Els glucòsids totals de les tiges de Cistanche Tubulosa alleugen comportaments semblants a la depressió: interacció bidireccional dels fitoquímics i la microbiota intestinal

per a més informació:ali.ma@wecistanche.com

Li Fan, et al

RESUM

Fons: Com a herba tonificant del yang del ronyó més utilitzada en la medicina tradicional xinesa, les tiges suculentes seques deCistanchetubulosa(Schenk) Wight (TC) ha demostrat ser eficaç en el tractament de la depressió. Tanmateix, els components antidepressius i el seu mecanisme subjacent encara no estan clars.

Propòsit: Explorar els components actius de la TC(Cistanchetubulosa)contra la depressió, així com els possibles mecanismes. Disseny i mètodes de l'estudi: es van utilitzar proves de desesperació del comportament per avaluar les activitats antidepressives de polisacàrids, oligosacàrids i diferents fraccions enriquides en glucòsids separades de la TC, així com els metabòlits típics de la microbiota intestinal, inclòs 3-àcid hidroxifenilpropiònic ({{2} }}HPP) i hidroxitirosol (HT). A més, es van explorar els efectes de les fraccions bioactives i els metabòlits sobre models d'estrès lleu impredictible crònic (CUMS) amb múltiples anàlisis farmacodinàmiques i bioquímiques. Es van observar canvis en la histologia del còlon i la barrera intestinal mitjançant la tinció i l'anàlisi immunohistoquímica. Es van explorar les característiques microbianes intestinals i el metabolisme del triptòfan-quinurena mitjançant la seqüenciació d'ARNr 16S i el western-blotting, respectivament.

Resultats: Totalglicòsids(TG) va alleujar dràsticament els comportaments semblants a la depressió en comparació amb diferents fraccions separades, reflectint-se en els efectes sinèrgics dels glicòsids feniletanoides i iridoides sobre la hiperactivació de l'eix hipotàlem-hipofisi-adrenal (HPA), inflamació neuro-, i perifèrica severa i deficiències. en 5-hidroxitriptamina (5-HT) i factor neurotròfic derivat del cervell a l'hipocamp. A més, TG(glucòsids totals)va mitigar la inflamació de baix grau al còlon i la interrupció de la barrera intestinal, i l'abundància de diversos gèneres bacterians altament correlacionat amb l'eix HPA i la inflamació en rates CUMS. De manera consistent, l'expressió de la indoleamina 2, 3-dioxigenasa 1 (IDO1) al còlon es va reduir significativament després de la TG(glucòsids totals)administració, acompanyada de la supressió del metabolisme de triptòfan-quinurena. D'altra banda, HT també va exercir un efecte antidepressiu marcat millorant la funció de l'eix HPA, l'alliberament de citocines proinflamatòries i el metabolisme de triptòfan-quinurena, mentre que no va poder ajustar en gran mesura la microbiota intestinal desordenada de la mateixa manera que la TG. Sorprenentment, superior a la fluoxetina, TG i HT podria millorar encara més la disfunció de l'eix hipotàlem-hipofisi-gonadal i el metabolisme anormal dels nucleòtids cíclics.

Paraules clau: Cistanchetubulosa, glucòsids totals, hidroxitirosol, depressió, microbiota intestinal

Feu clic a cistanche deserticola ma producte

Introducció

La depressió és un trastorn mental crònic, recurrent i potencialment mortal que afecta fins al 20% de la població a tot el món (Nabavi et al., 2017). Actualment, tot i que s'han aprovat nombrosos antidepressius, els efectes secundaris són preocupants. En particular, el tractament a llarg termini amb inhibidors selectius de la recaptació de serotonina (ISRS) com la fluoxetina, el principal agent farmacològic de la depressió, problemes exacerbats com la disfunció sexual crònica (Bijlsma et al., 2014); això ha cridat cada cop més l'atenció sobre el descobriment de nous antidepressius a partir d'herbes naturals (Wang et al., 2019). En la teoria de la medicina tradicional xinesa (MTC), la deficiència del ronyó-yang dóna lloc a una característica de rendiment similar als símptomes clínics de la depressió, com ara sentir-se abatut als abocadors, pèrdua d'interès i sentimentalisme (Yang et al., 2020), promovent els pensaments. per alleujar comportaments semblants a la depressió tonificant el yang del ronyó. Casualment, moltes herbes tonificants del yang del ronyó tenen l'avantatge de millorar la funció sexual (Wu et al., 2015). Aquests estudis ens fan parar atenció a la possible aplicació deCistancsHerba, que és l'herba tonificant del yang del ronyó més utilitzada en la MTC i és eficaç per tractar la disfunció sexual masculina (Wang et al., 2020), en termes de desenvolupaments antidepressius.CistancsHerba, registrades oficialment com les tiges suculentes seques deCistanchetubulosa(Schrenk) Wight (CT) iCistanchedeserticola(YC Ma) de la farmacopea xinesa (Wang et al., 2017), s'ha utilitzat a la Xina i altres països de l'Àsia oriental des del segle XV per tractar afeccions com la deficiència de ronyó-yang, la impotència i la infertilitat femenina. Els estudis farmacològics moderns ho indiquenCistancsHerba té múltiples bioactivitats, com ara la millora de la immunitat, neuroprotecció, efectes antioxidants, antienvelliment i antifatiga (Wang et al., 2017). Les propietats neuroprotectores deCistancsHerba suggereix el seu potencial terapèutic en malalties cognitives com ara l'ictus, la depressió i la malaltia d'Alzheimer (Wang et al., 2020). En el nostre estudi anterior, vam trobar que la TC(Cistanchetubulosa)L'extracte va alleujar els comportaments semblants a la depressió de les rates d'estrès lleu impredictible crònic (CUMS) (Li et al., 2018). Fins ara, anàlisi química de TC(Cistanchetubulosa)va demostrar que els seus principals constituents inclouen glicòsids feniletanoides, glicòsids iridoides, polisacàrids i oligosacàrids (Jiang i Tu, 2009), però, el tipus de compost que té un paper dominant en el seu efecte antidepressiu encara no està clar.

