L'efecte anti-envelliment del polipèptid Velvet Antler depèn de la modulació de la microbiota intestinal i la regulació de la via PPAR / APOE4 PART 1

Hem investigat els efectes anti-envelliment del polipèptid de corna de vellut en ratolins envellits induïts per D-galactosa (D-gal). Es van establir ratolins d'envelliment induït per D-gal i es van dividir aleatòriament en cinc grups, el control, el model, la vitamina E (VE), el polipèptid de vellut a dosi baixa i els grups de dosi alta de polipèptid de vellut. La prova del laberint d'aigua de Morris es va utilitzar per avaluar les capacitats d'aprenentatge i memòria dels ratolins envellits. Les neurones de l'hipocamp es van observar mitjançant tinció d'hematoxilina-eosina i microscòpia electrònica de transmissió. Es van utilitzar mètodes bioquímics per detectar les activitats de la superòxid dismutasa, el malonaldehid i altres enzims i avaluar la influència del polipèptid de corna de vellut sobre la capacitat antioxidant dels ratolins envellits. Utilitzant la seqüenciació del gen rRNA 16S i la tecnologia de meristemes, es va avaluar l'efecte del polipèptid de la rambla de vellut sobre la flora intestinal i el metabolisme dels àcids grassos dels ratolins envellits. Els resultats experimentals van demostrar que el polipèptid de corna de vellut podria millorar significativament l'aprenentatge i les habilitats cognitives dels ratolins envellits i augmentar les activitats de la superòxid dismutasa, la glutatió peroxidasa i la catalasa al sèrum per disminuir el contingut de malonaldehid. L'anàlisi microecològica intestinal va demostrar que el polipèptid de corna de vellut podria augmentar significativament l'abundància beneficiosa de lactobacillus del gènere bacterià. L'anàlisi de Western blot va demostrar a més que el polipèptid de corna de vellut podria promoure el metabolisme dels àcids grassos activant el receptor activat pel proliferador de peroxisomes (PPAR) i augmentant l'expressió dels enzims aigües avall carnitina-palmitoil transferasa -1 A i acil-CoA oxidasa 1 mentre es regula a la baixa. la de l'apolipoproteïna E4 (APOE4), reduint així l'acumulació d'àcids grassos i augmentant la producció d'adenosina-trifosfat (ATP). Per tant, el polipèptid de corna de vellut millora la microecologia intestinal i activa la via PPAR / APOE4 per regular el metabolisme dels àcids grassos.

El glicòsid de cistanche també pot augmentar l'activitat de la SOD en els teixits del cor i del fetge, i reduir significativament el contingut de lipofuscina i MDA a cada teixit, eliminant eficaçment diversos radicals reactius d'oxigen (OH-, H₂O₂, etc.) i protegint contra els danys de l'ADN causats. per radicals OH. Els glucòsids feniletanoides de Cistanche tenen una forta capacitat d'eliminació dels radicals lliures, una capacitat reductora superior a la de la vitamina C, milloren l'activitat de SOD en la suspensió d'esperma, redueixen el contingut de MDA i tenen un cert efecte protector sobre la funció de la membrana espermàtica. Els polisacàrids de Cistanche poden millorar l'activitat de SOD i GSH-Px en eritròcits i teixits pulmonars de ratolins senescents experimentalment causats per D-galactosa, així com reduir el contingut de MDA i col·lagen al pulmó i el plasma, i augmentar el contingut d'elastina. un bon efecte d'eliminació de DPPH, allarga el temps d'hipòxia en ratolins senescents, millora l'activitat de SOD al sèrum i retarda la degeneració fisiològica del pulmó en ratolins senescents experimentalment Amb la degeneració morfològica cel·lular, els experiments han demostrat que Cistanche té la bona capacitat antioxidant. i té el potencial de ser un fàrmac per prevenir i tractar malalties de l'envelliment de la pell. Al mateix temps, l'echinacòsid a Cistanche té una capacitat significativa per eliminar els radicals lliures de DPPH i té la capacitat d'eliminar espècies reactives d'oxigen i prevenir la degradació del col·lagen induïda pels radicals lliures, i també té un bon efecte reparador sobre el dany anònic dels radicals lliures de timina.

