Cistanche Tubulosa protegeix les neurones dopaminèrgiques mitjançant la regulació de l'apoptosi i el factor neurotròfic derivat de cèl·lules glials: in vivo i in vitro-Ⅱ

Proves de conducta

Prova de natació (Zhu et al., 2014)

La coordinació del moviment corporal en ratolins es va mesurar mitjançant la prova de natació. Els ratolins es van col·locar individualment en un dipòsit d'aigua (25 cm d'alçada i 10 cm de diàmetre) que contenia 10 cm d'aigua i es van provar en un entorn tranquil per registrar la seva durada estacionària durant 5 minuts.

Prova de camp obert (Kawai et al., 1998)

L'activitat locomotora es va mesurar mitjançant la prova de camp obert. Els ratolins es van provar en un entorn tranquil i poc il·luminat i es van col·locar individualment en un recipient acrílic transparent de 30 cm × 30 cm × 15 cm amb una graella de separació de 6 cm × 6 cm a la part inferior. Els ratolins van rebre 10 minuts per adaptar-se al medi i després es va mesurar la deambulació del nombre de quadrícula i la freqüència de cria de ratolins individuals cinc vegades consecutives per obtenir valors mitjans.

TUBULOSA NATURAL DE CISTANCHE PER A LA MILLORA DE LA FUNCIÓ SEXUAL PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Mostreig de teixit cerebral

Abans del mostreig de teixits, els ratolins van ser alimentats ad libitum amb accés lliure a l'aigua i van rebre intervenció de fàrmacs durant 14 dies consecutius. Es van seleccionar quatre ratolins de cada grup i es van decapitar ràpidament. El SN (Bregma: -2,75 mm -2,92 mm) de cada animal es va aïllar i es va col·locar sobre gel. Els teixits cerebrals es van esbandir amb una solució de clorur de sodi freda amb 0,9% per eliminar la sang i es van assecar sobre paper de filtre abans d'emmagatzemar-los a -80 ◦ C. Quatre ratolins de cada grup van ser anestesiats per via intraperitoneal i els seus pits es van obrir. Després es va inserir una agulla d'infusió al ventricle esquerre de cada animal. Per eliminar la sang del sistema circulatori, es va tallar l'apèndix auricular dret i es va infusionar a l'animal una solució salina normal a 4 ◦ C fins que el fetge es va posar pàl·lid per assegurar la perfusió successiva. Una vegada que l'efluent de l'aurícula dreta va quedar clar, es va perfondre a cada animal amb un fixador de paraformaldehid al 4%. Després de la perfusió, el teixit cerebral de cada animal es va disseccionar amb cura i es va fixar posteriorment en paraformaldehid al 4% durant 24 hores. Els teixits cerebrals fixos es van esbandir sota aigua corrent, es van deshidratar en una sèrie graduada de solucions d'etanol i es van netejar en solució de xile. Això va ser seguit per immersió i incrustació de parafina.

Canvis de la quantitat de DA mesurats per HPLC

El SN nanopols de cada grup es va col·locar en un bany de gel que contenia 0, 9% de solució de clorur de sodi (proporció 1:9). El teixit cerebral es va homogeneïtzar mitjançant un disruptor de cèl·lules ultrasòniques i es va centrifugar a 1200 rpm durant 20 min a 4 ◦ C per obtenir el sobrenedant. Per a HPLC, es va utilitzar una columna Hypersil AA-ODS (2, 1 mm × 200 mm, 5 µm) a una temperatura de columna de 30 ◦ C. La detecció de fluorescència es va realitzar a 280 nm λex i 340 nm λem. El volum d'injecció va ser de 10 µl.

