Tardbp siRNA (cat. no. E-040078-00-0005; Dharmacon) or Mdm2 siRNA (cat. no. E-041098-00-0005; Dharmacon) using Accell delivery media (Dharmacon) according to the manufacturer's instructions in the presence of IL-15 (50 ng/ml). The Accell eGFP control pool was used as siRNA control. The transfection efficiency was >90% mesurat per citometria de flux. L'eficiència de Geneknockdown es va determinar mitjançant qPCR i immunoblot. 3 d després de la transfecció, l'apoptosi cel·lular i la proliferació es van analitzar mitjançant citometria de flux tal com es descriu anteriorment.

Assaig del reporter de la luciferasa

La regió promotora Ythdf2 que va des de -2,000 bp fins a +100 bpo del TSS es va amplificar a partir de cèl·lules NK murines i es va clonar en apGL4-Basic Luciferase Reporter Vector (Promega) per generar apGL{ {5}}Plàsmidi reporter Ythdf2. Les cèl·lules HEK293T adquirides a ATCC es van cotransfectar amb els plasmides reporters pGL4-Ythdf2, així com plasmidis de sobreexpressió STAT5a o STAT5b o un vector buit, juntament amb un plasmidi reporter pRL-TK Renilla (Promega) per normalitzar l'eficiència de la transfecció. Les cèl·lules es van collir per a la lisi 24 hores després de la transfecció i l'activitat de la luciferasa es va quantificar fluorimètricament amb el sistema Dual-Luciferase (Promega). Les seqüències de cebador per clonar el promotor Ythdf2 i els plasmidis de sobreexpressió STAT5a i STAT5b es mostren a la taula S1.

Assajos de ChIP

Els assajos de ChIP es van realitzar mitjançant un kit Pierce Magnetic ChIP (núm. cat. 26157; Thermo Fisher Scientific) segons les instruccions del fabricant. Breument, es va utilitzar per separat una quantitat igual d'ananti-anti-fosfo-Stat5 (Tyr694, cat. núm. 9351; Cell Signaling Technologies) o la corresponent IgG de conill normal de control per precipitar els complexos ADN-proteïnes reticulats derivats de 5 × 106 cèl·lules NK primàries de ratolí purificades que es van tractar prèviament amb IL-15 (50 ng/ml) durant 1 h. Després de la reversió de la reticulació, l'ADN immunoprecipitat per l'anticòs indicat es va provar mitjançant qPCR. Les seqüències de tots els primers es mostren a la taula S1.

Assaig de citotoxicitat ex vivo

La citotoxicitat ex vivo de les cèl·lules NK es va avaluar mitjançant assajos estàndard de 51Crrelease. Les línies cel·lulars de limfoma de ratolí RMA-S (classe MHC deficient) i cèl·lules RMA (classe MHC I suficient), un regal d'Andre'Veillette (McGill University, Montreal, Canadà), es van utilitzar com a cèl·lules objectiu. Els ratolins es van tractar amb injecció ip d'àcid poliinosínic:policitidílic [poli (I: C); 200 µg/ratolins] durant 18 h. Les cèl·lules NK activades per Poly (I: C) es van aïllar de la melsa mitjançant el kit d'aïllament de cèl·lules NK EasySepMouse (STEMCELL Technologies). Les cèl·lules NK purificades es van cocultivar amb cèl·lules diana en una proporció de 5:1, 2,5:1 i 1,25:1 en presència d'IL-2 (50 U/ml).

m6A-seq

Les cèl·lules NK esplèniques purificades es van expandir per IL-2 (1,000 U/ml, núm. de cat. Bulk Ro 23-6019; National Cancer Institute) in vitro durant 7 d. L'ARN total es va aïllar mitjançant el reactiu TRIzol (Thermo FisherScientific) de 50 milions de cèl·lules NK expandides IL-2. L'ARN poliadenilat es va enriquir encara més a partir de l'ARN total mitjançant el kit de purificació d'ARNm de Dynabeads (Invitrogen). Les mostres d'ARNm es van fragmentar en fragments de 100-nt llargs amb reactius de fragmentació d'ARN (Invitrogen).

