Perfil químic, activitat citotòxica i reducció de l'estrès oxidatiu de diferents extractes de Syringa Vulgaris L. Part 1

Siusplau contactaoscar.xiao@wecstanche.comper a més informació

Resum:Syringa vulgaris L. (lila comú) és una de les espècies ornamentals més populars, però també una prometedora font no estudiada exhaustivament de compostos bioactius amb un important potencial terapèutic. El nostre estudi va ser dissenyat per caracteritzar la composició química i per avaluar les propietats antioxidants i citotòxiques dels extractes etanòlics obtinguts de flors, fulles, escorça i fruits de S.vulgaris L. El perfil químic dels extractes etanòlics es va investigar mitjançant mètodes cromatogràfics (HPLC-DAD-ESI plus, GC-MS) i espectrals (UV-Vis, FT-IR), mentre que l'efecte protector contra els radicals lliures es va avaluar in vitro mitjançant diferents productes químics. assaigs (DPPH, FRAP, CUPRAC). L'activitat citotòxica es va provar en dues línies cel·lulars tumorals, HeLa, B16F10, mitjançant l'assaig MTT. Quantitats significatives de components químics lliures o glicosilats que pertanyen a diverses classes estructurals terapèuticament importants, com els fenilpropanoides (siringina, acetònid, equinacòsid),flavonoides(quercetina, derivats de kaempferol) i secoiridoides (secologanòsid, oleuropeïna, 10-hidroxioleuropeïna, demetiloleuropeïna, siringalactona A, nuzhenide, lingstrosid) es van obtenir per a les flors, fulles i extractes d'escorça, respectivament. A més, les proves MTT van assenyalar un potencial citotòxic significatiu expressat de manera no dependent de la dosi cap a les línies tumorals. Els mètodes realitzats van subratllar que els extractes de S.vulgaris, en particular els pertanyents a flors i fulles, representen valuoses fonts de compostos amb potencial antioxidant i antitumoral.

Paraules clau:Syringa vulgaris L. flors; escorça; fulles; fruita;Polifenols d'oleaceae; secoiridoides; antioxidant; citotòxics

Feu clic aquí per saber-ne més

1. Introducció

Les Oleaceae són una família important entre les plantes amb flor, que comprèn 25 gèneres, amb més de 600 espècies repartides per tot el món en una gran varietat d'hàbitats, especialment en els climes temperats i subtropicals[1,2]. Els gèneres més coneguts pertanyents a aquesta família són Olea, Forsythia, Fraxinus, Syringa, Jasminum i Ligustrum, incloent espècies que tenen importància econòmica, plantes alimentàries i oleaginoses, plantes perfumades o espècies ornamentals [2]Entre aquests gèneres, en la flora europea es poden trobar poques espècies, especialment les que pertanyen als gèneres Fraxinus (p. ex., Fraxinus excelsior L.), Ligustrum (p. ex., Ligustrum vulgare L.), Syringa (p. ex., Syringa vulgaris L.) i Forsythia [1]. El gènere Syringa és un dels més coneguts entre aquests gèneres, s'estén a la part occidental i oriental d'Euràsia i comprèn dues espècies, Syringa vulgaris Land Suringa josikaea I. Jacg.ex Rchb. Les dues espècies es troben distribuïdes de manera diferent pel continent europeu: S.vulgaris es pot trobar a la península balcànica i a la part sud dels Carpats, S. josikaea a la part nord dels Carpats, i ambdues espècies es poden trobar a l'oest. parts del continent [3]. El gènere comprèn més de 40 espècies distribuïdes per Europa i Àsia. La majoria d'aquestes espècies són arbustos i arbres caducifolis [4].

L'espècie S. Vulgaris, el lila comú, és la més estesa d'aquestes dues espècies, sent conreada com a espècie ornamental per tot el continent europeu [1] i per a la indústria de perfums [5]. A més, l'espècie ha conegut diversos usos, sobretot en la medicina tradicional. El medicament més utilitzat està representat per les inflorescències. A Grècia, una infusió de les inflorescències s'utilitza internament per tractar problemes gastrointestinals (inflor) i externament com a massatge per al tractament de la gota i el reumatisme [6]. El mateix ús extern es cita a la medicina tradicional sèrbia per a aquest medicament en combinació amb el fruit d'Aesculus hippocastanum, per al tractament de les varius i el reumatisme [7]. Les flors de l'espècie també es recomanen com a antipirètics i aperitius com a decocció a Bulgària, mentre que la medicina tradicional italiana descriu l'ús d'escorça, fruita i fulles també com a decocció pel seu efecte astringent i antipirètic [8]. Les fulles de l'espècie es recomanen a l'etnofarmacologia hongaresa per al tractament de ferides hemorràgiques, dolors articulars i musculars [9]. Espècies similars pertanyents al mateix gènere (per exemple, S.oblata Lindl., S.pinnatifolia Hemsl., S.reticulata (Blume)H. Hara var. amurensis(Rupr.)ISPringle, S.pubescens Turcz. i S.pubescens subsp. Patula (Palib) MC Chang i XL Chen.) van demostrar tenir usos tradicionals similars. Així, fonts xineses citen l'ús tradicional de tots aquests medicaments vegetals (flors, fulles, escorces), però també d'arrels, branques i fruits, especialment per al tractament de trastorns gastrointestinals, inflamacions articulars, infeccions o asma [5] .