Expressió de TH, GDNF, GFR 1 i Ret detectada per immunohistoquímica

Es van aïllar seccions de parafina (5 µm de gruix) de teixit cerebral individual de cada animal i es van col·locar en un bany d'aigua tèbia a 40◦C per aplanar-se i adherir-se a portaobjectes de vidre. Totes les diapositives de teixit es van incubar en un forn a 60 ◦ C durant 3-6 h, seguit de desparafinat de xilè, deshidratació d'etanol en gradient i recuperació d'antigen incubant en un tampó d'àcid cítric i escalfant-se al microones durant 20 min. A continuació, es van incubar les diapositives de teixit en una solució d'H2O2 al 3% a temperatura ambient durant 10 min. Després de rentar-se tres vegades en PBS, les diapositives de teixit es van incubar amb sèrum normal en una cambra tancada a temperatura ambient durant 20 min. La tinció immunohistoquímica es va realitzar segons les instruccions del fabricant. Es va utilitzar un analitzador d'imatges Motic Med 6.0 per calcular el valor de la densitat òptica integrada a les cèl·lules tacades positivament.

Anàlisi Western Blot en teixits cerebrals de ratolins

Aquest estudi va avaluar l'expressió proteica de la tirosina hidroxilasa (TH), GDNF, GFR 1, Ret, Bcl2 i Bax. El lisat cerebral de cada grup es va homogeneïtzar durant 3{{10}} min en gel, seguit de centrifugació a baixa temperatura, 20, 000 rpm, a 4 ◦C durant 5 min per recollir el sobrenedant. Les mostres de proteïnes es van separar a pressió constant mitjançant un gel SDS-PAGE a l'10% tal com es descriu anteriorment. La concentració d'anticossos primaris: TH 0,15 mg/ml, GDNF 0,5 mg/ml, GFR 1 0,8 mg/ml, Ret 0,63 mg/ml, Bcl{-2 0,34 mg/ml i Bax 0,11 mg/ml. El procediment va ser el mateix que l'anterior.

TUBULOSA NATURAL DE CISTANCHE PER ANTIENVELLIMENT ANTIALZHEIMER PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Anàlisi estadística

Aquest estudi va utilitzar el programari estadístic SPSS 20.0 per al processament i l'anàlisi de dades. Els valors dels paràmetres es van expressar com a mitjana ± desviació estàndard (¯x ± S). Es va utilitzar ANOVA per a l'anàlisi de dades d'un sol factor. Es va utilitzar LSD o la prova de Games-Howell per comparar els grups. P< 0.05 (or P < 0.01) was considered as a statistically significant difference.

RESULTATS

Els components actius de C. tubulosa Nanopowder

En el rang d'exploració de 200 a 400 nm, ECH a C. tubulosa i VER a 330 nm van tenir el pic d'absorció màxim, que va aparèixer en 20 min. L'ICA va tenir pics d'absorció màxims a 270 nm i va aparèixer després de 20 min (figura 1A). Els resultats van mostrar que les mostres negatives no van interferir amb la detecció (figura 1B). Les mostres i el control tenien els mateixos pics cromatogràfics i la mostra negativa no en tenia cap. Això va demostrar que els altres ingredients de la mostra no interferien amb el component que es mesurava. A més, els tres components i els pics adjacents poden arribar a la línia de base de separació i el grau de separació era superior a 1,5.

C. tubulosa Nanopowder MPP reduït+ -Citotoxicitat induïda a les cèl·lules MES23.5

La viabilitat de les cèl·lules MES23.5 es va reduir significativament amb l'augment de les concentracions de MPP +. La figura 2F mostra la citotoxicitat significativa de diferents concentracions de MPP+.

La nanopols de C. tubulosa va reduir la citotoxicitat induïda per MPP+- i va millorar la viabilitat de les cèl·lules MES23.5. La figura 2G mostra que les dosis de nanopols de C. tubulosa de 10 a 250 µg/mL van exercir efectes protectors depenents de la dosi sobre les cèl·lules MES23.5 tractades amb MPP+-.