Es va utilitzar ARNm fragmentat (5 µgmRNA) per a la immunoprecipitació de m6A mitjançant un anticòs m6A (202003; Synaptic) seguint el protocol estàndard del kit Magna MeRIP m6A (Merck Millipore). L'ARN es va enriquir mitjançant RNA Clean & Concentrator-5 (Zymo Research) per a la generació de biblioteques amb un KAPA RNA HyperPrep Kit (Roche). La seqüenciació es va realitzar a les instal·lacions de genòmica de City of Hope en una màquina Illumina HiSeq 2500 amb mode de lectura única 50-bp. Les lectures de seqüenciació es van mapar al genoma del ratolí mitjançant el programari HISAT2 v101 (Kim et al., 2015).

Es van proporcionar lectures de mapes d'immunoprecipitació i biblioteques d'entrada mitjançant el paquet R exomePeak (Meng et al., 2014). Els m6Apeaks es van visualitzar mitjançant el programari Integrative Genomics Viewer (http://www.igv.org). El motiu d'unió a m6A va ser analitzat per MEME (https://meme-suite.org) i HOMER (http://homer.ucsd.edu/homer/motif). Els pics anomenats es van anotar mitjançant la intersecció amb l'arquitectura gènica mitjançant el Rpackage ChIPseeker (Yu et al., 2015).

StringTie was used to assess expression levels for mRNAs from input libraries by calculating the total exon fragments/mapped reads in millions × exon length in kb (Pertea et al., 2015). The differentially expressed mRNAs were selected with log2(fold change) >1 orlog2 (canvi de plec)<−1 and P < 0.05 using the R package edgeR (Robinson et al., 2010).

YTHDF2 RIP-seq

Es van recollir 50 milions de cèl·lules NK expandides IL{-2 i es van rentar dues vegades amb PBS fred, i el pellet cel·lular es va lisar amb tampó d'òlisi de 2 vol (10 mM Hepes, pH 7,6, 150). mM KCl, 2 mM EDTA, 0,5% NP-40, 0,5 mM ditiotreitol, còctel inhibidor de proteasa 1:100 [Thermo Fisher Scientific] i 400 U/ml d'inhibidor de RNasa SUPERase-In [Thermo Fisher Scientific]).

El lisat es va incubar en gel durant 5 minuts i es va centrifugar durant 15 minuts per netejar el lisat. Es va desar una desena part del volum de lisat cel·lular com a entrada. La resta del lisat cel·lular es va incubar amb 5 µg d'anti-YTHDF2 (núm. cat RN123PW; MBL) que es va acoblar amb perles magnètiques de proteïna A (núm. cat. 10001D; Invitrogen) a 4 graus durant 2 h amb gir suau. Després, les perles es van rentar cinc vegades amb 1 ml de tampó de rentat en fred (50 mM HEPES, pH 7,6.200 mM NaCl, 2 mM EDTA, 0,05% NP-40, 0,5 mM ditiotreitol i 200 U/ml RNasa). inhibidor).

Les mostres immunoprecipitades es van sotmetre a la digestió de la Proteinasa K en tampó de rentat suplementat amb 1% SDS i 2 mg/ml de Proteinasa K (ThermoFisher Scientific) incubada amb agitació a 1.200 rpm a 55 graus durant 1 h. L'ARN total es va extreure tant de l'ARN d'entrada com de l'ARN immunoprecipitat afegint 5 vol de reactiu TRIzol seguit de Direct-zol RNA Miniprep (Zymo Research).