Feu clic a Cong Rong Cistanche

【Per a més informació:george.deng@wecistanche.com/WhatApp:86 13632399501】

Paraules clau

polipèptid de corna de vellut; D-galactosa; envelliment; Microecologia intestinal; Aprenentatge; Discapacitat cognitiva; via PPAR /APOE4; Microbiota

1. Introducció

El polipèptid de la cornamenta de vellut (VAP) representa el 50-60 per cent del pes humit de la cornamenta de vellut i és un dels seus ingredients actius principals [1]. La VAP és rica en proteïnes, aminoàcids, fosfolípids, colesterol i ions de calci i exerceix diversos efectes de promoció de la salut, amb antioxidants [2], resistència a l'osteoporosi [3] i efectes de regulació immune [4]. Per entendre millor el paper de la VAP en la prevenció i el tractament de malalties neurodegeneratives, investigacions prèvies del nostre grup de recerca també van confirmar que la VAP podria reduir els nivells del receptor de glucocorticoides, el receptor de mineralocorticoides i l'hormona alliberadora de corticotropina. També s'han observat els efectes de la VAP sobre l'eix tàlem-hipòfisi-adrenal i la seva capacitat per inhibir l'apoptosi neuronal [5].

L'envelliment del cervell és un procés fisiològic natural caracteritzat per l'estrès oxidatiu (SO), l'acumulació de molècules de dany oxidatiu i els canvis en l'estructura i la funció de les neurones, que finalment condueixen al declivi cognitiu i a la pèrdua de memòria [6]. Entre aquests factors, el sistema operatiu es considera la causa principal de les malalties neurodegeneratives associades a l'envelliment [7]. Quan el cos està sotmès a estímuls nocius, hi ha un desequilibri entre la generació i l'eliminació de radicals lliures, donant lloc a un augment dels radicals lliures fins a un nivell que supera la capacitat antioxidant de l'organisme. En particular, els radicals lliures excessius són citotòxics, causant danys directes al sistema nerviós central [8, 9]. El cervell humà només representa el 2-3% del pes del cos humà. Tot i així, el sistema nerviós central (SNC) representa el 20 per cent del subministrament total d'oxigen del cos humà. Per tant, el contingut de radicals lliures neuronals al SNC és considerable, presentant un alt risc de SO [10].

La microbiota intestinal humana, que comprèn més de 100 espècies, inclou aproximadament 10- vegades més bacteris que cèl·lules humanes [11]. Els firmicutes són les espècies més abundants dins de la microbiota intestinal humana, que representen el 60 per cent del total de bacteris, seguits de les bacteroidetes (15 per cent) i altres components que representen una petita proporció. La microbiota intestinal es troba en un estat d'equilibri dinàmic amb el cos humà, i els microbis intestinals tenen un paper important en el metabolisme humà, la funció endocrina i la regulació immune. Per tant, quan l'estructura de la microbiota intestinal està alterada, es poden produir malalties neurodegeneratives, malalties cardiovasculars i obesitat [12]. Els canvis en la quantitat i diversitat de microorganismes intestinals també poden afectar els sistemes nerviós central i entèric. Aquestes interaccions es coneixen com a eix microbiota-intestí-cervell, que és important per a la funció corporal [13, 14]. Tot i que els canvis en els perfils de la microbiota intestinal no afecten necessàriament la salut, la pèrdua de diversitat de la microbiota bàsica s'associa amb una disminució de la funció cognitiva i la memòria [15]. De fet, amb l'edat, els canvis en la flora bacteriana es caracteritzen principalment per disminucions de la diversitat, probiòtics, anaerobis facultatius i àcids grassos totals de cadena curta [16].

Tot i que nombrosos estudis han confirmat que els efectes antioxidants i anti-envelliment associats a VAP atenuen l'envelliment, el mecanisme exacte subjacent a aquesta activitat no ha estat clar. Per tant, en el present treball, l'efecte anti-envelliment de VAP es va avaluar in vivo en ratolins mitjançant la prova de laberint d'aigua de Morris (MWM), anàlisi bioquímica, tinció d'hematoxilina-eosina (H&E) i microscòpia electrònica de transmissió (TEM). A més, es van avaluar els canvis en la microecologia intestinal en models de ratolins envellits tractats amb VAP mitjançant la tecnologia de seqüenciació de gens d'ARN ribosòmic (rRNA) 16S. El nostre objectiu era dilucidar el mecanisme de l'activitat VAP en el context de l'envelliment i proporcionar una base teòrica per al desenvolupament de nous enfocaments terapèutics anti-envelliment.