Efecte citomorfològic de C. tubulosa Nanopowder

Les cèl·lules MES23.5 normals tenien una bona adhesió cel·lular i tenien forma de fus amb límits cel·lulars i sinapsis clars. Les cèl·lules MES23.5 danyades per MPP+-va mostrar una mala adhesió i contracció cel·lular, i moltes es van suspendre als mitjans amb sinapsis contretes. Aquestes cèl·lules estaven agregades, reduïdes i arrodonides amb vacúols a l'interior, i els nuclis es van desintegrar o col·lapsar. La nanopols de C. tubulosa en diferents dosis va millorar la citomorfologia de les cèl·lules MES23.5 en diferents graus millorant l'adhesió cel·lular i la neteja sinàptica del grup vehicle. Les cèl·lules MES23.5 del grup de tractament amb dosis altes de C. tubulosa van mostrar una morfologia similar al grup control normal (figures 2A-E).

Efecte de la nanopols de C. tubulosa sobre l'expressió de TH i l'apoptosi a les cèl·lules

La figura 3 mostra una reducció significativa de l'expressió de la proteïna TH al grup de vehicles. L'expressió de la proteïna TH va augmentar de manera diferent en els grups tractats amb diferents dosis de C. tubulosa. Tanmateix, la prova de LSD va mostrar que no hi havia cap diferència significativa entre els tres grups tractats.

La figura 4 mostra els resultats de l'avaluació de l'apoptosi mitjançant citometria de flux. La taxa d'apoptosi en el grup de vehicles va ser significativament més alta que en els altres grups. Les cèl·lules tractades amb diferents dosis de nanopols de C. tubulosa van mostrar diferents graus de disminució de la taxa d'apoptòtica en comparació amb el grup de vehicles. Les cèl·lules del grup de tractament de C. tubulosa de dosis mitjana i alta van tenir la millora més significativa de la taxa d'apoptòtica en comparació amb els altres grups de tractament de C. tubulosa. La prova de LSD va mostrar que no hi havia cap diferència significativa entre els dos grups tractats, però també una diferència significativa entre el grup de dosis baixes.

Efecte de la nanopols de C. tubulosa sobre l'expressió de proteïnes Bcl2/Bax a les cèl·lules

La figura 5 mostra que l'expressió de la proteïna Bcl2 a les cèl·lules del grup vehicle era significativament menor en comparació amb el grup control normal. En canvi, l'expressió de la proteïna Bax a les cèl·lules del grup vehicle va ser significativament superior a la del grup control normal. Els grups de tractament amb C. tubulosa van mostrar un augment de l'expressió de la proteïna Bcl2 i una disminució de l'expressió de la proteïna Bax a les cèl·lules MES23.5 tractades amb MPP+-. Entre els tres grups tractats, hi va haver diferències significatives en la prova de LSD. Aquests efectes depenien de la dosi.

Proves de conducta

Els resultats de la prova de natació van suggerir que els ratolins del grup de vehicles tenien durades estacionàries relativament llargues, que van augmentar amb el temps. El dia 14, els ratolins del grup de vehicles tenien una durada estacionària significativament més llarga que els ratolins del grup de control normal. La durada estacionària dels ratolins a

la dosi baixaC. tubulosaEl grup de tractament no va ser significativament diferent del dels ratolins del grup de vehicles. Tanmateix, la durada estacionària dels ratolins del grup de tractament amb dosis altes de C. tubulosa va ser significativament menor que la dels ratolins del grup de vehicles.

Els resultats de la prova de camp obert suggereixen que després del dany induït per MPTP als ratolins, els ratolins del grup de vehicles van demostrar una disminució significativa de la seva capacitat per a l'activitat espontània, tal com mostra la freqüència de cria. Després d'un 14-dia d'administració deC. tubulosa nanopols, els ratolins dels grups de tractament de dosis moderades i altes tenien freqüències de cria significativament més altes en comparació amb els ratolins del grup de vehicles (figures 6A, B).

Efecte de la nanopols de C. tubulosa sobre el contingut de DA en ratolins

Els canvis en el contingut de DA del SN es van determinar mitjançant HPLC. Es va trobar que el contingut de DA al cervell del grup de vehicles es va reduir significativament. El contingut de DA al cervell dels ratolins PD del grup de tractament amb dosis baixes de C. tubulosa no va diferir significativament dels ratolins del grup de vehicles. Malgrat això,Tractament de C. tubulosava augmentar els nivells de DA al cervell dels ratolins PD de manera dependent de la dosi. Els cervells dels ratolins PD tractats amb dosis altes de C. tubulosa tenien un contingut de DA significativament més alt que els cervells dels ratolins del grup de vehicles (figura 6C).

