Reducció de la lesió de preservació/reperfusió renal per hipertèrmia controlada durant la perfusió a màquina Ex Vivo

Contacte:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Thomas Minor1,*,† i Charlotte von Horn1,†

El possible efecte reno-protector d'un tractament breu controlat de xoc tèrmic durant la perfusió aïllada de màquina ex vivo d'empelts de donant abans dereperfusiós'ha d'investigar en un estudi primari in vitro.Porcíronyons(n=14) es van recuperar després de 20 minuts d'aturada cardíaca del donant i es van sotmetre a 20 hores d'emmagatzematge en fred estàtic a la solució de la Universitat de Wisconsin. Abans dereperfusió, ronyonsvan ser sotmesos a 2 hores de perfusió de la màquina de reacondicionament amb un augment gradual de la temperatura de perfusió fins a 35 graus. A la meitat delronyons(n=7), es va implementar un breu impuls hipertèrmic (10 minuts de perfusió a 42 graus) durant el període de perfusió de la màquina. Es va observar la recuperació funcional dels empelts després de la reperfusió normotèrmica in vitro. El tractament hipertèrmic va donar lloc a un augment del 50 per cent de la proteïna de xoc tèrmic (HSP) 70 i HSP 27 mRNA i va anar acompanyat d'una millora del ~ 50 per cent de la reabsorció tubular de sodi i glucosa després de la reperfusió, en comparació amb els controls. A més, la pèrdua renal d'aspartat aminotransferasa es va reduir significativament a un terç dels controls, igual que la pèrdua de proteïnes urinàries, avaluada per la relació albúmina/creatinina. Es conclou que el tractament de xoc tèrmic ex vivo sembla ser una opció fàcil d'implementar i prometedora per millorar la maquinària d'autodefensa renal contrareperfusiólesiódesprés de la conservació que mereix una investigació addicional en models preclínics.

Cistanche dr vita opcés molt bo perronyóreperfusió

Aspectes destacats de l'estudi

QUINS ÉS EL CONEIXEMENT ACTUAL DEL TEMA?

✔ La inducció de proteïnes de xoc tèrmic (HSP) en els teixits locals és un mecanisme de defensa ben conegut en resposta a les tensions ambientals. La regulació a l'alça d'aquestes chaperones moleculars indueix mecanismes de reparació i tolerància contra les cèl·lules posteriorslesió. Clínicaronyóel trasplantament depèn cada cop més de l'ús d'òrgans de donant criteris ampliats que presenten una susceptibilitat millorada a la isquèmia/reperfusió.lesió. La perfusió a màquina ex vivo d'empelts d'òrgans marginals proporciona un accés privilegiat a l'empelt i una nova perspectiva per a una aplicació fàcil i controlada d'una estimulació hipertèrmica a l'òrgan aïllat per tal de desencadenar respostes de xoc tèrmic i desencadenar vies de senyal que afecten favorablement l'exacerbació consecutiva del teixit. lesió i millorarenalrecuperació després del trasplantament.

A QUINA PREGUNTA VA adreçar aquest estudi?

✔ Examinem un efecte protector potencial d'un breu estímul hipertèrmic durant el pretrasplantament ex vivoronyóperfusiósobre el resultat funcional després de la postiquèmicareperfusió.

QUÈ AFEGEIX AQUEST ESTUDI AL NOSTRES CONEIXEMENTS?

✔ Aquest estudi dóna algunes indicacions que el tractament hipertèrmic durant la perfusió de la màquina renal ex vivo actua com una possible eina nova per a la millora dels resultats funcionals de la perfusió marginalment conservada.ronyonsper reperfusió postiquèmica. Les dades donen suport a un paper rellevant dels HSP en la reducció de la destrucció cel·lular i la millora de la funció renal tubular posttrasplantament.

COM POT CANVIAR AQUEST FARMACOL CLÍNIC

ÒGIA O CIÈNCIA DE LA TRADUCCIÓ?

✔ L'addició d'hipertèrmia breu controlada a un protocol de perfusió de màquina normotèrmica establert és un mètode fàcilment implementable per a l'aplicació clínica i pot contribuir a millorar la recuperació d'òrgans després del trasplantament.

El trasplantament de ronyó clínic depèn cada cop més de l'ús d'òrgans de donant criteris amplis que s'han danyat abans de la recuperació o que probablement no són òptims.

qualitat. Juntament amb la proporció creixent d'aquells òrgans que presenten una major susceptibilitat als desencadenants nocius després de la conservació isquèmica, 1,2 alteracions dels teixits.

relacionat amb la lesió per isquèmia/reperfusió representa un problema creixent important en el trasplantament renal que desencadena una disfunció cel·lular després de la reperfusió.