Nombrosos estudis han confirmat que l'acció fisiològica de l'intestí (especialment la microbiota comensal) té un paper important en el desenvolupament de la depressió i pot regular el sistema neuroendocrí, el sistema nerviós autònom i el sistema immunitari (Yang et al., 2020). A més, la relació que uneix el metabolisme del triptòfan, la microbiota intestinal i la depressió ha cridat gradualment molta atenció. La microbiota intestinal alterada pot activar la via triptòfan-cinurenina, reduint posteriorment la disponibilitat de triptòfan perifèric i cerebral, la qual cosa provoca una deficiència de 5-HT (Agus et al., 2018). El nostre estudi anterior va demostrar que els glucòsids feniletanoides a la TC(Cistanchetubulosa)generalment exerceixen una baixa biodisponibilitat i es poden metabolitzar ràpidament en àcid 3-hidroxifenilpropiònic (3-HPP) i hidroxitirosol (HT) per la microbiota intestinal (Li et al., 2016). A més, CT(Cistanchetubulosa)Es va informar que l'extracte restaurava l'homeòstasi de la microbiota intestinal en rates CUMS (Li et al., 2018). A partir d'aquesta investigació, vam inferir que la interacció bidireccional dels fitoquímics i la microbiota intestinal podria regir els efectes antidepressius de components bioactius específics de la TC.(Cistanchetubulosa). Concretament, els compostos es podrien transformar en metabòlits absorbibles (com ara 3-HPP i HT) al tracte gastrointestinal per la microbiota intestinal i, posteriorment, exercir efectes antidepressius. Al seu torn, les alteracions estructurals de la microbiota intestinal induïdes per components bioactius poden jugar simultàniament un paper vital en l'activitat antidepressiva.

En el nostre estudi, hem utilitzat proves de desesperació conductual per avaluar les activitats antidepressives de polisacàrids, oligosacàrids i diverses fraccions enriquides amb glucòsids separades de la TC.(Cistanchetubulosa)extracte aquós (CTE) i els metabòlits típics de la microbiota intestinal (incloent-hi 3-HPP i HT), que vam confirmar encara més en el model d'estrès lleu impredictible crònic (CUMS) amb múltiples anàlisis farmacodinàmiques i bioquímiques. Posteriorment, vam investigar si el seu mecanisme contra la depressió era rellevant per a la interacció bidireccional dels fitoquímics i la microbiota intestinal.

Materials i mètodes

Materials

Tots els estàndards utilitzats per a l'anàlisi química es van comprar a Durst (Sichuan, Xina). 3-HPP, HT, fluoxetina i imipramina es van comprar a Aladdin (Xangai, Xina). El kit quantitatiu de proteïnes BCA es va comprar a Boster (Wuhan, Xina). Nanjing Jiancheng (Nanjing, Xina) va proporcionar 5-HT, BDNF, factor de necrosi tumoral-alfa (TNF-), interleucina-1beta (IL{-1) i interferó-gamma (IFN-). ) kits d'assaig immunoabsorbent lligat a enzims (ELISA). Es van comprar kits ELISA de corticosterona (CORT), hormona adrenocorticotròpica (ACTH) i hormona alliberadora de corticotrofina (CRH) a MultiSciences (Hangzhou, Xina). Els kits ELISA d'adenosina monofosfat cíclica (cAMP), guanosina monofosfat cíclica (cGMP), testosterona (T) i hormona alliberadora de gonadotropina (GnRH) es van comprar a Enzyme-linked Biotechnology (Xangai, Xina). Els kits ELISA de triptòfan i quinurenina es van obtenir a partir d'Anticossos de molècules petites (Bordeaux, França). Els anticossos primaris/secundaris incloent zonula occludens 1 (ZO-1), indoleamina 2, 3-dioxigenasa 1 (IDO1), -actina i IgG anti-conill de cabra HRP (H més L) es van comprar a Proteintech (Wuhan, Xina). Tots els altres reactius de grau analític o de puresa superior es van obtenir de proveïdors comercials.

Preparació de diferents fraccions separades de CTE(Cistancheextracte de tubulosa)

CT(Cistanchetubulosa)va ser recollit el novembre de 2015 a Hetian, Xinjiang, Xina, i autenticat pel professor Xiaobo Li. L'exemplar del val (20151108) es va dipositar a l'Escola de Farmàcia de la Universitat Jiao Tong de Xangai.

Les mostres triturades es van extreure tres vegades amb aigua destil·lada (1:10, p/v) durant 2 h a 80 ~ 90 ◦ C per obtenir CTE(Cistancheextracte de tubulosa)(el rendiment va ser del 57,1 per cent). El CTE es va dissoldre en aigua destil·lada i després es va agitar lentament amb etanol (1:4, v/v) i es va col·locar a 4 ◦ C durant 24 h. A continuació, es van recollir el precipitat i el sobrenedant per centrifugació a 4000 rpm durant 20 min. Els polisacàrids totals (TP; el rendiment va ser del 5,7 per cent) es van obtenir rentant amb etanol al 80 per cent i desproteinització amb reactiu Savage tres vegades del precipitat recollit. El sobrenedant restant es va cromatografiar sobre una columna de resina microporosa D101 i es va eluir amb aigua destil·lada i etanol al 40%. L'aigua eluïda i les fraccions d'etanol del 40 per cent contenien oligosacàrids totals (TO; el rendiment va ser del 35,1 per cent) itotalglicòsids(TG; el rendiment va ser del 12,1 per cent), respectivament. TG(glucòsids totals)es va eluir més amb aigua destil·lada i etanol al 5 per cent, 10 per cent i 40 per cent a través de la resina microporosa D101 de nou, i les fraccions eluïdes del 5 per cent i el 40 per cent d'etanol eren glicòsids iridoides totals (TG-IrG; el rendiment va ser del 2,7 per cent) i glucòsids feniletanoides totals (TG-PhG; el rendiment va ser del 8,7 per cent), respectivament.

Anàlisi química

En primer lloc, els principals constituents químics de diferents fraccions separats de CTE(Cistancheextracte de tubulosa)es van caracteritzar per UPLC-QTOF-MS. En segon lloc, els continguts relatius d'hidrats de carboni i glucòsids totals es van determinar mitjançant el mètode UV-Vis. En tercer lloc, els components principals (echinacòsid, verbascòsid, és verbascòsid, 8-àcid epilogànic i àcid tenipòsid) es van quantificar mitjançant un mètode HPLC validat. Els paràmetres detallats i la validació del mètode es mostren als Materials suplementaris.

Experiments amb animals

Els horaris experimentals específics amb animals es mostren a la figura 1. Tots els animals experimentals es van allotjar i aclimatar durant 1 setmana abans dels experiments al Centre d'Animals de Laboratori de la Universitat Jiao Tong de Xangai (Xangai, Xina), a temperatures ambient controlades (25 ± 2). ◦C; 55 ± 10 per cent d'humitat relativa) amb un cicle de llum-foscor de 12:12 h. Aquesta investigació es va dur a terme d'acord amb les directrius per a la cura i l'ús d'animals de laboratori de SJTU. Les instal·lacions i els protocols dels animals van ser aprovats pel Comitè d'Ètica Animal de SJTU (núm. A2019008).