Efecte de C. tubulosa Nanopowder sobre l'expressió de TH en ratolins

El nombre de cèl·lules TH positives i el nivell d'expressió de proteïnes TH en el SN dels ratolins PD induïts per MPTP van ser menors en comparació amb els ratolins del grup control. Després del tractament amb C. tubulosa, el nombre de cèl·lules TH positives i el nivell d'expressió de proteïna TH en el SN dels ratolins PD induïts per MPTP van augmentar, amb una diferència significativa entre el grup de tractament amb C. tubulosa a dosis altes i el grup de vehicles. per prova de LSD; i hi va haver diferències significatives entre els tres grups tractats (figura 7).

Efecte de la nanopols de C. tubulosa sobre l'expressió de proteïnes de GDNF i els seus receptors, GFR 1 i Ret en ratolins

L'expressió de proteïnes de GDNF i els seus receptors, GFR 1 i Ret, a les cèl·lules tacades positivament, es va avaluar mitjançant immunohistoquímica. Es va utilitzar l'anàlisi Western blot per avaluar els nivells d'expressió de proteïnes en el SN dels diferents grups de ratolins. Les troballes per als diferents grups van ser similars utilitzant els dos mètodes de detecció. L'expressió de GDNF i les seves proteïnes receptores, GFR 1 i Ret, en cèl·lules tacades positivament en el SN dels ratolins del grup vehicle, va ser significativament menor que en els ratolins del grup control normal. Les diferents dosis de tractament amb C. tubulosa van augmentar el nombre de cèl·lules GDNF-, GFR 1- i Ret positives (figures 8A-S).

L'expressió de proteïnes de GDNF, GFR 1 i Ret en el SN dels ratolins del grup vehicle va ser significativament menor que en els ratolins del grup control. Augment de les concentracions de tractament deC. tubulosa nanopowermillora significativament l'expressió d'aquestes proteïnes. L'expressió de proteïnes de GDNF, GFR 1 i Ret en el SN dels ratolins del grup de tractament amb dosis altes de C. tubulosa va ser significativament més alta que en els ratolins del grup de vehicles (P< 0.01; Figures 8T, U). 

Efecte de la nanopols de C. tubulosa sobre l'expressió de proteïnes de Bcl2/Bax en ratolins

L'expressió de la proteïna Bcl2 es va reduir significativament i l'expressió de la proteïna Bax es va millorar significativament en el SN dels ratolins del grup vehicle (P< 0.01) compared with the mice in the normal control group. High-dose C. tubulosa treatment significantly increased Bcl2 protein expression and significantly reduced Bax protein expression in the brains of the vehicle mice (P < 0.01; Figure 9). LSD test showed there was no significant difference between the middle-dose and high-dose groups but a significant difference between the low-dose group. 

DISCUSSIÓ

PD i apoptosi

La MP és un trastorn neurodegeneratiu. Segons Zhang et al. (2005), la prevalença és del 10,7% en la població xinesa de més de 55 anys i de l'1,67% en la de més de 65 anys. El nombre de pacients amb MP ha augmentat anualment amb l'acceleració de l'envelliment global, la qual cosa suposa una gran càrrega financera per a les famílies dels pacients. i la societat en general. Al cervell, les neurones dopaminèrgiques estan implicades principalment en la síntesi i secreció de DA. Es troben àmpliament distribuïts al sistema nerviós central i localitzats principalment al SN (80%). TH és l'enzim clau limitant la velocitat per a la síntesi de DA. Així, la inhibició de l'activitat de TH redueix la síntesi de DA (Huot i Parent, 2007). Els principals canvis patològics i bioquímics de la MP són l'apoptosi de les neurones dopaminèrgiques al SN, una reducció significativa de la DA nigrostriatal i la formació de cossos de Lewy a les neurones dopaminèrgiques (Dexter i Jenner, 2013). L'etiologia de la MP implica factors genètics associats, factors ambientals i envelliment del sistema nerviós (Allam et al., 2005). La patogènesi de la MP encara no està clara en la medicina moderna. Des de finals de la dècada de 1960, la teràpia de reemplaçament de levodopa s'ha utilitzat amb èxit per tractar la MP i s'ha reconegut com un punt d'inflexió important en el tractament de la MP. Tanmateix, l'aplicació a llarg termini d'aquesta teràpia provoca efectes secundaris i la teràpia no tracta les causes subjacents de la MP (Del Sorbo i Albanese, 2008). Per tant, la recerca activa de nous fàrmacs o mètodes de tractament dirigits a la protecció de les neurones dopaminèrgiques és crucial per tractar la MP.

