caLlenguatge
Casa / Coneixement / Contingut

Coneixement

L'equinacòsid suprimeix la inhibició i l'apoptosi del creixement induïda per la dexametasona a les cèl·lules osteoblàstiques MC3T3-E1

Mar 11, 2022

Contacte: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Correu electrònic:audrey.hu@wecistanche.com

Resum.

Els glucocorticoides (GC) s'utilitzen àmpliament per tractar malalties cròniques. L'administració prolongada i/o sobredosi de GC té molts efectes secundaris sobre la salut humana, inclosa l'osteoporosi induïda per GC (GIOP). En aquesta investigació, l'objectiu era avaluar la influència queechinacòsid de cistanche(ECH) exerceix sobre les cèl·lules MC3T3-E1 osteoblàstiques murines tractades amb dexametasona. Hem trobat que ECH(echinacòsid de cistanche) (5, 10, 20, and 40 mg/l) inhibited dexamethasone (1,000 nM)-suppressed cell viability as demonstrated by Cell Counting Kit-8 (CCK-8) assay. The dose of 10 mg/l was selected for the following experiments because this dose had a better effect than the dose of 5 mg/l, and the doses >10 mg/l van tenir un efecte similar a aquesta dosi. ECH(echinacòsid de cistanche)(10 mg/l) o pifitrina- (PFT-) (un inhibidor de p53, 20 µM) va suprimir l'apoptosi MC3T3-E1 induïda per dexametasona, tal com il·lustra l'anàlisi de citometria de flux de doble etiquetatge de l'Annexina V/iodur de propidi (PI) . ECH(echinacòsid de cistanche)o el tractament amb PFT també va alleujar l'acció de la dexametasona d'inhibir l'expressió de Bcl-2 així com l'acció de la dexametasona d'estimular l'expressió de p53 i Bax. A més, la sobreexpressió de p53 mediada per lentivirus va revertir els efectes de l'ECH(echinacòsid de cistanche)en cèl·lules MC3T3-E1 tractades amb dexametasona, cosa que suggereix que ECH(echinacòsid de cistanche)efectes antiapoptòtics induïts en osteoblasts tractats amb dexametasona mitjançant una via dependent de l'ap53-. En resum, ECH(echinacòsid de cistanche)té un efecte protector contra l'apoptosi cel·lular osteoblàstica induïda per la dexametasona, cosa que suggereix que l'ECH(echinacòsid de cistanche)pot tenir el potencial d'aplicació clínica en el tractament del GIOP.

cistanche to treat osteoporosis

Cistanche deserticola té molts efectes, feu clic aquí per saber-ne més

Introducció

Glucocorticoides(GC) s'utilitzen amb freqüència per tractar un ampli espectre de malalties cròniques, com ara la inflamació, el càncer i els trastorns autoimmunes (1). Tanmateix, l'administració prolongada i/o sobredosi de GC té molts efectes secundaris, com ara hipertensió, hiperglucèmia, glaucoma, osteonecrosi i osteoporosi (2-4). És evident que l'ús de GC augmenta la pèrdua òssia i el risc de fractura (3-6). Els GC poden induir l'apoptosi dels osteoblasts i perjudicar la funció d'aquestes cèl·lules. Per exemple, la dexametasona, una hormona GC, pot regular l'expressió de p53 a les cèl·lules osteoblàstiques MC3T3-E1, provocant així l'apoptosi cel·lular (7,8). L'apoptosi dels osteoblasts condueix a una disminució de la formació òssia. S'ha introduït l'ús oral de bisfosfonats (alendronat i risedronat) (9,10) per al tractament de l'osteoporosi induïda per GC (GIOP). Tanmateix, les baixes taxes d'adherència limiten l'eficiència dels bisfosfonats orals. Altres medicaments també tenen limitacions com ara l'administració incòmoda [àcid zoledrònic (11)] i el cost elevat [PTH 1-34 (teriparatida) (12,13)]. En conseqüència, hi ha la necessitat de desenvolupar noves opcions de tractament per a GIOP.