La biblioteca d'ADNc es va generar amb un KAPA RNA HyperPrep Kit (Roche) i es va seqüenciar en una plataforma Illumina HiSeq 2500. Els resultats màxims de trucades amb immunoprecipitació i biblioteques d'entrada van ser generats pel paquet R RIPSeeker (Li et al., 2013). HOMER es va utilitzar per trobar motius de la distribució de dades a les regions màximes. Els pics anomenats es van anotar mitjançant la intersecció amb l'arquitectura de gens i transcripció mitjançant ChIPpeakAnno (Zhu et al., 2010).

assaig d'estabilitat de l'ARNm

Les cèl·lules NK esplèniques purificades de ratolins Ythdf2ΔNK i Ythdf2WT es van cultivar amb IL-15 (50 ng/ml). 3 d després del cultiu, les cèl·lules es van tractar amb actinomicina D (5 µg/ml, núm. cat. A9415; Sigma) durant el temps indicat. Les cèl·lules sense tractament es van utilitzar a les 0 h. Les cèl·lules es van recollir en el moment indicat i es va extreure l'ARN total de les cèl·lules per a qPCR. La vida mitjana de l'ARNm es va calcular mitjançant el mètode descrit anteriorment per Weng et al. (2018). Les seqüències d'encebadors es mostren a la taula S1.

Anàlisi de bases de dades en línia

Hem utilitzat el recurs en línia BioGPS (http://biogps.org) per analitzar l'expressió específica del teixit del Ythdf2. Els conjunts de dades d'ARN eren de GEO sota els núms d'adhesió. GSE106138, GSE113214 i GSE25672. Es van exportar dades normalitzades de les anàlisis d'ARN-seq i es va visualitzar la puntuació z de l'expressió gènica amb la funció Heatmap.2 dins de la biblioteca gplots Rlibrary

Estadístiques

Les proves t de l'estudiant no emparellat (de dues cues) es van realitzar mitjançant el programari GraphPad Prism. Es va realitzar ANOVA unidireccional o bidireccional quan es van comparar tres o més grups independents. Els valors de P es van ajustar per a comparacions múltiples mitjançant el procediment Holm-Sˇ´ıdak. P < 0.05 es va considerar significatiu. *, P <{{10}},05; **, P <0,01; i ***, P <0,001.

Material complementari en línia

La figura S1 mostra els nivells de proteïnes d'YTHDF2 a les cèl·lules immunitàries, incloses les cèl·lules NK en resposta a l'estimulació per IL-15, la infecció per MCMV i la progressió del tumor; la generació de ratolins amb supressió específica de cèl·lules NK de Ythdf2. La figura S2 mostra els títols virals a la melsa i el fetge de ratolins infectats amb MCMV i el percentatge i el nombre absolut de cèl·lules NK Ly49H+ i/o Ly49D+ en ratolins infectats amb MCMV. La figura S3 mostra la proliferació, supervivència, maduració i expressió de receptors activadors i inhibidors de cèl·lules NK de ratolins Ythdf2WT i Ythdf2ΔNK. La figura S4 mostra la regulació de l'expressió YTHDF2 mitjançant la senyalització IL-15-STAT5 i l'expressió dels components dels receptors IL{-15, la via PI3K–AKT i la via MEK–ERK en cèl·lules NK de Ythdf2WT i Ythdf2ΔNK. ratolins. La figura S5 mostra els assaigs d'ARN-seq, m6A-seq i RIP-seq a tot el transcriptoma en cèl·lules NK. La taula S1 enumera els primers utilitzats en l'estudi.

Disponibilitat de dades

Les dades d'ARN-seq, m6A-seq i RIP-seq es van dipositar al Centre Nacional d'Informació Biotecnològica GEO amb el núm. GSE174027. Les dades restants que donen suport a les conclusions d'aquest estudi estan disponibles als autors corresponents a petició.

Agraïments

Aquest treball va comptar amb el suport dels Instituts Nacionals de Salut (NS106170, AI129582, CA247550, CA163205, CA223400, CA068458 i CA210087), la Societat de Leucèmia i Limfoma (1364-19), l'Institut de Medicina Regenerativa de Califòrnia ({{DISC2COVID) 9}}) i el Premi al Projecte Excepcional 2021 de Breast Cancer Alliance. Aquest treball també va comptar amb el suport parcial d'un USDAaward (USDA/NIFA 2020-67017-30843).