La inducció de chaperones cel·lulars i l'activació d'un fenotip de senyal protector (per exemple, per estrès tèrmic subcrític), és un mecanisme conegut per reduir les alteracions dels teixits pertinents a una situació d'estrès posterior i desafiar l'homeòstasi dels teixits.3,4.

L'arribada de la màquina perfusió aïllada com a alternativa o complement a l'emmagatzematge en fred isquèmic d'empelts de donants marginals ha obert una nova perspectiva per a una aplicació fàcil i controlada d'un repte hipertèrmic a l'òrgan aïllat per tal de desencadenar una resposta de xoc tèrmic i alliberar senyal. vies que afecten favorablement l'exacerbació consecutiva de la lesió tissular i milloren la recuperació renal després del trasplantament.

S'ha demostrat experimentalment que l'efecte de precondicionament de la resposta al xoc tèrmic està relacionat amb un augment temporal supranormal de la citorresistència5, a més de ser operatiu mitjançant la millora dels mecanismes secundaris de reparació cel·lular.6 Més recentment s'ha demostrat que la inducció de proteïnes de xoc tèrmic (HSP) poden conferir protecció fins i tot quan s'indueixen aviat després que ja s'hagi produït l'insult original al teixit.7

L'accés privilegiat a l'òrgan aïllat impedeix requeriments feixucs per a l'escalfament del cos sencer i incorre en efectes secundaris adversos en els organismes donants o receptors.

Per tant, aquest estudi pretenia ser una investigació pilot per escrutar proves primàries del tractament hipertèrmic durant la perfusió de la màquina renal ex vivo per actuar com una possible eina nova per a la millora del resultat funcional dels ronyons conservats marginalment després de la reperfusió postiquèmica.

MÈTODES

Tots els experiments es van dur a terme amb ronyons que es van recuperar de femelles de porcs Landrace alemanys morts (edat: 10-12 setmanes, pes: 25 i 30 kg). Es va seguir la llei federal sobre la protecció dels animals i els principis de cura dels animals de laboratori (publicació núm. 85-23 dels Instituts Nacionals de Salut (NIH), revisada el 1985). Els animals van ser tractats segons les normes i després de l'aprovació de les autoritats locals.

Els ronyons es van extreure 20 minuts després de l'aturada circulatòria i es van rentar a la taula posterior amb una gravetat de 100 cm amb una solució freda (4 graus) de la Universitat de Wisconsin fins que l'efluent va quedar clar. No es va donar heparina en cap moment.

Posteriorment, els empelts es van emmagatzemar durant 18 hores en un vas de precipitats ple d'una solució de la Universitat de Wisconsin i una temperatura regulada a 4 graus mitjançant un criotermòstat.

Al grup control, els ronyons van ser sotmesos a 2 hores de perfusió de màquina normotèrmica oxigenada (95 per cent d'O2; 5 per cent de CO2) amb solució Aqix RS I complementada amb 40 g/L d'albúmina sèrica bovina. Com es va proposar anteriorment, la perfusió 8,9 es va iniciar en hipotèrmia seguida d'un augment gradual de fins a 35 graus durant els primers 60 minuts, controlat per un criotermòstat circulant programable.

En el grup experimental, es va incloure un breu període d'hipertèrmia controlada (CH) a la perfusió aïllada

Tractament de xoc tèrmic Ex Vivo d'empelts d'òrgans Protocol Minor i von Horn. Després d'arribar als 35 graus, la temperatura del perfusat es va elevar temporalment encara més a 43 graus durant 10 minuts (figura 1) abans de continuar la perfusió a 35 graus durant la resta del període 2-hora. El temps i l'alçada de l'augment de temperatura s'han derivat d'experiments de cribratge incrementals anteriors amb l'objectiu d'obtenir un efecte consistent.

En tres experiments, la pressió parcial d'oxigen al teixit es va controlar mitjançant l'ús d'un sensor d'oxigen òptic de tipus agulla de microfibra, connectat a un mesurador d'oxigen de fibra òptica compensada per temperatura (Microx 4, detecció de precisió PreSens, Regensburg, Alemanya), que simultàniament va registrar la temperatura corresponent mitjançant una sonda de termistor.