Echinacòsid de cistanche (ECH)és un glucòsid feniletanoide aïllat de la medicina tradicional xinesaHerbaCistancs(14). ECH(echinacòsid de cistanche)té efectes protectors sobre el sistema neuronal (15-20), el fetge (21, 22) i el pulmó (23) mitjançant la promoció de la proliferació cel·lular i la inhibició de la resposta inflamatòria, la producció d'espècies reactives d'oxigen (ROS) i l'apoptosi cel·lular. Encara que ECH(echinacòsid de cistanche)també pot promoure la regeneració òssia osteoblàstica i té una activitat antiosteoporòtica extraordinària en els models de rata (24,25), no hi ha registres existents que descriguin els efectes de l'ECH(echinacòsid de cistanche)sobre l'apoptosi de cèl·lules osteoblàstiques induïda per GC. Així, hem investigat la influència que té ECH(echinacòsid de cistanche)exerceix sobre l'apoptosi de cèl·lules osteoblàstiques induïda per dexametasona i va dilucidar el mecanisme preliminar a les cèl·lules MC3T3-E1.


CISTANCHE

Materials i mètodes

Cultiu de cèl · lules. El Banc de cèl·lules de l'Acadèmia Xinesa de Ciències (Xangai, Xina) va proporcionar les cèl·lules osteoblàstiques murines MC3T3-E1. El creixement de les cèl·lules va tenir lloc en un medi essencial mínim (-MEM) (Hyclone; GE Healthcare, Logan, UT, EUA) que contenia un 10% de sèrum fetal boví (FBS; Gibco; Thermo Fisher Scientific, Inc., Grand Island, NY, EUA). ) i penicil·lina/estreptomicina (Beijing Solar Science and Technology Co., Ltd., Beijing, Xina). El manteniment de les cèl·lules es va dur a terme en un entorn amb un 95 per cent d'aire i un 5 per cent de diòxid de carboni a una temperatura de 37 °C.

Elproducciódelentivirussobreexpressant p53. Per crear la construcció d'expressió p53, es va sintetitzar la regió de la seqüència codificant de proteïnes (CDS) del gen p53 murí i es va inserir aEcoRI/BamLlocs de restricció HI del vector d'expressió lentiviral pLVX-puro (Clontech Laboratories, Inc., Palo Alto, CA, EUA) per Genewiz, Inc. (Beijing, Xina). La construcció es va verificar mitjançant la seqüenciació d'ADN. Les cèl·lules 293T (Shanghai GeneChem Co., Ltd., Xangai, Xina) es van transfectar amb una barreja de plasmidis, inclosos plasmidis d'envasament viral i plasmidi d'expressió p53 (pLVX-p53) o plasmidi de control (pLVX) mitjançant Lipofectamine 2000 (Invitrogen: Thermo Fisher). Scientific, Inc., Carlsbad, CA, EUA) segons les instruccions del fabricant. El sobrenedant viral es va recollir a les 48 h després de la transfecció i es va utilitzar per infectar cèl·lules MC3T3-E1. L'avaluació de l'expressió p53 es va realitzar a les 48 h després de la infecció viral.

Quantitativapolimerasacadenareacció(qPCR). Hem utilitzat el reactiu TRIzol (Invitrogen: Thermo Fisher Scientific, Inc.) per separar l'ARN total i les cèl·lules MC3T3-E1, i el kit de síntesi d'ADNc RevertAid™ First Strand (Thermo Fisher Scientific, Inc., Rockford, IL, EUA) segons les instruccions del fabricant per a la transcripció inversa de l'ARN total. El nivell d'ARNm p53 es va detectar mitjançant qPCR al sistema de detecció de seqüències ABI Prism 7300 (Applied Biosystems: Thermo Fisher Scientific, Inc., Foster City, CA, EUA). Els primers eren els següents: 5'-CCC CTGTCATCTTTTGTCCCT-3' i 5'-AGCTGGCAGAAT AGCTTATTGAG-3' per a p53, 5'-CTGCCCAGAACATCA TCC-3' i 5'-CTCAGATGCCTGCTTCAC{{{ 18}}' per a GAPDH.

