Coagulació, receptors activats per proteases i malaltia renal diabètica: lliçons de ratolins amb deficiència d'ENOS

Contacte:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Coagulació, receptors activats per proteases i malaltia renal diabètica: lliçons de ratolins amb deficiència d'eNOS

Yuji Oe,1 Mariko Miyazaki1 i Nobuyuki Takahashi2

1Divisió de Nefrologia, Endocrinologia i Medicina Vascular, Escola de Postgrau de la Universitat de Tohoku

Medicina, Sendai, Miyagi, Japó

2Divisió de Farmacologia Clínica i Terapèutica, Escola de Postgrau de Ciències Farmacèutiques de la Universitat de Tohoku i Facultat de Ciències Farmacèutiques, Sendai, Miyagi, Japó

Se sap que la disfunció endotelial de l'òxid nítric sintasa (eNOS) agreuja la progressió i el pronòstic de la malaltia renal diabètica (DKD). Un dels mecanismes a través dels quals s'aconsegueix això és que els nivells baixos d'eNOS s'associen a la hipercoagulabilitat, que afavoreix la lesió renal. A la cascada de la coagulació extrínseca, el factor tissular (factor III) i els factors de coagulació aigües avall, com el factor actiu X (FXa), agreugen la inflamació mitjançant l'activació dels receptors activats per proteases (PAR). Recentment, s'ha demostrat que la manca o la reducció d'expressió d'eNOS en ratolins diabètics, com a model de DKD avançada, augmenta els nivells de factor del teixit renal i les expressions PAR1 i 2 als seus ronyons. A més, la inhibició farmacèutica o la supressió genètica de factors de coagulació o PAR van millorar la inflamació en DKD en ratolins que no tenien eNOS. En aquesta revisió, resumim la relació entre eNOS, coagulació i PAR i proposem una nova opció terapèutica per al maneig dels pacients amb DKD.

Paraules clau: glomerulosclerosi diabètica; factor Xa; inflamació; factor tisular

Tohoku J. Exp. Med., setembre de 2021, 255 (1), 1-8.

L'extracte de Cistanche pot ajudar molt bé amb la malaltia renal

El nombre de pacients amb malaltia renal diabètica (DKD) està augmentant a tot el món (de Boer et al. 2011; Kainz et al. 2015; Ogurtsova et al. 2017). La DKD és una de les principals causes de mortalitat en pacients amb complicacions diabètics (Afkarian et al. 2013). A més, la DKD és pro-agressiva i és la principal causa de la malaltia renal en fase terminal que requereix teràpia de reemplaçament renal (Gregg et al. 2014; Liyanage et al. 2015). Al Japó, la nefropatia diabètica representa més del 39 per cent dels nous pacients de diàlisi (Nitta et al. 2020). Per tant, es requereix el desenvolupament de noves opcions terapèutiques per gestionar els pacients amb DKD.

Hi ha un interès creixent pel paper del sistema de coagulació en la patogènesi de la DKD. La hipercoagulabilitat està associada a la DKD (Goldberg 2009; Domingueti et al. 2016). Es va demostrar que un nivell elevat de fibrinogen a la sang estava associat amb una taxa de filtració glomerular estimada baixa, una proteïnúria elevada i una lesió histològica greu, i era un predictor de la progressió a la malaltia renal terminal (Dalla Vestra et al. 2005; Pan et al. al 2018; Zhang et al. 2018). Alguns estudis han demostrat una correlació entre el nivell de dímer D, un producte de degradació de la fibrina i la disfunció renal en DKD (Domingueti et al. 2018; Pan et al. 2018). La hipercoagulabilitat en DKD probablement està determinada per múltiples factors. Per exemple, el sistema renina-angiotensina-aldosterona activa el factor tisular (TF, factor III) i augmenta els esdeveniments trombòtics (Dielis et al. 2005). En cas contrari, la hiperglucèmia, la dislipèmia, la inflamació o la disfunció endotelial estan implicades en l'estat protrombòtic sota la patogènesi de la DKD (Goldberg 2009).

La disfunció endotelial està present a la DKD que pro-grau a complicacions microvasculars (Goldberg 2009; Nakagawa et al. 2011). La producció d'òxid nítric sintasa endotelial (eNOS) deteriorada o la reducció de l'activitat d'eNOS (per exemple, la fosforilació d'eNOS deteriorada) és un segell distintiu de la disfunció endotelial en DKD (Nakagawa et al. 2011; Cheng et al. 2012). Hem demostrat que una pèrdua d'expressió d'eNOS estava relacionada amb l'elevació del nivell de TF i l'activitat del sistema de coagulació extrínsec (Li et al. 2010; Wang et al. 2011a), que està estretament associada amb esdeveniments trombòtics en pacients amb ronyó crònic. malalties (Kolachalama et al. 2018).

Les proteases de coagulació, com el factor actiu FVII (FVIIa), el factor actiu (FXa) i la trombina, que estan presents a la cascada de coagulació extrínseca, medien la lesió tissular mitjançant un mecanisme depenent del receptor activat per la proteasa (PAR) (Madhusudhan et al. 2016; Posma et al. 2019). En aquesta revisió, resumim les troballes obtingudes de ratolins diabètics que no tenen eNOS i discutim la relació entre la via de coagulació-PAR, els nivells d'eNOS i la patogènesi de DKD.

Via del factor tissular/receptors activats per proteases

El factor tisular (TF), conegut com a factor III, és una proteïna transmembrana de 47 kDa que interacciona amb el factor VII (FVII) (Grover i Mackman 2018). El complex TF/FVIIa és un activador de la cascada de coagulació extrínseca i catalitza l'activació de FX i FIX. El FXa i el cofactor V activat (FVa) formen un complex protrombòtic que genera trombina. Finalment, la trombina converteix el fibrinogen en fibrina, donant lloc a la formació de trombos (Grover i Mackman 2018). El TF s'expressa tant en cèl·lules musculars llises vasculars com en fibroblasts adventicials. En condicions inflamatòries, la seva expressió s'indueix en cèl·lules endotelials o cèl·lules circulants com els monòcits (Østerud i Bjørklid 2006).