Es van comprar cent cinquanta ratolins ICR mascles (de 18 a 20 g de pes, 6 setmanes d'edat) a Shanghai Slack Biotechnology Company (Xangai, Xina) i es van dividir aleatòriament en 10 grups (n=15/grup). Els subjectes i les dosis dels ratolins de desesperació conductual de cada grup es mostren a la taula 1. Les dosis de CTE(Cistancheextracte de tubulosa) i les seves fraccions separades es van calcular mitjançant la fórmula següent: dosi=4,55 g/kg.d.bw × rendiment, que es va determinar segons tres càlculs de dosi equivalents humans basats en la superfície corporal. Les dosis del fàrmac positiu imipramina i metabòlits de la microbiota intestinal (3-HPP i HT) es van establir segons els estudis anteriors (Gupte et al., 2016; Pablos et al., 2019). Després de l'administració intragàstrica una vegada al dia durant 7 dies, la prova de camp obert (OFT), la prova de suspensió de la cua (TST) i la prova de natació forçada (FST) es van realitzar els dies 8, 9 i 10, respectivament. Els mètodes específics de les proves de comportament es descriuen als materials complementaris.

Es van comprar setanta-dos rates masculines Sprague-Dawley (que pesen entre 160 i 180 g, de 6 setmanes) a Shanghai Slack Laboratory Animal Company (Xangai, Xina). Abans dels experiments formals, totes les rates van ser sotmeses a la prova de preferència de sacarosa (SPT) després de l'entrenament corresponent. Les rates es van dividir en 8 grups (n=9/grup) segons la seva preferència de sacarosa (figura suplementària S1). Els subjectes i les dosis per a les rates de cada grup es mostren a la taula 1. Les dosis es van establir segons el coeficient de conversió entre ratolí i rata en funció de les seves dosis efectives en els ratolins de desesperació conductual. I la dosi del fàrmac de control positiu fluoxetina era coherent amb l'estudi anterior (Hou et al., 2017). Tots els grups van rebre una sèrie d'estrès lleu impredictible crònic (CUMS) excepte el grup control. Els estressants es van aplicar contínuament i aleatòriament durant 4 setmanes (vegeu la taula complementària S1 per obtenir més informació). El menjar i l'aigua estaven disponibles lliurement per a les rates de control, que es van mantenir tranquil·les en una altra habitació, excepte per a les proves de comportament. Els subjectes van ser administrats per via intragàstrica 1 h abans del procediment CUMS al llarg de 4 setmanes. Després de 28 dies d'estressors continus i administració de fàrmacs, l'OFT, SPT i FST es van realitzar els dies 29, 31 i 33, respectivament. Els mètodes específics dels experiments de comportament es mostren als Materials suplementaris.

Recollida de mostres i anàlisi bioquímica

Després de les proves de comportament, les rates en dejuni van ser anestesiades amb pentobarbital sòdic i es va recollir sang sencera per obtenir mostres de sèrum. Després de la perfusió cardíaca amb solució salina, el contingut d'hipocamp, còlon i cecal es va recollir i emmagatzemar a -80 ◦C. Els segments colònics distals es van eliminar i es van fixar en un 4% de paraformaldehid. Els nivells de CORT, CRH, ACTH, TNF- , IL-1 , IFN- , cAMP, cGMP, T, GnRH, triptòfan i quinurenina al sèrum, 5-HT, BDNF i TNF- a l'hipocamp, i TNF- i IFN- al còlon es van mesurar segons les instruccions proporcionades amb els kits ELISA corresponents.

Histologia, immunohistoquímica i assaig de Western Blotting

Es van utilitzar hematoxilina i eosina (H&E) i la tinció d'àcid periòdic blau Alcian-Schiff (AB-PAS) per observar els canvis patològics en el teixit del còlon. A més, es van realitzar avaluacions d'immunohistoquímica d'aquestes seccions per observar l'expressió de la proteïna ZO-1 a les cèl·lules epitelials del còlon (Ding et al., 2020). Els detalls sobre la preparació de mostres i l'assaig de Western Blotting per determinar l'expressió de la proteïna IDO1 al còlon i a l'hipocamp també es descriuen als materials suplementaris.

Anàlisi del perfil compositiu de la microbiota intestinal

MajorBio Co., Ltd. (Xangai, Xina) va realitzar la seqüenciació d'ARNr d'alt rendiment 16S i el mètode detallat i el processament de dades es mostren als materials suplementaris.

Anàlisi estadística

Les dades s'expressen com a mitjana ± error estàndard de la mitjana (SEM). L'anàlisi unidireccional de la variància (ANOVA) es va utilitzar per comparar diversos grups mitjançant el programari SPSS 20.0. Es va considerar una diferència significativa a p <0,05. les="" correlacions="" entre="" els="" microbis="" intestinals="" i="" certs="" factors="" fisiològics="" relacionats="" amb="" la="" depressió="" es="" van="" analitzar="" mitjançant="" el="" coeficient="" de="" correlació="" de="" spearman="" basat="" en="" l'anàlisi="" del="" mapa="" de="">

Resultats

Anàlisi química de diferents fraccions separades de CTE(Cistancheextracte de tubulosa)

Els components principals es van caracteritzar mitjançant UPLC-QTOF-MS (Taula suplementària S2 i Fig. S2) i es van identificar un total de 21 components, inclosos 16 constituents de glicòsids feniletanoides, 2 constituents de glicòsids fenòlics en CTE.(Cistancheextracte de tubulosa), TG i TG-PhG; i 3 components dels glicòsids iridoides en CTE(Cistancheextracte de tubulosa), TG i TG-IrG. En general, els continguts relatius d'hidrats de carboni totals en TP i TO van ser del 60,3% i del 80,8%, respectivament. Els continguts relatius detotalglicòsidsen TG eren el 87,7 per cent. En conseqüència, els glicòsids feniletanoides i iridoides van representar el 86,7% i el 53,4% de TG-PhG i TG-IrG, respectivament. El contingut d'echinacòsid, verbascòsid, és verbascòsid, 8-àcid epilogànic i àcid tenipòsid en cada fracció es mostra a la taula 2, i el cromatograma HPLC i les dades de validació del mètode es mostren a la taula complementària S3 i a la figura S3.