A continuació, vam avaluar els nivells d'ARNm de p53 mitjançant el 2-Mètode ΔΔCT (26) amb GAPDH com a control intern.

Western blotting. La lisi de cèl·lules MC3T3-E1 va tenir lloc en un tampó d'assaig de radioimmunoprecipitació amb inhibidors de proteases (Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd.) i la centrifugació de lisats va continuar durant 15 min a una temperatura de 4˚C a 9.600 xg. perquè es puguin eliminar les precipitacions. Posteriorment, vam avaluar la quantitat de proteïna amb el kit d'assaig BCA (Thermo Fisher Scientific, Inc.). Es va afegir una quantitat igual de proteïna a una SDS-PAGE del 10 o 15 per cent i es va transferir a una membrana de nitrocel·lulosa (EMD Millipore, Bradford, MA, EUA). Les membranes es van bloquejar amb un 5% de llet desnatada i es van sondar amb anticossos primaris. Després de rentar 3 vegades amb solució salina tamponada amb fosfat (PBS), es va dur a terme la incubació de membranes amb anticossos secundaris conjugats amb peroxidasa de rave picant (1:1,000; núm. cat. A0208; Beyotime Institute of Biotechnology, Xangai, Xina) . Hem realitzat proves de western blotting mitjançant un kit de quimioluminescència millorada (ECL) (EMD Millipore). GAPDH es va utilitzar com a estàndard intern. Les fonts d'anticossos primaris eren les següents: Bax (Sc-493) i Bcl{-2 (Sc{-492) tots dos de Santa Cruz Biotechnology, Inc. (Santa Cruz, CA, EUA); p53 (núm. 2524) i GAPDH (núm. 5174) tots dos de Cell Signaling Technology, Inc. (Danvers, MA, EUA).

Experimental agrupació. Per determinar la dosi adequada de dexametasona, es va realitzar un tractament de cèl·lules MC3T3-E1 amb una sèrie de quantitats de dexametasona (0, 1, 10, 100 i 1,000 nM; Sigma; -Aldrich; Merck KGaA, St. Louis, MO, EUA). A les 48 h després d'incubar les cèl·lules, es van realitzar assajos de Cell Counting Kit-8 (CCK{-8) per detectar la proliferació cel·lular.

Per seleccionar la dosi adequada d'ECH(echinacòsid de cistanche), el tractament de cèl·lules MC3T3-E1 es va dur a terme amb 1,000 nM de dexametasona i diverses dosis d'ECH (0, 2,5, 5, 10, 20 i 40 mg/l; Shanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd., Xangai, Xina). Les cèl·lules cultivades en condicions normals (simulades) es van servir de control. L'assaig CCK-8 es va realitzar després de 48 h de cultiu.

Per a la resta d'experiments, les cèl·lules MC3T3-E1 es van dividir en cinc grups: grup 1 (simulat), les cèl·lules es van cultivar en condicions normals; grup 2, les cèl·lules es van transduir amb lentivirus pLVX; grup 3, cèl·lules cultivades amb 10 mg/l d'ECH(echinacòsid de cistanche); grup 4, cèl·lules amb 20 µM de pifitrina- (PFT-; Selleck Chemicals, Houston, TX, EUA); grup 5, cèl·lules transduïdes amb lentivirus pLVX-p53 i tractades amb 10 mg/l d'ECH(echinacòsid de cistanche). Les cèl·lules dels grups 2-5 es van tractar amb 1,000 nM dexametasona. L'apoptosi cel·lular i l'expressió de proteïnes es van mesurar després de 48 h de cultiu.

Cèl·lulaassaig de proliferació.Hem sembrat cèl·lules MC3T3-E1 en 96-plaques de pous a 3x103cèl·lules/pou i cultivar-les en condicions normals durant la nit. Les cèl·lules es van tractar tal com s'indica. Després de 48 h de cultiu, es va realitzar l'assaig CCK8 (Signalway Antibody LLC, College Park, MD, EUA) segons les instruccions del fabricant. Breument, el medi de cultiu de cada pou es va substituir per 100 µl de solució de CCK-8 al 10% al medi. Després d'incubar les cèl·lules durant 1 h a una temperatura de 37 °C, vam avaluar l'absorbància a una longitud d'ona de 450 nm amb un lector de microplaques. Es va calcular la viabilitat cel·lular relativa (per cent) amb connexions als pous de control.