Els receptors activats per proteases (PAR) són membres de la superfamília de receptors acoblats a proteïnes G, que inclou quatre proteïnes PAR (PAR1-4). Els PAR pateixen una escissió per proteases a l'extrem N-terminal i s'activen en unir-se a un nou extrem N-terminal que conté un lligand lligat. Els quatre membres dels PAR (PAR1-4) s'activen per proteases de coagulació específiques: el complex TF i FVIIa activa PAR2, el factor Xa activa tant PAR1 com PAR2 i la trombina activa PAR1, PAR3 i PAR4 (Camerer et al. 2000; Coughlin 2005; Rothmeier i Ruf 2012; Zhao et al. 2014). La relació entre TF, proteases de coagulació i PAR es mostra a la figura 1.

Se sap que els PAR s'expressen àmpliament a les cèl·lules renals i estan implicats en la fisiopatologia de la lesió renal. Tant PAR1 com PAR2 s'expressen en cèl·lules endotelials glomerulars, cèl·lules mesangials i cèl·lules tubulars renals derivades d'humans o de ratolins; PAR2, PAR3 i PAR4 s'expressen en podòcits humans; PAR1, PAR3 i PAR4 s'expressen en podòcits murins (Tanaka et al. 2005; Vesey et al. 2005; Madhusudhan et al. 2012; Dong et al. 2015; Madhusudhan et al. 2016).

Tot i que s'han demostrat els efectes nocius o protectors dels PAR en la lesió renal, l'acumulació de dades suggereix que els PAR agreugen la inflamació estimulant la producció de citocines i quimiocines (Rothmeier i Ruf 2012; Isermann 2017; Posma et al. 2019). D'acord amb aquesta troballa, els agonistes PAR1 i PAR2 promouen l'expressió de mediadors inflamatoris, com la proteïna quimiotàctica 1 de monòcits (MCP1) i l'inhibidor de l'activador del plasminogen-1 (PAI-1) i els profibròtics. molècules en cèl·lules tubulars endotelials, mesangials i renals (Vesey et al. 2005; Vesey et al. 2013; Ellinghaus et al. 2016; Waasdorp et al. 2016; Oe et al. 2019). En estudis in vivo, la manca de PAR1 o la presència d'inhibidors de PAR1 va reduir la inflamació en models de glomerulonefritis crentica o lesió renal obstructiva (Cunningham et al. 2000; Waasdorp et al. 2019; Lok et al. 2020). De la mateixa manera, els efectes terapèutics de la inhibició de PAR2 en lesions renals van anar acompanyats d'una reducció de la inflamació als ronyons (Hayashi et al. 2016; Du et al. 2017; Han et al. 2019; Watanabe et al. 2019).

Polimorfismes endotelials d'òxid nítric sintasa en DKD

L'òxid nítric sintasa endotelial (eNOS) és una de les tres isoformes de NOS i contribueix a la producció de NO a l'endoteli vascular (Walford i Loscalzo 2003). NO produït per eNOS a l'endoteli vascular

Fig. 1. Relació entre factors de coagulació i receptors activats per proteases (PAR).

A la cascada de la coagulació extrínseca, el factor tissular (TF) i el complex FVII actiu (FVIIa) activen el receptor 2 activat per proteasa (PAR2), FX actiu (FXa) activa tant PAR1 com PAR2 i la trombina s'adreça a PAR1, PAR3 i PAR4. La divisió de la seqüència N-terminal de PARs per proteases de coagulació revela una nova seqüència N-terminal que actua com un lligand lligat i promou la inflamació.

té un paper crucial en la regulació de la relaxació vascular, l'antiinflamació i la prevenció de la formació de trombes (Walford i Loscalzo 2003). L'expressió deteriorada d'eNOS s'associa amb el desenvolupament de DKD. Les metaanàlisis realitzades recentment en humans han revelat que G894T (rs1799983), C-786T (rs2070744) i l'intró 4b/4a ​​(rs{869109213) en els gens eNOS (NOS3) estan estretament associats amb el desenvolupament de DKD (Dellamea et al. 2014; Zhang et al. 2015; Dong et al. 2018). D'aquestes variants, el paper del polimorfisme G894T (Glu298Asp) en la funció d'eNOS ha estat ben caracteritzat. La producció reduïda de NO o acumulació de nitrits es va indicar a les cèl·lules CHO transfectades amb 298Asp en comparació amb les amb 298Glu (Noiri et al. 2002). Col·lectivament, aquests resultats indiquen que la producció reduïda de NO per la disfunció d'eNOS és important per a la progressió de la DKD en humans.

Ratolins diabètics que no tenen eNOS com a model de nefropatia diabètica humana

L'establiment de models preclínics fiables semblants a la DKD humana és essencial per a l'estudi de noves opcions terapèutiques. A partir de l'evidència que mostra una associació entre el polimorfisme d'eNOS i la DKD, diversos estudis han demostrat que els models d'eliminació d'eNOS de tipus I i tipus II de DM són alguns dels models d'èxit que imiten la DKD humana (Brosius et al. 2009; Azushima et al. 2018). Es va demostrar que els ratolins diabètics induïts per estreptozotocina sense eNOS desenvolupen albuminúria severa, expansió mesangial, engrossiment de la membrana basal glomerular i hialinosi arteriolar, semblant a la DKD humana (Nakagawa et al. 2007). De la mateixa manera, els ratolins diabètics tipus II (DB/DB) sense eNOS van mostrar una glomeruloesclerosi severa i albuminúria (Zhao et al. 2006).

TF elevat en ratolins diabètics que no tenen eNOS

El NO inhibeix la formació de trombes i l'agregació plaquetària (Walford i Loscalzo 2003). Com que es va observar la formació de trombes glomerulars en ratolins diabètics sense eNOS (Nakagawa et al. 2007), és probable que l'expressió deteriorada d'eNOS s'associa amb l'augment de la coagulació dependent de TF. L'associació entre eNOS i TF en DKD s'ha abordat en els nostres informes anteriors (Li et al. 2010; Wang et al. 2011a; Oe et al. 2016) (Fig. 2).