Efectes de diferents fraccions separades de CTE(Cistancheextracte de tubulosa)i els metabòlits típics de la microbiota intestinal en proves de desesperació conductual en ratolins

Com es mostra a la figura 2, en comparació amb el grup control, els ratolins sotmesos a 7 dies d'administració d'imipramina (control positiu) van mostrar reduccions significatives dels temps d'immobilitat tant en FST com en TST i no van mostrar cap efecte significatiu en la distància total recorreguda a l'OFT. . També es van observar alteracions similars en CTE(Cistancheextracte de tubulosa), TG i grups HT, que indica que CTE, TG(glucòsids totals), i HT va exercir l'activitat antidepressiva i els efectes no estaven relacionats amb l'excitabilitat. Per tant, TG(glucòsids totals)i HT eren la fracció bioactiva dominant separada de CTE i metabòlits típics per la microbiota intestinal, respectivament. Curiosament, no es van mostrar canvis significatius en els temps d'immobilitat en el FST després de l'administració de TG-PhG i TG-IrG en comparació amb els dels controls, o en el TST després de l'administració de TG-PhG, cosa que indica que la presència de glucòsids feniletanoides i iridoides podria ser essencial en l'activitat antidepressiva del CTE.

Efectes farmacodinàmics i canvis bioquímics de diferents fraccions enriquides amb glucòsids i HT en rates CUMS

Tal com es mostra a la taula 3, les rates sotmeses a 28 dies del paradigma CUMS van mostrar reduccions significatives (p <0.001) en="" la="" preferència="" de="" sacarosa="" a="" l'spt,="" distància="" total="" recorreguda,="" i="" el="" nombre="" de="" cria="" a="" l'oft,="" així="" com="" un="" augment="" significatiu="" (p=""><0, 01)="" del="" temps="" total="" d'immobilitat="" a="" la="" fst="" en="" comparació="" amb="" els="" controls,="" cosa="" que="" suggereix="" la="" inducció="" de="" fenotips="" semblants="" a="" la="" depressió="" en="" rates="" cums.="" les="" actuacions="" depressives="" es="" van="" invertir="" en="" el="" grup="" flx="" (control="" positiu).="" de="" la="" mateixa="" manera,="" el="" tractament="" amb="" cte,="" tg,="" tg-phg,="" tg-irg="" i="" ht="" va="" donar="" lloc="" a="" la="" restauració="" de="" la="" preferència="" de="" la="" sacarosa="" als="" nivells="" normals="" en="" rates="" cums,="" que="" eren="" del="" 102,7%,="" 94,1%,="" 89,8%,="" 91,9%="" i="" 94,3%="" del="" total.="" controls,="" respectivament.="" de="" manera="" consistent="" en="" els="" grups="" fst,="" cte="" i="" tg="" van="" mostrar="" els="" efectes="" més="" evidents,="" i="" els="" temps="" d'immobilitat="" van="" arribar="" al="" 103,3%="" i="" el="" 93,4%="" dels="" del="" grup="" control,="" respectivament,="" mentre="" que="" els="" temps="" d'immobilitat="" dels="" grups="" tg-phg,="" tg-irg="" i="" ht.="" acaba="" d'arribar="" al="" 62,1="" per="" cent,="" el="" 73,2="" per="" cent="" i="" el="" 69,9="" per="" cent="" dels="" del="" grup="" control.="" es="" van="" observar="" augments="" significatius="" similars="" (p=""><0, 05)="" en="" la="" distància="" total="" recorreguda="" i="" el="" nombre="" de="" cria="" a="" l'oft="" després="" de="">(Cistancheextracte de tubulosa), TG i HT, i el tractament amb TG-PhG i TG-IrG van tendir a revisar el nombre de cria en rates CUMS. Els resultats van indicar que el TG era la fracció antidepressiva bioactiva dominant separada del CTE, i els glucòsids feniletanoides i iridoides eren indispensables per exercir el seu efecte antidepressiu. A més, es va demostrar que la HT era un dels metabòlits actius de la TG in vivo.

Consistentment, patir CUMS va augmentar significativament els nivells de CORT, CRF, ACTH, TNF-, IL-1 i IFN- al sèrum i TNF- a l'hipocamp de rates en comparació amb els del grup control (p.< 0.05),="" resulting="" in="" significant="" reductions="" (p="" <="" 0.05)="" in="" the="" levels="" of="" hippocampal="" 5-ht="" and="" bdnf="" (fig.="" 3).="" except="" for="" a="" non-significant="" difference="" in="" the="" level="" of="" hippocampal="" bdnf="" between="" flx="" and="" cums="" groups,="" the="" above-mentioned="" alterations="" in="" cums="" rats="" could="" be="" significantly="" reversed="" (p="" <="" 0.05)="" after="" administration="" of="" fluoxetine,="" cte="">(Cistancheextracte de tubulosa), TG i HT, que indica que CTE, TG(glucòsids totals), i HT van mostrar efectes millorants en la hiperactivació de l'eix HPA, inflamació perifèrica i neuronal severa i deficiències en {{0}}HT i BDNF. De la mateixa manera, el tractament amb TG-IrG i TG PhG va reduir significativament els nivells sèrics de CORT, TNF-, IFN- i TNF- de l'hipocamp i va augmentar el nivell de 5-HT de l'hipocamp en rates CUMS (p <{8} }.05).="" també="" es="" van="" observar="" disminucions="" significatives="" (p=""><0,05) en="" els="" nivells="" de="" crf="" sèric="" i="" acth="" en="" el="" grup="" tg-irg="" en="" comparació="" amb="" el="" grup="" cums.="" curiosament,="" els="" nivells="" sèrics="" de="" cort,="" tnf-,="" acth="" i="" crf="" en="" els="" grups="" tg-phg="" i="" tg-irg="" eren="" significativament="" més="" alts="" que="" els="" del="" grup="" tg="" (p=""><0, 05)="" i="" els="" nivells="" de="" 5-ht="" hipocampal.="" i="" bdnf="" va="" mostrar="" el="" patró="" d'expressió="" oposat="" (p=""><0, 05).="" aquests="" resultats="" van="" mostrar="" que="" els="" efectes="" de="" tg-phg="" i="" tg-irg="" sobre="" la="" hiperactivitat="" de="" l'eix="" hpa,="" la="" inflamació="" perifèrica="" i="" neuronal="" i="" l'escassetat="" de="" 5-ht="" eren="" clarament="" inferiors="" a="" la="" tg,="" cosa="" que="" indica="" que="" els="" glucòsids="" feniletanoides="" i="" iridoides="" podrien="" exercir.="" efectes="" sinèrgics="" en="" els="" múltiples="" aspectes="" esmentats="">