Cistanche pot millorar la immunitat

Les dades científiques de l'espècie donen suport als usos que es citen a la medicina tradicional, relacionant-se amb les propietats antioxidants[10,11], antimicrobianes [12], antiinflamatòries[13,14] i antipirètiques[4,5 i efectes inhibidors. sobre l'estasi de la sang[15]. Es van realitzar estudis sobre espècies similars pertanyents al gènere Syringa, com S.pinnatifolia[12,16], però la gran majoria es van fer amb l'espècie S.vulgaris[1,10,11,13-15]. Els compostos responsables d'aquestes activitats són els sesquiterpens[12], els derivats d'hidroxicinamoil i els secoiridoides o glicòsids secoiridoides[1,13], els compostos fenòlics [10,11,14,15], els lignans [14,16], els fenilpropanoides i els iridoides [1] 14]. Pel que fa als medicaments vegetals que es van provar, estaven representats per flors [10,13,15], escorces [11,14,16, tiges[12], fruites [10], fulles[11] o totes aquestes [1]. No obstant això, la informació sobre aquesta espècie, sobre els seus usos medicinals i sobre els compostos responsables d'aquests usos segueix sent escassa [1]. Tenint tot això en consideració, les espècies del gènere Syringa semblen ser fonts importants de compostos, demostrant al mateix temps usos medicinals importants. Aquestes espècies necessiten més investigacions per aportar més proves per a la seva introducció en la teràpia i per a la investigació dels seus ingredients bioactius i mecanismes d'acció subjacents als efectes farmacològics que presenten, ja que aquestes dades segueixen sent escasses 1,4]. Per tant, la novetat i l'originalitat d'aquest estudi es representen exactament en el seu objectiu principal, que es representa avaluant la composició química i provant les activitats antioxidants i citotòxiques d'extractes pertanyents a diferents parts de l'espècie: flors, fulles, escorça i fruita. . A més, l'estudi pretén realitzar una comparació entre aquests extractes, pel que fa a la seva composició i activitats biològiques, amb l'objectiu final de destacar el potencial de les flors, que poden representar un important medicament medicinal.

el producte que té potencial antiproliferatiu i que es pot utilitzar en la teràpia de diferents formes de càncer.

2. Resultats i discussió

2.1.HPLC-DAD-ESI més Anàlisi

Els resultats obtinguts per a l'anàlisi HPLC-DAD-ESI més de compostos fenòlics es poden trobar a la taula 1.

L'anàlisi realitzada va mostrar clarament diferències significatives pel que fa al nombre de compostos químics en els extractes de S. Vulgaris obtinguts de fulles, escorça, fruites i flors. Quantitats importants de components químics lliures o glicosilats que pertanyen a diverses classes estructurals terapèuticament importants, com ara fenilpropanoides (siringina, acteòsid, equinacòsid), flavonoides (derivats de quercetina i kaempferol), secoiridoides (secologanòsid, oleuropeïna, 10-dehidroxietileuropeïna, deshidroxioleuropeïna). , siringalactona A, nuzhenide, lingstroside) i àcid p-cumaroil-glicòlic. Dotze dels 14 compostos identificats es van detectar i quantificar en tots els extractes provats, mentre que acetònid i oleuropeïna no es van trobar a l'extracte de fruita (taula 1). A més, quantitats significativament elevades de certs compostos identificats, com ara àcid p-cumaroil-glicòlic (6748,16 ug/g), secologanòsid (27.663.00 ug/g), acetònid (9408,78 ug/g), quertino ）-ru (9408,78 ug/g) Es van observar 7642,07 ug/g, dimetil oleuropeïna (35.729,89 ug/g), kaempferol-glucòsid (3814,93 ug/g), nuzhenide (15.893,68 ug/g) en el cas de l'extracte de flors (taula 1). Nuzhenide és un compost secoiridoidic amb una forta activitat antioxidant, similar a l'oleuropeïna i els seus derivats [4,10].