Cèl·lulaavaluació de l'apoptosi. Hem utilitzat el kit d'apoptosi cel·lular Annexin V-FITC (Beyotime Institute of Biotechnology) per quantificar les cèl·lules que pateixen apoptosi primerenca seguint les instruccions del fabricant. En resum, la recollida de cèl·lules tractades es va dur a terme mitjançant tripsinització. Les cèl·lules es van rentar mitjançant PBS i es van tornar a suspendre amb tampó d'unió a l'annexina. La incubació de les cèl·lules es va dur a terme mitjançant Annexin V-FITC durant 15 minuts a una temperatura de 4 °C seguida d'una incubació amb iodur de propidi (PI) durant 5 minuts a 4 °C. Es va considerar que les cèl·lules del quadrant inferior dret (positiu de l'annexina V-FITC i PI negatiu) estaven sotmesos a una apoptosi primerenca.

Estadísticanàlisi. Les dades són les mitjanes ± SD per als tres experiments independents. La prova de comparacions múltiples de Tukey i l'anàlisi unidireccional de la variància es van realitzar per analitzar les diferències entre grups mitjançant el programari GraphPad Prism (versió 6.0; GraphPad Software, Inc., San Diego, CA, EUA). P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

CISTANCHE

Resultats

Establimentdea dosi adequadadedexametasona.Per determinar la dosi adequada de dexametasona, les cèl·lules MC3T3-E1 es van exposar a quantitats creixents de dexametasona (0, 1, 10, 100 i 1,000 nM) durant 48 h. . Com es mostra a la figura 1, la viabilitat relativa de les cèl·lules es va determinar mitjançant l'assaig de CCK-8 a les cèl·lules tractades amb concentracions baixes de dexametasona (1 i 10 nM) i es va reduir significativament a les cèl·lules exposades a concentracions elevades de dexametasona (100). i 1,000 nM).

Establishment of the suitable dose of DEX. Concentrations of 0, 1, 10, 100 or 1,000 nM of DEX were added to MC3T3-E1 cells for 48 h, and CCK-8 was then performed

La reducció més significativa es va observar a les cèl·lules amb 1,000 nM de dexametasona. Així, es va seleccionar 1,000 nM de dexametasona en els assaigs posteriors.

Efecte de l'ECH(echinacòsid de cistanche)sobre la inhibició del creixement cel·lular induïda per la dexametasona. Després vam explorar l'efecte de l'ECH(echinacòsid de cistanche)sobre la inhibició del creixement cel·lular induïda per la dexametasona. El tractament de les cèl·lules MC3T3-E1 es va dur a terme amb 1,000 nM de dexametasona i diverses dosis d'ECH(echinacòsid de cistanche)(0, 2,5, 5, 10, 20 i 40 mg/l; Fig. 2). A les 48 h posteriors al tractament, l'addició d'ECH(echinacòsid de cistanche)a dosis de 5, 10, 20 i 40 mg/l van disminuir notablement el dany cel·lular induït per la dexametasona. ECH(echinacòsid de cistanche)a una dosi de 10 mg/l té un efecte més evident que a una dosi de 5 mg/l. La viabilitat cel·lular va ser similar a les cèl·lules tractades amb 10, 20 i 40 mg/l d'ECH(echinacòsid de cistanche). Per tant, 10 mg/l d'ECH(echinacòsid de cistanche)s'ha utilitzat en els experiments següents.