2. Materials i mètodes

2.1 Materials experimentals

VAP was provided by the Molecular Pharmacology Laboratory, Changchun University of Chinese Medicine. Dgalactose (D-gal) and VE (purity >90 per cent) es van comprar a Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd. (Xangai, Xina). Els kits comercials de superòxid dismutasa (SOD), malonaldehid (MDA), catalasa (CAT) i glutatió peroxidasa (GSH-Px) es van comprar a Nanjing Jiancheng Technology Co., Ltd. (Nanjing, Xina). Tots els productes químics i reactius eren de grau analític.

El sistema de seguiment i anàlisi de vídeo Morris Water Maze (MWM) es va comprar a Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd. (Chengdu, Xina). Es va comprar un microscopi electrònic de transmissió a Tecnai Corporation (Hillsboro, OR, EUA). La plataforma de seqüenciació d'alt rendiment (MiSeq PE300) va ser proporcionada per Illumina (San Diego, CA, EUA).

2.2 Experiments amb animals

Es van comprar seixanta ratolins ICR sans (grau SPF, meitat mascle i meitat femella, amb un pes de 22 a 26 g) a Changchun Yisi Laboratory Animal Technology Co., Ltd. (certificat núm. SCXK(Ji) -2018-0007). Els ratolins es van criar en gàbies separades amb cicles de llum/foscor de 12 hores i una temperatura estàndard (22 ± 2 ◦ C), amb menjar i aigua proporcionats ad libitum. Tots els ratolins es van adaptar a aquestes condicions durant almenys una setmana abans de començar els experiments. Tots els ratolins es van dividir en cinc grups, els grups de control, model, vitamina E (VE), dosis baixes de VAP (VAP1) i dosis altes de VAP (VAP2). Als grups VE, VAP1 i VAP2 se'ls va administrar VE (100 mg/kg), VAP (200 mg/kg) i VAP (400 mg/kg), respectivament, durant 10 dies, mentre que els grups control i model van rebre aigua destil·lada. (el mateix volum i per la mateixa via intragàstrica). A partir de l'11è dia, el grup control va ser injectat per via subcutània amb solució salina normal. D-gal (1000 mg/kg) es va injectar per via subcutània a la part posterior del coll dels ratolins dels altres grups, i l'administració del model es va continuar durant 60 dies.

2.3 Laberint d'aigua de Morris

La prova MWM es va realitzar 1 h després de l'administració de D-gal el dia 57. Breument, es va col·locar una plataforma al mig del laberint d'aigua. Es va afegir aigua a la plataforma fins que va superar 1 cm i es va mantenir a aproximadament 25 ◦C. Els ratolins es van entrenar contínuament durant 1 setmana i la prova MWM es va realitzar formalment segons el procediment operatiu estàndard del laberint d'aigua. Abans de l'inici oficial de l'experiment, es va afegir diòxid de titani a l'aigua perquè els ratolins no poguessin percebre la posició específica de la plataforma. Els caps dels ratolins es van tenyir de groc per fer un seguiment i recollir dades. El programari d'anàlisi de seguiment de vídeo del laberint d'aigua de Morris va registrar la trajectòria de natació dels ratolins, el percentatge de temps de residència a l'anell mitjà i el percentatge de la distància de moviment de l'anell mitjà.

2.4 Tinció H&E

Els cervells sencers dels ratolins es van fixar en una solució de paraformaldehid al 4% i es van incrustar en parafina. Després de 24 h, els teixits cerebrals es van seccionar, es van desparafinar, es van rehidratar i es van tacar amb H&E. A continuació, es van observar les seccions al microscopi òptic per registrar els canvis patològics.

2.5 ARTICLE

Després de la perfusió, els teixits de l'hipocamp es van tallar, es van fixar amb una solució tampó de fosfat de glutaraldehid al 2 per cent i 2,5 per cent, es van deshidratar amb un gradient d'alcohol, es van netejar amb etoxi propà, es van incrustar, es van tallar i es van tacar amb acetat d'uranil i citrat de plom. La ultraestructura de les neurones de l'hipocamp es va observar amb un microscopi electrònic de transmissió.

2.6 Anàlisis bioquímiques

Es van recollir mostres de sang de ratolí i es van centrifugar a 3000 rpm durant 15 min a 4 ◦ C, després dels quals es va recollir el sobrenedant. El contingut de MDA sèric i la determinació de l'activitat de SOD, GSH-Px i CAT es van dur a terme mitjançant les instruccions del kit.