En estudis anteriors, l'aplicació de l'etiquetatge terminal dUTP mediat per desoxinucleotidil transferasa va indicar que 0, 6%-4, 8% de les neurones dopaminèrgiques en el SN dels pacients amb PD mostraven apoptosi (Mochizuki et al., 1996). La microscòpia electrònica va mostrar característiques apoptòtiques, inclosa la condensació cromàtica i els cossos apoptòtics a les cèl·lules dopaminèrgiques (Anglade et al., 1997). Tompkins et al. (1997) van realitzar una anàlisi ultraestructural d'autòpsies de teixit cerebral de pacients amb PD, AD i malaltia difusa del cos de Lewy (DLBD). Van trobar cossos apoptòtics a la capa densa del SN en pacients amb PD i DLBD, proporcionant proves concloents d'apoptosi neuronal en PD i malalties relacionades. Per tant, la reducció o supressió de l'apoptosi a les neurones dopaminèrgiques és fonamental per al tractament de la MP.

Estudis anteriors van demostrar que MPTP induïa símptomes semblants a la PD. L'MPTP travessa la barrera hematoencefàlica i és metabolitzat per les monoaminooxidases tipus B als astròcits. Posteriorment es converteix en MPP+ tòxic, que s'acumula als mitocondris de les neurones dopaminèrgiques mitjançant la ingesta de proteïnes del transportador DA. Així, genera un excés de radicals lliures d'oxigen que inhibeixen l'activitat del complex I de la cadena respiratòria mitocondrial i la síntesi d'ATP. Aquests esdeveniments promouen encara més la formació de radicals lliures i les reaccions d'estrès oxidatiu i, finalment, condueixen a la degeneració i la mort de les neurones dopaminèrgiques. Per tant, aquest estudi va utilitzar MPP + per establir un vehicle in vitro a les neurones dopaminèrgiques MES23.5 i MPTP per induir un ratolí vehicle per a la verificació mútua. Segons els resultats de l'assaig MTT, MPP+ va reduir significativament la viabilitat de les cèl·lules MES23.5, cosa que suggereix que MPP+ era citotòxica per a les neurones dopaminèrgiques. Els resultats també van demostrar que C. tubulosa va millorar eficaçment l'expressió de proteïnes anti-apoptòtiques i va inhibir l'augment de l'apoptosi induïda per MPP+-.

PD i GDNF

El GDNF és un factor neurotròfic, que va ser aïllat per primera vegada per Lin et al. (1993). Lin et al. (1993) també van demostrar que el GDNF tenia efectes nutricionals específics sobre les neurones dopaminèrgiques del cervell mitjà de les rates. El GDNF, la neurturina (NTN), la persefina (PSP) i l'artemina (ART) constitueixen la família GDNF. Són proteïnes secretores estructuralment similars i relacionades funcionalment (Kotzbauer et al., 1996; Baloh et al., 1998; Milbrandt et al., 1998; Woodbury et al., 1998).