La reducció o la manca d'expressió d'eNOS augmenta l'activitat renal de TF en ratolins Akita diabètics

Hem caracteritzat l'expressió de TF en ratolins diabètics Akita (Ins2Akita/plus), un model de DM tipus I, amb diversos nivells d'expressió d'eNOS (eNOS plus/plus, eNOS plus/- i eNOS-/-) (Wang et al. 2011a). ). Vam trobar que la gravetat de la DKD es va associar amb una expressió reduïda d'eNOS. L'excreció d'albúmina urinària, la glomerulosclerosi i la reducció de la taxa de filtració glomerular es van agreujar en l'ordre següent: eNOS plus / plus; Ins2Akita/ més < enos="" més="" ;="" ins2akita/="" més="">< enos-/-;="" ins2akita/="" plus="" .="" curiosament,="" l'expressió="" i="" l'activitat="" del="" tf="" renal="" es="" van="" incrementar="" en="" enos="" més="" ;="" ins2akita/="" plus="" i="" enos-/-;="" ratolins="" ins2akita/="" plus="" en="" comparació="" amb="" els="" d'enos="" plus/plus="" ;="" ins2akita/="" més="" ratolins.="" el="" dipòsit="" de="" fibrina="" glomerular="" també="" va="" ser="" notable="" en="" enos="" plus="" ;="" ins2akita/="" plus="" i="" enos-/-="" ;="" ins2akita/="" més="" ratolins.="" a="" més,="" l'expressió="" d'arnm="" de="" tf="" renal="" es="" va="" correlacionar="" amb="" la="" gravetat="" de="" la="" malaltia,="" l'excreció="" d'albúmina="" urinària="" i="" l'expressió="" de="" citocines="" inflamatòries="">

Els anticossos neutralitzants contra la TF milloren la inflamació als ronyons diabètics

eNOS-Knockout Ratolins

Un augment de la coagulació dependent de TF s'associa amb un augment de la inflamació (Witkowski et al. 2016). La inhibició del sistema de coagulació dependent de TF va millorar les malalties inflamatòries, com la sèpsia induïda per LPS (Pawlinski et al. 2010). Per dilucidar el vincle causal entre la inflamació i la TF en DKD, es va examinar l'efecte a curt termini dels anticossos neutralitzadors contra la TF sobre la inflamació dels ronyons diabètics en ratolins amb deficiència d'eNOS (Li et al. 2010). Els resultats van mostrar que l'administració d'anticossos anti-TF va reduir notablement els nivells d'expressió renal de gens relacionats amb la inflamació i la fibrosi com Tnfa, Ccl2, Tgfb i Col4 mRNA en ronyons de ratolí durant quatre dies després de la neutralització de TF.

L'inhibidor de la coagulació FXa millora la lesió renal en ratolins diabètics que no tenen eNOS

La coagulació FXa, situada aigües avall de TF/VIIa, també contribueix a la inflamació a través de les vies dependents de PAR. El seu paper en la DKD s'ha demostrat en diversos models animals. Sumi et al. (2011) van demostrar que fondaparinux, un inhibidor de FXa, va reduir els nivells de proteïnes urinàries, la hipertròfia glomerular i la deposició de fibrina en ratolins DB/DB. El nostre grup va demostrar l'efecte terapèutic de la inhibició de FXa en ratolins DKD que no tenen eNOS (Oe et al. 2016). Edoxaban (50 mg/kg/dia), un inhibidor oral de FXa, es va administrar a eNOS-/-; Ratolins Ins2Akita/ plus durant tres mesos, i els resultats van mostrar una millora de les lesions histològiques, com la proliferació de la matriu mesangial. Els nivells d'expressió dels gens inflamatoris als ronyons es van reduir per edoxaban (taula 1). FXa activa tant PAR1 com PAR2. Per dilucidar el mecanisme de la lesió renal mediada per FXa, vam demostrar que els efectes antiinflamatoris dels inhibidors de FXa són similars als que es troben en ratolins PAR2-/- i ratolins PAR{2-/- amb inhibidors de FXa. . Aquestes troballes van suggerir que probablement FXa va causar inflamació mitjançant un mecanisme depenent de PAR2-en DKD. En canvi, edoxaban no va millorar la lesió glomerular en eNOS plus/plus; Ratolins Ins2Akita/ plus, cosa que suggereix que l'efecte terapèutic de la inhibició de FXa es va associar amb la hipercoagulabilitat depenent d'eNOS en ratolins diabètics tipus I.

Altres factors de coagulació en DKD

Com que la trombina s'adreça a PAR1, que avança en la inflamació vascular (Chen i Dorling 2009), és probable que la trombina agreugi la DKD. Tanmateix, s'han demostrat els papers protectors o nocius de la trombina en la patogènesi de la DKD; s'evita la trombina a dosis baixes (50 pM), mentre que la trombina a dosis altes (20 nM) agreuja l'apoptosi induïda per la glucosa als podòcits (Wang et al. 201lb). Els efectes dels inhibidors de la trombina com el dabigatran en ratolins diabètics que no tenen eNOS s'han d'aclarir en el futur.

El fibrinogen està implicat en diversos estats inflamatoris. Curiosament, la reducció parcial o l'absència de fibrinogen va ser beneficiosa per als models d'isquèmia-reperfusió renal o per a la fibrosi renal obstructiva (Sorensen et al.2011; Craciun et al, 2014). Com que la deposició de fibrina glomerular augmenta en ratolins diabètics que no tenen eNOS (Nakagawa et al. 2007; Li et al. 2010; Wang et al.201la), dilucidar el seu paper en la patogènesi de DKD mereix més investigació.

Taula 1. Efectes de la inhibició del factor tissular (TF), el factor de coagulació Xa (FXa) i la inhibició del receptor activat per proteasa (PAR) en ratolins amb malaltia renal diabètica (DKD) amb expressió d'eNOS reduïda o mancada.