L'extracte d'escorça posseïa la concentració més alta en siringina (74.535,30 ug/g), si-ringalactona A (17.161,82 ug/g), 10-Hidroxi-oleuropeïna (8943,89 ug/g), equinacòsid (38,299,9 g) ligstroside (24.820,71 ug/g), oleuropeïna (9139,07 ug/g), oleuropeïna-aglicona (42.796,39 ug/g) (Taula 1). Aquests resultats van subratllar el contingut ric d'extracte d'escorça en echinacòsid, un glicòsid fenilpropanoide reconegut per propietats immunoestimulants i antioxidants, i la siringina, un glucòsid fenilpropanoide amb propietats immunoestimulants, antioxidants i antidiabètiques [17]. A més, també es va destacar la presència de siringina d'escorça a les altres parts analitzades de la planta (14.653,98 ug/g per a l'extracte de flors, 9245,97 ug/g per a l'extracte de fulles).

En general, l'extracte de flors va revelar el contingut més alt i equilibrat de compostos fenilpropanoides, flavonoides i secoiridoides, mentre que l'extracte de fruita va presentar el contingut més baix d'aquests compostos actius.

Tot i que la literatura no documenta informació detallada sobre el perfil químic dels extractes etanòlics, la composició polifenòlica es va avaluar en el cas d'extractes obtinguts de flors liles [10,15], fruites [1{0] , escorça[11,14] i fulles [11,15,18]. Toth et al. va realitzar l'anàlisi HPLC-DAD-ESI-MS d'extractes metanòlics obtinguts de flors i fruites liles i va indicar 34 compostos, inclosos 18 secoiridoides, set fenilpropanoides, quatre flavonoides i cinc fenols de baix pes molecular. Es va trobar que les flors contenien quantitats significatives de fenilpropanoides (acetònid, 2,48 per cent; equinacòsid, 0,75 per cent) i oleuropeïna (0,95 per cent), mentre que els principals metabòlits secundaris de la fruita es van identificar com a secoiridoides, oleuropeïna (1,09 per cent) i nuzhenid. (0,42 per cent)[10]. Un altre estudi va assenyalar un perfil de metabòlits complex i el potencial antioxidant en el cas dels extractes metanòlics d'escorça i fulles de Syringa vulgaris. Es van identificar un total de 33 compostos (15 secoiridoides, 6 fenilpropanoides, 3 flavonoides, 3 lignans i 6 fenols de baix pes molecular) mitjançant HPLC-DAD-ESI-TOF i HPLC-DAD-ESI-MS/MS. Els principals compostos fenòlics de l'escorça i les fulles estaven representats per siringina (2,52 per cent) i rutina (1,13 per cent) respectivament [11] Filipek et al. van informar de la identificació de 22 compostos: cinc compostos fenòlics simples, quatre lignans, tres feniletanoides, un feniletanoide. esterificat amb un oleòsid i vuit secoiridoides i iridoides. Entre aquests compostos, la siringina, l'acetònid, el nuzhenide, l'echinacòsid, l'oleuropeïna i el ligstroside van ser els més importants [14].

Tenint en compte tot això, el present estudi aporta novetat i originalitat, essent, pel que sabem, l'únic que compara els quatre extractes diferents (obtinguts de flors, fulles, escorça i fruita), informant de grans quantitats de compostos bioactius. en la seva composició i demostrant per tant que les flors representen la font més important de principis actius.

2.2. Espectres IR vibracionals de Syringa Vulgaris L., extractes d'escorça i fruites

L'espectroscòpia infraroja és un mètode analític eficaç i no dirigit que podria detectar de manera no destructiva i rendible la qualitat intrínseca de diferents plantes [19,20]. A partir dels resultats de F-IR, és possible destacar una llista de pics que es poden assignar a una classe bioquímica diferent de compostos, la qual cosa podria conduir a una millor correlació entre l'estructura química i les característiques espectroscòpiques de les plantes [21]. Per tant, aquesta tècnica també proporciona una assignació precisa dels grups funcionals, tipus d'enllaç i conformacions moleculars dins del teixit i les cèl·lules vegetals [20].

