Efectes preventius de feniletanol glicòsids de Cistanche Tubulosa en la fibrosi hepàtica induïda per al sèrum boví en rates
Mar 06, 2022
Contacte: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Correu electrònic:audrey.hu@wecistanche.com
NF-κB p65 i l'expressió de col·lagen I després de la intervenció de fàrmacs en cèl·lules HSC-T6 Per tal de caracteritzar els senyals de fibrosi hepàtica, es van determinar dos gens reguladors clau en el fetge mitjançant assaig RT-PCR. Les dades van mostrar que les cèl·lules tHSC-T6 del grup de control tenien nivells més baixos de NF- κB i ARNm de col·lagen tipus I. Per contra, les cèl·lules HSC-T6 induïdes per TGF-β1 per regular notablement NF-κB (P< 0.01)="" and="" col-i="" (p="">< 0.01)="" mrna,="" with="" levels="" higher="" than="" those="" in="" the="" control="" group.="" in="" the="" presence="" of="" different="" concentrations="" of="">glicòsid fenil·lanoides del cistanche) , els resultats de NF-κB p65 [P NF-κB = 0,001 per 100 ug/ml, P NF-κB = 0,002 per 75 ug/ml, P NF-κB = 0,007 per 50 ug/ ml, i P NF-κB = 0,012 per 25 ug /ml, respectivament] i Col-I [P Col-I = 0,006, P Col-I = 0,009, P Col-I = 0,014, P Col-I = 0,019, respectivament] mostraven expressions reduïdes d'aquests ARNm (Fig. 7).
L'anàlisi de blot occidental del nivell de col·lagen I després de la intervenció de fàrmacs en cèl·lules HSC-T6 Figura 8 mostra els nivells d'expressió de la proteïna I de col·lagen en cèl·lules HSC-T6 dels diferents grups experimentals. El nivell d'expressió de la proteïna I de col·lagen I es va reduir significativament en els diversos grups de dosis de CPhG(glicòsid fenil·lanoides del cistanche)(100 ug /ml, 75 ug/ml, 50 ug/ml i 25 ug/ml) en comparació amb el grup TGF-β1
Discussió
CPhG(glicòsid fenil·lanoides del cistanche)És un glicosíid fenitohanoide aïllat i purificat del rizoma de Cistanche, que s'utilitza com a medicina herbaria tradicional xinesa. En els últims anys, s'havia demostrat que els CPhG tenien una poderosa capacitat per prevenir lesions hepàtiques. Per tant, el seu objectiu era investigar si els CPhG tenen efectes inhibidors sobre la fibrosi de l'hepatitis per fibrosi hepàtica induïda per BSA en rates. El BJRG s'utilitza comunament com a fàrmac terapèutic per a la fibrosi hepàtica a la Xina. Està fet de closca de tortuga. Radix Paeonia rubra, Cordyceps Sinensis, Radix isatidis, etc. tenen els efectes de reposar Qi i sang, alleujar la fatiga, suavitzar els nodes. A més, estudis previs mostren que té la funció òbvia de bloquejar la fibrosi hepàtica primerenca, inhibir la proliferació de cèl·lules que emmagatzemen greix i reduir la síntesi de col·lagen. Per tant, BJRG es va utilitzar com a fàrmac positiu en aquest estudi.
Els canvis patològics de la fibrosi hepàtica en rates induïdes per injeccions de BSA són similars als de la cirrosi portal humana. CPhG(glicòsid fenil·lanoides del cistanche)la dosi dependent va alleujar el grau de fibrosi hepàtica i va inhibir la transformació de HSC en cèl·lules similars al miofibroblast, va reduir els nivells elevats de sèrum ALT, AST, HA, LN, CIV, TGF-β1 i l'índex hepàtic, i va suprimir notablement l'expressió de col·lagen I, col·lagen III i TGF-β1 en el teixit hepàtic. Les etapes de la fibrosi hepàtica estan correlacionades amb els nivells sèrics d'HA, LN i IV-C, que com a marcadors poden tenir un paper en la detecció del grau de fibrosi hepàtica. S'ha informat que l'HA és el principal recurs de la matriu extracel·lular. IV-C com a element essencial de la membrana basal se sintetitzarà abundantment i es dipositarà fortament en les fases anteriors de la cirrosi hepàtica. Els nivells sèrics de LN i IV-C són els índexs de la taxa de rotació de la membrana basal i mostren el grau de fibrosi a l'àrea del portal i els capil·lars sinusoïdals[ 24]. El PC III és un marcador en el diagnòstic de la fibrosi hepàtica i la cirrosi primerenca, però la seva sensibilitat i especificitat no són elevades, i no hi ha diferències significatives entre les diverses etapes de la fibrosi en moltes referències[24, 25].