TG i HT regulen l'eix HPG i el metabolisme cíclic dels nucleòtids en rates CUMS

Es van mesurar els nivells de T, GnRH, cAMP i cGMP i la proporció de cAMP i cGMP (cAMP/cGMP) en el sèrum sotmès a CUMS, i els resultats es mostren a la taula 4. Les concentracions de T, GnRH, cAMP, i cAMP/cGMP al sèrum es va reduir significativament, i el nivell de cGMP va augmentar significativament (p <0.05) en="" el="" grup="" cums="" en="" comparació="" amb="" els="" controls,="" cosa="" que="" indica="" que="" sotmès="" a="" cums="" va="" provocar="" la="" supressió="" de="" l'eix="" hpg="" i="" disfunció="" del="" metabolisme="" dels="" nucleòtids="" cíclics.="" en="" comparació="" amb="" el="" grup="" cums,="" no="" hi="" va="" haver="" canvis="" significatius="" en="" el="" grup="" flx.="" sorprenentment,="" després="" de="">(glucòsids totals)i tractament amb HT, es van mostrar augments significatius (p <{{0}},05) en="" els="" nivells="" de="" t="" sèrica,="" gnrh,="" ampc="" i="" ampc/gmpc,="" mentre="" que="" el="" nivell="" de="" gmpc="" sèric="" es="" va="" reduir="" significativament="" (p=""><0,05). aquests="" resultats="" van="" indicar="" que="">(glucòsids totals)i HT va regular l'eix HPG i el metabolisme dels nucleòtids cíclics, que era clarament superior al control positiu de la fluoxetina.

TG i HT alleugen la inflamació de baix grau al còlon i la interrupció de la barrera intestinal en rates CUMS

La tinció H&E es va utilitzar per avaluar el dany morfològic del còlon i no es van observar diferències significatives en el còlon entre els grups experimentals (Fig. 4a). A més, també es van analitzar els efectes de TG i HT sobre la inflamació del còlon i la ruptura de la barrera intestinal (Fig. 4b-d). En comparació amb els del grup control, el nombre de cèl·lules caliciformes i el gruix de la capa de moc es van reduir en el grup CUMS. Consistentment, l'expressió de proteïnes de ZO-1 i els nivells d'IFN- i TNF- al còlon es van reduir significativament (p < 0.05)="" i="" augmentar="" (p="">< 0,05).="" ),="" respectivament,="" cosa="" que="" suggereix="" que="" tot="" i="" que="" no="" es="" va="" induir="" cap="" dany="" histològic="" evident,="" sotmès="" a="" cums="" va="" provocar="" una="" inflamació="" de="" baix="" grau="" al="" còlon="" i="" una="" interrupció="" de="" la="" barrera="" intestinal.="" després="" de="" la="" fluoxetina,="">(glucòsids totals)i el tractament amb HT, es van augmentar el nombre de cèl·lules caliciformes i el gruix de la capa de moc i es van reduir significativament els nivells d'IFN- i TNF del còlon (p <0.05). a="" més,="" tg="" i="" ht="" van="" augmentar="" significativament="" (p=""><0, 05)="" l'expressió="" de="" proteïnes="" de="" zo-1="" a="" un="" nivell="" similar="" al="" del="" grup="" control.="" aquests="" resultats="" van="" mostrar="" que="">(glucòsids totals)i HT podria alleujar la inflamació de baix grau al còlon i la interrupció de la barrera intestinal a les rates CUMS.

Efectes de TG i HT sobre la composició de la microbiota intestinal

Després d'eliminar les seqüències no qualificades, es van obtenir un total de 1.874.721 lectures efectives. Els resultats de la diversitat alfa (Fig. 5a) i beta (Fig. 5b) van mostrar que, tot i que la riquesa (Chao) i la diversitat (Shannon) de la microbiota intestinal en els continguts cecals no difereixen, l'estructura general de la microbiota intestinal en la trama d'anàlisi de coordenades principals (PCoA) va indicar una diferència sorprenent entre els grups control i CUMS. A més, TG(glucòsids totals)i el tractament amb HT va augmentar significativament la riquesa bacteriana de les rates CUMS i va induir diferències marcades en la trama PCoA en comparació amb les de les rates CUMS, mostrant clares similituds amb els controls, especialment quan TG(glucòsids totals)es va assajar.

Els canvis taxonòmics en la microbiota van confirmar encara més que TG(glucòsids totals)va exercir un efecte regulador espectacular sobre la composició de la microbiota intestinal. Després de TG(glucòsids totals)administració, l'abundància de la majoria de tàxons alterats en rates CUMS es va invertir a un nivell similar als del grup control. Una reducció significativa (14,2 per cent, p < 0,05)="" i="" un="" enriquiment="" (53,6="" per="" cent,="">< 0.05)="" in="" the="" abundances="" of="" the="" phylum="" firmicutes="" and="" bacteroidetes="" were="" observed="" in="" the="" tg="">(glucòsids totals)grup comparat amb el grup CUMS (Fig. 5c), respectivament. De manera consistent, a nivell familiar (taula suplementària S4), TG va disminuir l'abundància de Ruminococcaceae (fil Firmicutes) i Peptococcaceae (fil Firmicutes) en un 33, 9 per cent i un 82, 9 per cent, respectivament, en comparació amb el grup CUMS (p < 0).="" {{10}}5).="" per="" contra,="" van="" existir="" enriquiments="" significatius="" en="" les="" abundàncies="" de="" la="" família="" erysipelotrichaceae="" (fil="" firmicutes,="" 78,4="" per="" cent,="" p="">< 0,05)="" i="" muribaculaceae="" (fílum="" bacteroidetes,="" 77,3="" per="" cent,="" p="">< 0,05)="" al="" grup="" tg.="" consistentment="" a="" nivell="" de="" gènere="" (fig.="" 5d),="" les="" abundàncies="" d'anaerotruncus,="" harryflintia,="" ruminiclostri="" dium_9,="" no="" classificat_f{_ruminococcaceae="" (membres="" de="" la="" família="" rumino-coccaceae)="" i="" els="" peptococs="" (un="" membre="" de="" la="" família="" peptococcaceae)="" van="" disminuir="" significativament="" mentre="" que="" norank_f{_erysipelotrichaceae,="" allo="" baculum,="" dubosiella="" (membres="" de="" la="" família="" erysipelotrichaceae)="" i="" norank_f{{{24}="" }muribaculaceae="" (un="" membre="" de="" la="" família="" muribaculaceae)="" va="" mostrar="" abundància="" més="" alta="" al="" grup="" tg="" que="" les="" del="" grup="" cums="">< 0.05).="" in="" addition,="" tg="" decreased="" the="" abundances="" of="" tyzzerella_3,="" acetatifactor,="" and="" norank_f_lachnospiraceae="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae="" (p="" <="" 0.05),="" although="" the="" abundance="" of="" the="" family="" lachnospiraceae="" was="" similar="" across="" all="" experimental="" groups.="" unlike="" tg,="" ht="" decreased="" the="" abundances="" of="" partially="" altered="" taxa="" induced="" by="" cums,="" including="" the="" family="" ruminococcaceae,="" 3="" genera="" (anaerotruncus,="" harryflintia,="" and="" ruminiclostridium_9)="" assigned="" to="" the="" family="" ruminococcaceae="" and="" 2="" genera="" (tyzzerella_3,="" acetatifactor)="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae.="" additionally,="" converse="" variations="" were="" observed="" in="" the="" abundances="" of="" ruminococcaceae_ucg_013="" and="" streptococcus="" in="" the="" ht="" group.="" these="" results="" indicated="" that="" tg="" and="" ht="" exerted="" clear="" differences="" in="" the="" regulation="" of="" gut="" microbiota="" composition,="" and="" the="" effect="" of="" tg="" was="" superior="" to="" that="" of="" tg="" especially="" in="" altering="" the="" genera="" assigned="" to="" the="" family="" erysipelotrichaceae,="" peptococcaceae,="" and="">