Expressió de PAR1 i PAR2 en ratolins diabètics que no tenen eNOS

L'augment de l'expressió de PAR s'associa amb una lesió renal. Nosaltres i altres hem demostrat que els nivells d'expressió d'ARNm Par1 i/o Par2 van augmentar en models animals amb nefropatia diabètica, lesió renal induïda per adenina, fibrosi renal obstructiva i lesió renal induïda per cisplatí (Chung et al. 2013; Hayashi et al. 2016; Oe et al. 2016; Watanabe et al. 2019). A més, es van augmentar els nivells de proteïna PAR2 glomerular en ratolins DB/DB, un model de DM tipus II (Sumi et al. 2011). Hem demostrat l'associació entre l'expressió PAR i la deficiència d'eNOS en ratolins diabètics (Oe et al. 2016). El nivell d'expressió de l'ARNm Par1 va ser significativament més alt en eNOS-/-; Ins2Akita/ més ratolins que en eNOS−/−; Ratolins Ins2Akita/ plus i no DM. De la mateixa manera, l'expressió de Par2 va ser significativament més alta en eNOS-/-; Ratolins Ins2Akita/ plus que en ratolins no DM. En canvi, els nivells d'ARNm de Par4 no difereixen entre els genotips. La manca d'eNOS agreuja la inflamació en DKD (Wang et al. 2011a). Com que les citocines proinflamatòries augmenten els PAR (Nystedt et al. 1996), una inflamació elevada causada per la manca d'eNOS probablement indueixi l'expressió de Pars renal en DKD. Col·lectivament, els resultats dels nostres estudis van suggerir que els nivells d'expressió de PAR1 i PAR2, de manera similar al cas de la TF, es van incrementar en els ronyons diabètics quan mancava eNOS (Fig. 2).

La supressió de PAR2 va millorar la lesió renal diabètica en ratolins amb eNOS reduït

Nosaltres i altres hem abordat el paper de PAR2 en DKD en estudis anteriors. La supressió de Par2 no va afectar la lesió glomerular en ratolins Akita diabètics de tipus salvatge (Ins2Akita/plus) amb eNOS (Oe et al. 2016). A més, els ratolins diabètics induïts per STZ que no tenien PAR2 van mostrar una albuminúria reduïda en comparació amb els ratolins diabètics de tipus salvatge, però van augmentar l'expansió mesangial (Waasdorp et al. 2017). Col·lectivament, aquests resultats demostren que no hi ha efectes terapèutics lleus o no de la inhibició de PAR2 sobre la lesió renal en els models primerencs i lleus de DKD. En canvi, hem demostrat els efectes de la deficiència de PAR2 sobre la DKD en ratolins Akita diabètics amb una expressió reduïda d'eNOS (eNOS plus /-; Ins2Akita/plus) (Oe et al. 2016). La manca de PAR2 va reduir significativament els nivells d'excreció d'albúmina urinària, l'expansió mesangial i el gruix del GBM. Els nivells d'expressió dels gens proinflamatoris i relacionats amb la fibrosi, inclosos Tnfa, Tgfb i Col4, també es van reduir als ronyons del ratolí. Aquests descobriments suggereixen que PAR2 és patogènic no al principi, sinó en la lesió glomerular diabètica relativament avançada causada per la deficiència d'eNOS (taula 1).

Bloqueig dual de PAR1 i PAR2 en ratolins diabètics amb eNOS reduït

Hem demostrat que PAR1 i PAR2 contribueixen de manera cooperativa a la patogènesi de DKD (Mitsui et al. 2020). En aquest estudi, es van utilitzar ratolins Akita diabètics de tipus I masculins heterozigots per a eNOS (Ins2Akita/plus; eNOS plus /-) com a model de DKD. Aquests ratolins es van tractar amb vehicle, antagonista PAR1 (E5555, 60 mg/kg/dia), antagonista PAR2 (FSLLRY, 3 mg/kg/dia) o E5555 més FSLLRY durant 4 setmanes. L'administració de l'antagonista PAR1 o PAR2 sol va atenuar la lesió glomerular, com l'expansió mesangial i la deposició de col·lagen IV, en comparació amb l'administració del vehicle. Es van observar efectes terapèutics sinèrgics tant de la inhibició de PAR1 com de PAR2, i la relació entre l'albúmina urinària i la creatinina es va reduir significativament quan PAR1 i PAR2 es van bloquejar amb E5555 més FSLLRY en comparació amb l'administració del vehicle. A més, el doble bloqueig de PAR1 i PAR2 per E5555 més FSLLRY va millorar sinèrgicament la lesió histològica, inclosa l'expansió mesangial, la infiltració de macròfags glomerulars i la deposició de col·lagen tipus IV. També es van reduir els nivells d'expressió dels gens relacionats amb la inflamació i la fibrosi als ronyons (taula 1).

Ens vam centrar en els efectes proinflamatoris dels agonistes PAR1 i PAR2 sobre les cèl·lules endotelials humanes (Mitsui et al. 2020). Els resultats van mostrar que l'estimulació amb agonistes PAR1 i PAR2 augmentava sinèrgicament els nivells d'expressió de l'ARNm de MCP1 i PAI1. L'efecte de l'agonista PAR1 va ser bloquejat per un inhibidor de NF-κB, mentre que el de l'agonista PAR2 va ser bloquejat pels inhibidors de NF-kB i MAPK. Col·lectivament, PAR1 i PAR2 contribueixen de manera cooperativa a la inflamació vascular i la DKD a través de diferents vies de senyalització (Fig. 3).

Conclusió

En aquesta revisió, ens vam centrar en la relació entre la via de coagulació proteasa-PAR i la deficiència d'eNOS en ratolins diabètics. La baixa producció d'eNOS està relacionada amb la hipercoagulabilitat i l'augment de la senyalització PAR, que són perjudicials en DKD. Aquestes troballes poden indicar el seu paper patològic en la fase avançada o posterior de la DKD (per exemple, amb insuficiència renal i/o proteinúria massiva). Els inhibidors orals de FXa s'utilitzen àmpliament per prevenir la trombosi (Patel et al. 2011; Robertson et al. 2015). El seu ús en el tractament de la DKD és una opció prometedora. A més, alguns antagonistes de PAR1, inclosos trobaxar i vorapaxar, es poden utilitzar en teràpia antiplaquetària per prevenir la síndrome coronària aguda.

Fig. 3. Funcions diferents de PAR1 i PAR2 en la inflamació vascular i la malaltia renal diabètica (DKD).

A les cèl·lules endotelials humanes, l'agonista PAR1 augmenta l'expressió de quimiocines i citocines mitjançant la via de senyalització NF-κB, mentre que l'agonista PAR2 les augmenta mitjançant les vies de senyalització NF-κB i MAPK. PAR1 i PAR2 causen sinèrgicament inflamació vascular a través de diferents vies en DKD.