2.7 Perfil de microbiota de mostres fecals

L'ADN total es va extreure de mostres fecals i es va utilitzar com a plantilla per amplificar per PCR la regió V3-V4 del gen 16S rRNA bacterià. El conjunt de dades en brut es diposita a NCBI BioProject PRJNA731623 amb els números d'accés de BioSample SAMN19291644 a SAMN19291668. Els productes de PCR es van analitzar quantitativament i es va realitzar la seqüenciació del gen 16S rRNA mitjançant una plataforma Illumina MiSeq (Illumina, San Diego, EUA). Les dades en brut es basen en la longitud mínima de superposició d'10 pb, amb una relació de desajustament màxima permesa a l'àrea de superposició de 0,2 (per defecte). Les lectures de cada mostra es van empalmar i es van filtrar etiquetes amb longituds inferiors al 75 per cent de la longitud de l'etiqueta després del control de qualitat. Les quimeres (és a dir, si els dos pares tenen una seqüència que és més d'un 80 per cent semblant a la seqüència de consulta, aleshores es considera que la consulta és una quimera) es van eliminar per obtenir seqüències d'etiquetes d'alta qualitat. El programari d'investigació (Sonoma, EUA) [17] es va utilitzar per agrupar etiquetes a un nivell de similitud del 97 per cent, classificar unitats taxonòmices operatives (OTU), obtenir una classificació d'espècies basada en la composició de la seqüència OTU i traçar la dilució de la mostra [18] i les corbes d'índex de Shannon. . PICRUSt (Halifax, CAN) [19] es va utilitzar per determinar la composició gènica funcional de cada mostra mitjançant la comparació de la informació de la composició de l'espècie segons els resultats de la seqüenciació del gen 16S rRNA. D'aquesta manera, es podrien determinar diferències funcionals entre diferents mostres o grups. Les abundàncies, les vies, la informació d'EC i les abundàncies d'OTU en el context de cada categoria funcional es van obtenir mitjançant la base de dades de l'Enciclopèdia de Kyoto de gens i genomes [20].

2.8 Western blotting

La proteïna total es va extreure del teixit cerebral i es va utilitzar el mètode blau brillant de Coomassie per avaluar la concentració de proteïnes. Després, després de l'electroforesi SDS-PAGE, les proteïnes s'han transferit a la membrana, que es va incubar amb anticossos primaris contra les proteïnes diana apolipoproteïna E (APOE4), acil-CoA oxidasa 1 (ACOX1), receptor activat per proliferador de peroxisomes (PPAR), carnitina-palmitoil transferasa-1 A (CPT1A) i gliceraldehid-3-fosfat deshidrogenasa (GAPDH) durant la nit a 4 ◦C. Posteriorment, es va rentar la membrana i després es va incubar amb un anticòs secundari a temperatura ambient durant 1 h. Després de rentar la membrana amb solució salina tamponada amb Tris i Tween 20 (TBST), es va afegir una solució quimioluminiscent (ECL) millorada. S'utilitza un sistema d'imatge en gel totalment automàtic (Aplegen, Pleasanton, EUA) per escanejar la fotografia.

2.9 Detecció de nivells d'àcids grassos lliures (FFA) al teixit cerebral

Es van recollir teixits cerebrals del ratolí i es va afegir una quantitat adequada de solució salina normal. A continuació, es van centrifugar les mostres a 4 ◦ C a 3000 rpm durant 10 min i es van recollir els sobrenedants. Els nivells de FFA als teixits cerebrals es van determinar mitjançant les instruccions del kit.

2.10 Detecció del contingut d'ATP al teixit cerebral

Els teixits cerebrals del ratolí es van recollir i lisar en una proporció de teixit cerebral: tampó de lisi d'1:5. A continuació, es van centrifugar les mostres a 12,000×g a 4 ◦C durant 5 min i es van recollir els sobrenedants. El contingut d'ATP als teixits cerebrals es va determinar mitjançant les instruccions del kit.

2.11 Anàlisi estadística

Per a l'anàlisi de dades es va utilitzar SPSS 19.0 (Chicago, IL, EUA). Els resultats s'expressen com a mitjana ± desviació estàndard (x ± s). La prova t de l'estudiant es va utilitzar per comparar grups, i les diferències es van considerar significatives a P < 0.05 o P < 0,01.