El receptor GDNF consta de dos components. El primer component, GFR, es fixa a la membrana externa del glicosilfosfatidilinositol (GPI) i s'ancora a la superfície de la connexina. El segon component és la proteïna Ret. La investigació ha demostrat que hi ha quatre tipus diferents de GFR: GFR 1, GFR 2, GFR 3 i GFR 4. GFR 1 és un receptor d'alta afinitat del GDNF (Onochie et al., 2000; Chen et al., 2001; Lindahl). et al., 2001). La proteïna ret és un receptor funcional del GDNF. La molècula homodímer de GDNF s'uneix directament a GFR 1 per formar complexos i interacciona amb Ret, donant lloc a la dimerització i l'activació de Ret. A causa de l'autofosforilació de Ret, Ret activa diverses vies comunes de senyalització de TH. En absència de proteïna Ret, el GDNF provoca la fosforilació de proteïnes de MAPK, PI{10}} i PLC-, a més de l'expressió d'ARNm i l'activitat funcional de C-fos a través de la seva proteïna receptora, GFR 1 (He et al., 2008).

Els estudis han demostrat que el GDNF va tenir l'efecte protector més fort sobre les neurones dopaminèrgiques (Rangasamy et al., 2010; Campos et al., 2012). En vehicles que utilitzen MPTP i 6-hidroxidopamina (6-OHDA) per induir danys a les neurones dopaminèrgiques, el GDNF protegeix les neurones dopaminèrgiques reduint l'apoptosi i promovent el creixement axonal per induir la diferenciació de cèl·lules mare (Lucas et al., 2012; Littrell et al., 2013). Lin et al. (1993) van demostrar que el GDNF va promoure específicament la viabilitat, la diferenciació i el creixement axonal de les neurones dopaminèrgiques per promoure la captació de DA a les neurones. L'estudi també va demostrar que el GDNF no només va prevenir la toxicitat aguda, sinó que també va alleujar la toxicitat a llarg termini de MPP+ o 6-OHDA a les neurones dopaminèrgiques, a més de prevenir la mort cel·lular en cèl·lules estressades o danyades (Yu et al., 2010). A més, el GDNF va promoure la proliferació i la diferenciació de cèl·lules mare neuronals cap a les neurones dopaminèrgiques del cervell mitjà (Lindsay, 1995) per rescatar les neurones dopaminèrgiques de la degeneració retrògrada (Hong-Juan et al., 2011).

Els estudis han demostrat que l'expressió de GDNF al SN es va reduir significativament en vehicles animals (Yang et al., 2010). Això suggereix que pot ser un dels mecanismes de patogènesi en rates PD. La injecció de 5-15 µg/d de GDNF al ventricle lateral o l'estriat d'un animal vehicle induït per MPTP durant tres mesos consecutius va promoure la reparació nigrostriatal del sistema dopaminèrgic a l'animal vehicle (Grondin et al., 2002). Els estudis sobre el tractament amb GDNF per a la PD en vehicles animals han demostrat que la injecció intracerebral de GDNF a diferents regions del cervell, com ara el SN, el nucli caudat i el ventricle lateral, millora els trastorns del moviment associats amb models animals de PD, inclosa la disminució de l'activitat motora, la rigidesa muscular i tremolor (Grondin et al., 2002). Tanmateix, el GDNF no pot passar directament a través de la barrera hematoencefàlica. Per tant, la injecció cerebral local de GDNF comporta un risc substancial i dificultats en l'aplicació clínica. Encara s'estan estudiant aplicacions per introduir GDNF exògen mitjançant microesferes d'alliberament controlat, càpsules d'alliberament sostingut i gens virals (Liang et al., 2010; Yang et al., 2010; Qiao et al., 2012). Tenint en compte les limitacions de diverses tècniques per introduir GDNF exògen al cervell, els agents neuroprotectors que promouen l'alliberament de GDNF endogen són importants per a l'aplicació clínica.