Sobreexpressió de p53 mitjançant la construcció de lentivirus. La dexametha sona pot augmentar la p53, induint així l'apoptosi dels osteoblasts (8). Estudiar els efectes de l'ECH(echinacòsid de cistanche) on dexamethasone-induced p53 expression, we constructed a lentivirus encoding p53 (pLVX-p53) and transduced the virus into MC3T3-E1 cells. The expression of p53 was analyzed at 48 h after transduction. Fig. 3 shows that p53 mRNA and protein levels were increased to >2 vegades en cèl·lules transduïdes pLVX-p53-en comparació amb cèl·lules amb virus control (pLVX). p53 va estar implicat en l'efecte de ECH (echinacòsid de cistanche) sobre l'apoptosi induïda per la dexametasona. Les cèl·lules MC3T3-E1 es van tractar amb Plavix o pLVX-p53, 10 mg/l d'ECH(echinacòsid de cistanche), 20 µM de PFT- (un inhibidor de p53) i 1,000 nM de dexametasona, i després es va mesurar l'apoptosi cel·lular mitjançant el kit d'apoptosi Annexin V-FITC. Tal com es mostra a la figura 4A, el tractament amb dexametasona va induir notablement l'apoptosi cel·lular en comparació amb les cèl·lules cultivades en condicions normals (simulat). ECH(echinacòsid de cistanche) i el tractament amb PFT va protegir significativament les cèl·lules MC3T3-E1 contra l'apoptosi induïda per la dexametasona. A més, la sobreexpressió de p53 va revertir els efectes protectors de l'ECH (echinacòsid de cistanche).

Se sap que Bcl-2 i Bax, com a reguladors importants de l'apoptosi, estan regulats per p53 (27). Western blotting va indicar que els canvis en l'expressió de la proteïna p53 i Bax eren coherents amb les alteracions de l'apoptosi cel·lular, mentre que l'expressió Bcl-2 va canviar en sentit contrari (Fig. 4B i C). En particular, els nivells de proteïnes de p53 van ser suprimits significativament per ECH(echinacòsid de cistanche)i tractament amb PFT en cèl·lules que sobreexpressen p53 i tractades amb dexametasona (Fig. 4C). Aquestes dades suggereixen que ECH(echinacòsid de cistanche)podria exercir efectes protectors sobre l'apoptosi induïda per la dexametasona mitjançant la inhibició de l'expressió p53.

15_1

Efectes de cistanche echinacoside

Discussió

La funció anti-apoptosi de l'ECH(echinacòsid de cistanche)s'ha descrit en el model de lesió hepàtica aguda induïda per D-galactosamina (D-GalN) i lipopolisacàrid (LPS) i en cèl·lules de neuroblastoma humà (SH-SY5Y) induïdes pel factor de necrosi tumoral o 1-metil{{6 }}fenilpiridiniió (MPP més ) (17,22,28). S'ha informat que el tractament amb dexametasona pot inhibir la proliferació i induir l'apoptosi de cèl·lules MC3T3-E1 (8,29). En l'estudi actual, la viabilitat cel·lular relativa es va reduir significativament a les cèl·lules exposades a altes concentracions de dexametasona (100 i 1,000 nM), cosa que era coherent amb un estudi anterior (8). El tractament addicional amb ECH (5-40 mg/l) va inhibir notablement la viabilitat cel·lular suprimida per la dexametasona. A més, l'exposició a la dexametasona (1,000 nM) va estimular l'apoptosi de les cèl·lules MC3T{3-E1, que el tractament amb ECH va restringir en gran mesura. L'informe va oferir una primera descripció de com es protegeix l'ECH contra l'apoptosi de cèl·lules osteoblasts induïda per dexametasona i va suggerir que l'ECH pot tenir el potencial d'aplicació clínica en GIOP.