L'agulla es va col·locar a la regió cortical interna del ronyó per documentar l'oxigenació adequada dels teixits fins i tot durant els períodes hipertèrmics de perfusió.

Model de reperfusió renal aïllada

La recuperació renal de la lesió per preservació/reperfusió es va avaluar mitjançant un model de reperfusió in vitro establert, tal com es va descriure anteriorment.10

En resum, es van rentar els ronyons en fred amb 100 ml de solució salina al final del període de reacondicionament de la màquina i després es van mantenir a temperatura ambient durant 20 minuts per simular el segon període d'isquèmia càlida durant la implantació quirúrgica in vivo. Aquest temps també es va utilitzar per a la canulació de l'urèter amb un tub gran per permetre la recollida d'orina després de la reperfusió.

Els ronyons es van col·locar en una cambra de plexiglàs controlada termostàticament i es van perfondre a través de l'artèria renal a una pressió pulsàtil mitjana de 90 mmHg. L'efluent venós va drenar lliurement a l'embassament. L'oxigenació del perfusat es va realitzar amb un 95 per cent d'O2/5 per cent de CO2 mitjançant un oxigenador de fibra buida termocontrolat. La pressió arterial es va mantenir mitjançant una bomba de corró servocontrolada juntament amb un transductor de pressió connectat a la cànula de perfusió arterial. L'orina es va recollir del tub de PE inserit a l'urètre que es va guiar cap a l'exterior del dipòsit. Cada 100 ml d'orina recollida es van filtrar i es van tornar a infusionar al dipòsit per tal de

figura 1RenalspO2 del teixit cortical (línia de punts) durant la perfusió de màquina ex vivo en relació amb la temperatura de perfusat respectiva (línia sòlida).

per mantenir constant la composició d'electròlits del perfusat al llarg del temps.

Procediments analítics

La pressió parcial d'oxigen i les concentracions de perfusat de glucosa i electròlits es van mesurar en un analitzador de gasos en sang de pH (laboratori àcid-base ABL 815flex, Radiometer, Copenhaguen).

Les activitats enzimàtiques de l'aspartat aminotransferasa (AST) i les concentracions de creatinina es van determinar de manera rutinària mitjançant fotometria de reflectància en una unitat d'atenció al punt Reflotron Plus (Roche Diagnostics, Mannheim, Alemanya).

Renalses va calcular l'aclaració per als intervals respectius com a creatinina urinària × flux d'orina / creatinina perfusa.

La concentració d'albúmina a la fracció d'orina al final de l'experiment es va mesurar fotomètricament mitjançant l'assaig d'unió de colorant amb verd de bromocresol al centre de laboratori de l'hospital universitari i la quantitat de proteïna es va normalitzar amb les concentracions corresponents de creatinina com a albúmina urinària. proporció de creatinina.

La càrrega filtrada de sodi (FL Na) es va calcular com

FL=GFR × Na

FRNa=(FLNa − Na(orina) ×flux d'orina)∕FLNa

La càrrega filtrada i la reabsorció fraccionada de glucosa es van calcular en conseqüència.

Transcripció inversa i posterior reacció en cadena de la polimerasa

L'ARN total es va aïllar de mostres de teixit congelades instantàniament de l'escorça externa i es va analitzar tal com es va descriure anteriorment.8

Els valors de referència es van calcular a partir de mostres de teixit que s'havien pres de vitalronyonsex vivo. Els resultats es van quantificar mitjançant el mètode ΔΔCt. Els gens objectiu es van normalitzar a la gliceraldehid 3-fosfat deshidrogenasa com a estàndard intern. Els valors d'expressió gènica de plegament es van calcular per a cada mostra individual tal com es van normalitzar amb els valors de referència.

En l'estudi es van utilitzar els següents imprimadors (comprats a Qiagen GmbH, Hilden, Alemanya): gliceraldehid 3-fosfat deshidrogenasa (núm. PPS00192A), HSP72 (núm. PPS00074A), HSP27 (núm. PPS01262) i HO{{ {6}} (núm. PPS01191A).

Western Blot

La immunoblotting de proteïnes es va realitzar a partir de lisats de cèl·lules senceres de l'exteriorrenalescorça per electroforesi en gel de dodecilsulfat de sodi-poliacrilamida i transferència electroforètica a membrana de nitrocel·lulosa, tal com es va descriure anteriorment.8 La tinció es va fer amb Ponceau S verificada la uniformitat de càrrega i transferència de proteïnes.