3. Resultats

3.1 Millora de la cognició, l'aprenentatge i la memòria en ratolins envellits tractats amb VAP

La prova MWM es basa en l'instint de supervivència dels animals per trobar la plataforma d'escapament i consisteix a buscar una posició espacial relacionada amb la memòria. La figura 1 mostra pistes representatives de ratolins als quals se'ls va administrar la prova MWM l'últim dia. El diagrama de trajectòria del comportament del ratolí del grup model era més complicat i irregular i els ratolins no van trobar la plataforma. Cal destacar que el diagrama de trajectòria del comportament dels ratolins dels grups VAP1 i VAP2 era senzill i es va trobar una plataforma. En comparació amb el grup de control, el percentatge de temps de retenció a l'anell central i el percentatge de la distància moguda per l'anell central al grup del model es van reduir significativament (P <0.01). En comparació amb el grup Model, el percentatge de temps de retenció a l'anell mitjà i el percentatge de la distància moguda per l'anell mitjà van augmentar significativament als grups VE, VAP1 i VAP2 (P <0.05, P <0,01). Aquestes troballes indiquen que l'administració de VAP va millorar la capacitat cognitiva dels ratolins envellits induïts per D-gal.

3.2 Efecte protector de la VAP sobre les neurones de l'hipocamp en ratolins envellits

La tinció H&E es va utilitzar per observar la morfologia patològica dels teixits cerebrals en ratolins envellits per explorar si la VAP podria millorar el dany patològic neuronal induït per D-gal (Fig. 2A). Les cèl·lules CA1 de l'hipocamp del grup control eren abundants, amb estructura cel·lular normal, morfologia completa i nuclis evidents. En canvi, el nombre de cèl·lules CA1 a l'hipocamp del grup model va disminuir i va mostrar una morfologia irregular, sense que s'observessin nucléols evidents al microscopi. Les neurones de la zona CA1 de l'hipocamp eren relativament normals i la contracció nuclear es va reduir al grup VE en comparació amb el grup model. Notablement, l'àrea CA1 dels hipocamps dels grups VAP1 i VAP2 era significativament diferent de l'observada al grup model i similar a la del grup control. L'estructura era relativament normal, les cèl·lules estaven ben ordenades i regulars i la morfologia era completa.

A més, es va utilitzar TEM per observar la ultraestructura de les neurones de l'hipocamp en ratolins envellits i per entendre si l'efecte inversor de la VAP sobre la disminució de l'aprenentatge i la memòria es va associar amb la regulació de la microestructura de les neurones al cervell (Fig. 2B). Les neurones de l'hipocamp mostraven una morfologia intacta, una distribució uniforme de la cromatina i abundants orgànuls al citoplasma del grup control. A gran augment, els mitocondris eren el·líptics, amb una membrana externa doble clara i unes crestas intactes. En canvi, les neurones de la regió de l'hipocamp del grup model eren anormals; es van observar canvis apoptòtics primerencs com la condensació de la cromatina; els corpuscles de lipofuscina eren més freqüents; l'estructura sinàptica no estava clara; Es van dispersar gotes de lípids i es va detectar una expansió semblant a una vesícula del complex de Golgi i un reticle endoplasmàtic rugós reduït. Notablement, en comparació amb el grup model, els grups VAP1 i VAP2 tenien neurones de l'hipocamp que tendien a ser normals en estructura i morfologia, amb membranes nuclears llises, nuclèols normals i orgànuls abundants. En particular, es van observar més sinapsis, les vesícules sinàptiques de la membrana anterior no tenien una agregació anormal, la morfologia del cos intracitoplasmàtic de Golgi i els mitocondris era normal i la lipofuscina era rara.

3.3 Efectes de la VAP sobre els enzims relacionats amb el dany oxidatiu

Un efecte negatiu del sistema operatiu és la producció de radicals lliures al cos, una de les principals causes de l'envelliment i la malaltia (Fig. 3). En comparació amb el grup control, les activitats de SOD, CAT i GSH-Px al sèrum de ratolins model administrats amb D-galan es van reduir significativament (P <{3}}. 0 1, P < {{7} }}.{{10}}5), i el contingut de l'MDA es va incrementar significativament (P <0.05), cosa que indica un model d'èxit. En comparació amb el grup model, les activitats de SOD, CAT i GSH-Px al grup VE van augmentar significativament (P <0.01, P <0.05) . En comparació amb el grup model, les activitats de SOD i GSH-Px al grup VAP1 van augmentar significativament (P <0,05, P <0,01). En canvi, el CAT va augmentar lleugerament, però no va ser significativament diferent. En comparació amb el grup model, les activitats de SOD, CAT i GSH-Px al grup VAP2 van augmentar significativament (P <0,05, P <0,01). En comparació amb el grup model, el contingut sèric de MDA dels ratolins dels grups VAP1 i VAP2 es va reduir significativament (P <0, 05). Els resultats anteriors indiquen que l'efecte anti-envelliment de la VAP està relacionat amb la millora de l'activitat dels enzims antioxidants sèrics en ratolins envellits i amb la reducció de la peroxidació lipídica.