A més, vam intentar explorar el mecanisme preliminar dels efectes protectors de l'ECH(echinacòsid de cistanche). La dexametasona pot millorar la transcripció de p53, induint així l'apoptosi dels osteoblasts i l'aturada del cicle cel·lular (8). p53 està regulat a la baixa per ECH a les cèl·lules SH-SY5Y (28). Aquí, PFT- (un inhibidor de p53) va tenir efectes protectors similars a l'ECH, mentre que la sobreexpressió de p53 va revertir els efectes protectors de l'ECH. Els canvis de l'expressió de la proteïna p53 en diferents condicions estaven d'acord amb les alteracions de l'apoptosi cel·lular. Aquests resultats indiquen que l'ECH podria exercir efectes protectors sobre l'apoptosi de cèl·lules osteoblàstiques induïda per dexametasona mitjançant la inhibició de l'expressió p53. Les proteïnes de la família Bcl-2, com ara Bcl{-2 i Bax, poden alterar la permeabilitat de la membrana mitocondrial, activar caspases efectores i provocar apoptosi cel·lular (30). És ben conegut que p53 pot regular Bcl-2 i Bax (27). Aquí, tractament amb PFT- o ECH(echinacòsid de cistanche) va atenuar els efectes inhibidors de la dexametasona sobre els nivells de proteïna anti-apoptosi Bcl-2, així com els efectes estimulants que té la dexametasona sobre els nivells de proteïna pro-apoptosi Bax, mentre que la sobreexpressió de p53 va revertir els efectes de l'ECH. Aquests resultats van demostrar encara més la implicació de p53 en la funció protectora de l'ECH.

En resum, vam demostrar que ECH(echinacòsid de cistanche)té un efecte protector prometedor sobre l'apoptosi de cèl·lules osteoblàstiques induïda per la dexametasona, cosa que suggereix que l'ECH pot tenir el potencial d'aplicació clínica en el tractament de GIOP.

effects of echinacoside from cistanche

Efectes de l'echinacòsid del cistanche

Referències

  1. Buttgereit F, Burmester GR i Lipworth BJ: teràpia amb glucocorticoides optimitzada: l'afilat d'una llança antiga. Lancet 365: 801-803, 2005.

  2. Schäcke H, Döcke WD i Asadullah K: Mecanismes implicats en els efectes secundaris dels glucocorticoides. Pharmacol Ther 96: 23-43, 2002.

  3. Fukushima W, Fujioka M, Kubo T, Tamakoshi A, Nagai M i Hirota Y: Enquesta epidemiològica a nivell nacional de l'osteonecrosi idiopàtica del cap femoral. Clin Orthop Relat Res 468: 2715-2724, 2010.

  4. Civitelli R i Ziambaras K: Epidemiologia de l'osteoporosi induïda per glucocorti-fred. J Endocrinol Invest 31 (Suppl): 2-6, 2008.

  5. Gudbjornsson B, Juliusson UI i Gudjonsson FV: Prevalència del tractament amb esteroides a llarg termini i la freqüència de presa de decisions per prevenir l'osteoporosi induïda per esteroides a la pràctica clínica diària. Ann Rheum Dis 61: 32-36, 2002.

  6. van Staa TP, Geusens P, Pols HA, de Laet C, Leufkens HG i Cooper C: una puntuació senzilla per estimar el risc de fractura a llarg termini en pacients que utilitzen glucocorticoides orals. QJM 98: 191-198, 2005.

  7. Rickard DJ, Sullivan TA, Shenker BJ, Leboy PS i Kazhdan I: inducció de la diferenciació ràpida dels osteoblasts en cultius de cèl·lules estromals de medul·la òssia de rata mitjançant dexametasona i BMP-2. Dev Biol 161: 218-228, 1994.

  8. Li H, Qian W, Weng X, Wu Z, Li H, Zhuang Q, Feng B i Bian Y: el receptor de glucocorticoides i l'activació seqüencial de P53 per dexametasona medien l'apoptosi i l'aturada del cicle cel·lular de les cèl·lules MC3T3-E1 osteoblàstiques. PLoS One 7: e37030, 2012.

  9. Stoch SA, Saag KG, Greenwald M, Sebba AI, Cohen S, Verbruggen N, Giezek H, West J i Schnitzer TJ: alendronat oral una vegada a la setmana 70 mg en pacients amb pèrdua òssia induïda per glucocorticoides: A 12- assaig clínic aleatoritzat i controlat amb placebo d'un mes. J Rheumatol 36: 1705-1714, 2009.

  10. Wallach S, Cohen S, Reid DM, Hughes RA, Hosking DJ, Laan RF, Doherty SM, Maricic M, Rosen C, Brown J, et al: Efectes del tractament amb risedronat sobre la densitat òssia i la fractura vertebral en pacients amb teràpia amb corticoides. Calcif Tissue Int 67: 277-285, 2000.