La incubació amb anticossos primaris es va realitzar durant la nit a 4 graus (quinasa regulada per senyal extracel·lular anti-fosfo de conill (ERK, Thermo Fisher, #MA5-15174—1:500) o anti HSP 72 (StressMarq Bioscience, #SCM). -100—1:300). Després de la incubació amb anticossos secundaris acoblats a la peroxidasa de rave picant (1:1,000) durant 1 hora a temperatura ambient, es va detectar proteïna mitjançant una quimioluminescència millorada mitjançant una taca C-Digit. Escàner (Li-COR).

La quantificació del contingut de proteïnes es va realitzar densitomètricament amb gel UN-SCAN-IT versió 6.1 (Silk Scientific, Orem UT) tal com es va normalitzar amb l'expressió d'ERK total (Thermo Fisher, #MA5-15174) o ß-actina (Thermo Fisher). , #PA1-46296).

Estadístiques

Tots els valors s'expressen com a mitjanes ± SD per a n {{0}} animals per grup i les diferències entre grups es van provar mitjançant una prova t no aparellada i de dues cares utilitzant la correcció de Welch per a les variacions desiguals, si no s'indica el contrari. La significació estadística es va establir en P <>

RESULTATS

Perfusió a màquina

Durant el reescalfament controlat amb oxigen dels empelts perfusos a màquina, la hipertèrmia temporal va provocar una caiguda transitòria visible derenalpO2 del teixit cortical (figura 1), que, tanmateix, sempre es va mantenir per sobre dels 200 mmHg i, per tant, complia clarament amb els requisits fisiològics durant la perfusió normotèrmica que s'havia informat que era de 30-50 mmHg.11,12.

RenalsL'alliberament d'AST al perfusat circulant va ser fins i tot lleugerament menor en el grup d'hipertèrmia que en condicions de control (19,8 ± 12,1 vs. 33,3 ± 25,9 U/L; CH vs. control, no significatiu).

Lectura molecular de la hipertèrmia transitòria durant la perfusió de màquina ex vivo

La preservació i la reperfusió condueixen a una notable inducció de HSP fins i tot en condicions de control amb un augment de ~ 2-, 8- i fins i tot 100- vegades de les transcripcions d'ARNm de l'hemoxigenasa 1, HSP 27 , i HSP 72, respectivament.

No obstant això, la hipertèrmia transitòria controlada durant la perfusió de la màquina va millorar eficaçment aquest augment de la inducció gènica en un 50% en tots els casos. Es va trobar que l'efecte era molt significatiu per a HSP 27 i HSP 72, mentre que no es va poder evidenciar significació estadística pel que fa a la inducció de l'hemoxigenasa 1 (figura 2).

La fosforilació d'ERK representa un esdeveniment de senyal de protecció ràpid i sensible que també pot promoure l'expressió de HSP 72.13

Es va investigar com a repercussió primerenca de l'estrès per calor al nivell de proteïnes. Les anàlisis de Western blot van revelar que la hipertèrmia transitòria durant la perfusió de la màquina va millorar significativament la quantitat de fosforilació d'ERK al teixit en comparació amb el grup control (figura 3). En conseqüència, també es va trobar que l'expressió de proteïnes de HSP 72 estava significativament elevada per sobre dels valors de control després d'una hipertèrmia controlada durant la perfusió de la màquina.

La hipertèrmia transitòria millorarenalrecuperació després de la conservació

El flux de perfusió durant la reperfusió va ser de mitjana entre 300 i 400 ml/minut sense diferències entre els dos

grups. La producció d'orina també va ser similar en ambdós grups amb 897 ± 354 enfront de 601 ± 280 ml/90 minuts (control vs. CH).

RenalsL'alliberament d'AST es va prendre com a paràmetre de lesió cel·lular global i es va seguir durant la reperfusió (figura 4). Es veu que el tractament hipertèrmic va donar lloc a valors inicialment més baixos a l'inici de la reperfusió i va mitigar encara més l'augment progressiu durant la perfusió en curs.

RenalsLa funció de les cèl·lules tubulars es va avaluar mitjançant l'anàlisi de la reabsorció de sodi i glucosa de l'ultrafiltrat (figura 5). Es va trobar que les taxes de reabsorció fraccionada deronyons, sotmesos prèviament a una hipertèrmia controlada durant la perfusió de la màquina, van superar significativament els del grup control en un 40 per cent.