PD iC. tubulosaNanopols

La MP és més freqüent en adults de mitjana edat i gent gran. La teoria de la MTC considera que la MP es localitza principalment al cervell i es deu principalment a una deficiència hepàtica i renal, a més d'una insuficiència d'energia vital i sang. Segons aquesta teoria, el tractament de la MP s'hauria de centrar, per tant, a estimular el ronyó i la medul·la òssia.Yang et al. (2010)van utilitzar assaigs clínics aleatoris, doble cec i controlats amb placebo i van trobar que la teràpia combinada amb Madopar i receptes de tonificació renal va alleujar les disfuncions motores dels pacients amb PD. El resultat del tractament va ser millor que una sola teràpia amb Madopar. L'eficàcia del tractament de la monoteràpia de TCM o la prescripció de compostos en PD s'ha confirmat en models animals de PD i aplicacions clíniques. Les aplicacions de TCM per tonificar els ronyons i promoure la circulació sanguínia van reduir la dosi de monoteràpia per a la MP mitjançant Madopar. Alguns estudis han suggerit que la MTC va millorar els símptomes de la MP i va protegir les neurones dopaminèrgiques, que podrien haver estat estretament relacionades amb la promoció de l'expressió endògena de GDNF.Hong-Juan et al., 2011; Qiao et al., 2012).

El compost tonificant renal utilitzat en aquest estudi,C. tubulosananopols, contingutCistanche, Epimedium, iRizoma poligonat. La investigació moderna suggereix que la composició química deCistancheés ECH, que protegeix les neurones dopaminèrgiques a la SN en els ratolins PD induïts per MPTP i inhibeix la reducció de DA i el transportador de DA (Zhao et al., 2010). A més, prevé la 6-reducció de DA induïda per OHDA i protegeix les neurones dopaminèrgiques estriatals (Chen et al., 2007). Epimedium inhibeix l'activació de la caspasa-3 i exerceix funcions neuroprotectores (Liu et al., 2011). Els flavonoides Epimedium afavoreixen eficaçment la proliferació i diferenciació de cèl·lules mare neuronals (Yao et al., 2010).

En aquest estudi,C. tubulosala nanopols va antagonitzar l'augment de MPP+-apoptosi induïda de manera dependent de la dosi. Va millorar significativament l'expressió de TH en elin vitrovehicle i va tenir efectes anti-apoptòtics significatius en les neurones dopaminèrgiques. Els ratolins vehicles induïts per MPTP van mostrar trastorns del comportament i van reduir significativament l'expressió de TH en els teixits del cervell mitjà i els nivells de DA, que són característiques patològiques típiques de la PD. Diferents dosis deC. tubulosala nanopols va escurçar la durada estacionària, va millorar les activitats autònomes, va millorar els trastorns del comportament, els nivells elevats de DA al cervell i l'expressió de TH augmentada als vehicles. Aquests resultats suggereixen queC. tubulosala nanopols va exercir efectes protectors a les neurones dopaminèrgiques, millorant així els trastorns del comportament dels vehicles. Diferents dosis deC. tubulosananopols va augmentar l'expressió de la proteïna GDNF i les seves proteïnes receptores al cervell dels ratolins vehicles. Dosis altesC. tubulosaEl tractament va augmentar significativament l'expressió de Bcl2 i va reduir l'expressió de Bax, cosa que va suggerir queC. tubulosananopolspodria promoure l'expressió i la secreció de GDNF al cervell del ratolí danyat per MPTP. A més, podria exercir efectes neuroprotectors a les neurones dopaminèrgiques i minimitzar l'apoptosi neuronal mitjançant els rols de suport neurotròfic del GDNF.

Aquest estudi ho va demostrarC. tubulosala nanopols va exercir efectes protectors en les neurones dopaminèrgiques en ambduesin vitroien viui augmentar l'expressió de TH per millorar el contingut de DA. També va millorar els trastorns del comportament en els ratolins vehicles induïts per MPTP, va regular l'expressió de proteïnes de GDNF i les seves proteïnes receptores al SN i va tenir efectes antiapoptòtics en els ratolins PD. El mecanisme subjacent als efectes clínics deC. tubulosananopols en PD pot implicar augmentar el contingut de GDNF endògen al cervell i, per tant, reduir el dany a les neurones dopaminèrgiques.

TUBULOSA NATURAL DE CISTANCHE PER A LA MILLORA DE LA FUNCIÓ SEXUAL PHGS75% ECH 30% ACTE 12