Contribucions dels autors: S. Ma, J. Yu i MA Caligiuri van concebre i dissenyar el projecte. S. Ma, J. Yan, J. Zhang i J. Yu va realitzar experiments i/o anàlisis de dades. Z. Chen, L.-S.Wang, JC Sun i J. Chen van aportar reactius i material de suport. S. Ma, J. Yu, J. Chen i MA Caligiuri van escriure, revisar i/o revisar el document. Tots els autors van discutir els resultats i van comentar el manuscrit.

Divulgacions: J. Chen va informar "un altre" de Genovel BiotechCorp. fora del treball presentat i és un fundador científic de Genovel Biotech Corp. i un assessor científic d'oncologia racial. No es van informar altres divulgacions.

Referències

1.Arase, H., ES Mocarski, AE Campbell, AB Hill i LL Lanier. 2002. Reconeixement directe del citomegalovirus mitjançant l'activació i inhibició dels receptors de cèl·lules NK. Ciència. 296:1323–1326.

2.Ayala, YM, T. Misteli i FE Baralle. 2008. TDP-43 regula la fosforilació de proteïnes del retinoblastoma mitjançant la repressió de l'expressió de la quinasa 6 dependent de la ciclina. Proc. Natl. Acad. Ciència. EUA. 105:3785–3789.

3.Barbieri, I., K. Tzelepis, L. Pandolfini, J. Shi, G. Millan-Zambrano, SC Robson, ´D. Aspris, V. Migliori, AJ Bannister, N. Han, et al. 2017. METTL3 lligat al promotor manté la leucèmia mieloide mitjançant un control de traducció dependent de m6A. Naturalesa. 552:126–131.

4.Becknell, B. i MA Caligiuri. 2005. Interleucina-2, interleucina-15 i els seus papers a les cèl·lules assassines naturals humanes. Adv. Immunol. 86:209–239.

5.Bertoli, C., JM Skotheim i RA de Bruin. 2013. Control del cicle de transcripció cel·lular durant les fases G1 i S. Nat. mossèn Mol. Biol cel·lular. 14:518–528.

6.Bezman, NA, CC Kim, JC Sun, G. Min-Oo, DW Hendricks, Y. Kamimura, JA Best, AW Goldrath i LL Lanier. Consorci del projecte del genoma immunològic. 2012. Definició molecular de la identitat i activació de les cèl·lules natural killer. Nat. Immunol. 13:1000–1009.

7.Carson, WE, JG Giri, MJ Lindemann, ML Linett, M. Ahdieh, R. Paxton, D.Anderson, J. Eisenmann, K. Grabstein i MA Caligiuri. 1994. La interleucina (IL) 15 és una nova citocina que activa les cèl·lules assassines naturals humanes mitjançant components del receptor IL-2. J. Exp. Med. 180:1395–1403.

8.Carson, WE, TA Fehniger, S. Haldar, K. Eckhert, MJ Lindemann, CF Lai, CM Croce, H. Baumann i MA Caligiuri. 1997. Un paper potencial de la interleucina-15 en la regulació de la supervivència de cèl·lules assassines naturals humanes.J. Clin. Invertir. 99:937–943.

9.Chan, CJ, MJ Smyth i L. Martinet. 2014. Mecanismes moleculars d'activació de cèl·lules assassines naturals en resposta a l'estrès cel·lular. Diferència de mort cel·lular. 21:5–14.

10.Chen, X., J. Han, J. Chu, L. Zhang, J. Zhang, C. Chen, L. Chen, Y. Wang, H.Wang, L. Yi, et al. 2016. Teràpia combinatòria de cèl·lules NK EGFR-CAR i virus de l'herpes simplex oncolític 1 per a metàstasis cerebrals del càncer de mama.Oncotarget. 7:27764–27777.

For more information:1950477648nn@gmail.com