Per tal d'excloure la possibilitat d'aquest controlronyonspodria haver estat carregat amb càrregues absolutament més elevades de sodi o glucosa a l'ultrafiltrat, també vam determinar la càrrega de filtració total d'ambdues substàncies, que, tanmateix, no difereix entre els dos grups amb FL Na que ascendia a 2,7 ± {{3 }},7 i 2,5 ± 0,8 mmol/minut i FL glu a 24,8 ± 12,1 i 28,6 ± 9,4 mg/min (control vs. CH, respectivament).

Les taxes de filtració glomerular també eren equívoques en ambdós grups; els valors d'eliminació de la creatinina van ascendir a {{0}},25 ± 0.{06 ml/g/minut en el grup control, i a 0,24 ± 0,08 ml/g/minut després de CH.

Per contra, les fuites de proteïnes urinàries es van reduir significativamentronyonsque van ser sotmesos a CH (Figura 6).

DISCUSSIÓ

L'ús de la màquina de perfusió ex vivo representa una tendència en evolució en la gestió de la preservació de l'empelt abans del trasplantament d'òrgans.

En l'última dècada, la perfusió de màquina hipotèrmica s'ha establert com un mètode de conservació superior en comparació amb l'emmagatzematge en fred estàtic simple14,15 i es va fer popular per a la preservació d'òrgans de major risc i criteris estès.14-16.

Es va demostrar que l'estimulació pulsàtil de la vasculatura durant el període extracorporal17 així com la presència d'oxigen18 mantenienrenalhomeòstasi i millorafuncionalresultats després del trasplantament.

Els darrers avenços tècnics han fomentat una nova tendència cap a la perfusió de màquina normotèrmica com una alternativa més fisiològica a les tecnologies de perfusió hipotèrmica, que compensa la major despesa amb un manteniment millor de l'homeòstasi metabòlica i una oportunitat més autèntica per avaluar l'empelt conservat. abans del trasplantament.19,20

Més enllà d'això, la perfusió normotèrmica de la màquina representa una plataforma ideal per a intervencions terapèutiques a l'òrgan aïllat que poden servir per a propòsits de condicionament amb l'objectiu d'alleujar les conseqüències de la lesió de recuperació/preservació anterior o per condicionar la lesió de reperfusió posterior després d'una segona isquèmia calenta i reperfusió després del trasplantament.

cistanche ronyó wirkung

Es va trobar que el tractament de xoc tèrmic com a enfocament terapèutic promou mecanismes de protecció molt eficaços als ronyons i indueix la tolerància a insults específics estabilitzant l'estructura de proteïnes i la integritat cel·lular. Aquest efecte es basa principalment en la síntesi d'HSP específiques, que s'expressen de manera constitutiva als ronyons i que poden ser altament regulats en resposta a una varietat de condicions d'estrès.4

Aquest estudi mostra que un breu repte hipertèrmic durant la perfusió renal aïllada provoca efectivament una reacció de xoc tèrmic molecular, com ho demostra el nivell pre-transcripcional i proteic, i activa la senyalització de supervivència a través de la via ERK. Per tant, el procediment descrit no es va associar amb hipòxia tissular aparent, malgrat la perfusió aïllada sense portadors d'oxigen addicionals.

S'ha establert anteriorment que la inducció d'HSP pot començar en menys d'1 hora21 i que l'expressió de HSP 72 augmenta a multitud ja després de 3 hores.22 L'HSP 70 és la chaperona més destacada que respon a l'estrès hipertèrmic i té un paper fonamental. paper en la protecció dels teixits mitjançant l'augment de la maquinària d'autodefensa cel·lular.5

HSP 72 evita el plegament incorrecte de les proteïnes5, facilita l'eliminació de proteïnes danyades6 i participa en el replegament i reparació de proteïnes. En donar suport a processos de reparació cel·lular que són molt menys costosos que la síntesi de novo. Així, HSP 72 redueix les necessitats metabòliques durant la situació crítica després de la reperfusió després d'una lesió cel·lular21 i, per tant, ajudarecuperació cel·lularde l'insult.

L'estabilització de les membranes lisosomals23 redueix la lesió cel·lular per hidrolases àcides i la inducció consecutiva de la mort cel·lular. A nivell molecular, estudis anteriors indiquen que HSP 72 activa la via MEK/Erk i l'efecte protector rellevant està relacionat amb la fosforilació de Raf, MEK i Erk i la supervivència cel·lular.24,25 En conseqüència, en el nostre model, la CH va conduir a un significatiu reducció de l'alliberament global d'AST, que es va prendre com el paràmetre de dany cel·lular general. A més, l'augment progressiu de l'AST durant la reperfusió en curs també es va atenuar notablement pel tractament.