Anàlisi de correlació de gèneres microbians alterats afectats per TG(glucòsids totals)i HT, hormones relacionades amb l'eix HPA, citocines proinflamatòries, 5-HT i BDNF

Per dilucidar les associacions entre els canvis en la composició de la microbiota intestinal afectats per TG(glucòsids totals)i HT, i els trets corresponents relacionats amb la depressió, es va realitzar l'anàlisi de correlació de Spearman. Com es mostra a la figura 6, els nivells de 5-HT i BDNF a l'hipocamp només es van correlacionar positivament de manera significativa amb norank_f{_Muribaculaceae. En cas contrari, es podrien identificar correlacions clares entre els gèneres microbians alterats i les hormones relacionades amb l'eix HPA. En particular, Dubosiella, norank_f{_Muribaculaceae, norank_f{_ Erysipelotrichacea i Peptococcus estaven fortament relacionats amb la funció de l'eix HPA. CORT, CRF i ACTH sèrics tenien correlacions negatives amb Dubosiella, norank_f_Muribaculaceae i norank_f{_Erysipelotrichacea, i associacions positives amb Peptococcus. A més, Dubosiella i norank_f{_ Erysipelotrichacea van mostrar associacions negatives amb l'IFN colònic i el TNF-hipocampal, mentre que hi havia relacions similars a Allobaculum, Harryfinita i el sèrum i el TNF-hipocampal, així com a norank. _f_Lachnospiracea i IFN- i TNF- sèrics. En canvi, Peptococcus es va associar positivament amb el TNF colònic i el TNF sèric. De la mateixa manera, norank_f{_Muribaculaceae es va relacionar positivament amb l'IFN- i el TNF- sèrics. Aquests resultats van indicar que els gèneres microbians alterats, especialment certs gèneres pertanyents a la família Erysipelotrichaceae, Peptococcaceae i Muribaculaceae, que estaven afectats específicament per TG, mostraven fortes associacions amb hormones relacionades amb l'eix HPA i citocines proinflamatòries simultàniament, demostrant el paper crític. de la microbiota intestinal en la regulació de la funció i la inflamació de l'eix HPA.

TG(glucòsids totals)i l'HT inhibeixen el metabolisme de triptòfan-quinurena en rates CUMS

Els efectes del TG(glucòsids totals)i HT sobre els nivells de triptòfan i quinurenina en el sèrum de rates, així com l'expressió d'IDO1 al còlon i a l'hipocamp, es van determinar. Com es mostra a la Fig. 7 i la Fig. 8, en comparació amb el del grup control, el nivell de triptòfan al sèrum es va reduir significativament en el grup CUMS, en contrast amb l'augment del nivell de quinurenina i la proporció de quinurenina a triptòfan (Kyn). /Trp) i expressió de proteïnes IDO1 al còlon i a l'hipocamp. En comparació amb el grup CUMS, Kyn/Trp sèric al grup FLX es va reduir significativament (p< 0.05).="" tg="">(glucòsids totals)i el tractament amb HT va provocar un augment significatiu del nivell de triptòfan sèric en rates CUMS (p <{{0}}.05) i="" una="" disminució="" dels="" nivells="" de="" quinurenina="" sèrica="" i="" kyn/trp.="" (p="">< 0,05).="" a="" més,="" tg="" va="" inhibir="" significativament="" l'expressió="" de="" la="" proteïna="" ido1="" al="" còlon="" de="" rates="" cums="" (p=""><0, 05),="" mentre="" que="" es="" va="" observar="" una="" diferència="" no="" significativa="" en="" l'expressió="" de="" la="" proteïna="" ido1="" a="" l'hipocamp="" entre="" els="" grups="" cums="" i="" tg.="" tanmateix,="" l'efecte="" de="" la="" ht="" sobre="" l'expressió="" de="" la="" proteïna="" ido1="" al="" còlon="" i="" a="" l'hipocamp="" va="" ser="" contrari="" al="" de="" la="" tg,="" cosa="" que="" indica="" que="" tg="" i="" ht="" van="" inhibir="" el="" metabolisme="" del="" triptòfan-quinurena="" disminuint="" l'expressió="" d'ido1="" al="" còlon="" i="" a="" l'hipocamp="" de="" les="" rates="" cums,="" respectivament.="">

Discussió

En aquest estudi, es van utilitzar dos models animals diferents per detectar compostos bioactius en TC(Cistanchetubulosa)que alleugen comportaments semblants a la depressió per primera vegada. TP i TO eren molt probablement ingredients ineficaços en CTE, mentre que TG(glucòsids totals)va mostrar el major potencial en el tractament de la depressió. Estudis previs sobre TC(Cistanchetubulosa), així comCistancheplantes, s'han centrat sobretot en les bioactivitats dels glicòsids feniletanoides amb els continguts més alts i han descuidat la importància dels glicòsids iridoides i altres ingredients menys abundants. Curiosament, el nostre estudi va demostrar que els glicòsids feniletanoides i iridoides mostraven efectes sinèrgics sobre la hiperactivitat de l'eix HPA, inflamació neuronal i perifèrica severa i deficiències en 5-HT i BDNF de l'hipocamp, que poden ser la raó crítica de l'avantatge antidepressiu. efecte del TG(glucòsids totals). Aquests resultats suggereixen, a més, les característiques multicomponent i multiobjectiu de la medicina a base d'herbes i ens recorden que els components amb nivells més baixos, fins i tot els ingredients traça, també poden tenir un paper clau en els efectes farmacològics.