(Goto et al. 2010; Tricoci et al. 2012). A més, hi ha un progrés notable en el desenvolupament d'antagonistes de PAR2 (Lim et al. 2013; Cheng et al. 2017; Jiang et al. 2018) i poden ser noves opcions terapèutiques per tractar pacients amb DKD.

Agraïments

Aquest estudi va comptar amb el suport de la Gonryo Medical Foundation. Ens agradaria donar les gràcies a Editage (https://www.editage.com) per l'edició en anglès.

Conflicte d'interessos

Els autors declaren no conflicte d'interessos.

Referències

Afkarian, M., Sachs, MC, Kestenbaum, B., Hirsch, IB, Tuttle, KR, Himmelfarb, J. i de Boer, IH (2013) Malaltia renal i augment del risc de mortalitat en diabetis tipus 2. Melmelada. Soc. Nefrol., 24, 302-308.

Azushima, K., Gurley, SB i Coffman, TM (2018) Modelatge de la nefropatia diabètica en ratolins. Nat. Rev. Nephrol., 14, 48-56.

Brosius, FC, Alpers, CE, Bottinger, EP, Breyer, MD, Coffman, TM, Gurley, SB, Harris, RC, Kakoki, M., Kretzler, M., Leiter, EH, Levi, M., McIndoe, RA , Sharma, K., Smithies, O., Susztak, K., et al. (2009) Models de ratolí de nefropatia diabètica. Melmelada. Soc. Nefrol., 20, 2503-2512.

Camerer, E., Huang, W. i Coughlin, SR (2000) Activació depenent del factor tisular i del factor X del receptor 2 activat per proteasa pel factor VIIa. Proc. Natl. Acad. Ciència. EUA, 97, 5255-5260.

Chen, D. i Dorling, A. (2009) Funcions crítiques de la trombina en la inflamació aguda i crònica. J. Tromb. Haemost., 7 Suppl 1, 122-126.

Cheng, H., Wang, H., Fan, X., Paueksakon, P. i Harris, RC (2012) La millora de l'activitat de l'òxid nítric sintasa endotelial retarda la progressió de la nefropatia diabètica en ratolins DB / DB. Kidney Int., 82, 1176-1183.

Cheng, RKY, Fiez-Vandal, C., Schlenker, O., Edman, K., Aggeler, B., Brown, DG, Brown, GA, Cooke, RM, Dumelin, CE, Doré, AS, Geschwindner, S. , Grebner, C., Hermansson, NO, Jazayeri, A., Johansson, P., et al. (2017) Visió estructural de la modulació al·lostèrica del receptor 2 activat per proteasa. Nature, 545, 112-115.

Chung, H., Ramachandran, R., Hollenberg, MD i Muruve, DA (2013) La transactivació del receptor activat per proteïnases-2 del receptor del factor de creixement epidèrmic i les vies de senyalització del receptor del factor de creixement transformant contribueix a la fibrosi renal. J. Biol. Chem., 288, 37319-37331.

Coughlin, SR (2005) Receptors activats per proteases en hemostàsia, trombosi i biologia vascular. J. Tromb. Haemost., 3, 1800-1814.

Craciun, FL, Ajay, AK, Hoffmann, D., Saikumar, J., Fabian, SL, Bijol, V., Humphreys, BD i Vaidya, VS (2014) L'esgotament farmacològic i genètic del fibrinogen protegeix de la fibrosi renal. Am. J. Physiol. Renal Physiol., 307, F471-484.

Cunningham, MA, Rondeau, E., Chen, X., Coughlin, SR, Holdworth, SR & Tipping, PG (2000) El receptor 1 activat per proteases media la inflamació renal depenent de la trombina i mediada per cèl·lules en la glomerulonefritis crentica. J. Exp. Med., 191, 455-462.

Dalla Vestra, M., Mussap, M., Gallina, P., Bruseghin, M., Cernigoi, AM, Saller, A., Plebani, M. i Fioretto, P. (2005) Marcadors de fase aguda d'inflamació i glomerular estructura en pacients amb diabetis tipus 2. Melmelada. Soc. Nefrol., 16 Suppl 1, S78-82.

de Boer, IH, Rue, TC, Hall, YN, Heagerty, PJ, Weiss, NS i Himmelfarb, J. (2011) Temporal trends in the prevalence of diabetic kidney disease in the United States. JAMA, 305, 2532-2539.

Dellamea, BS, Pinto, LC, Leitão, CB, Santos, KG i Canani, LH (2014) Polimorfismes del gen de l'òxid nítric sintasa endotelial i risc de nefropatia diabètica: una revisió sistemàtica i metaanàlisi. BMC Med. Genet., 15, 9.

Dielis, AW, Smid, M., Spronk, HM, Hamulyak, K., Kroon, AA, ten Cate, H. i de Leeuw, PW (2005) La paradoxa protrombòtica de la hipertensió: paper de la renina-angiotensina i la cal·licreïna. sistemes de kinina. Hipertensió, 46, 1236-1242.

Domingue, CP, Dusse, LM, Carvalho, M., de Sousa, LP, Gomes, KB i Fernandes, AP (2016) Diabetis mellitus: the linkage between oxidative stress, inflammation, hypercoagulability, and vascular complications. J. Complicacions de la diabetis, coagulació, eNOS i DKD 7

30, 738-745.

Domingue, CP, Fóscolo, RB, Dusse, LMS, Reis, JS, Carv- també, MDG, Gomes, KB & Fernandes, AP (2018) Association of different biomarkers of renal function with D-dimer levels in patients with type 1 diabetes mellitus (biomarcadors renals i dímer D en diabetis). Arc. Endocrinol. Metab., 62, 27-33.

Dong, J., Peng, Y., Wang, Y. i Zhang, Y. (2018) Els papers dels polimorfismes del gen de l'òxid nítric sintasa endotelial en la diabetis mellitus i les seves complicacions vasculars associades: una revisió sistemàtica i metaanàlisi. Endocrí, 62, 412-422.

Dong, W., Wang, H., Shahzad, K., Bock, F., Al-Dabet, MM, Ranjan, S., Wolter, J., Kohli, S., Hoffmann, J., Dhople, VM, Zhu, C., Lindquist, JA, Esmon, CT, Gröne, E., Gröne, HJ, et al. (2015) La proteïna C activada millora la lesió renal per isquèmia-reperfusió restringint la micció pública de la proteïna d'unió a la caixa Y-1. Melmelada. Soc. Nefrol., 26, 2789-2799.