Aquest estudi va obtenir un resultat similar. A més, les observacions de la secció tricromàtica de l'H&E i Masson presenten teixits hepàtics normals amb diferents lòbuls hepàtics i sinusoides hepàtics. L'estructura del teixit hepàtic en el grup model estava desordenada, i el teixit hepàtic i el sinusoide hepàtic van ser substituïts per una gran quantitat de teixit connectiu. No obstant això, es va observar una millora significativa en els grups de tractament en comparació amb el grup model. És important destacar que l'expressió de col·lagen tipus I i col·lagen tipus III juguen un paper essencial en el desenvolupament de la fibrosi hepàtica, el bloqueig de la qual pot prevenir i tractar la fibrosi hepàtica. Per tant, la generació i deposició en el teixit hepàtic del col·lagen tipus I i col·lagen tipus III podria servir com un important determinant de l'eficàcia de la fibrosi anti-hepàtica. TGF-β1 també és una citocina profibrogènica important en la lesió hepàtica i és biològicament activa amb múltiples accions farmacològiques. Es requereix un equilibri entre aquestes accions per mantenir l'homeòstasi tissular. L'expressió aberrant de TGF- β1 està involucrada en la patogènesi de les malalties hepàtiques [27, 28]. Se sap que el TGF-β1 és una citocina crucial que està involucrada en les primeres etapes de la fibrosi hepàtica.
L'estrès oxidatiu desencadena TGF-β1, resultant en la producció i deposició d'ECM[29]. Per tant, una de les estratègies efectives per produir fàrmac contra la fibrosi hepàtica és identificar agents anti-TGF-β1. L'anàlisi immunohistoquímica va mostrar que les expressions de col·lagen tipus I, col·lagen tipus III i TGF-β1 podrien detectar el procés patològic de la fibrosi hepàtica. Es redueixen les expressions del col·lagen tipus I, col·lagen tipus III i TGF-β1 en els grups de tractament, que van ser significativament més baixes en les altes dosis de CPhG(glicòsid fenil·lanoides del cistanche)grup de tractament en particular, i va suggerir que els CPhG és un inhibidor eficaç del col·lagen tipus I, el col·lagen tipus III i el TGF-β1. Presumiblement, els CPhG poden millorar l'activitat de la col·lagenasa, mantenint l'equilibri dinàmic de la síntesi i degradació de l'ECM, retardant i evitant així la formació de fibrosi hepàtica. CPhG(glicòsid fenil·lanoides del cistanche)no només podria millorar la fibrosi hepàtica induïda per BSA en rates, sinó que també podria estar associada amb la inhibició de l'activació de l'HSC in vitro. Es creu que l'activació de HSC representa el pas crucial de la fibrogènesi. En aquest estudi, els resultats van il·lustrar que l'administració de CPhG de 25 a 100 ug / ml va atenuar notablement la disminució de NF-κB p65, l'expressió de col·lagen I arnm i l'expressió de la proteïna I de col·lagen en HSC. NF-κB juga un paper important en la modulació de la resposta immune a la infecció o estímuls. L'acumulació de NF-κB en les cèl·lules hepàtiques pot donar lloc al reclutament de citocines / mediadors inflamatoris, induint així el desenvolupament de la fibrosi [31, 32]. A més, el col·lagen també és un índex sensible que reflecteix el nivell de fibrosi i representa aproximadament el 50% de la proteïna total del fetge fibrós.
Com a resultat, postulem que el mecanisme molecular contra l'hepato-fibrosi està relacionat amb els CPhG.(glicòsid fenil·lanoides del cistanche)-inactivació mediada de l'expressió de NF-κB, en la qual el benefici contribueix a rols sinèrgics d'atenuant de la immunotoxicitat i l'estrès inflamatori en el teixit hepàtic lesionat per BSA, corregint encara més el dismetabolisme per millorar les funcions hepàtiques.
Conclusions
En conclusió, els nostres estudis indiquen que els CPhGs(glicòsid fenil·lanoides del cistanche)atenuar significativament l'extensió de la fibrosi hepàtica induïda per la BSA en rates. El seu mecanisme pot ser almenys parcialment degut a l'efecte inhibidor dels CPhG sobre la composició de l'ECM i l'estimulació de la degradació de l'ECM, i/ o per inhibició directa de la síntesi de col·lagen tipus I, col·lagen tipus III i l'expressió de TGF-β1. Per tant, esperàvem que els CPhG es puguin utilitzar en productes sanitaris o en medicaments clínics per a la prevenció de la fibrosi hepàtica humana. Es requereixen estudis futurs per establir l'eficàcia dels CPhG com un potent fàrmac contra la fibrosi anti-hepàtica.