Juntament amb això va anar una mitigació important dedisfunció renalja que es va trobar que la capacitat de reabsorció de les cèl·lules tubulars augmentava un ~ 50 per cent sobre els valors de control.

L'HSP 27 és un HSP de baix pes molecular que també es va trobar que era un actor important en la resposta protectora al xoc tèrmic als ronyons.4 Els estudis sobre cèl·lules tubulars de rata mostren que l'acumulació de HSP 27 a les cèl·lules del túbul proximal s'associa amb un augment de la supervivència i regeneració.26

A partir dels resultats del present estudi pilot, la implementació d'un breu repte hipertèrmic al protocol de perfusió de màquines ex vivo sembla ser una manera fàcil de condicionar empelts de ronyó conservats marginalment que afavoreix la resiliència a lesions de reperfusió mitjançant la millora de l'autodefensa cel·lular. maquinària. Encara hi ha controvèrsia si la perfusió de la màquina s'ha de fer per endavant, immediatament després de l'obtenció de l'empelt27 malgrat incórrer en inconvenients logístics, o si un període breu de perfusió isquèmica final després del transport de l'òrgan mitjançant emmagatzematge en fred estàtic seria suficient i més fàcilment implementable en rutina clínica.28,29 El condicionament ex vivo de l'empelt per CH seria possible en qualsevol de les dues modalitats.

Tanmateix, s'ha de tenir precaució amb les conclusions finals prematures. El ronyó perfós aïllat (IPK) és una eina útil per als estudis de cribratge funcional30 i les correlacions entre les dades de la IPK i els resultats clínics fan del model IPK una eina potencialment útil per a l'avaluació de la funció renal.17,31 No obstant això, la capacitat funcional força constant del model. es limita a unes poques hores,32 la qual cosa impedeix observacions a llarg termini.

Com que encara es pot produir una expressió màxima d'HSP més enllà d'aquest temps,22 un potencial augment addicional de l'efecte protector del tractament hipertèrmic (per exemple, en termes de regeneració millorada després de l'insult isquèmic) no es tindrà en compte a la nostra configuració pilot. A més, és ben conegut, a partir d'estudis anteriors en altres models, que el tractament de xoc tèrmic o la sobreexpressió induïda per lentivirals d'HSP 27 poden provocar una mitigació de la reactivitat inflamatòria dels òrgans diana lesionats.

juntament amb una reducció important de la infiltració de neutròfils al teixit.33,34

La infiltració de leucòcits, al seu torn, se sap que és un fenomen de tipus agut principal que desencadena reaccions inflamatòries nocives després de la isquèmia renal i la reperfusió in vivo.

No obstant això, per tal d'excloure els efectes adversos concomitants de l'activació de cèl·lules sanguínies a les superfícies de tubs artificials, que serien inevitables en un model in vitro estès, el trasplantament i la reperfusió reals en condicions fisiològiques, inclosa la morfologia dels vasos naturals, sembla ser obligatori per abordar amb precisió les cèl·lules cel·lulars. efectes inflamatoris, que per tant no es van abordar en la present investigació pilot.

Finalment, les troballes recents han demostrat ser substancialsdiferències de sexeen transcripcions expressades en cèl·lules del túbul proximal de mascles versus femelles que poden reflectir disparitats relacionades amb el sexe en la malaltia renal crònica o en els mòduls de gens proinflamatoris.35 En el nostre estudi, només es van utilitzar animals femelles, evitant així les putatives disparitats relacionades amb el sexe en el reaccions de xoc tèrmic. D'altra banda, el comportament possiblement diferent del teixit masculí no s'ha abordat i, per tant, no es pot tenir en compte en aquest estudi.

En conclusió, les nostres dades fins ara mostren que la breu perfusió hipertèrmica ex vivo és una manera fàcil d'inducció de chaperones a l'empelt renal aïllat que confereix protecció parenquimàtica a la reperfusió precoç i garanteix una confirmació addicional mitjançant models de trasplantament in vivo amb temps d'observació prolongats.

Agraïments. Els autors agraeixen la valuosa ajuda tècnica de Bastian i Regina Lüer.

Finançament. No s'ha rebut cap finançament per a aquesta obra.

Conflicte d'interessos. Els autors no van declarar cap interès en aquest treball.

Aportacions de l'autor. TM i CvH van escriure el manuscrit. TM i CvH van dissenyar la investigació. TM i CvH van realitzar la investigació. TM i CvH van analitzar les dades.