Du, C., Zhang, T., Xiao, X., Shi, Y., Duan, H. i Ren, Y. (2017) El receptor activat per proteases-2 promou la inflamació de l'epiteli tubular del ronyó mitjançant la inhibició de l'autofàgia la via de senyalització PI3K/Akt/mTOR. Bioquímica. J., 474, 2733-2747.

Ellinghaus, P., Perzborn, E., Hauenschild, P., Gerdes, C., Heitmeier, S., Visser, M., Summer, H. & Laux, V. (2016) Expression of pro- gens inflamatoris en cèl·lules endotelials humanes: comparació de rivaroxaban i dabigatran. Tromb. Res.,

142, 44-51.

Goldberg, RB (2009) Citocines i marcadors d'inflamació semblants a citocines, disfunció endotelial i coagulació desequilibrada en el desenvolupament de la diabetis i les seves complicacions. J. Clin. Endocrinol. Metab., 94, 3171-3182.

Goto, S., Ogawa, H., Takeuchi, M., Flather, MD i Bhatt, DL; els investigadors J-LANCELOT (Japanese-Leson from Antagonizing the Cellular Effect of Thrombin) (2010) Estudis de fase II doble cec, controlats amb placebo de l'antagonista del receptor 1 activat per proteases E5555 (atopaxar) en pacients japonesos amb síndrome coronària aguda o malaltia de l'artèria coronària d'alt risc. Eur. Heart J., 31 anys, 2601-2613.

Gregg, EW, Williams, DE i Geiss, L. (2014) Canvis en les complicacions relacionades amb la diabetis als Estats Units. N. Anglès. J. Med., 371, 286-287.

Grover, SP i Mackman, N. (2018) Tissue factor: an essential mediator of hemostasis and trigger of thrombosis. Arterioscler. Tromb. Vasc. Biol., 38, 709-725.

Han, Y., Tian, ​​L., Ma, F., Tesch, G., Vesey, DA, Globe, GC, Lohman, RJ, Morais, C., Suen, JY, Fairlie, DP i Nikolic-Paterson, DJ (2019) La inhibició farmacològica del receptor activat per proteasa -2 redueix la formació de mitja lluna en la nefritis sèrica nefrotòxica de rata. Clin. Exp. Pharmacol. Physiol., 46,

456-464.

Hayashi, S., Oe, Y., Fushimi, T., Sato, E., Sato, H., Ito, S. i Takahashi, N. (2016) El receptor 2 activat per proteases agreuja la lesió tubulointersticial renal induïda per adenina en ratolins. Bioquímica. Biofísica. Res. Commun.,483, 547-552.

Isermann, B. (2017) Efectes homeostàtics de la senyalització depenent de la proteasa de la coagulació i dels receptors activats per la proteasa. J. Tromb. Haemost., 15, 1273-1284.

Jiang, Y., Yau, MK, Lim, J., Wu, KC, Xu, W., Suen, JY i Fairlie, DP (2018) Un potent antagonista del receptor 2 activat per proteasa que inhibeix múltiples funcions de senyalització en càncer humà cèl · lules. J. Pharmacol. Exp. Ther., 364, 246-257.

Kainz, A., Hronsky, M., Stel, VS, Jager, KJ, Geroldinger, A., Dunkler, D., Heinze, G., Tripepi, G. i Oberbauer, R. (2015) Predicció de la prevalença de malaltia renal crònica en pacients diabètics als països de la Unió Europea fins al 2025. Nefrol. Marqueu. Trasplantament, 30 Suppl 4, iv113-118.

Kolachalama, VB, Shashar, M., Alousi, F., Shivanna, S., Rijal, K., Belghasem, ME, Walker, J., Matsuura, S., Chang, GH, Gibson, CM, Dember, LM, Francis, JM, Ravid, K. & Chitalia, VC (2018) L'eix del factor tissular-receptor d'hidrocarburs d'aril solut urèmic s'associa amb la trombosi després d'una lesió vascular en humans. Melmelada. Soc. Nefrol., 29, 1063- 1072.

Li, F., Wang, CH, Wang, JG, Thai, T., Boysen, G., Xu, L., Turner, AL, Wolberg, AS, Mackman, N., Maeda, N. i Takahashi, N. (2010) L'expressió elevada del factor de teixit contribueix a l'exacerbació de la nefropatia diabètica en ratolins que no tenen eNOS alimentats amb una dieta alta en greixos. J. Tromb. Haemost., 8, 2122-2132.

Lim, J., Iyer, A., Liu, L., Suen, JY, Lohman, RJ, Seow, V., Yau, MK, Brown, L. i Fairlie, DP (2013) Obesitat induïda per la dieta, inflamació adiposa , i la disfunció metabòlica que es correlaciona amb l'expressió de PAR2 es veu atenuada per l'antagonisme de PAR2. FASEB J., 27, 4757-4767.

Liyanage, T., Ninomiya, T., Jha, V., Neal, B., Patrice, HM, Okpechi, I., Zhao, MH, Lv, J., Garg, AX, Knight, J., Rodgers, A ., Gallagher, M., Kotwal, S., Cass, A. i Perkovic, V. (2015) Accés mundial al tractament per a la malaltia renal en fase terminal: una revisió sistemàtica. Lancet, 385, 1975-1982.

Lok, SWY, Yiu, WH, Li, H., Xue, R., Zou, Y., Li, B., Chan, KW, Chan, LYY, Leung, JCK, Lai, KN i Tang, SCW

(2020) L'antagonista PAR-1 vorapaxar millora la lesió renal i la fibrosi tubulointersticial. Clin. Ciència. (Londres), 134, 2873-2891.

Lv, B., Wang, H., Tang, Y., Fan, Z., Xiao, X. i Chen, F. (2009) La proteïna de la caixa de grup 1 d'alta mobilitat indueix l'expressió del factor tissular a les cèl·lules endotelials vasculars mitjançant l'activació de NF-kappaB i Egr-1. Tromb. Haemost., 102, 352-359.

Madhusudhan, T., Kerlin, BA i Isermann, B. (2016) El paper emergent de les proteases de coagulació en la malaltia renal. Nat. Rev. Nephrol., 12, 94-109.