  11. Reid DM, Devogelaer JP, Saag K, Roux C, Lau CS, Reginster JY, Papanastasiou P, Ferreira A, Hartl F, Fashola T, et al; Investigadors d'HORIZON: àcid zoledrònic i risedronat en la prevenció i tractament de l'osteoporosi induïda per glucocorticoides (HORIZON): un assaig controlat aleatoritzat, doble cec, doble i multicèntric. Lancet 373: 1253-1263, 2009.

  12. Langdale BL, Rajzbaum G, Jakob F, Karras D, Ljunggren O, Lems WF, Fahrleitner-Pammer A, Walsh JB, Barker C, Kutahov A, et al: Reducció de la taxa de fractura i dolor d'esquena i augment de la qualitat de vida en dones postmenopàusiques tractats amb teriparatida: 18-dades mensuals de l'Estudi observacional europeu Forster (EFOS). Calcif Tissue Int 85: 484-493, 2009.

  13. Saag KG, Zanchetta JR, Devogelaer JP, Adler RA, Eastell R, Vegeu K, Krege JH, Krohn K i Warner MR: Efectes de la teriparatida versus l'alendronat per al tractament de l'osteoporosi induïda per glucocorticoides: resultats de trenta-sis mesos d'una aleatoria, assaig controlat, doble cec. Artritis Rheum 60: 3346-3355, 2009.

  14. Jia Y, Guan Q, Guo Y i Du C: l'equinacòsid estimula la proliferació cel·lular i prevé l'apoptosi cel·lular a les cèl·lules MODE-K epitelials intestinals mitjançant la regulació de l'expressió del factor de creixement transformador- 1. J Pharmacol Sci 118: 99-108, 2012.

  15. Kuang R, Sun Y, Yuan W, Lei L i Zheng X: efectes protectors de l'equinacòsid, un dels glicòsids feniletanoides, sobre la citotoxicitat induïda per H (2) O (2) a les cèl·lules PC12. Planta Med 75: 1499-1504, 2009.

  16. Kuang R, Sun Y i Zheng X: supressió de l'òxid nítric implicat en l'efecte protector de l'echinacòsid sobre la lesió cel·lular PC12 induïda per H2O2-. Nat Prod Commun 5: 571-574, 2010.

  17. Deng M, Zhao JY, Tu PF, Jiang Y, Li ZB i Wang YH: Echinacoside rescata les cèl·lules neuronals SHSY5Y de l'apoptosi induïda per TNFalfa. Eur J Pharmacol 505: 11-18, 2004.

  18. Geng X, Tian X, Tu P i Pu X: efectes neuroprotectors de l'equinacòsid en el model MPTP del ratolí de la malaltia de Parkinson. Eur J Pharmacol 564: 66-74, 2007.

  19. Zhao Q, Gao J, Li W i Cai D: efectes neurotròfics i de neurorescat de l'echinacòsid en el model de ratolí MPTP subagut de la malaltia de Parkinson. Brain Res 1346: 224-236, 2010.

  20. Zhu M, Lu C i Li W: l'exposició transitòria a l'equinacòsid és suficient per activar la senyalització de Trk i protegir les cèl·lules neuronals de la rotenona. J Neurochem 124: 571-580, 2013.

  21. Wu Y, Li L, Wen T i Li YQ: efectes protectors de l'equinacòsid sobre l'hepatotoxicitat induïda per tetraclorur de carboni en rates. Toxicologia 232: 50-56, 2007.

  22. Li X, Gou C, Yang H, Qiu J, Gu T i Wen T: l'equinacòsid millora la D-galactosamina més la lesió hepàtica aguda induïda per lipopolisacàrids en ratolins mitjançant la inhibició de l'apoptosi i la inflamació. Scand J Gastroenterol 49: 993-1000, 2014.

  23. Zhang Y, Xing J, Ai T, Wen T, Guan L i Zhao J: protecció de l'echinacòsid contra la lesió pulmonar aguda causada per l'àcid oleic en rates. Free Radic Res 41: 798-805, 2007.


Potser també t'agrada