3.4 Efectes de la VAP sobre la composició i diversitat de la microbiota intestinal en ratolins

Els resultats de la seqüenciació del gen rRNA 16S van donar 1.999,460 lectures PE i, després de filtrar i eliminar quimeres, es van obtenir 1.776.708 etiquetes efectives. Les longituds de seqüència mitjanes de les mostres dels grups control, model, VE, VAP1 i VAP2 van ser de 417,2, 416,2, 418,2, 421,0 i 420,4 pb, respectivament. La proporció de lectures amb una puntuació de qualitat de Phred superior a 30 (Q30) oscil·lava entre el 94,15 i el 95,71 per cent.

Posteriorment, vam determinar la composició de la microbiota intestinal mitjançant les lectures del gen 16S rRNA. Les etiquetes obtingudes mitjançant la seqüenciació d'alt rendiment es van agrupar a un nivell de semblança del 97 per cent i es va generar un diagrama de Venn (Fig. 4A). Cada grup tenia 490 OTU, i no hi havia essencialment cap OTU específic per grup. Per verificar si la profunditat de seqüenciació complia els requisits d'identificació d'espècies, vam dibuixar corbes de Shannon i rarefacció per a totes les mostres (Fig. 4B, C). Les dues corbes de totes les mostres estaven a prop de l'altiplà de saturació, revelant una alta cobertura (99 per cent). Aquestes dades suggereixen que es va extreure la gran majoria de la informació sobre la diversitat microbiana de les mostres i que l'estructura i la diversitat de la comunitat bacteriana es podrien determinar amb precisió.

La diversitat alfa reflecteix l'abundància (riquesa) i la diversitat d'espècies. Els índexs de Shannon i Simpson s'utilitzen per mesurar la diversitat d'espècies i es veuen afectats per l'abundància d'espècies a la comunitat de mostra i la uniformitat de les espècies (uniformitat de la comunitat). Com més gran sigui el valor de l'índex de Shannon, menor serà el valor de l'índex de Simpson, cosa que indica que la diversitat d'espècies de la mostra és més alta [21]. Els resultats presentats a la figura 4D no mostren diferències significatives en els valors de l'índex de Shannon de la flora del ratolí entre els grups.

En comparació amb el grup control, el valor de l'índex de Simpson del grup model no té cap diferència significativa. No es va observar cap diferència significativa entre el grup model i cada grup de tractament. Aquests resultats no mostren cap diferència significativa en la diversitat de la flora intestinal dels ratolins entre els grups.

La PCA es va realitzar a la flora intestinal del ratolí (Fig. 4E), on PC1 i PC2 són els dos valors característics que provoquen la major diferència entre les mostres. Els resultats van mostrar que el 32,94 i el 19,74 per cent del grau d'influència corresponen a PC1 i PC2, respectivament. Com més lluny estan els punts, més gran és la diferència. Els cinc grups de mostres s'agrupen en tres categories, amb les mostres del grup model distribuïdes a la cantonada superior esquerra de la figura, lluny dels altres grups. Els grups control, VE i VAP2 van mostrar més solapaments i els tres grups de mostres estaven junts. La part central superior de la figura 4E mostra que després de la intervenció de VAP, es va millorar la similitud de la flora intestinal del grup de ratolins VAP2 amb la dels ratolins control.

Les diferències en l'abundància de bacteris en els grups de model de control, VE, VAP1 i VAP2 es van avaluar per als 20 gèneres principals (Fig. 4F). Les abundàncies del grup Lachnospiraceae_NK4A{136_ i Lactobacillus eren diferents entre els animals de control i els models, on l'abundància de Lactobacillus al grup model es va reduir significativament. En canvi, les abundàncies dels gèneres restants van augmentar significativament. En particular, els membres de Lactobacillus són probiòtics amb efectes anti-envelliment i antiinflamatoris [22, 23]. Per tant, aquests resultats no van ser sorprenents. Notablement, l'abundància de Lactobacillus va augmentar significativament en els grups VAP1 i VAP2 en comparació amb el grup model, cosa que suggereix que VAP pot augmentar el contingut de bacteris beneficiosos a l'intestí, evitant l'envelliment.

【Per a més informació:george.deng@wecistanche.com/WhatApp:86 13632399501】