Madhusudhan, T., Wang, H., Straub, BK, Gröne, E., Zhou, Q., Shahzad, K., Müller-Krebs, S., Schwenger, V., Gerlitz, B., Grinnell, BW, Griffin, JH, Reiser, J., Gröne, HJ, Esmon, CT, Nawroth, PP, et al. (2012) La senyalització citoprotectora de la proteïna C activada requereix un receptor activat per proteasa -3 als podòcits. Sang, 119, 874-883.

Mitsui, S., Oe, Y., Sekimoto, A., Sato, E., Hashizume, Y., Yamakage, S., Kumakura, S., Sato, H., Ito, S. i Takahashi, N. ( 2020) El bloqueig dual dels receptors 1 i 2 activats per proteasa millora additivament la malaltia renal diabètica. Am. J. Physiol. Renal Physiol., 318, F1067-F1073.

Nakagawa, T., Sato, W., Glushakova, O., Heinig, M., Clarke, T., Campbell-Thompson, M., Yuzawa, Y., Atkinson, MA, Johnson, RJ i Croker, B. ( 2007) Els ratolins eliminadors d'òxid nítric sintasa endotelial diabètic desenvolupen nefropatia diabètica avançada. Melmelada. Soc. Nefrol., 18, 539-550.

Nakagawa, T., Tanabe, K., Croker, BP, Johnson, RJ, Grant, MB, Kosugi, T. & Li, Q. (2011) La disfunció endotelial com a contribuent potencial a la nefropatia diabètica. Nat. Rev. Nephrol., 7, 36-44.

Nitta, K., Goto, S., Masakane, I., Hanafusa, N., Taniguchi, M., Hasegawa, T., Nakai, S., Wada, A., Hamano, T., Hoshino, J., Joki, N., Abe, M., Yamamoto, K. i Nakamoto, H.; el Comitè del registre de dades renals de la Societat japonesa de teràpia de diàlisi (2020) Informe anual de dades de diàlisi per al 2018, Registre de dades renals JSDT: mètodes d'enquesta, dades de les instal·lacions, incidència, prevalença i mortalitat. Ren. Substitueix. Ter., 6, 41.

Noiri, E., Satoh, H., Taguchi, J., Brodsky, SV, Nakao, A., Ogawa, Y., Nishijima, S., Yokomizo, T., Tokunaga, K. i Fujita, T. (2002) ) Associació del polimorfisme eNOS Glu298Asp amb malaltia renal en fase terminal. Hipertensió, 40, 535-540.

Nystedt, S., Ramakrishnan, V. i Sundelin, J. (1996) El receptor 2 activat per proteïnases és induït per mediadors inflamatoris en cèl·lules endotelials humanes. Comparació amb el receptor de trombina. J. Biol. Chem., 271, 14910-14915.

Oe, Y., Fushima, T., Sato, E., Sekimoto, A., Kisu, K., Sato, H., Sugawara, J., Ito, S. i Takahashi, N. (2019) Protease-activated el receptor 2 protegeix contra l'inhibidor de VEGF 8 Y. Oe et al. lesió endotelial glomerular i podòcit. Ciència. Rep., 9, 2986.

Oe, Y., Hayashi, S., Fushima, T., Sato, E., Kisu, K., Sato, H., Ito, S. i Takahashi, N. (2016) Factor de coagulació Xa i receptor activat per proteasa 2 com a noves dianes terapèutiques per a la nefropatia diabètica. Arterioscler. Tromb. Vasc. Biol., 36, 1525- 1533.

Ogurtsova, K., da Rocha Fernandes, JD, Huang, Y., Linnenkamp, ​​U., Guariguata, L., Cho, NH, Cavan, D., Shaw, JE i Makaroff, LE (2017) IDF Diabetes Atlas: Global estimacions de la prevalença de diabetis per al 2015 i el 2040. Diabetes Res. Clin. Pràctica, 128, 40-50.

Østerud, B. & Bjørklid, E. (2006) Sources of tissue factor. Semin. Tromb. Hemost., 32, 11-23.

Owens, AP, Passam, FH, Antoniak, S., Marshall, SM, McDaniel, AL, Rudel, L., Williams, JC, Hubbard, BK, Dutton, JA, Wang, J., Tobias, PS, Curtiss, LK , Daugherty, A., Kirchhofer, D., Luyendyk, JP, et al. (2012) La simvastatina inhibeix l'activació de la coagulació depenent del factor del teixit monòcit en ratolins i micos hipercolesterolèmics. J. Clin. Invest., 122, 558-568.

Pan, L., Ye, Y., Wo, M., Bao, D., Zhu, F., Cheng, M., Ni, X. i Fei, X. (2018) Importància clínica dels paràmetres hemostàtics en la predicció per a la diabetis mellitus tipus 2 i la nefropatia diabètica. Dis. Marcadors, 2018, 5214376.

Patel, MR, Mahaffey, KW, Garg, J., Pan, G., Singer, DE, Hacke, W., Breithardt, G., Halperin, JL, Hankey, GJ, Piccini, JP, Becker, RC, Nessel, CC, Paolini, JF, Berkowitz, SD, Fox, KA, et al. (2011) Rivaroxaban versus warfarina en la fibril·lació auricular no valvular. N. Anglès. J. Med.,

365, 883-891. Pawlinski, R., Wang, JG, Owens, AP, Williams, J., Antoniak, S., Tencati, M., Luther, T., Rowley, JW, Low, EN, Weyrich, AS i Mackman, N. ( 2010) El factor de teixit cel·lular hematopoètic i no hematopoètic activa la cascada de coagulació en ratolins endotoxèmics. Sang, 116, 806-814. Posma, JJ, Grover, SP, Hisada, Y., Owens, AP, Antoniak, S., Spronk, HM i Mackman, N. (2019) Roles of coagulation proteases and PARs (Protease-Activated Receptors) in mouse models of inflammatory malalties. Arterioscler. Tromb. Vasc. Biol., 39, 13-24.

Robertson, L., Kesteven, P. i McCaslin, JE (2015) Inhibidors orals directes de la trombina o inhibidors orals del factor Xa per al tractament de la trombosi venosa profunda. Cochrane Database Syst. Rev.,

CD010956.