L'estrès crònic indueix la hiperactivitat de l'eix HPA, que afavoreix l'aparició de la depressió, així com la supressió de l'eix HPG mitjançant la disminució de l'alliberament de GnRH i/o la sensibilitat pituïtària de GnRH (Kirby et al., 2009). Mentrestant, cAMP i cGMP són centres intermedis importants que es basaven en molts neurotransmissors i hormones per exercir els seus efectes fisiològics (Siawrys et al., 2002). Estudis recents han demostrat constantment que l'aparició de deficiència de ronyó-yang està estretament relacionada amb la disfunció de l'eix hipotàlem-hipòfisi-glàndula diana (Zhang et al., 2019). En la síndrome de deficiència de ronyó-yang, també s'han observat reduccions marcades dels nivells d'AMPc sèric i d'AMPc/GMPc. En aquest estudi, hem trobat que TG(glucòsids totals)podria inhibir els nivells sèrics de CORT, CRF i ACTH i augmentar el contingut sèric de T i GnRH en rates CUMS, cosa que indica la recuperació de la disfunció de l'eix HPA i HPG després de l'administració de TG. A més, TG(glucòsids totals)va revertir una disminució significativa del nivell de cAMP/cGMP sèric en rates sotmeses a CUMS. Així, el possible mecanisme subjacent de la TC(Cistanchetubulosa) en el tractament de la depressió i la deficiència del ronyó-yang poden ser parcialment similars i mereixen ser explorats més a fons. A més, la producció de desigs i comportaments sexuals és un procés reflex neuronal complex. Les hormones sexuals són les principals fonts d'excitació sexual central i la manca d'hormones sexuals pot causar menys desig sexual o disfunció sexual (Holloway i Wylie, 2015). En particular, l'excés de 5-HT inhibeix l'alliberament de GnRH, que és un motiu dominant per a l'aparició de disfunció sexual crònica després d'un tractament a llarg termini amb ISRS (Prasad et al., 2015). En el nostre estudi, la fluoxetina (representant dels ISRS) va ser ineficaç en la disfunció de l'eix HPG. Tanmateix, tot i que TG(glucòsids totals)va millorar significativament el nivell de 5-HT a l'hipocamp, també es van observar alteracions similars en els nivells sèrics de T i GnRH, millorant així la supressió de l'eix HPG. Aquests resultats demostren el distint avantatge de la TC(Cistanchetubulosa) en el tractament de la depressió, i el mecanisme intrínsec responsable d'aquests efectes s'ha d'estudiar més.

L'evidència creixent ha demostrat que l'intestí és un objectiu potencial per al tractament de malalties cròniques mitjançant compostos naturals amb baixa biodisponibilitat (Zhou et al., 2020). Investigacions recents (Wei et al., 2019) han indicat que el tractament amb CUMS indueix alteracions del microbioma fecal i defectes de la barrera intestinal, que faciliten la invasió bacteriana a la mucosa del còlon i exacerben les reaccions inflamatòries al còlon. D'acord amb aquest informe, els nostres resultats van mostrar que 4 setmanes d'exposició a CUMS van induir un extens esgotament del nombre de cèl·lules caliciformes i del gruix de la capa de moc al còlon de la rata, així com l'aparició de la interrupció de la barrera intestinal representada per l'augment de la permeabilitat intestinal, que es va determinar per mesurant la proteïna ZO-1. A més, es va observar un augment de les expressions de factors proinflamatoris (com TNF- i IFN-) al còlon. En conseqüència, aquestes troballes van indicar que, tot i que no es va induir cap dany histològic evident, el tractament amb CUMS va iniciar la inflamació del còlon i la interrupció de la barrera intestinal. Estudis anteriors han informat que la TC va exercir una eficàcia millorada per prevenir la colitis induïda per DSS en ratolins (Jia et al., 2014). Incoherent, TG(glucòsids totals)També es va demostrar que alleujava la inflamació de baix grau al còlon i la interrupció de la barrera intestinal de les rates CUMS, cosa que subratlla el seu potencial per tractar clínicament malalties relacionades amb la inflamació del còlon.