Els espectres FTI-IR dels extractes de S. Vulgaris analitzats van mostrar alguns canvis espectrals (Figura 1). A més, tal com es pot observar a les taules 1 i 2, els principals grups funcionals d'echinacòsid (un fenilpropanoide), rutina (un flavonoide) i iridoides es van il·lustrar als espectres FT-IR dels extractes de S.vulgaris. Així, els pics entre 814-816 cm-1,1513-1515 cm{-1 eren característics dels senyals associats als fenilpropanoides d'echinacòsid [21,22]. Dins d'un rang similar, les vibracions d'estirament associades als terpens de C=O havien contribuït a la banda de 1694-1702 cm-I[23]. Es va observar un altre pic associat als terpens en el rang 2901-2909 cm{-1 i va ser causat per la vibració d'estirament de CH [20,23-25]. A més, els pics trobats entre 885-890 cm-I i 2925-2933 cm- es van associar amb la presència de CH, grup funcional, mentre que el pic entre 1256-1268 cm{-1 es podria atribuir a la vibració d'estirament del CO tant del terpen com dels iridoides [23]. Un pic fort en l'interval de 1076-1079 cm-1va ser causat pels iridoides que estiraven la vibració de-C-OH [24-26]. També es va poder confirmar la presència de flavonols en els extractes de S.vulgaris analitzats. Per tant, el pic que es produeix dins del rang 1596-1608 cm-I es podria atribuir a les vibracions d'estirament C{=C de l'estructura tant dels flavonols com dels iridoides [24,26-28). De la mateixa manera, en els espectres FT-IR dels extractes analitzats de S.vulgaris, els flavonols posseeixen COC, C=Cand CH; grups funcionals que mostren pics entre 924-930 cm{-1,1159-1162 cm-I i 1385-1404 cm{-1 respectivament [20,23,27-29]( Taules 2 i 3.

Una altra observació és que les bandes de la regió 1000-1800 cm-1són d'intensitat molt més alta en comparació amb les bandes per sota dels 1000 cm-. A més, a la mateixa regió, es pot observar que algunes bandes es desplacen a un nombre d'ona més baix o superior.

2.3.Quantificació del contingut total de polifenòlics (TPC), flaconoides (TFC) i àcids fenòlics (TPA)

El contingut total de polifenols, flavonoides i àcids fenòlics dels extractes de S.vulgaris provats va mostrar quantitats importants de tots aquests compostos que es podrien corroborar amb els resultats obtinguts per a l'avaluació de les activitats biològiques (Taula 4).

La quantificació de TPC, TFC i TPA s'informa per primera vegada a la literatura científica de l'espècie S.vulgaris, que representa una raó més que sustenta l'originalitat d'aquest estudi i ofereix arguments importants per donar suport a les activitats biològiques que es provat.

2.4. Anàlisi GC-MS

Els resultats obtinguts per a l'anàlisi GC-MS de diferents extractes de S.vulgaris es poden trobar a les taules 5-8.

L'anàlisi GC-MS va permetre identificar els principals compostos volàtils de l'extracte de flors S, Vulgaris que són els dos estereoisòmers dels alcohols liles, l'alcohol lila C i l'alcohol lila D. Juntament amb aquests, altres compostos aromàtics, fenols i àcids, els àcids grassos es poden identificar en la composició de les flors (taula 5).

S'han identificat una vintena de compostos i entre aquests, els que s'han trobat en major quantitat són els alcohols liles i l'alcohol benzílic, amb factors de concordança superiors a 80. També s'han identificat derivats furànics en quantitats elevades, relacionats amb els alcohols liles. Els compostos específics, els alcohols liles, com els alcohols furànics, representaven més del 40 per cent dels compostos identificats. Els dos compostos són dos estereoisòmers diferents amb espectres MS similars (figura 2) que es corresponen amb els de les dades estàndard de PubChem. Tenen un senyal important a m/z de 55 i altres senyals importants a m/z de 67, 93 i 111.

Juntament amb els alcohols liles, un altre compost important que és responsable de l'olor aromàtica de les flors liles és l'alcohol benzílic, que en les elevades quantitats l'1,77 per cent dels compostos identificats són derivats del furà, compostos relacionats amb els alcohols liles.

Un altre compost que es va identificar en quantitat important és el metil eugenol, un compost fenilpropanoides amb una important activitat antioxidant. El percentatge de compostos fenòlics és de l'1,74 per cent i estan representats, a més, metil eugenol, per l'èster de l'àcid p-hidroxicinàmic, també s'han identificat èsters d'àcids grassos i àcids grassos lliures que representa el 4,52 per cent dels compostos identificats.

Per als altres extractes provats, l'anàlisi GC-MS es va realitzar en les mateixes condicions i es van identificar diferents compostos (Taules 6-8). El compost comú identificat en tots aquests extractes és l'àcid n-hexadecanoic, un àcid gras saturat, anomenat també àcid palmític. L'extracte de fruita és ric en àcids grassos, el principal és l'àcid trans-13-octadecanoic. L'extracte de fulles conté derivats de l'àcid benzoic i també fellandrè. L'extracte d'escorça conté carotens: astaxantina i psi-carotè, respectivament, més d'un 12 per cent d'alcohol transsinapílico.

S'informa per primera vegada de l'anàlisi GC-MS d'aquests extractes, que representa una eina important per a la identificació dels principals compostos que es troben en la composició de diferents extractes obtinguts de diferents parts de l'espècie responsables de les activitats biològiques.

Això s'extreu de Molecules 2021, 26, 3104. https://doi.org/10.3390/molecules26113104 https://www.mdpi.com/journal/molecules