Rogero, MM i Calder, PC (2018) Obesitat, inflamació, receptor 4 de tipus toll i àcids grassos. Nutrients, 10, 432.

Rothmeier, AS i Ruf, W. (2012) Senyalització del receptor 2 activat per proteases en la inflamació. Semin. Immunopatol. , 34 ,133-149.

Samad, F. i Ruf, W. (2013) Inflamació, obesitat i trombosi. Sang, 122, 3415-3422.

Shrestha, C., Ito, T., Kawahara, K., Shrestha, B., Yamakuchi, M., Hashiguchi, T. i Maruyama, I. (2013) El palmitat d'àcids grassos saturats indueix l'alliberament extracel·lular de la histona H3: a possible base mecanicista per a la inflamació i la trombosi induïdes per la dieta alta en greixos. Bioquímica. Biofísica. Res. Comuni., 437, 573-578. Sörensen, I., Susnik, N., Inhester, T., Degen, JL, Melk, A., Haller,

H. & Schmitt, R. (2011) El fibrinogen, actuant com a mitogen per als fibroblasts tubulointersticials, afavoreix la fibrosi renal. Kidney Int., 80, 1035-1044.

Sumi, A., Yamanaka-Hanada, N., Bai, F., Makino, T., Mizukami, H. i Ono, T. (2011) Roles of coagulation pathway and factor Xa in the progression of diabetic nefropathy in DB/ ratolins DB. Biol. Farmàcia. Bull., 34, 824-830.

Tanaka, M., Arai, H., Liu, N., Nogaki, F., Nomura, K., Kasuno, K., Oida, E., Kita, T. i Ono, T. (2005) Paper of coagulation factor Xa i receptor 2 activat per proteasa en la proliferació de cèl·lules mesangials humanes. Kidney Int., 67, 2123-2133.

Tricoci, P., Huang, Z., Held, C., Moliterno, DJ, Armstrong, PW, Van de Werf, F., White, HD, Aylward, PE, Wallentin, L., Chen, E., Lokhnygina, Y., Pei, J., Leonardi, S., Rorick, TL, Kilian, AM, et al. (2012) Antagonista del receptor de trombina vorapaxar en síndromes coronàries agudes. N. Anglès. J. Med., 366, 20-33.

Vesey, DA, Cheung, CW, Kruger, WA, Poronnik, P., Gobe, G. & Johnson, DW (2005) La trombina estimula respostes proinflamatòries i proliferatives en cultius primaris de cèl·lules del túbul proximal humans. Kidney Int., 67, 1315-1329.

Vesey, DA, Suen, JY, Seow, V., Lohman, RJ, Liu, L., Gobe, GC, Johnson, DW i Fairlie, DP (2013) Respostes inflamatòries induïdes per PAR2-en l'epiteli tubular del ronyó humà cèl · lules. Am. J. Physiol. Renal Physiol., 304, F737-750.

Waasdorp, M., de Rooij, DM, Florquin, S., Duitman, J. & Spek, CA (2019) El receptor activat per proteases-1 contribueix a la lesió renal i la fibrosi intersticial durant la nefropatia obstructiva crònica. J. Cèl·lula. Mol. Med., 23, 1268-1279.

Waasdorp, M., Duitman, J., Florquin, S. i Spek, CA (2016) La deficiència del receptor activat per proteasa -1 protegeix contra la nefropatia diabètica induïda per estreptozotocina en ratolins. Ciència. Rep., 6, 33030.

Waasdorp, M., Duitman, J., Florquin, S., Spek, CA i Spek, AC (2017) Receptor 2 activat per proteases en la nefropatia diabètica: una arma de doble tall. Am. J. Trad. Res., 9, 4512-4520.

Walford, G. i Loscalzo, J. (2003) Òxid nítric en biologia vascular.

J. Tromb. Haemost., 1, 2112-2118.

Wang, CH, Li, F., Hiller, S., Kim, HS, Maeda, N., Smithies, O. i Takahashi, N. (2011a) Una modesta disminució de la NOS endotelial en ratolins comparable a l'associada amb la NOS3 humana variants agreuja la nefropatia diabètica. Proc. Natl. Acad.

Ciència. EUA, 108, 2070-2075.

Wang, H., Madhusudhan, T., He, T., Hummel, B., Schmidt, S., Vinnikov, IA, Shahzad, K., Kashif, M., Muller-Krebs, S., Schwenger, V. , Bierhaus, A., Rudofsky, G., Nawroth, PP i Isermann, B. (2011b) L'activació de la coagulació baixa però sostinguda millora l'apoptosi del podòcit induïda per glucosa: efecte protector del factor V Leiden en la nefropatia diabètica. Sang, 117, 5231-5242.

Watanabe, M., Oe, Y., Sato, E., Sekimoto, A., Sato, H., Ito, S. & Takahashi, N. (2019) El receptor 2 activat per proteasa agreuja la nefrotoxicitat induïda pel cisplatí. Am. J. Physiol. Renal Physiol., 316, F654-F659.

Witkowski, M., Landmesser, U. i Rauch, U. (2016) El factor tissular com a vincle entre la inflamació i la coagulació. Tendències Cardiovasc. Med., 26, 297-303.

Zhang, J., Wang, Y., Zhang, R., Li, H., Han, Q., Wu, Y., Wang, S., Guo, R., Wang, T., Li, L. & Liu, F. (2018) El fibrinogen sèric prediu la ESRD diabètica en pacients amb diabetis mellitus tipus 2. Diabetis Res. Clin. Pràctica, 141, 1-9.

Zhang, Y., Xiao, HQ, Zeng, XT, Zuo, HX i Xu, YC (2015) Associacions entre polimorfismes endotelials d'òxid nítric sintasa i risc de nefropatia diabètica: una metaanàlisi actualitzada. Ren. Fallada, 37, 312-326.

Zhao, HJ, Wang, S., Cheng, H., Zhang, MZ, Takahashi, T., Fogo, AB, Breyer, MD i Harris, RC (2006) La deficiència d'òxid nítric sintasa endotelial produeix nefropatia accelerada en ratolins diabètics. Melmelada. Soc. Nefrol., 17, 2664-2669.

Zhao, P., Metcalf, M. i Bunnett, NW (2014) Senyalització esbiaixada dels receptors activats per proteases. Davant. Endocrinol. (Lausana), 5, 67.