Estudis extensos també han demostrat que la relació que uneix la microbiota intestinal comensal, l'eix HPA i la inflamació és complexa i té un paper crucial en el desenvolupament de la depressió (Misiak, et al., 2020). Les alteracions en la composició de la microbiota intestinal poden contribuir a l'alliberament millorat de citocines i a la síntesi de petites molècules bioactives (Du et al., 2020). Algunes citocines (com el TNF-) poden passar per la barrera hematoencefàlica i són potents activadors de l'eix HPA (Misiak et al., 2020). Al seu torn, la hiperactivació de l'eix HPA pot contribuir a la disbiosi de la microbiota intestinal, la inflamació crònica del còlon i la permeabilitat intestinal alterada (Misiak et al., 2020). D'acord amb estudis anteriors, la modificació de la microbiota intestinal medicada amb TG és probablement responsable dels seus efectes millorants sobre la depressió. Hem observat que TG(glucòsids totals)va revertir l'abundància de tàxons microbians a diferents nivells en rates sotmeses a CUMS a un nivell similar als dels controls. En particular, es va trobar que els principals gèneres alterats pertanyents a la família Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae i Muribaculaceae estaven altament correlacionats amb l'eix HPA i la inflamació. D'acord amb els nostres resultats, s'ha informat que la família Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae i Muribaculaceae tenen un paper important en el manteniment de la integritat de la barrera mucosa i l'aparició d'inflamació (Kankoush, 2015; Borton et al., 2017; Zhang et al., 2020). Per tant, vam conjecturar que TG podria moderar l'abundància d'alguns gèneres assignats a la família Erysipelotrichacea, Peptococcaceae i Muribaculaceae, alleujant posteriorment la inflamació de baix grau al còlon, la hiperactivitat de l'eix HPA i la interrupció de la integritat de la barrera mucosa. Curiosament, en el nostre estudi, només un gènere anomenat ni ank_f{_Muribaculaceae es va correlacionar amb 5-HT i BDNF a l'hipocamp. El mecanisme específic de la relació encara no està clar i cal analitzar-lo més. En cas contrari, les troballes també suggereixen que és extremadament difícil que la majoria dels gèneres alterats causats per TG afectin directament els nivells de 5-HT a l'hipocamp. Per explicar com els canvis en la composició de la microbiota intestinal influeixen en el nivell de 5-HT de l'hipocamp després del tractament amb TG, la relació complexa que connecta el metabolisme del triptòfan, l'eix HPA, les citocines inflamatòries i la 5-HT va captar la nostra atenció. El triptòfan és un aminoàcid essencial per als humans i menys de l'1 per cent s'utilitza en la síntesi de proteïnes, amb la majoria (més del 90 per cent) convertit per IDO1 i triptòfan 2,3-dioxigenasa 2 (TDO2) en quinurenines, i aproximadament. El 5% és impulsat per la triptòfan hidroxilasa per la via de la serotonina (Duan, et al. 2018). El nivell de 5-HT al cervell depèn en gran mesura de la disponibilitat de triptòfan perifèric, atès que el triptòfan es transporta al cervell mitjançant transportadors d'aminoàcids neutres (Duan et al., 2018). IDO1, l'enzim que limita la velocitat en el primer pas de la via de la quinurenina, és induït principalment per IFN- i altres citocines proinflamatòries, com IL-1 i TNF- (Kennedy et al., 2017). que es va demostrar que estaven associats amb la microbiota intestinal al nostre estudi. Tal com s'ha informat, es metabolitza més triptòfan a través de la via de la quinurenina, reduint així de manera competitiva la conversió de triptòfan a 5-HT i enllaçant-se amb la disminució de 5-HT que es troba habitualment en la depressió (O'Mahony et al., 2015). Així, els nivells més baixos de triptòfan i els Kyn/Trp més alts són habituals i coincideixen amb un major risc d'estat d'ànim depressiu. Després de l'administració de TG, es va inhibir la sobreexpressió d'IDO1 al còlon, donant lloc a un augment dels nivells sèrics de triptòfan i una reducció de Kyn/Trp sèric, que va revelar la possible vinculació entre la microbiota intestinal i el nivell 5-HT de l'hipocamp afectat per TG. Mentrestant, el BDNF, un membre de la família de les neurotrofines, és essencial per a la diferenciació cel·lular, la supervivència neuronal, la formació de sinapsis i els processos de neuroplasticitat en la depressió (Greenberg et al., 2009). Estudis recents han demostrat que s'ha trobat que el BDNF està estretament associat amb la funció de barrera de la mucosa intestinal i la microbiota intestinal (Maqsood i Stone, 2016). A més, s'ha informat que els canvis en la microbiota intestinal tenen el potencial d'augmentar els nivells d'expressió de BDNF i, per tant, influir en el desenvolupament de comportaments semblants a la depressió (Du et al., 2020). Tanmateix, de manera similar a la 5-variació de l'HT, va ser extremadament impossible que la majoria dels gèneres alterats causats per TG en el nostre estudi afectessin directament els nivells de BDNF a l'hipocamp, i la connexió i el mecanisme molecular intrínsec necessiten un examen més ampli.

En canvi, HT, un metabòlit de la microbiota intestinal de TG(glucòsids totals), també va mostrar un efecte antidepressiu en el present estudi, que és coherent amb la seva activitat neuroprotectora avantatge (Hu et al., 2014). Preocupant, l'HT també podria moderar les citocines proinflamatòries, les hormones relacionades amb l'eix HPA i HPG i les concentracions de 5-HT de l'hipocamp a un nivell similar al dels controls en rates CUMS, mentre que la majoria dels gèneres microbians alterats afectaven. per HT tenia correlacions febles amb els índexs fisiològics anteriors, cosa que suggereix que la microbiota intestinal podria no ser l'objectiu de l'activitat antidepressiva de la HT. A més, la HT va suprimir la sobreexpressió d'IDO1 a l'hipocamp però no al còlon, acompanyada de l'augment dels nivells sèrics de triptòfan. L'aparició de les diferències aparents entre TG(glucòsids totals)i l'HT pot ser degut a l'excel·lent absorció de l'HT al torrent sanguini i a la capacitat de l'HT per creuar la barrera hematoencefàlica (Robles-Almazan et al., 2018), cosa que també indica que la forta capacitat metabòlica de la microbiota intestinal és especialment important en l'activitat antidepressiva del TG, a més de les seves funcions fisiològiques. Per tant, hem demostrat preliminarment que la interacció bidireccional dels fitoquímics i la microbiota intestinal té un paper crític en el tractament de la depressió amb l'administració de TG (com es mostra a la figura 9).

Conclusió

En resum, TG(glucòsids totals)va ser principalment responsable de l'activitat antidepressiva de la TC(Cistanchetubulosa), reflectint en els efectes sinèrgics dels glicòsids feniletanoides i iridoides sobre la hiperactivació de l'eix HPA, inflamació neuronal i perifèrica severa i deficiències en 5-HT i BDNF a l'hipocamp. A més, el mecanisme molecular potencial de l'efecte antidepressiu del TG(glucòsids totals)es va aconseguir mitjançant la interacció bidireccional dels fitoquímics i la microbiota intestinal. A més, la millora de l'eix HPG suprimit i l'anormalitat dels nucleòtids cíclics per TG(glucòsids totals)i l'HT, que no estaven regulats pel tractament amb ISRS representats per fluoxetina, van indicar el distint avantatge de la TC en el tractament de la depressió. Aquestes modulacions representen una estratègia prometedora per al tractament de la depressió mitjançant TC(Cistanchetubulosa) i herbes medicinals tradicionals similars.

Aportacions de l'autor

XL, YP i LF van dissenyar els experiments i van analitzar les dades. LF i JW van realitzar l'experiment i van analitzar les dades. LF i XL van redactar el manuscrit. PM va contribuir a l'experiment amb animals i a les proves de mostres, i LZ va contribuir a l'anàlisi de la composició de la microbiota intestinal. Totes les dades es van generar internament i no es va utilitzar cap fàbrica de paper. Tots els autors accepten ser responsables de tots els aspectes del treball garantint la integritat i la precisió.

Declaració d'Interès Concurrent

Els autors declaren que no hi ha conflictes d'interessos.

Agraïments

Aquest treball va comptar amb el suport de subvencions del National Key Research and Development Project (2017YFC1702400).

Materials complementaris

El material complementari associat a aquest article es pot trobar, a la versió en línia, a doi:10.1016/j.phymed.2021.153471.

De: 'glucòsids totals de tiges deCistanchetubulosaalleujar els comportaments semblants a la depressió: interacció bidireccional dels fitoquímics i la microbiota intestinal.Li Fan, et al

---Phytomedicine 83 (2021) 153471/ https://doi.org/10.1016/j.phymed.2021.153471