Abreviatures
CPhG:Glicòsids de feniletanol del cistanche; BSA: Albúbbre boví de sèrum; HSC-T6: Cèl·lules estelades hepàtiques; Hipn: Hidroxiprolina; BJRG: Comprimits compostos biejiarangan; TGF-β1: Transformant el factor de creixement β1; ALT: Alanina aminotransferasa; AST: Aspartat aminotransferasa; HA: Àcid hialurònic; LN: Laminin; PC III: Procollagen tipus III; IV-C: Col·lagen tipus IV; NF-κB: Factor nuclear kappa-llum-cadena-potenciador de cèl·lules B activades; RT-PCR: Reacció en cadena transcriptasa-polimerasa inversa; SDS-PAGE: Electroforesi gel sulfat de dodecil de sodi-poliacrilamida.
Interessos en competència Els autors declaren que no tenen interessos en competència. Les contribucions dels autors TL, JZ, SPY, LM, MT i SLZ van concebre i dissenyar els experiments. Spy, TL i JZ van analitzar les dades. L'ESPIA i JZ van escriure el manuscrit. TL, LM i JZ van revisar el manuscrit. Tots els autors van llegir i van aprovar el manuscrit final. Aquesta investigació va ser recolzada per la National Natural Science Foundation of China (81260624). Els autors volen expressar el seu sincer agraïment al professor Tao Liu per les seves millores suggerides per a la redacció d'aquest article. Detalls de l'autor 1 Departament de Toxicologia, Escola de Salut Pública, Universitat Mèdica de Xinjiang, Nº 393 Xinyi Road, Urumqi 830011Xinjiang Uigur Autònom
Regió, Xina. 2 Laboratori clau per a la Medicina Uigur, Institut de Matèria Mèdica de Xinjiang, Urumqi 830004, Xina. 3 No. 140 Xinhua South Road, Districte de Tianshan, Urumqi 830000Xinjiang Regió Autònoma Uigur, Xina. Rebut: 6 Agost 2015 Acceptat: 24 de novembre de 2015
Referències
Cohen-Naftaly M, Friedman SL. Estat actual de noves teràpies antifibètiques en pacients amb malaltia hepàtica crònica. Ther Adv Gastroenterol. 2011;4(6):391–417.
Puche JE, Saiman Y, Friedman SL. Cèl·lules hepàtiques i fibrosi hepàtica. Compr Physiol. 2013;3(4):1473–92.
Hernández-Gea V, Friedman SL. Patogènia de fibrosi hepàtica. Annu Rev Pathol. 2011;6:425–56.
Sohrabpour AA, Mohamadnejad M, Malekzadeh R. Article de revisió: la reversibilitat de la cirrosi. Aliment Pharmacol Ther. 2012;36(9):824–32.
Raven PH, Zhang LB, Ventenat O. Acadèmia Xinesa de Ciències. 23a ed. Xina: Comitè Editorial de Flora de la Xina; 2013. p. 1–16.
Comissió de Farmacopea Xinesa del Ministeri de Sanitat de la República Popular de la Xina. Farmacopea xinesa, part 1. Xina: Editorial de la indústria química; 2010. p. 126.
Yan GH, Tian JH, Long BW, Li N. Progrés de la recerca dels glucàsids fenitonoides de Cistanche tubulosa. Pharm Central Sud 2012;10:692–5.
Li J, Huang D, He L. Efecte de Rou Cong Rong(Herba Cistanches Deserticola) sobre la toxicitat reproductiva en ratolins induïts per glicòsid de Leigongteng (Radix et Rhizoma Tripterygii). J Tradit Chin Med. 2014;34(3):324–32.
Xing Y, Liao J, Tang Y, Zhang P, Tan C, Ni H, et al. ACE, i inhibidors de l'agregació de plaquetes de Tamarix Hojnacki Bunge (planta amfitriona de Cistanches Herba) que creixen a Xinjiang. Farmacogn Mag. 2014;10(38):111–7.
Jia Y, Guan Q, Jiang Y, Salh B, Guo Y, Tu P, et al. Millora de la colitis induïda per sodi del sulfat de dextrran en ratolins per extracte enriquit d'equiinacòsids de Cistanche tubulosa. Phytother Res. 2014;28(1):110–9.
